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1 第 39 卷第 6 期 Vol. 39 No. 6 摇 摇 摇 摇 中南医学科学杂志 Journal of Medical Science in Central South China 2011 年 11 月 Nov 沙眼衣原体 T 细胞抗原 CT143 原核表达 纯化及免疫活性鉴定 陆春雪1,吴移谋1,彭摇 波2,刘良专1,蔡恒玲1,李忠玉1 (1. 南华大学 微生物与免疫学教研室,湖南 衡阳 ;2. 南华大学 肿瘤研究所) 摘摇 要:摇 目的摇 克隆沙眼衣原体( Chlamydia trachomatis,ct) T 细胞抗原 Ct143 基因,表达并纯化该蛋白,检 测其免疫活性 摇 方法摇 采用 PCR 技术从 Ct 基因组中扩增 Ct143 基因,并构建 pgex鄄6p鄄ct143 原核表达质粒,转 化 E. coli XL1鄄Blue,IPTG 诱导重组 GST鄄CT143 融合蛋白表达,经酶切后得到无 GST 标签的纯蛋白免疫 Balb / c 鼠, ELISA 及 Western鄄blot 分析 CT143 蛋白免疫原性及免疫反应性 摇 结果摇 成功构建了 pgex鄄6p鄄ct143 原核表达质 粒,序列测定证实重组质粒插入片段与 GenBank 登陆的 Ct D 型一致,长度为 843 bp;gst鄄ct143 融合蛋白在 E. coli 中获得稳定高效表达;纯蛋白与佐剂混匀后肌肉免疫小鼠,ELISA 检测免疫小鼠的血清效价为 1 颐 ,Western blot 结果表明该蛋白与 Ct 泌尿生殖道感染病人混合血清中 IgG 结合,具有免疫反应性 摇 结论摇 成功克隆表达了 Ct T 细胞抗原 CT143,该抗原经纯化后具有良好的免疫原性及免疫反应性 关键词:摇 沙眼衣原体;摇 CT143;摇 克隆表达;摇 纯化;摇 免疫活性 中图分类号:R374郾 1摇 摇 摇 文献标识码:A摇 摇 摇 文章编号: (2011) Cloning Expression,Purification and Antigenicity Analysis of Chlamydia Trachomatis T Cell Antigen CT143 LU Chun鄄xue,WU Yi鄄mou,PENG Bo,et al (Department of Microbiology and Immunology,University of South China,Hengyang,Hunan ,China) Abstract:摇 Objective摇 To clone,express and purify the Chlamydia trachomatis T cell antigen CT143 and prelimina鄄 rily characterize the antigenicity of purified recombinant protein. 摇 Methods摇 The ORF of Ct143 was cloned and inserted into the expression vector pgex6p鄄2 to construct pgex鄄6p鄄ct143 recombinant plasmid. The recombinant plasmid was trans鄄 formed into E. coli XL1鄄Blue to express GST鄄CT143 fusion protein,then purified with Glutathione Sepharose 4B Beads and digested with PreScission Protease to remove the GST tag. The pure protein was used to immunize Balb / c mice. ELISA and Western bolt were carried out to identify the immunogenicity and immunoreactivity. 摇 Results摇 The pgex6p鄄ct143 expres鄄 sion plasmid was successfully constructed. DNA sequencing showed that the inserted Ct143 was about 843 bp,encoding a protein with 280 amino acids. CT143 was expressed as GST fusion proteins in E. coli and then successfully cleaved by PreS鄄 cission Protease. The ELISA result showed the specific antibody titer against CT143 reached 1颐 and the affinity be鄄 tween recombinant CT143 and IgG antibodies from pooled Ct infected patient serum was identified by Western blot. 摇 Con鄄 clusion摇 CT143 protein was successfully expressed and purified in prokaryotic system and the specific anti鄄ct143 antibody was induced in BALB / c mice,which lay a foundation for the further study on CT143 protein function and vaccine develop鄄 ment. Key words:摇 Chlamydia trachomatis;摇 CT143;摇 cloning and expression;摇 purification immunoactivity 收稿日期: 基金项目:国家自然科学基金( ) 和衡阳市科技局基金(2008KS30) 资助. 通讯作者:李忠玉,电话: ,E鄄mail:lzhy1023@ hotmail. com. 611
2 摇 摇 沙 眼 衣 原 体 (Chlamydia trachomatis,ct) 是 一 类 专 性 细 胞 内 寄 生 具 有 独 特 发 育 周 期 的 原 核 细 胞 型 微 生 物, 包 括 A B C D 等 19 种 血 清 型, 其 中 K ~ D 型 可 引 起 泌 尿 生 殖 道 感 染, 据 2001 年 世 界 卫 生 组 织 统 计,Ct 泌 尿 生 殖 道 感 染 每 年 新 发 病 例 约 为 万, 已 超 过 淋 病 每 年 新 发 病 例 数 (6 000 万 ) 而 成 为 性 传 播 疾 病 的 主 要 病 原 体 之 一 [1] 流 行 病 学 调 查 结 果 显 示, 衣 原 体 感 染 存 在 大 量 的 无 症 状 或 微 症 状 患 者, 通 常 不 被 发 现 或 不 被 治 疗, 可 持 续 存 在 数 月 至 数 年, 最 终 引 起 严 重 并 发 症, 如 盆 腔 炎 不 孕 异 位 妊 娠 宫 颈 鳞 状 细 胞 癌 等, 构 成 了 衣 原 体 感 染 的 高 发 病 率 和 沉 重 的 社 会 经 济 负 担 [2,3] 20 世 纪 90 年 代, 西 方 发 达 国 家 试 图 通 过 Ct 筛 查 及 早 期 抗 生 素 治 疗 等 措 施 控 制 Ct 感 染, 曾 短 期 降 低 感 染 率 达 50% 以 上, 但 因 抗 生 素 的 干 预 抑 制 了 衣 原 体 自 然 感 染 保 护 性 免 疫 应 答 的 产 生, 致 使 再 次 感 染 病 例 数 显 著 增 加 [4] 因 此 研 制 出 新 型 有 效 的 Ct 疫 苗 是 预 防 控 制 Ct 疾 病 的 关 键 本 研 究 采 用 基 因 重 组 技 术 将 Ct T 细 胞 抗 原 CT143 基 因 定 向 克 隆 到 原 核 表 达 载 体 pgex 鄄 6p, 再 将 重 组 质 粒 转 化 E. coli XL1 鄄 Blue, 实 现 了 CT143 在 E. coli 中 高 效 表 达, 并 对 表 达 的 蛋 白 进 行 纯 化 及 免 疫 活 性 分 析, 为 研 究 Ct T 细 胞 抗 原 的 结 构 与 功 能 研 制 基 因 工 程 疫 苗 奠 定 理 论 和 实 验 基 础 1 摇 材 料 与 方 法 1. 1 摇 材 料 摇 摇 Ct D 标 准 株 D / UW 鄄 3 / CX 基 因 组 DNA 模 板 pgex 鄄 6p 原 核 表 达 载 体 E. coli XL1 鄄 Blue Ct 泌 尿 生 殖 道 感 染 患 者 血 清 和 健 康 无 感 染 者 血 清 样 本 Balb / c 小 鼠 均 由 美 国 德 克 萨 斯 大 学 圣 安 东 尼 奥 健 康 科 学 中 心 钟 光 明 教 授 实 验 室 提 供 Pfx DNA 聚 合 酶 BamH 玉 Not 玉 限 制 性 内 切 酶 等 均 购 自 Invitrogen 公 司,Glutathi 鄄 one Sepharose 4B Beads 为 Invitrogen 公 司 产 品 ;PreS 鄄 cission Protease(GST 融 合 蛋 白 剪 切 酶 ) 为 GE health 鄄 care 公 司 产 品,HRP 标 记 羊 抗 鼠 IgG 羊 抗 人 IgG 均 购 自 Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc 1. 2 摇 CT143 基 因 序 列 分 析 和 特 异 性 引 物 的 设 计 合 成 从 GenBank ( http: 椅 www. ncbi. nlm. nih. gov / Entrez) 获 取 D 标 准 株 CT143 基 因 全 长 序 列 ( GI: ), 应 用 primer5. 0 软 件 设 计 并 合 成 一 对 特 异 性 引 物, 并 在 上 游 下 游 引 物 中 分 别 引 入 BamHI NotI 限 制 性 酶 切 位 点 及 保 护 性 碱 基 引 物 如 下 ( 下 划 线 为 酶 切 位 点 ):5 忆 鄄 CG 鄄 GGATCC 鄄 ATG AAA AAG 612 TTT GCT ACT TTC CT 鄄 3 忆 ; 5 忆 鄄 TTT TCC TTT T 鄄 GC GGCCGC 鄄 TTA 鄄 AAG ATT TGA TTG GAA ATG CG 鄄 3 忆 1. 3 摇 pgex 鄄 6p 鄄 CT143 原 核 表 达 质 粒 的 构 建 及 鉴 定 以 D 标 准 株 D / UW 鄄 3 / CX 基 因 组 DNA 为 模 板, PCR 法 扩 增 CT143 编 码 基 因 ; 扩 增 产 物 经 1. 0% 琼 脂 糖 电 泳 鉴 定 其 结 果 ; 应 用 PCR 快 速 纯 化 试 剂 盒 纯 化 回 收 PCR 产 物 纯 化 产 物 经 BamH 玉 Not 玉 双 酶 切 后 16 益 连 接 到 原 核 表 达 载 体 pgex 鄄 6p 鄄 2 上, 转 化 E. coli XL1 鄄 Blue 氨 苄 抗 性 平 板 筛 选 转 化 成 功 的 菌 株, 挑 取 单 个 菌 落 进 行 PCR 鉴 定 及 序 列 测 定 1. 4 摇 pgex 鄄 6p 鄄 CT143 重 组 质 粒 融 合 蛋 白 的 表 达 和 纯 化 将 鉴 定 后 的 阳 性 克 隆 接 种 于 3 ml 含 100 滋 g / ml 氨 苄 的 LB 培 养 液 中,37 益 摇 床 培 养 过 夜 次 日 以 1 颐 100 的 比 例 扩 大 培 养, 并 加 入 IPTG ( 终 浓 度 为 0. 2 mmol / L)30 益 诱 导 表 达 低 速 离 心 收 集 细 菌, 超 声 破 菌 后 高 速 离 心, 上 清 与 Glutathione Sepharose 4B Beads 室 温 结 合 1 h 后, 用 特 异 性 的 GST 融 合 蛋 白 剪 切 酶 ( 该 酶 特 异 性 结 合 Beads 并 精 确 剪 切 GST 标 签 与 目 的 蛋 白 间 LeuGluValLeuPheGlnGlyPro 基 序 的 Gln 鄄 Gly 残 基 ) 室 温 作 用 Beads 2 h, 离 心 收 集 酶 切 后 的 上 清 液 ( 主 要 含 酶 切 后 的 目 的 蛋 白 ) 及 Beads 洗 脱 液 ( 非 特 异 性 结 合 的 酶 切 后 目 的 蛋 白 ), 最 后 采 用 超 滤 离 心 管 (Millipore,Billerica,MA) 离 心 浓 缩, 获 得 纯 化 的 无 GST 标 签 纯 蛋 白 蛋 白 经 12% SDS 鄄 PAGE 电 泳 分 析, 观 察 其 表 达 情 况 和 纯 化 效 果 1. 5 摇 动 物 免 疫 以 50 滋 L 无 GST 标 签 的 CT143 纯 蛋 白 (40 滋 g) 与 等 体 积 的 弗 氏 不 完 全 佐 剂 (IFA) 超 声 乳 化 后, 行 Balb / c 小 鼠 两 侧 臀 部 肌 肉 注 射, 初 次 免 疫 后 的 第 14 天 和 第 28 天, 再 分 别 用 20 滋 g 纯 化 蛋 白 与 等 体 积 弗 氏 不 完 全 佐 剂 超 声 乳 化 后 进 行 第 2 次 和 第 3 次 免 疫 实 验 过 程 中 同 时 设 定 PBS 免 疫 组 为 对 照 组, 以 相 同 的 方 式 进 行 免 疫 小 鼠 在 每 次 免 疫 前 及 最 后 1 次 免 疫 后 2 周, 尾 静 脉 采 血, 分 离 血 清, - 80 益 保 存 备 用 1. 6 摇 ELISA 测 定 抗 体 滴 度 采 用 间 接 ELISA 法 测 定 小 鼠 血 清 特 异 性 抗 体 滴 度 以 100 滋 L 无 GST 标 签 的 CT143 纯 化 蛋 白 10 滋 g / ml 包 被 酶 标 板,4 益 过 夜,10% BSA 室 温 封 闭 1 h, 加 入 倍 比 稀 释 的 不 同 浓 度 的 待 测 免 疫 血 清,37 益 孵 育 1 h,0. 05% PBST 洗 涤 3 次 后 分 别 加 入 1 颐 稀 释 的 HRP 标 记 的 羊 抗 鼠 IgG 孵 育, 加 入 显 色 剂 ABTS,37 益 避 光 反 应 10 min 后 用 10% SDS 20 滋 L / 孔 终 止 反 应, 酶 标 仪 读 取 405 nm 波 长 的 OD 值
![终 引 起 严 重 并 发 症, 如 盆 腔 炎 不 孕 异 位 妊 娠 宫 颈 鳞 状 细 胞 癌 等, 构 成 了 衣 原 体 感 染 的 高 发 病 率 和 沉 重 的 社 会 经 济 负 担 [2,3] 20 世 纪 90 年 代, 西 方 发 达 国 家 试 图 通 过 Ct 筛 查 及 早 期 抗 生 素 治 疗 等 措 施 控 制 Ct 感 染, 曾 短 期 降 低 感 染 率 达](/docs-images/43/23162733/images/page_2.jpg "50% 以 上, 但 因 抗 生 素 的 干 预 抑 制 了 衣 原 体 自 然 感 染 保 护 性 免 疫 应 答 的 产 生, 致 使 再 次 感 染 病 例 数 显 著 增 加 [4] 因 此 研 制 出 新 型 有 效 的 Ct 疫 苗 是 预 防 控 制 Ct 疾 病 的 关 键 本 研 究 采 用 基 因 重 组 技 术 将 Ct T 细 胞 抗 原 CT143 基 因 定 向 克")
3 1. 7摇 重组 CT143 蛋白的免疫活性测定 先将蛋白 Marker 纯化好的无 GST 标签 CT143 蛋白及 pgex6p鄄2 空质粒表达纯化产物进行 12% SDS鄄PAGE,然后在 200 V 条件下进行 SDS鄄PAGE 转 膜 10 份沙眼衣原体泌尿生殖道感染患者的混合 血清作为一抗,HRP鄄羊抗人 IgG 作为二抗,5 名健康 人混合血清作为阴性对照,进行 Western blot 分析, 鉴定 CT143 蛋白免疫反应性 图 1摇 CT143 基因 PCR 扩增产物 2摇 结摇 摇 果 1:1 kb DNA 标准分子量;2:CT143 基因 PCR 产物;3:阴性对照 2. 1摇 pgex鄄6p鄄ct143 原核表达质粒的构建 Glutathione Sepharose 4B beads 纯化得到 GST鄄CT143 产物:M1鄄D280),1% 琼脂糖凝胶电泳,结果如图 1 将表达产物 酶切后上清 Beads 洗脱液及酶切后的 摇 摇 PCR 扩增 Ct D 血清型 CT143 全长基因( 编码 所示,扩增片段长度约为 869 bp,与预期结果一致 ( 含酶切位点及保护碱基序列) 经 BamH玉和 Not 玉双酶切重组质粒以及对测序结果的 BLAST 分析 证实克隆质粒序列完全正确 2. 2摇 pgex鄄6p鄄ct143 重组质粒融合蛋白的表达与 纯化 重组质粒转化的 E. coli XL1鄄Blue,表达产物经 融合蛋白,纯化的融合蛋白再经酶切进一步纯化 Beads 均用 12% SDS鄄PAGE 胶电泳分析,考马斯亮 蓝染色结 果 如 图 2A 所 示, 在 相 对 分 子 质 量 约 57 kda 处可见一清晰蛋白条带,与预测 GST鄄CT143 融 合蛋 白 分 子 量 相 符 ( GST 相 对 分 子 质 量 26 kda, CT143 相对分子质量约 31 kda) 酶切后无 GST 标 签的纯化蛋白 CT143 大量存在于酶切上清及洗脱 液中,经浓缩后结果见图 2B 图 2摇 GST鄄CT143 融合蛋白表达及纯化产物 A:GST鄄CT143 融合蛋白表达及纯化过程中各步骤产物;1:蛋白标准分子量;2:未经酶切的 GST鄄CT143 融合蛋白;3:酶切后的上清; 4:洗脱液 1;5:洗脱液 2;6:洗脱液 3;7:酶切后的 CST鄄CT143 融合蛋白. 摇 B:无 GST 标签 CT143 蛋白纯化终产物;1:蛋白标准分子量; 2:2 滋L 纯化蛋白;3:0郾 2 滋L 纯化蛋白;4:0郾 02 滋L 纯化蛋白 2. 3摇 小鼠血清抗 CT143 特异性 IgG 的检测 CT143 蛋白作为检测抗原, 包被酶标板, 间接 ELISA 法对 天收集的小鼠实验组和对 照组血清中抗 CT143 特异性抗体 IgG 进行检测,405 种次数的增多抗体滴度逐渐升高,最高抗体滴度达 1颐 ( 图 3) 2. 4摇 重组蛋白 CT143 的免疫活性鉴定 Western blot 结果显示,10 份沙眼衣原体泌尿生殖 nm 吸光值实验组 / 对照组大于 2 为阳性反应,抗体 感染病人的混合血清在约 31 kda(ct143 蛋白)处有一 显示 CT143 蛋白可刺激小鼠产生免疫反应,随着接 重组 CT143 抗原与抗体有很好的反应活性(图 4) 反应呈阳性时的最高血清稀释度即抗体滴度 结果 明显条带,5 份健康人混合血清没有特异性条带,表明 613
4 细胞因子 IFN鄄酌 产生 本课题组随即用 99 份沙眼 衣原体泌尿生殖道感染患者血清对这 8 个 T 细胞抗 原的 Ct 同源物进行筛查,发现仅衣原体属特异性抗 原 TC0420( Ct 血清型同源物为 CT143) 能被患者血 清优势识别 [9],提示 T 细胞抗原 CT143 作为一种新 的免疫优势原可能为人类 Ct 疫苗的研制提供一个 新的潜在的靶标 本研究采用 PCR 法从 Ct D 标 准 株 D / UW鄄3 / 图 3摇 抗 CT143 特异性抗体水平动态变化 CX 基因组 DNA 模板扩增 Ct143 全长编码基因,核 苷酸序列测定证实扩增的目的基因与 GenBank 登 陆的基因序列完全一致 为高效表达并纯化 CT143 蛋白,本实验选取了带有强的启动子及 lac 操纵基 因 SD 序列 lacl 阻遏蛋白基因等的 pgex6p鄄2 作为 表达载体,该载体系统可高效表达 GST 融合蛋白, 且表达的融合蛋白可通过谷胱甘肽一琼脂糖柱进行 亲和层 析, 再 用 PreScission Protease 精 确 剪 切 GST 标签与目的蛋白间 LeuGluValLeuPheGlnGlyPro 基序 的 Gln鄄Gly 残基获得目的蛋白 [10] 该系统已被广泛 地应用于科研及工业领域,尤其在蛋白质分离纯化 膜蛋白结构研究 蛋白质生理功能研究等方面有着 图 4摇 CT143 蛋白的免疫印迹分析 1:CT143 蛋白纯化产物;2:pGEX6p鄄2 空质粒纯化产物 3摇 讨摇 摇 论 沙眼衣原体疫苗尽管经过了几十年的研究,但 目前仍没有成熟的疫苗问世 早期的 Ct 全菌灭活 疫苗,在人和猴免疫接种后可获得部分保护,但保护 作用不完全且保护时间短,更为严重的是机体再感 染时易引起严重的免疫病理反应 [5] 随着基因工 重要作用 [11,12] 本实验通过基因重组技术成功构 建了 pgex鄄6p鄄ct143 重组质粒,在 E. coli 中高效表 达并最终获得了无 GST 标签的目的蛋白,动物免疫 后可刺激小鼠产生强烈的体液免疫反应,其特异性 抗体滴度达 1颐 ;Western Blot 分析显示 CT143 抗原与 Ct 泌尿生殖道感染患者混合血清中的 IgG 有良好的的结合活性,而对健康对照的混合血清没 有结合活性,提示纯化蛋白具有良好的免疫学活性 和抗原特异性,为今后利用 CT143 蛋白研究基因工 程疫苗 Ct 致病机制和免疫诊断试剂奠定了基础 程技术的发展,人们一方面在研制其它类型的疫苗, 同时也致力于改造 Ct 菌体,保留其抗原性而消除超 敏反应 1998 年,Ct D 型全基因组序列测序完成, 极大的推动了 Ct 亚单位疫苗的研制 沙眼衣原体为胞内感染病原菌,对于最理想的 清除生殖道感染而言,CD4 + Th1 细胞和 Th1 型细胞 因子 IFN鄄酌 在介导抗 Ct 免疫方面占有主导地位,因 此能有效刺激机体 CD4 + Th1 细胞反应的 T 细胞抗 原是 Ct 亚单位疫苗研究的关键 [6,7] 免疫蛋白质组 学技术是一种快速 高效筛选免疫原性蛋白的方法, 致谢:摇 本研究部分工作在美国得克萨斯大学 圣安东尼奥健康科学中心微生物学和免疫学系 Dr. Zhong 实验室完成 参考文献: [1] 摇 Starnbach MN,Roan NR. Conquering sexually transmitted diseases[ J]. Nat Rev Immunol,2008,8(4) :313鄄317. [2] 摇 Anttila T,Saikku P,Koskela P,et al. Serotypes of Chlamydia trachomatis and risk for development of cervical squamous cell carcinoma[j]. Jama,2001,285(1):47鄄51. 最近加拿大 Karunakaran 等 [8] 采用免疫蛋白质组学 [3] 摇 陈摇 慧,连摇 石. 沙眼衣原体感染与不孕不育的关系 感染的树突状细胞成功鉴定出 8 个 T 细胞抗原,分 [4] 摇 Brunham RC,Pourbohloul B,Mak S,et al. The unexpect鄄 PmpE / F鄄2 和 Gap,并证实能在小鼠体内诱导 Th1 型 ( 下转第 618 页) 技术,从鼠沙眼衣原体( Chlamydia muridarum,cm) 别 是 RplF FabG Aasf PmpG鄄1 TC0420 ClpP鄄1 614 [ J]. 中国计划生育杂志,2011,19(1) :55鄄57. ed impact of a Chlamydia trachomatis infection control
![表达载体,该载体系统可高效表达 GST 融合蛋白, 且表达的融合蛋白可通过谷胱甘肽一琼脂糖柱进行 亲和层 析, 再 用 PreScission Protease 精 确 剪 切 GST 标签与目的蛋白间 LeuGluValLeuPheGlnGlyPro 基序 的 Gln鄄Gly 残基获得目的蛋白 [10] 该系统已被广泛 地应用于科研及工业领域,尤其在蛋白质分离纯化 膜蛋白结构研究](/docs-images/43/23162733/images/page_4.jpg "蛋白质生理功能研究等方面有着 图 4摇 CT143 蛋白的免疫印迹分析 1:CT143 蛋白纯化产物;2:pGEX6p鄄2 空质粒纯化产物 3摇 讨摇 摇 论 沙眼衣原体疫苗尽管经过了几十年的研究,但 目前仍没有成熟的疫苗问世 早期的 Ct 全菌灭活 疫苗,在人和猴免疫接种后可获得部分保护,但保护 作用不完全且保护时间短,更为严重的是机体再感 染时易引起严重的免疫病理反应 [5] 随着基因工")
5 摇 摇 ( 上 接 第 614 页 ) 摇 摇 program on susceptibility to reinfection[ J]. J Infect Dis, 2005,192(10):1836 鄄 [5] 摇 Schachter J. Overview of Chlamydia trachomatis infection and the requirements for a vaccine[ J]. Rev Infect Dis, 1985,7(6):713 鄄 716. [6] 摇 Murphey C,Murthy AK,Meier PA,et al. The protective efficacy of chlamydial protease 鄄 like activity factor vaccina 鄄 tion is dependent upon CD4 + T cells[ J]. Cell Immunol, 2006,242(2):110 鄄 117. [7] 摇 唐 国 芳, 李 忠 玉, 吴 移 谋. 酌 干 扰 素 抗 衣 原 体 感 染 作 用 的 研 究 进 展 [J]. 微 生 物 与 感 染,2009,4(2):103 鄄 107. [8] 摇 Karunakaran KP,Rey 鄄 Ladino J,Stoynov N,et al. Immuno 鄄 proteomic discovery of novel T cell antigens from the ob 鄄 ligate intracellular pathogen Chlamydia [ J]. J Immunol, 2008,180(4):2459 鄄 [9] 摇 Wang J,Zhang Y,Lu C,et al. A genome 鄄 wide profiling of the humoral immune response to Chlamydia trachomatis infection reveals vaccine candidate antigens expressed in humans[j]. J Immunol,185(3):1670 鄄 [10] 摇 李 忠 玉, 汪 世 平, 吴 移 谋, 等. 沙 眼 衣 原 体 质 粒 蛋 白 porf5 原 核 表 达 及 免 疫 原 性 鉴 定 [J]. 中 国 现 代 医 学 杂 志,2009,19(4):517 鄄 520. [11] 摇 郑 江 花, 吴 移 谋, 丁 摇 涛, 等. 肺 炎 嗜 衣 原 体 蛋 白 酶 样 活 性 因 子 重 组 蛋 白 的 表 达 与 临 床 应 用 [ J]. 中 华 医 院 感 染 学 杂 志,2010,20(7):919 鄄 922. [12] 摇 周 摇 洲, 吴 移 谋, 陈 超 群, 等. 肺 炎 衣 原 体 ompa 基 因 VD2 鄄 VD3 区 重 组 蛋 白 在 血 清 学 诊 断 中 的 初 步 应 用 [J]. 微 生 物 学 报,2007,47(3):512 鄄 516. [13] 摇 谢 摇 浩, 杨 摇 程, 陈 丽 娥. 多 肽 融 合 标 签 的 移 除 策 略 [J]. 生 物 化 学 与 生 物 物 理 进 展, 2009, 36 ( 10 ): 1364 鄄 ( 此 文 编 辑 摇 朱 雯 霞 ) 618
![The protective efficacy of chlamydial protease 鄄 like activity factor vaccina 鄄 tion is dependent upon CD4 + T cells[ J]. Cell Immunol, 2006,242(2):110 鄄 117. [7] 摇 唐 国 芳, 李 忠 玉, 吴 移 谋.](/docs-images/43/23162733/images/page_5.jpg "酌 干 扰 素 抗 衣 原 体 感 染 作 用 的 研 究 进 展 [J]. 微 生 物 与 感 染,2009,4(2):103 鄄 107. [8] 摇 Karunakaran KP,Rey 鄄 Ladino J,Stoynov N,et al.")
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Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇
Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT
42 6 Vol.42, No.6 2011 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2011 南极衣藻 (Chlamydomonas sp. ICE-L) 谷胱 * 甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化 1 1 燏 1 1 2 (1. 524025; 2. 266061) RT-PCR GR ORF cdna, ; IPTG,, pet-gr BL21,
II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n
I SARS 21 SARS-CoV GeneBank SARS-CoV Tor2 PCR N PN422 N 40% SARS N 95% N C N 38 15%~30% SARS N N 39 Western N 30 60aa 160~170aa N Bal b/c 8 39 Western Blot 8 6 2 N N 30 184 301 360 2 2 IgG1 10 6 10 9 M
ment group was more effective than that of the control group OR = % CI = Conclusion The clinical efficacy of Chinese medic
33 243 HAART Meta * 1 1 1 1 1 2 3 3 3 1. 530001 2. 538000 3. 530011 highly active anti-retroviral therapy HAART Pubmed HAART randomized controlled trials RCT Jadad RevMan5. 3 Meta 5 RCT 761 Meta HAART
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EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
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227 ELISA 刘 沙 洲 1,2, 桑 小 雪 1, 欧 阳 华 学 3, 雷 绍 荣 3, 白 林 含 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 学 院, 四 川 成 都 610065;2. 成 都 市 食 品 药 品 检 测 中 心, 四 川 成 都 610045; 3. 四 川 省 农 业 科 学 院 分 析 测 试 中 心, 四 川 成 都 610066) 目 的 : 比 较
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44 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology http://journals.im.ac.cn/cjbcn DOI: 10.13345/j.cjb.170220 动物及兽医生物技术 周瑶琴等 / 一种快速鉴定猪肺炎支原体免疫显性蛋白抗原的 ELISA 方法的建立 Jan. 25, 2018, 34(1): 44 53 2018 Chin J Biotech,
泌尿生殖道不同部位沙眼衣原体感染的诊断和治疗评估
1 2 3 1 2 3 1 : Reiter 9-1-1 Annal of internal medicine 5PMN/1000 (+) (+) NGU DFA 10PMN/1000 DFA(+) + GS=Gram Stain PMN=polymorphonuclear leukocytes DFA=direct fulorescent antibody (Annal internal medicine)
SO 2 g/kg 2.0 ppm 2
ISSN 0255-6162 GPN 2006900031 273 92 9 20 161-2 02 26531318 http://www.nlfd.gov.tw 1 SO 2 g/kg 2.0 ppm 2 (Center of Biological Evaluation and Research, FDA) 30 1991 FDA 91 10 30 Trend of Vaccine Development
2000.11 2000.11 2000 11 Abstract: Background: The development of autoantibodies in the sera of patients with cancers has been described, but the mechanism is still not clear. Objective: The aim of this
PCR专题改.doc
Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1
不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体混合感染调查
不 明 原 因 发 热 病 人 钩 端 螺 旋 体 和 巴 尔 通 体 感 染 调 查 王 跃 兵, 向 东, 杨 发 莲, 彭 海 燕, 于 彬 彬, 杨 慧 云 南 省 地 方 病 防 治 所, 云 南 大 理 671000 摘 要 : 目 的 了 解 不 明 原 因 发 热 病 人 钩 端 螺 旋 体 和 巴 尔 通 体 的 感 染 状 况 方 法 用 显 微 镜 凝 集 实 验 方 法 检
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
5期xin
中 国 农 学 通 报 2014,30(5):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 筛 选 及 生 长 曲 线 测 定 喻 华 英, 李 启 峰 ( 塔 里 木 大 学 动 物 科 学 学 院, 新 疆 阿 拉 尔 843300) 摘 要 : 为 探 究 犊 牛 腹 泻 病 中 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 形 成
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骨 有 明 訊 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 形 態 關 係 之 研 究 科 別 : 生 物 科 第 48 屆 科 學 展 覽 北 二 區 佳 作 作 者 : 呂 苹 瑋 范 競 勻 指 導 老 師 : 陳 季 瑄 老 師 壹 摘 要 本 研 究 以 人 類 的 子 宮 頸 癌 細 胞 (HeLa cell) 為 細 胞 骨 架 的 觀 察 對 象, 經 過 培 養 與 繼 代, 利 用 免 疫
Microsoft Word - 052008-743-090065.doc
中 国 科 学 C 辑 : 生 命 科 学 2009 年 第 39 卷 第 6 期 : 534 ~ 541 www.scichina.com life.scichina.com SCIENCE IN CHINA PRESS 人 - 禽 双 价 流 感 新 型 DNA 疫 苗 构 建 及 免 疫 保 护 实 验 研 究 南 文 龙 12, 金 宁 一 2*, 鲁 会 军 2, 赵 翠 青 12, 田
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
10384 200326107 UDC Cloning and Expression of Genes from Venom Gland of Bungarus multicinctus 2006 7 1 2 V 1 1 2 C 4 α- P22-A31 0 11 1 11 2 11 13 α- 13 2 α- 14 3 α- 15 4 α- 15 17 α cdna 21 1 21 2 23 24
932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio
2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu
6 : 35 Key words: Oreochromis niloticus; Streptococcus agalactiae; genomic expression library ( Streptococcus agalactiae) B ( group B streptococcus, G
6 2 0 5 2 South China Fisheries Science Vol., No. 6 Dec., 205 doi: 0. 3969/ j. issn. 2095-0780. 205. 06. 005,,, 2,,,, (.,, 50380; 2., 50220) : ( Oreochromis niloticus) ( Streptococcus agalactiae), Hod-
EBV-EA IgG IFA Test 操作手冊
型 號 :708301 限 由 醫 師 或 醫 檢 師 使 用 效 能 因 諾 瓦 酒 精 固 定 抗 嗜 中 性 白 血 球 細 胞 質 抗 體 檢 測 系 統 NOVA Lite ANCA (Ethanol) Kit with DAPI 使 用 前 請 務 必 詳 閱 原 廠 之 使 用 說 明 書 並 遵 照 指 示 使 用 體 外 診 斷 用 許 可 證 字 號 : 衛 部 醫 器 輸 字
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
摘要
中 華 民 國 第 五 十 一 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 物 科 組 別 : 高 中 組 作 品 名 稱 : 不 給 糖 就 搗 蛋 - 蛀 牙 細 菌 的 抑 制 關 鍵 詞 :Bacillus horikoshii 轉 糖 鏈 球 菌 蛀 牙 編 號 : 摘 要 : 本 實 驗 的 目 的 是 希 望 能 找 出 人 類 牙 齒 上 的 主 要 菌
一步一步教你使用NCBI
查 找 DNA mrna cdna Protein promoter 引 物 设 计 BLAST 序 列 比 对 等 作 者 :urbest 2007-8-1 苏 州 大 学 生 命 科 学 学 院 最 近 看 到 很 多 战 友 在 论 坛 上 询 问 如 何 查 询 基 因 序 列 如 何 进 行 引 物 设 计 如 何 使 用 BLAST 进 行 序 列 比 对, 这 些 问 题 在 NCBI
11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P
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37 11 215 11 中国预防兽医学报 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Vol. 37 No.11 Nov. 215 doi: 1.3969/j.issn.8-589.215.11.12 张瑛杰 1, 尹杰超 1, 李天鹤 2, 周兵 3, 徐鹏飞 1, 荆燕 1,4, 任桂萍 1*, 李德山 1* (1. 153 2. 49
,,, A ECs,, A ECs,,, A ECs,,,, ( 8) 213 3,,,,,, A ECs,, ( 9) 7,,,,,, ( 10),,, 28,,A ECs,,A ECs, A ECs 7 ;, ( ) ( 11) 3 BL M IPF, IPF [2
512 Chinese Medical Journal of Metallurgical Industry,October 2005,Vol122 No1 5 3 1 1 1 2 1 ( 300020) 2 : : (5 mg/ kg), 3 7 28 : 3, ; 7 :,, ; 28 :,,, :, R 563 A 1005-5495 (2005) 05-0512 - 03 Ultrastructural
1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology NatureScienceLa
SARS SARS SARS SARS NatureScience 1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology 32 8 13.066 NatureScienceLancetPNAS SCI 905
基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting
Ellen G. White Writings
{CG 17.1} {CG 17.2} {CG 17.3} {CG 18.1} {CG 18.2}? {CG 18.3} {CG 18.4} {CG 18.5} Page 1 of 198 {CG 19.1} {CG 19.2} {CG 19.3} {CG 19.4} {CG 21.1} {CG 21.2} {CG 21.3} {CG 21.4} {CG 21.5} {CG 22.1} Page 2
104 18, 1 1.1, (500±20) g, 1, ; BALB/c 1.2 Varian Cary 50 ; Bio-Rad model 550, BioRad, BioRad IgG(Goat-IgG) Sigma ; CNBr Sepharose 4B Amersham-Pharmac
2011 1, 18(1): 103 109 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2011.00103 许娜娜 1,2, 钱冬 2 1, 赵海泉 1., 230001; 2., 313001 摘要 : (Lateolabrax japonicus) (Ig), -IgG(Goat-IgG), A Goat-IgG
GE Healthcare 3 4 5 6 8 10 12 14 FDA ph 90% 70% DNA DNA Cytodex TM Baxter Biosciences 3 FDA EMEA cytodex 1 4400 cm 2 /g cytodex 1 25 g 17-0448-01 cytodex 1 100 g 17-0448-02 cytodex 1 500 g 17-0448-03 cytodex
54 69 84 55 70 85 56 71 86 57 72 87 58 73 88 59 74 89 60 75 90 61 76 91 62 77 92 63 78 93 64 79 94 65 80 95 66 81 96 67 82 97 68 83 98 99 101 98 100 1
3 12 19 26 13 20 27 14 21 28 15 22 29 16 23 30 17 24 31 18 25 32 34 36 32 34 36 33 35 37 33 35 37 38 42 46 39 43 47 40 44 48 41 45 49 50 51 53 50 52 53 51 52 4 54 69 84 55 70 85 56 71 86 57 72 87 58 73
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2007, 29 (1 ) : 74 78 Acta Botanica Yunnanica AOX) 1, 3, Moore A L 2, 3, 3 (1, 363005; 2 School of Biological Sciences, University of Sussex, BN1 9QG UK; 3, 361005 ) : ( Alternative Oxidase, AOX), Q, 4
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林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
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标题
第 33 卷 第 3 期 医 学 研 究 与 教 育 Vol.33 No.3 2016 年 6 月 Medical Research and Education Jun.,2016 本 文 引 用 : 张 建 红, 刘 盼 英, 李 远, 等. 真 性 红 细 胞 增 多 症 的 中 医 辨 证 用 药 规 律 与 转 化 医 学 研 究 [ J ]. 医 学 研 究 与 教 育, 2016, 33
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第 十 章 貓 免 疫 不 全 病 毒 感 染 症 許 哲 銘 1 汪 鴻 展 2 張 清 棟 3 1 國 立 台 灣 大 學 獸 醫 學 研 究 所 2 台 南 縣 家 畜 疾 病 防 治 所 3 國 立 屏 東 科 技 大 學 一 前 言 貓 免 疫 不 全 病 毒 (Feline immunodeficiency virus; FIV) 為 一 造 成 貓 免 疫 抑 制 之 傳 染 性 疾
4 : pcdna3.1(+) ;PLV-EF1A-EGFP(2A) 30s,41 30s,72 2min,35 ; Puro ; TG1; (Hu min 1% manembryonickidney293cels); (Ma- din-darbycaninekidneyce
33 4 2017 6 CHINESEJOURNALOF VIROLOGY Vol.33 No.4 June 2017 1# 2#,, 2, 2, 1 3* 1*,, (1., 511436; 2., 510230; 3., 510663) : HEK-293-HA RT-PCR HA, pcdna3.1(+ ), pcdna3.1(+ )-HA pcdna3.1(+)-ha PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro
5-25袁宏钧.indd
第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
Microsoft PowerPoint - 6 Immunogenicity of therapeutic proteins.pptx
Pharmaceutical Biotechnology Immunogenicity of therapeutic proteins By Yuqiong Xia 2014 Keywords Immunogenicity, allergy, allergic, immune tolerance, neutralization Impurity, glycosylation, glycosylated
L 8 0 g L ~0 700 g L % 6 00% 1 50% 1 3 NaCl 0 50% NH 4 2 SO % KH 2 PO % CaCO % 0 03% ~ 0 04% 2 24 h 0 02
38 5 Vol 38 No 5 2014 9 Journal of Jiangxi Normal UniversityNatural Science Sep 2014 1000-5862201405-0501-05 1 1* 2 2 1 3300222 330052 Streptomyces lincolnensis 13 8 6% 12 4% Q 93 A 0 1 2 Streptomyces
5 期 周 舒 扬 等 : 黑 龙 江 省 玉 米 弯 孢 菌 叶 斑 病 病 原 鉴 定 及 其 产 细 胞 壁 降 解 酶 和 漆 酶 活 性 分 析 127 菌 分 离 形 态 学 鉴 定 工 作 当 前 黑 龙 江 省 玉 米 主 栽 品 种 缺 乏 抗 病 品 种, 玉 米 弯 孢 菌 叶
玉 米 科 学 2010,18(5):126~130 Journal%of%Maize%Sciences 文 章 编 号 : 1005-0906(2010)05-0126-05 黑 龙 江 省 玉 米 弯 孢 菌 叶 斑 病 病 原 鉴 定 及 其 产 细 胞 壁 降 解 酶 和 漆 酶 活 性 分 析 周 舒 扬 1, 杨 洪 一 1, 赵 敏 1, 梅 丽 艳 2 (1. 东 北 林 业 大 学
Microsoft Word tb 陆春雪
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn 研 究 报 告 FEB 20, 2012, 39(2): 226 236 2012 by Institute of Microbiology, CAS 沙 眼 衣 原 体 分 泌 性 蛋 白 Pgp3 滴 鼻 免 疫 增 强 小 鼠 对 衣 原 体 生 殖 道 感 染 的 保 护 作 用 陆 春 雪 1
Microsoft Word - 8 期中文目次.doc
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学
标题
医 药 导 报 2016 年 8 月 第 35 卷 第 8 期 803 特 约 稿 鱼 腥 草 制 剂 上 市 后 安 全 性 再 评 价 吴 健 鸿 1 ꎬ 杨 晓 燕 2 ꎬ 柳 强 妮 2 ꎬ 尹 平 2 2 ꎬ 曾 繁 典 (1. 武 汉 药 品 医 疗 器 械 检 验 所 ꎬ 武 汉 430075ꎻ2. 华 中 科 技 大 学 同 济 医 学 院 ꎬ 武 汉 430030) 摘 要 目 的
1421 历 360 份, 局 部 使 用 抗 菌 药 物 不 进 行 统 计 1.2 方 法 统 计 分 析 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况 统 计 内 容 包 括 使 用 科 室 年 龄 体 质 量 住 院 时 间 诊 断 抗 菌 药 物 品 种 抗 菌 药 物
1420 天 津 市 中 心 妇 产 科 医 院 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 使 用 情 况 分 析 * 汪 涛, 邢 丽 天 津 市 中 心 妇 产 科 医 院 药 剂 科, 天 津 300100 摘 要 : 目 的 调 查 天 津 市 中 心 妇 产 科 医 院 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况, 并 分 析 评 估 其 使 用 合 理 性 方
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( CIP) /,. :, 2003. 10 ISBN 7-5624- 2977-4............ :. G479 CIP ( 2003) 087438 : : : : * : : 174 ( A ) : 400030 : ( 023) 65102378 65105781 : ( 023) 65103686 65105565 : http: / /www. cqup. com. cn :
PCA+LDA 14 1 PEN mL mL mL 16 DJX-AB DJ X AB DJ2 -YS % PEN
21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
( ) 307 A B B B B ABO LeA LeX LeB LeY 1.3 ABO ABO O Rh O α -1, 3 [6] [ 4] ABO ABO (marginal zone) T [7] 1.2 1.4 [8] ( ) [ 5] 1.5 -
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306 : 1000-1336(2009)03-0306-09 ( 200031) Q53 ABO(H) [3] Landsteiner ABO O A B AB 4 N- - L- H O N- N- A B [1] (Glycoimmunology) A B 4 [2] / 1.1-2009-03-09 ( 1 9 4 0 - ) ( ) E - m a i l : keyiwang0717@gmail.com
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MMPs B00017140 2003 6 i 1 2 3 ED 3 ED 3 ED 5 5 6 9 10 12 12 13 13 14 14 15 16 16 16 ED 17 ED 17 CIEF-5 21 23 27 MMPs 28 29 31 31 31 31 34 MMPs 34 MMP 34 MMP 35 MMP 36 MMP 38 MMP 39 43 43 44 44 46 ii 50
600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合
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医 学 科 研 方 法 主 讲 苏 秀 兰 细 胞 生 物 学 教 授 第 一 讲 绪 论 一 概 念 : 在 医 学 科 学 研 究 活 动 中, 运 用 科 学 的 实 践 和 理 论 思 维 的 技 巧, 充 分 发 挥 自 己 的 智 慧, 去 寻 找 观 念 世 界 与 现 实 世 界 之 间 的 联 系 或 规 律, 从 而 发 现 新 现 象, 提 出 新 理 论 的 手 段 二 医
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第 14 卷 第 3 期 中 南 大 学 学 报 ( 社 会 科 学 版 ) Vol.14 No3 2008 年 6 月 J. CENT. SOUTH UNIV. (SOCIAL SCIENCE) Jun 2008 肺 病 隐 喻 与 性 别 身 份 建 构 中 国 现 代 文 学 中 的 肺 病 意 象 分 析 王 冬 梅 ( 枣 庄 学 院 中 文 系, 山 东 枣 庄,277160) 摘 要
1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS 8 NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology NatureScienceLance
SARS SARS SARS SARS NatureScience 2018 1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS 8 NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology 13.066 NatureScienceLancetPNAS SCI 940
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第 30 卷 第 2 期 2015 年 4 月 天 津 科 技 大 学 学 报 Journal of Tianjin University of Science & Technology Vol. 30 No. 2 Apr. 2015 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510.20140064 IrrE 重 组 大 肠 杆 菌 的 构 建 和 性 能 分 析 骆 健 美, 郑 媛
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土 地 的 保 障 功 能 与 中 国 农 村 养 老 保 障 体 系 的 建 设 钟 水 映 ( 武 汉 大 学 经 济 发 展 研 究 中 心, 湖 北 武 汉 430072) 摘 要 : 农 民 被 赋 予 土 地 使 用 权, 并 不 必 然 就 应 该 被 排 斥 在 社 会 养 老 保 障 的 体 系 之 外 土 地 并 不 能 够 承 担 也 不 该 承 担 农 村 养 老 保 障 的
第二部分
中 国 农 通 报 0,7(04):478-48 Chinese Agricultural Science Bulletin 基 于 网 络 平 台 的 生 物 统 计 改 革 及 实 践 效 果 分 析 袁 文, 彭 惠 茹, 张 洪 亮, 刘 文 欣, 华 金 平, 苏 胜 宝, 孔 繁 玲 ( 中 国 农 大 科 技 术 发 展 研 究 院, 北 京 0093; 中 国 农 大 农 与 生 物
Case Study WR Patient: WR, 93 y/o female No blood bank history Forward Typing Rh Typing Reverse Typing Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D A 1 Cells B Cells
Case Study WR Patient: WR, 93 y/o female No blood bank history Forward Typing Rh Typing Reverse Typing Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D A 1 Cells B Cells 4+ 0 4+ 4+ 0 0 What is the appropriate next step when
沙眼衣原体与前列腺炎的关系
1. Mårdh Colleen Nilsson Mårdh PA Colleen S 1 nonacute prostatitis 79 healthy volunteers 20 (Complement-fixing antibodies to Chlamydia) 33% 5% Mårdh PA Colleen S 2 Mårdh Mårdh Mardh PA, Colleen S. Search
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疾 病 名 柯 萨 奇 病 毒 感 染 英 文 名 coxsackie virus infections 缩 写 别 名 ICD 号 A08.3 概 述 柯 萨 奇 病 毒 感 染 是 由 柯 萨 奇 病 毒 引 起 的 病 毒 性 感 染 性 疾 病 临 床 表 现 复 杂 多 样, 有 无 菌 性 脑 膜 炎 脑 炎 心 肌 炎 心 包 炎 流 行 性 胸 肌 痛 疱 疹 性 咽 峡 炎 等,
.. 中 医 临 证 杂 志 0 年 月 第 0 卷 第 期 Clinical Journal of Traditional Chinese Medicine,September 0,Vol.0,No. 往 也 存 在 思 虑 过 度 的 情 况, 蔡 淦 教 授 在 调 理 中, 引 脾 胃 论
中 医 临 证 杂 志 0 年 月 第 0 卷 第 期 Clinical Journal of Traditional Chinese Medicine,September 0,Vol.0,No... 蔡 淦 教 授 从 脾 胃 论 治 内 伤 杂 病 的 经 验 名 老 中 医 经 验 论 坛 ( 脾 胃 病 科 ) 张 正 利 摘 要 本 文 从 调 理 脾 肺 调 理 心 脾 调 和 肝 脾
續論
國 立 臺 北 教 育 大 學 學 報, 第 19 卷 第 1 期 (95 年 3 月 )23~50 王 士 禎 的 山 水 詩 ( 下 ): 神 韻 與 山 水 23 國 立 臺 北 教 育 大 學 王 士 禎 的 山 水 詩 ( 下 ): 神 韻 與 山 水 * 黃 雅 歆 摘 要 引 領 康 熙 詩 壇 的 王 士 禎, 匯 聚 有 清 以 來 詩 人 對 詩 歌 創 作 的 主 張, 加 以
( CIP) /. :, 2004 ISBN 7-5331 - 3569-5......... :. R277.57 CIP (2003) 109359 : : 16 :250002 : ( 0531 ) 2065109 :www. lkj. com. cn : jn- publi c
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综合报道
55 doi:10.3969j.issn.1000-3606.2014.01.01 论 著 不 同 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 赵 玉 祥 岳 虹 霓 杨 占 华 江 苏 省 淮 安 市 保 健 院 新 生 儿 科 ( 江 苏 淮 安 223002) 摘 要 : 目 的 探 讨 妊 娠 期 高 血 压 疾 病 胎 膜 早 破 等 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 方 法 回 顾 性
Method
PfNPC 5% O 10% AB 4, RPMI 5% CO 2 37 5 100% 30 sec 10% Giemsa 15 mins 100x oil-immersion lens parasitemia parasitemia 10 15% Parasitemia multiple invasion 4 Panel A B C parasitemia parasitemia 2% *Parasitemia
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
标题
第 14 卷第 6 期 2013 年 12 月 南华大学学报( 社会科学版) Journal of University of South China( Social Science Edition) Vol. 14 No. 6 Dec. 2013 1961 年中央常委农村调查与人民公社体制的调整 王摇 涛 ( 中共中央党校 党史部 北京 100091) [摘摇 要] 摇 三年 大跃进冶 运动给中国经济造成了严重损失,其中农村是重灾区
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
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2006 2 No. 2,2006 122 JOURNAL OF HISTORIOGRAPHY Serial No. 122 (, 100875 ;, 100006) [ ],, [ ] [ ] K092 [ ]A []100225332 (2006) 0220001211, :,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, [] 2005212220 1924 ;,, ( :,,1924 ),,,,,,,,,
Protein Labeling and Detection
ECL plex Product Specialist 1/ Western Blot 2/ Western Blotting- PI 3/ Western Blotting 1. 2 1 2. 3. 4. Y 3 4 5. 4/ 1. SDS- (SDS-PAGE) SDS ( β- ) --SDS 5/ SDS-PAGE - - - (Tris-HCL ph 6.8) glycine/chloride
陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等
生物技术通报 研究报告 IOTECHNOLOGY ULLETIN 05, (0):6- 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的 检测 陆睿 宋绍征 祁正强 葛欣 邵宾 成勇 江苏省转基因动物制药工程研究中心扬州 5009 摘 要 人组织纤溶酶原激活剂 ht-pa 是临床血栓疾病治疗的主要生物药品应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有 报道但重组人纤溶酶原激活剂 rhpa 在转基因动物中表达尚未见报道
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R2 10315 20042008 2004 CLINICAL RESEARCH OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE THEORY & TREATMENT TO RELIEVE PAIN OF BREAST CANCER PATIENTS 2007 5 -----------------------------------------------------------------------------------------------
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
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High Efficiency Particulate Air Filter HEPA CO 2 74 30 min 2 min CO 2 37 5 CO 2 CO 2 90 14 h) 3000 CO 2 4-20 -80-196 1000 2500 rpm Zeiss 70 1. 5 2. 3. 4. 15 20 1 2 3 4 2 NaOH 5 6 5 30 min
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* 0 0 50 0 0 1 196 Rachel Carson 0 50 0 0 011 1986 1994 009 7 0 4007 zlhhorse@ 16. com * 1949 010 11YJC7907 1 181 017 0 0 1950 195 1 195 1 1955 1 1956 1 1956 7 1 1957 10 1958 11 1960 5 196 0 1 18 7 199
依据为各成员国提供卫生政策方面指导意见这一职责，世界卫生组织（WHO）就预防具有全球公共卫生影响的疾病的疫苗及联合疫苗问题，发布一系列定期更新的立场文件
伤 寒 疫 苗 : WHO 立 场 文 件 依 据 为 各 成 员 国 提 供 卫 生 政 策 方 面 指 导 意 见 这 一 职 责, 世 界 卫 生 组 织 (WHO) 就 预 防 具 有 全 球 公 共 卫 生 影 响 的 疾 病 的 疫 苗 及 联 合 疫 苗 问 题, 发 布 一 系 列 定 期 更 新 的 立 场 文 件 这 些 文 件 着 重 关 注 疫 苗 在 大 规 模 免 疫 规
CD + 4 CD + 25 T The role of CD + 4 CD + 25 Regulatory T cells in the pathogenesis of vitiligo CD + 4 CD + 25 T The role of CD + 4 CD + 25 Regulatory T cells in the pathogenesis of vitiligo 7000064 2008
M2 (M2e)23, M2e CRM197 CRM197-N389 CRM197-N190 N C SDS-PAGE A,M2e, (AUC),, M2e-(CRM197-N190)(CRM197- [8],M2e,, N190)-M2e, M2e,, (HBc) M2e (O19
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33 4 2017 6 CHINESEJOURNALOF VIROLOGY Vol.33 No.4 June 2017 M2e CRM197 1 1 2 1, 2 1,2 1,2 1,2 * 1,2, (1., 361102; 2., 361102) :, M2 (M2e),, (CRM197) CRM197,M2eCRM197(aa1~535) CRM197-N190 (aa1~190) CRM197-N389(aa1~389)C
EL ECTR IC MACH IN ES AND CON TROL Vol113 No11 Jan. 2009,, (, ) :, X 2Y,,,,,,, P ID P ID P ID,, : ; ; ; P ID : TM33 : A : X
13 1 2009 1 EL ECTR IC MACH IN ES AND CON TROL Vol113 No11 Jan. 2009,, (, 518060) :, X 2Y,,,,,,, P ID P ID P ID,, : ; ; ; P ID : TM33 : A : 1007-449X (2009) 01-0022- 06 Analysis and control of a novel
QUANTA LiteTM M2 EP（MIT3） 704540
QUANTA Lite M2 EP (MIT3) ELISA 704540 体 外 诊 断 用 试 剂 CLIA 复 杂 性 : 高 用 途 QUANTA Lite M2 EP(MIT3)ELISA 是 一 种 半 定 量 检 测 人 血 清 中 线 粒 体 抗 体 的 酶 联 免 疫 (ELISA) 检 测 试 剂 盒 线 粒 体 抗 体 的 存 在, 结 合 临 床 结 果 和 其 它 实 验
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
材料與方法
µ µ µ κ 17 18 19 20 µ µ µ 21 H 2 DCF-DA H 2 O 2 H 2 DCF-DA 酶 esterase H 2 DCF-DA deacetylation H 2 DCF H 2 DCF H 2 DCF DCF H 2 DCF DCF Bae et al., 1997; Vanden et al., 1997; Atlante et al., 1997; Wang
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
标题
第 33 卷 摇 第 9 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 014 年 9 月 情 摇 报 摇 杂 摇 志 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 JOURNAL OF INTELLIGENCE Vol. 33 摇 No. 9 Sep. 摇 014 基 于 专 利 的 大 数 据 技 术 发 展 情 报 * 分 析 及 战 略 研 究 1 1 李 鹏 飞 摇 卢 摇
2009 ( 29 ) 9, ( ) , 183 [9,39,44,46 ],, 57, 27 ( %) ; 91, 51 ( %),,,, , 2008, [24 ],,, 20 80, 1985,,1986,,, 1990,,,,,,
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:10002677X(2009) 0920003215 2009 ( 29 ) 9 CHINA SPOR T SCIENCE Vol. 29,No. 9,3217,2009. 300 Sport Science Research :A Methodological Exploration Survey and Analysis Based on 300 Doctoral Dissertations
第 猿 猿 卷 第 愿 期 20 员 猿 年 愿 月 张 媛 媛 等 院 肥 胖 与 雌 激 素 的 相 互 关 系 及 其 对 子 宫 的 作 用 研 究 原 员 远 员 原 素 等 多 种 原 因 有 关 袁 对 于 女 性 而 言 绝 经 后 雌 激 素 水 平 下 降 是 更 年 期 肥 胖
原 员 远 原 南 京 医 科 大 学 学 报 渊 自 然 科 学 版 冤 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING 渊 Natural Science 冤 第 猿 猿 卷 第 愿 期 20 员 猿 年 愿 月 肥 胖 与 雌 激 素 的 相 互 关 系 及 其 对 子 宫 的 作 用 研 究 张 媛 媛 袁 张 日 华 袁 薛 一 袁 刘 梦 兰 袁 黄 琼 袁
240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通
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2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
),,,, : 010-62782989 13901104297 13801310933,, (CIP) /. :,2004 ISBN 7-302-08925-6... - - -. G643-44 CIP (2004 ) 061188 : : / : 1
),,,, : 010-62782989 13901104297 13801310933,, (CIP) /. :,2004 ISBN 7-302-08925-6... - - -. G643-44 CIP (2004 ) 061188 : : http:/ / www.tup.com.cn : 100084 : 010-62770175 : 010-62776969 : : : : : : 185
标题
中国保健食品配方及配方审评现状及分析 中国保健食品配方及 配方审评现状及分析 赵洪静 摘 要: 目标: 介绍中国保健食品配方现状及配方审评原则 要点, 以 期为申请人 保健食品生产 研发机构及相关人员提供一些帮助和参考 方 法: 从保健食品配方设计的理论依据 原料配伍情况着手, 介绍保健食品配 方现状; 综述相关法律法规, 分析总结了配方审评原则 依据及要点 结 论: 中医养生保健理论是指导中国保健食品研发最具影响力的基础理论
Key words: Qi-diffciency syndrome, Cyclophosphamide, Codonopsis pilosula, Shenlinbaizhu Powder, Biochemical study CTX CTX RT-PCR CTX
2002207202 CTX 1 2 CTX 10mg/ml 0.2ml/ /d,2d 1 2 RT-PCR 1 2 1 2 P>0.05) RT-PCR CTX CTX A study on symptom model induced by Cyclophosphamide in mice Effects of Codonopsis pilosula (Dangshen) and Shenlinbaizhu
: A Hc SFV 125 toxin serotype A. Keywords: Semliki Forest virus, RNA replicon, botulinum neurotoxin serotype A, C-terminal fragment of heavy-chain rec
生物工程学报 Chin J Biotech 2008, January 25; 24(1): 124-129 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2008 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved. 研究简报
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1. 1. 2 500 730 2 5 1 1 1. 1. 3 739 127 116 712 265 3 143 50 2 2 1 13 2 14 3 15 4 16 5 17 6 18 7 19 8 20 9
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1006-446X 2011 12-0001-28 1 2 2 1. 201800 2. 510070 R 244. 9 A 1 1. 1 3 2000 1. 1. 1 1973 3 52 299 31 136 100 32 1 13 2011-10 -20 1 2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU