吉林省科技发展计划项目申报书1054

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1 计划类别 : 项目类别 : 管理处室 : 科技创新人才培育计划 青年科研基金项目 计划处 项目名称 : 申报主持单位 ( 盖章 ): 项目负责人 : 通讯地址 : 人参西洋参蛋白质差异性的比较研究长春中医药大学齐滨长春市净月开发区博硕路 1035 号 固定电话 : 移动电话 : 传真 : 邮编 : 电子邮箱 : qibin88@126.com 填报日期 : 吉林省科学技术厅 二 O 一二年八月制

2 一 申报项目基础信息 项目名称 人参西洋参蛋白质差异性的比较研究 项目所属学科中医 中药学项目所属专业中药学 经费预算总额 10.0 万元, 其中申请经费 5.0 万元起止年限 至 申报主持单位 参加单位 1 参加单位 2 项目负责人及主要参加人 创新类型 名称长春中医药大学所在长春地通讯地址长春市博硕路 1035 号邮编 单位类别 企业 科研机构 高等院校 事业单位 其它 帐 号 开户银行 名称 所在地 参与方式 合作 技术承接 技术依托 名称 所在地 参与方式 合作 技术承接 技术依托 项目负责人 第一参加人 第二参加人 原始创新 集成创新 引进消化吸收再创新 隶属 中直 省直 其它 姓 名 齐滨 性别 男 出生年月 学 历 研究生 学位 硕士 身份证号 职 务 讲师 职称 中级 电 话 工作单位 邮 箱 qibin88@126. m 姓 名 刘莉 性别 女 出生年月 学 历 研究生 学位 硕士 身份证号 职 务 副教授 职称 副高级 电 话 工作单位 邮 箱 qibin88@sina m 姓 名 白云鹏 性别 男 出生年月 学 历 研究生 学位 博士 身份证号 职 务 讲师 职称 中级 电 话 工作单位 邮 箱 @qq om 申报方式 技术创新战略联盟申报 产学研联合申报 其它 项目简介 ( 研发内容 拟解决关键技术 预期技术 经济指标等 )(400 字以内 ) 预期成果 同科同属的人参与西洋参的比较研究一直是研究热点 人参和西洋参中皂苷等小分子的研究取得了一些进展, 从蛋白质的角度对人参和西洋参进行比较研究报道较少 本项目拟采用同工酶方法对人参和西洋参中 17 种同工酶进行系统的比较研究 ; 在此基础上采用蛋白质组学方法对人参与西洋参差异蛋白进行比较研究, 并用生物信息学方法进行功能分析 ; 运用多种层析方法分离纯化人参西洋参中的 SOD 等功能蛋白, 并对其活性进行比较, 为阐明人参和西洋参的药效物质基础和作用机制提供实验依据 新产品 新品种 新工艺 新装置 新材料 技术标准 ( 国际标准 国家标准 行业标准 企业标准 ) 专利 计算机软件 论文论著 研究报告 其它 预期专利授权获得国外发明专利 0 项, 国内专利 0 项, 其中发明专利 0 项 成果预期作用 形成自主研发能力 突破关键技术 试点示范 规模生产 推广应用 提高经济效益 其它 第 1 页

3 二 申报项目内容概况 (1) ( 一 ) 立项的必要性 (150 字以内 ) 人参和西洋参同科同属, 但是在功效上有所不同 对其皂苷等小分子的比较研究取得了一些进展, 从蛋白质的角度对二者进行比较研究报道较少 人参蛋白具有抗肿瘤 抗衰老 免疫调节 等多种活性, 利用同工酶技术对人参西洋参蛋白活性进行比较研究, 意义重大 ( 二 ) 相关技术国内外发展现状与趋势 (150 字以内 ) 对人参蛋白的研究主要集中在具有催化作用的酶分子上, 如核糖核酸酶, 超氧化物歧化酶和过氧化氢酶等, 很多研究结果证实了人参蛋白质具有抗氧化 抗辐射 抗疲劳 提高免疫力 抑菌等生物学活性 但对人参西洋参蛋白活性的比较研究报道较少, 因此, 利用同工酶技术系统比较二者的活性差异, 对阐明二者的药效作用十分重要 ( 三 ) 前期工作基础 1 申报单位和项目负责人前期所开展的相关研究工作 (200 字内 ); 申请人所在的课题组以中药大分子为主要研究方向, 从事中药大分子的提取分离和蛋白质组学的相关研究 在前期的工作中, 申请人比较了不同年限, 不同产地的人参中同工酶的活性, 从人参西洋参中分离了超氧化物歧化酶, 初步研究了其活性和稳定性 课题组比较研究了野山参与园参的二维蛋白表达图谱, 发现了其中有 103 种差异蛋白, 进行了 MADI-TOF-MS/MS 分析, 鉴定了 52 种蛋白 2 前期研究所取得的进展和阶段性成果 (200 字以内 ) 申请人所在的课题组对不同地区, 不同生长年限的人参中的同工酶的的活力进行比较研究, 建立了完善的同工酶的测定方法 申请人在前期工作中, 对西洋参总蛋白的提取工艺进行了研究, 建立了稳定高效的总蛋白提取工艺, 并从西洋参总蛋白中分离出了 SOD, 对其活性和稳定性进行了初步研究, 在人参和西洋参的二维表达图谱中看到了差异蛋白点, 拟在本项目中运用生物信息学方法深入研究其差异性 ( 四 ) 研究 ( 开发 ) 内容和拟解决的关键技术问题 1 研究( 开发 ) 内容 (400 字以内 ) (1) 应用酶学方法比较人参西洋参中同工酶的活性, 找出活性差异较大大的同工酶 本项目选取了多种酶进行活力比较 : 其中包括 9 种氧化还原酶,5 种水解酶,1 种裂解酶,1 种转移酶,1 种异构酶 系统比较各种酶活的差异, 找出人参西洋参中活性差异比较大的同工酶 (2) 应用蛋白质组学技术比较人参西洋参功能蛋白的差异 通过比较人参和西洋参 2DE 图谱的差异, 发现并鉴定人参西洋参特异性蛋白成分, 并对此成分进行活力测定, 找出人参西洋参区别大的特异蛋白性成分, 确定标志蛋白的分子量 (3) 应用生物学方法比较人参和西洋参中 SOD 的差异性 应用现代生物方法从人参西洋参中提取 SOD 等功能蛋白, 运用层析方法纯化功能蛋白, 利用 SOD 试剂盒测试人参西洋参中 SOD 的活性, 利用细胞生物学技术测试功能蛋白的活性, 并比较人参西洋参中 SOD 等功能蛋白活性的差异 2 拟解决的关键技术 (400 字以内 ) (1) 从蛋白质角度比较人参和西洋参活性的差异 (2) 建立人参与西洋参中同工酶差异性的检测方法 第 2 页

4 二 申报项目内容概况 (2) ( 五 ) 实施方案 1 技术路线(600 字以内 ) 本项目采用膜分离技术分离纯化人参和西洋参总蛋白, 利用多种同工酶酶活测试方法测定人参西洋参中同工酶的活性, 并做对比研究 ; 采用离子交换, 分子筛等层析方法分离纯化 SOD 等功能蛋白, 并采用 SOD 试剂盒测定人参西洋参中 SOD 的活力 ; 运用细胞生物学方法检测功能蛋白的活性, 利用蛋白质组学技术分析人参西洋参蛋白的差异, 找出差异蛋白, 并确定标志蛋白的分子量 2 实施方案 ( 组织方式 产学研合作机制等 )(200 字以内 ) 本项目实验依托长春中医药大学中药大分子省级重点实验室 申请人及课题组成员已经掌握了中药蛋白的 分离 纯化和活性检测的关键技术, 对人参中同工酶活性的检测已经进行了初步的研究, 其成果已经在国家核心期刊和 SCI 收录期刊发表数篇文章, 为本项目的实施奠定了坚实的基础 项目主要成员由多学科的具有丰富经验的研究人员组成 申请者所在单位长春中医药大学研发中心具有先进的仪器设备和配套设施 ( 六 ) 预期成果及指标 1 预期技术指标(200 字以内 ) (1) 确立人参西洋参蛋白的提取工艺路线 (2) 确立人参西洋参同工酶的检测方法 (3) 完成人参西洋参蛋白活性的比较研究, 找出人参西洋参中的差异性蛋白, 确定差异性蛋白的分子量 (4) 分离出具有抗氧化作用的超氧化物歧化酶, 并对其活力进行比较研究 2 预期经济指标(100 字以内 ) 项目实施后可促进人参西洋参产业的发展, 提升人参西洋参深加工系列产品的档次, 增强市场竞争力 3 预期产业应用前景和社会 生态效益(100 字以内 ) 通过本项目的实施, 可以有计划地开发利用人参西洋参资源, 在保证人参西洋参药材质量和来源的同时, 保护天然资源, 改善生态环境, 调整产品结构, 带动人参西洋参种植地区经济的发展 4 成果提供形式( 授权专利 技术标准 新技术 新产品 新装置 论文专著的数量等 )(100 字以内 ) 发表国家核心期刊收录文章 2 篇 5 人才队伍建设( 培养博士 硕士数等 )(100 字以内 ) 培养硕士研究生 2 人 第 3 页

5 三 项目团队构成 项目负责人简介 ( 参与过的主要研究 开发和成果转化项目及任务分工, 授权发明专利, 在国内外核心期刊上发表的代表性学术论文等研究成果情况 )(350 字以内 ): 齐滨,2002 年 7 月毕业于长春工业大学化学工程系,2005 年就读于长春工业大学化学工程系, 硕士学位,2008 年就读于长春中医药大学, 中药学博士, 师从赵大庆教授, 从事中药蛋白质的研究工作至今, 目前研究方向为人参蛋白和西洋参蛋白的提取 分离和活性研究 参加的项目 : (1) 创新药物筛选 发现平台, 国家重大科技专项, 项目编号 2011ZX ,2011 年 12 月, 第七名 (2) 人参系列化妆品及 不上火 保健食品的产业化研究, 吉林省科技重大专项,2011 年 06 月至 2014 年 06 月, 第六名 发表的文章 : 齐滨, 赵大庆, 刘莉, 白雪媛, 张鹤, 邢艳丽, 路旭. 不同储藏条件下人参西洋参中超氧化物歧化酶的活力比较研究 [J]. 时珍国医国药,2012,23(6): 项目负责人 姓名性别年龄 齐滨男 32 主要参加人 刘莉女 32 白云鹏男 30 参加人员 张鹤女 26 李德慧女 32 刘诗超女 26 所在单位及部门 长春中医药大学研发中心 职称现从事专业在本项目中承担的主要工作 讲师中药学提取工艺优化 副教授中药学提取工艺优化 讲师中药学酶活检测 助研中药学酶活检测 长春中医药大学研发中心 讲师中药学同工酶电泳 助研中药学活性检测 孙立霞女 24 李秋萌女 23 赵大庆男 50 长春中医药大学研发中心 硕士研究生中药学活性检测 硕士研究生中药学活性检测 教授中药学技术指导 第 4 页

6 第 5 页

7 四 经费预算表 单位 : 万元 序号 科目名称 合计 申请经费 自筹经费申报单位参加单位 1 一 经费支出合计 ( 一 ) 直接费用 设备费 (1) 购置设备费用 (2) 原设备升级改造费用 (3) 设备租赁费 (4) 非标设备 ( 试验装置 ) 试制费 null null null null 8 2 材料费 测试 化验 检验 试验 加工费 燃料动力费 差旅费 会议费 国际合作与交流费 出版/ 文献 / 信息传播 / 知识产权事务费 劳务费 专家咨询费 其它支出 ( 二 ) 间接费用 房屋租赁费 水 电费 暖消耗费 绩效支出 其它支出 二 经费来源合计 申请专项经费资助 / / 26 2 自筹经费来源 5.0 / (1) 其它财政拨款 0.0 / (2) 单位自有资金 5.0 / (3) 其它资金 0.0 / 第 6 页

8 五 年度计划安排 (1) 年 月 项目计划完成的内容及目标 1 内容 : 内容 : 采用单因素考察和正交实验方法对人参西洋参总蛋白提取工艺进行优化 目标 : 确立人参西洋参蛋白的最优提取工艺 目标 : 2013 年 01 月至 2013 年 06 月 1 内容 : 内容 : 采用同工酶电泳方法, 对人参西洋参中条带清晰的同工酶进行比较研究 目标 : 找到人参西洋参中差异性明显的同工酶 目标 : 2013 年 07 月 至 2013 年 12 月 1 内容 : 内容 : 采用同工酶活性测定方法对人参西洋参中 17 种同工酶进行酶活的比较研究 目标 : 比较人参西洋参中同工酶活性差别 目标 : 2014 年 01 月 至 2014 年 06 月 第 7 页

9 五 年度计划安排 (2) 年 月 项目计划完成的内容及目标 1 内容 : 内容 : 采用离子交换, 凝胶过滤等多种层析方法, 提取分离人参西洋参中的超氧化物歧化酶, 并对其活性就行比较研究 目标 : 确立人参西洋参中超氧化物歧化酶的提纯方法, 找出其活性差别 目标 : 2014 年 07 月 至 2014 年 12 月 2015 年 01 月 至 2015 年 06 月 1 内容 : 内容 : 利用蛋白组组学技术分析人参西洋参总蛋白差异 目标 : 找到差异性蛋白, 确定其分子量 目标 : 1 内容 : 内容 : 运用细胞生物学方法比较研究人参西洋参总蛋白的差异 目标 : 从细胞水平分析人参西洋参总蛋白的差异性 目标 : 2015 年 07 月 至 2015 年 12 月 2 内容 : 内容 : 分析 整理数据, 发表文章 目标 : 发表国家核心期刊收录的文章 1-2 篇 目标 : 第 8 页

10 六 任务分工及申请经费分配 项目申报形式 : 独立 合作 产学研合作 单位 任务 申请经费 ( 万元 ) 参与方式 申报主持单位 / 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 申报参加单位 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 第 9 页

11 七 申报单位与推荐部门意见 申报主持单位意见 : 申报参加单位意见 : 盖 章 年月日 盖章盖章 年月日年月日 盖章年月日盖章年月日盖章年月日 推荐部门意见 : 盖章盖章 年月日年月日 第 10 页

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