前处理方法 1 QuEChERS 样品前处理 : a 取 2~3g 样品 +15mL H2O( 水果蔬菜等水分比较 大的样品可以不加 )+15mL 乙腈 ( 内含 1% 的乙酸 ); 后进样 b 加入 MgSO4 6g, 醋酸钠 1.5g, 加入陶瓷子几粒 c 快速振摇, 力度频率要大 d 离心 5

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1 复合质谱 QTRAP 在 339 种中国常见农残筛查的整体解决方案 ( 新国标 GB ) Total Solution of QTRAP on Pesticides Residues Screening (GB ) 引言近年来, 豇豆农残超标, 茶叶农残超标, 果汁农残超 标, 葡萄酒农残超标等农药残留超标事件屡屡发生, 由于 农药残留对人 生物以及环境危害很大, 各国对农药的使 用都进行严格的管理, 我国非常重视农产品质量安全, 在 风险评估项目中进行农药残留的筛查和确证 根据 食品安全法 规定, 经食品安全国家标准审 评委员会审查通过, 现发布 食品安全国家标准食品中 农药最大残留限量 (GB ), 自 2014 年 8 月 1 日起开始施行, 被称为史上最严的农残国标 2014 农残 新国标扩大了食品农产品种类, 新增加了农药种类和限量 指标, 重点增加了蔬菜 水果等鲜食农产品的限量标准, 基本与国际标准接轨 在农药筛查的实际筛查过程中, 一般常常认为农药 离子对 出峰 即为检出, 即为阳性结果, 但在实际检测 过程中由于基质的复杂和干扰较大, 经常会出现假阳性现 象, 进而影响筛查结果的正确性和筛查报告的严谨性 本筛查方法将 GB 农残新国标规定的适合 液质电离的农残,1987 至今登记的常用农药, 以及中国各 实验室常筛查的农药一一归类, 将适合液质检测的 339 种 农残建立筛查方法和筛查流程, 建立复合质谱 QTRAP 的 整体解决方案, 解决了实际筛查样品中阳性样品判断 本筛查方法有以下几个特点 : 1 筛查种类囊括了 GB 农残新国标 1987 至今水果蔬菜中国登记农药以及中国常见农残共 339 种 2 快速样品前处理, 提高了筛查效率 3 复合质谱 QTRAP 独有的筛查流程, 快速解决了 复杂样品的假阳性问题 程海燕, 杨总, 李立军, 刘华芬 AB SCIEX, 北京, 中国 2 QTRAP 独有的 MRM-IDA-EPI( 或 SMRM-IDA-EPI) 的工作流程, 是进行农残筛查的必备解决方案 3 库检索, 经过正匹配和反匹配, 得出综合匹配度, 有 效的消除了假阳性结果, 使筛查结果更加可靠 实验思路 : 1 复合型质谱 QTRAP 能够实现一针进样, 完成筛查的同时, 进行二级搜库确证, 大大节省了工作时间, 提高工作效率 4 自动给出检测报告, 包括样品 MRM 图和库检索报告

2 前处理方法 1 QuEChERS 样品前处理 : a 取 2~3g 样品 +15mL H2O( 水果蔬菜等水分比较 大的样品可以不加 )+15mL 乙腈 ( 内含 1% 的乙酸 ); 后进样 b 加入 MgSO4 6g, 醋酸钠 1.5g, 加入陶瓷子几粒 c 快速振摇, 力度频率要大 d 离心 5min,8000 转 /min e 取 8ml 加入净化管, 振荡, 取上清液进样或稀释 提示 : 比较干净的基质的样品也可不经过净化过程, 稀释后直接进样 2 超声提取 : 取 2~3g 样品, 加入 15-20mL 乙腈超声提取半小时, 离心 5min, 过滤直接上样或稀释后上样 液相条件 色谱柱 : Phenomenex Kinetex C18, 2.1*100mm, 2.6 um 流动相 : A:H 2 O-2mMNH 4 OAc B:MeOH-2mMNH 4 OAc 流速 :300 µl/min 柱温 :40 进样量 :2 µl 质谱条件 : 扫描方式 :MRM-IDA-EPI 或 SMRM-IDA-EPI Turbo V TM ESI 离子源参数 : 气帘气 CUR: 20psi 碰撞气 CAD: Medium IS 电压 :5500V 源温度 :600 雾化气 GAS1:50psi; 增强型子离子扫描范围 :m/z EPI 扫描速度 Da/s CE 能量 35±15 V 化合物信息 : 表 1. MRM 检测液相梯度条件 Time(min) A(%) B(%) 辅助气 GAS2:50psi DP 电压 60 v 表 个农残化合物信息 名称 Name 1 多菌灵 Carbendazim 2 啶虫脒 Acetamiprid 3 吡虫啉 Imidacloprid 4 甲霜灵 Metalaxyl 5 毒死蜱 Chlorpyrifos 6 噻虫嗪 Thiamethoxam 7 烯酰吗啉 Dimethomorph 8 戊唑醇 Tebuconazole 9 苯醚甲环唑 Difenoconazole 10 噁霜灵 Oxadixyl 11 灭蝇胺 Cyromazine 12 霜霉威 Propamocarb 13 腐霉利 Procymidone 14 氟虫腈 Fipronil 15 仲丁威 Fenobucarb 16 抑霉唑 Imazalil 17 三唑磷 Triazophos 18 氟硅唑 Flusilazole 19 丙溴磷 Profenofos 20 腈菌唑 Myclobutanil 21 多效唑 Paclobutrazol 22 十三吗啉 Tridemorph 23 甲基硫菌灵 Thiophanate-methyl 24 二甲戊灵 Pendimethalin 25 克百威 Carbofuran 26 稻瘟灵 Isoprothiolane 27 辛硫磷 Phoxim 28 扑草净 Prometryne 29 烯唑醇 Diniconazole 30 吡丙醚 Pyriproxyfen 31 异丙威 Isoprocarb 32 噻菌灵 Thiabendazole 33 吡唑醚菌酯 Pyraclostrobin 34 虫酰肼 Tebufenozide 35 异菌脲 Iprodione 36 敌百虫 Trichlorfon 37 三环唑 Tricyclazole 38 咪鲜胺 Prochloraz 39 氟啶脲 Chlorfluazuron 40 治螟磷 Sulfotep 2

3 41 地虫硫磷 Fonofos 42 乙霉威 Diethofencarb 43 阿维菌素 Avermectin B1a NH4 44 氧乐果 Omethoate 45 除虫脲 Diflubenzuron 46 甲基异柳磷 Isofenphos-methyl 47 百治磷 Dicrotophos 48 苯硫威 Fenothiocarb 49 苯霜灵 Benalaxyl 50 苯线磷 Fenamiphos 51 除草定 Bromacil 52 敌草胺 Napropamide 53 氟菌唑 Triflumizole 54 环嗪酮 Hexazinone 55 己唑醇 Hexaconazole 56 甲基毒死蜱 Chlorpyrifos-methyl 57 甲基嘧啶磷 Pirimiphos-methyl 58 甲氧虫酰肼 Methoxyfenozide 59 腈苯唑 Fenbuconazole 60 抗蚜威 Pirimicarb 61 克螨特 Propargite 62 喹硫磷 Quinalphos 63 硫双威 Thiodicarb 64 硫线磷 Cadusafos 65 氯吡脲 Forchlorfenuron 66 咪唑菌酮 Fenamidone 67 嘧菌酯 Azoxystrobin 68 噻唑磷 fosthiazate 69 杀扑磷 Methidathion 70 双甲脒 Amitraz 71 烯效唑 Uniconazole 72 氧环唑 Azaconazole 73 异噁草松 clomazone 74 蝇毒磷 Coumaphos 75 莠灭净 Ametryn 76 萎锈灵 Carboxin 77 唑螨酯 Fenpyroximate 78 敌敌畏 Dichlorvos 79 甲胺磷 Methamidophos 80 灭多威 Methomyl 81 乙酰甲胺磷 Acephate 82 嘧霉胺 Pyrimethanil 83 甲萘威 Carbaryl 84 涕灭威亚砜 Aldicarb-sulfoxid 85 涕灭威 Aldicarb 86 乐果 Dimethoate 羟基克百威 3-Hydroxycarbofuran 88 涕灭威砜 NH4 Aldicarb Sulfone 89 甲拌磷 Phorate 90 甲基对硫磷 Parathion-methyl 91 杀螟硫磷 Fenitrothion 92 倍硫磷 Fenthion 93 水胺硫磷 Isocarbophos 94 对硫磷 Parathion 95 三唑酮 Triadimefon 96 二嗪磷 Diazinon 97 灭幼脲 Chlorbenzuron 98 亚胺硫磷 Phosmet 99 马拉硫磷 Malathion 100 哒螨灵 Pyridaben 101 伏杀硫磷 Phosalone 102 嘧菌酯 Azoxystrobin 103 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 Emamectin Benzoate 104 虫螨腈 Chlorfenapyr 105 甲氰菊酯 Fenpropathrin 106 联苯菊酯 Bifenthrin 107 咯喹酮 Pyroquilon 108 禾草敌 Molinate 109 杀虫脒 Chlordimeform 110 霜脲氰 Cymoxanil 111 灭藻醌 Quinoclamine 112 残杀威 Propoxur 113 毒草胺 Propachlor 114 西草净 Simetryn 115 阿特拉津 Atrazine 116 特草定 Terbacil 117 久效磷 Monocrotophos 118 扑灭津 Propazine 119 环草定 Lenacil 120 特丁净 Terbutryn 121 灭线磷 Ethoprophos 122 拿草特 Propyzamide 123 禾草丹 Thiobencarb 124 甲草胺 Alachlor 3

4 125 灭銹胺 Mepronil 126 乙拌磷 Disulfoton 127 二甲酚草胺 Dimethenamide 128 敌菌灵 Anilazine 129 解草嗪 Benoxacor 130 异丙甲草胺 Metolachlor 131 特丁磷 Terbufos 132 三唑醇 Triadimenol 133 苯唑草胺 Mefenacet 134 甲基立枯磷 Tolclofos-methyl 135 苯氧威 Fenoxycarb 136 粉唑醇 Flutriafol 137 四螨嗪 Clofentezine 138 达草灭 Norflurazon 139 丁苯吗啉 Fenpropimorph 140 喹氧灵 Quinoxyfen 141 异恶唑磷 Isoxathion 142 甲基谷硫磷 Azinphos-methyl 143 稻丰散 Phenthoate 144 治螟灵 Sulfotep 145 克瘟散 Edifenphos 146 氯苯嘧啶醇 Fenarimol 147 吡螨胺 Tebufenpyrad 148 联苯三唑醇 Bitertanol 149 哒嗪硫磷 Pyridaphenthion 150 丙环唑 Propiconazole 151 谷硫磷乙酯 Azinphos-ethyl 152 丙胺磷 Isofenphos 153 噻螨酮 Hexythiazox 154 杀铃脲 Triflumuron 155 烯草酮 Clethodim 156 氟醚唑 Tetraconazole 157 喹禾灵 Quizalofop-ethyl 158 定菌灵 Pyrazophos 159 精吡氟氯禾灵 Haloxyfop-P-methyl 160 氟吡酰草胺 Picolinafen 161 氟苯脲 Teflubenzuron 162 丁硫克百威 Carbosulfan 163 精吡氟禾草灵 Fluazifop-butyl 164 乙硫磷 Ethion 165 恶唑菌酮 Famoxadone 166 鱼藤酮 Rotenone 167 苯磺隆 Tribenuron-methyl 168 酮螨酯 Spirodiclofen 169 唑草酮 Carfentrazone-ethyl 170 六伏隆 Hexaflumuron 171 氟虫脲 Flufenoxuron 172 虱螨脲 Lufenuron 173 茚虫威 Indoxacarb 174 对氧磷 Paraoxon 175 绿麦隆 Chlorotoluron 176 草乃敌 Diphenamid 177 双苯唑快 Difenzoquat 178 乙草胺 Acetochlor 179 仲丁灵 Butralin 180 氟酰胺 Flutolanil 181 吡唑硫磷 Pyraclofos 182 敌草快 Diquat 183 二氯吡啶酸 Clopyralid 184 草除灵 Benazolin 185 苯菌灵 Benomyl 186 氧异柳磷 Isofenphos-oxon 187 高效麦草伏甲酯 Flamprop-M-methyl 188 恶草灵 Oxadiazon 189 精恶唑禾草灵 Fenoxaprop-P-ethyl 190 氰氟草酯 Cyhalofop-butyl 191 氟喹唑 Fluquinconazole 192 乙氧氟草醚 Oxyfluorfen 193 胺苯磺隆 Ethametsulfuron-methyl 194 吡草醚 Pyraflufen-ethyl 195 硫环磷 Phosfolan 196 特丁硫磷 Terbufos 197 噻嗪酮 Buprofezin 198 氯菊酯 Permethrin 199 溴氰菊酯 Deltamethrin 200 速灭威 Metolcarb 201 嘧啶磷 Pirimiphos-ethyl 202 二溴磷 Dibrom 203 伐灭磷 Famphur 204 杀虫畏 Tetrachlorvinphos 205 乙嘧硫磷 Etrimfos 206 丙硫磷 Prothiofos 207 环丙唑醇 Cyproconazole 208 丙硫克百威 Benfuracarb 4

5 209 甲硫威 Methiocarb 210 依维菌素 Ivermectin 211 硫丙磷 Sulprofos 212 毒虫畏 Chlorfenvinphos 213 蚜灭多 Vamidothion 214 敌稗 Propanil 215 敌草隆 Diuron 216 氯溴隆 Chlorbromuron 217 戊菌唑 Penconazole 218 氟环唑 Epoxiconazole 219 苯菌灵 Benomy 220 氟喹唑 Fluquinconazole 221 乙螨唑 Etoxazole 222 矮壮素 Chlormequat chloride 223 苯噻酰草胺 Mefenacet 224 苄嘧磺隆 Bensulfuron-methyl 225 咪唑喹啉酸 Imazaquin 226 烟嘧磺隆 Nicosulfuron 227 氯虫苯甲酰胺 chlorantraniliprole 228 氯嘧磺隆 Chlorimuron-ethyl 229 灭草松 Bentazone 230 稀禾定 Sethoxydim 231 丙硫菌唑 Prothioconazole 232 敌瘟磷 Edifenphos 233 氟唑磺隆 Flucarbazone 234 乳氟禾草灵 Lactofen 235 乙虫腈 ethiprole 236 异丙隆 Isoproturon 237 噁唑菌酮 famoxadone 238 氟酰脲 novaluron 239 增效醚 Piperonyl butoxide 240 苯酰菌胺 Zoxamide 241 二氰蒽醌 dithianon 242 噁霉灵 hymexazol 243 苯硫威 fenothiocarb 244 丙硫多菌灵 Albendazole 245 苯氟磺胺 tolylfluanid 246 丁草胺 Butachlor 247 多杀霉素 spinosad 248 氟乐灵 Trifluralin 249 氟啶虫酰胺 flonicamid 250 氯硝胺 Dichloran 251 磷胺 Phosphamidon 252 螺螨酯 Spirodiclofen 253 醚菊酯 Etofenprox 254 内吸磷 demeton 255 溴螨酯 Bromopropylate 256 氟吡菌胺 fluopicolide 257 吲哚乙酸 3-Indoleacetic acid 258 烟碱 nicotine 259 肟菌酯 Trifloxystrobin 260 氟吡菌酰胺 fluopyram 261 氟铃脲 Hexaflumuron 262 氯唑磷 Isazofos 263 精吡氟禾草灵 Fluazifop-p-butyl 264 丁醚脲 diafenthiuron 265 噁草酮 Oxadiazone 266 氟吗啉 flumorph 267 精噁唑禾草灵 fenoxaprop-p 268 嘧菌环胺 Cyprodinil 269 双炔酰菌胺 mandipropamid 270 抑食肼 Benzoic acid 271 唑虫酰胺 Tolfenpyrad 272 氰霜唑 Cyazofamid 273 烯禾啶 sethoxydi 274 啶酰菌胺 Boscalid 275 灭菌丹 Folpet 276 盐酸吗啉胍 Moroxydine hydrochloride 277 噁唑菌酮 famoxadone 278 杀螟丹 cartap 279 乙氧喹啉 Ethoxyquin 280 环酰菌胺 Fenhexamid 281 蚜灭磷 vamidothion 282 烯啶虫胺 Nitenpyram 283 甜菜宁 phenmedipham 284 噻虫啉 thiacloprid 285 乙嘧酚 Ethirimol 286 氰草津 Cyanazine 287 乙硫苯威 Ethiofencarb 288 醚菌酯 Kresoxim-methyl 289 吡草胺 Metazachlor 290 嗪草酮 Metribuzin 291 灭草隆 Monuron 292 草不隆 Neburon 5

6 293 异丙氧磷 Propetamphos 294 灭菌唑 Triticonazole 295 速灭磷 Mevinphos 296 利谷隆 Linuron 297 甲基嘧啶磷 Pirimiphos-methyl 298 嘧菌胺 Mepanipyrim 299 炔螨特 Propargite 300 苯螨特 Benzoximate 335 溴谷隆 Metobromuron 336 双硫磷 Temephos 337 联苯肼酯 Bifenazate 338 醚菌胺 Dimoxystrobin 339 西玛津 Simazine 筛查色谱图 : 2 ppb 农残混标一针进样, 筛查结果色谱图如下所示 : 301 唑螨酯 Fenpyroximate 302 苄氯三唑醇 Diclobutrazol 303 恶唑隆 Dimefuron 304 磺噻隆 Ethidimuron 305 环草隆 Siduron 306 苯菌酮 Metrafenone 307 噻虫胺 Clothianidin 308 恶虫威 Bendiocarb 309 啶酰菌胺 Boscalid 310 吡蚜酮 Pymetrozine 311 特丁通 Terbumeton 冬枣实际样品筛查结果 : 前处理 : 乙腈提取冬枣样品直接上样 一针进样, 利用本方法 339 种农残筛查方法进行筛查, 筛查出 5 个农残, 图谱如下所示 : 312 氟苯嘧啶醇 Nuarimol 313 二氧威 Dioxacarb MRM 总图 314 棉铃威 Alanycarb 315 二胺磷 Diamidafos 316 伏草隆 Fluometuron 317 苯噻菌胺 Benthiavalicarb-isopropyl 318 胺唑草酮 Amicarbazone 增强型子离子 EPI 总图 319 稻瘟酰胺 Fenoxanil 320 呋虫胺 Dinotefuran 321 丁脒酰胺 Isocarbamid 322 仲丁通 Secbumeton 323 丙硫特普 Aspon 筛查出的每个物质 MRM 提取离子流图和相应保留时间的 EPI 图如下所示, 出峰比较高的物质有 4 个 : 324 甲基乙拌磷 Thiometon 325 氯虫苯甲酰胺 Chlorantraniliprole 326 乙环唑 Etaconazole 327 避蚊胺 DEET 328 双炔酰菌胺 Mandipropamid 329 乙氧苯草胺 Etobenzanid 330 禾草畏 Esprocarb 331 氟啶虫酰胺 Flonicamid 332 胺菊酯 Tetramethrin 333 扑灭通 Prometon 334 噻苯隆 Thidiazuron 6

7 EPI 谱图右键直接搜库, 经库搜索, 保留时间 8.07min 的 化合物 1, 经库比对匹配度为 91%, 筛查结果为农残多菌 灵 (carbendazim) 库比对结果图如下所示 : 样品的 EPI 谱 样品的 EPI 谱 谱库中的 EPI 谱 谱库中的 EPI 谱 经库比对, 保留时间 12.28min 的化合物 2, 经库比对匹配 度为 95%, 筛查结果为农残戊唑醇 (Tebuconazole) 库比对结果图如下所示 : 经库比对, 保留时间 13.03min 的化合物 4, 经库比对匹配度为 97%, 鉴定筛查结果为农残苯醚甲环唑 (Difenoconaz ole) 库比对结果图如下所示 : 样品的 EPI 谱 样品的 EPI 谱 谱库中的 EPI 谱 谱库中的 EPI 谱 经库比对, 保留时间 12.70min 的化合物 3, 经库比对匹配度为 51%, 经二级碎片一一比对, 虽受基质干扰匹配度较低, 但鉴定筛查结果为农残咪鲜胺 (Prochloraz) 库比对结果图如下所示 : 在筛查图谱中, 除了含量较大的以上四个农残外, 还筛查 出一个含量较低的农残, 如下图所示 : 7

8 14.01min 筛出的特丁磷 (Terbufos) 离子对虽出峰, 但是 库检索结果匹配度较低 39%, 且特征峰 无法匹配成 功, 经鉴定此峰不是特丁磷, 此结果为假阳性结果 结论 复合型质谱 QTRAP 即具有三重四极杆的功能又有线性离子阱的功能, 其复合扫描方式 MRM-IDA-EPI 是进行农残筛查的首选, 一针进样, 既能完成筛查, 又能进行确证 QTRAP 对于筛查出来的物质, 同时采集该物质的高中低三个能量的复合二级图谱, 且二级图谱为离子阱功能的增强型子离子扫描, 弥补了三重四极杆类仪器低含量农残在高选择的 MRM 扫描方式出峰, 但无法得到好的二级质谱图的缺陷 本方法包括了 GB 农残新国标规定的适合液质电离农残,1987 至今登记的常用农药, 以及中国各实验室常筛查的农药, 共 339 种农残, 确保了水果蔬菜谷物等基质中农药的筛查, 且 QTRAP 独有的复合扫描方式, 消除了筛查过程的假阳性现象, 保证了筛查结果的准确, 快速, 高效, 一针进样, 即可完成全部筛查过程,AB SCI EX 为农残筛查提供的整体解决方案 冬枣实际样品筛查报告 : 8

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print p 真 (3Cx, 0535-(388435 第 1 页 - w 5 页 1 戊菌隆 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 2 甲拌磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 3 k 氯硝基苯 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 4 地虫硫磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 5 艾氏剂 0.0125

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