陈 琼 姜 等 :CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 人 癌 胚 抗 原 启 动 子 效 率 的 作 用 研 究 77 品 收 藏 中 心 (American Type Culture Collection, ATCC), 保 存 于 本 实 验 室 酶 抗 体 及 其 它 试 剂
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- 阿 毛
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1 中 国 细 学 报 Chinese Joumal of Cell Biology 010, 3(5): CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 人 癌 胚 抗 原 启 动 子 效 率 的 作 用 研 究 陈 琼 姜 1 贾 振 宇 1 * 陈 萍 魏 群 张 敏 l 陈 钧 强 l 张 幸 l 叶 景 佳 3 曹 江 摘 要 (' 浙 江 省 医 学 科 学 院, 杭 州 ; 浙 江 大 学 邵 逸 夫 临 床 医 学 研 究 所, 杭 州 ; 3 浙 江 大 学 医 学 院 附 属 第 二 医 院 临 床 实 验 研 究 中 心, 杭 州 ) 为 了 探 讨 人 巨 细 胞 病 毒 (CMV) 早 期 转 录 增 强 子 用 于 癌 胚 抗 原 (CEA) 阳 性 肿 瘤 的 靶 向 基 因 治 疗 的 意 义, 我 们 参 考 有 关 文 献 利 用 PCR 法 分 别 克 隆 了 369 bp 的 人 CEA 启 动 子 和 531 bp 的 CMV 早 期 转 录 增 强 子, 构 建 了 相 应 的 pgl4.10 荧 光 素 酶 报 告 基 因 载 体, 与 内 参 照 pgl4.74 质 粒 共 转 染 CEA 阳 性 的 人 肠 癌 细 胞 LoVo HT-9 SW60 肺 癌 细 胞 A549 乳 腺 癌 细 胞 MCF7 和 CEA 阴 性 的 肠 癌 细 胞 SW480 宫 颈 癌 细 胞 HeLa 人 肺 成 纤 维 细 胞 LL47, 利 用 双 荧 光 素 酶 检 测 系 统 检 测 分 析 了 这 些 细 胞 中 CEA 重 组 启 动 子 的 效 率 结 果 表 明, CMV 增 强 子 能 够 明 显 增 强 CEA 启 动 子 在 CEA 阳 性 细 胞 中 的 效 率 ( 提 高 至 倍 ), 但 是 也 能 提 高 CEA 启 动 子 在 CEA 阴 性 细 胞 中 的 中 国 细 学 报 效 率 ( 提 高 4.01 至 倍 ) 因 此 上 述 CMV 增 强 子 虽 然 可 以 大 大 提 高 CEA 启 动 子 的 效 率, 但 是 对 特 异 性 有 影 响, 在 将 其 用 于 CEA 阳 性 肿 瘤 基 因 治 疗 时 还 需 采 用 其 它 保 证 特 异 性 的 手 段 关 键 词 瘤 基 因 治 疗 细 胞 特 异 性 启 动 子 ; 癌 胚 抗 原 (CEA) 启 动 子 ; 巨 细 胞 病 毒 (CMV ) 早 期 转 录 增 强 子 ; 肿 恶 性 肿 瘤 是 危 害 人 类 健 康 的 一 大 凶 手, 继 手 术 放 射 治 疗 和 化 学 治 疗 之 后, 包 括 基 因 治 疗 免 疫 治 疗 等 多 种 治 疗 方 式 在 内 的 肿 瘤 生 物 治 疗 正 在 成 为 日 益 发 挥 强 大 作 用 的 第 四 种 治 疗 模 式, 其 中 靶 向 性 基 因 治 疗 是 目 前 一 个 研 究 热 点 应 用 肿 瘤 细 胞 特 异 性 启 动 子 调 控 目 的 基 因 表 达 是 靶 向 性 基 因 治 疗 的 关 健 以 癌 胚 抗 原 (carcinoembryonic antigen, CEA) 启 动 子 为 目 的 基 因 的 表 达 调 控 序 列 对 CEA 阳 性 肿 瘤 细 胞 有 一 定 的 靶 向 性 [ 叫, 但 总 体 而 言 CEA 启 动 子 的 转 录 启 动 效 率 较 低, 且 因 不 同 的 肿 瘤 细 胞 表 达 CEA 的 水 平 高 低 而 异, 因 此 在 一 定 程 度 上 限 制 了 它 的 应 用 如 能 提 高 CEA 启 动 子 的 靶 向 启 动 效 率 将 大 大 改 善 其 目 前 应 用 状 况, 对 CEA 阳 性 肿 瘤 的 靶 向 性 基 因 治 疗 具 有 重 要 意 义 近 来 有 文 献 报 道, 巨 细 胞 病 毒 (Cytomegalovirus, CMV ) 的 早 期 转 录 增 强 子 可 用 于 构 建 重 组 启 动 子, 对 一 些 组 织 特 异 性 启 动 子 而 言 能 极 大 地 提 高 其 转 录 起 始 效 率 且 保 持 其 特 异 性 [6] 对 于 CEA 启 动 子 而 言, 虽 然 有 个 别 研 究 报 道 [7] 表 明 CMV 早 期 转 录 增 强 子 可 能 增 强 CEA 启 动 子 的 特 异 性 转 录 作 用, 但 是 我 们 在 研 究 工 作 中 发 现 这 一 增 强 作 用 似 乎 并 不 具 有 特 异 性 CMV 早 期 转 录 增 强 子 究 竟 能 否 特 异 地 提 高 CEA 启 动 子 的 效 率, 将 决 定 其 能 否 应 用 于 相 应 的 靶 向 性 基 因 治 疗 为 了 明 确 这 一 关 键 问 题, 本 研 究 克 隆 了 带 有 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 CEA 启 动 子, 利 用 目 前 广 泛 应 用 于 启 动 子 转 录 活 性 研 究 的 高 灵 敏 度 生 物 荧 光 素 酶 报 告 系 统 [83], 对 该 增 强 子 对 CEA 启 动 子 在 多 株 不 同 的 CEA 阳 性 的 肿 瘤 细 胞 与 CEA 阴 性 的 细 胞 中 的 转 录 效 率 进 行 了 定 量 分 析, 为 CMV 早 期 转 录 增 强 子 究 竟 能 否 用 于 CEA 启 动 子 调 控 的 肿 瘤 靶 向 性 基 因 治 疗 提 供 参 考 依 据 1 材 料 与 方 法 1. 1 材 料 菌 林 质 粒 和 细 胞 系 大 肠 杆 菌 菌 株 DH-5α 由 本 实 验 室 保 存 PCR 产 物 克 隆 载 体 pmd19 -T 购 自 TaKaRa 公 司, 双 荧 光 素 酶 报 告 基 因 载 体 pgl4.10 [luc] pgl4.74[hrluc/tk] 及 双 重 荧 光 素 酶 活 性 检 测 试 剂 盒 Dual Luciferase Assay Ki t 购 自 Promega 公 司 人 肠 癌 细 胞 LoVo HT-9 SW60 SW480 肺 癌 细 胞 A549 乳 腺 癌 细 胞 MCF7 宫 颈 癌 细 胞 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 胎 La 和 人 肺 成 纤 维 细 胞 LL47 直 接 购 自 美 国 标 准 生 物 项 目 收 稿 日 期 接 受 日 期 浙 江 省 科 技 厅 (No. 008FI09) 和 浙 江 省 卫 生 厅 (No. 007 A086) 资 助 中 国 细 学 报 * 通 讯 作 者 Te l: ,
2 陈 琼 姜 等 :CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 人 癌 胚 抗 原 启 动 子 效 率 的 作 用 研 究 77 品 收 藏 中 心 (American Type Culture Collection, ATCC), 保 存 于 本 实 验 室 酶 抗 体 及 其 它 试 剂 各 种 限 制 性 内 切 酶 连 接 酶 和 碱 性 磷 酸 酶 等 工 具 酶 均 购 自 New England Biol ab 公 司, PCR 扩 增 试 剂 盒 购 自 TaKaRa 公 司, 质 粒 提 取 试 剂 盒 Qiagen Plasrnid Mini Ki t j 疑 胶 片 段 回 收 试 剂 盒 QIAquick Ge! Extraction Ki t 购 自 Qiagen 公 司, 转 染 试 剂 Lipo-fectarnine 000 DNA 分 子 量 标 准 1 Kb Plus DNA Ladder 购 自 In vitro gen 公 司, 盯 'MI 培 养 液 胎 牛 血 清 购 自 Inv itrog en 公 司, BCA 蛋 白 质 定 量 试 剂 盒 购 自 Thermo 公 司, 小 鼠 抗 CEA 单 克 隆 抗 体 购 自 Cell Signaling 公 司, 小 鼠 抗 ß-Ac tin 单 克 隆 抗 体 购 自 SANTACRUZ 公 司, 化 学 发 光 显 色 底 物 购 白 In v itrogen 公 司, 其 它 各 种 常 规 生 物 化 学 试 剂 购 自 Sigma 公 司 和 Amre s co 公 司 中 国 细 学 报 1. 方 法 CEA 启 动 子 与 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 克 隆 (l ) CEA 启 动 子 收 集 生 长 旺 盛 的 人 肠 癌 细 胞 SW60, 按 参 考 文 献 提 取 基 因 组 DNA 并 定 量 以 此 基 因 组 DNA 为 模 板, 采 用 PCR 法 扩 增 369 bp 的 CEA 启 动 子 片 段 (Genbank 登 录 号 NT_ 所 列 序 列 中 第 位, CEA 基 因 的 转 录 起 始 点 的 -66 至 +10 位 ), 上 游 引 物 为 : 5' -AGA TCT CCC GGG ACC CTG CTG GGT TTC-3 '( 斜 体 为 引 入 的 Bg lii 位 点 ), 下 游 引 物 为 5 ' -GGA TCC AGC TTG AGT TCC AGG AAC G-3 '( 斜 体 为 引 入 的 BamHI 位 点 ), 扩 增 产 物 大 小 为 381 bp, PCR 条 件 为 : 95 0 C 变 性 5 min, 然 后 进 行 30 个 循 环 的 扩 增 : 95 0 C, 30 s; 58 0 C, 30 s; 7 0 C, 30 s; 最 后 一 个 循 环 完 成 后 于 7 0 C 继 续 反 应 10 min 用 l. 5 % 的 琼 脂 糖 凝 胶 进 行 电 泳 分 离 PCR 产 物, 用 凝 胶 片 段 回 收 试 制 盒 按 照 说 明 书 操 作 回 收 381 bp 的 PCR 产 物, 将 4μl 回 收 的 PCR 产 物 与 1μlPCR 产 物 克 隆 载 体 pmd19-t 按 照 使 用 说 明 建 立 连 接 体 系, 于 16 0 C 连 接 过 夜, 转 化 感 受 态 大 肠 杆 菌 DH5α, 涂 布 于 含 有 X-G a l IPTG 和 氨 下 青 霉 素 的 琼 脂 糖 平 板, 提 取 转 化 子 质 粒 DNA, 用 Bg lii 和 BamHI 双 酶 切 检 测 有 无 381 bp 的 插 入 片 段, 将 有 大 小 正 确 的 插 入 片 段 的 质 粒 DNA 送 至 Invitrogen 公 司 测 序, 序 列 正 确 者 即 为 ρmd19-t /CEA () CMV 早 期 转 录 增 强 子 参 考 有 关 文 献, 以 pcdna3. 1(+) 质 粒 为 模 板, 采 用 PCR 法 扩 增 载 体 上 第 位 区 域 的 CMV 早 期 转 录 增 强 子, 5' 引 物 为 : 5' -AGA TCT GAC A TT GAT TAT TGA CTA GT-3'( 牵 斗 体 为 引 入 的 B g lii 位 点 ) 3' 引 物 为 : 5 ' -GGA TCC ATG GGG CGG AGT TGT TAC GA - 3 '( 斜 体 为 引 入 的 BamHI 位 点 ), PCR 条 件 为 : 95 0 C, 5 min; 95 0 C, 30 s; 45 0 C, 的 s; 7 0 C, 的 s, 循 环 3 0 次 ; 最 后 一 个 循 环 完 成 后 于 7 0 C 继 续 反 应 10 min 同 上 分 离 回 收 54 3 bp 的 PCR 产 物, 克 隆 至 pmd1 9 -T 载 体 并 测 序, 序 列 正 确 者 即 为 pmd 19-T /CMV enhancer 1.. 带 有 含 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 重 组 CEA 启 动 子 的 荧 光 素 酶 报 告 载 体 的 构 建 用 B g lii 和 BamHI 分 别 双 酶 切 pmd1 9 -T/CEA 和 pm D 19-T/ CMVenhan 臼 r, 分 离 回 收 两 种 插 入 片 段, 将 CEA 启 动 子 克 隆 至 荧 光 素 酶 报 告 载 体 pgl4. 10 的 Bg lii 位 点, 得 到 带 有 CEA 启 动 子 的 荧 光 素 酶 报 告 载 体 pgl4. 1 0/CEA, 再 将 CMVenh a n ce r 插 入 pgl4.10/cea 的 B g lii 位 点, 得 到 带 有 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 CEA 启 动 子 荧 光 素 酶 报 告 载 体 pgl4. 10/CMVenahncer-CEA 分 别 用 B g lii 和 Hi n diii 双 酶 切 鉴 定 的 片 段 正 确 插 入 以 质 粒 提 取 试 剂 盒 提 取 pgl4.10/cea 和 pg L4.10/ CMVen ahncer-cea, 溶 解 于 无 菌 水 中 ; 在 紫 外 分 光 光 度 计 上 测 定 60 nm 处 光 吸 收 值, 对 质 粒 DNA 定 量 l..3 细 胞 转 染 人 肠 癌 细 胞 LoVo Hf-9 SW60 S W480 肺 癌 细 胞 A54 9 乳 腺 癌 细 胞 MC F7 颈 癌 细 胞 HeLa 和 人 肺 成 纤 维 细 胞 LL47 培 养 于 含 10 % 胎 牛 血 清 的 RPMI 1640 培 养 液 中, 5% CO, 37 0 C 细 胞 密 度 达 80 %- 90 % 时 传 代 收 集 生 长 旺 盛 的 上 述 细 胞 并 悬 浮 于 培 养 液 中, 调 至 4xl0 5 细 胞 /rnl, 接 种 于 4 孔 板, x10 5 细 胞 /500μν 孔, 培 养 过 夜 按 照 转 染 试 剂 说 明 书, 分 别 取 1 阳 上 述 纯 化 的 带 CEA 启 动 子 的 荧 光 素 酶 报 告 载 体 pgl4.10/ CEA pgl4.10/cmvenahncer-cea 及 不 带 启 动 子 的 pgl4. 10, 与 10 吨 的 内 参 质 粒 pgl4.74 混 合, 用 无 血 清 培 养 液 稀 释 至 50μ1, 再 各 取 μl 转 染 试 剂 Lipofectarnine 000 用 无 血 清 培 养 液 稀 释 至 50μ1, 将 稀 释 的 DNA 和 转 染 试 剂 混 合 均 匀, 室 温 放 置 0 min 以 形 成 转 染 复 合 物 ; 逐 滴 加 入 4 孔 板 的 细 胞 中, 混 匀 后 置 培 养 箱 中 培 养 每 种 转 染 设 三 复 孔 l..4 荧 光 素 酶 活 性 检 测 技 双 重 荧 光 素 酶 活 性 检 测 试 剂 盒 说 明 书 进 行 双 重 荧 光 素 酶 活 性 检 测 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 宫 转 染 4 h 后 的 细 胞, 用 预 冷 的 PBS 洗 两 遍, 然 后 加 100μI Passive Lysis Buffer 于 冰 浴 中 裂 解 细 胞 1 5 min; 移 至 微 量 离 心 管, 在 榄 涡 振 荡 器 上 充 分 振 荡, 4 0 C 下 叩 m 离 心 15 s; 取 0μl 上 清 与 100μ1 LAR II ~ 昆 中 国 细 学 报 匀, 以 荧 光 分 光 光 度 计 检 测 10 s, 记 录 荧 火 虫 荧 光 素 酶
3 78 活 性 ; 加 入 100μ1 Stop&Glo 试 剂, 11 昆 匀 后 再 检 测 10 s, 记 录 水 母 荧 光 素 酶 活 性 以 荧 火 虫 荧 光 素 活 性 / 水 母 荧 光 素 活 性 作 为 相 对 荧 光 素 酶 活 性 单 位 ( Relative Luciferase Unit, RLU), 以 不 带 启 动 子 的 pgl4. 10 转 染 细 胞 的 相 对 荧 光 素 酶 活 性 为 背 景, 计 算 各 不 同 报 告 载 体 的 相 对 荧 光 素 酶 活 性 1..5 细 胞 系 中 CEA 蛋 白 水 平 检 测 LoV o HT-9 SW60 SW480 A549 MCF7 HeLa 和 LL47 培 养 于 含 10 % 胎 牛 血 清 的 RPMI 1640 培 养 液 中, 5 % CO, 37 0 C 细 胞 密 度 达 70 % -80 % 时 收 集 细 胞, 裂 解 于 裂 解 液 (50 mmol/l Tris-HCl, ph6 扎 % SDS) 中, 用 BCA 蛋 白 质 定 量 试 剂 盒 按 照 说 明 书 测 定 细 胞 裂 解 液 中 的 总 蛋 白 浓 度 ; 用 10 % 聚 丙 烯 酌 肢 凝 胶 电 泳 ( SDS-PAGE) 方 法 分 离 0μg 细 胞 总 蛋 白, 将 蛋 白 转 移 到 PVDF 膜 上 于 含 5 % 脱 脂 奶 粉 的 PBST (PBS, 0.1 % Tween-0 ) 封 闭 缓 冲 液 室 温 下 封 闭 1 h, 用 稀 释 于 含 3 % 脱 脂 奶 粉 的 PBST 中 小 鼠 抗 CEA 或 Actin 单 克 隆 抗 体 在 4 0 C 孵 育 过 夜, 洗 涤 后 再 与 稀 释 于 含 3 % 脱 脂 奶 粉 的 PBST 中 的 HRP- 羊 抗 鼠 IgG 于 室 温 下 反 应 1 h, 再 洗 涤, 加 化 学 发 光 显 色 底 物 反 应 液, 反 应 5 min 后 在 Alpha Innotech 化 学 发 光 凝 胶 成 像 仪 中 显 带.1 结 果 细 胞 系 CEA 启 动 子 和 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 克 隆 经 PCR 扩 增, 分 别 从 人 肠 癌 细 胞 基 因 组 DNA 和 pcdna3. 1(+) 克 隆 到 381 bp 的 人 CEA 启 动 子 和 543 bp 的 CMV 早 期 转 录 增 强 子, 分 别 见 图 l 和 图 将 CMV 早 期 转 录 增 强 子 插 入 pmdi9-t/cea 的 Bg lii 位 点, 利 用 BamHI 与 Bg lii 双 酶 切 可 以 获 得 带 有 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 重 组 CEA 启 动 子. 荧 光 素 酶 报 告 基 因 载 体 的 构 建 分 别 将 上 述 克 隆 的 CEA 启 动 子 和 CMV 早 期 转 录 并 CM Venhancer 543 bp ' 研 究 论 文 pmd 19-T vector CMV enhancer Fig. Cloning of CMV early transcriptional enhancer 1: PCR product; M: 1 Kb Plus DNA marker; : Bam l 丑 a nd BglII double digestion of pmdl 9-T/CMVenhancer 增 强 子 用 于 构 建 荧 光 素 酶 报 告 基 因 载 体, 分 别 得 到 带 有 CEA 启 动 子 和 带 有 CMV 增 强 子 的 CEA 启 动 子 荧 光 素 酶 报 告 基 因 载 体, 见 图 3.3 CMV 旱 期 转 录 增 强 子 对 CEA 启 动 子 效 率 的 { 乍 用 中 国 细 学 报 M 喝 一 _ pmdi 9-T 用 We stem blot 方 法 检 测 培 养 的 肠 癌 细 胞 LoVo HT-9 SW60 SW480 肺 癌 细 胞 A549 乳 腺 癌 细 胞 MCF7 宫 颈 癌 细 胞 HeLa 和 人 肺 成 纤 维 细 胞 LL47 中 CEA 的 蛋 白 水 平, 以 ß-Actin 蛋 白 水 平 作 为 各 细 胞 系 等 量 蛋 白 的 参 照 ( 图 的, 具 有 不 同 的 内 源 性 CEA 蛋 白 表 达 情 况 Fig_3 CEA M 结 果 显 示 这 些 细 胞 系 pg L vector CMVenhancer-CEA promoter Identification of luciferase reporter vectors containing CEA promoters 1: BglII and HindIIl double di gestion of pgl4.1o/cea; M: 1 Kb Plus DNA marker; : BglII and HindIII double di gestion of pgl CMVenhancer-CEA 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 CEA promoter 381 bp--+ 喝 - 一 CEA promoter Fig.l Cloning of CEA promoter 1: PCR product; M: 1 Kb Plus DNA marker; : BamID and BglII double digestion of pmdi9-t/cea Fig.4 E υ 也 肘 z E 寸 的 寸 泣 的 O N 咀 洼 ' 的 由 一 U Z h 寸 叶 一 一 CEA 18û--00 kda 4 一 - ß-Actin 43 kda 中 国 细 学 报 Carcinoembryonic antigen (CEA) protein level in different cell lines by immunoblotting
4 陈 琼 姜 等 : CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 人 癌 胚 抗 原 启 动 子 效 率 的 作 用 研 究 79 以 单 独 的 CEA 启 动 子 荧 光 素 酶 报 告 基 因 载 体 和 带 有 CMV 早 期 转 录 增 强 子 的 重 组 CEA 启 动 子 的 荧 光 头 酶 报 告 基 因 载 体 分 别 转 染 上 述 细 胞 后, 各 个 转 染 细 胞 的 相 对 荧 光 素 酶 活 性 见 图 5 及 表 1 上 述 结 果 显 示, CMV 转 录 增 强 子 能 显 著 提 高 CEA 的 启 动 活 性, 在 CEA 高 表 达 的 人 肠 癌 细 胞 LoV 中 提 高 了 7.46 倍 CEA 中 等 表 达 的 乳 腺 癌 细 胞 MCF7 中 提 高 了 倍 CEA 中 等 表 达 的 肠 癌 细 胞 HT-9 中 提 高 了 3.1 倍 提 高 了 倍 CEA 低 表 达 的 肺 癌 细 胞 A549 中 CEA 低 表 达 的 肠 癌 细 胞 SW60 提 高 了 倍, 但 是 在 Western blot 检 测 中 显 示 CEA 阴 性 的 肠 癌 细 胞 SW480 宫 颈 癌 细 胞 HeLa 与 人 肺 成 纤 维 细 胞 LL47 中 也 分 别 提 高 了 和 4.01 倍 这 说 明 参 考 有 关 文 献 克 隆 的 531 bp 的 CMV 转 录 增 强 子 对 369 bp 的 CEA 转 录 活 性 的 增 强 作 用 与 细 胞 中 CEA 的 表 达 水 平 没 有 相 关 性, 这 一 增 强 作 用 弱 化 了 CEA 启 动 子 的 特 异 性 5d 7400o 3500 E 3000 " 争 出 团 回 g 1500 ~ 1000 EH 由 ω d 500 Fig.5 口 PGL CEA pg L4. 10/CMVenhancer-CEA Celllines Effect of C 岛 1V early t r anscrip tional enha ncer on transcription activity of two recombinant CEA promoters in differen t cell lines The column represents mean relative luciferase units (RLU) from three replicates and the bar represents the s.d Celllines LoVo Table 1 3 讨 论 靶 向 性 是 肿 瘤 基 因 治 疗 一 个 非 常 重 要 的 方 面, 即 在 特 异 性 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 同 时 对 正 常 细 胞 没 有 伤 害 目 前 基 因 治 疗 靶 向 性 研 究 包 括 使 目 的 基 因 靶 向 性 地 在 肿 瘤 细 胞 中 表 达 CEA (carcino-embryonic antigen, CEA) 是 一 种 胚 胎 性 抗 原, 是 人 类 胚 胎 发 育 阶 段 细 胞 合 成 的 正 常 成 分, 在 胚 胎 发 育 后 期 合 成 逐 渐 减 少, 出 生 后 逐 渐 消 失, 或 仅 存 留 极 微 量 中 国 细 学 报 当 正 常 细 胞 转 化 为 肿 瘤 细 胞 时, 这 类 抗 原 重 新 合 成 CEA 在 包 括 肠 癌 胃 癌 肺 癌 乳 癌 等 常 见 肿 瘤 的 多 种 肿 瘤 中 均 有 表 达, 其 启 动 子 亦 被 用 于 靶 向 性 基 因 治 疗 研 究 [ 叫 但 由 于 其 启 动 效 率 低, 限 制 了 其 调 控 的 外 源 基 因 的 表 达 效 率, 从 而 影 响 基 因 治 疗 的 效 果 为 了 解 决 这 一 问 题, Nyati 等 [ 钉 在 CEA 基 因 转 录 起 始 点 上 游 连 接 ~ CEA 转 录 增 强 序 列, 发 现 可 提 高 CEA 启 动 子 的 特 异 性 启 动 效 率 8-30 倍 ; Guo 等 问 将 CEA 启 动 子 置 于 四 个 线 性 串 连 的 核 因 子 KBDNA 结 合 位 点 的 下 游, 将 CEA 的 启 动 效 率 提 高 了 3-8 倍 ; 但 是 与 常 用 的 无 靶 向 性 启 动 子 相 比 启 动 效 率 仍 相 差 较 多 Nettelbeck 等 [ 川 构 建 了 一 个 正 向 自 身 调 节 环 : 单 纯 瘤 痊 病 毒 的 VP 1 6 蛋 白 与 一 种 DNA 损 伤 修 复 所 需 的 DNA 聚 合 酶 的 抑 制 酶 LexA 融 合 形 成 的 融 合 蛋 白 VP-LexA, 由 内 皮 细 胞 特 异 性 启 动 子 vwf 或 胃 肠 道 肿 瘤 特 异 性 表 达 的 SI 基 因 的 启 动 子 启 动 表 达 ; 表 达 的 VP-LexA 蛋 白 结 合 于 七 个 重 复 串 连 位 于 vwf 或 SI 上 游 的 DNA 结 合 位 点 LexA, 有 效 提 高 了 vwf 的 转 录 活 性 3-67 倍 或 SI 的 转 录 活 性 倍, 同 时 保 持 vwf 或 SI 的 细 胞 特 异 性 不 变 Iy 町 等 [ 11] 采 用 两 步 转 录 扩 增 法, 即 前 列 腺 特 异 性 抗 原 (PSA) 启 动 子 启 动 由 一 个 酵 母 转 录 激 活 蛋 白 Ga14 与 两 个 单 纯 殖 痊 病 毒 的 VP16 T r anscrip tion efficiency of two recombinant CEA promoters in different cells pgl4.10/cea pgl4.10/cmvenhancer-cea Folds increase (Relative luciferase unit) (Relative luciferase unit) (pgl4.1 O/CMV enhancer- 士 s. d 士 s.d. CEA versus pgl4. 10/CEA) 土 :t 土 MCF7 HT 士 :t 土 A 土 士 SW60 SW480 Hela LL 土 士 土 :t 土 :t 土 土 The data represent mean relative luciferase units (RLU) from three r e plicates 士 s. d.. 土 s.d 士 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 土 土 土 士 :t 士 土 物 中 国 细 学 报
5 730 蛋 白 融 合 形 成 的 融 合 蛋 白 GAL4-V 凹 的 表 达, 表 达 的 GAL4-VP 转 而 与 位 于 目 的 基 因 上 游 的 五 个 串 连 连 接 的 Ga14 位 点 结 合, 从 而 提 高 了 目 的 基 因 表 达 水 平 6-8 倍 Net t e lbeck 与 Iy 町 等 的 方 法 需 要 构 建 两 个 转 录 调 控 元 件 最 近 有 研 究 报 道 [ 俐, 人 巨 细 胞 病 毒 (Cyωmegalo 咄 咄, CMV) 启 动 子 上 游 的 转 录 增 强 子 能 够 高 效 促 进 一 些 人 细 胞 特 异 性 启 动 子 的 活 性 Gruh 等 (6J 报 道, CMV 早 期 转 录 增 强 序 列 分 别 插 入 到 人 心 纳 素 ( ANF ) 人 心 室 肌 球 蛋 白 轻 链 (MLVv) 和 11 型 肺 泡 上 皮 细 胞 表 面 活 性 蛋 白 (SP- C) 的 启 动 子 的 上 游, 可 在 相 应 的 特 异 性 组 织 细 胞 中 显 著 提 高 这 些 启 动 子 调 控 的 基 因 的 表 达, 幅 度 从 44 倍 至 倍, 而 在 非 特 异 性 组 织 细 胞 中 仅 提 高 7 倍 与 以 往 的 研 究 相 比, CMV 转 录 增 强 子 具 有 结 构 小 容 易 克 隆 体 外 整 合 到 肿 瘤 特 异 性 启 动 子 上 游 比 较 方 便 对 启 动 子 活 性 的 增 强 效 果 最 强 且 能 保 持 启 动 子 的 细 胞 特 异 性 等 特 点 李 富 驯 等 [ 7 J 将 CMV 早 期 转 录 增 强 序 列 与 CEA 启 动 子 重 组, 可 特 异 性 地 在 CEA 阳 性 的 肺 癌 细 胞 A549 中 启 动 自 杀 基 因 的 表 达, 而 在 CEA 阴 性 的 人 支 气 管 上 皮 细 胞 株 16HBE 中 则 没 有 启 动 自 杀 基 因 的 表 达 但 本 研 究 的 结 果 表 明, 参 考 有 关 文 献 克 隆 的 bp 的 CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 369 bp 的 CEA 启 动 子 转 录 效 率 确 实 具 有 极 显 著 的 增 强 作 用, 但 这 一 增 强 作 用 对 CEA 启 动 子 的 特 异 性 却 也 有 明 显 影 响 从 基 因 转 录 调 控 区 的 结 构 来 看, 心 铀 素 (ANF) 基 因 的 5' 区 域 ( bp 至 bp ) 对 ANF 启 动 子 的 活 性 具 有 重 要 作 用 调 节 序 列, 其 中 的 C ArG 结 构 的 活 性 与 是 否 与 心 肌 细 胞 特 异 性 调 节 因 子 形 成 复 合 物 有 关, 糖 ( 肾 上 腺 ) 皮 质 激 素 剌 激 ANF 的 转 录, 而 fo s 与 jun 蛋 白 则 阻 遏 ANF 的 转 录 ( 1 3, 14J 心 室 肌 球 蛋 白 轻 链 (MLVv) 基 因 启 动 子 的 特 异 性 由 两 个 正 向 调 节 序 列 盯 -1a 与 HF-1bIMEF- 一 个 负 向 调 节 序 列 盯 -3 调 控 [ 山, 16J 0 EFI A IYB-1 蛋 白 和 一 个 p30 蛋 白 与 HF - 1a 特 异 性 结 合, 一 个 新 的 C H 辞 指 蛋 白 和 一 个 转 录 因 子 RS 盯 家 族 成 员 MEF 则 与 HF-1bIMEF- 特 异 性 结 合, 从 而 调 控 MLVv 启 动 子 的 细 胞 特 异 性 活 性 E 型 肺 泡 上 皮 细 胞 表 面 活 性 蛋 白 (SP-C) 基 因 转 录 起 始 点 的 5' 上 游 的 30 个 碱 基 对 区 域 与 TNF - α 结 合 后, SP-C 基 因 表 达 受 到 抑 制 ( 1 飞 糖 ( 肾 上 腺 ) 皮 质 激 素 对 SP-C 基 因 表 达 的 具 有 重 要 的 调 控 作 用 (1 8 J 心 铀 素 ( ANF ) 心 室 肌 球 蛋 白 轻 链 (MLVv ) 11 型 肺 泡 上 皮 细 胞 表 面 活 性 蛋 白 (S P- C) 基 因 的 转 录, 即 启 动 子 的 活 性 由 各 自 不 同 的 细 胞 特 异 性 因 子 调 控 研 究 论 文 而 与 这 些 基 因 的 表 达 调 控 有 所 不 同 的 是, 在 人 肠 癌 细 胞 中 CEA 基 因 5 ' 区 域 一 些 位 点 的 甲 基 化 程 度 民 显 降 低 [ l 910], 因 此 CEA 启 动 子 的 活 性 在 一 定 程 度 上 由 其 甲 基 化 状 态 调 控 因 此, 当 由 外 源 ANF MLVv SP-C 启 动 子 控 制 的 外 源 基 因 进 入 相 应 的 特 异 性 组 织 细 胞 中 后, 特 异 性 组 织 细 胞 中 的 相 应 转 录 因 子 与 ANF MLVv SP-C 启 动 子 上 游 的 特 异 调 节 序 列 结 合, 调 节 其 启 动 的 外 源 基 因 的 表 达, 显 示 出 组 织 细 胞 的 特 异 性 而 由 外 源 CEA 启 动 子 控 制 的 外 源 基 因 进 入 肿 瘤 细 胞 或 非 肿 瘤 细 胞 后, 由 于 外 源 CEA 启 动 子 不 像 与 内 源 性 的 CEA 启 动 子 具 有 特 有 的 与 细 胞 类 型 相 对 应 的 特 殊 甲 基 化 状 态, 因 此, 由 外 源 CEA 启 动 子 控 制 的 外 源 基 因 的 表 达 水 平 与 肿 瘤 细 胞 或 非 肿 瘤 细 胞 类 型 中 国 细 学 报 性 肿 瘤 细 胞 内 源 性 CEA 表 达 水 平 没 有 相 关 因 而 CMV 转 录 增 强 子 在 提 高 外 源 CEA 启 动 子 带 动 的 外 源 基 因 的 表 达 水 平 的 同 时 却 无 法 保 持 肿 瘤 细 胞 的 特 异 性 另 外, 从 结 果 中 可 以 看 出, 各 种 细 胞 内 源 性 CEA 的 表 达 与 荧 光 素 酶 报 告 基 因 显 示 的 CEA 启 动 子 的 转 录 启 动 效 率 并 不 完 全 一 致, 这 是 因 为 内 源 性 CEA 的 表 达 是 由 CEA 基 本 启 动 子 (b as al promoter) 序 列 增 强 子 (enhan c er) 和 抑 制 子 ( s ilencer) 序 列 等 的 甲 基 化 ( methylatio n ) 程 度 和 染 色 体 水 平 的 组 蛋 白 乙 酷 化 ( acetylation) 情 况 以 及 转 录 因 子 水 平 等 多 层 次 调 控 的 [l910], 而 本 文 克 隆 的 是 基 本 启 动 子 序 列 出 于 基 因 治 疗 载 体 容 量 构 建 策 略 等 多 种 因 素 考 虑, 目 前 用 作 肿 瘤 基 因 治 疗 靶 向 性 调 控 序 列 的 均 为 CEA 基 本 启 动 子, 其 转 录 启 动 能 力 仅 受 与 该 序 列 结 合 的 转 录 相 关 因 子 水 平 影 响, 所 以 会 表 现 出 与 内 源 性 表 达 水 平 不 完 全 一 致 的 情 况 因 此, 虽 然 有 文 献 报 道 CMV 早 期 转 录 增 强 子 在 A549 和 1 6HBE 细 胞 中 可 以 特 异 性 地 提 高 CEA 启 动 子 的 效 率, 但 本 工 作 在 更 多 的 CEA 阳 性 和 阴 性 细 胞 中 的 研 究 结 果 表 明, 参 考 有 关 文 献 克 隆 的 531 bp 的 CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 369 bp 的 CEA 启 动 子 的 转 录 增 强 作 用 并 不 与 CEA 蛋 白 表 达 平 行, 因 此 该 增 强 作 用 不 具 有 特 异 性 CMV 转 录 增 强 子 在 用 于 CEA 启 动 子 调 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 控 的 CEA 阳 性 肿 瘤 基 因 治 疗 时 应 注 意 其 非 特 异 性 f 用 的 影 响, 包 括 可 能 的 副 作 用 从 改 进 特 异 性 的 角 度 出 发, 可 考 虑 采 用 在 该 组 合 中 引 入 其 它 由 肿 瘤 细 胞 特 异 性 转 录 因 子 结 合 的 序 列 在 增 强 CEA 启 动 子 活 性 中 国 细 学 报 的 同 时 保 持 其 肿 瘤 细 胞 的 特 异 性, 这 一 设 想 需 要 进 一
6 陈 琼 姜 等 CMV 早 期 转 录 增 强 子 对 人 癌 胚 抗 原 启 动 子 效 率 的 作 用 研 究 步 研 究 证 实 参 考 文 献 (References) 王 艳, 李 岩, 崔 刚 癌 胚 抗 原 启 动 子 调 控 的 臼 细 胞 介 索 - / 干 扰 素 融 合 基 因 的 原 核 及 其 核 表 达 载 体 的 构 建 中 华 消 化 杂 志 006; 6(6): Reinblatt M, Pin RH, Fong Y. Carcinoembryonic antigen directed herpes viral oncolys is improves selectivity and activity in colorectal cancer. Surgery 004; 136(3): Li Y, Chen Y, Dilley J, T Arroyo T, Ko D, Working P, et al. 19. Carcinoembryonic antigen-producing cell-specific oncolytic adenovirus, OV798, for colorectal cancer therapy. Mol Cancer Ther 003; (1 0): Nyati MK, Sreekumar A, Li S, Zhang M, Rynkiewicz SD, Chinnaiyan AM, et al. High and s e l ective 巳 x p ress i o n of yeast cytosine deaminase under a carci noembryonic antigen promoter-enhancer. Cancer Res 00; 6(8): Guo X, Evans TR, Somanath S, Armesill a AL, Darling JL, II the transcriptional activity of weak cell type-specific promoters. Gene Therapy 1998; 5: Iyer M, Salazar FB, Wu L, Carey M, Gambhir SS. Bioluminescence imaging of systemic tumor targeting using a prostatespec ific lentiviral vector. Hum Gene Ther 006; 17(1): Day CP, Rau KM, Qiu L, Liu CW, Kuo HP, Xie X, et al. Mutant Bik expression mediated by the enhanced minimal topoisomerase IIalpha promoter selectively suppressed breast tumors in an animal model. Cancer Gene Ther 006; 13(7): McBride K, Robitaille L, Tremblay S, Argentin S, Nemer M. fo 的 un repression of cardiac-specific transcription in quiescent and growth-stimulated myocytes is targeted at a tissuespecific cis element. Mol Cell Biol 1993 ; 13(1): Argentin S, Ardati A, Tremblay S, Lihrmann 1, Robitai lle L, Drouin J, et al. Developmental stage-specifi c regul ati on of atrial natriuretic factor gene transcription in cardiac ce ll s. 如 101 Cell Biol 1994; 14( 1): 中 国 细 学 报 Schatzlein A, et al. In ν itro evaluation of cancer-specific NF- 15 Zou Y,Chien KR. EFIA/YB- I is a component of cardiac HFkappaB-CEA enhancer-promoter system for 5-fluorouracil I A binding activity and positively regulates transcription of prodrug gene therapy in colon cancer cell lines. Br J Cancer the myosin light-chain v gene. Mol Cell Biol 1995; 15(6): 007; 97(6): Gruh 1, Wunderlich S, Winkler M, Schwanke K, Heinke J, 16 Small EM, Krieg PA. Molecul ar regul ation of cardiac chamber- Blomer U, et al. Human CMV immediate-early enhancer: a specific gene expression. Trends Cardiovasc Med 004; 14 usefu l tool to enhance cell -type-specific expression from ( 1): 13-8 lentiviral vectors. J Gene Med 008; 10: Bachurski CJ, Pryhuber GS, G l as s 巳 r SW, Kelly SE, Whitsett JA. 7 李 富 骗, 何 建 行, 邱 源 靶 向 治 疗 肺 癌 双 自 杀 基 因 HSVTKI Tumor necrosis factor - αinhibit s surfactant protein C gene CD 真 核 表 达 载 体 的 构 建 中 国 癌 症 杂 志 007; 17(1): 37- transcription. J Biol Chem 1995; 70(33): Mendelson CR, Boggaram V. Hormonal control of the surfac- 8 Shifera AS, Hardin JA.Factors modulating expr 巳 s sion of Renilla tant system in fe t a 门 un g. Annu Rev Physiol 199 1; 53: luciferase from control plasmids used in luciferase reporter 19 Tran R, Kashmiri SV, Kantor J, Greiner JW, Pestka S, Shively gene assays. Anal Biochem 010; 396(): JE. Correlation of DNA hypomethylation with expression of 9 Hasselbach L, Haase S, Fi scher D, Kolberg HC, Stürzbecher carcinoembryonic antigen in human colon carcinoma cells. HW. Characterisati on of the promoter region of the human Cancer Res 1988; 48(0): DNA-repair gene Rad5 1. Eur J Gynaecol Oncol 005 ; 6(6): 0 Boucher D, Cournoyer D, Stanners CP, Fuks A. Studies on the control of gene expression of the carcinoembryonic antigen 10 Nettelbeck DM, Jér ô m 巳 V, Müller R. A strategy for enhancing fa mily in human ti ssue. Cancer Res 1989; 49(4): 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 物 中 国 细 学 报
7 73 研 究 论 文 Study on the Effect of Human CMV Early Transcriptional Enhancer on Human CEA Promoter Qiong-Jiang Chen 1, Zhen-Yu Jia 1 *, Ping Chen, Qun Wei, Min Zhang 1, Jun-Qiang Chen 1, Xing Zhang 1, Jing-Jia Ye 3, Jiang Ca0 CZh 勾 iang Academy of Medical Sciences, Hangzhou 日, China; Sir Run Run Shaw lnstitute of Clinical Medicine, Zhejiang Univers 仰, Abstract Hangzhou , China; 3Clinical Research Center, nd Affiliated Hospital ofzhejiang University School of Medicine, HangzllOu , China) In order to explore the probability of Cytomegalovirus (CMV) early transcriptional enhancer in targeted gene therapy for carcinoembryonic antigen (CEA) positive cancers, CEA promoter (369 bp) and CMV early transcriptional enhancer (531 bp) were cioned by PCR using genornic DNA of human colon carcinoma SW60 cells and pcdna3. 1 (+) plasrnid as template, respectively according to literatures. CEA promoter and CMV early transcriptional enhancer were subcioned into luciferase reporter vector pgl4.1 0 to obtain pgl4.1 O-CEA and pgl C 岛 1V-CEA, and co-transfected with transfection-efficiency normalization vector pgl4.74 into CEA-positive human 中 国 细 学 报 colon carcinoma Lo Vo, HT-9, SW60, lung carcinoma A549 cells, breast carcinoma MCF7 cells and CEA-negative colon carcinoma SW480 cells, cervix carcinoma HeLa cells and lung fibroblast LL47 cells. The transcription initiation efficiencies of CEA promoter in these cells were analyzed by Dual Luciferase Assay system and relative luciferase unit (RLU) was used to evaluate the expression efficiency. The results showed that CMV early transcriptional enhancer up-regulated CEA promoter transcriptional acti vity significantly by 7.46 to folds in the above CEA-positive cancer cells, however, it also up-regulated CEA promoter transcriptional activity in CEA-negative Hela and fibroblast cells by 4.01 to folds. Therefore, the above CMV enhancer can greatly up-regulate CEA promoter transcriptional acti vity, but may attenuate the specificity of CEA promoter. The side effect of the nonspecificity of CEA promoter with CMV early transcriptional enhancer should be considered for targeted gene therapy of CEApositive cancer. Combination of other ways such as tissue-specific transcription factor-binding sites in the upstream regulatory region are needed for maintaining the specificity of CEA promoter when utilizing CMV early transcriptional enhancer in targeted gene therapy of CEA-positive cancer. Key words cell specific promoter; carcino-embryonic-antigen (CEA) promoter; cytomegalovirus (CMV) early transcriptional enhancer; cancer gene-therapy Received: May 7, 010 Accepted: September 7, 010 This work was supported by the Foundation of Department of Science & Technology of Zhejiang Province(No.008FI09) and Foundation of Public Health of Zhejiang Province(No.007 A086) *Corresponding author. Tel: ; zhenyuji a@ yahoo.com 学 报 中 国 细 学 报 中 国 细 胞 生 物 中 国 细 学 报
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>
EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
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第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
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项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
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BBS...5... 11...23...26...31...46...49...54...55...57...59...62... 110... 114... 126... 132... 149 I "108" 1 2 3 4 BBS 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 M ( ) Kg S ( ) A ( ) K (
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
![380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂](/thumbs/43/23114460.jpg "380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂")
中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
864 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 863 曲 妥 珠 单 抗 联 合 多 西 紫 杉 醇 治 疗 Her-2 阳 性 乳 腺 癌 的 临 床 研 究 * 周 永 安, 刘 训 碧 黄 石 市 中 心 医 院 ( 普 爱 院 区 ) 乳 腺 肿 瘤 外 科, 湖 北 黄 石 435000 摘 要 : 目 的 探 析 注 射 用 曲
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P 医学科研方法
医 学 科 研 方 法 主 讲 苏 秀 兰 细 胞 生 物 学 教 授 第 一 讲 绪 论 一 概 念 : 在 医 学 科 学 研 究 活 动 中, 运 用 科 学 的 实 践 和 理 论 思 维 的 技 巧, 充 分 发 挥 自 己 的 智 慧, 去 寻 找 观 念 世 界 与 现 实 世 界 之 间 的 联 系 或 规 律, 从 而 发 现 新 现 象, 提 出 新 理 论 的 手 段 二 医
357 P <. 5. TCD findings revealed that the contralateral vertebral artery systolic blood flow velocities in patients with phase Ⅰ Ⅱ and Ⅲ steal groups
356 TCD 212 3 215 4 TCD 45 TCD 8 Ⅰ 21 Ⅱ 11 Ⅲ 5 4 45 6 2 Ⅰ 12 9 Ⅱ 3 7 1 Ⅲ 3 2 r =. 78 P
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
该 奈 自 受 PZ 多 透 soc i e B t h y. y t is NA YL OR exp os ed t h a t b e i n g wh o res or sa in t es s e s we r e m ad e n b ot om. M ean wh i l e NA YL
探 性 通 性 圣 重 ' 颠 并 格 洛 丽 亚 奈 勒 小 说 贝 雷 的 咖 啡 馆 对 圣 经 女 性 的 重 写 郭 晓 霞 内 容 提 要 雷 的 咖 啡 馆 中 权 社 会 支 配 的 女 性 形 象 美 国 当 代 著 名 黑 人 女 作 家 格 洛 丽 亚 过 对 6 个 圣 经 女 性 故 事 的 重 写 奈 勒 在 其 小 说 贝 覆 了 圣 经 中 被 父 揭 示 了 传 统
ment group was more effective than that of the control group OR = % CI = Conclusion The clinical efficacy of Chinese medic
33 243 HAART Meta * 1 1 1 1 1 2 3 3 3 1. 530001 2. 538000 3. 530011 highly active anti-retroviral therapy HAART Pubmed HAART randomized controlled trials RCT Jadad RevMan5. 3 Meta 5 RCT 761 Meta HAART
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
é SI 12g C = 6 12 = 1 H2( g) + O2( g) H2O( l) + 286kJ ( 1) 2 1 1 H 2( g) + O2( g) H2O( l) H = 286kJ mol ( 2) 2 1 N 2 ( g) + O2( g) NO 2 ( g) 34kJ 2 1 1 N 2 ( g) + O2( g) NO 2 ( g) H = + 34kJ mol 2 1 N
< F63756D656E D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA38C6DA2D30362DC3F1D7E5D2BDD2A92E6D6469>
绎 1 2 1. 8300112 援 830000 CNKI 1979-20121989-2013 PubMed/MEDLINE Jadad Cochrane RevMan 5.2.0 Meta 4 360 Meta OS WMD 95%-0.48-0.81-0.160.04-0.150.22 RR 95% 1.671.292.151.220.354.20 doi: 10.11842/wst.2014.08.030
临床路径管理模式下医疗服务流程的关键环节分析
临 床 路 径 管 理 模 式 下 医 疗 服 务 流 程 的 关 键 环 节 分 析 郭 淑 岩 陶 红 兵 曲 豪 柯 晓 华 刘 鹏 珍 梁 婧 摘 要 采 取 文 献 综 述 相 关 资 料 分 析 和 医 生 意 愿 调 查 等 方 法 找 出 影 响 医 院 临 床 路 径 管 理 服 务 流 程 的 主 要 环 节, 邀 请 已 经 开 展 临 床 路 径 的 医 院 相 关 人 员
第二部分
中 国 农 通 报 0,7(04):478-48 Chinese Agricultural Science Bulletin 基 于 网 络 平 台 的 生 物 统 计 改 革 及 实 践 效 果 分 析 袁 文, 彭 惠 茹, 张 洪 亮, 刘 文 欣, 华 金 平, 苏 胜 宝, 孔 繁 玲 ( 中 国 农 大 科 技 术 发 展 研 究 院, 北 京 0093; 中 国 农 大 农 与 生 物
2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE : g/ d a : b : a/ b Ag As Au Cd Ce 1817
2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 15 2 : 1006 2 446X (2008) 02 2 00152 17. (, 201800) :,, ;, : ; ; ; ; : R 15313 : A, () () ( ) () () () [ 1 ],, 1,, ( ) 1996 1997, 4 ( ), 12 42 [ 2 ], (1) 1, 36, 17
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Yearbook of Chinese Medicine and Pharmacy, 23(6),303-320,2005 中 醫 藥 年 報 第 23 期 第 6 冊 編 號 :CCMP93-CT-107 補 中 益 氣 湯 抑 制 多 種 惡 性 細 胞 腫 瘤 生 長 機 轉 的 體 外 細 胞 與 肺 氣 虛 老 鼠 模 型 之 先 驅 研 究 沈 建 忠 長 庚 大 學 中 醫 系 摘 要
932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio
2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu
因 味 V 取 性 又 鸟 U 且 最 大 罗 海 惜 梅 理 春 并 贵 K a t h l ee n S c h w e r d t n er M f l e z S e b a s t i a n C A Fe rs e T 民 伊 ' 国 漳 尤 地 视 峰 州 至 周 期 甚 主 第 应
国 ' 东 极 也 直 前 增 东 道 台 商 才 R od e ric h P t ak 略 论 时 期 国 与 东 南 亚 的 窝 贸 易 * 冯 立 军 已 劳 痢 内 容 提 要 国 与 东 南 亚 的 窝 贸 易 始 于 元 代 代 大 规 模 开 展 的 功 效 被 广 为 颂 扬 了 国 国 内 市 场 窝 的 匮 乏 窝 补 虚 损 代 上 流 社 会 群 体 趋 之 若 鹜 食 窝
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012
Protein Labeling and Detection
ECL plex Product Specialist 1/ Western Blot 2/ Western Blotting- PI 3/ Western Blotting 1. 2 1 2. 3. 4. Y 3 4 5. 4/ 1. SDS- (SDS-PAGE) SDS ( β- ) --SDS 5/ SDS-PAGE - - - (Tris-HCL ph 6.8) glycine/chloride
時間
104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專
[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig
![[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig](/thumbs/91/106435555.jpg "[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig")
40 6 2011 6 Vol.40 No.6 Infrared and Laser Engineering Jun. 2011 808 nm 2000 W 1 1 1 1 2 2 2 2 2 12 (1. 710119 2. 710119) : bar 808 nm bar 100 W 808 nm 20 bar 2 000 W bar LIV bar 808 nm : : TN248.4 TN365
香 蕉 保 健 功 能 及 香 蕉 皮 利 用 - 綜 述 Vol.2 No.1 壹 前 言 香 蕉 (Banana), 屬 於 芭 蕉 科 (Musaceae) 芭 蕉 屬 (Musa), 是 一 種 熱 帶 傳 統 的 經 濟 作 物, 產 地 主 要 在 南 北 緯 30 以 內 的 熱 帶
健 康 與 照 顧 科 學 學 刊 第 二 卷 第 一 期 香 蕉 保 健 功 能 及 香 蕉 皮 利 用 - 綜 述 The banana health functions and banana peel - Review 張 佑 安 1 陳 冠 仲 1 張 翔 2 林 信 成 1 1 中 州 科 技 大 學 保 健 食 品 系 2 元 培 科 技 大 學 生 物 科 技 系 摘 要 香 蕉 為
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
EXAMINATION RULES
考 試 規 則 : 1. 競 賽 者 必 須 在 考 試 前 10 分 鐘 到 達 考 場 2. 競 賽 者 不 可 以 攜 帶 任 何 工 具, 但 是 個 人 所 需 要 的 醫 藥 用 品 及 器 具 不 在 此 限 3. 競 賽 者 必 須 坐 在 指 定 的 位 置 4. 在 考 試 開 始 前, 競 賽 者 必 須 檢 查 大 會 提 供 的 文 具 及 任 何 工 具 ( 筆 尺 計
吴根良 等 不同前作对设施草莓土壤环境动态变化和经济效益的影响 4 土传病害也因此日趋严重 严重影响草莓的产 量和品质 轮作尤其是水旱轮作是克服连作障 5 6 233 棚揭开大棚膜 其他大棚不揭膜 都按常规进行 水肥 农药的管理 8 月初前作结束后用产品名 碍的有效技术措施之一 其中有关水稻 草 7
24( 2) : 232 237 浙江农业学报 Acta Agriculturae Zhejiangensis 2012 http: / / www zjnyxb cn 2012 24( 2) : 吴根良 忻雅 童建新 等 不同前作对设施草莓土壤环境动态变化和经济效益的影响 J 浙江农业学报 232 237 不同前作对设施草莓土壤环境动态变化和经济效益的影响 1 吴根良 忻 ( 1 1 * 雅 童建新1
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont
210 毛 果 芸 香 碱 联 合 拉 坦 前 列 素 治 疗 原 发 性 急 性 闭 角 型 青 光 眼 的 疗 效 观 察 符 元 党 1, 郑 振 优 2, 林 再 雄 2, 周 吉 良 1. 昌 江 黎 族 自 治 县 中 西 医 结 合 医 院, 海 南 昌 江 572700 2. 海 南 医 学 院 附 属 医 院 眼 科, 海 南 海 口 570100 1 摘 要 : 目 的 探 讨
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1. 1. 2 500 730 2 5 1 1 1. 1. 3 739 127 116 712 265 3 143 50 2 2 1 13 2 14 3 15 4 16 5 17 6 18 7 19 8 20 9
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1006-446X 2011 12-0001-28 1 2 2 1. 201800 2. 510070 R 244. 9 A 1 1. 1 3 2000 1. 1. 1 1973 3 52 299 31 136 100 32 1 13 2011-10 -20 1 2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
, 12 2,, 6486 22372 ( IARC) / ( IACR) 41528 (CIFC), 1993 1997 89489 31307,,, 1, 1996 1997 2, 1993 1997 5 ; + 4, 19931997, ( 19961997 ) ; () 19931997 1
12 1993 1997 1, 2, 1, 1 3, (1., 100021 ;2., 100044 ;3., 100021) :[ ], [ ] /, 12 1993 1997 [ ], 12 108 915 759, 230 024, 161 602 88 %, 0. 578,,,,12 14/ 10 21/ 10 11/ 10 15/ 10 ; 169. 3/ 10 359. 7/ 10 48.
Microsoft Word - 8 期中文目次.doc
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学
®
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 15 期 214 年 8 月 2277 稳 心 颗 粒 治 疗 心 律 失 常 的 Meta 分 析 * 何 颖, 刘 莹, 邹 爱 英 天 津 中 医 药 大 学 第 二 附 属 医 院, 天 津 15 摘 要 : 利 用 Meta 分 析 法 评 价 稳 心 颗 粒 治 疗 心 律 失 常 的
结 直 肠 癌 (, ) 是 消 化 道 最 常 见 的 恶 性 肿 瘤 之 一, 死 亡 率 在 世 界 上 排 名 第 位, 在 我 国 排 名 第 位, 每 年 约 有 万 人 死 于 发 生 发 展 的 病 理 机 制 十 分 复 杂, 目 前 认 为 基 因 突 变 是 癌 变 过 程 中
中 国 病 理 生 理 杂 志, ( ): - 杂 志 网 址 : : [ 文 章 编 号 ] - ( ) - - 可 变 剪 接 在 结 肠 癌 与 正 常 组 织 间 的 * 差 异 表 达 陶 敏, 黄 良 祥, 蔡 鹏 威, 晋 龙, 吴 文 冰, 曾 长 青, 黄 毅, 伍 严 安 ( 福 建 医 科 大 学 省 立 临 床 医 学 院, 福 建 省 立 医 院, 福 建 福 州 ) [
< 愛 滋 病 毒 感 染 與 人 類 乳 突 病 毒 感 染 之 相 關 問 題. 上 > 毒 在 細 胞 核 中 複 製 病 毒 基 因 可 分 為 三 個 區 塊, 包 括 非 轉 錄 的 長 調 控 區 (noncoding long control region;lcr, 約 1 Kb)
人 類 乳 突 病 毒 介 紹 張 淑 媛 台 大 醫 學 院 醫 技 系 人 類 乳 突 病 毒, 或 稱 人 類 乳 頭 狀 瘤 病 毒 (Human papillomavirus,hpv ) 是 一 種 無 套 膜 (un-enveloped) 具 二 十 面 體 外 殼 (capsid) 的 雙 股 DNA 病 毒 人 類 乳 突 病 毒 為 乳 突 瘤 病 毒 科 成 員 之 一, 能 夠
Abstract Seminar in Hakka culture studies, committed to Hakka Culture Studies, from Hakka Society document retrieval, genealogy; this seminar describe
客 家 學 院 客 家 語 文 研 究 所 客 家 文 化 專 題 研 究 客 家 本 質 个 源 考 研 究 客 家 學 為 例 指 導 教 授 : 羅 肇 錦 博 士 碩 士 研 究 生 : 戴 宏 興 中 華 民 國 一 一 年 十 一 月 三 十 日 星 期 五 1 Abstract Seminar in Hakka culture studies, committed to Hakka Culture
<30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D34A3A92E6D6469>
212 绎 Vol.14 No.5 ScienceDirect 阴 元元 元元 / 99978 5 doi: 1.3969/j.issn.1674-3849.212.5.3 2 1 29 72.7% 21 27.1% 24.26% 1 [1] 1 2 21 7.85 [2] 1 29 21% 662 26 9.38 211 3.8 27.2% 1 212-3-26 212-1-19 元 UL16/9-Y4/CMS/WYT1/ICMS
马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,
![马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,](/thumbs/42/22971098.jpg "马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,")
1072 基 础 研 究 Basic Research www.tumorsci.org 肿 瘤 2011 年 12 月 第 31 卷 第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat
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E VIDENCE IDENTIFICATION THEORY&PRACTICE 山 东 省 高 校 重 点 验 室 山 东 政 法 学 院 司 法 定 中 心 20 年 2 月 Vol., No. 本 目 录 什 么 是 声 纹 分 析 ------------------------------------------------------------------------------------
目錄
疱 herpesviruses DNA capsid 疱 疱 疱 疱 疱 herpes simplex virus 1 HSV-1 疱 herpes simplex virus 2 HSV-2 疱 varicella-zoster virus VZV EB Epstein-Barr virus EBV human cytomegalovirus HCMV 疱 human herpesvirus 6
240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通
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2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
具有多个输入 特别是多个输出的 部门 或 单位 ( 称为 决策单元 Decision Making Unit 简称 DMU) 间的相对有效 8 性 C2R 模型是 DEA 的个模型 也是 DEA 的基础 和重要模型 假设有 n 个决策单元 DMUj( j = 1 2 3 n) 每个 DMU 有 m
基于 DEA 模型的 我国政府社会管理职能绩效评价研究 以 30 个省 ( 直辖市 自治区 ) 为统计样本的实证分析 * 李超显 摘 要 政府社会管理职能绩效评价是政府管理中的一个重点和难点问题 本文采用数据包络分析模型对中 30 国 30 个省( 直辖市 自治区) 的政府社会管理职能绩效进行时空差异分析和实证评价 研究发现 个省( 直辖市 自治区) 的政府社会管理职能绩效具有空间差异性 雁行形态和区域梯度性
<4D6963726F736F667420576F7264202D20ECFAD0C0D0C0C2DBCEC4CCE1BDBB6F7665722E646F63>
硕 士 专 业 学 位 论 文 论 文 题 目 鲍 温 病 临 床 病 理 特 征 和 几 种 治 疗 方 法 比 较 的 分 析 研 究 研 究 生 姓 名 指 导 教 师 姓 名 禚 欣 欣 康 定 华 专 业 名 称 皮 肤 性 病 学 研 究 方 向 皮 肤 肿 瘤 与 皮 肤 病 理 论 文 提 交 日 期 2013 年 4 月 I 鲍 温 病 临 床 病 理 特 征 和 几 种 治 疗
4期
中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京
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journal.newcenturyscience.com/index.php/gjanp Global Journal of Advanced Nursing Practice,214,Vol.1,No.1 The practicality of an improved method of intravenous infusion exhaust specialized in operating
United Nations ~ ~ % 2010
42 3 2018 5 Vol. 42 No. 3 May 2018 38 Population Research 2014 60 3% ~ 4% 10% 60 +
云锡肺癌高发研究进展
云 南 个 旧 现 场 介 绍 1 姚 树 祥 2 黄 绍 锵 3 常 润 生 黄 玉 辉 4 姚 明 鉴 5 乔 友 林 第 一 节 一 般 情 况 一 地 理 地 貌 与 矿 产 资 源 ( 一 ) 地 理 地 貌 云 南 省 个 旧 市 位 于 云 南 省 南 部, 红 河 北 岸, 北 回 归 线 横 贯 市 区 北 郊, 东 与 蒙 自 县 接 壤, 南 隔 红 河, 与 元 阳 金 平
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
第一章 绪 论
环 境 监 测 主 编 : 王 怀 宇 姚 运 先 高 等 教 育 出 版 社 内 容 提 要 本 书 将 环 境 监 测 的 对 象 进 行 了 明 确 的 分 类, 详 细 讲 述 了 各 种 监 测 技 术 的 基 础 理 论 和 手 段 内 容 包 括 环 境 监 测 绪 论 环 境 监 测 质 量 控 制 水 体 监 测 大 气 监 测 噪 声 监 测 土 壤 与 固 体 废 物 监 测
00 sirius 3R SIRIUS 3R 3RV1 0A 1 3RT1 3RH1 3 3RU11/3RB SIRIUS SIRIUS TC= / 3RV1 A 1 IEC6097- IP0 ( IP00) 1/3 IEC6097- (VDE0660) DIN VDE 06 0 AC690V, I cu 00V 1) P A n I n I cu A kw A A ka S00 0.16 0.0
試料分解と目的元素精製法_2010日本分析化学会
H2007T(10:3011:00) ICPAES,ICPMS 22416 http://www.caa.go.jp/safety/pdf/100419kouhyou_1.pdf http://www.caa.go.jp/safety/pdf/100419kouhyou_1.pdf 2010-07-28 Cd0.4 ppm232 * CODEX STAN 193-1995, Rev.3-2007 Web
标题
摇 878 环 球 中 医 药 2015 年 7 月 第 8 卷 第 7 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, July 2015,Vol 郾 8, No 郾 7 慢 性 前 列 腺 炎 外 治 法 治 疗 进 展 综 述 莫 旭 威 摇 王 彬 摇 李 海 松 摇 赵 冰 摇 刘 洋 揖 摘 要 铱 摇 目 前 慢 性 前 列 腺 炎 的 治 疗 已 经
Persuasive Techniques (motorcycle helmet)
M O D E A T H E E L E M E N T S O F A N A R G U M E N T 1n t h l s t e s t i m o n y g iv e n b e f o r e t h e M a ry l a n d Se n a t e t h e s p e a ke r m a ke s a s t r o n g c l a i m a b o u t t
21 13 D / 2 10 ig ig 10 d 1. 0 g kg /2 2 β- 5 g kg g kg mg kg - 1 ig ig 24 h 5% 1 2% CMC-Na 2. 5 ml 30
21 13 1 2 1* 2 1. 430065 2. 445000 20 10 5 g kg - 1 5 mg kg - 1 ig 10 d ig HE 1 TFF1 TFF1 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 05 R285. 5 doi 10. 13422 /j. cnki. syfjx. 2015130100 A 1005-9903 2015 13-0100-05
1269 malondialdehyde (MDA) were significantly decreased, while oxygen partial pressure (PaO 2 ), ph value, superoxide dismutase (SOD) and glutathione
1268 维 生 素 A 联 合 牛 肺 表 面 活 性 物 质 治 疗 新 生 儿 呼 吸 窘 迫 综 合 征 的 临 床 研 究 朱 琼 1, 陈 小 利 2, 叶 华 2 1. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 儿 科, 重 庆 401520 2. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 内 儿 科, 重 庆 401520
12-1b T Q235B ML15 Ca OH Table 1 Chemical composition of specimens % C Si Mn S P Cr Ni Fe
* - - 100084 Q235B ML15 Ca OH 2 DOI 10. 13204 /j. gyjz201508023 STUDY OF GALVANIC CORROSION SENSITIVITY BETWEEN ANY COUPLE OF STUD WELDMENT OR BEAM Lu Xinying Li Yang Li Yuanjin Department of Civil Engineering
标题
摇 1524 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 中 医 证 型 研 究 进 展 综 述 扶 伟 摇 徐 立 然 摇 马 秀 霞 摇 孟 鹏 飞 摇 宋 夕 元 摇 李 亮 平 摇 李 正 摇 丁 雪 摇 邱 荃 摇 杨 超 华 揖 摘 要 铱 摇 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 的 治 疗 过 程 中 因 其 病 因 复 杂, 临 床 症 状 多 样, 辨 证 分 型 及 临 床 疗 效 评
用 矿 物 质 丰 富 的 盐 炼 成 的 竹 盐 是 科 学 Contents 可 以 解 决 矿 物 质 缺 乏 的 生 命 之 盐 - 竹 盐 2 什 么 是 矿 物 质? 3 盐 不 是 单 纯 的 氯 化 钠 4 难 道 盐 是 高 血 压 的 元 凶 吗? 5 推 荐 用 盐 补 充 体 内 缺 乏 矿 物 质 8 什 么 是 竹 盐? 10 盐 与 竹 盐 的 成 分 分 析 11 竹
2015医学版第六期
第 4 卷 第 6 期 205 年 2 月 Journal of Lanzhou University(Medical Sciences) Vol.4 No.6 Dec. 205 文 章 编 号 :000-282 (205) 06-0054-05 金 昌 队 列 人 群 代 谢 综 合 征 率 及 组 分 分 析 彭 峥, 白 亚 娜, 王 凤 杰 2, 李 娟 生, 李 海 燕 2, 刘 燕 青,
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国 际 中 医 中 药 杂 志 2016 年 6 月 第 38 卷 第 6 期 Int J Trad Chin Med, June 2016, Vol. 38, No.6 481 国 外 传 统 医 学 管 理 模 式 探 讨 一 带 一 路 胡 艳 敏 李 宗 友 徐 俊 李 彦 文 王 俊 文 姜 威 赵 阳 摘 要 传 统 医 学 以 其 在 疾 病 治 疗 及 预 防 保 健 中 的 确 切
600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合
mm 400 mm 15 mm EOF mm/10a Fig. 1 Distributions
7 2 2011 3 ADVANCES IN CLIMATE CHANGE RESEARCH Vol. 7 No. 2 March 2011 1673-1719 (2011) 02-0097-07 1961 2007 77 5 5 6 2 3 8 11 1980 1980 1990 2015 8 11 P426.6 A 7.86% 4 50 0.35 5 6 19 7 8 9 1 1906 2005
[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%
![[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%](/thumbs/88/115539847.jpg "[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%")
38 2 2016 4 -- 1,2, 100190, 100083 065007 -- 0.25 mm 2.0 mm d 10 = 0.044 mm 640 3 300. Richardson--Zaki,,, O359 A doi 10.6052/1000-0879-15-230 EXPERIMENTAL STUDY OF FLUID-SOLID TWO-PHASE FLOW IN A VERTICAL
1.0 % 0.25 % 85μm % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song
1.0 % 0.25 % 85μm 0.97 0.136 % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song Liang 1,2 Wang Xuan-cang 1 1 School of Highway, Chang
99710b45zw.PDF
1 2 1 4 C && Zn H H H H H Cl H O H N H H H CH C H C H 3 2 5 3 7 H H H H CH 3 C2H 5 H H H O H H O K K O NO 2 H O NO 2 NO O 2 C2H5 H O C2H5 C H O C2H3 2 5 H H H O H H O 1826 O
66 a T. S. Kuhn 2 b a b Thomas Kuhn disciplinary matrix examplars or shared examples incommensurability
J Chin Med 20(1,2): 65-78, 2009 65 1 1 1,3 1,3 1,2 1 2 3 98 01 16 98 05 07 1 33378 123 03-3196200 2613 03-3298995 tcmchh@mail.cgu.edu.tw, chenlien@seed.net.tw 66 a T. S. Kuhn 2 b a b Thomas Kuhn1962-78
研 发 前 沿, 相 关 报 道, Key Words: Laparoscopy; Early enteral nutrition; Colorectal cancer surgery Niu WB, Li ZY, Zhou CX, Wang GY, Yu YM. Clinical effects
: http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i5.857 2015 2 18 ; 23(5): 857-861 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 2015. CLINICAL
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感謝 感謝 腸癌真的無感嗎 從蛛絲馬跡看大腸直腸癌 柯道維 醫師 中國醫藥大學附設醫院大腸直腸外科 柯道維 D id T David, Tao-Wei W i Ke K 學歷 國立交通大學高階主管管理碩士學程 EMBA 修業中 中山醫學大學醫學研究所博士班畢業 l 中山醫學大學醫學研究所博士班畢業 July, 2015 中國醫藥大學中西醫結合研究所畢業 ( June,2008) 中國醫藥大學畢業 (
< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA34C6DAB8BDBCD32D30302DB7E2C3E6CDC6BDE941A3A D34A3A92E6D6469>
2013 绎 Vol.15 No.4 阴 元元 450002 Ki-6772 Wistar 6 5 mg kg -1 30 0.8 mg kg -1 7.5 15.0 22.5 g kg -1 1 30 Ki-67 TUNEL Ki-67 P
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International Conference on Advanced Information and Communication Technology for Education (ICAICTE 2015) Categorical Management of Faculty in High Education: a case of University of Queensland Sichao
Microsoft PowerPoint - Jt HKBCF Ca breast SE Talk_Nov 13_2010[PDF]
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如 何 處 理 乳 癌 治 療 的 副 作 用 : 疲 勞 認 知 功 能 減 弱 性 功 能 障 礙 更 年 期 症 狀 等 曾 詠 恆 醫 生 香 港 大 學 臨 床 腫 瘤 學 系 助 理 教 授 香 港 大 學 內 科 學 系 榮 譽 助 理 教 授 二 零 一 零 年 十 一 月 十 三 日 專 題 內 容 乳 癌 確 診 類 型 乳 癌 的 發 展 及 趨 勢 治 療 發 展 治 療 引
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5 10 15 中 国 科 技 论 文 在 线 # 台 湾 独 蒜 兰 无 菌 萌 发 与 植 株 再 生 研 究 卓 孝 康 1,2, 兰 思 仁 1,2, 彭 东 辉 1,2, 吴 沙 沙 1,2, 陈 潇 1,2, 江 鸣 涛 1,2 1,2**, 张 林 瀛 (1. 福 建 农 林 大 学 园 林 学 院, 福 建 福 州 350002; 2. 福 建 农 林 大 学 海 峡 兰 花 保 育
/MPa / kg m - 3 /MPa /MPa 2. 1E ~ 56 ANSYS 6 Hz (a) 一阶垂向弯曲 (b) 一阶侧向弯曲 (c) 一阶扭转 (d) 二阶侧向弯曲 (e) 二阶垂向弯曲 (f) 弯扭组合 2 6 Hz
31 3 Vol. 31 No. 3 218 9 Journal of Shijiazhuang Tiedao University Natural Science Edition Sep. 218 1 1 2 1 2 1 1. 543 2. 543 U462. 3 217-2 - 16 A 295-373 218 3-63 - 6 1-4 5-7 8-11 1 11 11 398 mm 86 mm
2013国际营销科学与信息技术大会（MSIT2013）
2013 国 际 营 销 科 学 与 信 息 技 术 大 会 (MSIT2013) 邀 请 函 随 着 全 球 市 场 环 境 的 不 断 变 化 和 网 络 信 息 技 术 的 日 新 月 异, 营 销 科 学 和 营 销 方 式 的 创 新 对 于 企 业 的 发 展 起 着 越 来 越 大 的 作 用 为 了 进 一 步 推 动 国 内 外 营 销 学 者 的 学 术 交 流 与 合 作, 促
Chinese-Traditional-Why-you-should-take-a-high-quality-multivitamin-mineral-supplement-daily
為 什 麼 你 應 該 每 天 採 取 一 個 高 品 質 的 多 種 維 生 素 礦 物 質 補 充 劑? 一 天 一 個 蘋 果 真 的 夠 讓 我 遠 離 醫 生? 專 家 指 出, 我 們 實 際 上 是 處 於 缺 乏 維 生 素 和 礦 物 質 的 情 況! 據 營 養 專 家 的 調 查, 我 們 並 沒 有 在 我 們 的 飲 食 中 獲 得 充 足 的 維 生 素 和 礦 物 質
Microsoft Word - 201506定版
56 Chinese Journal of Library and Information Science for Traditional Chinese Medicine Dec. 2015 Vol. 39 No. 6 综 述 中 医 药 学 语 言 系 统 研 究 综 述 于 彤, 贾 李 蓉, 刘 静, 杨 硕 *, 董 燕, 朱 玲 中 国 中 医 科 学 院 中 医 药 信 息 研 究 所,
吴 燕 / 国 民 政 府 时 期 四 川 县 级 司 法 人 事 制 度 改 革 研 究 司 法 公 署, 或 称 法 院 司 法 处 ; 在 人 事 任 命 上, 司 法 厅 省 政 府 地 方 军 事 当 局 高 等 法 院 均 可 委 派 县 级 司 法 人 员 ; 审 判 权 的 大 小
专 题 论 文 国 民 政 府 时 期 四 川 县 级 司 法 人 事 制 度 改 革 研 究 * 吴 燕 内 容 提 要 国 民 政 府 时 期, 最 高 司 法 行 政 当 局 力 图 对 县 级 司 法 人 事 制 度 进 行 改 革, 并 在 此 基 础 上 推 动 县 法 院 的 普 及 四 川 各 县 司 法 机 构 在 省 高 院 的 部 署 下 实 施 了 改 革 在 人 事 任 命
1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法
![1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法](/thumbs/40/22057924.jpg "1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法")
1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广
strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a
32 2 Vol. 32 No. 2 2011 4 Journal of Jinan University Medicine Edition Apr. 2011 HepG2 1 1 2 1 1 1 1. 510632 2. 510080 HepG2 MTT WST-8 HepG2 PI Annexin V-FITC /PI Western blotting HepG2 - P < 0. 01 HepG2
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# 针 刺 治 疗 过 敏 性 鼻 炎 取 穴 规 律 探 析 ** 张 佳 佳, 陈 晟, 郭 盛 楠, 赵 吉 平 ( 北 京 中 医 药 大 学 东 直 门 医 院 ) 5 摘 要 : 变 应 性 鼻 炎 (AR) 已 成 为 全 球 性 常 见 病 针 刺 治 疗 本 病 疗 效 独 特 且 相 关 的 临 床 报 道 数 量 较 多 本 文 通 过 对 针 刺 治 疗 AR 相 关 文 献
1421 历 360 份, 局 部 使 用 抗 菌 药 物 不 进 行 统 计 1.2 方 法 统 计 分 析 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况 统 计 内 容 包 括 使 用 科 室 年 龄 体 质 量 住 院 时 间 诊 断 抗 菌 药 物 品 种 抗 菌 药 物
1420 天 津 市 中 心 妇 产 科 医 院 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 使 用 情 况 分 析 * 汪 涛, 邢 丽 天 津 市 中 心 妇 产 科 医 院 药 剂 科, 天 津 300100 摘 要 : 目 的 调 查 天 津 市 中 心 妇 产 科 医 院 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况, 并 分 析 评 估 其 使 用 合 理 性 方
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基 于 胜 任 特 征 模 型 的 结 构 化 面 试 信 度 和 效 度 验 证 张 玮 北 京 邮 电 大 学 经 济 管 理 学 院, 北 京 (100876) E-mail: weeo1984@sina.com 摘 要 : 提 高 结 构 化 面 试 信 度 和 效 度 是 面 试 技 术 研 究 的 核 心 内 容 近 年 来 国 内 有 少 数 学 者 探 讨 过 基 于 胜 任 特 征
2 1: 1 7-27 ( 2001) Formosa n Entomol. 2 1 : 1 7-27 (2001) (Orgyia posticus) ( ) * (Orgyia posticus (Walker)) 10 15 20 25 30 35 12L : 12D 25 5 10-35 64.1 40.0 26.2 16.2 16.2 21.1 19.6 16.0 8.2 6.9 6.0
标题
第 33 卷 第 3 期 医 学 研 究 与 教 育 Vol.33 No.3 2016 年 6 月 Medical Research and Education Jun.,2016 本 文 引 用 : 张 建 红, 刘 盼 英, 李 远, 等. 真 性 红 细 胞 增 多 症 的 中 医 辨 证 用 药 规 律 与 转 化 医 学 研 究 [ J ]. 医 学 研 究 与 教 育, 2016, 33
高齡長者輔具使用
1 高 齡 長 者 輔 具 使 用 Hsiu-Yun Hsu, Ph.D., OTR. Department of Physical Medicine and Rehabilitation, National Cheng Kung University Hospital 2016-4-23 大 綱 2 老 化 對 身 體 所 造 成 的 影 響 長 者 在 日 常 生 活 所 面 臨 之 困 難 輔
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绎 1. 110032 2. 100029 3. 100045 4. 300193 5. 116023 6. 510120 7. 110004 8. 250011 9. 210029 10. 200032 11. 510405 12. 210008 13. 201102 14. 300074 13 3 1~2 doi: 10.11842/wst.2013.05.039 R725.6 A World
1 y ml / h kg x mg /d y 2. 5 ml / h kg 0. 3 ml / h kg y = 0. 143 + 0. 046 x r = 0. 994 7 10 PAVELKA 2 Wistar 5 Br - Cl - HCO3 - ClO - 4 SCN - 14 d 82
1006-446X 2011 10-0001-021 1 2 1. 201800 2. 201800 2001 2010 80% 8 5 O 613. 43 R 969 A 1857 1912 1980 20 1 1. 1 SOREMARK 1960 12 d 1 SANGSTER 1983 10 d MAY 1992 8 ~ 14 d 6 ~ 8 d RAUWS 1975 91 mg /kg 3
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 料 ), 山 西 皇 城 相 府 药 业 有 限 公 司, 批 号 20111003 ( 人 口 服 推 荐 剂 量 为 每 日 3 次, 每 次 4 粒, 成 人 体 质 量 按 60
Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治 疗 作 用 研 究 * 刘 聪, 岳 永 花, 郝 旭 亮 山 西 省 中 医 药 研 究 院, 山 西 太 原 030012 摘 要 : 目 的 探 讨 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治
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助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
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基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting