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1 香港 食物内除害剂残余规例 的整体解决方案以及方法包介绍 赛默飞世尔科技三重四极杆串接气质

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3 目录 一. 方法包简介 4 二. 仪器简介 5 三. 化合物简介 6 四. 相关政策及法规 11 五. 样品前处理方法 12 六. 仪器和设备 13 七. 方法包使用简介 14 八. 应用文章 18 3

4 一. 方法包简介 方法包是赛默飞世尔科技色谱质谱部应用部门针对客户需求提出的简易仪器使用流程, 方法包内所涉及的化合物均为常见的能在 GC/MS 上检测的化合物, 如农药残留 多环芳烃 多氯联苯 多溴联苯和多溴联苯醚 邻苯二甲酸酯等 方法包的作用就是能使客户更快更简便得使用仪器, 尽快上手 方法包包括进样方法, 数据处理方法 (TraceFinder 方法文件夹 ), 相关应用文章, 相关标准, 色谱柱信息, 前处理方法, 数据文件等, 客户可以直接调用进样方法和数据处理方法完成化合物的定性定量分析 由于 Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 采用 T-SRM 进样方法而不是分时间段的扫描方法, 原来的进样的方法可以直接调用, 即使保留时间会有微小的偏差, 也不会影响最终的结果 另外,TraceFinder 软件自带的数据库可以直接编辑数据处理方法, 数据库里包括化合物的名称 离子对 碰撞能量 定量离子 定性离子 CAS 号等信息 同时,TraceFinder 软件可以根据数据处理方法自动关联生成 TSQ 8000 Evo 的方法文件 这样应用 TraceFinder 就可以直接生成数据处理方法和部分进样方法 整个过程都是自动化的, 几乎不需要操作者手动输入任何操作信息 方法包 (Method Kit) 对于常用分析化合物, 我们可以提供方法包 包括 : 邻苯二甲酸酯 PCB PAH PBDE 农残筛查 GB2763 烟草中农残 PM2.5 香港规管方案 亚硝胺 二恶英等 目的 : 上手方便, 直接使用 方法包 仪器方法 数据处理方法 色谱图 RT 色谱柱信息 前处理方法 相关文献 C10 保留时间 RT: SM: 7G NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid6.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid26.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid34.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid32.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid30.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid22.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid34.00 [ ] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms @cid8.00 [ ] MS 5ppb Time (min) 4

5 二. 仪器简介 TSQ 8000 Evo 三重四极杆串接气质联用仪 秉承着在气相色谱三重四极杆质谱中技术的一贯领先优势,Thermo Fisher Scientific 在推出 TSQ 8000 之后再次创新, 推出了 更新的一款气相串接质谱仪 TSQ 8000 Evo, 该款高效的 GC/MS/MS 提供了永不停机的生产率, 其出色的灵敏度, 超快的扫描速度, 简便的 MSMS 功能, 满足最苛刻的定量定性分析要求, 为食品安全 环境分析 法医和制药应用分析提供基础 TSQ 8000 Evo 主要特点 : AutoSRM 功能自动优化二级离子对信息 ; 定时保留时间 SRM 功能 (T-SRM) 和定时保留时间 SIM 功能 (T-SIM) 使高通量检测成为可能, 并且优化方法设置参数, 无需分配时间段 ; 最新的 TraceFinder 软件, 提供最新的技术平台, 界面友好的色谱分析软件, 可以直接调用数据库信息自动建立数据处理方法及进样方法 ; 高达 800 MRM/s 的扫描速度, 即使在极限高速扫描条件下仍不会过多损失灵敏度 ; 在质谱不泄真空的情况下, 更换整个离子源, 节省常规系统维护时间, 简化操作 ; 双灯丝设计, 并且灯丝在同一侧 ; 离子源上具有双加热区, 有效去除基质对离子源的污染, 节省维护时间 ; 弯曲的预四极杆, 有效去除中性噪音, 减少背景并提高灵敏度 5

6 三. 化合物简介 香港 食物内除害剂残余 规例 (Hong Kong Pesticide Residues in Food Regulation) 包含 360 种除害剂以及超过 7000 个 除 害剂 - 食物 组合的最高残留限量 / 最高再残留限量标准 除害剂, 又称农药, 一般用于杀死或控制有害昆虫 植物 真菌或其他 有害生物的物质, 也包括一些生长调节剂等 食物中由于使用了除害剂, 或者在饲料中混有除害剂, 又或者本身环境中存在的除 害剂都有可能迁移到食物中, 从而需要对这些有害的物质进行检测 香港规例中所包含的除害剂, 用 GC/MS/MS 和 LC/MS/MS 可以检测其中 95% 以上的化合物, 而赛默飞世尔科技已经可以提 供一个综合 GC/MS/MS 和 LC/MS/MS 的整体解决方案 下图是在 GC/MS/MS 上完成的化合物信息列表 序号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 1 Acephate 乙酰甲胺磷 C 4 H 10 NO 3 PS 2 Acibenzolar-S-methyl 甲噻活素 C 8 H 6 N 2 OS 2 3 Alachlor 甲草胺 C 14 H 20 ClNO 2 4 Aldrin 艾氏剂 C 12 H 8 Cl 6 5 Amitraz 双甲眯 C 19 H 23 N 3 6 Azoxystrobin 嘧菌酯 C 22 H 17 N 3 O 5 7 Benalaxyl 苯霜灵 C 20 H 23 NO 3 8 Benfluralin 氟草胺 C 13 H 16 F 3 N 3 O 4 9 BHC, Alpha α- 六六六 C 6 H 6 Cl 6 10 BHC, Beta β- 六六六 C 6 H 6 Cl 6 11 BHC, delta δ- 六六六 C 6 H 6 Cl 6 12 BHC, gamma γ- 六六六 C 6 H 6 Cl 6 13 Bifenthrin 毕芬宁 C 23 H 22 ClF 3 O 2 14 Boscalid (Nicobifen) 啶酰菌胺 C 18 H 12 Cl 2 N 2 O 15 Bromopropylate 溴螨酯 C 17 H 16 Br 2 O 3 16 Bromoxynil 辛酰溴苯腈 C 7 H 3 Br 2 NO 17 Butachlor 丁草胺 C 17 H 26 ClNO 2 18 Butylate (Sutan) 丁草特 C 11 H 23 NOS 19 Captan 克菌丹 C 9 H 8 Cl 3 NO 2 S 20 Chlordane 氯丹 C 10 H 6 Cl 8 21 Chlorethoxyfos 氯氧磷 C 6 H 11 Cl 4 O 3 PS 22 Chlorfenapyr 虫螨腈 C 15 H 11 BrClF 3 N 2 O 23 Chlorothalonil 百菌清 C 8 Cl 4 N 2 24 Chlorpropham 氯苯胺灵 C 10 H 12 ClNO 2 25 Chlorpyrifos-ethyl 毒死蜱 C 9 H 11 Cl 3 NO 3 PS 26 Chlorpyrifos-methyl 甲基毒死蜱 C 7 H 7 Cl 3 NO 3 PS 27 Chlorthal-dimethyl (Dacthal) 氯酞酸甲酯 (DCPA) C 10 H 6 Cl 4 O 4 28 Coumaphos 蝇毒磷 C 14 H 16 ClO 5 PS 6

7 序号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 29 Cycloate 环草敌 C 11 H 21 NOS 30 Cyfluthrin 氟氯氰菊酯 C 22 H 18 Cl 2 FNO 3 31 Cyhalothrin II (gamma) 氯氟氰菊酯 C 23 H 19 ClF 3 NO 3 32 Cypermethrin 氯氰菊酯 C 22 H 19 Cl 2 NO 3 33 DDT p,p p,p'- 滴滴涕 C 14 H 9 Cl 5 34 Deltamethrin 溴氰菊酯 C 22 H 19 Br 2 NO 3 35 Desmedipham 甜菜安 C 16 H 16 N 2 O 4 36 Diazinon 二嗪农 C 12 H 21 N 2 O 3 PS 37 Dichlobenil 2,6- 二氯苄腈 C 7 H 3 Cl 2 N 38 Dichlorvos 敌敌畏 C 4 H 7 Cl 2 O 4 P 39 Diclofop methyl 禾草灵 C 16 H 14 Cl 2 O 4 40 Dicloran 2,6- 二氯 -4- 硝基苯胺 C 6 H 4 Cl 2 N 2 O 2 41 Dicofol 三氯杀螨醇 C 14 H 9 Cl 5 O 42 Dicrotophos 倍硫磷 C 8 H 16 NO 5 P 43 Difenoconazole 苯醚甲环唑 C 19 H 17 Cl 2 N 3 O 3 44 Dimethenamid 二甲吩草胺 C 12 H 18 ClNO 2 S 45 Dimethipin 噻节因 C 6 H 10 O 4 S 2 46 Dimethoate 乐果 C 5 H 12 NO 3 PS 2 47 Diniconazole 烯唑醇 C 15 H 17 Cl 2 N 3 O 48 Diphenylamine 二苯胺 C 12 H 11 N 49 Edifenphos 敌瘟磷 C 14 H 15 O 2 PS 2 50 Endosulfan 硫丹 C 9 H 6 Cl 6 O 3 S 51 Endrin 异狄氏剂 C 12 H 8 Cl 6 O 52 Esfenvalerate 杀灭阿菊酯 C 25 H 22 ClNO 3 53 Ethalfluralin 丁氟消草 C 13 H 14 F 3 N 3 O 4 54 Ethion 乙硫磷 C 9 H 22 O 4 P 2 S 4 55 Ethoprop (Ethoprophos) 灭线磷 C 8 H 19 O 2 PS 2 56 Etofenprox 醚菊酯 C 25 H 28 O 3 57 Etoxazole 乙螨唑 C 21 H 23 F 2 NO 2 58 Famoxadone 恶唑菌酮 C 22 H 18 N 2 O 4 59 Fenamidone 咪唑菌酮 C 17 H 17 N 3 OS 60 Fenamiphos 苯线磷砜 C 13 H 22 NO 3 PS 61 Fenarimol 氯苯嘧啶醇 C 17 H 12 Cl 2 N 2 O 62 Fenbuconazol 腈苯唑 C 19 H 17 ClN 4 63 Fenitrothion 杀螟松 C 9 H 12 NO 5 PS 64 Fenpropathrin 甲氰菊酯 C 22 H 23 NO 3 65 Fenpropimorph 丁苯吗啉 C 20 H 33 NO 66 Fenthion 倍硫磷 C 10 H 15 O 3 PS 2 67 Fenvalerate 敌虫菊酯 C 25 H 22 ClNO 3 68 Fipronil 锐劲特 C 12 H 4 Cl 2 F 6 N 4 OS 7

8 序号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 69 Fluazifop-P-butyl 精吡氟禾草灵 C 19 H 20 F 3 NO 4 70 Flucythrinate 氟氰戊菊酯 C 26 H 23 F 2 NO 4 71 Fludioxonil 咯菌腈 C 12 H 6 F 2 N 2 O 2 72 Flufenacet 氟噻草胺 C 14 H 13 F 4 N 3 O 2 S 73 Flufenphyr-ethyl 氟哒嗪草酯 C 16 H 13 ClF 4 N 2 O 4 74 flumethrin 氟氯苯菊酯 C 16 H 12 ClF 4 N 3 O 4 75 Flumiclorac-pentyl 氟烯草酸 C 21 H 23 ClFNO 5 76 Flumioxazin 丙炔氟草胺 C 19 H 15 FN 2 O 4 77 Flusilazole 氟哇唑 C 16 H 15 F 2 N 3 Si 78 Flutriafol 粉唑醇 C 16 H 13 F 2 N 3 O 79 Fluvalinate 氟氰戊菊酯 C 26 H 22 ClF 3 N 2 O 3 80 Folpet 灭菌丹 C 9 H 4 Cl 3 NO 2 S 81 Heptachlor 七氯 (104) C 10 H 5 Cl 7 82 Hexachlorobenzene 六氯苯 C 6 Cl 6 83 Ipconazole 种菌唑 C 18 H 24 ClN 3 O 84 Iprodione 异菌脲 C 13 H 13 Cl 2 N 3 O 3 85 Isocarbophos 水胺硫磷 C 11 H 16 NO 4 PS 86 Isofenphos-methyl 甲基异柳磷 C 14 H 22 NO 4 PS 87 Isoprothiolane 稻瘟灵 C 12 H 18 O 4 S 2 88 Malathion 马拉硫磷 C 10 H 19 O 6 PS2 89 Mepronil 灭锈胺 C 17 H 19 NO 2 90 Metalaxyl 甲霜灵 C 15 H 21 NO 4 91 Methamidophos 甲胺磷 C 2 H 8 NO 2 PS 92 Methidathion 杀扑磷 C 6 H 11 N 2 O 4 PS 3 93 Metolachlor 异丙甲草胺 C 15 H 22 ClNO 2 94 Metrafenone 苯菌酮 C 19 H 21 BrO 5 95 Metribuzin 嗪草酮 C 8 H 14 N 4 OS 96 Mevinphos 速灭磷 C 7 H 13 O 6 P 97 Molinate (Ordram) 禾草敌 C9H 17 NOS 98 Monocrotophos 久效磷 C 7 H 14 NO 5 P 99 Myclobutanil 腈菌唑 C 15 H 17 ClN Napropamide 敌草胺 C 17 H 21 NO Norflurazon 达草灭 C 12 H 9 ClF 3 N 3 O 102 Ortho-phenylphenol 邻苯基苯酚 C 12 H 10 O 103 Oxadiazon 恶草酮 C 15 H 18 Cl 2 N 2 O Oxyfluorfen 乙氧氟草醚 C 15 H 11 ClF 3 NO Parathion (ethyl) 对硫磷 C 10 H 14 NO 5 PS 106 Parathion-methyl 甲基对硫磷 C 8 H 10 NO 5 PS 107 Penconazole 戊菌唑 C 13 H 15 Cl 2 N Pendimethalin 胺硝草 C 13 H 19 N 3 O 4 8

9 序号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 109 Permethrin 氯菊酯 C 21 H 20 Cl 2 O Phenthoate 稻丰散 C 12 H 17 O 4 PS Phorate 甲拌磷 C 7 H 17 O 2 PS Phosalone 伏杀硫磷 C 12 H 15 ClNO 4 PS Phosmet 亚胺硫磷 C 11 H 12 NO 4 PS Phosphamidon 磷胺 C 10 H 19 ClNO 5 P 115 Phthalide-4,5,6,7-tetrachloro 四氯苯酞 C 8 H 2 Cl 4 O Piperonyl butoxide 增效醚 C 19 H 30 O Pirimiphos-methyl 甲基嘧啶磷 C 11 H 20 N 3 O 3 PS 118 Pretilachlor 丙草胺 C 17 H 26 ClNO Procymidone 腐霉利 C 13 H 11 Cl 2 NO Profenofos 丙溴磷 C 11 H 15 BrClO 3 PS 121 Prometryn 扑草净 C 10 H 19 N 5 S 122 Propachlor 毒草胺 C 11 H 14 ClNO 123 Propanil 敌稗 C 9 H 9 Cl 2 NO 124 Propazine 扑灭津 C 9 H 16 ClN Propiconazole 丙环唑 C 15 H 17 Cl 2 N 3 O Prothiofos 丙硫磷 C 11 H 15 Cl 2 O 2 PS Pyridaben 哒螨灵 C 19 H 25 ClN 2 OS 128 Pyridalyl 三氟甲吡醚 C 18 H 14 Cl 4 F 3 NO Pyrimethanil 嘧霉胺 C 12 H 13 N Pyriproxyfen 吡丙醚 C 20 H 19 NO Quinalphos 喹硫磷 C 12 H 15 N 2 O 3 PS 132 Quinoxyfen 快诺芬 C 15 H 8 Cl 2 FNO 133 Quintozene 五氯硝基苯 C 6 Cl 5 NO Quizalofop-ethyl 乙基喹禾灵 C 19 H 17 ClN 2 O semiamitraz 单甲脒 C 10 H 14 N Simazine 西玛津 C 7 H 12 ClN Spirodiclofen 螺螨酯 C 21 H 24 Cl 2 O spirotetramat 螺虫乙酯 C 21 H 27 NO TCMTB 苯噻硫氰 C 9 H 6 N 2 S Tebuconazole 戊唑醇 C 16 H 22 ClN 3 O 141 Tecnazene 四氯硝基苯 C 6 HCl 4 NO 142 Tefluthrin 七氟菊酯 C 17 H 14 ClF 7 O Terbufos 特丁硫磷 C 9 H 21 O 2 PS Tolclofos-methyl 甲基立枯磷 C 9 H 11 Cl 2 O 3 PS 145 Tolyfluanid 甲苯氟磺胺 C 10 H 13 Cl 2 FN 2 O 2 S Triadimefon 三唑酮 C 14 H 16 ClN 3 O Triadimenol 三唑醇 C 14 H 18 ClN 3 O Triazophos 三唑磷 C 12 H 16 N 3 O 3 PS 9

10 序号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 149 Tribuphos 脱叶磷 C 12 H 27 OPS Trichlorfon 敌百虫 C 4 H 8 Cl 3 O 4 P 151 Trifloxystrobin 肟菌酯 C 20 H 19 F 3 N 2 O Triflumizole 氟菌唑 C 15 H 15 ClF 3 N 3 O 153 Trifluralin 氟乐灵 C 13 H 16 F 3 N 3 O Uniconazole 烯效唑 C 15 H 18 ClN 3 O 155 Vinclozolin 乙烯菌核利 C 12 H 9 Cl 2 NO Zoxamide 苯酰草胺 C 14 H 16 Cl 3 NO 2 备注 : 标样购买 :Sigma-Aldrich 公司 百灵威 泉岛 振翔 安谱等均有标样提供 10

11 四. 相关法规及政策 香港立法会已于 2012 年 6 月完成审议 食物内除害剂残余规例 ( 第 132CM 章 )( 规例 ) 的程序 有关规例于 2014 年 8 月 1 日起实施 (1) 食物内除害剂残余规例 列明容许某些食物含有除害剂残余的最高限量以及一些的释义条文, 是供港蔬菜项目必须遵循的法规以及政策 规例所检测的化合物以及限量标准主要以内地和向香港出口食物的其他国家当时可用的相关标准作为补充, 同时考虑了在 2011 年 7-9 月针对公众咨询所收集的意见, 并且这些标准已经通过了风险评估 参考 :

12 五. 样品前处理 当前的检测方法针对的农药种类越来越多, 所涉及的基质类型也是多种多样, 所以 QuEChERS(Quick, Easy, Cheap, Effective, Ruggedand Safe) 这种比较普遍且有效的前处理方法便应运而生 QuEchERS 方法对大量极性及挥发性的农药回收率高, 分析准确度高, 并且操作简便, 污染小, 因而在供港蔬菜项目这种大规模的样品处理检测中也被广泛使用 QuEchERS 的方法简单概括为提取, 净化和萃取的过程, 具体过程如下图所示 ( 参考 EN 方法 ): 步骤 1 提取过程 向装有 10 g 样品中加入 10 ml 乙腈, 振摇 加入 4 g MgSO 4 1 g NaCl 1 g 水合柠檬酸三钠 0.5 g 水合柠檬酸二钠, 振摇 1 min, 然后 3000 U/min 下离心 5 min 步骤 2 净化过程 GCB: 石墨化碳黑 MgSO 4 : 硫酸镁 NaCl: 氯化钠 PSA: 伯仲胺 分散型 SPE 净化过程取 1 ml 上清液转移至装有 150 mg MgSO 4 和 25 mg PSA ( 可加入 2.5 mg 或 7.5 mg GCB 用于去除色素 ) 的离心管中, 振摇 30 s( 如果加入 GCB, 振摇 5 min), 然后在 3000 U/min 下离心 5 min 用含 5% 甲酸的乙腈溶液保存, 如果进行 GC/MS 检测, 需要转换溶剂 萃取柱净化过程用 5 ml 甲苯淋洗 PSA 和 GCB 双层复合小柱, 转移上清液至小柱, 开始收集, 然后用 6-12 ml 3:1 丙酮 : 甲苯溶剂洗脱, 浓缩后进行 GC/MS 分析 12

13 六. 仪器和设备 仪器 :Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 气相色谱三重四极杆串接质谱仪 设备 : 涡旋混合器, 离心机, 旋转蒸发仪, 氮吹仪等 色谱柱 :TR-Pesticide II(30 m*0.25 mm*0.25 µm, 带 5 m 预柱 ) 毛细管色谱柱 (Thermo Fisher Scientific) C10 保留时间为 min 13

14 七. 方法包的使用 1. 进样方法使用 : 直接使用方法包中 meth 结尾的文件, 进行进样分析 不同仪器配置可能稍有不同, 可以参考以下方法截图 14

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16 2. 数据处理方法建立 : 直接拷贝方法包中的文件夹到 C:\TraceFinderData\32\ Methods 中, 方法就可以直接在 TraceFinder 软件中打开, 这个方法包括数据处理方法和进样方法 将步骤 1 中的进样方法拷贝粘贴到 C:\TraceFinderData\ InstrumentMethods 中, 在 Instrument Methods 中选择这个文件, 然后保存这个 TraceFinder 的 Master Method 16

17 3. 将按照步骤 1 进样完成的数据文件与 TraceFinder 方法相关联, 得到完整的数据处理方法 按需要更改保留时间等参数进一步 对数据处理方法进行优化, 得到准确的数据处理方法 整个过程无需输入化合物信息, 离子对信息, 挑选离子对信息找到化合物, 所有的步骤均是自动完成, 一点即可, 极大得提高分析效率, 简化方法流程 17

18 八. 应用文章 18

19 应用 TSQ 8000 Evo 快速检测香港 食物内除害剂残余规例 中的多种除害剂残留 邓武剑朱曼洁吴凤琪吴卫东 1. 赛默飞世尔科技 2 深圳出入境检验检疫局 关键词 : 食物内除害剂残余规例 ;QuEChERS; 农药残留 ; TSQ 8000 Evo 三重四极杆气质联用 1. 前言 早在 2012 年 6 月, 香港立法会就已完成审议 食物内除害剂残余规例 ( 第 132CM 章 )( 规例 ) 的程序 有关规例于 2014 年 8 月 1 日起正式实施 食物内除害剂残余规例 列明容许某些食物含有除害剂残余的最高限量以及一些释义条文, 是供港蔬菜项目必须遵循的法规以及政策 香港 食物内除害剂残余 规例 (Hong Kong Pesticide Residues in Food Regulation) 包含 360 种除害剂以及超过 7000 个 除害剂 - 食物 组合的最高残留限量 / 最高再残留限量标准 香港规例中所包含的除害剂, 用 GC/MS/MS 和 LC/MS/MS 可以检测其中 95% 以上的化合物 本实验用 Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 结合赛默飞世尔科技农残分析色谱柱 (TR-Pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 µm) 分析香港规例中的 101 种农药残留, 得到了非常出色的结果 各种农药的最低检测限在 µg/l 之间, 在 µg/l 的范围有良好的线性, 且用 10 µg/l 样品连续 6 针进样, 得到 RSD 在 % 之间, 表明此方法具有良好的重现性 2. 实验部分 2.1 仪器和试剂质谱仪器 :Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 质谱仪 ( 赛默飞世尔科技, 美国 ); 气相色谱仪 :Thermo Scientific TM Trace 1310 GC 配 AI l310 自动进样器 ( 赛默飞世尔科技, 美国 ); 色谱柱 :TR-Pesticide II 30m*0.25mm*0.25 µm 毛细管色谱柱 ; 试剂 : 丙酮 乙腈 : 色谱纯 ; 2.2 仪器方法气相方法 : 柱温箱 :40 ºC 保持 1.5 min, 以 25 ºC/min 升至 90 ºC, 保持 1.5 min, 再以 25 ºC/min 升至 180 ºC, 以 5 ºC/min 升至 280 ºC, 最后以 10 /min 升温到 300, 保持 5 min 进样口: 不分流进样, 不分流时间 :1.5 min; 进样口温度 :270 ºC; 载气 : 恒流,1.2 ml/min; 传输线 :300 ºC 质谱方法 : 离子源温度为 300 ºC, 采用 Acquisition-Timed 方法,SRM 扫描, 具体检测离子对如表 1 所示 : 19

20 表 1: 检测化合物列表及 SRM 离子对信息 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 甲胺磷 Methamidophos 敌敌畏 Dichlorvos 2,6- 二氯苄腈 Dichlobenil 速灭磷 Mevinphos 丁草特 Butylate (Sutan) 乙酰甲胺磷 Acephate 2- 邻苯基苯酚 2-phenylphenol 四氯硝基苯 Tecnazene 氟氯苯菊酯 flumethrin 环草敌 Cycloate 氯苯胺灵 Chlorpropham 氟乐灵 Trifluralin 丁氟消草 Ethalfluralin

21 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 氟草胺 Benfluralin 辛酰溴苯腈 Bromoxynil 甲拌磷 Phorate α- 六六六 BHC, Alpha 乐果 Dimethoate 2,6- 二氯 -4- 硝基苯胺 Dicloran 西玛津 Simazine 噻节因 Dimethipin β- 六六六 BHC, Beta 五氯硝基苯 Quintozene γ- 六六六 BHC, gamma 特丁硫磷 Terbufos 二嗪农 Diazinon

22 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 氯氧磷 Chlorethoxyfos 百菌清 Chlorothalonil 甲基对硫磷 Parathion-methyl 七氟菊酯 Tefluthrin δ- 六六六 BHC, delta 敌稗 Propanil 甲基毒死蜱 Chlorpyrifos-methyl 甲基立枯磷 Tolclofos-methyl 甲霜灵 Metalaxyl 甲噻活素 Acibenzolar-S-methyl 甲基嘧啶磷 Pirimiphos-methyl 杀螟松 Fenitrothion 马拉硫磷 Malathion

23 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 异丙甲草胺毒死蜱倍硫磷丁苯吗啉氟噻草胺对硫磷水胺硫磷单甲脒甲基异柳磷戊菌唑喹硫磷克菌丹腐霉利 Metolachlor Chlorpyrifos-ethyl Fenthion Fenpropimorph Flufenacet Parathion (ethyl) Isocarbophos semiamitraz Isofenphos-methyl Penconazole Quinalphos Captan Procymidone

24 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 氟菌唑 Triflumizole 灭菌丹 Folpet 杀扑磷 Methidathion α- 硫丹 Endosulfan peak 1 粉唑醇 Flutriafol 敌草胺 Napropamide 苯线磷砜 Fenamiphos 苯噻硫氰 TCMTB 咯菌腈 Fludioxonil 丙硫磷 Prothiofos 丙溴磷 Profenofos 烯效唑 Uniconazole 恶草酮 Oxadiazon

25 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 脱叶磷 Tribuphos 乙氧氟草醚 Oxyfluorfen 虫螨腈 Chlorfenapyr β- 硫丹 Endosulfan peak 2 乙硫磷 Ethion 三唑磷 Triazophos 达草灭 Norflurazon 快诺芬 Quinoxyfen 异菌脲 Iprodione 亚胺硫磷 Phosmet 溴螨酯 Bromopropylate 毕芬宁 Bifenthrin 三氯杀螨醇 Dicofol

26 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 乙螨唑 Etoxazole 甲氰菊酯 Fenpropathrin 咪唑菌酮 Fenamidone 伏杀硫磷 Phosalone 吡丙醚 Pyriproxyfen γ- 氟氯氰菊酯 Cyhalothrin II (gamma) 双甲眯 Amitraz 氯苯嘧啶醇 Fenarimol λ- 氟氯氰菌酯 Cyhalothrin I (lambda) 螺螨酯 Spirodiclofen 顺式苄氯菊酯 Permethrin peak 1 反式苄氯菊酯 Permethrin peak 2 哒螨灵 Pyridaben

27 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 腈苯唑 Fenbuconazol 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin peak 1 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin peak 2 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin peak 3 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin peak 4 氯氰菊酯 Cypermethrin peak 1 啶酰菌胺 Boscalid (Nicobifen) 氯氰菊酯 Cypermethrin peak 2 乙基喹禾灵 Quizalofop-ethyl 氯氰菊酯 Cypermethrin peak 3 氯氰菊酯 Cypermethrin peak 4 醚菊酯 Etofenprox 螺虫乙酯 spirotetramat

28 中文名英文名保留时间母离子子离子碰撞能量 (ev) 三氟甲吡醚 Pyridalyl 丙炔氟草胺 Flumioxazin 敌虫菊酯 Fenvalerate 氟胺氰菊酯 Fluvalinate peak 1 杀灭阿菊酯 Esfenvalerate 氟胺氰菊酯 Fluvalinate peak 2 溴氰菊酯 Deltamethrin 氟烯草酸 Flumiclorac-pentyl 样品前处理 2.5 标准溶液的配置 1) 样品制备 : 取适量的蔬菜样品于均质器中, 将蔬菜样品打碎, 均质混匀 2) 样品提取 : 称取 10 g 样品到 50 ml QuEChERS 萃取管中, 加入 10 ml 乙腈震荡混匀, 加入 4 g MgSO 4 1 g NaCl 1 g 无水柠檬酸三钠和 0.5 g 柠檬酸二钠, 在涡旋振荡器上振荡 2 分钟, 放置于平行摇床上摇 30 分钟, 然后在 5000 rpm 转速下离心 5 min 3) 样品净化 : 取上清液, 转移到 15 ml QuEChERS 净化管, 净化管中包括 1200 mg MgSO mg PSA 和 400 mg C18 旋涡震荡样品 1 min, 然后在 5000 rpm 转速下离心 5 min 取上清液 1 ml 于进样瓶中, 直接 GC-MS/MS 分析 2.4 样品基质溶液 1) 标准储备液 : 在十万分之一分析天平上称取每种农药单标化合物 10 mg, 加入 10 ml 相应的溶剂 ( 根据不同的化合物加入丙酮 甲苯或者乙腈 ) 溶解, 配制成浓度为约 1000 mg/l 的溶液 每种单个标准储备液的浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得到 所有单标储备液在 -20 冰箱中冷冻保存 单标储备液的有效期为 6 个月 2) 混合标准中间液 : 移取适量的单标储备液, 用乙腈稀释 中间标准储备液的浓度为 10.0 mg/ml 中间标准储备液在 -20 冰箱中冷冻保存 中间储备液的有效期为 3 个月 3) 工作标准溶液 : 取适量的混合标准中间液, 以空白样品基质液 (2.4) 依次稀释成浓度为 和 µg/l 工作标准溶液 按照 2.3 的程序处理白菜样品, 得到空白样品的基质溶液 28

29 3. 结果分析 3.1 色谱分离结果每个化合物 SRM 质谱条件 ( 母离子 - 子离子 - 碰撞能量 ) 从 TraceFinder 的 CDB 中导出 ( 见表 1), 在该条件下运行样品可得到目标物的 SRM 色谱质谱图见图 1 图 1: 标准溶液色谱图 (200 µg/l) 3.2 方法的最低检测限 以 S/N=3 为计算最低检测限, 结果见表 2 图 2 列出来部分 1 µg/l 的除害剂的色谱图 可以看出, 农残的检出限基本上低于 1.0 µg/l, 足以满足现行国标以及国际上除害剂检测方法的要求, 可保证样品中除害剂的定性与定量检测 图 2:1 µg/l 部分农残的色谱图 29

30 3.3 标准曲线线性 检出限及精密度配置混合标准溶液, 各浓度分别为 : 和 µg/l 采用上述方法分别进样分析, 考察各组分的线性 实验结果表明 101 种农药组分在 µg/l 线性关系良好, 线性相关系数均大于 0.99( 见表 2), 对同一样品连续进样 6 针, RSD 在 % 之间, 重复性良好 按照 IUPAC 方法规定计算各组分检出限, 各组分检出限在 µg/l 之间 ( 见表 2), 基本上满足现行方法对于农残分析 ( 检出限 10 µg/l) 的要求 表 2: 保留时间 线性及 RSD% 数据统计 序号英文名中文名线性范围线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 1 2-phenylphenol 2- 邻苯基苯酚 5.0~200.0 Y=1.361e4X-5.994e Acephate 乙酰甲胺磷 5.0~200.0 Y=7.063e4X-8.141e Acibenzolar-S-methyl 甲噻活素 5.0~200.0 Y=9.513e3X-2.861e Amitraz 双甲眯 5.0~200.0 Y=1.946e4X-8.476e Benfluralin 氟草胺 5.0~200.0 Y=2.551e3X-8.951e BHC, Alpha α- 六六六 5.0~200.0 Y=3.841e4X-1.468e BHC, Beta β- 六六六 5.0~200.0 Y=7.36e3X-1.994e BHC, delta δ- 六六六 5.0~200.0 Y=1.86e4X-5.324e BHC,gama(Lindan) γ- 六六六 5.0~200.0 Y=6.818e3X-1.529e Bifenthrin 毕芬宁 5.0~200.0 Y=3.841e4X-1.468e Boscalid (Nicobifen) 啶酰菌胺 5.0~200.0 Y=3.883e4X-3.087e Bromopropylate 溴螨酯 5.0~200.0 Y=1.181e4X-3.97e Bromoxynil 辛酰溴苯腈 5.0~200.0 Y=5.539e4X-2.705e Butylate (Sutan) 丁草特 5.0~200.0 Y=1.56e4X-4.965e Captan 克菌丹 5.0~200.0 Y=1.282e3X-1.678e Chlorfenapyr 虫螨腈 5.0~200.0 Y=1.6e3X-2.543e Chlorothalonil 百菌清 5.0~200.0 Y=2.098e3X-1.641e Chlorpropham 氯苯胺灵 5.0~200.0 Y=5.898e3X-3.514e Chlorpyrifos-ethyl 毒死蜱 5.0~200.0 Y=4.783e3X-1.116e Chlorpyrifos-methyl 甲基毒死蜱 5.0~200.0 Y=6.302e3X-1.517e Cyfluthrin 氟氯氰菊酯 5.0~200.0 Y=8.081e3X-7.253e Cyhalothrin 氟氯氰菊酯 5.0~200.0 Y=1.672e4X-1.166e Cypermethrin 氯氰菊酯 5.0~200.0 Y=8.325e3X-6.421e Deltamethrin 溴氰菊酯 5.0~200.0 Y=2.676e3X-1.523e

31 序号英文名中文名线性范围线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 25 Diazinon 二嗪农 5.0~200.0 Y=7.443e3X-1.31e Dichlobenil 2,6- 二氯苄腈 5.0~200.0 Y=1.368e4X-3.814e Dichlorvos 敌敌畏 5.0~200.0 Y=8.522e3X-1.567e Dicloran 2,6- 二氯 -4- 硝基苯胺 5.0~200.0 Y=2.129e3X-1.177e Dicofol 三氯杀螨醇 5.0~200.0 Y=1.49e4X-5.305e Dimethipin 噻节因 5.0~200.0 Y=2.292e3X-9.084e Dimethoate 乐果 5.0~200.0 Y=5.13e3X-3.737e Endosulfan peak 1 α- 硫丹 5.0~200.0 Y=6.376e3X-8.567e Endosulfan peak 2 β- 硫丹 5.0~200.0 Y=4.634e3X-7.764e Esfenvalerate 杀灭阿菊酯 5.0~200.0 Y=1.049e4X-7.494e Ethalfluralin 丁氟消草 5.0~200.0 Y=1.066e3X-7.618e Ethion 乙硫磷 5.0~200.0 Y=7.356e3X-2.945e Etofenprox 醚菊酯 5.0~200.0 Y=9.526e4X-5.508e Etoxazole 乙螨唑 5.0~200.0 Y=1.029e4X-1.72e Fenamidone 咪唑菌酮 5.0~200.0 Y=3.608e3X-2.564e Fenamiphos 苯线磷砜 5.0~200.0 Y=3.899e3X-1.098e Fenarimol 氯苯嘧啶醇 5.0~200.0 Y=1.455e4X-1.336e Fenbuconazol 腈苯唑 5.0~200.0 Y=7.287e3X-2.605e Fenitrothion 杀螟松 5.0~200.0 Y=1.693e3X-7.518e Fenpropathrin 甲氰菊酯 5.0~200.0 Y=2.952e4X-9.429e Fenpropimorph 丁苯吗啉 5.0~200.0 Y=3.242e4X-7.842e Fenthion 倍硫磷 5.0~200.0 Y=3.878e3X-1.301e Fenvalerate 敌虫菊酯 5.0~200.0 Y=1.563e4X-1.071e Fludioxonil 咯菌腈 5.0~200.0 Y=5.59e3X-1.103e Flufenacet 氟噻草胺 5.0~200.0 Y=2.401e4X-5.815e flumethrin 氟氯苯菊酯 5.0~200.0 Y=3.873e4X-7.29e Flumiclorac-pentyl 氟烯草酸 10.0~200.0 Y=4.386e2X-3.904e Flumioxazin 丙炔氟草胺 10~200.0 Y=5.845e2X-8.704e Flutriafol 粉唑醇 5.0~200.0 Y=2.171e4X-4.847e Fluvalinate 氟胺氰菊酯 5.0~200.0 Y=2.625e3X-2.534e

32 序号英文名中文名线性范围线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 55 Folpet 灭菌丹 5.0~200.0 Y=2.588e3X-2.562e Iprodione 异菌脲 5.0~200.0 Y=4.116e2X-3.879e Isocarbophos 水胺硫磷 5.0~200.0 Y=7.998e3X-2.065e Isofenphos-methyl 甲基异柳磷 5.0~200.0 Y=1.904e4X-5.144e Malathion 马拉硫磷 5.0~200.0 Y=4.696e3X-1.442e Metalaxyl 甲霜灵 5.0~200.0 Y=1.068e4X-2.475e Methamidophos 甲胺磷 5.0~200.0 Y=3.205e3X-6.102e Methidathion 杀扑磷 5.0~200.0 Y=2.715e4X-1.385e Metolachlor 异丙甲草胺 5.0~200.0 Y=2.412e4X-5.709e Mevinphos 速灭磷 5.0~200.0 Y=1.64e4X-7.319e Napropamide 敌草胺 5.0~200.0 Y=2.954e4X-5.167e Norflurazon 达草灭 5.0~200.0 Y=3.13e3X-1.857e Oxadiazon 恶草酮 5.0~200.0 Y=1.936e4X-5.809e Oxyfluorfen 乙氧氟草醚 5.0~200.0 Y=3.763e2X-1.124e Parathion (ethyl) 对硫磷 5.0~200.0 Y=4.338e3X-1.112e Parathion-methyl 甲基对硫磷 5.0~200.0 Y=1.914e3X-7.718e Penconazole 戊菌唑 5.0~200.0 Y=3.726e3X-4.428e Permethrin 苄氯菊酯 5.0~200.0 Y=1.42e4X-1.03e Phorate 甲拌磷 5.0~200.0 Y=8.979e3X-1.314e Phosalone 伏杀硫磷 5.0~200.0 Y=9.414e3X-4.581e Phosmet 亚胺硫磷 5.0~200.0 Y=1.677e4X-9.46e Pirimiphos-methyl 甲基嘧啶磷 5.0~200.0 Y=1.894e3X-7.081e Procymidone 腐霉利 5.0~200.0 Y=3.024e4X-7.458e Profenofos 丙溴磷 5.0~200.0 Y=1.064e3X-3.309e Propanil 敌稗 5.0~200.0 Y=4.11e3X-8.895e Prothiofos 丙硫磷 5.0~200.0 Y=5.258e3X-1.322e Pyridaben 哒螨灵 5.0~200.0 Y=3.28e4X-1.706e Pyridalyl 三氟甲吡醚 5.0~200.0 Y=5.104e3X-4.297e Pyriproxyfen 吡丙醚 5.0~200.0 Y=1.886e4X-1e Quinalphos 喹硫磷 5.0~200.0 Y=2.047e4X-7.491e

33 序号英文名中文名线性范围线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 85 Quinoxyfen 快诺芬 5.0~200.0 Y=1.12e4X-3.877e Quintozene 五氯硝基苯 5.0~200.0 Y=1.793e3X-9.67e Quizalofop-ethyl 乙基喹禾灵 5.0~200.0 Y=2.141e3X-1.978e semiamitraz 单甲脒 5.0~200.0 Y=8.76e3X-6.876e Simazine 西玛津 5.0~200.0 Y=2.299e3X-9.476e Spirodiclofen 螺螨酯 5.0~200.0 Y=8.253e3X-3.505e spirotetramat 螺虫乙酯 20~200.0 Y=2.372e1X-2.986e TCMTB 苯噻硫氰 20~200.0 Y=4.462e1X-1.386e Tecnazene 四氯硝基苯 5.0~200.0 Y=1.061e3X-1.692e Tefluthrin 七氟菊酯 5.0~200.0 Y=2.432e4X-1.018e Terbufos 特丁硫磷 5.0~200.0 Y=7.477e3X-3.3e Tolclofos-methyl 甲基立枯磷 5.0~200.0 Y=7.964e3X-2.726e Triazophos 三唑磷 5.0~200.0 Y=5.498e3X-3.227e Tribuphos 脱叶磷 5.0~200.0 Y=4.331e3X-2.273e Triflumizole 氟菌唑 5.0~200.0 Y=2.915e3X-6.498e Trifluralin 氟乐灵 5.0~200.0 Y=2.991e3X-1.174e Uniconazole 烯效唑 5.0~200.0 Y=2.212e3X-8.379e 结论本文采用 QuEChERS 前处理 - 气相串联质谱法 (QuEChERS GC-MS/MS) 测定蔬菜基质中的 101 项农残, 样品前处理只需要 60 min 即可完成, 无须经过繁琐的人工前处理过程 以快速的 QuEChERS 前处理结合 Thermo Fisher 的 TSQ 8000 Evo 三重四极杆仪器, 为农残分析带来灵敏度高 准确性好 方便易用的解决方案 总而言之, 由赛默飞世尔科技提供的完整工作流程解决方案连同最新开发的 TSQ 8000 GC-MS/MS 系统为多农残的分析和准确定量带来了良好的系统性能 致谢 特别感谢深圳市出入境检验检疫局提供检测样品及化合物混标, 共同完成此篇应用文章 33

34 关于赛默飞世尔科技 赛默飞世尔科技 ( 纽约证交所代码 :TMO) 是科学服务领域的世界领导者 公司年销售额 170 亿美元, 在 50 个国家拥有约 50,000 名员工 我们的使命是帮助客户使世界更健康 更清洁 更安全 我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究 解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战, 促进医疗诊断发展 提高实验室生产力 借助于首要品牌 Thermo Scientific Applied Biosystems Invitrogen Fisher Scientific 和 Unity Lab Services, 我们将创新技术 便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合, 为客户 股东和员工创造价值 欲了解更多信息, 请浏览公司网站 : 赛默飞世尔科技中国 赛默飞世尔科技进入中国发展已有 30 多年, 在中国的总部设于上海, 并在北京 广州 香港 台湾 成都 沈阳 西安 南京 武汉等地设立了分公司, 员工人数约 3700 名 我们的产品主要包括分析仪器 实验室设备 试剂 耗材和软件等, 提供实验室综合解决方案, 为各行各业的客户服务 为了满足中国市场的需求, 现有 8 家工厂分别在上海 北京和苏州运营 我们在全国共设立了 6 个应用开发中心, 将世界级的前沿技术和产品带给国内客户, 并提供应用开发与培训等多项服务 ; 位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术, 研发适合中国的技术和产品 ; 我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队, 在全国有超过 2000 名专业人员直接为客户提供服务 我们致力于帮助客户使世界更健康 更清洁 更安全 欲了解更多信息, 请登录网站 Orbitrap 组学俱乐部 赛默飞小分子质谱应用技术群 赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司 全国服务热线 : ( 支持手机用户 ) AN_C_GCMSMS_4_201506Y

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print p 真 (3Cx, 0535-(388435 第 1 页 - w 5 页 1 戊菌隆 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 2 甲拌磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 3 k 氯硝基苯 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 4 地虫硫磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 5 艾氏剂 0.0125

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