2 进行快速的数据分析本文介绍了完整的多农药残留的测定方法的内部方法验证结果, 以及对方法性能参数的评估 3. 范围本方法验证研究的目的是证明一种能应用在一些有代表性的基质 ( 草莓小麦粉和韭菜 ) 中的多农药残留 ( 大约 140 种优先的农药 ) 的日常分析的完整工作流程及解决方案 (

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韵季
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气相色谱 - 三重四极杆质谱联用技术测定农药残留的方法验证 Laszlo Hollosi, Katerina Bousova, Michal Godula 赛默飞世尔科技, 食品安全应用中心, 德国 Dreieich Application Notes CM0104 关键词 TraceFinder,TSQ8000, 气相色谱,GC,GC-MS/MS, 农药残留, QuEChERS, 三重四极杆

1 气相色谱 - 三重四极杆质谱联用技术测定农药残留的方法验证 Laszlo Hollosi, Katerina Bousova, Michal Godula 赛默飞世尔科技, 食品安全应用中心, 德国 Dreieich Application Notes CM0104 关键词 TraceFinder,TSQ8000, 气相色谱,GC,GC-MS/MS, 农药残留, QuEChERS, 三重四极杆 1. 方法示意图均质样品 + IS 1. 称取 10 g 样品到 50 ml 萃取管中萃取 2. 加入 9.8 ml 乙腈 ( 小麦粉加入 20 ml 水 + 10 ml 乙腈 ) 和 200 µl IS 储备液 3. 振荡 10min, 在 5000 rpm 转速下离心 5min 净化 4. 将上清液转移到 15 ml 净化管 5. 样品在 5000 rpm 转速下离心 5min 6. 将上清液转移到 GC 进样瓶中 7. 加入 50 µl 山梨醇和 20 µl 进样标准溶液 GC-MS/MS 2. 前言食品中农药残留的分析是实验室日常工作中最重要和最具挑战性的任务之一欧洲法规规定了植物和动物来源的各种产品中农药的最大残留限量 (MRL), 是目前世界上最严格的法规 ( 欧洲法规 396/2005 和指令 2006/125/ EC) 这些法规要求一些特定的食品基质有很低的定量检出限 (LOQ), 针对这些基质的分析是一个很大的挑战目前已经有各种各样的 GC 和 HPLC 方法结合各种样品前处理和净化技术用于多种农药残留的测定近年来, QuEChERS 方法被广泛的应用在水果和蔬菜的样品前处理, 但是随着对测定方法的灵敏度和准确度的要求越来越高, 同样需要仪器生产厂商不断进步本文方法中样品前处理采用 QuEChERS 试剂盒, 样品测定采用最新开发的 Thermo Scientific TM TSQ TM 8000 Pesticide Analyzer 系统, 并采用 Thermo Scientific TM TraceFinder TM 软件

2 2 进行快速的数据分析本文介绍了完整的多农药残留的测定方法的内部方法验证结果, 以及对方法性能参数的评估 3. 范围本方法验证研究的目的是证明一种能应用在一些有代表性的基质 ( 草莓小麦粉和韭菜 ) 中的多农药残留 ( 大约 140 种优先的农药 ) 的日常分析的完整工作流程及解决方案 ( 由 Thermo Scientific 化学品消耗品和仪器提供 ) 此方法符合现行法规的要求, 方法的检出限 (LOQ) 与 MRL 值一致, 具有良好的灵敏度原理取出部分事先均质好的样品 ( 对一些不稳定的, 建议在低温下研磨 ), 采用标准的 QuEChERS 方法 ( 萃取和净化 ) 进行样品前处理, 然后进样到 TSQ 8000 Triple- Stage Quadrupole GC-MS/MS 系统 5,6 现成的 QuEChERS 试剂盒包括萃取管和净化管, 以及相关的样品前处理操作方法 ( 赛默飞世尔科技, 英国 Runcorn) 农药残留的鉴定是基于保留时间, 并用特征离子对在选择反应监测 (SRM) 模式下的离子比进行验证, 而定量采用的是基质匹配校准曲线和内标法所有的方法性能标准是根据相关的指导方针而设定的 1-4,7 5. 试剂列表产品号 5.1 丙酮,HPLC 级 A/0606/ 乙腈,LC-MS 级 A/0638/ 甲醇,Optima LC-MS 级 A 甲苯,HPLC 级 T/2200/ 水,LC-MS 级 W/0112/ 山梨醇,500 g 标准样品单 6.1 农药所有单个的农药均购自 Sigma-Aldrich ( 德国 ) 和 Laboratory Instruments Srl ( 意大利 CASTELLANA GROTTE), 包括乙酰甲胺磷氟丙菊酯双甲脒保棉磷嘧菌酯联苯菊酯联苯三唑醇啶酰菌胺溴螨酯溴菌唑乙嘧酚磺酸酯噻嗪酮硫线磷克菌丹西维因克百威萎锈灵虫螨腈毒虫畏乙酯杀螨醇百菌清氯苯胺灵乙基毒死蜱甲基毒死蜱氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯氯氰菊酯环丙唑醇嘧菌环胺滴滴滴滴滴伊滴滴涕溴氰菊酯甲基内吸磷二嗪磷苯氟磺胺氯硝胺二氯二苯甲酮敌敌畏开乐散苯醚甲环唑乐果烯酰吗啉二苯胺硫丹硫丹硫酸盐苯硫磷氟环唑乙硫磷灭线磷醚菊酯苯线磷苯线磷砜苯线磷亚砜氯苯嘧啶醇腈苯唑杀螟硫磷苯氧威甲氰菊酯苯锈啶丁苯吗啡倍硫磷氰戊菊酯氟虫腈咯菌腈氟喹唑氟硅唑氟酰胺粉唑醇氟胺氰菊酯灭菌丹 α- 六六六,β- 六六六,γ- 六六六 ( 林丹 ) 己唑醇抑霉唑异菌脲甲基异柳磷醚菌酯利谷隆马拉硫磷嘧菌胺甲霜灵虫螨畏甲胺磷杀扑磷灭虫威嗪草酮久效磷腈菌唑邻苯基苯酚噁草酮噁霜灵多效唑甲基对氧磷对硫磷 ( 乙基 ) 甲基对硫磷二甲戊灵氯菊酯稻丰散伏杀硫磷亚胺硫磷磷胺抗蚜威对脱甲基抗蚜威甲基嘧啶磷咪酰胺腐霉利丙溴磷炔螨特丙环唑炔苯酰草胺丙硫磷唑菌胺酯哒螨灵嘧霉胺吡丙醚喹氧灵螺螨酯戊唑醇虫酰肼吡螨胺七氟菊酯四氟醚唑三氯杀螨砜四氢酞酰亚胺噻苯咪唑甲基立枯磷甲苯氟磺胺三唑酮三唑醇肟菌酯氟乐灵灭菌唑乙烯菌核利 6.2 内标物 1- 溴 -4- 氟苯 (BFB) 和磷酸三苯酯 (TPP)( 购自 Sigma- Aldrich, 德国 ) 6.3 质量控制材料 FAPAS #19140QC ( 生菜 ), FAPAS #19141QC ( 青刀豆 ) 和 FAPAS #19142QC ( 瓜泥 ) 注意 :FAPAS 样品的选择主要是基于目标农药成分的含量但是由于样品有限, 选择的基质与验证的基质稍有不同

3 3 7. 标准样品和试剂配制 7.1 单个农药标准储备液在十万分之一分析天平上称取每种农药单标 10 mg, 分别倒入到 20 ml 棕色螺口带盖样品瓶中, 加入 10 ml 相应的溶剂 ( 根据不同的加入丙酮甲苯或者乙腈 ) 溶解, 配制成浓度为 ~ 约 1000 mg/l 的溶液每种单个标准储备液的浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得到所有单标储备液在 -20 冰箱中冷冻保存单标储备液的有效期为 6 个月 7.2 中间标准储备液和工作标准溶液移取适量的单标储备液, 用乙腈稀释中间标准储备液的浓度为 5000 ng/ml 进一步稀释配制得到工作标准溶液中间标准储备液在 -20 冰箱中冷冻保存, 工作溶液保存在 4 冰箱中中间储备液的有效期为 3 个月 7.3 单个内标物储备液在十万分之一分析天平上称取每种农药单标 10 mg, 分别倒入到 20 ml 棕色螺口带盖样品瓶中, 加入 10 ml 丙酮到 TPP 中, 加入 10 ml 甲苯到 BFB 中, 配制成浓度为 ~1000 mg/l 的溶液溶液的准确浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得到所有单个内标物储备液在 -20 冰箱中冷冻保存单个内标物储备液的有效期为 6 个月 7.4 内标物工作标准储备液分别移取适量的单个标准储备液, 用乙腈稀释内标物工作标准储备液的浓度为 5000 ng/ml, 可直接用于样品的加标工作储备液的有效期为 3 个月 7.5 1% 山梨醇溶液 ( 分析物保护剂 ) 在体积比为 70/30% 的乙腈 / 水溶液中配制, 进样前加入样品中进样前加入保护剂溶液的目的是防止分析物的交互反应和进样过程中的损失 8 8. 仪器产品号 8.1 Fisher 精密天平 XP-1500FR 8.2 赛多利斯分析天平 ME235S 8.3 Thermo Barnstead EASYpure II water ULTRA-TURRAX G25 解胶工具 ULTRA-TURRAX 旋涡震荡仪旋涡通用盖水平震荡仪水平震荡仪板 Thermo Heraeus Freco 17 微型离心机 TPesticide Analyzer (TSQ 8000 Triple Stage Quadrupole GC-MS 配备 Thermo Scientific TM TRACE TM 1310) 9. 耗材产品号 9.1 GC 进样瓶 Finnpipette 移液器 μl Finnpipette 移液器 μl Finnpipette 移液器 μl 移液器架移液器枪头 μl, 500 支 / 盒移液器枪头 1 5 ml, 75 支 / 盒移液器枪头 μl, 200 支 / 盒刮刀,18/10 不锈钢刮刀, 尼龙离心管架 QuEChERS 萃取管,50 ml,250 个装 QuEChERS 净化管,15 ml,50 个装气相色谱柱 Thermo Scientific TM TraceGOLD TM TG-5SilMS, 30 m 0.25mm 0.25 um 9.15 PTV Baffle Liner (Siltek), 去活化, 453T mm 内径 2.75 mm 外径 120 mm 长 ml 样品瓶架玻璃器皿产品号 10.1 容量瓶,10 ml FB 容量瓶,25 ml FB ml 螺口带盖样品瓶 ml 螺口带盖样品瓶瓶盖 ml 试剂瓶 ml 试剂瓶

4 4 11. 实验步骤 11.1 样品前处理用于方法验证实验的空白基质样品 ( 草莓 (SB), 小麦粉 (WF) 和韭菜 (LK)) 购自当地零售商店在样品前处理前, 将空白基质样品在 Ultra-Turrax 均质器上均质处理提取和净化基质提取物用于基质空白样品, 稀释溶剂用于基质匹配校准样品前处理采用现成的 Thermo Scientific QuEChERS 萃取试剂盒, 包括 4 g MgSO 4,1 g NaCl,1 g 无水柠檬酸三钠和 0.5 g 柠檬酸二钠组成的缓冲剂, 用于目标的萃取预先准备好的净化管含有 1200 mg MgSO 4,400 mg PSA 和 400 mg C18, 用于提高更复杂的样品基质的净化效率, 如韭菜所有的样品基质采用同样的 QuEChERS 方法样品基质的均质选取较大量的草莓 ( 约 500 g) 和一把韭菜基质, 加入到适当大小的烧杯中, 贴上标签在 Ultra-Turrax 均质器上装上 G25 解胶工具 ( 建议一些不稳定的采用冷冻均质以提高回收率 ) 中等速度 ( 速度水平 2-3) 下开始均质, 直到形成光滑的匀浆样品萃取和净化称取 10 g 样品到 50 ml QuEChERS 萃取管中萃取管中含有 4 g MgSO 4,1 g NaCl,1 g 无水柠檬酸三钠和 0.5 g 柠檬酸二钠在样品中加入 200 µl 5000 ng/ml 的内标物 # 在 SB 和 LK 样品中加入 10 ml ACN 对于 WF 样品, 先加 20 ml 水使样品完全湿润, 然后加入 10 ml ACN 样品在水平震荡仪上震荡 10 min, 然后在 5000 rpm 转速下离心 5 min 将上清液( 约 8 ml) 转移到 15 ml QuEChERS 净化管, 净化管中包括 1200 mg MgSO 4,400 mg PSA 和 400 mg C 旋涡震荡样品 1 min, 然后在 5000 rpm 转速下离心 5 min 收集上清液, 取 1 ml 加入到 GC 进样瓶中, 用于仪器分析进样前在样品瓶中加入 50µL 山梨醇溶液 ( 保护剂 ) 和 20 µl 5000 ng/ml 进样标准溶液 (BFB) 11.2 GC-MS/MS 分析样品测定采用 TRACE 1310 气相色谱与 TSQ 8000 三重四极杆质谱仪联用技术 ( 农药残留分析手册 ) 仪器控制数据采集数据处理和报告采用 TraceFinder 3.1 软件 GC 方法设置进样器参数设置如下 : 进样器 : Thermo Scientific TM TriPlus RSH 自动进样器, 带 10 µl 进样针衬管 : PTV Baffle Liner (Siltek), 去活化, 2 mm ID 2.75 mm OD 120 mm 长 ( 建议基质样品进样 40 次后更换 ) 进样模式 : 不分流 PTV, 基本模式载气模式 : 恒流进样口温度 : 75 分流流速 : 50 ml/min 不分流时间 : 1 min 进样体积 : 1 µl 排气泡次数 : 3 空气通入模式 : 自动载气流速 : 1.2 ml/min PTV 进样时间 : 0.1 min PTV 传输速率 : 2.5 /s PTV 传输温度 : 300 PTV 传输时间 : 3 min PTV 清洗速率 : 14.5 PTV 清洗温度 : 330 PTV 清洗时间 : 20 min PTV 清洗流速 : 75 ml/min PTV 清洗状态 : 温度降低后循环 GC 柱温箱设置如下 : 载气 : 1.2 ml/min 氦气 ( 恒流 ) PTV 清洗状态 : 温度降低后循环表 1. GC 程序升温设置 # 升温速率 ( /min) 温度 ( ) 保持时间 (min) 初始

5 三重四极杆 MS 设置质谱检测使用 TSQ 8000 三重四极杆质谱仪的 Timed-SRM 模式完成所有的方法和 SRM 设置来自 Thermo Scientific TSQ 8000 Pesticide Analyzer 系统 6 离子比值根据每种待测基质进行修改和设置参数设置如下 : 扫描类型 : timed-srm( 详情见表 2) 离子化 : EI + MS 传输线温度 : 250 离子源温度 : 300 循环时间 : 最小基线峰宽 : 0.3 s 3 s 单峰所需扫描 : 10 最小驻留时间 : Q1 分辨率 : s 常规 (0.7 Da) 11.3 结果计算目标农药的定量采用内标法相对响应因子 (R f ) 的定义见如下列方程按照如下方程计算最终结果方程响应因子的计算 : A R f = A St [IS] + + c c [IS] St 样品含量的计算 ( 样品中农药的绝对量 ): A X = analyte analyte A IS X C = m + + X analyte 样品中农药的绝对量 A analyte 样品中农药的峰面积 A [IS] 样品中内标物的峰面积 X [IS] 加入到样品中的内标物的绝对量 analyte X R 样品含量的计算 ( 样品中农药的绝对量 ): m 样品重量 [g] X analyte 分析物的绝对量 [ng] 12. 方法性能特征本文针对所有基质和目标农药成分完成了内部方法验证方法性能标准参考欧洲关于单个实验室方法验证和农药残留分析的指导方法 1,2 所有方法性能参数都与相关法规要求和最大残留限量 (MRLs) 进行了对比 2-4,7 对于有多种异构体的, 只采用一种性能标准 f IS R f 相对响应因子 A st 校准标样中农药的峰面积 A [IS] 校准标样中内标物的峰面积 C st 校准标样溶液中农药的浓度 C [IS] 校准标样溶液中内标物的浓度 12.1 选择性方法 ( 选择反应监测 SRM) 选择性的评估是基于在相对应保留时间下的特定离子对 ( 定量离子和用于确认的两个离子对 )( 表 2), 以及与标准样品相对应的离子比值的测定值保留时间和离子比值的可接受范围的标准是根据现行质量控制标准而设立的 1,3 基质空白样品在目标物的保留时间位置附近的干扰峰应小于 LOQ 的 30% ( 按照 SANCO 指导方针的定义 ) 3 空白样品在如下目标峰附近出现了其它峰 : 氯苯胺灵 (LK) 甲基内吸磷(SB) 环酰菌胺 (WF,LK) 杀螟硫磷(WF,LK) 腐霉利(WF) 伏杀硫磷 (SB) 氯菊酯(WF,LK) 甲氰菊酯(LK) 邻苯基苯酚 (WF) 和克百威 (SB,WF) 但是除了 SB 和 WF 基质中的克百威和 WF 和 LK 基质中的炔螨特, 这些峰都明显与目标峰的保留时间分离开了 (Rs >1.5)

6 线性, 响应因子, 基质效应校准曲线建立在六个浓度水平上 ( 基质匹配 ), 每个浓度平行进样两次根据所有基质和内标物的校准曲线, 在整个校准范围内计算了累加平均响应因子做为内标的 R f 值校准浓度范围分别为 0-200, 和 ng/g 的三组 ( 取决于相关 MRL 值 ) 分别制备了校准曲线 ( 具体结果见表 3) 校准标样浓度水平的选取为校准曲线范围内等距离分布线性函数采用曼德尔拟合方法, 曲线残差应小于可接受限的 20% 3 此外, 由于没有相关法规的规定, 将相关系数值的最低限设定为由于与校准标样浓度水平相关的 LOQ 值太高, 设定标准不适合甲氰菊酯和苯氟磺胺 (LK), 以及炔螨特 (WF) 没有采用加权函数基质效应采用尤登图进行评估, 以配制在溶剂中和相关基质中的校准标样的相对峰面积测定值作图如果拟合线性与理想曲线 (y=x) 斜率的差别 (dif%) 小于 20%, 则认为没有基质效应 ; 当差别在 20-50% 之间时, 有较小基质效应 ; 当差别超过 50%, 有较大基质效应基质效应的结果如表 3 所示对于已证明有基质效应的, 要求采用基质匹配校准曲线 12.3 准确度方法的准确度用回收率实验进行评估, 在空白基质中加入三个浓度水平的标样 (L1,L2 和 L3), 每个浓度平行配制并进样六次 ( 表 4) 在样品前处理之前加入标样计算得到测定浓度回收率和相对标准偏差 (%RSD) 如表 5 所示根据 SANCO 的要求, 回收率在 % 之间被认为是可以接受的 3 只有加标的浓度水平高于基质中的 LOQ 时才计算回收率由于加标浓度水平比 LOQ 值更低, 没有得到 WF 中的双甲脒和 LK 基质中的克菌丹百菌清和甲苯氟磺胺的回收率值一些情况下, 基质对结果有很大影响, 由于不同基质测定的 LOD/LOQ 值有所差别, 有一到两个加标浓度下没有得到回收率值 ( 详见表 4) 对于日常测定这些基质中的这几个, 则需要采用其余的方法, 特别是优化的分析方法采用从 FAPAS ( 英国约克郡 ) 获得的外部质量控制材料确定方法偏差这些 FAPAS 材料包括 #19140QC( 生菜泥 ),#19141QC( 青刀豆泥 ) 和 #19142QC( 瓜泥 ) 这些材料只代表一定数量的目标和含有这些的不同基质但是, 除了克百威的测定值稍低于标准范围, 其余所有情况下的测定都很好的符合规定值这可能是由于两种不同基质特性的差异引起的 FAPAS 测定值详见表精密度将低浓度的标样溶液 (L1) 连续进样 (n=6) 测定所有目标的保留时间和峰面积, 计算得到仪器的进样精密度在没有内标补偿的情况下, 所有的仪器进样精密度测定中, 保留时间低于 0.5%, 峰面积在 % 之间 ( 氟虫腈和苯线磷亚砜 ), 显示了可靠的仪器性能连续三天测定分别配制的中等加标浓度 (L2) 的各个基质样品 (n=6), 得到方法的日内和日间精密度值, 用 %RSD 表示取三天内每天测定结果的平均精密度的平均值做为平均日内精密度, 而日间精密度则为所有精密度数据的平均值按照 SANCO 的要求, 所有的目标和基质的精密度的可接受标准为 <20% 3 精密度测定值见表检出限, 定量检出限按照 IUPAC 方法测定检出限和定量检出限方法 LOD 和 LOQ 的测定值, 以及相关法规限值 (MRLs) 如表 6 所列 7 对于没有法规规定 MRL 值的, 将 MRL 目标值设定为 10 ng/g 绝大多数目标都符合 MRL 值, 至少与 LOQ 值一样的要求灭虫威 (WF,LK) 克百威(SW) 噁霜灵 (WF) 和炔螨特 (WF,LK) 的 LOQ 值超出 MRL 值要求但是, 交换定量和定性离子也能达到目标值甲氰菊酯 (WF,LK), 双甲脒 (WF) 和虫酰肼 ( 所有基质 ) 即使交换了定量和定性离子仍然达不到目标值

7 耐用性耐用性实验通过改变一些参数来测定, 如实验人员提取和净化批次结果与原方法进行对比, 采用 ANOVA 分析是否存在显著性差异这些参数的变化不会导致测量值的显著性差异, 显示了良好的方法耐用性 13. 结论本文完成了用于日常农药残留测定的方法的完整内部验证研究的目的是客观可靠地评价一种广泛使用和接受的样品前处理方法配合先进的分析仪器的方法分析性能方法性能参数显示大多数目标的性能符合现行法规的要求采用独立的外部质量控制材料提高了测定结果的可信赖程度在一些情况下, 由于的特性和基质对分析结果的较大影响, 无法确定方法性能参数或者测定值落到目标范围以外对这些 ( 在相关基质中 ), 必须单独优化前处理方法 ( 额外或特殊的净化 ) 和仪器分析方法从实际操作上来说 ( 特别是针对不稳定或活性 ), 可以在每次进样后更换衬管 ( 和隔垫 ) 以获得最佳的性能总而言之, 由赛默飞世尔科技提供的完整工作流程解决方案连同最新开发的 TSQ 8000 GC-MS/MS 系统为目标的分析和准确定量带来了良好的系统性能, 特别是在灵敏度选择性和回收率方面 14. 参考文献 1. European Commission 2002/657/EC 2. European Commission 2006/125/EC 3. European Commission SANCO/12495/ European Commission 788/2012/EC 5. Fussell et al. (2007) Food Additives & Contam, 24: Thermo Scientific TSQ 8000 Pesticide Analyzer Brochure, static.thermoscientific.com/images/d22018~.pdf 7. EU Pesticides Database, public/index.cfm 8. Anastassiades et al. (2003) J. Chromatogr A, 1015:

8 8 15. 附录图表表 2. 目标的选择性参数 * 所有异构体的保留时间 ** 内标名称 RT (min) 定量离子定量离子 1 定量离子 2 离子比 ( 定量离子 1/ 定量离子 2) [% 定量离子 ] 乙酰甲胺磷 /99 氟丙菊酯 /52 双甲脒 /78 保棉磷 /120 嘧菌酯 /250 联苯菊酯 /400 联苯三唑醇 /40 啶酰菌胺 /350 溴螨酯 /600 溴菌唑 21.87/ 22.6* /150 磺嘧菌灵 /60 噻嗪酮 /75 硫线磷 /15 克菌丹 /130 西维因 /400 克百威 /120 萎锈灵 /100 溴虫腈 /30 毒虫畏 /80 乙酯杀螨醇 /440 百菌清 /160 氯苯胺灵 /45 乙基毒死蜱 /135 甲基毒死蜱 /55 氟氯氰菊酯 /25 三氟氯氰菊酯 /80 氯氰菊酯 27.28/ 27.53/ 27.63/ 27.72* /50 环丙唑醇 /210 嘧菌环胺 /40 p,p'- 滴滴滴 /48 p,p'- 滴滴伊 /30 p,p'- 滴滴涕 /48 溴氰菊酯 /35 甲基内吸磷 /25 二嗪磷 /10

9 9 表 2 接上表 * 所有异构体的保留时间 ** 内标名称 RT (min) 定量离子定量离子 1 定量离子 2 离子比 ( 定量离子 1/ 定量离子 2) [% 定量离子 ] 苯氟磺胺 /120 氯硝胺 /160 p,p - 二氯二苯甲酮敌敌畏 /16 氰戊菊酯 /160 苯醚甲环唑 29.51/ 29.62* /220 乐果 /55 烯酰吗啉 /31.00* /130 二苯胺 /550 硫丹 17.19/ /120 硫丹硫酸盐 /550 苯硫磷 /210 氟环唑 /300 乙硫磷灭线磷 /70 醚菊酯 /350 苯线磷 /50 苯线磷砜 /420 苯线磷亚砜氯苯嘧啶醇 /80 腈苯唑 /370 杀螟硫磷 /48 苯氧威 /60 甲氰菊酯 /92 苯锈啶 /1850 粉锈啶 /300 倍硫磷 /500 氰戊菊酯 /300 氟虫腈 /65 咯菌腈 /160 氟喹唑 /65 氟硅唑 /350 氟酰胺 /56 粉唑醇 /72

10 10 表 2 接上表 * 所有异构体的保留时间 ** 内标名称 RT (min) 定量离子定量离子 1 定量离子 2 离子比 ( 定量离子 1/ 定量离子 2) [% 定量离子 ] 氟胺氰菊酯 29.03/ 29.16* /35 灭菌丹 /62 α- 六六六 β- 六六六 γ- 六六六 _ 林丹己唑醇 /1100 抑霉唑 /130 异菌脲 /22 甲基异柳磷 /70 醚菌酯 /102 利谷隆 /120 马拉硫磷 /300 嘧菌胺 /41 甲霜灵 /80 虫螨畏 /40 甲胺磷 /520 杀扑磷灭虫威 /554 塞克津 /100 久效磷 /350 腈菌唑 /60 邻苯基苯酚 /100 草酮 /52 霜灵 /260 多效唑 /90 甲基对氧磷 /110 ( 乙基 ) 对硫磷 /48 甲基对硫磷 /60 二甲戊灵 /85 氯菊酯 /25.64* /105 稻丰散 /120 伏杀硫磷 /190 亚胺硫磷 /110 磷胺 /100 抗蚜威 /230 脱甲基抗蚜威 /120 甲基嘧啶磷 /70 咪酰胺 /10 腐霉利 /65

11 11 表 2 接上表 * 所有异构体的保留时间 ** 内标名称 RT (min) 定量离子定量离子 1 定量离子 2 离子比 ( 定量离子 1/ 定量离子 2) [% 定量离子 ] 丙溴磷 /35 炔螨特 /110 丙环唑 20.19/ 20.39* /155 炔苯酰草胺 /190 丙硫磷 /160 唑菌胺酯 /220 哒螨灵 /58 嘧霉胺 /120 吡丙醚 /10 喹氧灵 /33 螺螨酯 /105 戊唑醇 /110 虫酰肼吡螨胺 /31 七氟菊酯 /40 四氟醚唑 /100 三氯杀螨砜 /252 四氢酞酰亚胺 (THPI) /80 噻苯咪唑 /700 甲基立枯磷 /80 甲苯氟磺胺 /110 三唑酮 /120 三唑醇肟菌酯 /40 氟乐灵 /900 磷酸三苯酯 (TPP)** /62 灭菌唑 /120 乙烯菌核利

12 12 表 3. 线性和基质效应结果 ( 尤登图斜率结果详见正文 12.2) - 残差图 RSD%<20% - 残差图 RSD% >20% 校准范围 [ng/g] r2 草莓小麦粉韭菜残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] 乙酰甲胺磷氟丙菊酯双甲脒 n.d. n.d. n.d 保棉磷嘧菌酯联苯菊酯联苯三唑醇啶酰菌胺溴螨酯溴菌唑磺嘧菌灵噻嗪酮硫线磷克菌丹 n.d. n.d. n.d. 西维因克百威萎锈灵溴虫腈毒虫畏乙酯杀螨醇百菌清 n.d. n.d. n.d. 氯苯胺灵乙基毒死蜱甲基毒死蜱氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯氯氰菊酯环丙唑醇嘧菌环胺 p,p'- 滴滴滴 p,p'- 滴滴伊 p,p'- 滴滴涕溴氰菊酯甲基内吸磷二嗪磷苯氟磺胺氯硝胺 p,p - 二氯二苯甲酮敌敌畏氰戊菊酯苯醚甲环唑乐果

13 13 表 3 接上表 - 残差图 RSD%<20% - 残差图 RSD% >20% 校准范围 [ng/g] r2 草莓小麦粉韭菜残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] 烯酰吗啉二苯胺硫丹硫丹硫酸盐苯硫磷氟环唑乙硫磷灭线磷醚菊酯苯线磷苯线磷砜苯线磷亚砜氯苯嘧啶醇腈苯唑杀螟硫磷苯氧威甲氰菊酯苯锈啶粉锈啶倍硫磷氰戊菊酯氟虫腈咯菌腈氟喹唑氟硅唑氟酰胺粉唑醇氟胺氰菊酯灭菌丹 n.d. n.d. n.d. α- 六六六 β- 六六六 γ- 六六六 _ 林丹己唑醇抑霉唑异菌脲甲基异柳磷醚菌酯利谷隆马拉硫磷嘧菌胺甲霜灵虫螨畏

14 14 表 3 接上表 - 残差图 RSD%<20% - 残差图 RSD% >20% 校准范围 [ng/g] r2 草莓小麦粉韭菜残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] 甲胺磷杀扑磷灭虫威塞克津久效磷腈菌唑邻苯基苯酚草酮霜灵多效唑甲基对氧磷 ( 乙基 ) 对硫磷甲基对硫磷二甲戊灵氯菊酯稻丰散伏杀硫磷亚胺硫磷磷胺抗蚜威脱甲基抗蚜威甲基嘧啶磷咪酰胺腐霉利丙溴磷 > 炔螨特丙环唑炔苯酰草胺丙硫磷唑菌胺酯哒螨灵嘧霉胺吡丙醚喹氧灵螺螨酯戊唑醇虫酰肼吡螨胺七氟菊酯四氟醚唑三氯杀螨砜四氢酞酰亚胺

15 15 表 3 接上表 - 残差图 RSD%<20% - 残差图 RSD% >20% 校准范围 [ng/g] r2 草莓小麦粉韭菜残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] r2 残差图偏差 [%RSD] 尤登图斜率 [diff%] 噻苯咪唑甲基立枯磷甲苯氟磺胺 n.d. n.d. n.d. 三唑酮三唑醇肟菌酯氟乐灵灭菌唑乙烯菌核利表 ng/g( 水平 1),20 ng/g( 水平 2) 和 100 ng/g( 水平 3) 加标浓度下的回收率值 [%] * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 乙酰甲胺磷氟丙菊酯双甲脒 ** n.d. n.d. n.d 保棉磷 * 嘧菌酯 * 联苯菊酯联苯三唑醇啶酰菌胺溴螨酯溴菌唑磺嘧菌灵 * 噻嗪酮 * 硫线磷克菌丹 n.d. n.d. n.d. 西维因 * 克百威 <LOQ 萎锈灵溴虫腈 * 毒虫畏乙酯杀螨醇百菌清 n.d. n.d. n.d. 氯苯胺灵乙基毒死蜱甲基毒死蜱氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯

16 16 表 4. 接上表 * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 氯氰菊酯环丙唑醇嘧菌环胺 p,p'- 滴滴滴 p,p'- 滴滴伊 p,p'- 滴滴涕溴氰菊酯甲基内吸磷 * 二嗪磷苯氟磺胺 * <LOD <LOD 55 氯硝胺 p,p - 二氯二苯甲酮 <LOD <LOQ 84 <LOQ 敌敌畏氰戊菊酯苯醚甲环唑乐果烯酰吗啉二苯胺硫丹 * 硫丹硫酸盐苯硫磷氟环唑乙硫磷灭线磷醚菊酯苯线磷苯线磷砜苯线磷亚砜 ** 氯苯嘧啶醇腈苯唑杀螟硫磷苯氧威甲氰菊酯 <LOD <LOD 82 <LOD <LOD 77 苯锈啶 * n.d 粉锈啶倍硫磷氰戊菊酯氟虫腈咯菌腈 <LOD <LOD 氟喹唑氟硅唑氟酰胺粉唑醇氟胺氰菊酯灭菌丹 ** <LOD <LOD <LOQ

17 17 表 4. 接上表 * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 α- 六六六 β- 六六六 γ- 六六六 _ 林丹己唑醇 * 抑霉唑 * 异菌脲甲基异柳磷醚菌酯利谷隆 * 马拉硫磷嘧菌胺甲霜灵 * 虫螨畏甲胺磷杀扑磷灭虫威 ** <LOD <LOD 75 <LOD <LOQ 78 塞克津 * 久效磷 * 腈菌唑邻苯基苯酚草酮霜灵多效唑甲基对氧磷 * ( 乙基 ) 对硫磷 * 甲基对硫磷二甲戊灵氯菊酯稻丰散 * 伏杀硫磷亚胺硫磷磷胺抗蚜威脱甲基抗蚜威 * 甲基嘧啶磷咪酰胺 * 腐霉利丙溴磷炔螨特 <LOD <LOD 丙环唑炔苯酰草胺丙硫磷唑菌胺酯哒螨灵嘧霉胺

18 18 表 4. 接上表 * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 水平 1 水平 2 水平 3 吡丙醚喹氧灵螺螨酯 <LOQ 戊唑醇虫酰肼 * <LOD <LOQ 84 <LOQ 吡螨胺七氟菊酯四氟醚唑 * 三氯杀螨砜四氢酞酰亚胺 (THPI) <LOQ <LOQ 90 <LOQ <LOQ 噻苯咪唑 * 甲基立枯磷甲苯氟磺胺 * n.d. n.d. n.d. 三唑酮 * 三唑醇 * 肟菌酯氟乐灵灭菌唑乙烯菌核利表 ng/g( 水平 1),20 ng/g( 水平 2) 和 100 ng/g( 水平 3) 浓度下的方法精密度和中间精密度值 [RSD%] * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜精密度中间精密度中间精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 乙酰甲胺磷氟丙菊酯双甲脒 ** n.d. n.d. n.d. n.d 保棉磷 * 嘧菌酯 * 联苯菊酯联苯三唑醇啶酰菌胺溴螨酯溴菌唑磺嘧菌灵 * 噻嗪酮 * 硫线磷克菌丹 n.d. n.d. n.d. n.d. 西维因 * <LOQ 克百威萎锈灵中间精密度

19 19 表 5. 接上表 * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜精密度中间精密度中间精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 溴虫腈 * 毒虫畏乙酯杀螨醇百菌清 n.d. n.d. n.d. n.d. 氯苯胺灵乙基毒死蜱甲基毒死蜱氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯氯氰菊酯环丙唑醇嘧菌环胺 p,p'- 滴滴滴 p,p'- 滴滴伊 p,p'- 滴滴涕溴氰菊酯甲基内吸磷 * 二嗪磷苯氟磺胺 * <LOD <LOD 90 n.d. 氯硝胺 p,p - 二氯二苯甲酮 <LOD <LOQ 11 n.d. <LOQ 敌敌畏氰戊菊酯苯醚甲环唑乐果烯酰吗啉二苯胺硫丹 * 硫丹硫酸盐苯硫磷氟环唑乙硫磷灭线磷醚菊酯苯线磷苯线磷砜苯线磷亚砜 ** 氯苯嘧啶醇腈苯唑杀螟硫磷苯氧威甲氰菊酯 <LOD <LOD 8 n.d. <LOD <LOD 13 n.d. 苯锈啶 * n.d 中间精密度

20 20 表 5. 接上表 * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜精密度中间精密度中间精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 粉锈啶倍硫磷氰戊菊酯氟虫腈咯菌腈 <LOD <LOD 6 n.d 氟喹唑氟硅唑氟酰胺粉唑醇氟胺氰菊酯灭菌丹 ** <LOD <LOD <LOQ n.d. α- 六六六 β- 六六六 γ- 六六六 _ 林丹己唑醇 * 抑霉唑 * 异菌脲甲基异柳磷醚菌酯利谷隆 * 马拉硫磷嘧菌胺甲霜灵 * 虫螨畏甲胺磷杀扑磷灭虫威 ** <LOD <LOD 11* n.d. <LOD <LOQ 11 n.d. 塞克津 * 久效磷 * 腈菌唑邻苯基苯酚草酮霜灵多效唑甲基对氧磷 * ( 乙基 ) 对硫磷 * 甲基对硫磷二甲戊灵氯菊酯稻丰散 * 伏杀硫磷亚胺硫磷磷胺中间精密度

21 21 表 5. 接上表 * 加标浓度为 50,100 & 500 ng/g ** 加标浓度为 100,200 & 1000 ng/g <LOD/LOQ 加标量低于 LOD/LOQ 值草莓小麦粉韭菜精密度中间精密度中间精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 精密度水平 1 水平 2 水平 3 抗蚜威脱甲基抗蚜威 * 甲基嘧啶磷咪酰胺 * 腐霉利丙溴磷炔螨特 <LOD <LOD 56 n.d 丙环唑炔苯酰草胺丙硫磷唑菌胺酯哒螨灵嘧霉胺吡丙醚喹氧灵螺螨酯 <LOQ 戊唑醇虫酰肼 * <LOD <LOQ 6 7 <LOQ 吡螨胺七氟菊酯四氟醚唑 * 三氯杀螨砜四氢酞酰亚胺 (THPI) <LOQ <LOQ 8 n.d. <LOQ <LOQ 噻苯咪唑 * 甲基立枯磷甲苯氟磺胺 * n.d. n.d. n.d. n.d. 三唑酮 * 三唑醇 * 肟菌酯氟乐灵灭菌唑乙烯菌核利中间精密度

22 22 表 6. 方法 LOD,LOQ 和现行法规规定残留限量 ( 单位 ng/g) * 由于没有 MRL 规定值, 默认设置为 10 ng/g 草莓小麦粉韭菜 LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL 乙酰甲胺磷氟丙菊酯双甲脒保棉磷嘧菌酯联苯菊酯联苯三唑醇啶酰菌胺溴螨酯溴菌唑磺嘧菌灵噻嗪酮硫线磷克菌丹西维因克百威萎锈灵溴虫腈 * * * 毒虫畏 * * * 乙酯杀螨醇百菌清氯苯胺灵乙基毒死蜱 * * * 甲基毒死蜱氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯 * * * 氯氰菊酯环丙唑醇嘧菌环胺 p,p'- 滴滴滴 p,p'- 滴滴伊 * * * o,p'- 滴滴涕 * * * 溴氰菊酯甲基内吸磷 * * * 二嗪磷苯氟磺胺 * * * 氯硝胺 p,p - 二氯二苯甲酮 * * * 敌敌畏氰戊菊酯苯醚甲环唑乐果烯酰吗啉 * * *

23 23 表 6. 接上表 * 由于没有 MRL 规定值, 默认设置为 10 ng/g 草莓小麦粉韭菜 LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL 二苯胺硫丹硫丹硫酸盐 * * * 苯硫磷 * * * 氟环唑乙硫磷灭线磷醚菊酯苯线磷苯线磷砜 * * * 苯线磷亚砜 * * * 氯苯嘧啶醇腈苯唑杀螟硫磷苯氧威甲氰菊酯苯锈啶粉锈啶倍硫磷氰戊菊酯氟虫腈咯菌腈氟喹唑氟硅唑氟酰胺粉唑醇氟胺氰菊酯 * * * 灭菌丹 α- 六六六 β- 六六六 γ- 六六六 _ 林丹己唑醇抑霉唑异菌脲甲基异柳磷 * * * 醚菌酯利谷隆马拉硫磷嘧菌胺甲霜灵虫螨畏甲胺磷杀扑磷

24 24 表 6. 接上表 * 由于没有 MRL 规定值, 默认设置为 10 ng/g 草莓小麦粉韭菜 LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL 灭虫威塞克津久效磷 * * * 腈菌唑邻苯基苯酚 * * * 草酮霜灵多效唑甲基对氧磷 ( 乙基 ) 对硫磷 * * * 甲基对硫磷 * * * 二甲戊灵氯菊酯稻丰散 * * * 伏杀硫磷亚胺硫磷磷胺抗蚜威脱甲基抗蚜威 * * * 甲基嘧啶磷咪酰胺腐霉利丙溴磷炔螨特丙环唑炔苯酰草胺丙硫磷 * * * 唑菌胺酯哒螨灵嘧霉胺吡丙醚喹氧灵螺螨酯戊唑醇虫酰肼吡螨胺七氟菊酯四氟醚唑三氯杀螨砜四氢酞酰亚胺 (THPI) * * * 噻苯咪唑甲基立枯磷甲苯氟磺胺 *

25 25 表 6. 接上表 * 由于没有 MRL 规定值, 默认设置为 10 ng/g 草莓小麦粉韭菜 LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL LOD LOQ MRL 三唑酮三唑醇肟菌酯氟乐灵灭菌唑乙烯菌核利表 7. 相关的外部质量控制样品 (FAPAS) 结果 Fapas 样品编号理论值 [µg/kg] 允许范围 [µg/kg] 测定值 [µg/kg](rsd%) 西维因 T (22) β- 硫丹 T (7) 甲基毒死蜱 T (8) 氯氰菊酯 T (8) 氯氰菊酯 T (17) o,p'- 滴滴涕 T (16) 氯硝胺 T (15) 乐果 T (15) 灭线磷 T (10) 杀扑磷 T (19) 久效磷 T (13) 伏杀硫磷 T (9) 炔苯酰草胺 T (4) 图 1. 韭菜中校准浓度水平 2[5 ng/g] 的甲基异柳磷的色谱图

26 26 图 2. 韭菜中校准水平 2[5 ng/g] 的灭线磷的色谱图图 3. 韭菜中校准水平 3[10 ng/g] 的氯菊酯的两个色谱峰

27 Application Notes CM0104 图 4. 小麦粉中校准水平 6[100 ng/g] 的克菌丹的色谱图图 5. 小麦粉中校准水平 4[25 ng/g] 的邻苯基苯酚的色谱图赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司免费服务热线 : ( 支持手机用户 ) AN_CM0104

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print p 真 (3Cx, 0535-(388435 第 1 页 - w 5 页 1 戊菌隆 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 2 甲拌磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 3 k 氯硝基苯 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 4 地虫硫磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 5 艾氏剂 0.0125