解放军医学院学报 Acad J Chin LA Med Sch May 2017,38(5) SOCS-3 level was negatively correlated with TNF-α, IL-16, Th1/Th2 rat
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1 426 解放军医学院学报 Acad J Chin LA Med Sch May 2017,38(5) 血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 水平及 Th1/Th2 与妊娠期高血压疾病的关系 温丽, 郭珍, 胡际东, 田新羽, 王丽丽, 常春红, 周欢欢河北涿州市医院妇产科, 河北涿州 摘要 : 目的探讨血清细胞因子信号转导负调控因子 -3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS-3) 肿瘤坏死因子 -α(tumor necrosis factor-α,tnf-α) 白细胞介素 -16(interleukin-16,IL-16) 及 T 辅助细胞 1/T 辅助细胞 2(Th1/Th2) 与妊娠期高血压疾病 (HDC) 的关系 方法选取 2014 年 1 月 年 6 月本院妇产科收治的妊娠期高血压疾病患者 182 例, 其中妊娠期高血压组 51 例, 轻度子痫前期组 69 例, 重度子痫前期组 62 例 另选择同期分娩健康孕妇 65 例作为对照组 采用 ELISA 法检测各组孕妇血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平, 分析重度子痫前期患者不良妊娠结局与各指标的关系 采用 Spearman 相关分析各组 HDC 患者血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 的相关性 结果与对照组比较, 轻度子痫前期组和重度子痫前期组血清 SOCS-3 水平均明显降低 (0.59±0.12 vs 0.14±0.03 和 0.08±0.01 ; 均 < 0.05) 各组 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于对照组, 且重度子痫前期组较轻度子痫前期组升高更明显 [TNF-α(ng/L): 12.58±2.37 vs 34.75±6.42 和 61.53±9.26 ;IL-16 (ng/l):108.47±35.24 vs ±81.47 和 ± ;Th1/Th2 :9.27±2.38 vs 20.15±4.82 和 26.48±6.13 ; 均 < 0.05] 重度子痫前期患者中,SOCS-3 低表达组胎儿宫内窘迫综合征 胎儿生长受限及新生儿窒息的发生率均显著高于高表达组 ( 均 < 0.05),TNF-α IL-16 Th1/Th2 高表达组早产及胎儿生长受限的发生率均显著高于低表达组 ( 均 < 0.05) 相关分析显示, 妊娠期高血压患者血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 Th1/Th2 均呈负相关 (r=-0.528,r=-0.506,r= ; 均 < 0.05) 结论监测孕妇血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 对妊娠期高血压疾病尤其是重度子痫前期的早发现 早诊断 早治疗具有一定的临床指导意义 关键词 : 妊娠期高血压疾病 ; 信号转导负调控因子 -3 ; 肿瘤坏死因子 -α ; 白细胞介素 -16 ;T 辅助细胞 1/T 辅助细胞 2 比值中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : (2017) DOI : /j.issn 网络出版时间 : :36 网络出版地址 : Relationship between serum SOCS-3, TNF-α, IL-16, Th1/Th2 ratio and hypertensive disorder complicating pregnancy WEN Li, GUO Zhen, HU Jidong, TIAN Xinyu, WANG Lili, CHANG Chunhong, ZHOU Huanhuan Department of Obstetrics and Gynecology, Hebei rovince Zhuozhou City Hospital, Zhuozhou , Hebei rovince, China The first author: WEN Li @163.com Abstract: Objective To investigate the relationship of serum cytokine signaling negative regulation factor-3 (SOCS-3), tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-16 (IL-16) and T helper cell 1/T helper 2 (Th1/Th2) ratio with hypertensive disorder complicating pregnancy (HDC). Methods From January 2014 to June 2016, 182 cases with hypertensive disorder complicating pregnancy were selected from the department of obstetrics and gynecology in our hospital,including 51 cases of hypertensive of pregnancy, 69 cases of mild preeclampsia and 62 cases of severe preeclampsia. Another 65 cases of healthy pregnant women were selected as the controls.the levels of serum SOCS-3, TNF-α, IL-16 and Th1/Th2 in each group were detected by ELISA assay, and the relationship between the adverse pregnancy outcome and the serum indexes in patients with severe preeclampsia were analyzed. The correlation of serum SOCS-3 levels with TNF-α, IL-16 and Th1/Th2 were examined by spearman correlation analysis. Results Compared with the control group, the serum levels of SOCS-3 were significantly lower in the mild preeclampsia group and the severe preeclampsia group (0.59±0.12 ng/l vs 0.14±0.03 ng/l and 0.08±0.01 ng/l, < 0.05). The levels of TNF-α, IL- 16 and Th1/Th2 were 19.13±4.36, ±57.82, 16.58±3.64 in gestational hypertension group, 34.75±6.42, ±81.47, 20.15±4.82 in mild preeclampsia group, and 61.53±9.26, ±113.58, 26.48±6.13 in severe preeclampsia group, which increased by disease severity ( < 0.05, respectively), and were significantly higher than those in control group (12.58±2.37, ±35.24, 9.27±2.38)( < 0.05, respectively). The incidences of fetal distress syndrome, fetal growth restriction and neonatal asphyxia in SOCS-3 low expression group were significantly higher than those in the high expression group ( < 0.05, respectively). The incidences of premature birth and fetal growth restriction in TNF-α, IL-16 and Th1/Th2 high expression groups were significantly higher than those in the low expression groups ( < 0.05, respectively). Correlation analysis showed that serum 收稿日期 : 基金项目 : 保定市科学计划与发展指导计划项目 (16ZF052) Supported by the Scientific lanning and Development Guidance rogram of Baoding rovince (16ZF052) 作者简介 : 温丽, 女, 学士, 主治医师 研究方向 : 临床妇科疾病的诊断及治疗 @163.com
2 解放军医学院学报 Acad J Chin LA Med Sch May 2017,38(5) SOCS-3 level was negatively correlated with TNF-α, IL-16, Th1/Th2 ratio (r=-0.528, r=-0.506, r=-0.126; < 0.05, respectively) in HDC. Conclusion Monitoring maternal serum SOCS-3, TNF-α, IL-16 and Th1/Th2 will benifit the early detection, diagnosis, and treatment for hypertensive disorder complicating pregnancy, especially for severe preeclampsia patients. Keywords: hypertensive disorder complicating pregnancy; suppressor of cytokine signaling 3; tumor necrosis factor-α; interleukin- 16; Th1/Th2 ratio 妊娠期高血压疾病 (hypertensive disorder complicating pregnancy,hdc) 是妊娠期特有的常见疾病, 其发病率高达 5% ~ 12%, 对孕妇和围生儿的生命健康造成极大威胁 [1-2] 多项研究表明, 免疫因素在 HDC 的发生过程中扮演重要角色 肿瘤坏死因子 -α(tumor necrosis factor-α,tnf-α) 白细胞介素 -16(interleukin-16,IL-16) 及 T 辅助细胞 1/T 辅助细胞 2(T helper cell 1/T helper cell 2, Th1/Th2) 是参与调节母胎免疫的关键因素 [3-4] 近 年研究发现, 细胞因子信号转导负调控因子 -3 (suppressor of cytokine signaling 3,SOCS-3) 参与多 种细胞因子的转录调控和免疫应答反应 [5] 尽管 国内外学者对 HDC 的发病机制进行了大量研究, 但其准确的病因尚未阐明, 早期预测指标仍很有限, 探讨影响该病发生的因素以寻找切实可行的预 防方法, 一直是产科领域的研究热点 [6-7] 本研究 拟通过观察妊娠期高血压疾病患者血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 变化, 分析其与妊娠期高血压疾病的关系, 为临床防治提供依据 对象和方法 1 研究对象选取 2014 年 1 月 年 6 月本院妇产科收治的妊娠期高血压疾病患者 182 例, 年龄 24 ~ 41(28.27±3.75) 岁, 平均孕周 (37.25±1.61) 周 按第 8 版 妇产科学 妊娠期高血压疾病诊断与分类标准 [8], 妊娠期高血压 51 例, 平均年龄 (27.95±3.64) 岁, 平均孕周 (38.06±1.74) 周 ; 轻度子痫前期 69 例, 平均年龄 (29.15±4.16) 岁, 平均孕周 (37.58±1.75) 周 ; 重度子痫前期 62 例, 平均年龄 (28.14±3.68) 岁, 平均孕周 (35.97±1.60) 周 另选取同期在我院产检的正常妊娠妇女 65 例作为对照组, 平均年龄 (28.37±3.72) 岁, 平均孕周 (39.30±1.83) 周 排除多胎, 既往有肝肾疾病 慢性高血压 糖尿病及血液系统疾病史, 自身免疫疾病 母体或胎儿感染 胎儿先天性疾病等患者 本研究符合医学伦理标准, 经医院伦理委员会批准, 并获得患者或家属知情同意 2 血液标本采集及检测所有研究对象均于清晨空腹采集肘静脉血 5 ml( 妊娠期高血压疾病孕妇于确诊收住院治疗前抽血 ), 置 37 水浴箱 30 min 后, 以离心半径 13.5 cm r/min 离心 10 min, 分离血清保存于 -80 采用酶联免疫吸附试剂盒检测血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 的含量, 试剂盒由北京普尔伟生物科技有限公司提供 严格按照说明书操作 Th1/Th2 比值检测 : 取肝素抗凝血 0.5 ml 加等量 RMI-1640 培养液稀释后 ( 或 0.5 ml 淋巴细胞悬液 ), 加入刺激剂, 孵育 4 h 取收获细胞, 加入抗体 打孔剂, 用流式细胞仪测定, 计数 个 CD4 + 淋巴细胞中分泌细胞因子 TNF-γ 的 Th1 细胞和分泌细胞因子 IL-4 的 Th2 细胞所占的百分比 3 统计学方法采用 SSS17.0 统计软件分析, 数据以 - x±s 表示, 多组间比较采用单因素方差分析, 进一步两两比较采用 LSD-t 检验 计数资料以百分率 (%) 表示, 组间比较采用 χ 2 检验 相关性分析采用 earson 相关分析 < 0.05 为差异有统计学意义 结果 1 各组一般资料比较各组的年龄 孕前体质量指数 (body mass index,bmi) 高血压家族史比例 贫血比例及剖宫产比例比较, 差异均无统计学意义 ( 均 > 0.05) 重度子痫前期组和轻度子痫前期组平均孕周均明显早于对照组, 差异有统计学意义 ( 均 < 0.05) 见表 1 2 各组 SOCS-3 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平比较妊娠期高血压疾病各组血清 SOCS-3 水平均低于对照组, 子痫前期患者血清 SOCS-3 水平低于妊娠期高血压患者, 且重度子痫前期患者血清 SOCS-3 水平低于轻度子痫前期患者 ( < 0.05) 妊娠期高血压疾病各组 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于对照组, 子痫前期组 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于妊娠期高血压组, 且重度子痫前期组 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于轻度子痫前期组 ( < 0.05) 见表 2 3 不良妊娠结局与血清 SOCS-3 TNF-α IL- 16 Th1/Th2 的关系以 SOCS-3 TNF-α IL- 16 Th1/Th2 水平的中位数为标准 ( 分别为 0.08 ng/l ng/l ng/l 27.14), 将 62 例重度子痫前期患者的各项目检测值分为高表达组和低表达
3 428 解放军医学院学报 Acad J Chin LA Med Sch May 2017,38(5) Groups 表 1 妊娠各组一般资料比较 Tab. 1 Comparison of general data in 4 groups Control (n=65) Gestational hypertension (n=51) Mild preeclampsia (n=69) Severe preeclampsia (n=62) Age ( - x±s, years) 28.37± ± ± ± Mean gestational weeks ( - x±s, weeks) 39.25± ± ±1.75 a 35.97±1.60 abc re pregnancy BMI ( - x±s, kg/m 2 ) 22.48± ± ± ± Family history of hypertension (n, %) 10(15.4) 12(23.5) 18(26.1) 13(21.0) Anemia (n, %) 6(9.2) 7(13.7) 13(18.8) 10(16.1) Cesarean section (n, %) 45(69.2) 41(80.4) 64(92.8) 60(96.8) a < 0.05, vs control group; b < 0.05, vs gestational hypertension group; c < 0.05, vs mild preeclampsia group 表 2 各组 SOCS-3 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平比较 Tab. 2 Comparison of SOCS-3, TNF-α, IL-16 and Th1/Th2 levels in each group ( - x±s) Groups Control (n=65) Gestational hypertension (n=51) Mild preeclampsia (n=69) Severe preeclampsia (n=62) F SOCS-3 (ng/l) 0.59± ±0.06 a 0.14±0.03 ab 0.08±0.01 abc < TNF-α(ng/L) 12.58± ±4.36 a 34.75±6.42 ab 61.53±9.26 abc < IL-16 (ng/l) ± ±57.82 a ±81.47 ab ± abc < Th1/Th2 9.27± ±3.64 a 20.15±4.82 ab 26.48±6.13 abc < a < 0.05, vs control group; b < 0.05, vs gestational hypertension group; c < 0.05, vs mild preeclampsia group 表 3 HDC 不良妊娠结局与血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 Th1/Th2 的关系 Tab. 3 Relationship between adverse pregnancy outcomes and serum SOCS-3, TNF-α, IL-16, Th1/Th2 in patients with severe preeclampsia (cases) SOCS-3 TNF-α IL-16 Th1/Th2 Adverse pregnancy outcome expression expression expression expression expression expression expression expression remature delivery (n=16) Fetal distress syndrome (n=24) Fetal growth restriction (n=9) Asphyxia neonatorum (n=10) 表 4 各组血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 Th1/Th2 比值的相关性分析 Tab. 4 Correlation analysis of serum SOCS-3 levels with TNF-α, IL-16 and Th1/Th2 ratios in each group SOCS-3 TNF-α IL-16 Th1/Th2 r r r Control (n=65) Gestational hypertension (n=51) Mild preeclampsia (n=69) Severe preeclampsia (n=62) F/χ 2 组, 各 31 例 结果显示,SOCS-3 低表达患者胎儿宫内窘迫综合征 胎儿生长受限及新生儿窒息的发生率均明显高于高表达患者 ( 均 < 0.05) ;TNF-α IL-16 Th1/Th2 高表达患者早产及胎儿生长受限的发生率均明显高于低表达患者 ( 均 < 0.05) 见表 3 4 各组血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 Th1/ Th2 的相关性分析 earson 相关分析显示, 妊娠期高血压组血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 均呈负相关 ( 均 < 0.05), 轻度子痫前期组和重度子痫前期组血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL- 16 Th1/Th2 均呈负相关 ( 均 < 0.05) 对照组血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 Th1/Th2 均无明显相关性 ( > 0.05) 见表 4 讨论 HDC 是一种原因不明 累及多系统的极为严重的并发症, 是导致孕产妇和围生儿死亡的主要原因 研究表明, 免疫失衡 滋养细胞缺血及血管内皮损伤是妊娠期高血压疾病发生的重要环节 [9-10] TNF-α 是一种重要的免疫调节细胞因子, 较早地参与炎性反应与诱导血管内皮细胞产生其他炎症介质, 对调节机体的免疫 代谢功能 和维持机体内部的稳定状态发挥着重要的作用 [11]
4 解放军医学院学报 Acad J Chin LA Med Sch May 2017,38(5) IL-16 是活化免疫细胞释放的多功能细胞因子, 能刺激免疫细胞产生多种炎性细胞因子 ( 如 IL-6 和 TNF-α), 并促进 T 淋巴细胞表达 IL-2 受体 抑制 Th2 型细胞因子的产生 [12] Th1/Th2 失衡也是 HDC 另一个重要的免疫学变化,HDC 患者体内存在着 Th1 型免疫增强和 Th2 型免疫减弱的失衡状态 [13] 血清 SOCS 参与机体内细胞因子的信号转导和免疫应答反应, 通过抑制 JAK/STAT 信号通路 来调节细胞因子的合成和分泌 [14-15] 本研究结果显示,HDC 患者各组血清 SOCS-3 水平均低于对照组, 子痫前期患者血清 SOCS-3 水平低于妊娠期高血压患者, 且重度子痫前期患者血清 SOCS-3 水平均低于轻度子痫前期患者 HDC 患者各组 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于对照组, 子痫前期患者 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于妊娠期高血压患者, 且重度子痫前期患者 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平均高于轻度子痫前期患者 提示炎性细胞因子的水 平升高可能与病情的严重程度相关 郭玉娜等 研究也表明,SOCS-3 水平变化在疾病的发生过程中发挥者重要作用, 子痫前期患者血清中 SOCS-3 水平明显降低, 进而抑制 Th1 型细胞因子 TNF-α 表达 IL-16 通过刺激 Th1 型细胞因子 TNF-α 表达, 并抑制 Th2 型细胞因子的产生, 使 Th1/Th2 平衡向 Th1 偏移 这些研究提示,HDC 发生是多种细胞因子相互作用的结果, 血清 TNF-α IL-16 及 Th1/Th2 水平的升高可能是引起 HDC 的病因性因素 我们以 SOCS-3 TNF-α IL-16 Th1/Th2 水平的中位数为标准, 将 62 例重度子痫前期患者分为高表达组和低表达组各 31 例 结果显示, SOCS-3 低表达患者胎儿宫内窘迫综合征 胎儿生长受限及新生儿窒息的发生率均明显高于高表达患者,TNF-α IL-16 Th1/Th2 高表达患者早产及胎儿生长受限的发生率均明显高于低表达患者 Fitzgerald 等 [17] [16] 研究显示, 在母胎界面上 SOCS-3 蛋白和细胞因子的相互调节作用决定了 Th1/Th2 功能的平衡,SOCS-3 高表达将导致 Th2 反应的提高, 维持妊娠 ;SOCS-3 缺乏可导致胎盘供养不足致胚胎死亡 另有研究表明, 高水平的 TNF-α 可诱导滋养层细胞的凋亡, 合体滋养层微泡的脱落以及胎盘的功能受损 [18] Th1 细胞分泌的 TNF-α 细胞因子主要介导细胞毒性和局部炎性反应, 在妊娠的过程中具有损害胎盘组织 抑制滋养细胞生长 进而抑制胎盘发育的作用 此外,TNF-α 还通过趋化炎症细胞 促进炎性因子表达 诱发激活氧化应激等方式直接导致组织器官的损害 [19] 因此, 监测 SOCS-3 TNF-α IL-16 Th1/Th2 水平对 HDC 患者的严重程度及妊娠结局的评估具有一定临床意义 相关分析显示,HDC 者血清 SOCS-3 水平与 TNF-α IL-16 Th1/Th2 均呈负相关, 与既往研究结果相符合 [16] 进一步说明 HDC 的发生发展与多种细胞因子相互作用有关,SOCS-3 可能通过抑制 TNF-α 和 IL-16 的分泌, 进而使 Th1/ Th2 细胞功能失衡 综上所述,HDC 患者血清 SOCS-3 TNF-α IL-16 Th1/Th2 水平变化与疾病的发病过程相关, 在一定程度上可反映疾病的严重程度及不良妊娠结局, 有望作为疾病早期预测及病情严重程度的监测指标, 同时对指导临床治疗具有一定的参考价值 参考文献 1 Fauvel J. Hypertension during pregnancy :Epidemiology,definition [J]. resse Med,2016,45(7-8 t 1): ayne BA,Groen H,Ukah UV,et al. Development and internal validation of a multivariable model to predict perinatal death in pregnancy hypertension[j]. regnancy Hypertens,2015,5(4): Minuz,Fava C,Hao S,et al. Differential regulation of TNF receptors in maternal leukocytes is associated with severe preterm preeclampsia[j]. J Matern Fetal Neonatal Med,2015,28(8): Li Y,Wang Y,Ding X,et al. Serum Levels of TNF-α and IL-6 Are Associated With regnancy-induced Hypertension[J]. Reprod Sci,2016,23(10): Kershaw NJ,Murphy JM,Liau N,et al. SOCS3 binds specific receptor-jak complexes to control cytokine signaling by direct kinase inhibition[j]. Nat Struct Mol Biol,2013,20(4): Shopen N,Schiff E,Koren-Morag N,et al. Factors That redict the Development of Hypertension in Women With regnancy-induced Hypertension[J]. Am J Hypertens,2016,29(1): Hu R,Li YX,Di HH,et al. Risk factors of hypertensive disorders among Chinese pregnant women[j]. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2015,35(6): 谢幸, 苟文丽. 妇产科学 [M]. 8 版. 北京 : 人民卫生出版社, 2013 : 李留霞, 吴改英, 王宁, 等. 子痫前期孕妇胎盘组织中内皮分化基因 2 的表达 [J]. 中华妇产科杂志,2012,47(6): 赵先兰, 刘传, 刘彩. 孕妇外周血 脐血和胎盘组织中 AT1-AA 及内皮素 1 的表达及其与子痫前期发病的关系 [J]. 中华妇产科杂志,2012,47(10): Zárate A,Saucedo R,Valencia J,et al. Early disturbed placental ischemia and hypoxia creates immune alteration and vascular disorder causing preeclampsia[j]. Arch Med Res,2014,45(7): El-Baradie SM,Mahmoud M,Makhlouf HH. Elevated serum levels of interleukin-15,interleukin-16,and human chorionic gonadotropin in women with preeclampsia[j]. J Obstet Gynaecol Can,2009,31 (2): ( 下转 432 页 )
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综合报道
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