材料與方法
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- 卜 龙
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1 µ µ µ κ 17
2 18
3 19
4 20
5 µ µ µ 21
6 H 2 DCF-DA H 2 O 2 H 2 DCF-DA 酶 esterase H 2 DCF-DA deacetylation H 2 DCF H 2 DCF H 2 DCF DCF H 2 DCF DCF Bae et al., 1997; Vanden et al., 1997; Atlante et al., 1997; Wang et al., 2003 relative fluorescent unit, rfu 2,7-dichloridihydrofluoresceinH 2 DCF-DA : Sigma/molecular probe l mm H 2 DCF-DA 24 cytofluormetry excitation 485 nm emission
7 酶 酶 23
8 酶 酶 酶 酶 24
9 酶 酶 酶 25
10 µ µ 26
11 κα κα κα µ µ µ µ 27
12 2. Coomassie Brilliant Blue G-250 DDI 14 µ µ µ 28
13 µ µ 29
14 µ µ µ 30
15 31
16 Wang et al., 2000 R&D ELISA kitduo Set multiple antibody sandwich principle, ELISA 96 IL-6, MIP IL-6, MIP 酶 IL-6, MIP peroxidase-conjugated polyconal anti-il-6, anti-mip rat IL-6, MIP 酶 450 nm IL-6, MIP IL-6, MIP 32
17 1. phosphate bufferpbs 1X- ph wash buffer % Tween 20 PBS 3. Block buffer- 1 % BSA5 % sucrose PBS 4. Reagent diluent- 1 % BSA PBS 5. Substrate solution- TetramethylbenzidineTMB 6. Stop solution- 2 N H 2 SO 4 7. ELISA kit kit Reagent diluent 1. kit PBS 100l overnight 2. wash buffer 300l 3 3. block buffer100l l l HRP Reagent diluent 1 33
18 l Streptavidin-HRP1: l substrate solution TMB l stop solution2 N 2 HSO 4 30 ELISA reader 450 nm ELISA reader 34
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