前言本标准代替 GB/T 食品卫生微生物学检验罐头食品商业无菌的检验本标准与 GB/T 相比主要变化如下 : 修改了标准的中英文名称 ; 修改了范围 ; 删除了规范性引用文件 ; 修改了术语和定义 ; 修改了设备和材料 ; 修改了培养基和试剂

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剿羊
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1 中华人民共和国国家标准 GB xxxx 食品安全国家标准食品微生物学检验罐头食品商业无菌检验 ( 征求意见稿 ) xxxx-xx-xx 发布中华人民共和国卫生部 xxxx-xx-xx 实施发布

2 前言本标准代替 GB/T 食品卫生微生物学检验罐头食品商业无菌的检验本标准与 GB/T 相比主要变化如下 : 修改了标准的中英文名称 ; 修改了范围 ; 删除了规范性引用文件 ; 修改了术语和定义 ; 修改了设备和材料 ; 修改了培养基和试剂 ; 增加了检验程序图 ; 修改了检验步骤 ; 修改了结果判定 ; 修改了规范性附录 A 和资料性附录 B I

3 食品安全国家标准食品微生物学检验罐头食品商业无菌检验 1 范围本标准规定了罐头食品商业无菌检验的基本要求操作程序和结果判定本标准适用于各种密封容器包装后, 经过适度的热杀菌后达到商业无菌, 在常温下能较长时间保存的罐头食品 2 术语和定义 2.1 罐头食品的商业无菌 commercial sterilization of canned food 罐头食品经过适度的热杀菌以后, 不含有在常温下能在其中繁殖的微生物, 也不含有致病微生物, 这种状态称作商业无菌 2.2 密封 hermatical seal 食品容器经密闭后能阻止微生物进入的状态 2.3 胖罐 swell 由于罐头内微生物活动产生气体或由于其他物理化学原因, 形成正压, 使包装外凸的现象 2.4 泄漏 leakage 罐头密封结构有缺陷, 或由于外力而破坏密封, 或罐壁腐蚀而穿孔的现象 3 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外, 其他设备和材料如下 : 3.1 冰箱 :2 ~5 3.2 恒温培养箱 :36 ±1 3.3 均质器及无菌均质袋均质杯或乳钵 3.4 电位 ph 计, 精确度应在已知缓冲液的 0.05pH 单位之内 3.5 显微镜 :10 ~ 细菌学检查用 bacti-dise 开罐器和罐头打孔器 ( 罐头食品细菌学检查首选的开罐器是由一根在末端装有穿刺装置的金属杆及在杆上装有的由螺栓固定的可以滑动的三角形刀片组成相比其他类型的开罐器, 它的优点是不易损坏卷边结构, 不会影响罐头密封性检查 ) 3.7 电子秤或台式天平 1

4 3.8 超净工作台或百级洁净实验室 4 培养基和试剂 4.1 无菌生理盐水 : 见附录 A 中 A 结晶紫染色液 : 见附录 A 中 A 二甲苯 4.4 含 4% 碘的乙醇溶液 :4% 碘溶于 70% 酒精 5 检验程序罐头食品商业无菌检验程序见图 1 样品检样对照保温, 发现胖罐 2 ~5 立即剔出开罐检查冰箱保藏 36 ±1,14 d 开罐 ph 测定感官检查留样, 至少 30 ml(g) 置灭菌容器,2 ~5 涂片染色镜检接种培养密封性检验报告图 1 罐头食品商业无菌检验程序 2

5 6 操作步骤 6.1 罐头准备去除罐体标签, 在罐体上用防水的油性记号笔做好标记, 并记录容器编号产品性状泄漏情况是否有小孔或锈蚀压痕胖罐及其他异常情况 6.2 称重用电子秤或台天平称重,1 kg 及以下的罐头精确到 1 g,1 kg 以上的罐头精确到 2 g,10 kg 以上的罐头精确到 10 g, 并记录 6.3 保温每个批次取 1 个罐头置 2 ~5 冰箱保存作为对照, 将其余样罐在 36 ±1 下保温 14 d 保温过程中应每天检查, 如有胖罐或泄漏现象, 应立即剔出作开罐检查保温结束时, 再次称重并记录, 比较保温前后罐头重量有无变化如有变轻, 表明罐头发生泄漏将所有罐头置于室温直至开罐检查 6.4 开罐如有胖罐的罐头, 则将罐头先置于 2 ~5 冰箱内冷藏数小时后开罐用冷水和洗涤剂清洗待检样罐的光滑面自来水冲洗后用无菌毛巾擦干以含 4% 碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面 15 min 后用无菌毛巾擦干, 在密闭罩内点燃至表面残余的碘乙醇溶液全部燃烧完胖罐罐头不能灼烧, 以含 4% 碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面 30 min 后用无菌毛巾擦干在超净工作台或百级洁净实验室中开罐带汤汁的罐头开罐前应适当振摇使用无菌开罐器在消毒后的罐头光滑面开启一个适当大小的口, 开罐时不能伤及卷边结构, 每一个罐头单独使用一个开罐器, 不得交叉使用如样品为软包装, 可以使用灭菌剪刀开启, 不得损坏接口处立即在开口上方嗅闻气味, 并记录注 : 严重胖罐罐头可能会发生爆炸, 喷出有毒物可以采取一些预防措施来防止这类危险的发生, 例如在胖罐罐头上盖一条灭菌毛巾或者用一个无菌漏斗倒扣在罐头上 6.5 留样开罐后, 用灭菌吸管或其他适当工具以无菌操作取出内容物至少 30 ml(g) 至灭菌容器内, 保存 2 ~5 冰箱中, 在需要时可用于进一步试验, 待该批罐头得出检验结论后可弃去开启后的罐头可进行适当的保存, 以备日后容器检查时使用 6.6 ph 测定样品处理液态制品混匀备用, 固相和液相分开的制品则取混匀的液相部分备用对于稠厚或半稠厚制品以及难以从中分出汁液的制品 ( 如 : 糖浆果酱果冻等 ), 取一部分样品在均质器或研钵中研磨, 如果研磨后的样品仍太稠厚, 加入等量的无菌, 混匀备用测定将电极插入被测试样液中, 并将 ph 计的温度校正器调节到被测液的温度如果仪器没有温度校正系统, 被测试样液的温度应调到 20 ±2 的范围之内, 采用适合于所用 ph 计的步骤进行测定当读数稳定后, 从仪器的标度上直接读出 ph, 精确到 0.05 ph 单位同一个制备试样至少进行两次测定两次测定结果之差应不超过 0.1 ph 单位取两次测定的算术平均值作为结果, 报告精确到 0.05 ph 单位分析结果 3

6 与同批中冷藏保存对照罐相比, 比较是否有显著差异 ph 值相差 0.5 及以上判为显著差异 6.7 感官检查在光线充足空气清洁无异味的检验室中, 将罐头内容物倾入白色搪瓷盘内, 对产品的组织形态色泽和气味等进行观察和嗅闻, 用餐具或戴薄指套按压食品检查产品性状, 鉴别食品有无腐败变质的迹象, 同时观察罐体内部和外部的情况, 并记录 6.8 涂片染色镜检涂片取罐头样品进行涂片带汤汁的罐头样品可用接种环挑取汤汁涂于载玻片上, 固态食品可以直接涂片或用少量灭菌生理盐水稀释后涂片, 待干后用火焰固定油脂性食品涂片自然干燥并火焰固定后, 用二甲苯流洗, 自然干燥染色镜检对上述涂片用结晶紫染色液进行单染色, 干燥后镜检, 至少观察 5 个视野, 记录菌体的形态特征以及每个视野的菌数与同批冷藏保存对照罐相比, 判断是否有明显的微生物增殖现象菌数有百倍或百倍以上的增长则判为明显增殖 7 结果判定样品经保温试验未出现泄漏 ; 保温后开罐, 经感官检验 ph 值测定涂片镜检, 确证无微生物增殖现象, 则可报告该样品为商业无菌样品经保温试验出现泄漏 ; 保温后开罐, 经感官检验 ph 值测定涂片镜检, 确证有微生物增殖现象, 则可报告该样品为非商业无菌 4

7 附录 A 培养基和试剂 A.1 无菌生理盐水 A.1.1 成分氯化钠 8.5 g ml A.1.2 制法称取 8.5 氯化钠溶于 1000 ml 中,121 高压灭菌 15 min A.2 结晶紫染色液 A.2.1 成分结晶紫 1.0 g 95% 乙醇 20.0 ml 1% 草酸铵水溶液 80.0 ml A.2.2 制法将结晶紫完全溶解于乙醇中, 然后与草酸铵溶液混合 A.2.3 染色法将涂片在酒精灯火焰上固定, 滴加结晶紫染液, 染 1 min, 水洗 5

8 附录 B 异常原因分析若需核查罐头出现胖罐 ph 或感官异常微生物增殖等原因, 可取罐头内容物的留样进行接种培养并报告若需判定罐头是否出现泄漏, 可取开启后的罐头进行密封性检查并报告 B.1 术语和定义 B.1.1 低酸性罐头食品 low acid canned food 除酒精饮料以外, 凡杀菌后平衡 ph 值大于 4.6, 水分活度大于 0.85 的罐头食品, 原来是低酸性的水果蔬菜或蔬菜制品, 为加热杀菌的需要而加酸降低 ph 值的, 属于酸化的低酸性罐头食品 B.1.2 酸性罐头食品 acid canned food 指杀菌后平衡 ph 值等于或小于 4.6 的罐头食品 ph 值小于 4.7 的番茄梨和菠萝以及由其制成的汁, 以及 ph 值小于 4.9 的无花果都算作酸性食品 B.2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外, 其他设备和材料如下 : B.2.1 恒温培养箱 :30 ±1 ;55 ±1 B.2.2 恒温水浴箱 :55 ±1 B.3 培养基和试剂 B.3.1 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 B 成分蛋白胨 10.0 g 牛肉浸膏 3.0 g 葡萄糖 10.0 g 氯化钠溴甲酚紫 0.04 g( 或 1.6% 酒精溶液 2.0 ml ml B 制法将上述各成分 ( 溴甲酚紫除外 ) 加热搅拌溶解, 校正 ph 至 7.0±0.2, 加入溴甲酚紫, 分装于带有小倒管的中号试管中, 每管 10 ml,121 高压灭菌 10 min B.3.2 庖肉培养基 B 成分牛肉浸液 ml 蛋白胨 30.0 g 酵母膏葡萄糖 3.0 g 磷酸二氢钠可溶性淀粉 2.0 g 碎肉渣适量 B 制法 B 称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉 500 g, 加 1000 ml 和 1 mol/l 氢氧化钠溶 25.0 ml, 搅拌煮沸 15 min, 充分冷却, 除去表层脂肪, 澄清, 过滤, 加水补足至 1000 ml 加入除碎肉渣外的各种成分, 校正 ph 至 7.8±0.2 6

9 B 碎肉渣经水洗后晾至半干, 分装 15 mm 150 mm 试管约 2 cm~3 cm 高, 每管加入还原铁粉 0.1 g~0.2 g 或铁屑少许将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约 1 cm 上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡 0.3 cm~0.4 cm 121 灭菌 15 min B.3.3 营养琼脂 B 成分蛋白胨 10.0 g 牛肉膏 3.0 g 氯化钠琼脂 1~20.0 g ml B 制法将除琼脂以外的各成分溶解于内, 加入 15% 氢氧化钠溶液约 2 ml, 校正 ph 至 7.2~7.4 加入琼脂, 加热煮沸, 使琼脂溶化分装烧瓶或 13 mm 130 mm 试管,121 高压灭菌 15 min B.3.4 酸性肉汤 B 成分多价蛋白胨酵母浸膏葡萄糖磷酸二氢钾 ml B 制法将以上各成分加热搅拌溶解, 校正 ph 至 5.0±0.2,121 高压灭菌 15 min B.3.5 麦芽浸膏汤 B 成分麦芽浸膏 ml B 制法将麦芽浸膏在中充分溶解, 滤纸过滤, 校正 ph 至 4.7±0.2, 分装,121 灭菌 15 min B.3.6 沙氏葡萄糖琼脂 B 成分蛋白胨 10.0 g 琼脂 1 葡萄糖 40.0 g ml B 制法将各成分在中溶解, 加热煮沸, 分装在烧瓶中, 校正 ph 至 5.6±0.2,121 高压灭菌 15 min B.3.7 小牛肝琼脂 B 成分牛肝 ( 制牛肝浸液用 ) 50.0 g 小牛肉 ( 制小牛肉浸液用 ) g 月示蛋白胨 20.0 g 新蛋白胨 1.3 g 胰蛋白胨 1.3 g 7

10 葡萄糖可溶性淀粉 10.0 g 等离子酪蛋白 2.0 g 氯化钠硝酸钠 2.0 g 明胶 20.0 g 琼脂 ml B 制法在中将各成分混合于 121 灭菌 15 min 最终 ph 应为 7.3±0.2 B.3.8 革兰氏染色液 B 结晶紫染色液 B 成分结晶紫 1.0 g 95% 乙醇 20.0 ml 1% 草酸铵水溶液 80.0 ml B 制法将结晶紫完全溶解于乙醇中, 然后与草酸铵溶液混合 B 革兰氏碘液 B 成分碘 1.0 g 碘化钾 2.0 g 300 ml B 制法将碘与碘化钾先行混合, 加入少许充分振摇, 待完全溶解后, 再加至 300 ml B 沙黄复染液 B 成分沙黄 0.25 g 95% 乙醇 10.0 ml 90.0 ml B 制法将沙黄溶解于乙醇中, 然后用稀释 B 染色法 a) 涂片在火焰上固定, 滴加结晶紫染液, 染 1 min, 水洗 b) 滴加革兰氏碘液, 作用 1 min, 水洗 c) 滴加 95% 乙醇脱色约 15 s~30 s, 直至染色液被洗掉, 不要过分脱色, 水洗 d) 滴加复染液, 复染 1 min, 水洗待干镜检 B.4 低酸性食品的接种培养 (ph 值大于 4.6) B.4.1 对低酸性食品, 每罐接种 4 管预先加热到 100 并迅速冷却到室温的庖肉培养基内 ; 同时接种 4 管溴甲酚紫葡萄糖肉汤每管接种 1 ml(g)~2 ml(g) 样品 ( 液体样品为 1 ml~2 ml, 固体为 1 g~2 g, 两者皆有时, 应各取约一半 ) 培养条件见表 B.1 表 B.1 低酸性食品 (ph 值 >4.6) 接种的庖肉培养基和溴甲酚紫葡萄糖肉汤 8

11 培养基管数培养温度 ( ) 培养时间 (h) 庖肉培养基 2 36±1 96~120 庖肉培养基 2 55±1 24~72 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 2 55±1 24~48 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 2 36±1 96~120 B.4.2 经过表 B.1 规定的培养条件培养后, 记录每管有无微生物生长如果没有微生物生长, 则记录后弃去 B.4.3 如果有微生物生长, 以接种环沾取液体涂片, 革兰氏染色镜检如在溴甲酚紫葡萄糖肉汤管中观察到不同的微生物形态或单一的球菌真菌形态, 则记录并弃去在庖肉培养基中未发现杆菌, 培养物内含有球菌酵母霉菌或其混合物, 则记录并弃去将溴甲酚紫葡萄糖肉汤和庖肉培养基中出现生长的其他各阳性管分别划线接种 2 块小牛肝琼脂 ( 不带蛋黄 ) 或营养琼脂平板, 一块平板作需氧培养, 另一平板作厌氧培养 ( 如图 B.1 所示 ) B.4.4 挑取需氧培养中单个菌落, 接种于营养琼脂小斜面, 用于后续的革兰氏染色镜检 ; 挑取厌氧培养中的单个菌落涂片, 革兰氏染色镜检挑取需氧和厌氧培养中的单个菌落, 接种于庖肉培养基, 进行纯培养 B.4.5 挑取营养琼脂小斜面和厌氧培养的庖肉培养基中的培养物涂片镜检 B.4.6 挑取纯培养中的需氧培养物接种小牛肝琼脂 ( 不带蛋黄 ) 或营养琼脂平板, 进行厌氧培养 ; 挑取纯培养中的厌氧培养物接种小牛肝琼脂 ( 不带蛋黄 ) 或营养琼脂平板, 进行需氧培养以鉴别是否为兼性厌氧菌 B.4.7 如果需检测梭状芽胞杆菌的肉毒毒素, 挑取典型菌落接种庖肉培养基作纯培养 36 培养 5 d, 按照 GB/T 进行肉毒毒素检验 B.5 酸性食品的接种培养 (ph 值小于或等于 4.6) B.5.1 每罐接种 4 管酸性肉汤和 2 管麦芽浸膏汤每管接种 1 ml(g)~2 ml(g) 样品 ( 液体样品为 1 ml~2 ml, 固体为 1 g~2 g, 两者皆有时, 应各取约一半 ) 培养条件见表 B.2 表 B.2 酸性食品 (ph 值 4.6) 接种的酸性肉汤和麦芽浸膏汤培养基管数培养温度 ( ) 培养时间 (h) 酸性肉汤 2 55±1 48 酸性肉汤 2 30±1 96 麦芽浸膏汤 2 30±1 96 B.5.2 经过表 B.2 中规定的培养条件培养后, 记录每管有无微生物生长如果没有微生物生长, 则记录后弃去 B.5.3 对有微生物生长的培养管, 取培养后的内容物的直接涂片, 革兰氏染色镜检, 记录观察到的微生物 B.5.4 如果在 30 培养条件下在酸性肉汤或麦芽浸膏汤中有微生物生长, 将各阳性管分别接种 2 块营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板, 一块作需氧培养, 另一块作厌氧培养 B.5.5 如果在 55 培养条件下, 酸性肉汤中有微生物生长, 将各阳性管分别接种 2 块营养琼脂平板, 一块作需氧培养, 另一块作厌氧培养 ( 如图 B.2 所示 ) 对有微生物生长的平板进行染色涂片镜检, 并报告镜检所见微生物型别 B.5.6 挑取 30 需氧培养的营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板中的单个菌落, 接种营养琼脂小斜面, 用 9

12 于后续的革兰氏染色镜检同时接种酸性肉汤或麦芽浸膏汤进行纯培养挑取 30 厌氧培养的营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板中的单个菌落, 接种酸性肉汤或麦芽浸膏汤进行纯培养挑取 55 需氧培养的营养琼脂平板中的单个菌落, 接种营养琼脂小斜面, 用于后续的革兰氏染色镜检同时接种酸性肉汤进行纯培养挑取 55 厌氧培养的营养琼脂平板中的单个菌落, 接种酸性肉汤进行纯培养 B.5.7 挑取营养琼脂小斜面中的培养物涂片镜检挑取 30 厌氧培养的酸性肉汤或麦芽浸膏汤培养物和 55 厌氧培养的酸性肉汤培养物涂片镜检 B.5.8 将 30 需氧培养的纯培养物接种于营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板中进行厌氧培养, 将 30 厌氧培养的纯培养物接种于营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板中进行需氧培养, 将 55 需氧培养的纯培养物接种于营养琼脂中进行厌氧培养, 将 55 厌氧培养的纯培养物接种于营养琼脂中进行需氧培养, 以鉴别是否为兼性厌氧菌 10

13 样品庖肉培养基和溴甲酚紫葡萄糖肉汤 36 ±1,96 h~120 h 55 ±1,24 h~72 h 或 24 h~48 h 不生长生长不生长生长镜检镜检小牛肝琼脂 ( 不含小牛肝琼脂 ( 不含小牛肝琼脂 ( 不含小牛肝琼脂 ( 不含蛋黄 ) 或营养琼脂蛋黄 ) 或营养琼脂蛋黄 ) 或营养琼脂蛋黄 ) 或营养琼脂需氧,36 ±1 厌氧,36 ±1 需氧,55 ±1 厌氧,55 ±1 庖肉培养基庖肉培养基营养琼脂小斜面庖肉培养基营养琼脂小斜面庖肉培养基镜检镜检镜检小牛肝琼脂 ( 不含小牛肝琼脂 ( 不含镜检小牛肝琼脂 ( 不含小牛肝琼脂 ( 不含蛋黄 ) 或营养琼脂蛋黄 ) 或营养琼脂蛋黄 ) 或营养琼脂蛋黄 ) 或营养琼脂厌氧 36 ±1 需氧 36 ±1 厌氧 55 ±1 需氧 55 ±1 图 B.1 低酸性食品接种培养程序 11

14 样品酸性肉汤麦芽浸膏汤 30 不生长生长不生长生长不生长生长营养琼脂或沙氏营养琼脂营养琼脂或沙葡萄糖琼脂氏葡萄糖琼脂需氧 55 需氧 30 厌氧 30 厌氧 55 需氧 30 厌氧 30 营养琼脂酸性肉汤或酸性肉汤或营养琼脂酸性肉汤酸性肉汤小斜面麦芽浸膏汤麦芽浸膏汤小斜面营养琼脂酸性肉汤或酸性肉汤或镜检小斜面麦芽浸膏汤麦芽浸膏汤镜检镜检营养琼脂或沙营养琼脂或沙镜检营养琼脂营养琼脂营养琼脂或沙营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂氏葡萄糖琼脂厌氧 55 需氧 55 镜检氏葡萄糖琼脂氏葡萄糖琼脂厌氧 30 需氧 30 厌氧 30 需氧 30 图 B.2 酸性食品接种培养程序 12

15 B.5.9 结果分析 B 如果在胖罐的罐头里没有发现微生物的生长, 胖罐可能是由于内容物和包装发生反应产生氢气造成的产生氢气的量随储存的时间长短和存储条件而变化罐头填装过满也可能导致轻微的胖罐, 可以通过称重来确定是否由于填装过满所致在直接涂片中看到有大量细菌的混合菌相, 但是经培养后不生长, 表明系装罐前发生的腐败由于装罐前细菌生长的结果, 导致产品的 ph 气味和组织形态呈现异常 B 罐头密封性良好时, 在 36 培养条件下若只有芽胞杆菌生长, 且它们的耐热性不高于肉毒梭状芽胞杆菌, 则表明生产过程中加热不充分 B 培养出现杆菌和球菌真菌的混合菌落, 表明罐头发生泄漏也有可能是杀菌不完全所致, 但在这种情况下同批产品的胖罐率将很高 B 在 36 或 55 溴甲酚紫葡萄糖肉汤培养观察产酸产气情况, 如有产酸, 表明是有嗜中温的微生物, 如嗜温耐酸芽胞杆菌, 或者嗜热微生物, 如嗜热脂肪芽胞杆菌生长在 55 的庖肉培养基上有细菌生长并产气, 发出腐烂气味, 表明罐头腐败是由嗜热厌氧梭状芽胞杆菌所致在 36 庖肉培养基上生长并产生带腐烂气味的气体, 镜检可见芽胞, 表明腐败可能是由肉毒梭状芽胞杆菌生孢梭状芽胞杆菌或产气荚膜梭菌引起的有需要可以进一步进行肉毒毒素检测 B 酸性食品的变质通常是由于无芽胞的乳杆菌和酵母所致一般 ph 低于 4.6 的情况下不会发生由芽胞杆菌引起的变质, 但有一种特例, 变质的番茄酱或番茄汁罐头表现为平罐, 但有腐臭味, 伴或不伴有 ph 降低, 一般是由于需氧的芽胞杆菌所致 B 许多罐头食品中含有嗜热菌, 在正常的储存条件下不生长, 但当产品暴露于较高的温度 (50 ~55 ) 下时, 嗜热菌就会生长并引起腐败嗜热耐酸芽胞杆菌和嗜热脂肪芽胞杆菌分别在酸性和低酸性的食品中引起平罐腐败在 55 培养不会引起罐头外观的改变, 但会产生臭味, 伴有或不伴有 ph 值的降低番茄梨无花果和菠萝等类罐头的腐败变质有时是由于巴斯德梭菌 ( 一种能产酸产气的厌氧菌 ) 引起嗜热解糖梭状芽胞杆菌就是一种嗜热厌氧菌, 能够引起胖罐和产品的腐烂气味嗜热厌氧菌也能产气, 由于在细菌开始生长之后迅速增殖, 可能混淆胖罐是由于氢气引起的还是嗜热厌氧菌产气引起的化学物分解将产生二氧化碳, 尤其是集中发生在含糖和一些酸的食品如番茄酱糖蜜甜馅和高糖的水果的罐头中这种分解速度随着温度上升而加快 B 灭菌的真空包装和正常的产品直接涂片, 分离出任何微生物应该怀疑是实验室污染为了证实是否实验室污染, 在无菌的条件下接种该分离出的活的的微生物到另一个正常的对照罐头, 密封, 在 36 培养 14 d 如果发生胖罐或产品变质, 这些微生物就可能不是来自于原始样品如果罐头仍然是平坦的, 无菌操作打开罐头并按上述步骤做再次培养 ; 如果同一种微生物被再次发现并且产品是正常的, 认为该产品商业无菌, 因为这种微生物在正常的保存和运送过程中不生长 B 如果食品本身发生混浊, 肉汤培养可能得不出确定性结论, 这种情况需进一步培养以确定是否有微生物生长 B.6 罐头密封性检验方法将已洗净的空罐, 经 36 烘干, 可选择进行减压或加压试漏 B.6.1 减压试漏将烘干的空罐内小心注入清水至八九成满, 将一带橡胶圈的有机玻璃板妥当安放罐头开启端的卷边上, 使能保持密封启动真空泵, 关闭放气阀, 用手按住盖板, 控制抽气, 使真空表从 0 Pa 升到 Pa(510 mmhg) 的时间在 1 min 以上, 并保持此真空度 1 min 以上倾斜并仔细观察罐体, 13

16 尤其是卷边及焊缝处, 有无气泡产生凡同一部位连续产生气泡, 应判断为泄漏, 记录漏气的时间和真空度, 并在漏气部位做上记号 B.6.2 加压试漏用橡皮塞将空罐的开孔塞紧, 同时将空罐浸没在盛水玻璃缸中, 开动空气压缩机, 慢慢开启阀门, 使罐内压力逐渐加大, 直至压力升至 Pa 并保持 2 min 仔细观察罐体, 尤其是卷边及焊缝处, 有无气泡产生凡同一部位连续产生气泡, 应判断为泄漏, 记录漏气开始的时间和压力, 并在漏气部位做上记号 14

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin( 氨卡青霉素 )(100 mg/ml) 100 mg/ml Ampicillin 50 ml 配制方法 1. 称量 Ampicillin 置于 50 ml 离心管中 ; 2. 加入 40 ml 灭菌水, 充分混合溶解后, 定容至 50 ml; 3. 用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌 ; 4. 小份分装 (1 ml/ 份 ) 后,-20 保存 IPTG(