第 2 期刘寒艳, 等. 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响 239 transfer currently which can obtain good neonatal outcomes. Key words:vitrification;cleavage stage;blastocyst cu

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1 第 39 卷第 2 期 2018 年 3 月 JOURNAL OF SUN YAT SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES) Vol.39 No.2 March 2018 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响刘寒艳, 陈仕萍, 杜红姿, 李莉, 陈蕊 ( 广州医科大学附属第三医院生殖医学中心 // 广东省生殖医学重点实验室 // 广东省产科重大疾病重点实验室 // 广东省普通高校生殖与遗传重点实验室, 广东广州 ) 摘要 : 目的比较卵裂期胚胎复苏后囊胚培养移植与复苏嚢胚移植的单胎分娩结局, 探讨最佳冻存方案方法回顾性分析 2014 年 1 月至 2016 年 10 月在本中心行复苏周期移植 (FET) 并单胎分娩的患者, 囊胚复苏组个周期, 卵裂胚复苏囊胚培养组 690 个周期分析两组的新生儿分娩结局, 其中包括平均孕周, 平均体质量, 男婴出生率, 早产率, 极早产率, 低体质量率, 极低体质量率, 先天异常率结果平均胎龄, 新生儿平均体质量, 活产健康抱婴以及死胎的比例两组没有统计学差异 (P>0.05) 出生性别比差异没有统计学意义 ; 早产率, 极早产率, 低出生体质量率, 极低出生体质量率以及先天异常率两组没有统计学差异 (P>0.05); 校正后, 出生男婴率 (AOR 1.07,95% CI 0.86~1.34), 早产率 (AOR 0.7,95% CI 0.49~1.01), 极早产率 (AOR 1.47,95% CI 0.55~ 3.96), 低出生体质量率 (AOR 1.38,95% CI 0.86~2.22), 极低出生体质量率 (AOR 0.76,95% CI 0.20~2.83) 以及先天异常率 (AOR 1.58,95% CI 0.66~3.76) 两组仍然没有统计学差异 (P>0.05) 结论新鲜囊胚冷冻后择期复苏移植能获得较好的新生儿结局, 是目前较佳的囊胚培养和移植方案关键词 : 玻璃化冷冻 ; 卵裂期胚胎 ; 囊胚培养 ; 囊胚移植 ; 单胎分娩结局中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : (2018) Influence of the Single Live Birth Outcome Following Transfer of Vitrified Blastocyst and Blastocyst Cultured from Thawing Cleavage Embryo LIU Han-yan,CHEN Shi-ping,DU Hong-zi,LI Li,CHEN Rui (Center for Reproductive Medicine,Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University//Key Laboratory for Reproductive Medicine of Guangdong Province//Key Laboratory for Major Obstetric Diseases of Guangdong Province// Key Laboratory of Reproduction and Genetics of Guangdong Higher Education Institutes,Guangzhou ,China) Corresponding to:du Hong-zi, dhz_gz@hotmail.com Abstract: Objective To compare the single live birth outcomes of blastocyst transfer between vitrified blastocyst and blastocyst cultured from thawing cleavage embryo,so as to choose the best scheme of blastocyst transfer. Methods Retrospective analysis of the single live birth clinical data of vitrified blastocyst compared with 690 blastocyst cul tured from thawing cleavage embryo undergoing frozen embryo transplantation(fet)from January 2014 to October 2016 was performed. Mail outcome were including gestational age,neonatal weight,proportion of male neonate,preterm birth rate,very preterm birth rate,low birthweight rate,very low birthweight rate,congenital anomalies rate. Results There were no differences between the two groups for gestational age,neonatal weight,proportion of Live birth,health baby and stillbirth(p>0.05). There were no differences in proportion of male neonate(aor 1.07,95% CI 0.86~1.34),preterm birth rate(aor 0.7,95% CI 0.49~1.01),very preterm birth rate(aor 1.47,95% CI 0.55~3.96),low birthweight rate (AOR 1.38,95% CI 0.86~2.22),very low birthweight rate(aor 0.76,95% CI 0.20~2.83),congenital anomalies rate (AOR 1.58,95% CI 0.66~3.76,P>0.05). Conclusion The blastocyst may be the preferable stage for vitrifying and 收稿日期 : 基金项目 : 广东省中医药局面上项目 ( ); 广州医科大学青年项目 (2014A18) 作者简介 : 刘寒艳, 硕士, 医师, 研究方向 : 生殖医学, liuhanyan_21@163.com; 杜红姿, 通信作者, dhz_gz@hotmail.com

2 第 2 期刘寒艳, 等. 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响 239 transfer currently which can obtain good neonatal outcomes. Key words:vitrification;cleavage stage;blastocyst culture;blastocyst transfer;single live birth outcomes [J SUN Yat sen Univ(Med Sci),2018,39(2): ] 在辅助生殖技术中, 胚胎冷冻在很多情况下都是必需的, 尤其是对于卵巢反应良好, 能获得更多胚胎的患者然而, 胚胎冷冻需要足够的空间以及胚胎学家大量的工作量而且, 患者在复苏 [1] 周期中对妊娠的期望值更高相对于胚胎移 [2] 植, 囊胚移植能提高妊娠率但是对于复苏囊胚和复苏卵裂期胚胎后继续培养来的囊胚的新生儿结局, 尚未见相关报道本文旨在探讨不同时期玻璃化冷冻来源的囊胚, 在复苏周期中获得单胎妊娠并分娩的新生儿结局 1 材料与方法 1.1 研究对象我们收集 2014 年 1 月至 2016 年 10 月期间在广州医科大学附属第三医院生殖中心进行辅助生殖技术治疗 (Invitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection,ivf/icsi) 患者的临床资料, 满足以下条件 : 复苏周期行囊胚复苏或者卵裂期胚胎复苏行囊胚培养, 移植囊胚后获得单胎分娩的患者, 二步移植不纳入本研究同一患者只计入一次单胎分娩周期共有名单胎分娩患者纳入本研究, 其中复苏囊胚移植为个周期, 复苏卵裂胚行囊胚培养移植为 690 个周期本研究通过医院伦理委员会批准, 所有患者均签署同意用于研究的知情同意书 1.2 方法试剂和耗材采用日本加藤公司玻璃化冷冻解冻试剂盒 (Kitazato Biophama Co.Ltd. Shizuoka. Japan) 冷冻试剂包括平衡液(Equilibration Solu tion,es) 冷冻液 (Vitrification Solution,VS); 解冻试剂含有解冻液 (Thawing Solution,TS) 稀释液 (Diluent Solution,DS) 洗液 1(Washing Solution 1, WS1) 和洗液 2(Washing Solution 2,WS2); 冷冻载体为 Cryotop( 日本加藤公司生产 ) 胚胎冷冻步骤卵裂期胚胎冷冻过程为, 取 0.5 ml ES VS 于 Falcon 3037 皿内室温 (24 ) 下平衡, 将胚胎 ( 一次最多 2 枚 ) 移入平衡液 ES 中 5 min, 然后移入冷冻液 VS 中 45~60 s, 充分混匀后迅速将胚胎置于冷冻载体 Cryotop 顶端, 并立刻投入液氮中囊胚冷冻前利用激光辅助孵化系统 (300 μs) 在远离内细胞团一侧透明带进行人工皱缩囊腔, 将囊胚液释放, 待完全皱缩后进行玻璃化冷冻冷冻过程在 37 下,ES 液中 2 min,vs 中 45~60 s, 其余过程与卵裂期胚胎冷冻相同胚胎复苏及序贯囊胚培养卵裂期胚胎和囊胚复苏步骤相同, 将 0.5 ml 解冻试剂取出在室温下平衡, 并取解冻液 TS 于 Falcon 3653 皿中置于 37 预温, 将要解冻患者的胚胎从液氮中取出, 迅速将 Cryotop 顶端置于 TS 中 1 min, 然后在室温下依次将胚胎转入 DS WS1 WS2 中各 3 min 最后将胚胎移入平衡过的培养液中, 置于 37 体积分数为 6% 的 CO 2 培养箱中培养 2 h 等待移植行囊胚培养的胚胎, 则将其移入预先平衡好的囊胚培养液中, 于 37 体积分数为 6% CO 2 和 5% O 2 的 3 种气体培养箱中培养 48~72 h 后观察囊胚形成情况, 囊胚培养采用商品化的序贯培养液 (Vitrolife AB 公司, 瑞典 ) 囊胚培养的指征新鲜周期患者有 7 个及以上可利用卵裂期胚胎, 则新鲜周期移植或冷冻两个卵裂期胚胎, 剩余胚胎囊胚培养 ; 复苏周期囊胚培养的指征为冻存有 4 个及以上的卵裂期胚胎和 / 或两次以上 IVF 失败囊胚评分标准采用 Gardner 囊胚评分标准, 以数字 1~6 对囊胚的扩张度和孵化状态评分, 以字母 A B C 对内细胞团及滋养外胚层细胞评 [3] 分子宫内膜准备对于月经周期正常且排卵规律的患者采用自然周期, 从月经第 9 ~10 天开始超声监测卵泡和内膜发育情况, 当优势卵泡直径 16 mm, 子宫内膜 8 mm, 于排卵后给予黄体酮针 40 mg/d 肌内注射 ( 浙江仙琚 ), 第 3~5 天后复苏胚胎移植 ; 月经周期不正常或排卵不规律的患者则采用人工周期, 从月经的第 3 天口服补佳乐 6 mg/d(bayer,1 mg/ 片 ),10 d 后阴道 B 超监测内膜

3 240 第 39 卷情况, 当子宫内膜 8 mm, 加用黄体酮针 60 mg, 每天 1 次, 肌内注射, 于第 3~5 天后复苏胚胎移植移植后予黄体酮 20 mg, 每天 1 次, 肌注或地屈孕酮片每次 20 mg, 口服, 每天 2 次, 黄体支持妊娠及分娩后情况的判断胚胎移植 14 d 后进行血 HCG 检测, 血 HCG>25 U/L 定义为 HCG 阳性, 阳性者妊娠第 6 8 周行 B 超监测, 观察到妊娠囊的为临床妊娠, 未观察到妊娠囊为生化妊娠妊娠 25 周定义为分娩健康抱婴周期是指 : 胎龄 37 周, 体质量 g, 活胎分娩, 产后 28 d 仍存活, 且没有先天异常的新生儿 <2 500 g 定义为为低出生体质量,<1 500 g 定义为为极低出生体质量 <37 周分娩定义为早产,<32 周分娩定义为极早产先天异常是指排除染色体疾病导致的其他异常 1.3 数据收集收集病人的基本资料治疗方案胚胎发育以及治疗结局病人收集的信息包括 : 女方年龄男方年龄抗缪勒管激素 (anti- Mullerian hormone, AMH) 水平女方身高体质量指数 (body mass index,bmi) 不孕类型不孕因素不孕年限周期数复苏周期方案取卵周期用药方案和授精方式决定解冻日内膜厚度移植胚胎数移植胚胎天数以及妊娠监测情况和新生儿分娩结局, 其中包括平均孕周平均体质量男婴出生率早产率极早产率低体质量率极低体质量率先天异常率 1.4 统计学分析采用 SPSS19.0 统计软件进行数据分析, 计量资料用均数 ± 标准差表示, 对于正态或非正态分布资料分别采用两独立样本 Student s t 检验或 Mann-Whitney s U 检验, 计数资料用率 (%) 表示, 采用 chi-square 检验或 Fisher 精确概率计算法 P<0.05 认为差异有统计学意义使用单因素回归和多重 logistic 回归分析 OR 值及 AOR 值 2 结果单胎分娩周期中, 复苏囊胚组平均年龄为 31.2 岁,AMH 为 6.64 ng/ml, 复苏卵裂胚行囊胚培养组平均年龄为 31.9 岁,AMH 为 5.77 ng/ml, 两组差异有统计学意义 (P<0.05) 此外, 两组的其他基础参数分布, 包括原发不孕的比例不孕的原因不孕年限行 IVF/ICSI 周期数取卵周期促排卵方案取卵周期授精方式也有统计学差异 (P<0.05) 复苏周期内膜准备方式也有统计学差异, 在复苏囊胚组 71.8% 为自然周期,27.4% 为人工周期, 而在复苏卵裂胚行囊胚培养组,60% 为自然周期,39% 为人工周期 (P<0.05) 关于移植胚胎个数 (1 个或 2 个 ) 和移植胚胎天数 (Day5 为第 5 天,Day6 为第 6 天 ), 复苏囊胚组移植 2 个囊胚占 78.1%,Day5 囊胚移植占 63.3%, 而复苏卵裂胚行囊胚培养组,93.9% 移植 2 个囊胚,98.3% 为 Day5 囊胚移植, 两组也有统计学差异 (P<0.05) 男方年龄女方身高 BMI 指数决定解冻日内膜厚度, 两组没有统计学差异 (P>0.05; 表 1) 比较两组单胎分娩结局 ( 表 2), 平均胎龄, 新生儿平均体质量, 活产健康抱婴以及死胎的比例两组没有统计学差异 (P>0.05) 两组出生性别比 (1.33/1.27) 早产率 (12.05%/9.42%), 极早产率 (1.16%/1.45%), 低出生体质量率 (6.17%/6.67%), 极低出生体质量率 (0.77%/0.58%) 以及先天异常率 (1.06%/2.03%) 没有统计学差异 (P>0.05; 表 2) 进一步通过单因素和多因素回归分析两组单胎分娩周期不良结局的优势比和校正优势比, 发现出生男婴率 (AOR 1.07,95% CI 0.86~1.34), 早产率 (AOR 0.7,95% CI 0.49~1.01), 极早产率 (AOR 1.47,95% CI 0.55~3.96), 低出生体质量率 (AOR 1.38,95% CI 0.86~2.22), 极低出生体质量率 (AOR 0.76,95% CI 0.20~2.83) 以及先天异常率 (AOR 1.58,95% CI 0.66~3.76) 两组仍然没有统计学差异 (P>0.05; 表 3) 3 讨论 3.1 囊胚培养和玻璃化冷冻技术的应用 [3] Gardner 等于 1998 年首次用序贯培养基将人胚胎体外培养至囊胚期后进行移植, 临床妊娠率达 63%, 胚胎种植率为 45.5% 囊胚培养包括新鲜周期囊胚培养和复苏卵裂胚后囊胚培养, 两者的囊胚形成率无统计学差异 [4], 说明复苏过程并不影响胚胎的发育潜能而囊胚培养将会淘汰质量不好发育潜能较差的胚胎, 从而提高种植率及临床妊娠率全世界第一例玻璃化囊胚复苏移植获得妊娠分娩是在 2000 年 [5], 囊胚存活率也从早期的 67% 提高到 97%, 种植率从 23% 提高到

4 第 2 期刘寒艳, 等. 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响 241 Table 1 表 1 单胎分娩周期的基础参数 Analysis of the basic and treatment characters of singleton birth compared between Thawed blastocyst and blastocyst from thaw cleavage [n(%),x ± s] n Female age/years Paternal age/years AMH/(ng/mL) Female height/m BMI/(kg/m 2 ) Primary infertility Reason of infertility Tubal factor Ovulation disorders Endormetriosis Spermatozoa factor Both sides factor Unexplained Length of infertility/years Previous IVF/ICSI attempts Type of FET cycle Spontaneous Spontaneous,luteal support Hormonal substitution Oocyte insemination type Conventional ICSI Ovarian stimulation protocol Microflare Down-regulation GnRH antagonist Endometrial thickness on day of FET decision/mm No. of transferred embryos 1 2 Transfer day Day 5 ET Day 6 ET Thawed blastocyst ± ± ± ± ± (50.1) 579(55.8) 74(7.1) 30(2.9) 100(9.6) 22(2.1) 232(22.4) 4.31± (85.3) 127(12.2) 25(2.4) 745(71.8) 284(27.4) 8(0.8) 891(85.9) 146(14.1) 33(3.2) 812(78.3) 192(18.5) 8.85± (21.9) 810(78.1) 656(63.3) 381(36.7) Blastocyst from thaw cleavage ± ± ± ± ± (58.4) 371(53.8) 56(8.1) 23(3.3) 109(15.8) 19(2.8) 112(16.2) 4.78± (77.0) 109(15.8) 50(7.2) 414(60.0) 269(39.0) 7(1.0) 540(78.3) 150(21.7) 60(8.7) 578(83.8) 52(7.5) 8.78± (6.1) 648(93.9) 678(98.3) 12(1.7) t/χ P % [6-7] 自然生理状态下早期卵裂期胚胎应在输卵管中发育, 到近囊胚期才进入子宫腔, 复苏周期囊 [8] 胚移植更符合生殖生理, 降低了异位妊娠率和程序化冷冻相比, 玻璃化能增加胚胎及囊胚的存活率, 因此, 玻璃化复苏移植周期能获得和新鲜 [9] 移植周期相似的着床率和妊娠率 3.2 囊胚冷冻和移植的优势单胚胎移植是辅助生殖技术中降低多胎妊娠的有效方法, 同时降低围产期和新生儿风险, 尤其是早产和低体质量儿的发生率相对于单胚胎移

5 242 第 39 卷 Table 2 表 2 两组单胎分娩周期不良结局的比较 Outcomes and events in singleton live birth pregnancies [x ± s or n(%)] Outcome n Gestational age/weeks Neonatal weight/g Live birth Health baby Still birth Gender of neonate(male) Sex ratio(male/female) Preterm birth(<37 weeks) Very preterm birth(<32 weeks) Low birth weight(<2 500 g) Very low birth weight(<1 500 g) Congenital anomalies Thawed blastocyst ± ± (99.52) 1 023(98.65) 5(0.48) 591(56.99) (12.05) 12(1.16) 64(6.17) 8(0.77) 11(1.06) Blastocyst from thaw cleavage ± ± (99.57) 672(97.39) 3(0.43) 386(55.94) (9.42) 10(1.45) 46(6.67) 4(0.58) 14(2.03) t/χ P / Table 3 表 3 比较两组单胎分娩周期不良结局的优势比和校正优势比 Odds ratios and adjusted odds ratios for adverse outcome in singleton birth Outcome Blastocyst from thaw cleavage Thawed blastocyst Gender of neonate(male) Preterm birth(<37 weeks) Very preterm birth(<32 weeks) Low birth weight(<2 500 g) Very low birth weight(<1 500 g) Congenital anomalies OR(95%CI) (0.86~1.27) 1.32(0.96~1.81) 0.796(0.34~1.85) 0.92(0.62~1.36) 1.33(0.4~4.45) 0.518(0.23~1.15) P for OR AOR(95%CI) (0.86~1.34) 0.7(0.49~1.01) 1.47(0.55~3.96) 1.38(0.86~2.22) 0.76(0.20~2.83) 1.58(0.66~3.76) P for AOR Adjusted for the female age, primary infertility, reason of infertility, previous IVF/ICSI attempts, type of FET cycle, oocyte insemination type, ovarian stimulation protocol, No. of transferred embryos, transfer day. 植, 单囊胚移植在降低多胎妊娠风险的同时, 保 [10] 证了种植率和临床妊娠率本中心复苏周期囊胚移植有两种形式, 第一种为直接复苏囊胚进行移植, 第二种是复苏卵裂胚, 进行囊胚培养后再移植, 复苏周期囊胚培养的指征为有两次及以上移植失败史, 且患者冻存有 4 个及以上卵裂期胚胎, 相对于复苏周期囊胚培养, 新鲜周期行囊胚培养并冷冻, 能节省储存空间, 降低工作量, 而复苏周期囊胚培养存在不能形成囊胚而取消移植的风险, 同时面临多余囊胚再次冷冻问题, 而目前双冻的风险仍然未知因此本中心更推荐新鲜周期囊胚培养并冷冻, 复苏周期囊胚移植 3.3 囊胚玻璃化冷冻的安全性囊胚冷冻保存能节省储存空间和工作量, 但是为了确定囊胚玻璃化冷冻的安全性, 必须重视除了存活率和发育潜能, 玻璃化冷冻对囊胚可能产生的其他损害已有报道表明玻璃化冷冻降低 [11] 人囊胚纺锤体正常形成率 ; 导致小鼠囊胚 DNA [12] 损伤, 改变线粒体分布状态以及氧化还原反应 [13] 状态既往关于复苏周期囊胚移植结局说法不一, 有研究认为卵裂期解冻胚胎后囊胚移植更优, 也有研究认为解冻囊胚移植更好有研究发现, 复苏周期囊胚移植妊娠率和围产结局优于新鲜周期 [14-16] 囊胚移植, 而复苏卵裂期胚胎行囊胚培养移

6 第 2 期刘寒艳, 等. 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响 243 植妊娠率和分娩率优于解冻囊胚移植, 流产率低于解冻囊胚移植, 因此更推荐新鲜周期移植囊胚 [14,17] 及冷冻卵裂胚, 并在复苏周期中行囊胚培养移植有研究认为复苏囊胚移植能获得更好的新 [16] 生儿结局, 显著降低早产率, 低出生体质量以及小于胎龄儿的发生率, 但是增加大于胎龄儿的发生率, 同时增加母亲胎盘植入以及妊娠期高血 [15] 压疾病的风险但也有研究发现囊胚移植较第 [18-19] [18] 3 天移植单胎早产率增加, 先天畸形增加关于复苏囊胚移植和复苏卵裂胚行囊胚培养移植的单胎分娩新生儿的结局, 尚未见报道, 本文首次比较了这两者的单胎分娩的新生儿结局及不良结局, 没有发现两组的胎龄出生体质量性别比早产率极低早产率低出生体质量率极低出生体质量率之间差异有统计学意义活产比例健康抱婴比例死婴比例差异没有统计学意义在复苏卵裂胚行囊胚培养组, 患者年龄较大,AMH 水平较低, 早产率和极低出生体质量率与复苏囊胚组相比下降, 但是尚无统计学差异, 且由于影响新生儿结局和不良的因素很多, 本文在校正了相关因素, 如女方年龄不孕类型 ( 原发 / 继发 ) 不孕原因,IVF/ICSI 周期数 FET 周期内膜准备方式取卵周期用药方案取卵周期授精方式移植胚胎个数移植胚胎天数 (Day5/Day6) 后, 两组结局及不良结局仍然没有统计学差异, 说明相对于卵裂胚玻璃化冷冻, 新鲜周期囊胚培养行囊胚冷冻, 解冻周期复苏囊胚是相对安全, 较佳的囊胚培养和移 [20] 植方案综上分析, 新鲜周期囊胚培养并冷冻, 后复苏移植能获得较好的分娩结局及新生儿结局, 是目前最佳的囊胚培养和移植方案, 对于胚胎较多反应好的患者, 可在复苏周期使患者子宫内膜呈现出更好的容受性, 提高与胚胎发育同步性但囊胚培养存在着无囊胚形成的风险, 对于胚胎较少的患者, 并不建议行囊胚培养而对于复苏卵裂期胚胎后因特殊意外原因不能及时移植患者, 可以考虑行复苏卵裂期胚胎囊胚培养移植, 给患者缓冲的时间, 尽量避免胚胎再次冷冻情况的发生因此, 各中心应根据实际情况, 有指征的进行囊胚培养参考文献 : [1] Check JH,Choe JK,Katsoff D,et al. Controlled ovarian hyperstimulation adversely affects implanta tion following in vitro fertilization- embryo transfer [J]. J Assist Reprod Genet,1999,16(8): [2] Langley M,Marek DM,Gardner DK,et al. Extend ed embryo culture in human assisted reproduction treatments[j]. Hum Reprod,2001,16(5): [3] Gardner DK,Vella P,Lane M,et al. Culture and transfer of human blastocysts increases implantation rates and reduces the need for multiple embryo transfers[j]. Fertil Steril,1998,69(1): [4] 唐永梅, 韦继红, 姚春玲, 等. 冻融囊胚及冻融胚胎养囊胚后移植的临床效果分析 [J]. 中国优生与遗传杂志,2012,20(8): Tang YM,Wei JH,Yao CL,et al. Clinical analy sis of frozen-thawed blastocysts and blastocysts cul tured from frozen-thawed embryos[j]. Chin J Birth Health Hered,2012,20(8): [5] Yokota Y,Sato S,Yokota M,et al. Successful pregnancy following blastocyst vitrification:case re port[j]. Hum Reprod,2000,15: [6] Vanderzwalmen P,Bertin G,Debauche C,et al. Vitrification of human blastocysts with the Hemi- Straw carrier:application of assisted hatching after thawing[j]. Hum Reprod,2003,18(7): [7] Mukaida T,Oka C,Goto T,et al. Artificial shrink age of blastocoeles using either a micro-needle or a laser pulse prior to the cooling steps of vitrification improves survival rate and pregnancy outcome of vit rified human blastocysts[j]. Hum Reprod,2006, 21(12): [8] Ishihara O,KuwaharaA,Saito H. Frozen- thawed blastocyst transfer reduces ectopic pregnancy risk: An analysis of single embryo transfer cycles in Ja pan[j]. Fertil Steril,2011,95(6): [9] Takahashi K,Mukaida T,Goto T,et al. Perinatal outcome of blastocyst transfer with vitrification us ing cryoloop:a 4-year follow-up study[j]. Fertil Steril,2005,84(1):88-92.

7 244 第 39 卷 [10] Papanikolaou EG,Kolibianakis EM,Tournaye H, et al. Live birth rates after transfer of equal number of blastocysts or cleavage- stage embryos in IVF [J]. Hum Reprod,2008,23(1): [11] Chatzimeletiou K,Morrison EE,Panagiotidis Y,et al. Cytoskeletal analysis of human blastocysts by confocal laser scanning microscopy following vitrifi cation[j]. Hum Reprod,2012,27(1): [12] Li L,Zhang X,Zhao L,et al. Comparison of DNA apoptosis in mouse and human blastocysts after vitri fication and slow freezing [J]. Mol Reprod Dev, 2012,79(3): [13] Somoskoi B,Martino NA,Cardone RA,et al. Dif ferent chromatin and energy/redox responses of mouse morulae and blastocysts to slow freezing and vitrification [J]. Reprod Biol Endocrinol,2015, 13:22. [14] Wang YA,Chapman M,Costello M,et al. Better perinatal outcomes following transfer of fresh blasto cysts and blastocysts cultured from thawed cleavage embryos:a population- based study[j]. Hum Re prod,2010,25(6): [15] Ishihara O,Araki R,Kuwahara A,et al. Impact of frozen- thawed single- blastocyst transfer on mater nal and neonatal outcome:an analysis of 277,042 single-embryo transfer cycles from 2008 to 2010 in Japan[J]. Fertil Steril,2014,101(1): [16] Roy TK,Bradley CK,Bowman MC,et al. Singleembryo transfer of vitrified- warmed blastocysts yields equivalent live-birth rates and improved neo natal outcomes compared with fresh transfers [J]. Fertil Steril,2014,101(5): [17] Wang YA,Costello M,Chapman M,et al. Trans fers of fresh blastocysts and blastocysts cultured from thawed cleavage embryos are associated with fewer miscarriages [J]. Reprod Biomed Online, 2011,23(6): [18] Källén B,Finnström O,Lindam A,et al. Blasto cyst versus cleavage stage transfer in in vitro fertil ization:differences in neonatal outcome?[j]. Fertil Steril,2010,94(5): [19] Dar S,Librach CL,Gunby J,et al. IVF directors group of canadian fertility and andrology society. In creased risk of preterm birth in singleton pregnan cies after blastocyst versus Day 3 embryo transfer: Canadian ART register(cartr)analysis[j]. Hum Reprod,2013,28(4): [20] 刘艳丽, 杨晓娜, 许小燕, 等. 新鲜周期和复苏周期囊胚培养及移植的临床结局分析 [J]. 郑州大学学报 ( 医学版 ),2015,50(2): Liu YL,Yang XN,Xu XY,et al. Analysis of clini cal outcomes of blastocyst culture and transfer be tween fresh cycles and vitrified- thawed cycles[j]. J Zhengzhou Univ(Med Sci),2015,50(2): ( 编辑余菁 ) ( 上接第 214 页 from page 214) [24] Ratelade J,Verkman AS. Inhibitor(s)of the classi cal complement pathway in mouse serum limit the utility of mice as experimental models of neuromyeli tis optica[j]. Mol Immunol,2014,62(1): [25]Wang Z,Guo W,Liu Y,et al. Low expression of complement inhibitory protein CD59 contributes to humoral autoimmunity against astrocytes[j]. Brain Behav Immun,2017,65(9): [26] Tradtrantip L, Zhang H, Anderson MO, et al. Small- molecule inhibitors of NMO- IgG binding to aquaporin- 4 reduce astrocyte cytotoxicity in neuro myelitis optica [J]. FASEB J, 2012, 26(5): [27] Tradtrantip L,Zhang H,Saadoun S,et al. Antiaquaporin- 4 monoclonal antibody blocker therapy for neuromyelitis optica[j]. Ann Neurol,2012,71 (3): ( 编辑徐杰 )

连接

doi 10.3969/j.issn.1673-4254.2013.06.15 861 临床研究口服地屈孕酮对冻融胚胎移植周期临床妊娠结局的影响口服地屈孕酮对冻融胚胎移植周期临床妊娠结局的影响郭薇陈薪叶德盛何于夏黎璞牛静杨新红唐妍陈士岭南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心广东广州 510515 摘要目的探讨口服地屈孕酮片在冻融胚胎移植 FET 周期中进行黄体支持对临床结局的影响

第 2 期 刘寒艳, 等. 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响 239 transfer currently which can obtain good neonatal outcomes. Key words:vitrification;cleavage stage;blastocyst cu

第 2 期刘寒艳, 等. 玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响 239 transfer currently which can obtain good neonatal outcomes. Key words:vitrification;cleavage stage;blastocyst cu