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1 司 法 鉴 定 技 术 规 范 SF/Z JD 血 液 尿 液 中 154 种 毒 ( 药 ) 物 的 检 测 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 法 发 布 生 效 中 华 人 民 共 和 国 司 法 部 司 法 鉴 定 管 理 局 发 布
2 前 言 本 标 准 的 附 录 A 为 资 料 性 附 录 本 标 准 由 中 华 人 民 共 和 国 司 法 部 司 法 鉴 定 科 学 技 术 研 究 所 提 出 本 标 准 由 中 华 人 民 共 和 国 司 法 部 归 口 本 标 准 起 草 单 位 : 中 华 人 民 共 和 国 司 法 部 司 法 鉴 定 科 学 技 术 研 究 所 本 标 准 主 要 起 草 人 : 向 平 卓 先 义 沈 敏 沈 保 华 刘 伟 卜 俊 马 栋 严 慧 I
3 血 液 尿 液 中 154 种 毒 ( 药 ) 物 的 检 测 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 法 1 范 围 本 标 准 规 定 了 血 液 和 尿 液 中 154 种 毒 ( 药 ) 物 ( 见 附 录 A) 的 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 (LC-MS/MS) 检 测 方 法 本 标 准 适 用 于 血 液 和 尿 液 中 154 种 毒 ( 药 ) 物 的 筛 选 分 析 定 性 和 定 量 分 析 本 标 准 血 液 中 154 种 毒 ( 药 ) 物 测 定 方 法 检 出 限 为 1-10ng/mL( 见 附 录 A) 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 本 标 准 的 引 用 而 成 为 本 标 准 的 条 款 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件, 其 随 后 所 有 的 修 改 单 ( 不 包 括 勘 误 的 内 容 ) 或 修 订 版 均 不 适 用 于 本 标 准, 然 而, 鼓 励 根 据 本 标 准 达 成 协 议 的 各 方 研 究 是 否 可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件, 其 最 新 版 本 适 用 于 本 标 准 GB/T 6682 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 (GB/T ,ISO 3696:1987,MOD) GA/T 122 毒 物 分 析 名 词 术 语 3 原 理 本 法 利 用 154 种 常 见 毒 ( 药 ) 物 可 在 中 性 碱 性 条 件 下 被 有 机 溶 剂 从 血 尿 中 提 取 出 来 的 特 点, 用 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 法 的 多 反 应 监 测 (MRM) 模 式 进 行 检 测, 以 保 留 时 间 一 对 母 离 子 / 子 离 子 对 进 行 筛 选 分 析 ; 以 保 留 时 间 和 两 对 母 离 子 / 子 离 子 对 进 行 定 性 和 定 量 分 析 4 试 剂 和 材 料 除 另 有 规 定 外, 试 剂 均 为 分 析 纯, 水 为 GB/T 6682 规 定 的 一 级 水 种 毒 ( 药 ) 物 对 照 品 溶 液 的 制 备 分 别 精 密 称 取 各 种 毒 ( 药 ) 物 对 照 品 适 量, 用 甲 醇 配 成 1mg/mL 的 对 照 品 储 备 溶 液 置 于 -18ºC 冷 冻 保 存, 保 存 期 为 1 年 试 验 中 所 用 其 它 浓 度 的 标 准 溶 液 均 从 上 述 储 备 液 稀 释 而 得, 储 存 在 4 冰 箱 中, 保 存 期 为 6 个 月 4.2 硼 砂 缓 冲 液 ph 乙 醚 4.4 乙 腈 色 谱 纯 4.5 乙 酸 胺 1
4 色 谱 纯 4.6 甲 酸 优 级 纯 4.7 流 动 相 缓 冲 液 SF/Z JD mmol/L 乙 酸 铵 和 0.1% 甲 酸 缓 冲 液 : 分 别 称 取 1.54g 乙 酸 铵 和 1.84g 甲 酸 置 于 1000mL 容 量 瓶 中, 加 水 定 容 至 刻 度,pH 值 约 为 4 5 仪 器 5.1 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 联 用 仪 配 有 电 喷 雾 离 子 源 5.2 分 析 天 平 感 量 0.1mg 5.3 旋 涡 混 合 器 5.4 离 心 机 5.5 恒 温 水 浴 锅 5.6 移 液 器 5.7 具 塞 离 心 试 管 6 测 定 步 骤 6.1 样 品 预 处 理 取 血 液 或 尿 液 1mL, 加 入 2mL ph9.2 硼 砂 缓 冲 液 后 用 3.5mL 乙 醚 提 取, 混 旋, 离 心 上 清 液 于 60 C 水 浴 中 挥 干, 残 留 物 中 加 入 100μL 乙 腈 : 流 动 相 缓 冲 液 (70: 30) 进 行 溶 解, 取 5μL 注 入 LC-MS/MS 6.2 测 定 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 条 件 a) 液 相 柱 :Allure PFP Propyl 100mm 2.1mm 5μm 或 相 当 者, 接 C 18 保 护 柱 ; b) 柱 温 : 室 温 ; c) 流 动 相 :V( 乙 腈 ): V( 流 动 相 缓 冲 液 )=70: 30; d) 流 速 :200μL/min; e) 进 样 量 :5μL; f) 离 子 源 : 电 喷 雾 电 离 - 正 离 子 模 式 (ESI+); g) 检 测 方 式 : 多 反 应 监 测 ; h) 去 簇 电 压 (DP) 碰 撞 能 量 (CE) 等 参 数 见 附 录 A 筛 选 分 析 筛 选 分 析 选 取 毒 ( 药 ) 物 的 一 对 母 离 子 / 子 离 子 离 子 驻 留 时 间 (Dwell Time) 为 5-10 ms, 总 循 环 时 间 2s 如 果 检 出 的 色 谱 峰 保 留 时 间 与 附 录 A 中 某 种 常 见 毒 ( 药 ) 物 的 色 谱 峰 保 留 时 间 比 较, 相 对 误 差 小 于 5%, 且 与 空 白 检 材 添 加 该 种 对 照 品 的 色 谱 峰 保 留 时 间 比 较, 相 对 误 差 小 于 2.5%,, 可 以 初 步 认 为 检 材 中 含 有 某 种 常 见 毒 ( 药 ) 物, 并 进 行 确 证 分 析 确 证 分 析 选 取 毒 ( 药 ) 物 的 两 对 母 离 子 / 子 离 子 ( 见 附 录 A), 离 子 驻 留 时 间 为 200 ms 如 果 检 出 的 色 谱 峰 保 留 时 间 与 空 白 检 材 添 加 对 照 品 的 色 谱 峰 保 留 时 间 比 较, 相 对 误 差 小 于 2%, 2
5 并 且 在 扣 除 背 景 后 的 样 品 质 谱 图 中, 均 出 现 所 选 择 的 离 子 对, 而 且 所 选 择 的 离 子 对 相 对 丰 度 比 与 添 加 对 照 品 的 离 子 对 相 对 丰 度 比 之 相 对 误 差 不 超 过 表 1 规 定 的 范 围, 则 可 判 断 样 品 中 存 在 这 种 化 合 物 表 1 相 对 离 子 对 丰 度 比 的 最 大 允 许 相 对 误 差 (%) 相 对 离 子 对 丰 度 比 允 许 的 相 对 误 差 ±20 ±25 ±30 ± 定 量 测 定 采 用 外 标 - 校 准 曲 线 法 或 单 点 法 定 量 用 相 同 基 质 空 白 添 加 适 量 目 标 物 对 照 品 制 得 一 系 列 校 准 样 品, 以 目 标 物 的 的 第 1 个 母 离 子 / 子 离 子 对 峰 面 积 对 为 纵 坐 标, 添 加 浓 度 为 横 坐 标 绘 制 校 准 曲 线, 用 校 准 曲 线 对 检 材 进 行 定 量 添 加 浓 度 应 覆 盖 检 材 浓 度 范 围 当 空 白 检 材 中 添 加 目 标 物 浓 度 在 检 材 中 目 标 物 浓 度 的 ±50% 以 内 时, 可 采 用 单 点 校 准 法 来 计 算 目 标 化 合 物 的 浓 度 6.3 平 行 试 验 样 品 应 按 以 上 步 骤 同 时 平 行 测 定 两 份 平 行 试 验 中 两 份 检 材 测 定 结 果 的 双 样 相 对 相 差 若 不 超 过 20% 时 ( 腐 败 检 材 不 超 过 30%), 结 果 按 两 份 检 材 浓 度 的 平 均 值 计 算 双 样 相 对 相 差 按 式 (1) 计 算 : C 1 - C 2 双 样 相 对 相 差 (%) = 100 (1) C 式 中 : C 1 C 2 两 份 样 品 平 行 定 量 测 定 的 结 果 ; C 两 份 样 品 平 行 定 量 测 定 结 果 的 平 均 值 (C 1 + C 2 )/ 空 白 试 验 除 以 相 同 基 质 空 白 替 代 检 材 外, 均 按 上 述 步 骤 进 行 7 结 果 计 算 以 外 标 - 校 准 曲 线 法 或 按 式 (2) 计 算 : A 1 W C = A 2 W 1 式 中 : C 被 测 样 品 中 毒 ( 药 ) 物 浓 度 C(μg/mL); A 1 检 材 中 目 标 物 的 峰 面 积 ; A 2 空 白 检 材 中 添 加 目 标 物 的 峰 面 积 ; W 空 白 检 材 中 目 标 物 的 添 加 量 (μg); W 1 检 材 量 (ml) (2) 3
6 附 录 A ( 资 料 性 附 录 ) 154 种 毒 药 物 的 LC-MS/MS 分 析 参 数 表 A 154 种 毒 药 物 的 LC-MS/MS 分 析 参 数 目 标 物 名 称 母 离 子 / 子 离 子 对 DP CE(1) Rt LOD (1) (2) (V) (ev) (min) (ng/ml) 去 甲 麻 黄 碱 norephedrine 134.2/ / 苯 丙 胺 amphetamine 136.1/ / 甲 胺 磷 methamidophos 142.1/ / 甲 基 苯 丙 胺 150.1/ / methamphetamine 苯 丁 胺 phentermine 150/ / 苯 丙 醇 胺 152.1/ / phenylpropanolamine 扑 热 息 痛 152.3/ / acetaminophenol 尼 古 丁 nicotine 163.2/ / 灭 多 威 methomyl 163.2/ 速 灭 威 metolcarb 166.1/ / 麻 黄 碱 ephdrine 166.1/ / 匹 莫 林 pemoline 177.0/ 可 铁 宁 cotinine 177.2/ / 尼 克 刹 米 nikethamide 179.3/ / MDA 180.1/ / 美 西 律 mexiletine 180.2/ / 茶 碱 theophylline 181.1/ / 乙 酰 甲 胺 磷 acephate 184/ / 爱 康 宁 ecognine 186.2/ / 叶 蝉 散 isoprocarb 194.1/ / BDB 194.2/ / MDMA 194.2/ / 咖 啡 因 caffeine 195.2/ / 爱 康 宁 甲 酯 200.2/ / ecognine ester 西 维 因 carbaryl 202.1/ / MDE 208.2/ / MBDB 208.3/ / 氧 乐 果 omethoate 214/ / 眠 尔 通 meprobamate 219.2/ /
7 扑 米 酮 primidone 219.2/ / MDPA 222.2/ / 呋 喃 丹 furadan 222.2/ / 敌 敌 畏 dichlorvos 223.1/ / 久 效 磷 monocrotophos 224.1/ / 去 甲 氯 胺 酮 norketamine 224.1/ / 阿 米 洛 利 amiloride 230.1/ / 乐 果 dimethoate 230/ / 萘 普 生 naproxen 231.2/ / 可 乐 定 clonidine 232.1/ / 芬 氟 拉 明 fenflutamine 232.2/ / 氨 基 比 林 232.3/ / Aminophenazone 去 甲 度 冷 丁 234.2/ / normeperidine 利 多 卡 因 lidocaine 235.2/ / 普 鲁 卡 因 procaine 237.2/ / 卡 马 西 平 Carbamazepine 237.3/ / 氯 胺 酮 ketamine 238.1/ / 抗 蚜 威 pirimicarb 239.1/ / 舒 喘 宁 salbutamol 240.1/ / 氯 胺 酮 -d 4 ketamine-d / / 度 冷 丁 meperidine 248.3/ / 氨 基 硝 基 安 定 252.2/ / aminonitrazepam 奥 卡 西 平 oxcarbazepine 253.0/ / 西 米 替 丁 cimetidine 253.2/ 三 氨 蝶 啶,triamterene 254.0/ / 拉 莫 三 嗪 lamotrigine 256.1/ / 苯 海 拉 明 256.2/ / diphenhydramine 敌 百 虫 trichlorfon 259.3/ / 肌 安 宁 Carisoprodol 261.3/ / 甲 拌 磷 phorate 261/ / 甲 基 对 硫 磷 264.1/ / parathion-methyl 去 甲 替 林 nortriptyline 264.2/ / 曲 马 多 Tramadol 264.2/ / 丁 卡 因 trfracaine 265.2/ / 阿 替 洛 尔 atenolol 267.2/ /
8 去 甲 安 定 nordiazepam 271.2/ / 美 沙 芬 dexmethorphanum 272.3/ / 布 桂 嗪,bucinnazine 273.2/ / 扑 尔 敏 chlorpheniramine 275.2/ / 去 氢 替 林 cyclobenzaprine 276.3/ / 克 仑 特 罗 clenbuterol 277.2/ / 杀 螟 松 fenitrothion 278.1/ / 阿 米 替 林 amitripthyline 278.2/ / EDDP 278.2/ / 多 虑 平 doxepin 280.3/ / 丙 咪 嗪 imipramine 281.3/ / 硝 基 安 定 nitrazepam 282.2/ / 酚 妥 拉 明 phentolamine 282/ / 氨 基 氟 硝 安 定 284.2/ / aminoflunitrazepam 安 定 diazepam 285.1/ / 异 丙 嗪 promethazine 285.2/ / 吗 啡 morphine 286.1/ / 氨 基 氯 硝 西 泮 286.1/ / aminoclonazepam 氢 吗 啡 酮 hydromorphone 286.2/ / 去 甲 氧 安 定 demoxepam 287.1/ / 羟 基 安 定 oxazepam 287.2/ / 异 稻 瘟 净 iprobenfos 289/ / 阿 托 品 atropine 290.3/ / 对 硫 磷 parathion 292.1/ / 艾 司 唑 仑 estazolam 295.2/ / 尼 美 西 泮 nimetazepam 296.1/ / 去 甲 氟 西 汀 norfluoxetine 296.2/ / 喹 硫 磷 quinalphos 299.1/ / 可 待 因 codeine 300.2/ / 二 氢 可 待 因 酮 300.2/ / hydrocodone 甲 羟 安 定 temazepam 301.2/ / 杀 扑 磷 methidathion 303.1/ / 可 卡 因 cocaine 304.1/ / 东 莨 菪 碱 scopolamine 304.3/ / 二 嗪 农 diazinon 305.1/ / 珊 特 拉 林 sertraline 306.2/ / 左 吡 登 zolpidem 308.1/ /
9 阿 普 唑 仑 alprazolam 309.1/ / 美 沙 酮 methadone 310.2/ / 大 麻 酚 CBN 311.2/ / 蒂 巴 因 thebaine 312.2/ / 奥 氮 平 olanzapine 313.1/ / 氟 硝 安 定 flunitrazepam 314.2/ / 乙 基 吗 啡 ethylmorphine 314.3/ / 四 氢 大 麻 酚 THC 315.2/ / 大 麻 二 酚 CBD 315.2/ / 氯 硝 安 定 clonazepam 316.2/ / 羟 可 待 酮 oxycodone 316.2/ / 泰 尔 登 chlorprothixene 316.3/ / 溴 西 泮 bromazepam 317.1/ / CE cocaethylene 318.2/ / 氯 丙 嗪 chlorpramazine 319.3/ / 稻 丰 散 phenthoate 321.1/ / 劳 拉 西 泮 lorazepam 321.1/ / 治 螟 磷 sulfotep 323.1/ / α- 羟 基 阿 普 唑 仑 325.2/ / α-hydroxyalprazolam 咪 哒 唑 仑 midazolam 326.2/ / 氯 氮 平 clozapine 327.3/ / 单 乙 酰 吗 啡 328.1/ / acetylmorphine 纳 络 酮 naloxone 328.3/ / 帕 罗 克 赛 paroxetine 330.3/ / 马 拉 硫 磷 malathion 331.1/ / 胺 菊 酯 tetramethrin 332.4/ / 咳 必 清 carbetapentane 334.4/ / 芬 太 尼 fentanyl 337.2/ / 法 莫 替 丁 famotidine 338.2/ / 罂 粟 碱 papaverine 340.1/ / 右 丙 氧 芬 propoxyphene 340.2/ / 坎 利 酮 canrenone 341.2/ / 羟 基 咪 哒 唑 仑 342.0/ / hydroxymidazolam 舒 必 利 sulpiride 342.1/ / 乙 酰 可 待 因 acetylcodeine 342.2/ / 三 唑 仑 triazolam 343.2/ / 萝 巴 新 raubasine 353.2/ /
10 消 炎 痛 indomethacin 358.2/ / α- 羟 基 三 唑 仑 359.2/ / α-hydroxytriazolam 伏 杀 磷 phosalone 370.1/ / 海 洛 因 heroin 370.2/ / 曲 唑 酮 trazodone 372.2/ / 氟 哌 啶 醇 haloperidol 376.2/ / 氟 安 定 flurazepam 388.2/ / 洛 贝 林 lobelonum 3882./ / 奋 乃 静 perphenazine 404.2/ / 三 氟 拉 嗪 trifluoperazine 408.4/ / 利 培 酮 risperidone 411.2/ 那 可 汀 norcotine 414.2/ / 哌 氟 酰 胺 flecanide 415.1/ / 西 沙 比 利 cisapride 466.2/ / 丁 丙 诺 啡 buprenorphine 468.1/ / 伟 哥 vigra 475.0/ / 阿 米 三 嗪 almitrine 478.1/ /
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