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1 GC-MS/MS 法测定复杂基质 ( 生姜 油麦菜 ) 中多农药残留 摘要 : 建立了三重四极杆气质联用仪 GC-MS/MS 同时检测复杂基质 ( 生姜 油麦菜 ) 中 5 多种农药多残留 ( 农业部年度考核农药 ) 的分析方法 为减少基质增强效应对农药残留分析的影响, 采用空白基质配制标准溶液, 在 1~1 µg/l 浓度范围内, 各农药的相关系数均在.997 以上 对 1µg/L 的标准溶液连续 6 针进样, 峰面积的 RSD% 均小于 8.%, 绝大数农药的最低检出限 (LOD) 在 1 µg/kg 以下 在 1 µg/kg 和 5 µg/kg 的加标浓度下, 大部分农药的加标回收率在 7.~12.% 之间, 完全满足日常检测对农药残留分析的要求 关键词 :GC-MS/MS 农药残留生姜油麦菜 农业生产中广泛使用农药以提高产量, 但农药残留危害也日趋严重 发达国家相继建立了蔬菜中更低浓度的农药限定标准, 如欧洲指南 91/414/EEC 和美国食品质量保护法案 (FQPA) 等 我国从 2 世纪 9 年代初开始研究农药多残留分析方法, 并相继推出了一系列国家标准分析方法, 农药多残留检测在我国得到了快速发展 由于蔬菜样品的组成成分复杂, 对样品中的农药残留进行直接测定时, 需要对样品进行提取 净化以减少其杂质的影响 但对于基质非常复杂的样品如生姜 大葱等, 简单的净化不能满足分析要求, 传统的检测手段如 ECD FPD NPD 和 GCMS 等技术也有其局限性, 容易造成定性不准确 串联质谱因其分析结果更准确 可靠 灵敏, 正逐渐应用于农药残留分析 本实验利用三重四级杆气质联用仪, 建立了同时测定蔬菜中 5 多种农药残留的方法, 取得了较好的效果 测定的农药参照了农业部年度考核的 5 多种农药, 农药种类涵盖了有机磷 有机氯以及拟除虫菊酯类农药, 具有一定的代表性 由于使用了基质校准溶液和多反应监测模式 (MRM) 减少了基质效应, 有效降低了背景干扰, 提高了分析灵敏度, 使各待测物的方法测定下限在.3~3.61µg/kg 范围, 适用于日常的农药残留痕量检测工作 1. 实验部分 1.1 仪器三重四极杆气质联用仪 :GCMS-TQ83( 岛津公司 ) 1.2 分析条件色谱柱 :Rxi-5 ms,3m.mm.μm 进样口温度 : 柱温程序 :5 (1min)-( /min)-15 - (1 /min)-3 (5 min) 恒线速度方式 :47.6 cm/sec 进样方式 : 不分流进样不分流时间 :1min 高压进样 :kpa(1min) 34

2 离子源 :2 传输线 :23 检测器电压 : 相对调谐电压 +.3kv 溶剂切割时间 :1.5min MRM 采集条件见表 样品制备 标准溶液配制 : 称取一定量的各农药标准品, 用正己烷稀释至 2µg/L 作为使用液备用 样品处理方法 : 样品前处理参照 GB/T 进行处理, 见下图 1 所示. 称取 2g 样品 加入 4mL 乙腈提取 均质提取 1min 加入 5gNaCl 均质提取 1min 5r/min 离心 1min 移取 2mL 上清液 1mL 乙腈活化 C18 柱 过 C18 SPE 柱,15mL 乙腈洗脱 旋蒸至近干 1mL 甲苯 + 乙腈 (1+3) 活化 过 GCB 和 NH2 柱,mL 甲苯 + 乙腈 (1+3) 洗脱, 收集所有液体 旋蒸至近干, 正己烷转相两次 正己烷定容 1mL+ 内标 GC-MS/MS 分析 35

3 表 1 农药组分保留时间及 MRM 参数 No. 保留时间 农药中英文名 定量离子 (CE) 定性离子 (CE) CAS 号 甲胺磷 (Methamidophos) 141>95(8) 141>126(4) 敌敌畏 (Dichlorvos) 185>93(14) 185>19(14) 敌百虫 (Trichlofon) 185>93(14) 185>19(14) 氧乐果 (Omethoate) 156>11(8) 156>141(4) 灭线磷 (Ethoprophos) 2>158(6) 2>114(14) 治螟磷 (Sulfotep) 322>294(4) 322>22(1) 久效磷 (Monocrotophos) 127>19(12) 127>95(16) 甲拌磷 (Phorate) 26>75(8) 26>231(4) α- 六六六 (α-bhc) 219>183(8) 219>145(18) 乐果 (Dimethoate) 1>79(8) 1>47(14) β- 六六六 (β-bhc) 219>183(8) 219>147(2) 五氯硝基苯 (Quintozene) 295>237(16) 295>265(12) γ- 六六六 (γ-bhc) 219>183(8) 219>147(2) 特丁硫磷 (Terbufos) 231>175(14) 231>129(26) 地虫硫磷 (Fonofos) 246>19(18) 246>137(6) 二嗪磷 (Diazinone) 34>179(1) 34>162(8) 磷胺 -1(Phosphamidon-1) 264>127(12) 264>193(8) 嘧霉胺 (Pyrimethanil) 198>183(14) 198>158(18) δ- 六六六 (δ-bhc) 219>183(1) 219>145(22) 磷胺 -2(Phosphamidon-2) 264>127(14) 264>193(8) 乙烯菌核利 (Vinclozoline) 285>212(12) 285>178(14) 甲基对硫磷 (Parathion-methyl) 263>19(14) 263>136(8) 杀螟硫磷 (Fenitrothion) 277>26(6) 277>19(14) 马拉硫磷 (Malathion) 173>127(6) 173>99(14) 毒死蜱 (Chlorpyrifos) 314>8(14) 314>286(8) 对硫磷 (Parathion) 291>19(14) 291>137(6) 三唑酮 (Triadimefon) 28>181(1) 28>127(14) 水胺硫磷 (Isocarbophos) 289>136(14) 289>113(6) 三氯杀螨醇 (Dicofol) 1>216(8) 1>139(16) 甲基异硫磷 (Isofenphos methyl) 241>199(8) 241>121(22) 氟虫腈 (Fipronil) 367>213(3) 367>5(22) 硫环磷 (Phosfolan) 196>14(12) 196>168(6) 环氧七氯 (Heptachlor epoxide) 353>263(14) 353>282(12) 稻丰散 (Phenthoate) 274>1(2) 274>246(6) 喹硫磷 (Quinalphos) 157>129(14) 157>93(1) 腐霉利 (Procymidone) 283>96(1) 283>5(12) 杀扑磷 (Methidathion) 145>85(8) 145>58(14) α- 硫丹 (alpha-endosulfan) 339>16(18) 339>267(4) 丙溴磷 (Profenofos) 337>267(14) 337>39(6) p,p'-dde 246>176(28) 246>211(22) p,p'-ddd 235>165(24) 235>199(14) o,p'-ddt 235>165(24) 235>199(16)

4 三唑磷 (Triazophos) 7>162(8) 7>134(22) p,p'-ddt 235>165(22) 235>199(14) 异菌脲 (Iprodione) 314>245(12) 314>56(22) 亚胺硫磷 (Phosmet) 16>133(14) 16>77(24) 联苯菊酯 (Bifenthrin) 181>166(12) 181>153(8) 甲氰菊酯 (Fenpropathrin) 265>21(12) 265>172(14) 氯氟氰菊酯 -1(Cyhalothrin-1) 197>161(8) 197>141(12) 氯氟氰菊酯 -2(Cyhalothrin-2) 197>161(8) 197>141(12) 氯菊酯 -1(Permethrin-1) 183>168(14) 183>165(12) 蝇毒磷 (Coumaphos) 362>19(14) 362>226(12) 氯菊酯 -2(Permethrin-2) 183>168(14) 183>165(14) 哒螨灵 (Pyridaben) 147>117(22) 147>132(14) 氟氯氰菊酯 -1(Cyfluthrin-1) 226>26(14) 226>199(6) 氟氯氰菊酯 -2(Cyfluthrin-2) 226>26(14) 226>199(6) 氟氯氰菊酯 -3(Cyfluthrin-3) 226>26(14) 226>199(6) 氟氯氰菊酯 -4(Cyfluthrin-4) 226>26(14) 226>199(6) 氯氰菊酯 -1(Cypermethrin-1) 181>152(22) 181>127(22) 氯氰菊酯 -2(Cypermethrin-2) 181>152(22) 181>127(22) 氯氰菊酯 -3(Cypermethrin-3) 181>152(22) 181>127(22) 氟氰戊菊酯 -1(Flucythrinate-1) 199>157(1) 199>17(22) 氯氰菊酯 -4(Cypermethrin-4) 181>152(22) 181>127(22) 氟氰戊菊酯 -2(Flucythrinate-2) 199>157(8) 199>17(22) 氰戊菊酯 -1(Fenvalerate-1) 419>2(6) 419>167(12) 氟胺氰菊酯 -1(Fluvalinate-1) >55(18) >2(2) 氟胺氰菊酯 -2(Fluvalinate-2) >55(2) >2(2) 氰戊菊酯 -2(Fenvalerate-2) 419>2(6) 419>167(12) 苯醚甲环唑 -1(Difenoconazole-1) 323>265(14) 323>22(28) 苯醚甲环唑 -2(Difenoconazole-2) 323>265(14) 323>22(28) 溴氰菊酯 -1(deltamethrin-1) 3>93(18) 3>172(4) 溴氰菊酯 -2(deltamethrin-2) 3>93(2) 3>172(8) 结果 2.1 标准样品的 TIC 图 (x1,,) TIC (1.) 图 2 1ppb 的 TIC 图 37

5 2.2 标准曲线使用空白基质溶液分别配制浓度为 µg/l 的混合农药标准溶液, 以环氧七氯为内标 ( 浓度 28 µg/l) 以浓度比作为横坐标, 峰面积比作为纵坐标, 绘制标准曲线如下图所示, 相关系数及检出限见表 甲胺磷敌敌畏敌百虫 氧化乐果灭线磷治螟磷 久效磷甲拌磷 α- 六六六 乐果 β- 六六六五氯硝基苯 38

6 γ- 六六六特丁硫磷地虫硫磷 二嗪农磷胺嘧霉胺 δ- 六六六乙烯菌核利甲基对硫磷 杀螟硫磷马拉硫磷毒死蜱 39

7 对硫磷三唑酮水胺硫磷 三氯杀螨醇甲基异硫磷氟虫腈 硫环磷稻丰散喹硫磷 腐霉利杀扑磷硫丹 4

8 丙溴磷 p,p'-dde p,p'-ddd 1 5 o,p'-ddt 三唑磷 p,p'-ddt 异菌脲亚胺硫磷联苯菊酯 甲氰菊酯氯氟氰菊酯氯菊酯 41

9 蝇毒磷哒螨灵氟氯氰菊酯 氯氰菊酯氟氰菊酯氰戊菊酯 氟胺氰菊酯苯醚甲环唑溴氰菊酯 表 2 各农药标准曲线相关系数及最低检出限 (LOD) No. 化合物名称 相关系数 r LOD(µg/kg) 1 甲胺磷 敌敌畏 敌百虫 氧乐果 灭线磷 治螟磷 久效磷 甲拌磷 α- 六六六 乐果 β- 六六六 五氯硝基苯

10 13 γ- 六六六 特丁硫磷 地虫硫磷 二嗪磷 磷胺 嘧霉胺 δ- 六六六 乙烯菌核利 甲基对硫磷 杀螟硫磷 马拉硫磷 毒死蜱 对硫磷 三唑酮 水胺硫磷 三氯杀螨醇 甲基异硫磷 氟虫腈 硫环磷 稻丰散 喹硫磷 腐霉利 杀扑磷 α- 硫丹 丙溴磷 p,p'-dde p,p'-ddd o,p'-ddt 三唑磷 p,p'-ddt 异菌脲 亚胺硫磷 联苯菊酯 甲氰菊酯 氯氟氰菊酯 氯菊酯 蝇毒磷 哒螨灵 氟氯氰菊酯 氯氰菊酯 氟氰戊菊酯

11 54 氰戊菊酯 氟胺氰菊酯 苯醚甲环唑 溴氰菊酯 重复性测试 取空白基质配制的 1 µg/l 的混合标准溶液, 重复进样 6 次, 重复性结果见表 3 表 3 峰面积重复性结果 No. 化合物名称 RSD% 1 甲胺磷 敌敌畏 敌百虫 氧乐果 灭线磷 治螟磷 久效磷 甲拌磷 α- 六六六 乐果 β- 六六六 五氯硝基苯 γ- 六六六 特丁硫磷 地虫硫磷 二嗪磷 磷胺 嘧霉胺 δ- 六六六 乙烯菌核利 甲基对硫磷 杀螟硫磷 马拉硫磷 毒死蜱 对硫磷 三唑酮 水胺硫磷 三氯杀螨醇 甲基异硫磷 氟虫腈 硫环磷

12 32 稻丰散 喹硫磷 腐霉利 杀扑磷 α- 硫丹 丙溴磷 p,p'-dde p,p'-ddd o,p'-ddt 三唑磷 p,p'-ddt 异菌脲 亚胺硫磷 联苯菊酯 甲氰菊酯 氯氟氰菊酯 氯菊酯 蝇毒磷 哒螨灵 氟氯氰菊酯 氯氰菊酯 氟氰戊菊酯 氰戊菊酯 氟胺氰菊酯 苯醚甲环唑 溴氰菊酯 回收率测试 分别在空白的生姜及油麦菜基质中加入农药混标, 添加浓度为 1 µg/kg 和 5 µg/kg, 分别平行处 理 3 份, 两种基质的加标回收率 (3 次平行样平均回收率及 RSD%) 结果见表 4 No. 化合物名称 油麦菜回收率 加标浓度 1 µg/kg RSD % 表 4 加标回收率 生姜回收率 RSD% 油麦菜回收率 加标浓度 5 µg/kg RSD% 生姜回收率 RSD% 1 甲胺磷 敌敌畏 敌百虫 氧乐果 灭线磷 治螟磷

13 7 久效磷 甲拌磷 α- 六六六 乐果 β- 六六六 五氯硝基苯 γ- 六六六 特丁硫磷 地虫硫磷 二嗪磷 磷胺 嘧霉胺 δ- 六六六 乙烯菌核利 甲基对硫磷 杀螟硫磷 马拉硫磷 毒死蜱 对硫磷 三唑酮 水胺硫磷 三氯杀螨醇 甲基异硫磷 氟虫腈 硫环磷 稻丰散 喹硫磷 腐霉利 杀扑磷 α- 硫丹 丙溴磷 p,p'-dde p,p'-ddd o,p'-ddt 三唑磷 p,p'-ddt 异菌脲 亚胺硫磷 联苯菊酯 甲氰菊酯 氯氟氰菊酯

14 48 氯菊酯 蝇毒磷 哒螨灵 氟氯氰菊酯 氯氰菊酯 氟氰戊菊酯 氰戊菊酯 氟胺氰菊酯 苯醚甲环唑 溴氰菊酯 注 : 表中 --- 表示受样品基质干扰, 结果无法计算 3 结论采用岛津公司 GCMS-TQ83 三重四极杆气质联用仪对蔬菜中 5 多种农药残留进行定性定量分析, 该方法操作简单, 重复性好, 灵敏度高, 在 1µg/kg 和 5µg/kg 的加标浓度下, 大部分农药的回收率在 7.%~12.% 之间, 完全满足日常的农药残留痕量分析工作 实验表明, 串联质谱的检测方法能够避免杂质的干扰, 尤其是分析复杂样品时, 能有效地消除基质干扰, 减少假阳性的检出率, 同时能提高分析的选择性和检测灵敏度, 简化样品前处理过程, 降低分析成本 47

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