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1 86 中国热带医学 07 年第 7 卷第 9 期 China Tropical Medicine,September 07,Vol.7,No.9 珠海市斯坦利沙门菌耐药特征和分子分型分析 论著 方艳梅, 杨春晓, 张丽荣, 魏泉德珠海市疾病预防控制中心, 广东珠海 5906 摘要 : 目的分析 0 06 年珠海市斯坦利沙门菌的耐药情况与脉冲场凝胶电泳 (PFGE) 分子分型 方法将腹泻病人的粪便进行沙门菌分离培养, 生化鉴定和血清学分型, 采用药敏纸片法 (K-B 法 ) 进行 种抗生素的耐药试验 根据美国 PulseNet 实验室推荐的沙门菌 PFGE 分型试验方案进行分子分型 结果分离培养共获得斯坦利沙门菌 08 株, 检出高峰期在 7 0 月, 主要感染人群是小于 岁的幼儿 (55.6%), 感染病例男女比为.8 药敏试验显示本地斯坦利沙门菌对庆大霉素 三代和四代头孢类抗生素及环丙沙星较为敏感, 对复方磺胺类抗生素耐药率为 6.8% (70/08), 对氨苄青霉素 萘啶酮酸 四环素 氯霉素和链霉素呈现低水平的耐药 (0.%~6.7%), 但对链霉素的中度敏感率为 68.5%, 有 8 株 (6.7%) 菌呈多重耐药 08 株菌经 PFGE 分型分为 6 个聚类簇, 共获得 66 种带型, 每种带型包含菌株数 ~ 株不等, 相似值在 6.%~00%, 优势带型为 ST5( 株 ) 和 ST8(0 株 ) 结论珠海市斯坦利沙门菌的耐药情况较为乐观, 但对磺胺类抗生素耐药率比较高, 也出现多重耐药株, 需继续加强监测 斯坦利沙门菌遗传基因多样性, 多重耐药株的型别多样, 菌株来源广泛 关键词 : 沙门菌 ; 抗生素敏感性 ;PFGE; 分子分型中图分类号 :R378. 文献标识码 :A 文章编号 : (07) DOI:0.360/j.cnki.6-06/r Characteristics of antimicrobial resistance and molecular typing of Salmonella stanley in Zhuhai FANG Yanmei, YANG Chunxiao, ZHANG Lirong, WEI Quande Zhuhai City Center for Disease Control and Prevention, Zhuhai, Guangdong 5906, China Abstract: Objective To investigate the antimicrobial resistance status and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) patterns of Salmonella stanley isolates in Zhuhai City, Methods The stool samples from infectious diarrhea patients were isolated and cultured by the sentinel surveillance hospitals, and the strains were identified by the biochemical methods and serotyping. The disk diffusion method (K-B) was used to determine the susceptibility of all strains to kinds of antimicrobial agents, and the molecular typing was performed according to the Salmonella PFGE genotypic test recommended by Pulsenet Laboratory. Results A total of 08 strains of S. stanley were isolated, and the peak- season of the pathogen isolation was mainly from July to October of the year. The children under year old were mainly affected, accounting for 55.6%, and the gender ratio (male to female) was.8. Over 90% of Salmonella isolates were sensitive to gentamicin (GEN), cephalosporin and ciprofloxacin (CIP). The resistance rate to sulfamethoxazole (S3) was 6.8% (70/08). There were low levels of resistance to ampicillin (AMP), nalidixicacid (NA), tetracycline (TE), chloramphenicol (C) and streptomycin (S) (0.%- 6.7%). The medium sensitive rate of S was 68.5%. However, there were 8(6.7%)strains showed multidrug resistance(mdr). The 08 Salmonella strains were divided into 6 clusters and 66 PFGE types, each type included - strains, the similarity range was from 6.% to 00%, and the common types was ST5 and ST8, which included strains and 0 strains, respectively. Conclusions The drug resistance of S. stanley in Zhuhai City is relatively optimistic, but the resistance rate to sulfonamides is relatively high, and some multidrug resistant strains also appear, which reminds us to strengthen the resistance monitoring. S. stanley shows genetic diversity, and the PFGE patterns of MDR strains are also various. The range of the strainsource is wide. Key words: Salmonella; drug susceptibility; PFGE; molecular typing 非伤寒沙门菌通常导致腹泻或肠胃炎, 是食源性疾病常见的致病菌 文献资料分析发现 年每年因非伤寒沙门菌导致急性腹泻 83.5 万人次, 导致急性胃肠炎病例估计为 987. 万人次, 造 [] 成较重的疾病负担 在食源性疾病监测项目中, 广 东省食源性疾病的主要致病菌是非伤寒沙门菌, 斯 [] 坦利沙门菌是常见的非伤寒沙门菌血清型之一, 和其他非伤寒沙门菌血清型感染的临床表现一样, 斯坦利沙门菌感染会引起新生儿胃肠炎 败血症和食 [3-5] 物中毒等 近年来非伤寒沙门菌耐药问题日益严 基金项目 : 广东省医学科学技术研究基金 (No ) 作者简介 : 方艳梅 (98 ), 女, 本科, 主管技师, 研究方向 : 病原微生物检验

2 中国热带医学 07 年第 7 卷第 9 期 China Tropical Medicine,September 07,Vol.7,No 重, 特别是鼠伤寒沙门菌, 呈现较高的多重耐药 [6] 率, 对临床治疗产生一定的影响, 本文分析了珠海市 0 06 年分离自腹泻病例的斯坦利沙门菌的耐药情况和脉冲场凝胶电泳 (PFGE) 分子分型特征, 以了解珠海市斯坦利沙门菌的耐药谱和分子流行病学特征, 为食源性疾病暴发调查和溯源提供参考数据 材料与方法. 菌株来源分离自珠海市 0 06 年腹泻病例的 08 株斯坦利沙门菌 药敏试验质控菌株为大肠埃希菌 ATCC59,PFGE 相对分子质量标准菌株为 H98, 均由广东省疾病预防控制中心病原微生物所提供. 主要试剂与仪器.. 主要试剂改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤 (SBG) ( 广东环凯 ) 沙门菌科马嘉显色培养基 脑心浸液培养基 ( 英国 OXOID) M-H 琼脂 ( 博赛生物 ) 药敏纸片 ( 英国 OXOID) GN 鉴定卡 ( 法国生物梅里埃 ) 沙门菌诊断血清 ( 丹麦 SSI) 琼脂粉 ( 英国 OXOID) Seakem Glod 琼脂糖 ( 美国 LONZA) 蛋白酶 K( 英国 Roche) 限制性内切酶 XBaI(promega) TRIS-HCl( 双螺旋生物科技公司 ) EDTA( 双螺旋生物科技公司 ) 0 X TBE( 双螺旋生物科技公司 ).. 主要仪器药敏纸片分配器 ( 英国 OXOID) VITEK 浊度仪 ( 法国生物梅里埃 ) VITEK-compact 仪 ( 法国生物梅里埃 ) 去离子水系统 ( 美国 Milipore) 恒温水浴摇床 ( 德国 memmert) 水浴锅 ( 德国 memmert) 微型台式离心机 (eppendoff) 脉冲场凝胶电泳系统 ( 美国 BIORAD) 凝胶成像系统 ( 美国 BIORAD).3 方法.3. 分离培养与菌株鉴定用拭子挑取粪便放入 SBG 增菌液,37 培养 6~8 h, 接种沙门菌科马嘉显色平板, 从显色平板上挑取可疑菌落到脑心浸液平板上,37 培养 6~8 h, 生理盐水制备菌悬液, 比浊仪测定 OD 值,VITEK 仪进行生化鉴定, 确定为 沙门菌后用沙门菌诊断血清进行 O 抗原玻片凝集分型, 再利用 0.6% 营养软琼脂进行 H 抗原分型试验, 生理盐水做自凝对照 根据 K-W 血清分型表确定对应血清型别.3. 药敏试验参考 WHO 推荐的 K-B 法, 将斯坦利沙门菌转种到脑心浸液平板上,37 培养 6~8 h, 生理盐水制备 0.5 麦氏浊度菌悬液 用无菌棉拭子蘸取菌液均匀涂布于 M-H 平板表面, 用分配器将药敏纸片压盖其上,5 min 内 37 培养箱, 培养 8 h 后测量各药敏纸片抑菌圈直径, 参照美国临床实验室标准化协会 CLSI M00-S3 标准进行耐药表型判定, 大肠杆菌 ATCC 59 做为质控菌株.3.3 PFGE 分型按照美国 PulseNet 网络实验室公布的沙门菌脉冲场凝胶电泳标准分型方法, 对 08 株斯坦利沙门菌菌株进行分子分型, 沙门菌标准菌株 H98 作为分子量标记, 限制性内切酶 XbaⅠ,37 酶切 h 电泳参数: 电压 6 V/cm, 脉冲时间.~63.8 s, 线性转换, 电场角度 0 度, 电泳时间 7.5 h, 电泳液温度 电泳结束后胶块用 GelRed 染料染色 0 min 后纯水清洗 30 min, 凝胶成像仪拍照, 保存.3. 数据分析将菌株药敏试验结果录入 Excel 表并统计分析 用 BioNumerics6.0 软件对 PFGE 图谱进行数据分析, 绘制聚类分析树状图, 聚类算法为非加权配对平均法 UPGMA, 电泳条带位置优化度.5%, 相似度 00% 认定为同一 PFGE 带型 结果. 背景资料分析 0 06 年珠海市腹泻病例共分离得到沙门菌 00 株, 血清型分型发现排在前四的血清型是 I,5,:i:- 鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌和斯坦利沙门菌, 共占 7.0%, 其中分离到 08 株斯坦利沙门菌, 详见表 分析斯坦利沙门菌感染病例发现男女比为.8 (70/38), 主要发病人群为小于 岁婴幼儿 (55.6%,60/08),~6 岁幼儿为 3 株 (39.8%), 大于 6 岁的仅为 5 株 (.6%); 全年均可检出, 高峰期在 7 0 月份, 共有 68 株 (6.9%) 监测医院共有 3 家, Table 表 年沙门菌主要血清型分布情况 Distribution of the predominant serovars of Salmonella, 年份 Year I,5,:i:-S.,5,:i:- 鼠伤寒沙门菌 S. typhimurium 肠炎沙门菌 S. enteritidis 斯坦利沙门菌 S. stanley 其他型别 Others 合计 Total 合计 Total

3 86 中国热带医学 07 年第 7 卷第 9 期 China Tropical Medicine,September 07,Vol.7,No.9 家在西区, 家在东区,85% 株菌 (9 株 ) 分离自东区的监测医院. 药敏试验结果 08 株斯坦利菌株对三代头孢类 氟喹诺酮类环丙沙星 庆大霉素普遍敏感, 耐药率均低于 5%; 对磺胺复合物耐药率较高, 耐药率为 6.8%; 呈现低水平耐药的抗生素有氯霉素 氨苄青霉素 萘啶酮酸 链霉素和四环素, 耐药率分别为 0.%.%.0%.8% 和 6.7% 虽然链霉素耐药率较低, 但它的中度敏感比例高达 68.5%; 中度敏感率较高的抗生素有萘啶酮酸 四环素和头孢噻肟, 中度敏感率分别是 5.0% 9.% 和.0%, 详见表 耐 种抗生素的菌株共有 5 株, 均是磺胺复合物与其他基础抗生素的组合, 耐 3 种及以上抗生素的多重耐药菌株共有 8 株 (6.7%), 其中耐 3 种抗生素的有 8 株, 耐 种抗生素的有 株, 耐 5~0 种抗生素的有 6 株, 详见表 3 而在鼠伤寒沙门菌中常见的多重耐药型别 AC SSuT+ 菌株有 株, 分布于 年 无抗生素耐药的菌株共有 30 株 (7.8%), 分布在 0 05 年, 分别为 0 年 9 株 03 年 株 0 年 株和 05 年 8 株 谱为 AMP-S3-TE 的 5 株菌均分布在 A 簇, 相似值为 89.0%; 分型共获得 66 种带型, 命名为 ST0~ST66, 菌 株间相似值为 6.%~00%, 每种带型包含 ~ 株 菌,5 种带型只包含 株菌, 种带型包含了 ~ 株 菌, 优势带型为位于 B 簇的 ST5( 株 ) 和 ST8(0 株 ) 分析优势型别 ST5 的 株菌发现分离时间在 0 06 年均有分布, 主要集中在 05 和 06 年 (9/,5% 和 8/,0%); 年龄在 3 个年龄段均有分 布, 但以小于 岁年龄为主 (/,66.7%); 男女性别 比为.33 (/9), 这与斯坦利沙门菌流行特征相一 致 还发现两种优势带型的耐药谱均有一定的特 点,ST5 带型耐药谱以耐磺胺复合物的菌株为主 (/,67%), 而 ST9 带型菌株以无抗生素耐药的 菌株为主 (7/0,70%) 对 种抗生素及以上的菌株 有 33 株, 它们的 PFGE 型别较为分散, 同年同一耐药 谱的菌株 PFGE 型别也不一样, 耐 6~9 种抗生素菌株 的 PFGE 型别也分布在不同型别, 提示多重耐药株来 源多样 详见图 表 3 Table 3 斯坦利沙门菌对两种及以上抗生素耐药谱 Multidrug resistance spectrum of Salmonella stanley Table 表 08 株斯坦利沙门菌耐药情况 [n(%)] Rate of antimicrobial resistances of 08 isolates of Salmonella stanley [n(%)] 序号 No. 耐药谱 Resistance spectrum 氨苄西林 + 磺胺复合物磺胺复合物 + 萘啶酮酸 菌株数 Strain No. 抗生素 耐药 中度敏感 敏感 3 磺胺复合物 + 链霉素 Antibiotic Resistance Intermediary Sensitive 磺胺复合物 + 环丙沙星 氨苄西林 Ampicillin(AMP) (.) 7(6.8) 89(8.) 5 磺胺复合物 + 四环素 磺胺复合物 Sulphonamides compound (S3) 70(6.8) 0(9.5) 8(5.9) 6 7 磺胺复合物 + 头孢他啶磺胺复合物 + 庆大霉素 链霉素 Streptomycin (S) 6(.8) 7(68.50) 8(6.7) 8 氨苄西林 + 磺胺复合物 + 四环素 5 甲氧苄氨嘧 Trimethoprim(W) 7(6.8) 0(0.00) 0(93.5) 9 氨苄西林 + 磺胺复合物 + 氯霉素 萘啶酮酸 Nalidixic acid(na) 3(.0) 7(5.00) 68(63.0) 0 氨苄西林 + 萘啶酮酸 + 四环素 四环素 Tetracycline(TE) 8(6.7) (9.0) 69(63.9) 磺胺复合物 + 萘啶酮酸 + 头孢他啶 氯霉素 Chloramphenicol(C) (0.) (0.93) 96(88.9) 氨苄西林 + 氯霉素 + 磺胺复合物 + 链霉素 庆大霉素 Gentamicin (GEN) 5(.6) (3.70) 99(9.) 3 氯霉素 + 磺胺复合物 + 萘啶酮酸 + 四环素 头孢他啶 Ceftazidime(CAZ) 5(.6) (0.93) 0(9.) 氨苄西林 + 氯霉素 + 磺胺复合物 + 四环素 头孢噻肟 Cefotaxime (CTX) (0.9) 3(.00) 9(87.0) 5 氨苄西林 + 磺胺复合物 + 四环素 + 头孢他啶 头孢吡肟 Cefepime (FEP) (0.9) 3(.80) 0(96.3) 6 氨苄西林 + 氯霉素 + 磺胺复合物 + 四环素 + 甲氧苄 环丙沙星 Ciprofloxacin(CIP) (3.7) 6(5.56) 98(90.7) 氨嘧啶 7 氨苄西林 + 磺胺复合物 + 链霉素 + 四环素 + 庆大霉.3 PFGE 分子分型结果 08 株斯坦利沙门菌 经 Xba Ⅰ 酶切, 进行 PFGE 分型 ( 图 ) 结果经 Bionumerisc V6.0 软件分析, 分为 6 大聚类簇 (A~F 簇 ), 聚类相似值为 6.%~77.5%,80.6% 的菌株 (87 株 ) 聚类在 B 簇, 各聚类簇之间在病人年龄 分离时间 和分离地点方面没有明显的特点, 但发现同年的耐药 素 + 甲氧苄氨嘧啶氨苄西林 + 氯霉素 + 磺胺复合物 + 链霉素 + 四环素 + 庆大霉素 + 萘啶酮酸 + 甲氧苄氨嘧啶氨苄西林 + 氯霉素 + 磺胺复合物 + 链霉素 + 四环素 + 庆大霉素 + 萘啶酮酸 + 甲氧苄氨嘧啶 + 头孢噻肟氨苄西林 + 氯霉素 + 磺胺复合物 + 链霉素 + 四环素 + 庆大霉素 + 萘啶酮酸 + 甲氧苄氨嘧啶 + 头孢吡肟 + 环丙沙星

4 中国热带医学 07 年第 7 卷第 9 期 China Tropical Medicine September 07 Vol.7 No.9 编号 年龄 分离地 年份 耐药谱 865 型别 株数 A簇 B簇 C簇 D簇 E簇 F簇 注 带型相同归为同一型别并统一编号 统计编号相同菌株 挑选有代表性的菌株条带进行聚类分析 ST 表示 PFGE 型别 耐药谱 无 表示无 抗 生 素 耐 药 Note: The same patern classed as one PFGE type and unified the numbers, count the strain with the same PFGE type, and choose the representative strain for cluster analysis; ST represents the PFGE type; NO represents the stains with no antibiotic resistance. 图 Fig. Fig. 3 斯坦利沙门菌 PFGE 聚类分析图谱 Xba XbaⅠ Ⅰ内切酶 内切酶 Cluster analysis of Salmonella stanley according to the results of PFGE incised by Xba XbaⅠ Ⅰ 讨论 在我国非伤寒沙门菌是重要的食源性疾病致病 菌 造成较重的疾病负担 非伤寒沙门菌感染占急性 胃肠炎的比例与发达国家类似[7-8] 国内多省份报道 非伤寒沙门菌常见血清型是鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门 菌 阿贡那沙门菌和德尔卑沙门菌,在国内特别是北

5 866 中国热带医学 07 年第 7 卷第 9 期 China Tropical Medicine,September 07,Vol.7,No.9 方省份斯坦利沙门菌少有检出, 属于罕见血清型 [9], 而 在广东 007 年沙门菌监测以来斯坦利沙门菌是引起 腹泻的非伤寒沙门菌中排名第四的血清型 [0], 在南 [] [] 宁和东莞禽类沙门菌感染监测中, 发现斯坦利沙 门菌也是沙门菌感染的常见血清型, 可见在南方斯坦 利沙门菌广泛分布于外环境中, 可能引起食源性疾 病 珠海市沙门菌的血清型分布和广州市情况相 似 [3], 常见血清型均是 I,5,:i:- 鼠伤寒沙门菌 肠炎 沙门菌和斯坦利沙门菌, 不同的是近年来珠海市后三 种血清型检出比例相差不大, 可见本地斯坦利沙门 菌的感染情况不可忽视, 也可能引起暴发 分析斯坦 利沙门菌在本地的流行特征发现, 它和非伤寒沙门菌 的流行特征一致 [3-], 婴幼儿是主要发病人群, 男性检 出比例稍高, 全年均有检出, 高峰期集中在夏秋季 药敏试验结果显示 7.8% 的斯坦利沙门菌株无 产生抗生素耐药, 除了对磺胺复合物耐药率较高 (6.8%), 对其他基础抗生素耐药率较低, 对三代和四 代头孢类抗生素和氟喹诺酮类抗生素较敏感 但值 得注意的是对链霉素中度敏感率高达 68.5%, 对萘啶 酮酸和四环素中度敏感率在 0% 左右, 特别是有 3 株菌 (%) 对头孢噻噁抗生素中度敏感, 可见部分菌 株对这些抗生素呈现一定的耐药压力 在广东省监 测中发现 90% 以上的鼠伤寒沙门菌对三种以上抗生 素产生耐药, 多重耐药型别为 ACSSuT+ 的鼠伤寒沙门 菌高达 50% [6], 相较于鼠伤寒沙门菌, 珠海市斯坦利沙 门菌的耐药情况相对乐观, 不过也发现对 种抗生素 耐药的菌株有 5 株 (3.9%),3 种抗生素以上耐药的 菌株有 3 株 (.0%), 其中有 株菌对 8 种以上抗生 素耐药, 可见随着抗生素的使用和时间的推移, 斯坦 利沙门菌面对抗生素选择性压力也可能产生更多的 耐药株, 提示我们继续做好耐药监测, 及时了解斯坦 利沙门菌的耐药谱及其变化, 指导临床规范用药 PFGE 分型技术分辨力高, 重复性好, 为确定菌株 之间的亲缘关系提供了可靠的技术手段, 被广泛地认 为是细菌分子流行病学研究的金标准, 通过该分型技 术, 能进一步探明相同血清型的菌株的同源性, 判定 为散发或暴发 [5-6] 08 株菌经 PFGE 分型获得 66 种 PFGE 型别, 提示珠海市斯坦利沙门菌基因型别的多 样性 聚类分析发现相同年份来源菌株分布在不同 基因簇中, 地域上东西区来源菌株的型别也互为交 叉, 没有明显的同源性 ; 多重耐药株也分布在不同聚 类簇中, 提示多重耐药株来源广泛 优势型别 ST5 包含了 株菌, 主要来源于 05 和 06 年, 耐药型 别也有相同的耐药谱, 以耐磺胺复合物 (S3) 抗生素为主, 但由于缺乏流行病学调查资料, 没能推断是否存在散发, 也提示今后食源性疾病监测中加强菌株分子分型 数据分析和流行病学调查的及时性, 充分发挥分子分型的溯源作用, 尽早察觉可能发生的散发和暴发 参考文献 [] 毛雪丹, 胡俊峰, 刘秀梅. 用文献综述法估计我国食源性非伤寒沙门氏菌病疾病负担 [J]. 中华疾病控制杂志, 0, 5(7): [] JONES T F, INGRAM L A, CIESLAK P R, et al. Salmonellosis outcomes differ substantially by serotype[j]. J Infect Dis, 008, 98 (): 09-. [3] 贾青云, 贡桂清, 张志华, 等. 新生儿斯坦利沙门氏菌感染 [J]. 新生儿科杂志, 99(): 6-66, 96. [] 包贻顺, 张晓峰, 王惠敏. 斯坦利沙门菌致腰椎化脓性骨髓炎并发败血症 例 [J]. 第四军医大学学报, 00, (0): [5] 刘国蓉, 王涛, 王鲁茜, 等. 一起由斯坦利沙门菌引起食源性疾病暴发疫情的调查研究 [J]. 疾病监测, 05, 30(0): [6] 李柏生, 柯碧霞, 何冬梅, 等. 广东省腹泻病例非伤寒沙门菌耐药谱和 PFGE 分型研究 [J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 0, 3(6): [7] MAJOWICZ S E, MUSTO J, SCALLAN E, et al. International collaboration on enteric disease burden of illness'studies: the global burden of nontyphoidal Salmonella gastroenteritis[j]. Clin Infect Dis, 00, 50(6): [8] 戴月, 朱谦让, 周翌婧, 等. 03 年江苏省食源性非伤寒沙门菌疾病负担研究 [J]. 江苏预防医学, 0, 5(): 0-. [9] 赵嘉咏, 郝宝林, 谢志强, 等. 河南省一起斯坦利沙门菌聚集性病例的病原学研究及溯源分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 06, 3 (5): [0] KE B, SUN J, HE D, et al. Serovar distribution, antimicrobial resistance profiles, and PFGE typing of Salmonella enterica strains isolated from in Guangdong, China[J]. BMC Infect Dis, 0, : 338. [] 王鸣柳, 林玫, 周凌云, 等. 主要爬行动物来源沙门菌血清型分布及耐药特征分析 [J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 05, 6(3): [] 张丽华, 朱学海, 郭主声, 等. 市售活鸡和腹泻患者中非伤寒沙门菌分子特征和耐药性研究 [J]. 中国食品卫生杂志, 0, 6(6): [3] 张晶, 张欣强, 侯水平, 等. 广州市 566 株腹泻病例沙门菌的血清型分布及耐药性分析 [J]. 实用预防医学, 06, 3(5): 66-67,63. [] 苏良, 杨柳青, 欧新华, 等. 长沙市 0 0 年感染性腹泻沙门菌监测结果 [J]. 中国热带医学, 05, 5(): [5] 黄冰, 周勇, 龙佳丽, 等.03 年广州市腹泻病人沙门菌血清分型及耐药性分析. 热带医学杂志, 05, 5 (7) : [6] 陈琛. 肠道病原菌的分子分型研究方法进展 [J]. 微生物学免疫学进展, 00, 38(): 收稿日期 : 编辑 : 王佳燕

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