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蝶甘
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1 吉非替尼片溶出度测定方法的考察叶国健, 秦凌浩, 胡巧红 * ( 广东药学院药科学院, 广州 ) 摘要 : 目的建立吉非替尼片的溶出度试验方法方法应用桨法测定溶出度, 并以 HPLC 测定样品中药物浓度, 通过对溶出介质, 转速和时间进行筛选, 拟定吉非替尼片的溶出度试验方法, 并以该方法测定不同制剂的溶出度结果采用桨法, 转速 50 r min 1, 选取 ph 1.0 盐酸液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液 5% 聚山梨酯 80 水溶液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液作为溶出介质, 溶出截止时间为 60 min 应用 HPLC 测定样品中药物浓度, 溶出介质, 辅料和滤膜吸附对测定无干扰, 药物在 10~300 μg ml 1 内线性相关良好, 回收率在 98%~100% 内, 精密度及稳定性的 RSD 值均 <2% 结论建立的溶出度测定方法具有较强区分度, 能为制剂处方工艺筛选提供评价依据关键词 : 吉非替尼 ; 溶出度 ; 方法学中图分类号 :R ;R944.4 文献标识码 :B 文章编号 : (2016) DOI: /j.cnki.issn Study on Dissolution Method for Gefitinib Tablets YE Guojian, QIN Linghao, HU Qiaohong * (School of Pharmacy, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou , China) ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a dissolution method for gefitinib tablets. METHODS Paddle apparatus was used. The drug concentrations in samples were determined by HPLC. The dissolution media, rotational speed and time were investigated to establish the dissolution method. And dissolution test of different preparations were carried out by the established method. RESULTS The dissolution method was as follows: paddle apparatus, the rotational speed of 50 r min 1, and the dissolution time of 60 min. ph 1.0 hydrochloric acid solution, ph 4.5 acetate buffer solution, 5% Polysorbate 80 solution and ph 6.8 phosphate buffer solution containing 5% Polysorbate 80 were as dissolution media. Dissolution media, excipients and membrane adsorption did not interferer the determination of gefitinib in samples by HPLC. It showed good linearity in drug concentration from 10 μg ml 1 to 300 μg ml 1. The recoveries ranged from 98% to 100%. The RSD of precision and stability were less than 2%. CONCLUSION The dissolution method is discriminative, which is suitable as a standard method for the formulation study of gefitinib tablets. KEY WORDS: gefitinib; dissolution; methodology 吉非替尼是由阿斯利康公司研发的一种分子靶向药物, 它能与表皮生长因子受体 (EGFR) 细胞内的 ATP 结合位点上的三磷酸腺苷竞争, 阻断其酪氨酸激酶活性, 进而阻断 EGFR 的信号传导通路, 阻碍肿瘤的生长转移和血管生成, 并可诱导肿瘤细胞的凋亡 [1-2] 其制剂于 2005 年在中国上市, 单药或联合治疗晚期非小细胞肺癌疗效肯定, 患者耐受性好吉非替尼属于弱碱性药物, 在生物药剂分类系统属于 BCSⅡ 类, 其给药方式为口服固体制剂, 剂量为 250 mg 由于其原研制剂价格昂贵, 因此开发一种仿制制剂势在必行为保证仿制制剂的疗效与原研制剂相同, 临床前试验中一般采用体外溶出试验对制剂的质量进行评价 [3-5] 本实验以仿制药质量一致性评价原则作为指导, 对吉非替尼片的溶出实验条件进行考察, 建立其体外溶出方法, 为吉非替尼片的仿制制剂处方工艺考察提供评价依据 1 仪器与试药 FA1104N 分析天平 ( 上海精密科学仪器有限公司 );PHS-3C 酸度计 ( 上海仪电科技仪器股份有限公司 );ZRS-8G 智能溶出试验仪 ( 天津市天大天发科技有限公司 );Hitachi Chromaster 系列高效液相色谱仪 (5110 四元泵,5310 柱温箱,5410 紫外检测器,5210 自动进样器, 日本日立高新技术公司 ) 吉非替尼 ( 纯度 :99.9%, 实验室自制, 批号 : ); 吉非替尼片 ( 实验室自制, 批号 : ); 易瑞沙 (AstraZeneca, 批号 :KK429); 基金项目 : 广东省战略性新兴产业核心技术攻关计划项目 (2012A ) 作者简介 : 叶国健, 男, 硕士生 Tel: (020) Vettelheim@163.com (020) hu_qiaohong@163.com * 通信作者 : 胡巧红, 女, 博士, 教授 Tel: 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 741

2 聚山梨酯 80( 南京威尔化工有限公司 ); 十二烷基硫酸钠 (SDS, 天津市福晨化学试剂厂 ); 盐酸乙酸氢氧化钠磷酸二氢钾三水合乙酸钠均为分析纯, 来自广州化学试剂厂 ; 微孔滤膜 ( 聚醚砜, 0.45 μm, 天津市津腾实验设备有限公司 ); 乙腈 (J.T.Barker, 色谱纯 ); 乙酸铵 ( 上海化学试剂有限公司, 分析纯 ); 重蒸馏水 ( 实验室自制 ) 2 方法与结果 [6] 2.1 溶出样品液中药物浓度的测定色谱条件 Inertsil ODS-3 色谱柱 (3 mm 100 mm,3 μm); 流动相 : 乙腈 -0.96% 乙酸铵溶液 (38 62); 柱温 :40 ; 流速 :0.9 ml min 1 ; 检测波长 :247 nm; 进样量 :20 μl 专属性试验按处方量称取辅料, 用溶出介质稀释得到空白对照液分别进样空白对照液及溶出样品液, 记录液相图谱 ( 见图 1) 结果表明, 辅料和溶出介质在药物出峰时间未有色谱峰出现, 因此对药物含量的测定无干扰图 1 吉非替尼高效液相色谱图 A 空白对照液 ;B 溶出样品液 ;1 吉非替尼 Fig. 1 HPLC chromatograms of gefitinib A blank solution; B sample solution; 1 gefitinib 标准曲线的绘制精密称定吉非替尼 0.25 g, 置 250 ml 量瓶中, 用甲醇稀释定容, 得到浓度为 1 mg ml 1 的储备液分别用 5% 聚山梨酯 80 水溶液 ph 1.0 盐酸溶液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 4 种溶出介质稀释成浓度为 10,20,50,100, 200,250,300 μg ml 1 的溶液, 微孔滤膜过滤后进样测定以峰面积 (A) 对浓度 (C) 进行线性回归得回归方程,4 种溶出介质的回归方程分别为 A= C (r= ), A=40 759C (r= ), A=40 488C (r= ), A= C (r= ), 表明浓度在 10~ 300 μg ml 1 内线性关系良好回收率试验取吉非替尼及辅料, 照制剂处方, 制备成处方量 50%,80%,100% 的模拟处方样品, 以 5% 聚山梨酯 80 水溶液 ph 1.0 盐酸溶液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 4 种溶出介质分别配制成相应浓度的样品溶液, 微孔滤膜过滤后进样测定, 根据标准曲线计算回收率在 4 种溶出介质中的回收率分别为 (99.81±0.70)%,(99.59±0.99)%, (98.46±0.29)%,(99.39±0.42)%(n=3),RSD 分别为 0.70%,0.99%,0.30%,0.43%, 表明药物在此溶出介质中的回收率良好精密度试验在溶出试验的同一溶出杯中取溶出样品液 6 份, 微孔滤膜过滤后进样测定, 计算溶出度, 考察精密度 5% 聚山梨酯 80 水溶液 ph 1.0 盐酸溶液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 4 种溶出介质中溶出度的 RSD 均 <2%, 分别为 0.68%,0.41%,0.52% 和 1.33%(n=6), 说明该测定方法的精密度良好稳定性试验取溶出样品 1 份, 微孔滤膜过滤后, 分别在 0,1,2,4,6,8,10,12 h 进样测定, 计算溶出度, 考察稳定性 5% 聚山梨酯 80 水溶液 ph 1.0 盐酸溶液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 4 种溶出介质中溶出度的 RSD 值分别为 1.03%, 1.39%,1.31%,1.27%, 均 <2%, 说明药物溶出样品在 12 h 内稳定性良好滤膜吸附试验在溶出试验的同一溶出杯中取溶出样品液 2 份, 其中一份样品 r min 1 离心 10 min 后, 取上清液进样测定 ; 另一份样品过 0.45 μm 微孔滤膜, 弃去初滤液, 取续滤液稀释后进样测定按下式计算 2 种方法测得的溶出度的相对偏差离心测得溶出量过滤测得溶出量相对偏差过滤测得溶出量 ph 1.0 盐酸溶液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液 5% 聚山梨酯 80 水溶液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 4 种溶出介质中, 离心后测得的溶出度分别为 95.05%,90.41%,93.41%,91.26%; 过滤后测得的溶出度分别为 94.88%,89.55%, 92.07%,91.24%;4 种介质中溶出度的相对偏差分别为 0.18%,0.95%,1.45%,0.09%, 均 <2%, 因此可认为滤膜吸附对溶出的测定没有明显干扰 2.2 溶出度测定方法考察溶出介质的选择首先考察吉非替尼在水和 ph 为 1.0~6.8 溶液中的溶解度, 然后针对药物 742 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期

3 溶解性能较差的介质, 进一步考察加入表面活性剂后药物溶解度的变化根据溶解度测定结果, 考察添加表面活性剂的种类和用量, 选择合适的溶出介质吉非替尼在不同介质中的溶解度吉非替尼在 ph 1.0,2.0,3.0,4.0,4.5,5.0,5.5,6.0, 6.8 溶液和水中的溶解度分别为 19.00,2.53,21.88, 8.89,1.00,0.14,0.02,0.01,0.001,0.001 mg ml 1 结果表明, 吉非替尼的溶解度具有 ph 依赖性当 ph<4.0 时, 吉非替尼的溶解性能良好, 而 ph 在 4.0~6.0 之间急剧下降药物在 ph 6.8 溶液和水中的溶解度最小, 溶解性极差吉非替尼属于水难溶性药物, 对于难溶性药物的固体制剂, 溶出介质一般选择 ph 1.0,4.0~4.5, 6.8 和水 [7] 而吉非替尼片的剂量为 250 mg, 溶出介质体积为 ml, 若要满足漏槽条件, 药物在介质中的溶解度应 >0.75 mg ml 1 药物在 ph 1.0 盐酸液中溶解度为 mg ml 1, 能满足漏槽条件药物在 ph 4.0 的溶液中溶解度为 8.89 mg ml 1,pH 4.5 时溶解度降为 1 mg ml 1 由于药物在介质中的溶解度越大, 意味着溶出速度越快, 导致溶出曲线的区分力下降因此为了提高溶出曲线的区分度, 选取溶解度相对较小, 但也能满足漏槽条件的 ph 4.5 醋酸盐缓冲液作为溶出介质而对于水和 ph 6.8 磷酸盐缓冲液, 由于药物的溶解度很低, 即使将溶出试验的转速提高也无法改善制剂在其中的溶出行为, 因此需要通过其他方法改善其溶出行为表面活性剂的筛选由于吉非替尼难溶于水和 ph 6.8 磷酸盐缓冲液, 因此需要通过加入表面活性剂提高药物在溶出介质中的溶解度溶出试验中常用的表面活性剂为 SDS 和聚山梨酯 80 分别测定了在水和 ph 6.8 磷酸盐缓冲液中添加不同浓度 SDS 和聚山梨酯 80 的药物溶解度, 结果见表 1 由于 ph 6.8 磷酸盐缓冲液中含有钾离子, 会与 SDS 产生沉淀, 影响其增溶效果, 因此本实验未考察 SDS 对 ph 6.8 磷酸盐缓冲液的增溶效果由表 1 可看出, 药物溶解度与表面活性剂用量呈正相关 ;SDS 对药物的增溶效果比聚山梨酯 80 强,1% SDS 水溶液即可符合漏槽条件, 而聚山梨酯 80 需达到 8% 的浓度才能符合漏槽条件 ; 当 SDS 的浓度为 0.5% 或聚山梨酯 80 浓度为 5% 时, ml 溶出介质中可溶解制剂规格 2 倍的药物根据表 1 溶解度数据, 分别考察吉非替尼片在含不同种类和浓度表面活性剂的溶出介质中的溶出曲线, 结果见图 2 当 SDS 浓度为 1% 时, 制剂中的药物在 10 min 内的溶出度已 >90%; 浓度降为 0.5% 时,15 min 溶出度能达到 85%, 因此药物在上述浓度中的溶出速度偏快, 会使溶出曲线的区分度降低 [5] 而将浓度降低至 0.4% 时, 药物在 20 min 以内溶出较慢,20 min 后增加明显, 但到 60 min 时的溶出度才达到 85%, 与 0.5% SDS 水溶液中的溶出情况差异较大, 溶出行为不稳定, 规律性较差而聚山梨酯 80 作为增溶剂时, 溶出曲线规律性良好, 因此作为溶出介质中的添加剂聚山梨酯 80 浓度的筛选由图 2B 可知, 当聚山梨酯 80 浓度为 3% 和 4% 时,45 min 溶出度未能达到 85% 的溶出限度, 需要将聚山梨酯 80 浓度提高至 5% 才能满足 45 min 溶出度 >85% 因此进一步考察了 2 种不同处方制备的吉非替尼片剂在含 5% 和 6% 聚山梨酯 80 溶液中的溶出情况结果表明, 聚山梨酯 80 的浓度为 5% 时,5,10, 15,20,30,45,60 min 的溶出度差值分别为 4.68%, 13.72%,10.65%,8.33%,1.04%,0.62%,0.06%, 前 20 min 的溶出度差异显著 ; 而浓度为 6% 时, 由于溶出速度的加快, 使 2 种制剂的差异变小,5, 10,15,20,30,45,60 min 的溶出度差值分别为 0.94%,0.95%,2.36%,2.28%,2.41%,1.13%, 0.12% 经统计学分析,2 种制剂在 5% 聚山梨酯 80 溶液中的溶出结果有显著性差异 (P<0.05), 而在 6% 聚山梨酯 80 溶液中没有显著性差异, 因此选择 5% 聚山梨酯 80 溶液为溶出介质表 1 吉非替尼在不同浓度聚山梨酯 80 和 SDS 溶液中的溶解度 Tab. 1 Solubility of gefitinib in different Polysorbate 80 and SDS solution mg ml 1 聚山梨酯 80 SDS 介质 1% 2% 3% 4% 5% 6% 7% 8% 0.01% 0.1% 0.2% 0.3% 0.4% 0.5% 1% 水 ph 6.8 磷酸盐缓冲液中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 743

4 2.2.3 溶出时间的选择根据上述拟定溶出条件, 对吉非替尼片在不同介质中的溶出行为进行定时取样考察, 取样点为 5,10,15,20,30,45, 60,90,120 min, 以相邻 2 个取样时间点溶出度 <5% 作为截止时间图 4 为原研制剂在 4 种溶出介质中 120 min 内的溶出曲线由图可见, 在 ph 1.0 和 4.5 的介质中, 药物在 20 min 时的溶出度已达到 90%, 随后相邻取样时间点的溶出度差值均 <3%; 而在 5% 聚山梨酯 80 水溶液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液中, 在 45 min 溶出度 >85%,60 min 后相邻取样时间点的溶出度差值 <5% 因此根据相关技术指导原则, 吉非替尼片溶出试验截止时间定为 60 min 图 2 吉非替尼片在不同表面活性剂水溶液中的溶出曲线 A SDS;B 聚山梨酯 80 Fig. 2 Dissolution curves of gefitinib tablets in different surfactant solutions A SDS; B polysorbate 转速的选择根据仿制药一致性评价技术指导原则, 需要放宽试验参数时, 桨法的最大转速为 75 r min 1, 不建议使用 100 r min 1 因此实验仅考察了 50 r min 1 和 75 r min 1 2 种转速条件下吉非替尼片在 5% 聚山梨酯 80 溶液中的溶出情况, 结果见图 3 结果表明, 制剂在 2 种转速条件下均能在 45 min 内达到 85% 的溶出限度 ; 75 r min 1 的转速条件下的溶出速度明显快于 50 r min 1, 对溶出曲线的区分度有弱化作用鉴于 2 种转速条件下均能满足 45 min 溶出 85% 的限度,50 r min 1 的转速具有普遍适用性, 因此优先选择较低转速图 3 吉非替尼片在不同转速条件下的溶出曲线 Fig. 3 Dissolution curves of gefitinib tablets under different rotational speed 图 4 吉非替尼片溶出度试验时间考察 Fig. 4 Investigation of dissolution time for gefitinib tablets 2.3 溶出度的测定取吉非替尼片, 按照溶出度测定法 [8] ( 中国药典 2015 年版四部, 溶出介质 ml, 转速为 50 r min 1, 温度为 37, 定时取样 5 ml, 及时补充等体积溶出介质样品滤过后, 取续滤液作为样品液另取吉非替尼储备液, 用溶出介质稀释制成浓度为 250 μg ml 1 的溶液取上述 2 种溶液, 按 2.1 项下方法进行测定, 计算溶出度按上述拟定溶出度测定条件, 分别测定原研制剂与自制制剂在 5% 聚山梨酯 80 水溶液 ph 1.0 盐酸溶液 ph 4.5 醋酸盐缓冲液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 4 种溶出介质中的溶出曲线, 结果见图 5 由图可见,2 种制剂在 ph 1.0 和 ph 4.5 介质中的溶出速度较快,15 min 后溶出度均达到 90%, 两者较显著的差异主要体现在 5 min 的溶出度而在区分度较强的 5% 聚山梨酯 80 水溶液和含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液中,20 min 内自制制剂的溶出速度略快于原研制剂,30 min 后两者的溶出情况基本一致 ; 经计算,2 种制剂在这 2 种溶出介质中的溶出曲线相 744 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期

5 似因子 f 2 分别为 66 和 59, 均 >50, 可以认为 2 种制剂的溶出曲线一致图 5 原研制剂与自制制剂在 4 种溶出介质中的溶出曲线 A 5% 聚山梨酯 80 溶液 ;B 含 5% 聚山梨酯 80 的 ph 6.8 磷酸盐缓冲液 ;C ph 1.0 盐酸溶液 ;D ph 4.5 醋酸盐缓冲液 Fig. 5 Dissolution curves of original preparation and mimic preparation in different media A 5% Polysorbate 80 solution; B ph 6.8 phosphate buffer solution containing 5% Polysorbate 80; C ph 1.0 hydrochloric acid solution; D ph 4.5 acetate buffer solution. 3 讨论美国 FDA 药品数据库中, 吉非替尼片的溶出度测定中溶出样品液的测定方法采用紫外分光光度法但由于溶出试验中制剂中的辅料质量参差不齐, 使用紫外法测定时, 辅料带来的干扰会使测得的溶出度高于含量 [9] 紫外测定法中, 选取的检测波长为 334 nm 根据药物在紫外光区的吸收图谱可知, 药物在 250 nm 附近有最大吸收峰, 而在 340 nm 附近有次强吸收峰这可能是由于辅料在 250 nm 附近存在一定紫外吸收, 会对测定结果造成干扰, 因此只能选择次强吸收峰作为紫外的测定波长, 以避免辅料对测定结果造成较大误差而 HPLC 法兼备测定与分离的功能, 能将样品中的多种组分进行分离后分别测定, 且绝大部分辅料在反相色谱柱上不会出峰, 即便出峰, 保留时间也较短, 因此能有效避免其他组分对主成分含量测定的干扰紫外的线性范围较窄, 因此溶出样品需要用溶出介质稀释后才能测定而 HPLC 的线性范围较宽, 溶出样品可以直接过滤后进行测定, 实现机器的自动化, 大批量连续测定, 有效减少人为操作产生的误差因此本实验对原有检测方法进行了改进, 使用 HPLC 作为溶出度样品测定手段一般而言, 溶出试验中表面活性剂的最大建议浓度仅为 3% 原研制剂在 3% 和 4% 聚山梨酯 80 水溶液中的溶出行为在前 20 min 与在 5% 聚山梨酯 80 中相似, 而在 30 min 后的溶出趋于饱和, 45 min 的溶出度未能达到 85% 的限度, 这可能是由于药物在较低表面活性剂浓度的介质中较快达到饱和状态 ; 而达到饱和状态后, 浓度差较小使制剂中的药物不易转移至溶出介质中为了保证制剂能在规定时间内达到溶出限度, 只能选择添加更高浓度的表面活性剂虽然药物在 5% 聚山梨酯 80 的水溶液和 ph 6.8 磷酸盐缓冲液中均未达到漏槽条件, 仅能满足在 ml 溶出介质中制剂规格 2 倍的药物溶解量, 但溶出试验结果表明, 若选取能达到漏槽条件的溶出介质, 表面活性剂的添加量将很大, 药物的溶出速度很快, 结果将导致溶出曲线区分度下降再者, 若以漏槽条件为出发点, 根据药物在溶出介质中的溶解度来推算表面活性剂的添加量, 将极大地忽视药物制剂的作用, 是对制剂的作用是改善药物水难溶性程度这概念的摒弃从自制制剂与原研制剂的溶出曲线可以看出,2 种制剂在 ph 1.0 和 ph 4.5 介质中 15 min 溶出度已达到 85%, 可认为两者在此溶出条件下溶出曲线相似 ; 而对于其他 2 种介质, 需要进行溶出曲线的相似性评价 [10] 根据该评价方法, 选取 10,15,20,30 min 4 个时间点进行 f 2 检验溶出介质为 5% 聚山梨酯 80 水溶液算得的 f 2 值为 66, ph 6.8 磷酸盐缓冲液中则为 59,f 2 值均 >50, 可认为 2 种制剂的溶出曲线相似然而 ph 6.8 溶出介质中的 f 2 值相对偏小, 为了保证仿制制剂质量与原研制剂的一致性, 仍需对处方工艺进行优化, 使两者的溶出曲线相似度更高因此, 建立区分度强的溶出度方法, 能为制剂的处方工艺考察提供有效的依据, 为制剂质量提供可靠的保证 REFERENCES [1] SORDELLA R, BELL D W, HABER D A, et al. Gefitinib-sensitizing EGFR mutations in lung cancer activate anti-apoptotic pathways [J]. Science, 2004, 305(5687): [2] LUO J, WANG S Y, WU Z X, et al. Special inhibition of smooth muscle cell proliferation by gefitinib via EGFR/Akt pathway [J]. Chin J Hosp Pharm( 中国医院药学杂志 ), 2015, 36(10): [3] LIU M J, XU Z M, CHEN D J, Study on the dissolution test of captopril tablets in Chinese Pharmacopoeia 2010 [J]. Chin J 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 745

6 Mod Appl Pharm( 中国现代应用药学 ), 2015, 31(4): [4] ZHU R, ZHANG H J, WANG J S, et al. Comparative study on dissolution profiles of betahistine hydrochloride tablets from different manufacturers [J]. Chin J Mod Appl Pharm( 中国现代应用药学 ), 2015, 32(3): [5] XIA J, FU X, CHEN Z Y, et al. Study on the uncertainty and the Z score for the determination of dissolution rate of salicylic acid tablets [J]. Chin J Mod Appl Pharm( 中国现代应用药学 ), 2015, 32(12): [6] 格勒尔特 P R, 帕克 M D, 德马塔斯 M. 含有水溶性纤维素衍生物的 IRESSA 药物制剂 : 中国, [P] [7] XIE M F. The dissolution curve with distinguishing ability [J]. Chin J Pharm( 中国医药工业杂志 ), 2014, 45(7): [8] 中国药典. 四部 [S]. 2015: [9] XIE M F. High-efficient and accurate method for determination of dissolution samples [J]. Chin J Pharm( 中国医药工业杂志 ), 2010, 41(7): [10] XIE M F. Evaluation methods of comparability of dissolution curve [J]. Chin J Pharm( 中国医药工业杂志 ), 2009, 40(4): 收稿日期 : 改良透析法制备 MePEG-PLGA- 羟基喜树碱共聚物纳米粒许浩云 1, 谢黎崖 1*, 常迪 2, 侯振清 2, 柯金珍究中心, 福建厦门 ) 1 (1. 厦门大学附属第一医院, 福建厦门 ;2. 厦门大学生物医学工程研摘要 : 目的以聚合物单甲氧基聚乙二醇 - 聚乳酸聚乙醇酸 (MePEG-PLGA) 为载体, 羟基喜树碱 (hydroxy camptothecin, HCPT) 为模型药物, 采用改良的透析法优化制备单甲氧基聚乙二醇 - 聚乳酸聚乙醇酸 - 羟基喜树碱共聚物纳米粒 (MePEG-PLGA-HCPT-NPs), 并进行表征方法粒径 Zeta 电位载药量和包封率的测定结果以粒径和载药量为指标, 考察各影响因素优化制备工艺并进行外观优化制备条件 : 丙酮作为溶剂, 透析温度为 25, 透析初始含水量为 1%, 透析外水相 ph=4.0, 聚合物浓度为 3 mg ml 1, 载体中的 PEG 含量为 15%, 载体中的乳酸含量为 100%,HCPT 与 MePEG-PLGA 投料质量比为 1 5 优化制备的 MePEG-PLGA-HCPT-NPs 为实心球形壳核结构, 表面圆滑, 粒径分布均一, 分散性好, 平均粒径 (120.1±2.4)nm, 多分散系数为 0.057±0.021,Zeta 电位为 ( 31.2±0.98)mV, 载药量为 7.42%, 包封率为 44.5% 结论改良透析法适合 MePEG-PLGA-HCPT-NPs 的制备, 为后续研究奠定了良好的基础关键词 : 羟基喜树碱 ; 甲氧基封端的聚乙二醇 - 聚乳酸聚乙醇酸 ; 纳米粒 ; 透析法中图分类号 :R943 文献标志码 :B 文章编号 : (2016) DOI: /j.cnki.issn Preparation of MePEG-PLGA Hydroxy Camptothecin Nanoparticles by Improved Dialysis Method XU Haoyun 1, XIE Liya 1*, CHANG Di 2, HOU Zhenqing 2, KE Jinzhen 1 (1.First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen , China; 2.Research Center of Biomedical Engineering of Xiamen University, Xiamen , China) ABSTRACT: OBJECTIVE To prepare methoxyl poly(ethylene glycol)-poly(lactic-co-glycolic acid)-hydroxy camptothecin nanoparticles(mepeg-plga-hcpt-nps) by an improved dialysis method, and to characterize the nanoparticles. METHODS Using drug-loading and diameter as indexes, each single factor test was used to optimize the preparation technology. The appearance, diameter, Zeta potential, drug-loading and entrapment efficiency were investigated. RESULTS The optimal preparation conditions for MePEG-PLGA-HCPT-NPs were as follows: initial organic solvents was acetone; temperature was 25 ; initial water content was 1%; ph of external phase was 4.0; initial copolymer concentration was 3 mg ml 1 ; PEG content of copolymer was 15%; lactic acid content of copolymer was 100 %; the ratio of HCPT to MePEG-PLGA was 1 5. Based on these experimental results, it was proposed that MePEG-PLGA-HCPT-NPs exhibited a solid spherical shape, fairly uniform size, well dispersed, and relatively smooth surface with core-shell structure. The average particle diameter was (120.1±2.4)nm, polydispersity was 0.057±0.021, Zeta potential was ( 31.2±0.98)mV, the drug-loading was 7.42% and the entrapment efficiency respectively was 44.5%. CONCLUSION The improved dialysis method is suitable to prepare the MePEG-PLGA-HCPT-NPs, 基金项目 : 福建省医药卫生科技创新项目 (2014-CXB-35) 作者简介 : 许浩云, 女, 副主任药师 Tel: (0592) xhaoyun@126.com 副教授 Tel: (0592) xly885@163.com * 通信作者 : 谢黎崖, 女, 硕士, 主任药师, 746 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min 25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.