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目录 一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果 二 按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流 骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5

长沙市70株沙门菌的血清型分布、耐药特征及PFGE分型研究

正文

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福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析

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检验医学 2014 年 5 月第 29 卷第 5 期 LaboratoryMedicine,May2014,Vol29.No 的大量应用, 细菌对氨基糖苷类药物的耐药越来越严重 产生 16SrRNA 甲基化酶是近年来报道的介导氨基糖苷类高水平耐药的主要机制之一 [1 8] 我们对临床分离

北京市2011年1-2月份细菌耐药监测结果

卷 PCRSu- 菌株 permix 25 滋 L, 补足 ddh 2 O 至总体积 50 滋 L PCR 1.4 ESBLs 基因扩增与测序分析挑取纯培养菌落, 按照说明书提取质粒 反应程序 : 预变性 94 5 min, 变性 94 30s, 退火 30s ( 退火温度参照引物合成

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2053 近年来, 伴随着抗菌药物用量的不断增加 免疫抑制剂的应用和介入技术的使用, 医院感染和细菌耐药性越来越严重 [1] 病原菌分布和耐药性会随着不同时间 不同地区 不同医院而呈现不同的特点 [2] 所以及时了解医院感染的病原菌分布特点和耐药性状况对于医院感染的控制和抗菌药物的合理使用具有重要价

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2017 年全国细菌耐药监测报告 2017 年全国细菌耐药监测网成员单位共有 所医院, 其中上报数据医院共 所 上报数据的成员单位中二级医院 379 所, 三级医院 所 ; 经过数据审核, 纳入数据分析的医院共有 所, 其中二级医院 336 所, 占

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2016医学版第2期

目 录 一 本院全年标本类型构成, 病原菌分布及药敏分析 本院全年标本类型构成 全院标本类型构成变化 病原菌种类及其分布-

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国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期! " # $ %& '! * " - -## ' " *2-2 ( 9 " - : ;-# -!! %4! '9 % %-#! - 9 # #! 2-4 '9 % %-# - % " " # --# 2 ; - # # 2! (# ; -!

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期 曹 敏等 贵州部分地区猪源大肠杆菌耐药性分析及. 基因型检测.3" / &,-/ +-+ <A AA /A-++,+*',++,+,-/,+ +-+/ *, +,/,,+-3-+,/+&,-/ -) /*+/-) / /,++,+,-/,+.,-/

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Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr

804 新乡医学院学报 htp:// 年第 34 卷 specimensofesbls producingklebsielapneumoniaestrainsofelderlypatientsweremainlyfrom urine(36 67%),sputu

32期

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临床检验杂志 ( 电子版 )201x 年 x 月第 x 卷第 x 期 Clinical Laboratory Journal (Electronic Edition) x 201x, Vol.x No.x use antibiotics reasonably and reduce mortality

543 年临床常见病原菌的分布和耐药率进行统计和分析, 以利于临床合理选用 1 数据与方法 1.1 临床资料收集重庆市荣昌区中医院 2013 年 9 月 2015 年 9 月门诊及各临床科室送检的标本 株 1.2 方法收集患者痰 血液 尿液 ( 晨中段尿 ) 粪便 分泌物 胸腹水等标本,

218 中华预防医学杂志 2011 年 3 月第 45 卷第 3 期 ChinJPrevMed,March2011,Vol 45,No 3 DHA,orCIT positiveampc β lactamase producingstrains Antibioticresistantrateswere

期 梁德媚等 上海市肉鸽沙门氏菌的分离鉴定及流行血清型和耐药性分析 50"% %%%%"0 %" %%0%%"%8%%0 %% """5"0 % %"%%& %""%"%% %%%%%"&0 "%%%"& %% -"& %%% 沙门氏菌是一种重要的人兽共患病原菌 其对人 家畜 家禽及其他

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国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期!"# $% &' "# " #" ')"* )% $%" )!)#* +)!+), -)%## ).!) )."+% -)%).)'.+. + '')% ) ". %"!!" )-"%' ). )-"%' '."# - ' )'")-#* %#%)# )

538 中国食品卫生杂志 CHINESE JOURNAL OF FOOD HYGIENE 2014 年第 26 卷第 6 期 物导致人群感染, 是冷藏食品中威胁人类健康的主 要病原菌之一 [1] 单增李斯特菌污染食品引起的 食源性疾病通常需要抗生素治疗 由于抗生素在 动物饲养中的广泛应用, 单增李斯

政院衛生署疾病管制局九十一年度自行研究計畫

戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s

株烧伤患者创面分泌物病原菌种类分布及耐药性分析杨璐等 strains, 49.%), Staphylococcus epidermis (96 strains, 22.4%), and Enterococcus faecalis (75 strains, 8.6%); the

Tetracycline,Doxycycline,Florfenicol,Trimethoprim-sulfamethoxazol,Sulfamethoxazole,Enrofloxacin and Ofloxacin was more severe that in EU countries,but

805 aureus (MRCNS) were 38.5% and 77.2%, respectively. No significant difference was found between the gramnegative and gram-positive bacteria. The an

38 检验医学 2018 年 1 月第 33 卷第 1 期 Laboratory Medicine,January 2018,Vol. 33,No. 1 geriatrics (2 isolates),surgery intensive care unit (ICU)(1 isolate) and

2 西安交通大学学报 医学版 第 卷 -&//&/&#/&#&#&/&/2&//&$/2&//2&/ /&"& ##-&$ &#& $&$&22&&#&/#&2/&$"&-# /"#""*"( "$""/!-"#/&/#&/& /&"/&# & -"#"# " /"*"("$2"" "/! -"#$

北京市人源性单核细胞增生李斯特菌耐药特征及分子分型研究王丽丽等 冰淇淋引起 人 感 染其 中 人 死 亡 近 年 来 京市李斯特菌病患 者 的 株 单 核 细 胞 增 生 李 斯 特 我国及欧 美 国 家 经 食 品 感 染 的 李 斯 特 菌 病 患 者 呈 菌均分 离 自 胎 盘 株 外 周 血

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专 业 最高分最低分一本线最高分最低分一本线最高分最低分一本线 临床医学 ( 5+3 一体化 ) 口腔医学 ( 5+3 一体化 )

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第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液

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1099 医 科 学 院 广 安 门 医 院 南 区 也 随 之 开 展 全 院 抗 菌 药 物 临 床 应 用 专 项 整 治 活 动, 提 高 抗 菌 药 物 临 床 合 理 应 用 水 平 对 年 门 诊 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况 进 行 分 析, 为 抗 菌 药

北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药及分子分型研究王迪等 9 c V^ V M V ^#1 F V V V D ^ M ^ > 3 #1 F V V^ D ^ [ R c [ V? M V ^ M ^ D V M D V> * * [ ^ D [ *:<g> D [ M D M^ V ^-I>9 D? M

国 际 中 医 中 药 杂 志 2014 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 Int J Trad Chin Med, February 2014, Vol. 36, No 年 10 月, 笔 者 作 为 北 京 中 医 药 大 学 东 方 医 院 管 理 部 门 代 表,

采用高级微生物基因分型系统对食品中单核细胞增生李斯特菌进行同源性分析 曾静, 等 533 were 1 / 2a serotype, except two of them were 3a serotype. Conclusion DiversiLab system typing results re

by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2

8期

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1421 历 360 份, 局 部 使 用 抗 菌 药 物 不 进 行 统 计 1.2 方 法 统 计 分 析 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况 统 计 内 容 包 括 使 用 科 室 年 龄 体 质 量 住 院 时 间 诊 断 抗 菌 药 物 品 种 抗 菌 药 物

6调查分析.FIT)

世界临床药物 WORLD CLINICAL DRUGS Vol.37 NO 随着耐药菌株的出现, 尤其是多重耐药 广泛耐药和全耐药菌株日益增多, 临床治疗面 临极大挑战, 已成为公共卫生领域中的棘手问题 [1] 本次研究对上海交通大学附属第一人民医院 2015 年度细菌耐药结果进行汇总

240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通

中国抗生素杂志 年 月第 卷第 期 文章编号 : - ( ) - - 年中山市某医院沙门菌的药敏分析及肠毒素基因检测 向蓉陈荣忠 * 黄雪珍 ( 南方医科大学附属小榄医院检验科, 中山 ) 摘要 : 目的研究中山市西北部区域沙门菌感染患者的流行病学特征 耐药特点及其相关肠毒素基因型 方

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检验医学 年 月第 卷第 期 ) + ) + *(1 "1 ; 二 试剂与仪器细菌基因组提取试剂盒 北京天根生化科技有限公司 4 & 标准带 A 4 上海生工生物工程有限公司 试验所用引物 上海生工生物工程有限公司 # 159 ) 酶 大连宝生物工程有限公司 1"1 54 聚合酶

年 6 月第 34 卷第 6 期 Chin J Public Health, Jun 218 Vol.34 No.6 了解广东省不同宿主来源香港海鸥菌的耐药表型 及耐药基因携带情况, 本研究于 215 年 1 月 216 年 8 月对分离自淡水产品鱼 蛙肠道及病人粪 便的 122 株香

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National and Provincial Life Tables Derived from China’s 2000 Census Data

Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug GPS,,, : km, 2. 51, , ; ; ; ; DOI: 10.

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卫生政策研究进展

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716 中华预防医学杂志 2015 年 8 月第 49 卷第 8 期 Chin J Prev Med,August 2015, Vol. 49, No. 8 中国六省份零售整鸡中环丙沙星与头孢噻肟双耐药印第安纳沙门菌流行状况及分子分型研究 胡豫杰赫英英王晔茹崔生辉陈秋霞刘桂华陈倩周刚杨保伟 黄金林于红霞李凤琴 摘要 目的 对中国 6 个省份零售整鸡中对环丙沙星与头孢噻肟双耐药的沙门菌流行状况及 分子分型进行研究 方法对我国 6 个省份市售整鸡样品中分离的 2 629 株沙门菌进行耐药性实验, 筛选出对环丙沙星和头孢噻肟双重耐药的菌株, 进行血清分型 超广谱 β- 内酰胺酶 (ESBLs) 表型确证 和 PFGE 遗传特性研究 结果对环丙沙星与头孢噻肟双耐药的沙门菌共计 227 株 (8.52%,227/ 2 629), 北京 吉林 广东 江苏 陕西 内蒙的检出率分别为 11.67%(99/874) 8.20%(60/726) 1.39% (7/502) 15.61%(42/260) 8.56%(16/186) 0(0/81);224 株为印第安纳沙门菌, 其中 213 株 (95.10%) 为 ESBLs 阳性 所有双耐印第安纳沙门菌均耐 5 种以上的抗生素,17.86% 的菌株 (40/224) 对除碳青霉 烯类外的 10 种抗生素均耐药 ;50.89% 的菌株 (114/224) 对 9 种抗生素耐药,25.45% 的菌株 (57/224) 对 8 种抗生素耐药 224 株双耐印第安纳沙门菌划分为 32 个基因簇和 150 种 PFGE 带型, 双耐印第安纳沙 门菌带型既具有地域差异, 相同或不同的省份及采样时间均发现相同带型菌株 结论 中国零售整 鸡中环丙沙星与头孢噻肟双耐药沙门菌污染严重, 是双耐药沙门菌的重要储存库, 分子分型结果提示 沙门菌存在交叉污染或共同污染来源 关键词 沙门菌属 ; 环丙沙星 ; 头孢噻肟 ; 电泳, 凝胶, 脉冲场 ; 耐药 论著 Epidemic condition and molecular subtyping of ciprofloxacin and cefotaxime co-resistant Salmonella Indiana isolated from retail chicken carcasses in six provinces, China Hu Yujie *, He Yingying, Wang Yeru, Cui Shenghui, Chen Qiuxia, Liu Guihua, Chen Qian, Zhou Gang, Yang Baowei, Huang Jinlin, Yu Hongxia, Li Fengqin. * Key Laboratory of Food Safety Risk Assessment of Health, China National Center for Food Safety Risk Assessment, Beijing 100021, China Corresponding author: Li Fengqin, Email: lifengqin@cfsa.net.cn Abstract Objective To elucidate the epidemic condition and molecular subtyping of ciprofloxacin and cefotaxime co-resistant Salmonella Indiana(S. Indiana)isolated from retail chicken carcasses in six provinces of China. Methods A total of 2 647 Salmonella strains isolated from retail chicken carcasses collected from six provinces of China were subjected to antimicrobial susceptibility testing. All Salmonella isolates co-resistant to ciprofloxacin and cefotaxime were further characterized by serotyping, extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) producing strains screening and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) typing. Results Among 2 629 Salmonella isolates tested, 227 (8.52%) isolates were co-resistant to ciprofloxacin and ceftazidime/cefotaxime (Beijing: 11.67%(99/874),Jilin: 8.20%(60/726), Guangdong: 1.39%(7/502),Jiangsu: 15.61%(42/260),Shaanxi: 8.56%(16/186),Inner Mongolia: 0(0/ 81)), and 224 of them were identified as S. Indiana. 213(95.10%)isolates of S. Indiana were ESBLs DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2015.08.010 基金项目 : 国家高技术研究发展计划 (2012AA101603) 作者单位 :100021 北京, 国家食品安全风险评估中心卫生部食品安全风险评估重点实验室 ( 胡豫杰 王晔茹 李凤琴 ); 山东大学公共卫生学院营养与食品卫生研究所 ( 赫英英 于红霞 ); 中国食品药品检定研究院食品化妆品检定所 ( 崔生辉 ); 广东省疾病预防控制中心病原微生物所 ( 陈秋霞 ); 吉林省疾病预防控制中心微生物所 ( 刘桂华 ); 北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所 ( 陈倩 ); 内蒙古自治区食品药品监督管理局食品药品检验所 ( 周刚 ); 西北农林科技大学食品与科学学院 ( 杨保伟 ); 扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室 ( 黄金林 ) 通信作者 : 李凤琴, Email:lifengqin@cfsa.net.cn

中华预防医学杂志 2015 年 8 月第 49 卷第 8 期 Chin J Prev Med,August 2015, Vol. 49, No. 8 717 producing strains. All ciprofloxacin and cefotaxime co-resistant S. Indiana isolates developed a multi-drug resistant profile and 17.86%(40/224)of them were resistant to all antibiotics tested except carbapenems, and 50.89%(114/224)of them resistant to 9 antibiotics, additionally, 25.45%(57/224)of them showed multi-drug resistance to 8 antibiotics. All ciprofloxacin and cefotaxime co-resistant S. Indiana isolates were divided into 32 PFGE clusters and 150 PFGE patterns. Strains of S. Indiana from same or different sampling site and time seemed to either share the same PFGE patterns or be differential to each other in different regions. Conclusion The results indicated that chicken carcasses collected from parts of China were heavily contaminated by ciprofloxacin and cefotaxime co-resistant S. Indiana and could serve as an important reservoir of ciprofloxacin and cefotaxime co-resistant Salmonella. Molecular subtyping results indicated that cross contamination or common pollution source might be in these strains. Key words Salmonella; Ciprofloxacin; Cefotaxime ; Electrophoresis, gel, pulsed-field; Drug resistance 非伤寒沙门菌 (nontyphoidal Salmonella,NTS) [1] 是一种最常见的食源性致病菌, 大多数沙门菌感染归因于食用受 NTS 污染的动物性食品 在我国, 70%~80% 的细菌性食物中毒由沙门菌引起, 禽类 [2] 制品是该类中毒的重要载体 氟喹诺酮类和三代 [1] 头孢类抗生素是治疗沙门菌感染的首选用药, 在动物饲养中广泛应用, 因此养鸡场和零售鸡肉已成为超广谱 β- 内酰胺酶 (extended spectrum β-lactamases,esbls) 和喹诺酮耐药沙门菌的重要储存库, 世界范围内已经出现了对这两类抗生素耐药的 超级耐药沙门菌 [3-4], 本研究通过对我国部分省份零售整鸡中分离到的沙门菌进行耐药性分析, 筛选出对环丙沙星 (CIP) 和头孢噻肟 (CTX) 双重耐药 ( 简称双耐 ) 菌株, 并在血清分型的基础上对其进行分子分型研究 材料与方法 1. 菌株 : 本试验用沙门菌为 2010 年 8 月至 2012 年 3 月间, 从北京 广东 江苏 吉林 内蒙古和陕西 6 个省份零售市场采集的整鸡样品中分离获得 各监测点每月采集冷冻 冷藏和现宰杀整鸡共计不少于 20 份样品, 连续采集 12 个月, 共采集样品 1 680 份 鉴于目前物流的广泛性, 为避免在同一销售点对相同品牌产品的重复采样, 确保样品来源的多渠道, 对同一超市出售的整鸡每次采样不超过 4 个, 且采集的是不同品牌的样品 分离的可疑菌株经 PCR 和生化实验鉴定后, 共得到 2 629 株沙门菌用于本次研究 此外, 大肠埃希菌 ATCC 25922 为抗生素敏感性实验用质控菌株, 肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 为 ESBLs 确证实验用质控菌株, 沙门菌 S. Braenderup H9812 为 PFGE 相对分子量菌株, 以上标准菌株均为本实验室保存 2. 仪器 : 生物安全柜 ( 新加坡 ESCO BIOTECH 公司 ), 恒温培养箱 ( 美国 3M 公司 ), 小型高速离心机 ( 德国 Eppendorf 公司 ), 微量紫外分光光度计 ( 美国 Thermo Fisher 公司 ), 细菌多点接种仪 ( 日本佐久间公司 ),PFGE 及成像系统 ( 美国 Bio-Rad 公司 ), 细菌浊度分析仪 ( 法国生物梅里埃公司 ), 恒温振荡器 ( 德国 IKA 公司 ), 纯水仪 ( 美国 Millipore 公司 ) 3. 试剂 : 脑心浸液琼脂 (BHA) 和脑心浸液肉汤 (BHI) 购于北京陆桥技术有限责任公司 Mueller-Hinton 肉汤 (MHB) 和 Mueller-Hinton 琼脂 (MHA) 购于英国 Oxoid 公司 沙门菌诊断血清购于丹麦国家血清研究所 庆大霉素 (GEN) 氯霉素 (CHL) CIP 萘啶酸 (NAL) 氨苄西林 (AMP) 氨苄西林 / 舒巴坦 (SAM) 四环素 (TET) 亚胺培南 (IPM) 头孢他啶 (CAZ) CTX 磺胺甲唑 / 甲氧苄啶 (SXT) 克拉维酸 十二烷基肌氨酸钠 (SLS) 购于美国 Sigma 公司 EDTA(0.5 mol/l,ph 8.0) Tris-HCl(1 mol/l, ph 8.0) 5 Tris- 硼酸 (TBE) 缓冲液购于美国 Solarbio 公司 蛋白酶 K 购于德国 Merck 公司 限制性内切酶 XbaⅠ 购于英国 New England BioLabs 公司 Plug 模具 SeaKem Gold 琼脂糖购于美国 Bio-Rad 公司 4. 抗生素敏感性试验 : 根据美国临床与实验室标准化协会 (CLSI) 推荐的微量肉汤稀释法, 测定 12 种抗生素对受试菌株的最低抑菌浓度 (MIC) [5], 并判定对各抗生素的耐药情况, 挑选对 CIP 和 CAZ 同时耐药或 CIP 和 CTX 同时耐药的菌株为双耐菌株 5.ESBLs 确证试验 : 选取对 CAZ 或 CTX 中任一耐药的菌株, 按照 CLSI 推荐的琼脂稀释法对其进 [6] 行 ESBLs 表型确证 若三代头孢抗生素添加了克拉维酸后对受试菌株的 MIC 值较之前降低了 8 倍以上, 则判定为 ESBLs 阳性 6. 双耐菌株的血清型鉴定 : 按照 GB 4789.4-2010 [7] 中规定的沙门菌血清学鉴定程序和

718 中华预防医学杂志 2015 年 8 月第 49 卷第 8 期 Chin J Prev Med,August 2015, Vol. 49, No. 8 国际通用的 White Kaufmann Le MinorScheme (WKLM 表解 ) [8], 对双耐沙门菌分离株进行 O 抗原和 H 抗原的血清学鉴定, 采用简易平板法进行 H 抗原位相变异试验 7.PFGE: 参照美国 CDC 推荐的标准化 PulseNet 分子分型方案, 对双耐菌株进行 PFGE 分型, 使用 Bionumeries 4.0 分析软件 采用加权组平均法 (UPGMA) 进行聚类分析 条带位置差异容许度选择 1.0%, 优化值选择 1.0% 使用 Band based/dice 方法计算不同菌株电泳条带的相似性系数 并按照 PulseNet 的命名原则, 对每一种不同的带型进行命名, 将相似度 85% 的指纹图谱划分至同一基因簇, 将相似度为 100% 的指纹图谱归为相同 PFGE 带型 结果 1. 双耐沙门菌的筛选及血清分型结果 :2 647 株沙门菌中,227 株对 CIP 和 CTX 同时耐药, 占 8.58%, 其中 70 株对 CAZ 也耐药 江苏和北京的双耐沙门菌分离率高于其他地区, 而内蒙古沙门菌分离株中未检出双耐菌株 双耐菌株血清学鉴定结果显示,224 株 (98.7%,224/227) 为印第安纳沙门菌 (S.Indiana), 剩余 3 株分别为乌普萨拉沙门菌 (S.Uppsala) 蒙得维的亚沙门菌 (S.Montevideo) 和沙门菌肠道种萨拉姆亚种 (S.Enterica Subsp. Salamae) 具体见表 1 2. 双耐沙门菌抗生素敏感性结果 : 所有双耐沙门菌对碳青霉烯类抗生素 (IPM 和 MEM) 均敏感, 对其余 10 种抗生素不同程度耐药 224 株印第安纳沙门菌均为 5 重以上的多重耐药菌, 其中 17.86% 的菌株 (40/224) 对碳青霉烯类外的 10 种抗生素耐药, 50.89%(114/224) 的菌株对 9 种抗生素耐药, 25.45%(57/224) 的菌株对 8 种抗生素耐药, 见表 2 此外 3 株非印第安纳双耐沙门菌共有 2 种耐药谱, 分别为 CIP-CTX-CAZ-CHL-NAL-AMP-SAM-TET-SXT (2 株 ) 和 TET-SXT(1 株 ) 3. 双耐印第安纳沙门菌 ESBLs 筛选结果 : 添加不可逆性竞争结合抑制剂克拉维酸后, 共筛选出 213 株 ESBLs 阳性菌株 4. 双耐印第安纳沙门菌 PFGE 聚类分析结果 : (1) 基因簇分群结果 :224 株双耐印第安纳沙门菌被归为 32 个基因簇, 依次被命名为 A~AF 其中 E P F 和 D 为优势基因簇, 分别包含 68 20 16 和 14 株菌, 其他 28 个基因簇中菌株数目不等 进一步 省份 北京 广东 吉林 江苏 陕西 表 1 内蒙古 合计 中国 6 个省份零售整鸡中环丙沙星与头孢噻肟 分离菌株数 874 503 732 269 187 82 2 647 双耐药沙门菌的血清学分布情况 双耐药菌株数 102 7 60 42 16 0 227 双耐药菌株比例 (%) 11.67 1.39 8.20 15.61 8.56 0.00 8.58 血清型及其构成比 印第安纳沙门菌 (99/102, 97.0%), 乌普萨拉沙门菌 (1/102,1.0%), 蒙得维的亚沙门菌 (1/102,1.0%), 萨拉姆沙门菌 (1/102, 1.0%) 印第安纳沙门菌 (7/7,100%) 印第安纳沙门菌 (60/60, 100%) 印第安纳沙门菌 (42/42, 100%) 印第安纳沙门菌 (16/16, 100%) 分析显示, 北京 吉林 江苏的优势基因簇均为 E 基 因簇, 广东和陕西的优势基因簇不明显 不同地区 分离株基因簇既有交叉又有不同,D 簇和 E 簇在北 京和吉林有分布,G 簇在江苏和陕西有分布,P 簇在 北京和江苏有分布 此外, 同一时间从同一省份不 同样本中分离株的基因簇不尽相同, 如 2 月份从北 京 5 个样品分离的 7 株菌株, 分别归为 A E J K X AD 5 个基因簇 (2) 带型分型结果 :224 株双耐印 第安纳沙门菌被分为 150 个 PFGE 带型, 依次命名 为 JFPX01.C0001~JFPX01.C0150 北京市的优势 带型为 JFPX01. C0051(5 株 ) JFPX01. C00105 (5 株 ); 吉林省的优势带型为 JFPX01. C0123 (7 株 ); 江苏省的优势带型为 JFPX01. C0018(8 株 ); 陕西省和广东省分离到的双耐印第安纳沙门 菌数目较少, 无明显优势带型 具有相同带型 的型别有 38 个 (25.3%,38/150), 共包含菌株 112 株 (50%,112/224), 其余 112 种不同带型内各包含一 株菌 (3) 不同采样地 采样时间样品中双耐印第安 纳沙门菌的型别 :1 同省份和采样时间样品具有相 同带型菌株 : 从不同省份 不同采样时间采集的 样品中可分离出具有相同带型的双耐印第安纳 沙门菌 ( 图 1) 北京市和吉林省在不同采样时间 均分离出 JFPX01. C0021 JFPX01. C0034 和 JFPX01. C0039 带型的分离株, 这些分离株均来自 - 印第安纳沙门菌 (224/227, 98.7%), 乌普萨拉沙门菌 (1/227,0.4%), 蒙得维的亚沙门菌 (1/227, 0.4%), 萨拉姆沙门菌 (1/ 227,0.4%)

中华预防医学杂志 2015 年 8 月第 49 卷第 8 期 Chin J Prev Med,August 2015, Vol. 49, No. 8 719 表 2 中国 6 个省份环丙沙星与头孢噻肟双耐药印第安纳沙门菌耐药谱分布 耐药谱 CIP-CTX-NAL-AMP-TET(5) CIP-CTX-NAL-AMP-SAM(5) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-SXT(6) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-SAM(7) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-SXT(7) CIP-CTX-CAZ-NAL-AMP-CHL-SXT(7) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-SAM-SXT(7) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-SAM-TET(7) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-TET(7) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-SAM-SXT(8) CIP-CTX-NAL-AMP-CHL-TET-SAM-SXT(8) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-TET-SAM(8) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-TET-SAM-SXT(8) CIP-CTX-CAZ-NAL-AMP-CHL-TET-SXT(8) CIP-CTX-CAZ-NAL-AMP-CHL-SAM-SXT(8) CIP-CTX-CAZ-NAL-GEN-CHL-TET-SXT(8) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-TET-SXT(8) CIP-CTX-NAL-AMP-GEN-CHL-TET-SAM- SXT(9) CIP-CTX-CAZ-NAL-AMP-GEN-CHL-SAM- SXT(9) CIP-CTX-CAZ-NAL-AMP-GEN-TET-SAM- CHL(9) CIP-CTX-CAZ-NAL-AMP-GEN-CHL-TET- SAM-SXT(10) 合计 a 菌株数构成比 (%) 4 1.78 2 0.90 23 10.27 18 8.04 9 4.02 3 1.34 88 39.28 15 6.70 11 4.91 40 17.86 224 100.00 注 : a 括号内为耐药种类数 GEN: 庆大霉素,CHL: 氯霉素, CIP: 环丙沙星,NAL: 萘啶酸,AMP: 氨苄西林,SAM: 氨苄西林 / 舒巴坦,TET: 四环素,IPM: 亚胺培南,CAZ: 头孢他啶,CTX: 头孢噻肟, SXT: 磺胺甲唑 / 甲氧苄啶 超市样品,3 种带型均属 E 基因簇 2 同一省份不同采样时间样品具有相同带型菌株 : 从同一省份不同采样时间分离到相同带型的双耐印第安纳沙门菌,JFPX01. C0084 带型的沙门菌分离自北京市 5 月和 10 月采集样品, 相同情况的还有北京市的 JFPX01. C0038 带型及 JFPX01. C0084 带型, 江苏省的 JFPX01. C0016 JFPX01. C0018 JFPX01. C0020 和 JFPX01. C0065 带型 这些带型主要集中在 E 基因簇,G 和 I 基因簇也有分布, 具体见图 2 和图 3 3 相同省份和采样时间不同样品具有相同带型菌株 : 从同一省份 同一采样时间但从不同样品中分离到具有相同带型的分离株, 主要集中在北京市和吉林省, 陕西省和江苏省亦见分布, 其中吉林省来自 10 份样品的 16 株菌分为 4 种带型, 北京市 来自 10 份样品的 14 株菌分为 4 种带型, 陕西省和 江苏省均有来自 2 份样品的菌株为同一带型 5. 双耐印第安纳沙门菌 PFGE 分型与耐药谱关 系 : 双耐印第安纳沙门菌的 PFGE 型别与耐药谱关 系差异较大, 相同耐药谱的分离株基因簇 带型及 菌株数不尽相同 每种耐药谱的优势带型各异, 但 优势基因簇均为 E 簇 ( 表 3) 讨 论 临床过量或不合理使用抗生素 养殖业滥用抗 生素导致细菌耐药性增加, 这一问题在我国尤为严 [9] [4] 重 Lauderdale 等和 Wang 等的研究结果显示, 零售鸡肉中常携带大量多重耐药沙门菌, 使得临床 治疗药物的选择越来越困难 诸如双耐印第安纳 沙门菌这样的食源性超级耐药细菌, 通过不同方式 积累了不同来源的耐药机制, 产生与传播的速度超 过人类抗生素研发速度 [10] 自从有报道从猪肉中 分离到 2 株双耐沙门菌以来 [11-12], 本研究从我国多 地区零售鸡肉中分离到大量双耐沙门菌尚属首次, 且各地分离株大都为印第安纳血清型, 呈现出高度 [13] 一致性, 与 Kasimoglu 等的研究结果相似, 同时还 检出 3 种非印第安纳血清型的双耐菌株, 表明鸡肉 中双耐沙门菌血清型一定程度上呈多样化趋势 值得指出的是,3 种非印第安纳血清型双耐沙门菌 均从北京市售样品检出, 推测与北京市场上汇集来 自全国各地的零售整鸡, 分离到多种血清型双耐沙 门菌几率较高有关, 同时也提示不同地区分离菌株 可能有相同污染源 如此大量印第安纳沙门菌双 耐菌株在我国多个地区产生的原因 在沙门菌耐药 性传播中的作用及对食源性沙门菌感染的影响等 将是有待深入研究的课题 ESBLs 细菌主要由质粒介导, 对第 3 代 第 4 代 头孢菌素和单环类抗生素耐药 [14] 本研究中 95.1% 的双耐印第安纳沙门菌为 ESBLs 阳性, 且均为 5 重 以上耐药株, 这是由于 ESBLs 菌株携带具有多种耐 药基因的 ESBLs 质粒, 可同时对多种抗生素耐药 [15], 因此对该血清型沙门菌进行耐药机制的检测 表型 基因型关联研究以及耐药质粒的扩散和进化将是 未来研究的重点 从不同时间 相同或不同省份样品中分离到具 有相同 PFGE 带型的双耐沙门菌菌株, 表明同一地 区的不同时间销售了同一批次或同一养殖场出栏 的鸡, 或不同地区从同一批发商中购进了同一批整

720 中华预防医学杂志 2015 年 8 月第 49 卷第 8 期 Chin J Prev Med August 2015, Vol. 49, No. 8 鸡 北京市和吉林省在不同时间从 超市分离出 3 种具有相同带型的菌 株 提示从这两个采样点超市来源 的整鸡可能有共同的养殖场或者批 发来源 从同一采样地 采样时间 来自不同样品但分离出具有相同带 型的沙门菌 说明采样地的不同采 图1 不同省份 不同采样时间分离出相同带型的环丙沙星与头孢噻肟双耐药印第安纳 沙门菌分离株 PFGE 聚类图谱 样点之间也存在交叉污染或存在共 同污染源的可能 李薇薇等[16] 从肉 鸡胴体分离出沙门菌血清型种类多 于肉鸡活体 且后者的血清型均能 在前者中检到 说明屠宰场存在交 叉污染等卫生问题 本研究中具有 相同耐药谱的双耐印第安纳沙门菌 菌株 其 PFGE 基因簇和带型各异 一方面与多重耐药菌株的来源多样 性有关 也提示在整个生产销售链 图2 北京市不同采样时间分离出相同带型的环丙沙星与头孢噻肟双耐药印第安纳 沙门菌分离株 PFGE 聚类图谱 中存在交叉污染的可能 本研究中 的 E 基因簇为我国双耐印第安纳沙 门菌的主要 PFGE 基因簇型别 需加 注意 监管部门和生产企业采取适 宜措施 降低肉鸡生产链各环节沙 门菌污染 是保障食品安全 减少人 类食源性沙门菌感染的重中之重 参 考 文 献 [1] [2] [3] 图3 江苏省不同采样时间分离出相同带型的环丙沙星与头孢噻肟双耐药印第安纳 沙门菌分离株 PFGE 聚类图谱 表3 耐受抗生素数目 种 Hohmann EL. Nontyphoidal salmonellosis[j]. Clin Infect Dis, 2001, 32(2):263-269. 王军, 郑增忍, 王晶钰. 动物源性食品 中沙门氏菌的风险评估[J]. 中国动物 检疫,2007, 24(4):23-25. Xu X, Cui S, Zhang F, et al. Prevalence and characterization of cefotaxime and ciprofloxacin co-resistant Escherichia coli isolates in retailchicken carcasses and Ground Pork, China [J]. Microb 中国 6 个省份环丙沙星与头孢噻肟双耐药印第安纳沙门菌 PFGE 型别与耐药谱分布 基因簇 带型 菌株 数目 种 数目 种 数目 株 优势 基因簇 优势带型 5种 2 2 2 E M JFPX01. C0047 JFPX01. C0098 7种 4 8 10 E I JFPX01. C0042 JFPX01. C0079 87 114 150 224 6种 1 8种 14 10 种 10 9种 合计 24 32 1 44 28 1 57 40 E E F J N P D E H P Q E G N D E F P JFPX01. C0026 JFPX01. C0018 JFPX01. C0034 JFPX01. C0051 JFPX01. C0005 JFPX01. C0016 JFPX01. C0071 JFPX01. C0123 JFPX01. C0018 JFPX01. C0105 JFPX01. C0130 JFPX01. C0018 JFPX01. C0051 JFPX01. C0105 JFPX01. C0123

中华预防医学杂志 2015 年 8 月第 49 卷第 8 期 Chin J Prev Med,August 2015, Vol. 49, No. 8 721 Drug Resist, 2014, 20(1):73-81. [4] Wang Y, Chen Q, Cui S, et al. Enumeration and characterization of Salmonella isolates from retail chicken carcasses in Beijing, China[J]. Foodborne Pathog Dis, 2014, 11(2):126-132. [5] Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI). M100-S22 performance standards for antimicrobial susceptibility testing. twenty-second informational supplement[s]. Wayne, PA: CLSI, 2012:45-49. [6] Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI). M100-S22 performance standards for antimicrobial susceptibility testing. twenty-second informational supplement[s]. Wayne, PA: CLSI, 2012:50-51. [7] 中华人民共和国卫生部. GB4789.4-2010 食品安全国家标准食品微生物检验沙门氏菌检验 [S]. 北京 : 中国标准出版社,2010. [8] WHOCC-Salm. White-Kauffmann-Le-Minor Scheme// WHOCC-Salm. Antigenic formulae of the Salmonella serovars. 9th edition[s]. Paris: Institut Pasteur, 2007: 15-107. [9] Lauderdale TL, Aarestrup FM, Chen PC, et al. Multidrug resistance among different serotypes of clinical Salmonella isolates in Taiwan[J]. Diagn Microbiol Infect Dis, 2006, 55(2): 149-155. [10] 崔生辉, 徐潇, 张凤兰. 中国 超级耐药细菌 流行原因与控制措施探讨 [J]. 中华预防医学杂志, 2013, 47(5) : 400-402. [11] Wong MH, Zeng L, Liu JH, et al. Characterization of Salmonella food isolates with concurrent resistance to ceftriaxone and ciprofloxacin[j]. Foodborne Pathog Dis, 2013, 10(1):42-46. [12] Yang B, Qu D, Zhang X, et al. Prevalence and characterization of Salmonella serovars in retail meats of marketplace in Shaanxi, China[J]. Int J Food Microbiol, 2010, 141(1-2):63-72. [13] Kasimoglu DA, Ayaz ND, Gencay YE. Serotype identification and antimicrobial resistance profiles of Salmonella spp. isolated from chicken carcasses[j]. Trop Anim Health Prod, 2010, 42(5): 893-897. [14] Jacoby GA. Extended-spectrum beta-lactamases and other enzymes providing resistance to oxyimino-beta-lactams[j]. Infect Dis Clin North Am, 1997,11(4):875-887. [15] 滕林, 苏芬, 甄永强, 等. 产超广谱 β- 内酰胺酶细菌肺部感染及耐药性分析 [J]. 中华医院感染学杂志, 2002, 12(12) : 948-949. [16] 李薇薇, 白莉, 张秀丽, 等. 中国四省肉鸡生产加工环节沙门菌的污染及耐药谱分布状况 [J]. 中华预防医学杂志, 2013, 47(5) :435-438. ( 收稿日期 :2015-01-19) ( 本文编辑 : 吕相征 ) 关于 中华预防医学杂志 刊出论文中英文缩写的公告 读者 作者 编者 BMI: 体质指数 CDC: 疾病预防控制中心 CFU: 菌溶形成单位 Ct 值 : 每个反应管内荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数 EDTA: 乙二胺四乙酸 ELISA: 酶联免疫吸附试验 FAO: 联合国粮农组织 FBG: 空腹血糖 HDL-C: 高密度脂蛋白胆固醇 HIV: 人类免疫缺陷病毒 LDL-C: 低密度脂蛋白胆固醇 MTB: 结核分枝杆菌 PBS: 磷酸盐缓冲液 PCR: 聚合酶链反应 PAGE: 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PFGE: 脉冲场凝胶电泳 Real-time RCR: 实时定量荧光 PCR RT-PCR: 逆转录 - 聚合酶链反应 P n: 第 n 百分位数 SDS: 十二烷基硫酸钠 SPF: 无特定病原体 TMB: 四甲基联苯胺 TC: 总胆固醇 TG: 甘油三酯 Tris: 三羟甲基氨基甲烷 WHO: 世界卫生组织

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