5 10 15 20 25 30 35 40 肺 癌 组 织 Vimentin 表 达 与 肿 瘤 转 移 中 医 # 证 型 研 究 王 淑 美 1,2, 林 丽 珠 1, 熊 绍 权 (1. 广 州 中 医 药 大 学 第 一 附 属 医 院 肿 瘤 科, 广 州 510405; 2. 重 庆 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 重 庆 401331; 3. 成 都 中 医 药 大 学 附 属 医 院 肿 瘤 科, 成 都 610075) 摘 要 : 目 的 : 研 究 Vimentin 在 人 肺 癌 病 理 组 织 的 表 达 及 与 肿 瘤 转 移 及 中 医 辨 证 分 型 的 相 关 性 方 法 : 收 集 按 4 种 证 型 辨 证 的 肺 癌 病 理 79 例, 肺 良 性 病 变 20 例, 免 疫 组 化 法 检 测 肺 癌 癌 旁 组 织 肺 良 性 病 变 及 不 同 证 型 肺 癌 组 织 Vimentin 的 表 达 结 果 :Vimentin 在 肺 癌 组 织 表 达 强, 癌 旁 组 织 表 达 弱, 正 常 肺 泡 上 皮 表 达 弱 (P<0.05) ; 炎 症 及 转 移 明 显 的 组 织 表 达 更 强 (P<0.05);4 种 中 医 证 型 间 差 异 无 显 著 性 (P>0.05) 结 论 :Vimentin 在 肺 癌 组 织 表 达 强, 炎 症 及 转 移 明 显 的 组 织 表 达 更 强, 与 中 医 证 型 没 有 相 关 性 关 键 词 : 肺 癌 ;Vimentin; 淋 巴 结 转 移 ; 感 染 ; 中 医 证 型 Expression of Vimentin and its relation with lymphnode metastasis and 4 types of tranditional Chinese medicine Syndromes of lung cancer Wang Shumei 1,2, Lin Lizhu 1, Xiong Shaoquan 1,3 (1. Department of Oncology of The First Affiliated Hospital of GuangZhou Traditional Chinese Medicine University, GuangZhou 510405; 2. College of traditional Chinese medicine Chongqing medical university, ChongQing 401331; 3. Department of Oncology, the Affiliated Hospital,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ChengDu 610705) Abstract: Objective:To study the expression of Vimentin and its relation with lymph node metastasis and 4 types of tranditional Chinese medicine (TCM) syndromes of lung cancer. Methods:The expression of Vimentin was detected by immunohistochemistry in 79 cases of lung cancer tissues,4 adjacent tissues samples and 20 cases benign pulmonary lesions tissue. Analysis of Vimentin protein and clinical features of lung cancer, as well as correlation among lymph node metastasis,infection and 4 types of TCM syndromes of lung cancer were conducted. Results:Compared with adjacent tissuesand benign pulmonary lesions tissue, lung cancer tissues had higher expression of Vimentin ( P < 0.05) and increased expression of Vimentin was related to the lymph node metastasis and infection ( P < 0.05 ),there were no diffrence in 4 types of TCM syndromes ( P > 0.05). Conclusions:Vimentin may be involved in the transformation of epithelial cells into the mesenchymal cells, and itmay plays an important role in the lymph node metastasis of lung cancer.. Keywords: lung carcinoma; Vimentin; metastasis; Infection; syndrone of tranditional Chinese medicine 0 引 言 肺 癌 是 当 今 大 中 城 市 发 病 率 和 死 亡 率 居 于 首 位 的 恶 性 肿 瘤 其 诊 断 和 治 疗 尚 存 在 很 大 的 发 展 空 间 前 期 我 们 采 用 比 较 蛋 白 质 组 学 的 方 法 研 究 发 现 益 气 除 痰 方 治 疗 LEWIS 肺 癌 小 鼠 1,3** 基 金 项 目 : 高 等 学 校 博 士 学 科 点 专 项 科 研 基 金 资 助 (20094425110007;20094425120008) 作 者 简 介 : 王 淑 美,(1969-), 女, 副 教 授, 中 西 医 结 合 肿 瘤 学 博 士, 主 要 从 事 抗 肿 瘤 中 药 药 理 研 究 E-mail: wangshumei968@yahoo.com.cn 通 信 联 系 人 : 林 丽 珠,(1962-), 女, 教 授, 博 士 生 导 师, 从 事 恶 性 肿 瘤 中 西 医 结 合 治 疗. E-mail: lizhulin903@21.com - 1 -
45 后 下 降 最 显 著 的 蛋 白 是 波 形 蛋 白 Vimentin [1,2] 最 新 研 究 表 明 Vimentin 是 肿 瘤 间 质 细 胞 标 志 因 子, 其 高 表 达 标 志 着 上 皮 - 间 质 转 化 (Epithelial-mesenchymal transition, EMT) 过 程 的 发 生 据 报 道 肺 癌 发 生 EMT 可 以 促 进 肿 瘤 的 进 展 转 移 和 耐 药 [3-5] 本 研 究 采 用 肺 癌 临 床 病 理 切 片 检 测 Vimentin 在 肺 癌 癌 旁 组 织 伴 / 不 伴 淋 巴 结 转 移 伴 / 不 伴 感 染 及 不 同 中 医 证 型 的 表 达, 旨 在 探 讨 Vimentin 在 肺 癌 诊 断 治 疗 及 判 断 预 后 的 意 义 1 资 料 与 方 法 1.1 诊 断 标 准 50 55 60 (1) 参 照 中 华 人 民 共 和 国 医 政 司 编 写 的 常 见 恶 性 肿 瘤 诊 治 规 范 [72] 中 的 原 发 性 支 气 管 肺 癌 的 诊 断 标 准 分 期 标 准 按 照 国 际 抗 癌 联 盟 (UICC)1997 年 制 定 的 肺 癌 TMN 分 期 系 统 [6] (2) 中 医 辨 证 分 型 标 准 : 参 照 周 岱 翰 主 编, 临 床 中 医 肿 瘤 学, 人 民 卫 生 出 版 社, 2003 年 [7] 1 肺 郁 痰 瘀 型 : 咳 嗽 不 畅, 痰 中 带 血, 胸 胁 痛 或 胸 闷 气 急, 唇 紫, 口 干, 便 秘, 舌 暗 红, 有 瘀 斑 ( 点 ), 苔 白 或 黄, 脉 弦 滑 2 脾 虚 痰 湿 型 : 咳 嗽 痰 多, 胸 闷 气 短, 疲 乏 懒 言, 纳 呆 消 瘦, 腹 胀 便 溏, 舌 边 有 齿 痕, 舌 苔 白 腻, 脉 濡 缓 滑 3 阴 虚 痰 热 型 : 咳 嗽 痰 少, 干 咳 无 痰, 或 痰 带 血 丝, 咳 血, 胸 闷 气 急, 潮 热 盗 汗, 头 晕 耳 鸣, 心 烦 口 干, 尿 赤 便 结, 舌 红 绛, 苔 花 剥 或 舌 光 无 苔, 脉 细 数 无 力 4 气 阴 两 虚 型 : 干 咳 少 痰, 咳 声 低 微, 或 痰 少 带 血, 颜 面 萎 黄 暗 淡, 唇 红, 神 疲 乏 力, 口 干 短 气, 纳 呆 肉 削, 舌 淡 红 或 胖, 苔 白 干 或 无 苔, 脉 细 如 丝 1.2 纳 入 标 准 65 70 (1) 符 合 非 小 细 胞 肺 癌 西 医 诊 断 标 准 与 分 期 标 准, 经 病 理 或 细 胞 学 诊 断 的 Ⅲa Ⅲb Ⅳ 期 NSCLC 患 者 ; (2) 年 龄 18-80 岁 ; (3)KPS 60 分, 生 存 期 超 过 6 个 月 ; (4) 住 院 或 门 诊 病 历 资 料 完 整 者 ; (5) 伴 / 不 伴 淋 巴 结 转 移 1.3 排 除 标 准 (1) 排 除 临 床 诊 断 和 病 理 诊 断 不 明 确 者 ; (2) 未 按 周 岱 翰 肺 癌 辨 证 分 型 四 型 者 ; (3) 病 历 资 料 不 详 者 1.4 病 理 资 料 来 源 75 99 例 广 州 中 医 药 大 学 第 一 附 属 医 院 病 理 科 2006 年 10 月 ~2010 年 10 月 手 术 或 肺 穿 刺 活 检 的 患 者, 保 存 完 好 的 蜡 块 鳞 癌 10 例, 男 性 6 例, 女 性 4 例, 低 分 化 6 例, 中 分 化 2 例, 高 分 化 2 例, 淋 巴 结 转 移 的 7 例, 无 转 移 的 3 例, 伴 有 感 染 的 6 例, 不 伴 感 染 的 4 例, 脾 虚 痰 湿 型 4 例, 肺 郁 痰 瘀 型 3 例, 阴 虚 痰 热 型 2 例, 气 阴 两 虚 型 1 例, 平 均 年 龄 57.6 岁 ; 腺 癌 69 例, 男 性 39 例, 女 性 30 例, 低 分 化 20 例, 中 分 化 26 例, 高 分 化 23 例, 淋 巴 结 转 移 - 2 -
80 85 的 49 例, 无 转 移 的 20 例, 伴 有 感 染 的 30 例, 不 伴 感 染 的 39 例, 脾 虚 痰 湿 型 35 例, 肺 郁 痰 瘀 型 15 例, 阴 虚 痰 热 型 10 例, 气 阴 两 虚 型 9 例, 平 均 年 龄 62.7 岁 ; 可 见 到 癌 旁 组 织 的 4 例, 男 性 2 例, 女 性 2 例, 腺 癌 3 例, 鳞 癌 1 例, 淋 巴 结 转 移 的 2 例, 无 转 移 的 2 例, 伴 有 感 染 的 0 例, 不 伴 感 染 的 4 例, 脾 虚 痰 湿 型 2 例, 肺 郁 痰 瘀 型 1 例, 阴 虚 痰 热 型 0 例, 气 阴 两 虚 型 1 例, 平 均 年 龄 55 岁 ; 支 气 管 粘 膜 慢 性 炎 症 肺 间 质 纤 维 增 生 伴 慢 性 炎 症 组 织 20 例, 男 性 14 例, 女 性 8 例, 平 均 年 龄 52 岁, 其 中 支 气 管 粘 膜 肺 间 质 慢 性 炎 症 10 例, 肺 间 质 纤 维 增 生 肉 芽 肿 共 10 例 1.5 免 疫 组 化 法 检 测 肺 癌 癌 旁 组 织 肺 良 性 病 变 ( 炎 症 增 生 ) 组 织 Vimentin 8 的 表 达 90 95 100 105 110 115 按 照 链 霉 卵 白 素 - 生 物 素 过 氧 化 物 酶 法 (SP) 试 剂 盒 说 明 书 进 行 进 行 免 疫 组 化 染 色, 步 骤 如 下 : (1) 石 蜡 切 片, 贴 敷 在 玻 片 上 ; (2) 脱 蜡, 置 于 烘 箱 中 60 预 热 20min; (3) 自 动 染 色 机 10min, 包 括 二 甲 苯 脱 蜡, 依 次 经 过 100% 95% 85% 70% 浓 度 乙 醇 ; (4)PBS 洗 3min 3 次 ; (5)3%H 2 O 2 室 温 孵 育 10min, 以 消 除 内 源 性 过 氧 化 物 酶 的 活 性 ; (6) 双 蒸 水 冲 洗,PBS 浸 泡 5min; (7) 微 波 修 复 : 抗 原 修 复 液 (EDTA PH9.0) 烧 杯 煮 沸, 然 后 端 离 电 炉, 把 片 放 入 烧 杯 内, 微 波 炉 中 高 档 10 min, 打 开 微 波 炉 片 刻, 转 低 档 0 min, 取 出, 室 温 冷 却 30min; (8)PBS 洗 3min 3 次 ; (9) 取 出, 滤 纸 吸 干 水 分, 画 圈, 放 湿 盒 ; (10) 正 常 山 羊 血 清 工 作 液 封 闭, 室 温 孵 育 10min 弃 血 清, 滴 加 按 照 1:100 稀 释 的 Ⅰ 抗 Vimentin, 阴 性 对 照 用 PBS 代 替 Ⅰ 抗, 微 波 炉 2.5min, 反 应 档 10min, 换 水, 重 复 一 次, 共 10min; (11)PBS 洗,5min 3 次 ; (12) 滴 加 生 物 素 标 记 Ⅱ 抗 工 作 液, 微 波 炉 10min; (13)PBS 洗,5min 3 次 ; (14) 滴 加 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 链 霉 卵 白 素 工 作 液,37 孵 育 30min; (15)PBS 洗,5min 3 次 ; (16)DAB 显 色 按 照 试 剂 盒 说 明 书 进 行 : 向 1mL 双 蒸 水 中 加 入 一 滴 试 剂 A, 混 匀, 然 后 各 加 一 滴 试 剂 B 和 试 剂 C, 再 次 混 匀, 现 用 现 配, 避 光 保 存 将 混 合 液 滴 加 至 切 片, 室 温 下 显 色 5min; (17) 自 来 水 充 分 冲 洗 20min; (18) 苏 木 素 复 染 1min, 流 水 漂 洗 20min,PBS 浸 泡 3min; (19)70% 盐 酸 酒 精 分 色 约 10s; (20)1% 氨 水 返 蓝 10min,PBS 浸 泡 3min, 镜 下 观 察 细 胞 核 染 色 为 深 蓝 色 ; (21) 中 性 树 胶 盖 封 片 ; (22) 结 果 判 断 :Vimentin 阳 性 染 色 定 位 于 细 胞 浆, 综 合 染 色 强 度 和 阳 性 细 胞 所 占 比 例 进 行 半 定 量 测 定 染 色 强 度 评 分 : 不 着 色 为 0 分, 浅 黄 色 为 1 分, 棕 黄 色 为 2 分, 黄 褐 色 - 3 -
120 为 3 分 阳 性 细 胞 百 分 率 <1O% 为 0 分,10-25% 为 1 分,26 50% 为 2 分, 51% 为 3 分 将 两 者 的 乘 积 作 为 评 判 标 准 :0 分 为 阴 性 (-),1-3 分 为 (+),4-6 分 为 (++), 7 分 为 (+++) 弱 阳 性 表 达 指 (+), 强 阳 性 表 达 指 (++) 1.6 统 计 分 析 125 采 用 统 计 软 件 SPSS13.0 进 行 数 据 分 析 有 序 等 级 指 标, 采 用 Mann - Whitney U 检 验 法 ; 相 关 性 分 析 采 用 Spearman 等 级 相 关 分 析 显 著 水 平 a =0.05 2 结 果 130 135 140 免 疫 组 化 检 测 临 床 肺 癌 癌 旁 组 织 肺 良 性 病 变 ( 炎 症 增 生 ) 组 织 Vimentin 的 表 达 结 果 显 示,Vimentin 在 肺 癌 组 织 中 的 阳 性 染 色 主 要 定 位 于 细 胞 间 质, 很 少 数 在 上 皮 有 表 达, Vimentin 强 阳 性 表 达 率 肺 腺 癌 患 者 为 34.78%, 肺 鳞 癌 为 33.33%, 癌 旁 组 织 为 25%, 肺 良 性 组 织 病 变 为 25%, 淋 巴 结 转 移 的 肺 癌 为 62.5%, 无 转 移 的 肺 癌 为 21.74%, 伴 有 感 染 的 肺 癌 组 织 为 58.33%, 不 伴 感 染 的 肺 癌 组 织 为 41.86% 肺 癌 脾 虚 痰 湿 型 为 51.31% 肺 郁 痰 瘀 型 为 49.66% 阴 虚 痰 热 型 为 49.51%, 气 阴 两 虚 型 为 50.22% 结 果 提 示 Vimentin 在 肺 癌 组 织 表 达 强, 癌 旁 组 织 表 达 弱, 正 常 肺 泡 上 皮 表 达 弱, 炎 症 及 转 移 明 显 的 组 织 表 达 更 强 (P<0.05); 4 种 中 医 证 型 间 差 异 无 显 著 性 (P>0.05) 见 表 1, 图 1 表 1 Vimentin 在 非 小 细 胞 肺 癌 癌 旁 组 织 及 肺 良 性 病 变 组 织 Vimentin 的 表 达 Tab 1 The expresion of Vimentin in lung carcinoma, adjacent tissues,and benign pulmonary lesions tissue 组 别 N Vimentin 阴 性 弱 阳 性 强 阳 性 肺 腺 癌 69 9(13.04%) 36(52.17%) 24(34.78%)** 肺 鳞 癌 10 2(20%) 5(50.0%) 3(33.33%)** 癌 旁 组 织 4 1(25%) 2(50%) 1(25%) 肺 良 性 病 变 20 6(30%) 9(45.0%) 5(25%) 伴 淋 巴 结 转 移 56 3(5.36%) 18(32.14%) 35(62.5%)## 无 淋 巴 结 转 移 23 2(8.7%) 16(69.57%)## 5(21.74%) 伴 肺 部 感 染 36 3(8.33%) 13(33.33%) 21(58.33%)$$ 不 伴 肺 部 感 染 43 4(9.3%) 21(48.84%)$$ 18(41.86%) 肺 癌 脾 虚 痰 湿 型 39 3(7.69%) 20(51.28%) 16(41.03%) 肺 癌 肺 郁 痰 瘀 型 18 2(11.11%) 8(44.44%) 8(44.44%) 肺 癌 阴 虚 痰 热 型 12 2(16.67%) 5(41.67%) 5(41.67%) 肺 癌 气 阴 两 虚 型 10 1(10%) 5(50%) 4(40%) 注 : 与 癌 旁 组 织 比 较 * P<0.05,**P<0.01; 与 肺 炎 组 织 比 较 P<0.05, P<0.01; 伴 淋 巴 结 转 移 与 无 淋 巴 结 转 移 比 较 ##P<0.01; 伴 肺 部 感 染 与 不 伴 肺 部 感 染 比 较 $$P<0.01 Note: Compared with adjacent tissues,*p<0.05,**p<0.01;compared with benign pulmonary lesions tissues, P<0.05, P<0.01;Compared with multiple metastases ##P<0.01;Compared with pulmonary infection $$P<0.01. - 4 -
145 图 1-1 低 分 化 腺 癌, 胸 膜 纵 膈 锁 骨 上 图 1-2 高 分 化 腺 癌, 右 肺 门, 纵 膈 淋 淋 巴 转 移, 胸 水, 心 包 积 液, 阳 性 强 度 +++ 巴 转 移, 胸 水,Vimentin 阳 性 强 度 + 150 155 160 165 170 3 讨 论 图 1-3 支 气 管 粘 膜 慢 性 炎,Vimentin 图 1-4 高 分 化 腺 癌, 无 转 移,Vimentin 阳 性 强 度 +++ 阳 性 强 度 + 图 1 免 疫 组 化 检 测 检 测 肺 癌 肺 良 性 病 变 Vimentin 的 表 达 (100X) Fig 1 The expresion of Vimentin in lung carcinoma and benign pulmonary lesions tissue 目 前 有 关 EMT 与 肺 癌 的 研 究 甚 少 EMT 是 上 皮 细 胞 在 与 周 围 间 质 的 相 互 作 用 过 程 中 逐 渐 获 得 了 某 些 间 质 细 胞 特 有 性 状 的 现 象, 以 E 钙 黏 素 (E-cadherin) 连 环 蛋 白 (catenin) 等 表 征 上 皮 型 指 标 蛋 白 的 丧 失 以 及 波 形 蛋 白 (Vimentin) 和 纤 维 粘 连 蛋 白 (fibronectin) 等 表 征 间 质 型 指 标 蛋 白 的 获 得 为 主 要 特 征, 并 且 与 肿 瘤 细 胞 的 原 位 侵 袭 和 远 处 转 移 有 着 密 切 的 关 系 EMT 的 发 生 与 多 种 蛋 白 分 子 微 环 境 及 Micro RNA 等 有 关, 涉 及 到 多 个 信 号 转 导 通 路 和 复 杂 的 分 子 机 制 Vimentin,Fibronectin 和 N-cadherin 是 间 质 细 胞 标 志 因 子, 它 们 的 过 高 表 达 标 志 着 EMT 过 程 的 发 生, 也 就 是 启 动 了 肿 瘤 转 移 的 发 生 肿 瘤 细 胞 的 粘 附 能 力 下 降, 迁 移 运 动 能 力 增 加, 使 得 肿 瘤 细 胞 更 易 于 离 开 原 有 位 置, 发 生 原 位 浸 润 或 者 随 血 行 淋 巴 等 途 径 转 移 到 体 内 远 隔 部 位, 重 新 定 位 于 新 的 器 官 或 组 织, 最 终 导 致 肿 瘤 复 发 转 移 EMT 不 仅 使 癌 细 胞 从 原 发 肿 瘤 播 散 出 去, 也 赋 予 它 们 类 似 于 干 细 胞 的 自 我 更 新 能 力 最 新 研 究 显 示, 上 皮 型 的 肺 癌 对 表 皮 生 长 因 子 受 体 (Epidermal growth factor receptor, EGFR) 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂 (tyrosine kinase inhibitor,tki) 治 疗 较 间 质 化 改 变 的 敏 感, 提 示 肺 癌 的 EMT 状 态 有 望 成 为 靶 向 治 疗 疗 效 的 预 测 因 素 应 用 于 临 床 [9-14] 本 研 究 证 实 了 Vimentin 肺 癌 组 织 细 胞 间 质 高 表 达, 转 移 明 显 的 组 织 表 达 强 且 发 现 伴 感 染 者 表 达 增 强, 说 明 炎 症 与 肿 瘤 关 系 密 切 不 同 中 医 证 型 间 差 异 无 显 著 性, 说 明 Vimentin 在 有 感 染 有 转 移 的 肺 癌 组 织 细 胞 间 质 高 表 达 具 有 一 定 普 遍 性 免 疫 组 化 主 要 是 定 性 研 究 的 方 法, 尚 需 扩 大 样 本 量, 并 且 用 定 量 研 究 的 方 法 进 行 研 究 - 5 -
[ 参 考 文 献 ] (References) 175 180 185 190 195 [1] 王 淑 美, 林 丽 珠, 周 京 旭. 益 气 除 痰 方 对 脾 虚 LEWIS 肺 癌 小 鼠 生 存 期 及 PRDX-1,PRDX-6 表 达 的 影 响 [J]. 中 国 中 西 医 结 合 杂 志,2011,31(1):99-103 [2] 林 丽 珠, 王 淑 美.2010 中 西 医 结 合 防 治 肿 瘤 国 际 会 议 ( 香 港 大 学 ), 论 文 集 [C]:64. [3] Tellez CS, Juri DE, Do K, et al. EMT and Stem Cell-Like Properties Associated with mir-205 and mir-200 Epigenetic Silencing Are Early Manifestations during Carcinogen-Induced Transformation of Human Lung Epithelial Cells[J]. Cancer Res, 2011,71(8):3087-3097. [4] JI X G, DENG Y Y, WANG P. Characters of atmosphere pressure, pure oxygen fixed bed gasification of seven kinds coal[j]. Clean Coal Technology, 2004, 25(4): 50-52.JI X G, DENG Y Y, WANG P. Characters of atmosphere pressure, pure oxygen fixed bed gasification of seven kinds coal[j]. Clean Coal Technology, 2004, 25(4): 50-52. [5] 中 国 抗 癌 协 会. 新 编 常 见 恶 性 肿 瘤 诊 治 规 范 [M]. 北 京 : 中 国 协 和 医 科 大 学 出 版 社,1999,773. [6] 周 岱 翰. 中 医 肿 瘤 学 [M]. 广 州 : 广 东 高 等 教 育 出 版 社,2007:361-363,370-371. [7] 张 绘 宇, 张 惠 球, 林 云 恩, 等. 肺 癌 中 DAL-1 表 达 及 其 与 上 皮 细 胞 间 质 转 化 关 系 [J]. 临 床 与 实 验 病 理 学 杂 志,2009,25(5):494-497,502. [8] 中 国 抗 癌 协 会. 新 编 常 见 恶 性 肿 瘤 诊 治 规 范 [M]. 北 京 : 中 国 协 和 医 科 大 学 出 版 社,1999,773. [9] Mikesh LM, Kumar M, Erdag G, et al. Evaluation of molecular markers of mesenchymal phenotype in melanoma[j]. Melanoma Res, 2010, 20(6):485-495. [10] Micalizzi DS,Farabaugh SM,Ford HL. Epithelial-mesenchymal transition in cancer:parallels between normal development and tumor progression[j]. J Mammary Gland BIol Neoplasia,2010,15:117-134. [11] Shen J, Todd NW, Zhang H, et al. Plasma micrornas as potential biomarkers for non-small-cell lung cancer. Lab Invest,2011,91(4):579-587. [12] Josson S, Nomura T, Lin JT,et al. beta 2-Microglobulin Induces Epithelial to Mesenchymal Transition and Confers Cancer Lethality and Bone Metastasis in Human Cancer Cells[J]. Cancer Res,2011,71(7):2600-2610 [13] Yuen HF, Chan YK, Grills C, et al. Polyomavirus enhancer activator 3 protein promotes breast cancer metastatic progression through Snail-induced epithelial-mesenchymal transition[j]. J Pathol, 2011, 224(1):78-89. - 6 -