Chapter : 中文摘要Ｃｈｉｎｅｓｅｓｕｍｍａｒｙ Nederlandse samenvatting

Size: px

Start display at page:

Download "Chapter : 中文摘要Ｃｈｉｎｅｓｅｓｕｍｍａｒｙ Nederlandse samenvatting"

染苍
5 years ago
Views:

1 University of Groningen Targeting inflammatory responses in the brain dead donor Liu, Bo IMPORTANT NOTE: You are advised to consult the publisher's version (publisher's PDF) if you wish to cite from it. Please check the document version below. Document Version Publisher's PDF, also known as Version of record Publication date: 2016 Link to publication in University of Groningen/UMCG research database Citation for published version (APA): Liu, B. (2016). Targeting inflammatory responses in the brain dead donor [Groningen]: University of Groningen Copyright Other than for strictly personal use, it is not permitted to download or to forward/distribute the text or part of it without the consent of the author(s) and/or copyright holder(s), unless the work is under an open content license (like Creative Commons). Take-down policy If you believe that this document breaches copyright please contact us providing details, and we will remove access to the work immediately and investigate your claim. Downloaded from the University of Groningen/UMCG research database (Pure): For technical reasons the number of authors shown on this cover page is limited to 10 maximum. Download date:

2 Chapter : 中文摘要Ｃｈｉｎｅｓｅｓｕｍｍａｒｙ Nederlandse samenvatting

3 Chapter 中文摘要对于肾病终末期的患者来讲的确有多种治疗方法来维持生命, 例如血液透析, 不过他们还是愿意选择器官移植来提高自己的生活质量但是, 患者的需求和供体的缺乏之间的矛盾持续加剧 2013 年在欧洲仅完成 3183 例肾移植手术, 与此同时仍有 105 名肾功能衰竭的病人等待移植手术而且在美国, 每年有大约 2000 名因为死亡而从等候名单中被删除所以, 增加供体器官成为移植领域中的重要任务除了活体供体和循环衰竭的供体之外, 脑死亡供体成为主要来源然而脑死亡本身就是一个重大的危险因素, 相比与活体供体器官, 它可以导致移植器官功能和存活率的下降, 和急性排斥反应的上升脑死亡是一个独立的危险因素, 与供体的年龄保存方法 HLA 匹配性和缺血再灌注损伤并不相关在过去的几十年中, 我们和其他人员一直致力于脑死亡的实验室和临床研究以便最大程度地利用供体器官和提高移植的成功率作为一个不可逆的病理生理过程, 脑死亡引起明显的血液动力学紊乱内分泌功能改变和炎症反应我们和其他的科研团队发现脑死亡引起广泛的系统和局部的免疫激活反应, 它对脑死亡的供体器官功能下降起着重要作用急性时相蛋白介导下游的炎症反应, 我们猜测如果抑制急性时相蛋白可能是一种有效的治疗方法, 以提高器官移植的效果此篇论文的前半部分专注于甲基强的松龙对于脑死亡供体的预处理在第一节中, 我们在脑死亡确诊之前给脑死亡模型大鼠注射甲基强的松龙, 并检测它的作用与对照组比较, 我们发现血肌酐水平下降和肾组织急性时相蛋白的表达下降, 这表明肾功能的改善和炎症反应的抑制但是通过检测血浆 AST 和 ALT 水平, 我们并没有发现肝细胞损伤程度的明显改变众所周知, 甲基强的松龙可以抑制炎 120

4 Chinese summary 症反应但是我们的研究提示在脑死亡大鼠模型中, 甲基强的松龙的预治疗对肾肝有不同的作用所以我们的研究结果仅仅评估它的单次剂量的作用和脑死亡确诊之前预治疗的作用因此在第二节中, 我们评估不同剂量的甲基强的松龙在脑死亡确诊之后预治疗的作用, 这样更接近临床的治疗过程根据第一节的发现, 我们认为注射甲基强的松龙将会降低供体的炎症反应改善肝肾功能, 以支持目前临床上甲基强的松龙对脑死亡供体的预治疗出乎意料的是, 通过检测与第一节相同的指标后我们发现脑死亡确诊后一个小时的甲基强的松龙预治疗并没有改善供体的肝肾功能比较两个实验设置我们发现有两个区别 : 其一是注射甲基强的松龙的时间点不同 ; 其二是注射甲基强的松龙和供体器官获取之间的时间间隔不同而且脑死亡之前的甲基强的松龙预治疗导致其中一个关键的急性时相蛋白 - 补体 C3 在肾组织的基因表达下降此外, 肾组织保护性蛋白 HSP-0 的表达在脑死亡之前的甲基强的松龙预治疗中下降 ; 而在脑死亡之后一小时的甲基强的松龙预治疗中则没有变化, 同时伴有血浆 AST 和 ALT 的上升在以上两节中值得注意的是, 脑死亡之前和之后的甲基强的松龙预治疗都明显地降低 IL-6 和 TNF-a 的血浆水平和基因表达这对供体器官功能的改善可能是重要的潜在机制细胞因子 IL-6 和 TNF-a 是强效的急性时相蛋白, 在致炎性过程中起主导作用目前在许多自身免疫性疾病的治疗中抑制 IL-6 和 TNF-a 成为一种有效的方法, 特别是在糖皮质激素治疗无效的情况下尤为显著因为这个原因, 我们在本论文的第二部分论证 : 在脑死亡供体上分别直接抑制 IL-6 和 TNF-a 可能会对炎症水平和肾功能起到一定的作用然而, 第三节和第四节的研究结果表明 : 通过检测血肌酐水平和急性时相蛋白的基因表达, 在脑死亡确诊之前一小时给予单次单一剂量的抗体中和 IL-6 和 TNF-a 不能改善肾功能和降低急性炎症反应 IL-6 和 TNF-a 是两种典型的多效性细胞炎性因子, 通过结合自身高亲和力 121

5 Chapter 的受体在急性炎症过程中起到损伤和修复的作用但是中和它们中的任何一个都无法平息系统和局部的炎症反应这样的结果当然暗示到它们的抗炎功效也被抑制 IL-6 和 TNF-a 的表达上调同时触发负反馈环路, 通过合成并释放炎性细胞因子的拮抗剂来抑制过度的免疫反应虽然 IL-6 TNF-a 以及其他主要的免疫分子之间可以相互重叠相互作用, 但是它们有着各自相对独立的信号传导路径来调控炎性反应因此, 中和其中一个炎性因子不足以抑制整个免疫反应进而我们认为抑制脑死亡供体学循环中的 IL-6 或 TNF-a 并不会改善供体器官的功能综合上述结果得出结论 : 脑死亡是一个多重复杂的病理生理过程抑制炎症激活放大的最佳方法是在不同的层次上选择性的抑制 IL-6 和 TNF-a 有害的部分因素来减弱脑死亡引起的损伤, 同时保留它们有益的部分因素未来有潜能的治疗方法之一就是选择性的中和抑制 Sgp130Fc 是 gp130 胞外域的一种融合蛋白, 伴有人类 IgG 抗体的 Fc 片段, 它被设计成可以选择性的拮抗 IL-6/sIL-6R 复合物与完全中和 IL-6 活性的抗体相比,Sgp130Fc 可以抑制 IL-6 的跨越信号通路, 也就是炎症激活的有害部分 ; 而保留 IL-6 的经典信号通路, 也就是必不可少的有益部分 Sgp130Fc 在细胞膜外发挥作用, 机制上类似 tocilizumab 拮抗 IL-6R 而应用于风湿性关节炎的治疗除此之外, 还有其他的小分子 ( 例如 tofacitinib) 干扰 Jak/STAT 信号级联放大效应而在细胞膜内水平抑制绝大多数炎性细胞因子的活性对于抑制 TNF-a 通路的理想治疗方法是拮抗有害的信号通路, 它通过 stnf 结合 TNFR-1 介导 ; 同时保留有益的信号通路, 它通过 tmtnf 结合 TNFR-2 来免疫调控 Etanercept 是一种融合蛋白, 它由 TNFR2 分子细胞外的部分和 IgG1 分子的 Fc 片段组成 Etanercept 对 tmtnf 有较低的亲和性 Furst D E 和他的同事报道使用 Etanercept 可 122

6 Chinese summary 以降低感染的发生率其他的抑制剂还包括 Xpro 1595 拮抗 stnf; 和 R1antTNF 拮抗 TNFR1. 免疫抑制治疗可能是另一种选择为了肾移植的病人提供高度的免疫抑制效果, 诱导免疫抑制治疗经常使用而避免早期急性排斥反应所有的诱导免疫抑制剂要么是单克隆 (rituximab, basiliximab, alemtuzumab) 要么是多克隆 (antithymocyte globulin antibodies[atg]) ATG 通过多种机制损耗和调整 T 细胞, 包括 Fc 受体介导的补体依赖性细胞溶解, 巨噬细胞的调理和吞噬作用, 通过细胞凋亡和抗体依赖性的 T 介导的细胞毒性所引起的免疫调节而导致的长期损耗这样 ATG 对细胞和体液免疫应答起到深远的干扰 Alemtuzumab 是一种抗 CD52 人源化单克隆抗体, 用于治疗慢性 B 淋巴细胞白血病实际上, 所有的 B 细胞 T 细胞巨噬细胞 NK 细胞和粒细胞都表达 CD52 Alemtuzumab 结合 CD52 触发抗体依赖的细胞溶解 Basiliximab 高亲和力地结合 IL-2 受体的 alpha 亚基, 就是 CD25 它作为受体拮抗剂抑制 T 细胞的活性而且在无细胞溶解和破坏的情况下继续增殖 Basiliximab 最明显的是安全, 特别过敏性反应和细胞恶变发生率很低 Rituximab 是一种抗 CD20 人源化单克隆抗体, 用于 CD20 阳性的非 Hodgkin 淋巴细胞癌和类风湿关节炎 CD20 是血循环中成熟 B 细胞所表达的一种表明抗原 Rituximab 作为诱导剂抑制抗体介导和细胞介导的排斥反应诱导免疫治疗在器官移植后的早期通过提供高度免疫抑制而预防急性排斥反应已经得到广泛认可目前,ATG 得到最普遍的应用, 而 basiliximab 使用在肾移植受者也很安全我们预想诱导免疫治疗对于抑制脑死亡供体的炎性反应可能是一种非常有潜能的方法为了最大程度地利用供体器官和改善受体功能, 对供体的积极治疗是应该考虑的目前糖皮质激素对脑死亡供体的预治疗是有效的, 实验室和临床数据证明它可以阻止免疫反应的放大然而, 我们手中 123

7 Chapter 的武器还比较薄弱, 主要是对供体的损伤机制理解不深入进一步的研究内容是阐明脑死亡的损伤机制和炎症反应机理, 以开发一种更加特别有效的治疗方法来改善供体的器官功能 124

8 Nederlandse samenvatting Samenvatting NEDERLANDSE SAMENVATTING Ondanks verscheidene therapieen voor eindstadium nierfalen, kiezen patienten uiteindelijk voor orgaan transplantatie om hun kwaliteit van leven te verbeteren. Helaas word de disbalans tussen het aanbod van organen en de vraag steeds verder verslechterd. In 2013, zijn 3183 niertransplantaties uitgevoerd in de Eurotransplant regio, terwijl er 105 patienten met nierfalen op de wachtlijst stonden. In de Verenigde Staten overlijden ongeveer 2000 patienten per jaar tijdens het wachten op een levertransplantatie. Daarom is het vergroten van de donorpool een belangrijke taak in het veld van orgaantransplantatie. Hersendode donoren vormen de grootste bron van organen naast hartdode en levende donoren. Echter, hersendood is een risicofactor voor verminderde orgaanfunctie, verminderde overlevingspercentages, en verhoogd risico op afstoting in de ontvanger vergeleken met levende donoren. Het effect van hersendood is onafhankelijk van andere risicofactoren zoals leeftijd, preservatie methoden, HLA incompatibiliteit en ischemie-reperfusie schade. In de laatste decennia hebben wij en andere de focus gelegd op het tegengaan van de schadelijke effecten van hersendood om transplantatie uitkomsten te verbeteren. Hersendood is een irreversibele pathofysiologisch proces dat leidt tot significante veranderingen in hemodynamiek, hormonale huishouding, en inflammatie. Wij, en anderen, hebben een wijd verspreide systemische en immunologische activatie geobserveerd wat verantwoordelijk geacht word de verminderde transplantatie uitkomsten. Wij hebben gehypothetizeerd dat het "targeten" van acute fase eiwitten, die de immuun respons verder naar benden in de keten medieeren, een effectieve strategie is om transplantatie uitkomsten te verbeteren. Het eerste deel van dit proefschrift richt zich op het voorbehandelen van de hersendode donor met prednisolon. In Hoofdstuk 1, hebben we het effect getest van prednisolon toediening voor de inductie van hersendood. Wij vonden verbeterde nierfunctie. Aan de hand van plasma creatinine waarden, en verminderde renale inflammatie aan de hand va lokale gen expressie van acute fase eiwitten vergeleken met onbehandelde dieren. In tegenstelling tot dit, was er geen verschil tussen beide groepen in lever schade markers zoals aspartate aminotransferase (AST) en alanine aminotransferase (ALT). Prednisolon kan de inflammatie reactie 125

9 Chapter onderdrukken maar onze studie suggereert verschillende rollen van prednisolon in de nier en lever als het gebruikt word als voorbehandeling. Desalniettemin, hebben wij echter alleen het effect van een enkele dosis voor de inductie van hersendood ge valueerd. Daarom hebben wij in hoofdstuk 2 het effect van verschillende doseringen prednisolon na hersendood inductie gevalueerd, wat tegelijkertijd ook meer klinische relevantie heeft. Met de resultaten uit hoofdstuk 1 in het achterhoofd verwachtten wij dat prednisolon toediening de inflammatie respons in de donor zou reduceren en de functie van de nier en lever zou verbeteren en daarmee de huidig klinische praktijk van het behandelen van potentiale donors met prednisolon rechtvaardigen. Helaas hebben wij geconstateerd dat predinsolon toediening 1 uur na hersendood inductie geen verbetering oplevert van nier en lever functie markers. Het verschil in opzet tussen de twee experimentele proeven is het tijdstip van prednisolon toediening en het tijdsinterval tussen toediening en orgaan oogsting. Ook was één van de acute fase eiwitten voor het complemet systeem, C3, alleen verlaagd in de nier na behandeling voor hersendood inductie. Verder was het beschermende Hsp0 geinhibeerd bij voorbehandeling en ongestoord bij nabehandeling. Nabehandeling met prednisolon 1 ur na hersendood inductie leidde tot een toename in plasma levels van AST en LDH. Van belang, wij hebben in voorgaande twee hoofdstukken geobserveerd dat prednisolon voor -en nabehandeling tot een significante reductie leidt van sytemische levels van lokale gen expressie van interleukin -6 (IL -6) en tumor necrosis factor(tnf-α). Dit zou het onderliggende mechanisme voor de verbeterde orgaanfuncie kunnen zijn. De cytokines IL-6 en TNF-α zijn bekend als potente acute fase eiwitten en worden geacht een centrale rol in pro -inflammatoire processen te spelen. Het moduleren van IL -6 en TNF -α word voorgesteld als therapie bij veel autoimmuue ziekte, vooraal wanneer behandeling met stero? den faalt. Daarom hebben wij in het tweede deel van die proefschrift het effect van directe blokkade van IL-6 of TNF-α respectievelijk getest op cytokine levels en nierfunctie van potentiale hersendode donoren. Desondanks laat de data uit hoofdstuk 3 en 4 zien dat het " neutralizeren" van IL-6 en TNF-α, met één dosis antilichaam 1 uur voor de inductie van hersendood niet leid tot verbeterde nierfunctie noch een verlaging in acute fase eiwitten. Beide Il-6 en TNF-α zijn twee typische pleiotropische cytokines met zowel schadelijk als beschermende rollen in acute immuun reacties door binding met hun hoge affiniteit receptoren. Het blokkeren van één van deze cytokines zal niet leiden tot een totale blokkade van de systemische als de lokale inflammatoire respons. De resultaten impliceren echter dat hun anti -inflammatoire eigenschappen geblokeerd worden. Het 126

10 Nederlandse samenvatting opreguleren van IL -6 of TNF -α kan negatieve feedback induceren om de immuunreactie te onderdrukken via de release van antagonisten of pro - inflammatoire cytokines. Ook hebben IL-6 en TNF- α en andere centrale cytokines relatieve onafhankelijke signaal transductie pathways die de immuunrespons medieren, ook al tonen zij overlap en ineracteren ze op verschillende niveaus. Dus, het inhiberen van één deze cytokines leidt niet per se to teen blokkade van de gehele immuun -respons. Wij hebben laten zien dat blokkade van circulerend IL-6 en TNF- α in hersendode donors niet leidt to verbeterde orgaan kwaliteit. Samenvattend leiden deze resultaten tot de conclusie dat patho -fysiologische processen die tijdens hersendood plaatsvinden multipel en complex zijn. De beste manier om de inflammatoire cascade te onderdrukken zou de selectieve blokkade zijn van de negatieve effecten van IL-6 en TNF- α op verschillende levels. Toekomstperspectiven Een van de potentiale therapieen zou "selective targeting" kunnen zijn. Sgp130Fc, een fusie-eiwit van het gp130 domein met het Fc gedeelte van humaan IgG antilichaam, is genetisch vervaardigd voor selectieve "targeting" van het Il-6/ SIL -6R complex. Vergeleken met de globale blokkade van IL -6 activatie met " neutralizerend" antilichaam, had het superieure effecten via de selectieve blokkade van IL -6 "trans -signaling" wat voornamelijk de pro -inflammatoire en dus potentieel schadelijke effecten van Il-6 verantwoordelijkt, in tegenstelling tot het klassieke "signaling" wat essentieel is voor de beschermende effecten van IL -6. Het mechanisme van sgp130fc is extracellulair, hetzelfde als dat van tocilizumab " targeting" van IL-6 in reumatoide artritis. Verder, andere kleine moleculen(zoals tofacitinib) interfereren met de Jak/STAT signaal transductie cascade om de activiteit van de meeste cytokines te blokkeren op intracellulair niveau. Voor het moduleren van de TNF "pathway" zou de ideale therapie gericht zijn op het inhiberen van ongewenste effecten die gemedieerd worden door soluble TNF (stnf) binding TNF receptor (TNFR)-1, terwijl de gunstige effecten behouden blijven die gemedieerd worden door trans-membrane TNF(tmTNF) binding TNFR2. Etanercept, een fusie -eiwit bestaande uit het extracellulaire gedeelte van twee TNFR2 moleculen gekoppeld aan het Fc egio van een IgG molecuul, is een minder potente inhibitor van tmtnf. Furst D.E. en zijn collega's hebben gerapporteerd dat Etanercept geassocieerd is met een lagere incidentie van infecties. Andere inhibitoren zijn Xpro 1595 targeting stnf, en R1antTNF targeting TNFR1. 12

11 Chapter Inductive immunosuppressieve therapie zou een andere keuze. Immunosu ppresieve therapie word veelal gebruikt in ontvangers van nieren om vroege acute rejectie te voorkomen. De immunosupressiva zijn of monoklonaal (rituximab, basiliximab, alemtuzumab) of polyklonaal (antithymocyte globulin antibodies (ATG)). ATG word verondersteld T -cel depletie te induceren en te moduleren aan de hand van meerdere mechanismen, waaronder Fc -receptor gemedieerde en complement -afhankelijk lysis, opsonizatie en fagocytose door macrofagen, en immunomodulatie wat leidt tot langere termijn depletie via apoptose en antilichaam -afhankelijke en T -cell gemedieerde cytotoxiciteit. zodoende leidt dit tot aanzienlijke interferentie met zowel de cellulaire als de humorale respons. Alemtuzumab is een anti-cd52 gehumaniseerd monoklonaal antilichaam wat gebruikt wordt in de behandeling van chronische B-cell lymfocytaire leukemie. CD52 word tot expressie gebracht op praktisch alle B en T cellen, zowel macrofage, NK cellen en granulocyten. Bindend aan CD25, induceert alemtuzumab een antilichaam - afhankelijke lysis van deze cellen. Basiliximab bindt met hoge affiniteit aan de alpha subunit van de IL -2 receptor, CD25, waar het als receptor antagonist fungeert om T-cell activatie en vervolgens proliferatie te voorkomen zonder lysis en celdestructie. Veiligheid is een van de meest evidente voordelen van basiliximab, vooral ook in laag frequetie in hypersensitiviteit reacties en maligniteiten. Rituximab is een anti -CD20, gehumaniseerd, monoklonaal antilichaam wat gebruikt wordt for CD20-positieve non-hodgkin lymphomas en reumatoide artritis. CD20 komt tot expressie op alle circulerende en gematureerde B cellen. Rituximab inhibeert antilichaam-gemedieerde rejectie en acute cellulaire rejectie. Het is alom geaccepteerd dat inductie-therapie acute rejectie voorkomt gedurende het vroege "post -transplantatie" periode door een hoge graad aan immunosup- pressie te bieden. Momenteel, is ATG de meest gebruikte therapie alhoewel basil- iximab veiliger schijnt te zijn. Wij verwachten dat inductie-therapie een potentiele therapie is in hersendode donoren om de inflammatoire respons te onderdrukken. 128

12 Nederlandse samenvatting Conclusies Om de hoeveelheid donor organen te vermeerderen en transplantatie uitkomsten te ver- beteren moet een aggressief donor-managment strategie overwogen worden. Voorbehan- deling van donoren met steroide is effectief om de inflammatoire respons te onder- drukken in beide experimentele en klinische setting. Desondanks, onze therapie? n blijven zwak vanwege onze beperkte kennis van het "schade-mechanisme". Verder on- derzoek is noodzakelijk om de mechanismes op te helderen die leiden tot inflam- matie en schade om zodoende efficiente therapie te kunnen realiseren. 129

Editor's Note Sharon Chang 5 Simon Sinek2017 Thinkers50 TED Talk 3500 TED.com 01

vol 3 Point Three Editor's Note Sharon Chang 5 Simon Sinek2017 Thinkers50 TED Talk 3500 TED.com 01 vol 3 June 2018 P 06 C O N T E N T S P 11 P 16 P 23 P 28 P 34 P 38 02 03 04 05 Erin Chang 120 1,260 5,100

Chapter : 中文摘要 Ｃｈｉｎｅｓｅ ｓｕｍｍａｒｙ Nederlandse samenvatting

Chapter : 中文摘要Ｃｈｉｎｅｓｅｓｕｍｍａｒｙ Nederlandse samenvatting