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溥泉景
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1 第 27 卷第 20 期中国现代医学杂志 Vol. 27 No 年 9 月 China Journal of Modern Medicine Sept DOI: /j.issn 文章编号 : (2017) 东莞地区临床分离耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌的耐药特点及其机制研究郭主声 1, 林偲思 1, 朱学海 1, 张丽 1, 张丽华 1, 胡继华 2, 周谋清 2, 阎红霞 3, 郭少卿 4 ( 中山大学附属东莞东华医院 1. 检验科,2. 感染科,3. 呼吸科,4. 急诊科, 广东东莞 ) 摘要 : 目的回顾分析东莞东华医院 2011~2013 年临床分离的鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药特点, 为临床合理用药和防止医源性感染提供依据方法选取 2011~2013 年东华医院临床分离的非重复鲍曼不动杆菌菌株 30 株, 采用琼脂稀释法检测该菌对 11 种抗菌药物的最低抑菌浓度 (MIC), 采用乙二胺四乙酸纸片协同实验检测待检菌株的金属酶表型, 采用三维实验检测待检菌株的 AmpC 酶表型和改良 Hodge 实验筛查碳青霉烯酶, 聚合酶链反应进行编码基因的检测, 应用脉冲场凝胶电泳进行同源性分析结果在监测的 14 种抗菌药物 MIC 中, 耐药率 >60% 的达 13 种, 其中只有头孢哌酮舒巴坦耐药率 <50%, 共筛选出耐碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌 30 株, 其中金属酶表型和基因检测均为阴性,AmpC 酶阳性者 21 株, 改良 Hodge 实验阳性 24 株, 其中 26 株 -23 基因扩增阳性, 未检出 -24 基因, 可见 -23 基因为主要的流行克隆株结论东莞地区临床分离的鲍曼不动杆菌多重耐药十分严重, 产 OXA-23 碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶类药物耐药的重要机制, 且碳青霉烯酶耐药菌株存在克隆流行关键词 : 鲍曼不动杆菌 ; 耐碳青霉烯酶 ; 药敏实验 ; 耐药基因中图分类号 :R446 文献标识码 :A Study on genotyping of beta-lactamase in Carbapenem-resistant separated in Dongguan area Zhu-sheng Guo 1, Si-si Lin 1,Xue-hai Zhu 1,Li Zhang 1,Li-hua Zhang 1, Ji-hua Hu 2, Mou-qing Zhou 2,Hong-xia Yan 3, Shao-qing Guo 4 (1. Clinical Laboratory; 2. Department of Infectious Diseases; 3. Department of Respiratory Medicine; 4. Emergency Department, Tungwah Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University, Dongguan, Guangdong , China) Abstract: Objective To analyze clinical distribution and drug resistance of isolated in Tungwah Hospital, to learn 茁 -lactamase gene of resistant to Carbapenem so as to provide the basis for clinical use of drugs and prevention of nosocomial infections. Methods Thirty strains of non-repetitive resistant to Carbapenem which were isolated in Tungwah Hospital from January 2011 to December 2013 were collected. Agar dilution method was used to detect the minimal inhibitory concentrations (MIC) of 11 kinds of antimicrobial agents. Pidemiological analysis was conducted. Carbapenemase was screened by modified Hodge test. The metalloenzyme phenotype and AmpC enzyme phenotype of the tested strains were detected by EDTA-disk synergy test and three-dimensional test respectively. PCR amplification of, O and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) homology analysis were used to analyze the moleculer type and genetic relationship between the resistant strains. Results In the 14 antimicrobial agents with monitored MIC, the resistance rate of 13 species was over 60%, only that of SCF was lower than 50%. Totally 30 strains of Carbapenem-resistant were screened out, of which the metalloenzyme phenotype and gene were both negative, 21 strains had AmpC 收稿日期 :

2 第 20 期郭主声, 等 : 东莞地区临床分离耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌的耐药特点及其机制研究 enzyme and 24 strains showed positive modified Hodge test; among which gene was amplified in 26 strains while gene was not detected. Conclusions The resistance of isolated in clinic of Dongguan area is very severe. gene is the main carbapenemase gene, and Carbapenemresistant strains are prevalent in this area. Keywords: ; resistance to carbapenemase; drug sensitive test; drug resistance gene 鲍曼不动杆菌实质上就是临床上经常出现的一种革兰阴性杆菌, 尤其是在重症监护室 (intensive care unit,icu) 中, 其分布范围十分广泛, 主要存在于机体的泌尿生殖道呼吸道及皮肤, 在土壤水中也有分布, 传播途径主要为接触, 是导致院内感染状况发生的主要病原菌鲍曼不动杆菌主要由感染专科的脑脊液呼吸道分泌物脓液尿液及血液等一系列标本中分离出现, 极易诱发脑膜炎败血症尿路感染及获得性肺炎等感染状况现阶段因为临床上对于抗菌药物的使用不合理不规范, 导致鲍曼不动杆菌对 β- 内酰胺类氨基糖苷类及喹诺酮类等一系列抗菌药物产生耐药性越来越强, 造成多重耐药的鲍曼不动杆菌的数量越来越多, 尤其是碳青霉烯类药物的耐药性, 这在很大程度上增大临床治疗难度 [1-4] 本文主要通过对 30 株多重耐药的鲍曼不动杆菌, 特别是耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌予以检测, 为临床合理用药提供有价值的参考依据 1 材料与方法 1.1 实验菌株来源选取 2011 年 1 月年 12 月本院临床分离的 30 株耐耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌, 其中 20 株痰标本,3 株伤口分泌物,3 株引流液,2 株咽拭子,2 株尿标本, 均为不重复标本 1.2 试剂与仪器选取 M-H 琼脂平板和乙二胺四乙酸 (ethylene diamine tetraacetic acid,edta) 纸片 ( 广州迪景微生物试剂公司 ), 蛋白酶 K( 德国 Merck 公司 ),Sea Kem Gold Agarose( 美国 Cambrex 公司 ), Ⅰ 酶 ( 美国 Promega 公司 ), 比浊仪 ( 美国 Dade Behring 公司 ), GEL Doc EQ 凝胶成像分析系统 Chef Mapper 脉冲场凝胶电泳仪购自美国 Bio-Rad 公司,VITEK-2- COMPACT 系统与配套 GN 鉴定卡 ( 广州华鑫行试剂有限公司 ) 低温高速离心机 ( 美国 Sigma 公司,2-16PK);d3H 2 O 纯水仪器 ( 美国 Bio-Rad 公司, 仪器型号 :CaSCada Bio.water.pallcorporation), 聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,pcr) 仪为 Biometra 35 PCR 仪 ( 美国 Bio-Rad 公司 ), 电泳仪为 BG Power600 ( 北京百晶生物技术有限公司 ),PCR 反应体系引物及分子标准 ( 广州东盛生物科技有限公司 ), 置入 -70 冰箱冷冻保存 ( 美国赛默飞公司 ),-20 冰箱冷冻保存 ( 青岛海尔公司 ) 1.3 鉴定菌株根据第 3 版全国临床检验操作规程 [5] 对细菌予以分离培养及鉴定等相关操作, 先分离出要鉴定的纯菌后, 根据菌落生长形态革兰染色镜下形态及相应的生化实验鉴定到种 [6] 1.4 药敏实验采用采用琼脂稀释法, 按美国临床和实验室标准协会推荐的琼脂稀释法进行, 用手工接种法将鲍曼不动杆菌菌液接种于预先制备好一系列浓度梯度的含药琼脂表面, 细菌接种量为菌落形成单位 (colony forming units,cfu)/ 点,37 培养 18h, 无菌落形成的最低抗菌药物浓度为最小抑菌浓度 (minimum inhibitory concentration,mic), 药敏实验所使用抗菌药物为本院临床的常用抗菌药物 1.5 质控菌株实验质控标准菌株主要包括 : 金黄色葡萄球菌 (ATCC25923) 铜绿假单胞菌 (ATCC27853) 及大肠埃希菌 (ATCC25922), 所有质控菌株来源于国家卫计委临床检验中心, 产超广谱 β- 内酰胺酶 (extended spectrum beta-lactamases,esbls) 肺炎克雷伯 ATCC 和产 KPC 酶的肺炎克雷伯菌为北京协和医院检验科谢秀丽老师赠送 1.6 AmpC 酶检测根据郑力等 [7] 在相关研究报道中提出的三维实验方法,1 制备酶粗提物 : 选取血平板上已经培养 18~24 h 的 3~5 个菌株, 在营养肉汤中进行接种操作, 温度控制在 35 左右, 培养时间 6h, 于规定时间内混合均匀,2600r/min 离心 30min, 弃上清液, 将其沉淀于 35 和 80, 反复冻融 8 次左右, 冻融时间 2 h/ 次, 冻融完成后加入 0.01 mol 磷酸盐缓冲液, r/min 离心 20min, 酶提取物即上清液 ; 2 三维实验 : 欣二 (Mueller-Hinton,MH) 琼脂平板上

3 中国现代医学杂志第 27 卷涂抹大肠埃希菌, 其浓度为 0.5 麦氏单位, 然后在平板中心黏贴头孢西丁药敏纸片, 在距离头孢西丁药敏纸片边缘 5mm 位置, 使用无菌刀片切 1 个小槽, 将 50 μl 酶提取物置于小槽中, 进行培养, 温度控制在 35 左右, 于第 2 天清晨观察培养结果若是抑菌圈处于不完整状态, 抑菌圈与头孢西丁纸片端交接处发生趋向于平皿中心扩大状况, 即判定为 AmpC 酶阳性, 若是抑菌圈处于完整状态, 即可判定为 AmpC 酶阴性 1.7 EDTA 纸片实验根据纸片扩散法, 按照药物敏感性实验流程, 对细菌进行配置, 将其浓度制备为 0.5 麦氏单位, 均匀涂布于 MH 琼脂平板上, 张贴 2 张亚胺培南药敏纸片, 且 2 张亚胺培南药敏纸片中心距离 25 mm 同时将 5 μl 500 mmol/l EDTA 溶液滴入 1 张亚胺培南药敏纸片上, 培养温度控制在 35 左右, 培养 20 h 后进行观察金属酶阳性的判定指标为单纯亚胺培南纸片与亚胺培南 +EDTA 纸片的抑菌圈直径差值 7mm 1.8 检测产灭活酶基因制备模版从 MH 平板中提取细菌, 数量控制在 3 4 个, 于 300 μl 0.85% 生理盐水制备细菌悬液, 混合均匀 r/min 离心 5min, 弃上清液, 加入无菌双蒸水 300 μl, 混合均匀, 置于 100 左右水中,15 min 后 r/min 离心 2min, 离心处理后 DNA 模板即为上清液扩增 PCR 总反应体系为 50 μl, 其中 0.36u/L DH 2 O,0.25μl Taq 酶,1 μl 正向引物,1 μl 反向引物, 3 μl DNA 模板,4 μl dntps mixture,5 μl 10 缓冲液反应条件 :94 预变性 5min,94 变性 30 s, 55 退火 30s,72 延伸 1min, 共 30 个循环,72 继续延伸 7min 1.2% 琼脂糖凝胶电泳处理 PCR 产物, 观察特异性扩增条带采用 PCR 检测 OXA-23 型酶的编码基因见表脉冲场凝胶电泳同源性胰蛋白胨大豆肉汤培养基接种单个菌落, 维持温表 1 靶基因 PCR 扩增引物序列基因引物序列产物长度 /bp -23 正向 :5'-GATGTGTCATAGTATTCGTTA-3' 1067 反向 :5'-TCACAACAACTAAAAGCACTG-3' -24 正向 :5'-TTCCCCTAACATGAATTTGT-3' 1024 反向 :5'-GTACTAATCAAAGTTGTGAA-3' 度在 35 左右, 振荡孵育过夜 1ml 肉汤加入 1.5ml 离心管 (eppendorf tubes,ep), 离心收集细菌沉淀加入 500 μl SE buffer, 充分混合均匀, r/min 离心 1min, 弃上清液加入 300 μl SE buffer, 重新悬浮沉淀制备 2% 低熔点琼脂糖, 将 0.2g 低熔点琼脂糖加入 10 ml SE buffer, 用微波炉溶化处理, 保持温度在 60 ~70, 避免出现凝固混充分合 2% 低熔点琼脂糖与菌悬液, 置于模具中制作成胶块,4 固化 30 min 左右裂解液的制备 :500 μg/ml 蛋白酶 K ph mol/l EDTA 及 1% N- 十二烷基肌氨酸钠破裂过程中从 -20 条件下取出 20 mg/ml 蛋白酶 K 母液, 配置所需浓度将 1ml 裂解液置于 EP 管中并推入固化胶块,56 孵育过夜 ; 次日更换裂解液, 保持裂解液的新鲜,56 再次孵育过夜将裂解液吸出, 防止胶块碎裂加入 1ml TE buffer, 上下颠倒,4 条件下放置 30min, 重复 3 次后洗涤 4 TE 缓冲液中存储胶块, 存储时间可 6 个月, 每间隔 1 个月需要更换 TE 缓冲液酶切 : 将胶块切成长条, 长度在 1mm 左右, 每一个标本切 2 条置入 100 μl1 酶切缓冲液,4 条件下平衡 1h 左右将酶切缓冲液吸出, 酶切处理,100 μl 酶切体系, 其中包含 30 u ApaⅠ,10 μl 10 酶切缓冲液, 离子双蒸水补足体积,35 消化过夜酶切液吸出后, 加入 200μl TE buffer, 混合均匀,4 条件下放置 30 min 左右, 重复 3 次后洗涤加入 100μl 0.5 TBE 缓冲液,4 条件下放置 30 min 80 ml 0.5 TBE 缓冲液中置入 0.8 g 电泳用琼脂糖, 混合均匀, 制备 1% 脉冲场凝胶电泳配置 5 TBE 母液 :20 ml 0.5 mol/l EDTA,27.5 g 硼,54 g Tris 碱,pH 8.0, 定容至 1L 取出经酶切处理后的胶条, 与加样孔的前壁上样紧靠,1% 电泳琼脂糖液封闭每个加样孔 6v/cm 14 线性变化时间控制在 5~8 s, 电泳 20h 后溴化乙锭染色, 紫外凝胶成像仪进行拍摄结果评价 : 将图谱完全一致的作为同一型, 相差 1 个条带的作为同一型的不同亚型, 相差 2 或 3 个条带的判定为亲缘关系十分密切, 相差 4~6 个条带的判定为可以有一定联系, 相差 7 个条带的判定为无任何亲缘关系, 同时随机选取字母分型, 按照 A B C D 的顺序 2 结果 2.1 鲍曼不动杆菌对常用抗生素的药敏结果本院分离的 21 株产 AmpC 酶 24 株产碳青霉烯酶 24 株产 AmpC 酶和碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌 36

4 第 20 期郭主声, 等 : 东莞地区临床分离耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌的耐药特点及其机制研究对 14 种常用抗生素的药敏结果见表产酶表型和基因表型检测结果所有菌株 EDTA 为阴性,Hodge 实验阳性菌株为 24 株, 三维实验阳性菌株为 21 株,26 株菌株的 OXA-23 阳性, 所有菌株 OXA-24 为阴性见表 3 和图 PFGE 结果 1~ ~13 15~17 19~21 为同一克隆株, 与上述菌株仅差 1 个条带, 为同一克隆株的不同亚型见图 3 表 2 鲍曼不动杆菌对 14 种常用抗生素的药敏结果 % 抗生素 AmpC 酶 ( =21) 产碳青霉烯酶 ( =24) 产 AmpC 酶和碳青霉烯酶 ( =24) R S R S R S 哌拉西林头孢哌酮 / 舒巴坦哌拉西林 / 他唑巴坦头孢他啶头孢吡肟亚胺培南美洛培南阿米卡星庆大霉素妥布霉素环丙沙星左旋氧氟沙星复方新诺明米诺环素注 :R: 耐药 (resistance);s: 敏感 (susceptible) 表 3 30 株鲍曼不动杆菌产酶表型和基因表型检测结果序号 EDTA Hodge 三维实验 OXA-23 OXA _ 序号 EDTA Hodge 三维实验 OXA-23 OXA 注 :- 代表检测阴性,+ 代表检测阳性 37

中国现代医学杂志第 27 卷 Hodge 实验阳性图 1 Hodge 实验和改良三维实验结果改良三维实验阳性 1000 bp 750 bp 500 bp 250 bp 150 bp M P N 1 2 3 4 5 6 7 M:Maker;P: 阳性对照株 ;N: 阴性对照株图 2 OXA-23 PCR 电泳图 M:Maker;1~3 6 7 9 11~13 15~17

噻吩纸片法检测到产 β- 内酰胺酶菌株 30 株, 阳性率为 100.0%; 改良三维实验法检测到 AmpC 酶阳性株 21 株, 阳性率为 70.0%;Hodge 实验检测到碳青霉烯酶阳性株 24 株, 阳性率为 80.0% 同时产 AmpC 酶和碳青霉烯酶阳性株 24 株, 阳性率为 70.

被发现和证实, 临床应用前景面临着巨大的挑战不 3 讨论动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物有关的耐药机制为 : 外膜孔蛋白缺失药物主动外排表达青霉素结合蛋鲍曼不动杆菌是医院内不动杆菌感染爆发流行白改变产碳青霉烯酶等, 其中产碳青霉烯酶的关注最主要的菌株据文献报道, 由于临床对三代头孢菌 [13-16] 度最高进一步了解与掌握耐碳青霉烯类鲍曼不素的广泛使用或甚至滥用,

[10] 胺酶等其中最主要的是产 β- 内酰胺酶, 主要有 AmpC 酶广谱 β - 内酰胺酶 ESBLs 碳青霉烯酶及金属 β- 内酰胺酶 Ampc 酶实质上就是一种 β- 内酰胺酶, 根据其产生方式, 可以将其划分为 : 持续低产酶持续高产 [11] 酶及诱导高产酶前两者与 β- 内酰胺类抗生素子生物方法, 并在此基础上寻找更加有效的方式本研究对 30

5 中国现代医学杂志第 27 卷 Hodge 实验阳性图 1 Hodge 实验和改良三维实验结果改良三维实验阳性 1000 bp 750 bp 500 bp 250 bp 150 bp M P N M:Maker;P: 阳性对照株 ;N: 阴性对照株图 2 OXA-23 PCR 电泳图 M:Maker;1~ ~13 15~17 19~21: 同一克隆株, : 同一克隆株图 3 鲍曼不动杆菌 PFGE 结果的存在有关近年来研究表明, 随着 β- 内酰胺类抗生素, 尤其是头孢菌素的广泛应用,AmpC 酶不仅可由染色体上的基因编码, 而且可由质粒介导 [12] 本研究收集的 30 株鲍曼不动杆菌的 B 内酰胺酶实验改良三维实验法及 Hodge 实验结果中, 头孢噻吩纸片法检测到产 β- 内酰胺酶菌株 30 株, 阳性率为 100.0%; 改良三维实验法检测到 AmpC 酶阳性株 21 株, 阳性率为 70.0%;Hodge 实验检测到碳青霉烯酶阳性株 24 株, 阳性率为 80.0% 同时产 AmpC 酶和碳青霉烯酶阳性株 24 株, 阳性率为 70.0% 碳青霉烯酶实质上就是一种可以水解亚胺培南的 β- 内酰胺酶, 包含 Ambler 分子, 主要分为 A B D3 类酶 ; 其中,B 类酶是一种金属酶, 可由转座子介导其碳青霉烯酶主要有金属酶和 OXA 类酶碳青霉烯类抗菌药物是目前临床治疗革兰阴性菌感染最为有效的抗菌药物之一然而随着其在临床治疗中广泛应用, 对碳青霉烯类抗菌药物呈耐药的菌株也逐渐被发现和证实, 临床应用前景面临着巨大的挑战不 3 讨论动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物有关的耐药机制为 : 外膜孔蛋白缺失药物主动外排表达青霉素结合蛋鲍曼不动杆菌是医院内不动杆菌感染爆发流行白改变产碳青霉烯酶等, 其中产碳青霉烯酶的关注最主要的菌株据文献报道, 由于临床对三代头孢菌 [13-16] 度最高进一步了解与掌握耐碳青霉烯类鲍曼不素的广泛使用或甚至滥用, 导致鲍曼不动杆菌在医院动杆菌在耐药方面的机制, 其研究更加趋向于选用分病原菌分离所占比例呈上升趋势, 特别是重症监护病 [7-9] 房急诊病区及呼吸内科病房而且从临床分离的药敏资料来看, 鲍曼不动杆菌对临床常用的抗菌药物呈现不同程度的耐药而鲍曼不动杆菌对 β- 内酰胺类抗菌药物的耐药机制有以下几个方面 : 药物靶位修饰和药物外排泵作用外膜通透性降低产 β- 内酰 [10] 胺酶等其中最主要的是产 β- 内酰胺酶, 主要有 AmpC 酶广谱 β - 内酰胺酶 ESBLs 碳青霉烯酶及金属 β- 内酰胺酶 Ampc 酶实质上就是一种 β- 内酰胺酶, 根据其产生方式, 可以将其划分为 : 持续低产酶持续高产 [11] 酶及诱导高产酶前两者与 β- 内酰胺类抗生素子生物方法, 并在此基础上寻找更加有效的方式本研究对 30 株耐碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌进行 PCR 反应, 检测出 26 株 OXA-23 阳性菌株, 但未检测出 OXA-24 菌株, 说明 OXA-23 是东莞地区碳青霉烯酶抗生素耐药鲍曼不动杆菌主要的碳青霉烯酶基因型通过鲍曼不动杆菌 PFGE 检测结果显示, 东莞地区碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌绝大多数为同一克隆株同一克隆株可以在同一医院病房内或不同病房内, 甚至是不同医院间造成克隆传播因此微生物室一旦发现高耐菌株, 应立即与院感部门和临床科室沟通联系, 落实做好各项预防措施, 防止耐药克隆株的院内播散流行 38

6 第 20 期郭主声, 等 : 东莞地区临床分离耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌的耐药特点及其机制研究本研究药敏结果显示, 产 AmpC 酶和产碳青霉烯酶是本院鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物耐药的主要原因, 呈多重耐药性鲍曼不动杆菌的特点主要是使其具有多重耐药基因, 而且够将该基因转移至其他细菌上, 与其他具有耐药基因的细菌相结合, 因此对于一系列抗生素具有一定耐药性, 在很大程度上增加临床抗感染治疗难度, 所以应当充分重视产酶菌株的检出在对抗生素进行选取的时候, 应当充分考虑抗生素具备的细菌耐药突变适应能力和抗菌活性, 根据药敏结果, 选取抗菌活性强的抗生素药物, 避免高耐药株细菌出现同时对于一些反复运用广谱抗生素反复感染病程长, 以及基础疾病严重的产酶菌株感染患者, 应当给予精心护理, 避免产酶菌株大量传播除此之外, 应提高医务人员对院内下呼吸道感染的认识, 加强医院环境消毒, 防止医源性感染参考文献 : [1] 王娟, 王磊, 李志奎, 等. 综合性医院 ICU 鲍曼不动杆菌分布及耐药性变迁分析 [J]. 中华肺部疾病杂志 : 电子版,2013, 6(5): [2] 刘江波, 蒋萍.ICU 病房患者下呼吸道感染鲍曼不动杆菌的临床分析及耐药性分析 [J]. 中国慢性病预防与控制,2011, 19(6): [3] 杜坤, 应春妹, 汪雅萍, 等. 上海地区四家医院鲍曼不动杆菌产 β- 内酰胺酶研究 [J]. 检验医学,2012,27(2): [4] HUANG J, CHEN EZ, QU HP, et al. Sources of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii and its role in respiratory tract colonization and nosocomial pneumonia in intensive care unit patients[j]. Chinese Medical Journal, 2013, 126(10): [5] 叶应妩, 王毓三, 申子瑜, 等. 全国临床检验操作规程第 3 版 [S]. 南京 : 东南大学出版社,2006: [6] 郭主声, 朱学海, 林偲思, 等. 重症监护病房病原菌分布及耐药性分析 [J]. 国际检验医学杂志,2014,35(3): [7] 郑力, 高永红, 陈予新, 等. 呼吸机相关性肺炎中鲍曼不动杆菌耐药性的动态分析 [J]. 中国现代医药杂志,2011,13(3): [8] 孙茜, 李耘, 王珊, 等. 呼吸监护室搬迁前后亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的流行病学及碳青霉烯酶基因型研究 [C]. 广州 : 中华医学会呼吸病学年会,2011. [9] KARAGEORGOPOULOS DE, FALAGAS ME. Current control and treatment of multidrug-resistant acinetobacter baumannii infections[j]. Lancet Infect Dis, 2008, 8(12): 751. [10] 汤荣睿, 龚雅利, 张晓兵. 碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌耐药性分析及金属 β- 内酰胺酶检测 [J]. 重庆医学,2011, 40(21): [11] 张丽梅, 苏丹虹, 徐韫健. 鲍曼不动杆菌 AmpC 酶和 AmpC 耐药基因检测分析 [J]. 检验医学与临床,2012,9(21): [12] JAMALI S, SHAHID M, FARRUKH S, et al. Molecular characterization of genes encoding Amp C beta-lactamases in clinical isolates of pseudomonas and acinetobacter species[j]. Journal of Applied Pharmaceutical Science, 2015, 5(10): [13] 郭主声, 张丽, 朱学海, 等年我院临床分离鲍曼不动杆菌的分布及耐药性分析 [J]. 海南医学杂志,2015,26(22): [14] 郭主声, 梁思远, 林偲思, 等.300 株鲍曼不动杆菌琼脂稀释法与纸片扩散法药敏检测结果比较 [J]. 现代生物医学进展杂志,2016, 16(12): [15] 韩爽, 于文静, 杨瑞林, 等. 多药耐药鲍曼不动杆菌 ADC 型 AmpC 酶基因的检测研究 [J]. 世界最新医学信息文摘,2015, 15(67): 1-2. [16] 万琼, 谢忆红.1126 株鲍曼不动杆菌的耐药变迁及来源分布 [J]. 医学理论与实践,2014(11): ( 童颖丹编辑 ) 39

目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5

目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 2014 年安医大一附院病原菌分布及药物敏感性分析编者 : 沈继录编审 : 王中新徐元宏 1 目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 伤口引流液标本病原菌构成及药敏分析