830 临床与病理杂志, 2015, 35(5) Keywords positively correlated to each other in preeclampsia placenta (r=0.489, r=0.561 and r=0.517 respe

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1 临床与病理杂志 J Clin Pathol Res 2015, 35(5) doi: /j.issn View this article at: ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体在子痫前期中的相关性研究 李国红 ( 陕西省煤化集团铜川矿务局中心医院妇产科, 陕西铜川 ) [ 摘要 ] 目的 : 探讨子痫前期患者细胞间黏附分子 -1(ICAM-1) P- 选择素 (P- 选择素 ) D- 二聚体 (D-dimer) 的水平变化及相互关系 方法 : 选择随机选取年龄 孕周 孕次相匹配的子痫前期孕妇 90 例为观察组, 同期正常晚期妊娠孕妇 92 例为对照组, 采用免疫组织化学 SABC 法检测两组研究对象胎盘组织中 ICAM-1 P- 选择素的表达水平 ; 采用酶联免疫吸附 ELISA 法检测两组对象血浆 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体的表达水平 结果 : 子痫前期患者胎盘组织 ICAM-1 P- 选择素的表达水平明显高于正常对照组 (P<0.05), 在子痫前期组二者之间存在正相关性 (r=0.523,p<0.05); 两组孕妇血浆均有 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体的表达, 子痫前期患者血浆 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体表达水平明显高于正常对照组 (P<0.05), 在子痫前期组三者之间相互呈明显正相关关系 ( 分别为 r=0.489, r=0.561 和 r=0.517, 均 P<0.05) 结论: 子痫前期患者 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体的高表达可能与子痫前期的发生发展有关, 监测这些指标对判断病情及指导治疗具有重要价值 [ 关键词 ] 子痫前期 ; 细胞间黏附分子 ;P- 选择素 ;D- 二聚体 The correlation study of ICAM-1, P-selectin and D-dimer in preeclampsia LI Guohong (Department of obstetrics and gynecology, Central hospital of Tongchuan Mining Bureau, Shanxi Coal and Chemical Industry Group, Tongchuan Shanxi , China) Abstract Objective: To explore the expression and correlation of ICAM-1, P-selectin, D-dimer in preeclampsia. Methods: A total of 90 preeclampsia pregnant were selected randomly as the observation group, and matching to age, gestational age, pregnant times, 92 normal pregnant women were selected as the control group, to detect the expression of ICAM-1 and P-selectin of the placenta tissue by immunohistochemical SABC in two groups; and detect the expression of ICAM-1, P-selectin and D-dimer of plasma by enzyme-linked immunosorbent assay ELISA in two groups. Results: The expression of ICAM-1 and P-selectin in preeclampsia placenta tissue were higher than that in normal control group, the difference was statistical significantly (P<0.05), ICAM-1 and P-selectin were positively correlated in preeclampsia placenta (r=0.523, P<0.05). ICAM-l, P-selectin and D-dimer were expressed in maternal plasma of each group, which were higher in preeclampsia than that in normal control group, the difference was statistical significantly (P<0.05), ICAM-l, P-selectin and D-dimer were 收稿日期 (Date of reception): 通信作者 (Corresponding author): 李国红, liguohong1984@163.com

2 830 临床与病理杂志, 2015, 35(5) Keywords positively correlated to each other in preeclampsia placenta (r=0.489, r=0.561 and r=0.517 respectively, P<0.05). Conclusion: The high expression of ICAM-1, P-selectin and D-dimer may be associated with the development of preeclampsia, which is very important for determining condition and guiding treatment. preeclampsia; intercellular adhesion molecule; P-selectin; D-dimer 子痫前期是常见的妊娠期特发性疾病, 典型表现为高血压和蛋白尿 其发生在妊娠 20 周以后, 病情严重复杂, 是导致孕产妇及围产儿死亡的重要疾病之一, 发病率约 5%~12% [1] 子痫前期的病理改变涉及全身多器官 多系统, 目前尚无明确病因及发病机制 近年来, 内皮细胞损伤 炎症反应 凝血功能异常在子痫前期发生 发展中的作用逐渐受到重视 [2-3], 而细胞间黏附分子 -1(intercellular adhesion molecule-1,icam-1) P- 选择素 (P-selectin) D- 二聚体 (D-dimer) 是与内皮损伤 炎症和凝血关系密切的因子 ICAM-1 属于黏附分子免疫球蛋白超家族, 是近年新发现重要炎症因子, 其可诱发内皮细胞激活与损伤, 参与氧化应激 炎症与免疫应答等病理过程 [4] P- 选择素也称颗粒膜蛋白 (GMP140), 属细胞黏附分子家族, 在机体炎症反应 内皮细胞损伤和血栓形成方面起着重要作用, 是启动和促进炎症反应的一个典型黏附分子, 并可作为血小板活化状态的和重要检测指标 [5] 正常妊娠时机体处于高凝状态, 子痫前期患者因受各种氧化应激及血液浓缩, 机体高凝状态更加明显,D- 二聚体是纤维蛋白的降解产物, 是血液高凝状态和纤溶亢进的特异性分子标志物, 是临床判断体内血液凝集状况及血栓形成的常用指标 [6] 本研究通过检测及分析 ICAM-1 P- 选择素在胎盘组织以及 ICAM-1 P- 选择素 D- 二聚体在母体血浆中的表达情况, 以探讨三者水平变化在子痫前期发生 发展中的作用及临床检测价值 1 资料与方法 1.1 研究对象随机选取 2013 年 1 月至 2014 年 10 月在我院妇产科病房住院分娩 90 例子痫前期患者作为观察组, 平均年龄为 (32.04±5.68) 岁, 平均孕周为 (35.72±3.91) 周, 孕次 2.1±0.3 次 ; 其中包括轻度子痫前期 (mild preeclampsia,mpe)49 例, 重度子痫前期 (severe preeclampsia,spe)41 例 诊断依据参照妊娠期高血压疾病诊治指南 (2012 版 ) 中的诊断标准 [7] 以同期健康 92 例晚期孕妇作为对照组, 平均年 龄 (30.14±4.25) 岁, 平均孕周 (38.34±1.95) 周, 孕次 (2.3±0.5) 次 以末次月经和超声法评估研究对象的孕周, 所有孕妇均为单胎 剖宫产, 研究对象无其它合并症及并发症, 排除有慢性高血压 妊娠期糖尿病 肾病 免疫系统疾病等病史者 入选对象在年龄 分娩孕周及孕次方面无统计学差异, 资料具有可比性 (P>0.05) 1.2 研究方法 标本采集产妇于入院后空腹 12 h 清晨采集静脉血 5 ml, 抗凝管中加入柠檬酸钠抗凝, 在 4 条件下, r/min 离心 10 min, 分离血浆于 80 冰箱保存待检 在剖宫产胎盘娩出后, 立即在近脐根部母体面取 1.0 cm 1.0 cm 0.5 cm 大小的胎盘组织, 生理盐水冲洗, 福尔马林溶液固定, 石蜡包埋保存备用 检测方法采用免疫组织化学 SABC( 链酶亲和素 - 生物素 - 过氧化物酶 ) 法检测 182 例孕妇胎盘组织中的 ICAM-1 P- 选择素表达水平, 采用 ELISA 双抗体夹心法检测血浆中 ICAM-1 P- 选择素 D- 二聚体的水平 检测试剂盒均购自武汉明德生物科技有限公司, 严格按说明书进行操作 免疫组化染色结果判定光学显微镜下观察组织切片, 严格控制光度 亮度, 用同一台显微镜并统一拍摄条件, 每张切片在 200 倍的光镜下随机选取 5 个视野拍照, 使用 Image-Pro Plus 6.0 彩色图文分析软件测定阳性细胞积分光密度值 (IOD) 阳性细胞表现为镜下细胞结构清晰, 细胞膜及基质有明显棕黄色颗粒, 染色高于背景 ; 阴性细胞表现为无棕色颗粒沉着 1.3 统计学处理采用 SPSS 21.0 统计软件分析数据, 各组计量资料以 x±s 表示, 组间比较采用 t 检验或秩和检验 子痫前期组数据的相关分析, 采用 Pearson 直线相关分析或 Spearman 秩相关分析 P<0.05 为差异有统计学意义

3 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体在子痫前期中的相关性研究李国红 结果 2.1 胎盘组织中 ICAM 和 P- 选择素结果比较 免疫组织化学显示 ICAM-1 在胎盘合体滋养细 胞及绒毛血管内皮细胞呈高表达 ;P- 选择素在合体 滋养细胞 血管内皮及间质细胞呈高表达 通过 计算 ICAM-1 和 P- 选择素的 IOD 值表明子痫前期组 孕妇胎盘组织中 ICAM-1 和 P- 选择素表达均高于正 常对照组, 具有显著性差异 (P<0.05), 见表 1 相 关性分析结果显示在子痫前期组, 孕妇胎盘组织 ICAM-1 与 P- 选择素的表达呈正相关关系 (r=0.523, P<0.05) 表 1 两组间胎盘组织 ICAM-1 和 P- 选择素的表达水平 比较 (x±s) Table 1 The expression level of ICAM - 1 and P - select element in placenta tissue in the two groups (x±s) 分组 ICAM-1 P- 选择素 子痫前期组 (n=90) ± ±87.93 正常妊娠组 ( n=92) ± ±57.14 Z 值 P 值 <0.001 < 两组间母体血浆中 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体的比较 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体在两组孕妇血 浆中均有表达, 子痫前期组 轻度 重度子痫前 期孕妇三个指标的表达水平均高于正常对照组, 均具有统计学差异 ( P< 0.05); 重度子痫前期孕妇 血浆中 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体的表达水 平均高于轻度子痫前期孕妇, 且均存在明显差异 (P<0.05), 见表 2 相关性分析结果显示在子痫前 期组孕妇中,ICAM-1 与 P- 选择素及 D-dimer 的表达 均呈正相关关系 (r=0.489,r=0.561, 均 P<0.05), 且 P- 选择素与 D- 二聚体的表达也呈正相关关系 (r=0.517,p<0.05) 3 讨论 ICAM-1 可诱发内皮细胞激活与损伤, 参与 血管炎症的发生发展 血浆中 ICAM-1 水平的检 测可间接反映内皮细胞稳态和炎症的状态 血浆 [8] ICAM-1 参与子痫前期的病理损伤 有研究表明 子痫前期孕妇的胎盘滋养细胞 ICAM-1 表达明显增 [9] 强 Portelinha 等研究指出有子痫前期病史的孕 妇血浆 ICAM-1 表达水平显著高于无子痫前期病 史的孕妇, 且随病情加重而逐渐升高 本研究对 子痫前期孕妇胎盘组织及血浆中 ICAM-1 的表达 水平进行检测及分析, 发现子痫前期孕妇胎盘组 织和血浆中 ICAM-1 的水平均明显高于正常对照 组 ( P< 0.05), 说明子痫前期患者出现内皮细胞功 能损伤及炎症反应 并且我们发现重度子痫前期 ICAM-1 水平明显高于轻度子痫前期 ICAM-1 水平 (P<0.05), 说明 ICAM-1 可能参与了子病前期的发 病, 且随着子痫进展而 ICAM-1 水平升高, 可作为 监测子痫前期发生 发展的敏感指标 P- 选择素主要表达于激活的血管内皮细胞或 血小板颗粒, 参与炎症反应, 并可反应血小板的 黏附聚集功能, 评价血小板活化程度的金标准, 是血栓早期检测及疗效评估的一个有价值分子标 志物 [5] 而子痫前期多出现血小板的过度活化, 一 个对子痫早期粘附分子变化的研究发现, 在子痫 前期患者 P- 选择素的表达升高, 并发生于子痫临床 症状出现之前 [10] [11] Ramacciotti 等研究表明, 通 过抑制 P- 选择素表达水平可减少血栓的形成, 并可 促进溶栓和血管的再通 本研究对子痫前期孕妇 胎盘组织及血浆中 P- 选择素的表达进行分析, 发现 子痫前期孕妇胎盘组织和血浆中 P- 选择素的水平均 明显高于正常对照组 (P<0.05), 并且重度子痫前期 P- 选择素水平明显高于轻度子痫前期 P- 选择素水平 (P<0.05), 说明子痫前期母体和胎盘血管内皮细胞 发生损伤, 毛细血管形成微血栓, 提示 P- 选择素参 与了子痫前期的病理损伤和进展的过程 表 2 两组间血浆 ICAM-1 P- 选择素和 D-dimer 的表达水平比较 (x±s) Table 2 The expression level of ICAM-1, P-select element and thed - dimer in plasma in the two groups (x±s) 分组 /n ICAM-1/pg ml 1 P- 选择素 /pg ml 1 D- 二聚体 /pg ml 1 子痫前期组 (90) ± a ±90.87 a ± a 轻度子痫前期 (49) ± b ±65.21 b ± b 重度子痫前期 (41) ± c,d ±70.64 c,d ± c,d 正常妊娠组 (92) ± ± ± 注 : a,b,c 与正常妊娠组比较 P<0.05; d 与轻度子痫前期比较 P<0.05

4 832 临床与病理杂志, 2015, 35(5) D- 二聚体是反应体内高凝状态和纤溶亢进 的特异性分子标志物, 对血栓的形成具有很好的 预测价值 正常妊娠机体的 D- 二聚体水平升高以 减少分娩过程的出血量, 机体处于高凝状态, 子 痫前期患者因缺血 缺氧 炎症反应等一系列变 化, 致血管内皮细胞损伤, 血管通透性增强, 形 成微血栓而使血液处于高凝及纤溶亢进状态, 故 D- 二聚体水平可作为子痫前期发病的预测指标 [12] 孙黎等研究比较子痫前期的孕妇和无妊娠并 发症的正常孕妇血浆 D- 二聚体水平, 发现子痫前 期患者血浆 D- 二聚体水平显著升高, 且重度子痫 前期患者血浆 D- 二聚体水平高于轻度子痫前期患 者, 说明 D- 二聚体浓度与子痫前期的病情严重程 度密切相关 [13] 本研究中子痫前期孕妇血浆 D- 二 聚体水平明显高于正常妊娠孕妇 (P<0.05), 并且重 度子痫前期 D- 二聚体水平明显高于轻度子痫前期 D- 二聚体水平 (P<0.05), 说明子痫前期机体出现了 凝血纤溶系统平衡失调而处于严重高凝和纤溶亢 进状态 临床对孕妇进行 D- 二聚体动态监测, 可 有效预防子痫前期的发生发展 指导抗凝治疗及 明显改善病情预后 另外本研究相关分析结果显示, 在子痫前期 患者血浆中 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体三者之 间相互呈正相关关系, 三者在子痫前期组表达均 高于正常对照组, 表明三者可能同时参与了子痫 前期的发生 发展, 且相互关联 彼此促进, 同 时进一步说明子痫前期发病的复杂性 本研究同 时发现 ICAM-1 和 P- 选择素在胎盘组织细胞的表达 也高于对照组, 且二者间存在正相关关系, 其胎 盘表达趋势与血浆中一致, 说明子痫前期是一种 全身性疾病 ICAM-1 和 P- 选择素在母血中的变化 一定程度上可反应胎盘状况, 从而为胎儿生长安 全性及指导临床治疗提供重要依据 综上所述,ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体在 子痫前期的发生发展中具有协同作用, 联合检测 血浆中的 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体三个因子 的水平变化能够反应疾病的严重程度, 对监测病 情 指导治疗及判断预后有重要的临床意义, 可 进一步降低子痫前期母婴的病死率 参考文献 1. 谢幸, 苟文丽. 妇产科学第 8 版 [M]. 北京 : 人民卫生出版社, 2013: 64. XIE Xin, GOU Wenli. Obstetrics and gynecology version 8[M]. Beijing: people's medical publishing house, 2013: 赵大印, 辛虹. 血浆 scd40l sicam-1 变化与子痫前期的相关性研究 [ J]. 河北医药, 2012, 34(15): ZHAO Dayin, XIN Hong. The correlation study of Serum s CD40L, sicam 1 and preeclampsia[ J]. Hebei Medical Journal, 2012, 34(15): 覃秀珠. 子痫前期的预测研究进展 [ J]. 广西中医药大学学报, 2014, 17(2): QIN Xiuzhu. Research progress of preeclampsia prediction[ J]. Journal of Guangxi University of Chinese Medicine, 2014, 17 (2): Fei X, Hongxiang Z, Qi C, et al. Maternal plasma levels of endothelial dysfunction mediators including AM, CGRP, sicam-1 and thcy in pre-eclampsia[ J]. Adv Clin Exp Med, 2012, 21(5): Kazmi RS, Cooper AJ, Lwaleed BA. Platelet function in preeclampsia[ J]. Semin Thromb Hemost, 2011, 37(2): 王莉. 2 型糖尿病患者血浆 D 二聚体及血浆纤维蛋白原监测的临床意义 [ J]. 检验医学与临床, 2011, 8(8): Wang Li. The clinical significance of plasma D-dimer and plasma fibrinogen monitoring in patients with type 2 diabetes[ J]. Laboratory Medicine and Clinic, 2011, 8(8): 中华医学会妇产科学分会妊娠期高血压疾病学组. 妊娠期高血压疾病诊治指南 (2012 版 )[J]. 中华妇产科杂志, 2012, 47(6): Gestational hypertension disease group, the branch of obstetrics and gynaecology, Chinese Medical Association. Gestational hypertension disease diagnosis and treatment guidelines 2012[ J]. Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi, 2012, 47(6): 孙国强, 乔福元, 鲁秋云. 细胞间粘附分子 -1 在妊高征子宫蜕膜及胎盘中的表达 [ J]. 同济医科大学学报, 2001, 30(5): SUN Guoqiang, QIAO Fuyuan, LU Qiuyun. Expression of intercellular adhesion molecule-1 in decidua and placenta of the patients with pregnancy-induced hypertension syndrome[ J]. Acta Univ Med Tongji, 2001, 30(5): Portelinha A, Belo L, Tejera E, et al. Adhesion molecules (VCAM- 1 and ICAM-1) and C-reactive protein in women with history of preeclampsia[ J]. Acta Obstet Gynecol Scand, 2008, 87(9): Chavarría ME, Lara-González L, García-Paleta Y, et al. Adhesion molecules changes at 20 gestation weeks in pregnancies complicated by preeclampsia[ J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2008, 137(2): Ramacciotti E, Myers DD Jr, Wrobleski SK, et al. P-selectin/ PSGL-1 inhibitors versus enoxaparin in the resolution of venous thrombosis: a meta-analysis[ J]. Thromb Res, 2010, 125(4): e138-e142.

5 ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体在子痫前期中的相关性研究李国红 孙黎, 俞琼琰, 王咏梅, 等. D 二聚体对子痫前期的预测价值 [ J]. 血栓与止血学, 2013, 19(2): SUN Li, YU Qiongyan, WANG Yongmei, et al. The prediction value of plasma D dimer for preeclampsia[ J]. Chinese Journal of Thrombosis and Hemostasis, 2013, 12(2): Kucukgoz Gulec U, Tuncay Ozgunen F, Baris Guzel A, et al. An analysis of C-reactive protein, procalcitonin, and D-dimer in pre-eclamptic patients[ J]. Am J Reprod Immunol, 2012, 68(4): 本文引用 : 李国红. ICAM-1 P- 选择素和 D- 二聚体在子痫前期中的相关性研究 [ J]. 临床与病理杂志, 2015, 35(5): doi: /j.issn Cite this article as: Li Guohong. The correlation study of ICAM- 1, P-selectin and D-dimer in preeclampsia[ J]. Journal of Clinical and Pathological Research, 2015, 35(5): doi: / j.issn

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