姓名 : 孙雅逊院系 : 人民医院学号 : 北京大学医学部学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明 : 所呈交的学位论文, 是本人在导师的指导下, 独立进行研究工作所取得的成果除文中已经注明引用的内容外, 本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果

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1 博士研究生学位论文论文题目 : 长 QT 综合征致病基因的检测及新突变位点功能学与临床表型分析姓名 : 孙雅逊学号 : 院 ( 部 ): 北京大学第二临床医院专业 : 心血管内科学导师 : 郭继鸿教授完成时间 : 二零零九年四月

2 姓名 : 孙雅逊院系 : 人民医院学号 : 北京大学医学部学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明 : 所呈交的学位论文, 是本人在导师的指导下, 独立进行研究工作所取得的成果除文中已经注明引用的内容外, 本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果对本文的研究做出重要贡献的个人和集体, 均已在文中以明确方式标明本声明的法律结果由本人承担论文作者签名 : 导师签名 : 年月日学位论文使用授权说明本人完全了解北京大学医学部关于收集保存使用学位论文的规定, 即 : 按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本 ; 学校有权保存学位论文的印刷本和电子版, 并提供目录检索与阅览服务 ; 学校可以采用影印缩印数字化或其它复制手段保存论文 ; 在不以赢利为目的的前提下, 学校可以公布论文的部分或全部内容请选择图书馆发布时间 : 即时发布一年后发布二年后发布 ( 保密论文需注明, 并在解密后遵守此规定 ) 论文作者签名 : 导师签名 : 年月日

3 目录主要缩略词 1 中文摘要 2 英文摘要 5 第一部分长 QT 综合征家系的收集及临床特点分析研究背景 9 材料和方法 10 结果 12 讨论 26 结论 28 第二部分 LQTS 患者基因突变检测及新突变位点功能学与临床表型分析研究背景 29 材料和方法 30 结果 45 讨论 55 结论 59 本研究的创新之处 60 本研究的不足之处 60 参考文献 61 文献综述 66 附录一 75 附录二 76 致谢 77

4 主要缩略词 Abbreviations LQTS long QT syndrome 长 QT 综合征 ECG electrocardiogram 心电图 HERG human ether-a-go-go-related gene HERG 基因 PCR polymerase chain reaction 多聚酶链式反应 RFLP restriction fragment length polymorphism 限制性酶切长度多态性 NMD nonsense mediated decay 无义突变介导的 mrna 降解 RT-PCR reverse-transcript PCR 逆转录 PCR QTc corrected QT interval 校正后的 QT 间期 I kr rapidly activating delayed rectifier K + channel 快速激活延迟整流钾通道 Tdp torsades de pointes 尖端扭转型室速 ICD implantable cardiac defibrillator 植入型心脏转复除颤器 LCSD left cardia sympathetic denervation 左侧颈交感神经切除术 1

5 长 QT 综合征致病基因的检测及新突变位点功能学与临床表型分析北京大学医学部内科学 ( 心血管病 ) 博士研究生孙雅逊导师郭继鸿教授中文摘要研究背景遗传性长 QT 综合征 (Long QT syndrome, LQTS) 是一种遗传性心肌离子通道疾病, 表现为心电图上 QT 间期延长, 易于发生尖端扭转型室速 (Torsades de pointes, Tdp), 室颤等恶性室性心律失常, 从而发生晕厥甚至猝死等心脏事件近年来研究发现,LQTS 是由 Na +,K +,Ca 2+ 通道或通道相关蛋白的突变所引起这些突变使心肌复极过程延长, 心肌各层及不同区域间复极不一致, 从而使早后除极及折返现象易于出现, 引起多形性室速甚至恶化为室颤影响 LQTS 发生心脏事件的危险因素包括 QT 间期心率年龄性别及不同亚型等许多研究证实 LQTS 致病基因的不同突变类型及突变位点的性质可影响离子通道功能及临床事件的发生率通道蛋白关键功能区的突变可严重影响通道功能从而产生较为严重的临床表型, 非功能区的突变则可能轻微影响或不影响通道功能目前对 LQTS 的临床表现与基因突变位点的功能学研究较多, 而对临床表型的严重程度与突变的类型与突变位点位置研究较少报道近年来, 一种称为 NMD(Nonsense Mediated Decay) 的 mrna 监控机制在 LQTS 中逐渐受到重视这种机制对 LQTS 患者临床表型的影响及其特点值得研究目的本研究对临床诊断或疑诊为 LQTS 的患者进行 LQTS 评分及危险分层, 对其临床资料进行分析并初步判断其亚型, 并进行相应的治疗及随访根据初步分析结果进行候选基因的突变检测, 分析所发现的突变位点的突变类型, 针对不同突变类型进行功能学研究, 观察不同突变类型及位点对通道产生的不同影响, 以明确临床表型与基因型的关系 2

6 方法收集临床 LQTS 家系的临床资料, 绘制家系图, 对 LQTS 患者及其家族成员体表心电图的心率 QTc 间期 T 波形态和振幅和家族遗传模式进行分析应用 Schwartz 评分对 LQTS 患者进行诊断,Priori 方法进行危险分层, 结合临床检查结果进行相应的治疗, 定期门诊或电话随访根据 LQTS 患者的临床表现及心电图特点等资料进行 LQTS 亚型的初步判定, 并据此进行相应候选基因的检测应用 QIAamp 试剂盒提取 LQTS 患者基因组 DNA PCR 结合直接测序的方法对 LQTS 患者多个候选基因进行检测并与正常序列对比以发现突变位点血液 RNA 提取试剂盒提取外周血总 RNA 并逆转录为 cdna 实时定量 PCR 结合等位基因特异性扩增方法检测正常及突变 mrna 表达量的改变长距离 PCR 技术对 HERG 基因进行扩增, 应用定点突变试剂盒对 HERG 基因进行定点突变分别将野生型突变型基因克隆到 pegfp N1 真核表达载体, Entranster 转染试剂将构建后的 HERG 基因表达载体转染进入 293 细胞, 荧光显微镜及共聚焦显微镜证实 HERG 基因表达情况全细胞膜片钳技术对野生及突变型 I kr 通道蛋白进行电生理特性研究结果 1. 共收集 12 个 LQTS 家系, 初步分型考虑其中 10 个家系为 LQT2 家系,1 个为 LQT1 家系, 1 个 LQT3 家系 12 个家系中共入选家族成员 59 人遗传模式分析表明所有家系符合常染色体显性遗传模式, 未发现常染色体隐性遗传模式 LQT1 家系表现可能存在不完全外显 2. ECG 分析表明 12 个家系中, 有 10 个家系具有较为典型的 ECG 改变,2 个家系 ECG 改变不典型, 其中 1 个不典型家系的分型被基因检测结果所证实 3. LQTS 先证者及部分直系亲属进行了相应治疗, 所有先证者均服用 β 受体阻滞剂治疗, 平均剂量为普萘洛尔 1.1 ± 0.3 mg/kg 体重, 美托洛尔 1.2 ± 0.2 mg/kg 体重其中 2 名先证者开始服药时出现副作用, 均可耐受而未停药 2 名先证者同时服用美西律 50 mg, tid 治疗 4 名先证者口服补钾 1g/ 天 3 名先证者进行了左颈交感神经切除术平均随访 16 个月,1 名先证者发生猝死,1 名先证者停药后再次发生晕厥,1 名先证者直系亲属发生心源性晕厥, 其余先证者无心脏事件发生 4. 对 12 个先证者进行了 KCNQ1 HERG 及 SCN5A 基因的检测共在 HERG 基因上发现 6 个突变, 在 KCNQ1 基因上发现 1 个突变其中 HERG 基因 Y652X 突变在 Pubmed 数据库及国内外文献中都未见报道, 为新发现的 HERG 基因突变, 目前该研究结果已经提交至 Pubmed Genbank 数据库 (Accessioin ID:FJ794944) HERG 基因 D836N 突变未见国内外报道, 尚未提交至 Genbank 数据库 HERG 基因 D501N 突变已在国外有报道, 未见国内相应报道, 未有功能学研究其余突变均为已报道突变其中 Y652X 及 D501N 两个 HERG 基因突变位点均应用高保真酶扩增双向测序及限制性酶切反应证实经过与 Pubmed 数据库及已发表文献相对比, 排除可能存 3

7 在的假阳性及重复报道 5. Y652X 突变为无义突变, 该突变位于第 8 外显子,HERG 基因的 S6/ 孔区共有 6 名家族成员携带有该突变, 先证者及其家族成员表现为 QT 间期延长或边缘值 (QTc: 463~533 ms) 实时定量 PCR 表明 : 该家族中突变携带者的 HERG 基因 mrna 表达明显降低, 正常等位基因的 mrna 表达量与正常对照者无差异, 而突变等位基因的 mrna 表达量明显降低 (P<0.01) 应用膜片钳技术证实该突变引起快速激活延迟整流钾通道的膜电位依赖性激活功能明显下降, 其通道的电流密度与未转染 HERG 基因的 293 细胞相似, 而与野生型的 HERG 基因同时转染后, 电流密度明显低于正常野生型 HERG 转染时的电流密度, 说明该突变在不受 NMD 机制调控时也存在着明显的负显性机制 6. D501N 为国内首次发现的 HERG 基因突变, 该突变位于 S3 跨膜区, 属于错义突变将带有 D501N 定点突变的 HERG 基因转接到 pegfp N1 载体后, 转染入 HEK293 细胞后利用荧光显微镜和共聚焦荧光显微镜进行观察, 证实 D501N 突变的 HERG 基因表达于细胞膜上应用膜片钳技术证实该突变引起快速激活延迟整流钾通道的膜电位依赖性激活功能明显下降, 与野生型 HERG 基因同时转染 293 细胞后, 电流密度明显低于正常野生型 HERG 转染时的电流密度, 说明该突变存在着负显性机制, 可能引起较为严重的临床症状结论 1. 对临床诊断或疑似诊断的 LQTS 患者进行候选基因检测具有可行性, 对于部分不典型的 LQTS 患者, 基因检测可能有助于明确诊断治疗及预后 2. 在 12 个 LQTS 家族中发现 7 个 LQTS 相关的致病基因,2 个为新发现的突变,1 个为国内新发现的突变 3. HERG 基因 Y652X 为无义突变, 受 NMD 机制调控,NMD 机制使突变型 mrna 表达降低, 异常 I kr 通道蛋白表达量减少, 从而减轻了负显性机制, 从而其先证者及其他携带者临床表型较为轻微 4. HERG 基因 D501N 为错义突变, 其致病机制为产生异常蛋白, 与正常蛋白形成功能异常的离子通道, 从而影响心肌复极其临床表型严重程度与突变的性质有关关键词长 QT 综合征 ;HERG 基因 ; 无义突变 ; 错义突变 ; 无义突变介导的 mrna 降解 ; 膜片钳 4

8 Mutation Screening of Long QT Syndrome and Analysis of Genotype-Phenotype Correlation of Novel Mutations Department of Cardiac, People Hospital Peking University Ph.D Candidate Supervisor Ya-Xun Sun Prof. Ji-Hong Guo 英文摘要 Background The hereditary long QT syndrome (LQTS) is a genetic channelopathy with different penetrance. LQTS is associated with increased propensity to syncope, polymorphous ventricular tachycardia (torsades de pointes), and sudden arrhythmic death. Risk assessment and stratification in LQTS patients relies upon a constellation of electrocardiographic, clinical, and genetic factors. Many studies have proved that the phenotypic expression of LQTS is time dependent and age specific, warranting continuous risk assessment and stratification in affected patients. Furthermore, the biophysical function, type, and location of the ion-channel mutation are currently emerging as important determinants of outcome in genotyped patients. An mrna surveillance mechanism called nonsense mediated decay(nmd) are emerging as a novel mechanism in LQTS. NMD can apparently affect phenotypic expression of LQTS patients. The study on the mechamism of LQTS mutations and phenotype-genotype of the LQTS patients may be useful for the risk stratification and for the development of gene-specific therapies that may reduce the risk of life-threatening cardiac events in these patients. Objective We evaluated the clinically diagnosed or suspected LQTS patients by Schwartz scoring system and Priori stratification. The subtype of LQTS was judeged by clinical characteristic and ECG patterns. The LQTS patients and their family 5

9 members were treated and followed up regularly. To screen the pathogenic gene mutation in LQTS patients and explore the possible mechanism of these mutation. And explorer the genotype-phenotype relationship in these specitfic mutation carriers. Methods 1. Collect LQTS pedigree and their clinical materials. Rest heart rate, QTc, T wave patterns, T wave amplitude of surface ECG and pedigree model were analyzed. Schwartz score was evaluated in each proband. Stratification was undergone according Priori strategies. 2. The clinical characteristics combining ECG patterns were analyzed and the patients were treated and followed up regularly. 3. Genomic DNA of probands and their family members were extracted using QIAamp kit. PCR combining direct bi-direction sequencing to screen multiple possible gene mutation, and the sequencing results were compared with normal alleles. 4. The mrna was extract for peripheral leucocyte using RNAprep Blood Kit and was reverse transcript into cdna. 5. Real-time PCR combining allele specific amplification to determine the mrna expression level of HERG gene in Y652X proband. 6. Site-specific mutation was introduced by site-directed mutagenesis kit. The wild-type and mutated HERG gene was connected with pegfp N1 expression vector. 7. HEK 293 cell was transfected by HERG gene expression vector using Entranster-H reagent. The transfection efficiency and the localization of HERG gene were confirmed by fluorescence microscope and confocal microscope. 8. The electrophysiological features of mutated I kr ion channel was studied by whole cell clamp patch technique. Results 1. In 12 LQTS pedigrees, 10 were LQT2 pedigrees, 1 was LQT1 pedigree and 1was LQT3 pedigree. There are total 59 family members were included in analysis. All the pedigree showed a hereditary pattern of autosomal dominant, no recessive patterns was observed. 2. Totally, 10 of 12 pedigree showed typical ECG pattern and 2 pedigree showed atypical ECG patterns. One of the 2 atypical pedigree was diagnosed as LQT2 by genetic study. 3. The LQTS probands and their family members were treated accordingly. All the probands orally took βblocker, propranolol or metalol, 1.1 ± 0.3 mg/kg body weight and 1.2 ± 0.2 mg/kg body weight respectively. Two probands 6

10 showed side effects ofβblocker but were able to tolerate. Two probands orally took mexiletine 50 mg tid. Four proband orally took potassium 0.5~1 g/d. Three proband underwent LCSD. The average follow-up period was 16 months. One proband died for cardiac cause, one proband experienced syncope for drug withdrawal. One of family member occurred syncope. No other episode occurred during follow-up period. 4. In 12 LQTS probands, 6 mutations on HERG gene and 1 KCNQ1 mutation were found. The Y652X on HERG gene was not reported previously and not recorded in Pubmed database. The Y652X mutation was submitted to Genbank and was accepted. The accession number is FJ The D501N mutation was firstly reported in China. 5. The Y652X and D501N mutation of HERG gene were confirmed by RFLP and high fidelity enzyme amplification. 6. The Y652X of HERG gene was non-sense mutation and localized in S6/pore region in exon 8 of HERG gene. There are 6 mutation carriers in the family. The proband and his family members showed a mild QTc prolongation. The mutation was subjected to NMD mechanism according to the NMD principle. Real-time PCR results indicated the HERG expression in mutation carriers was significantly lower than that in nomal subjects. Allele specific real-time PCR results showed that the decrease in mutated allele accounted for the decrease of HERG mrna. Whole cell clamp patch showed a significantly reduced current density in Y652X HERG gene transfected cell. The Y652X of HERG gene showed significant dominant negative mechanism. 7. D501N was first reported in Chinese population. The mutation was missense mutation and localized in S3 transmembrane region. Whole cell clamp patch showed a significantly reduced current density in D501N HERG gene transfected cell. When the wild type and D501N HERG gene were transfected to 293 cell, the net current density was significantly lower than that of wild type transfected cell. The D501N mutation on HERG gene showed significant dominant negative mechanism. Conclusions 1. Gene mutation screening was feasible in LQTS patients and was helpful in the diagnosis of atypical LQTS patients. Beta-bloker are foundermental therapy in the treatment and LCSD might be considered in high-risk patients. 2. Totally 7 gene mutations were found in 12 LQTS families. Two of them was novel mutation and 1 was reported first in Chinese population. 3. Y652X mutation in HERG gene was nonsense mutation and subjected to the NMD mechanism. The mrna expression level was significantly reduced in Y652X carriers. The NMD mechanism eliminated mutated protein and reduce 7

11 dominant negative effect of Y652X mutation shown in transfected 293 cells. This founding might explain the relatively mild phenotype of Y652X carriers. 4. D501N mutation in HERG gene was missense mutation. And the whole cell clamp patch revealed the dominant negative mechanism of the mutation. The D501N mutation carriers showed a relatively severely phenotype. Keywords Long QT syndrome; HERG gene; Nonsense mutation; Missense mutation; Nonsense mediated decay; Clamp patch 8

12 长 QT 综合征致病基因的检测及新突变位点功能学与临床表型分析北京大学医学部内科学 ( 心血管病 ) 博士研究生孙雅逊导师郭继鸿教授第一部分长 QT 综合征家系的收集及临床特点分析研究背景遗传性长 QT 综合征 (LQTS) 是一种遗传性心肌离子通道疾病, 表现为心电图上 QT 间期延长, 易于发生尖端扭转型室速 (Torsades de pointes, Tdp) 室 1, 颤等恶性室性心律失常, 从而发生晕厥甚至猝死等心脏事件 2 近年来研究发现,LQTS 是由 Na + K + Ca 2+ 通道或通道相关蛋白的突变所引起 3-6 这些突变使心肌复极过程延长, 心肌各层及不同区域间复极不一致, 从而使早后除极及折返现象易于出现, 引起多形性室速甚至恶化为室颤 7 LQTS 根据发现的突变基因不同而分为不同亚型, 目前已发现 12 个亚型, 分别命名为 LQT1~LQT12 在欧美人群中 LQT1 最为常见, 其次为 LQT2, 二者约占全部 LQTS 患者的 90% 以上,LQT3 占 5%~8% 左右 8 中国人 LQTS 患者以 LQT2 更为常见 LQTS 各亚型的致病基因临床事件的发生率发作的诱因治疗及预后都不尽相同, 正确诊断 LQTS 的亚型对 LQTS 的治疗及预后有较为重要的意义目前根据病史心脏事件发作情况及体表心电图等临床资料来对典型的 LQTS 患者进行分型已经有了重要进展, 具有较高的准确性和特异性 Zhang 9 等人的研究证实体表心电图诊断 LQTS 的准确性和 / 特异性分别为 :LQT1 85%/70%,LQT2 83%/94%,LQT3 47%/63% 但对于不典型的 LQTS 患者, 仅凭 ECG 及临床病史进行分型有一定困难同时, 一部分 LQTS 患者可能在多个相关基因上存在突变, 称之为复合突变 (Compound mutation), 这些患者的临床和心电图表现可能多种多样, 家族遗传模式也可能不典型因此在诊断 LQTS 时应增加对不同临床表现形式的认识, 提高诊断的准确性, 以进行更为有效和有针对性的治疗 9

13 本研究对临床诊断或疑诊为 LQTS 的患者进行临床资料和 ECG 特点的进行分析, 并针对初步的诊断及不同亚型进行相应的治疗, 对本研究收集的 LQTS 家系进行临床特点的讨论 1. 资料和方法方 1.1 LQTS 家系临床资料的收集临床诊断或疑诊为 LQTS 的先证者, 经过门诊或住院治疗, 收集其先证者及家系的临床资料, 进行 12 导联体表心电图超声心动图动态心电图运动试验及血电解质检查签署知情同意书后进行家族相关资料收集对每位参与者进行临床病史的采集每位家族成员者抽取 10 ml 静脉血, 应用 EDTA 抗凝后保存于 -20 及 -80,DNA 及 cdna 提取后保存于 -20,RNA 提取后保存于 -80 每半年对家族成员进行门诊或电话随访 1.2 LQTS 患者临床诊断危险分层治疗与随访临床诊断临床诊断根据 Schwartz 标准进行评分, 评分 4 分认为高度可能的 LQTS ( 见表 1) 表 1 LQTS 诊断评分表诊断依据评分 a 心电图 A QTc b 480ms 3 460ms~470ms 2 450ms( 男 ) 1 B Tdp c 2 C T 波切迹 ( 至少三个导联 ) 1 D T 波电交替 1 E d 心动过缓 0.5 临床表现家族史 A 晕厥 c : 与体力或精神紧张有关 2 与体力或精神紧张无关 1 B 先天性耳聋 0.5 A e 家族中有确定的 LQTS 患者 1 B 直系亲属中有 30 岁以下发生不明原因的心脏性猝 0.5 e 死注 :a. 在没有药物和代谢紊乱干预下 ;b. Bazett s 公式计算方法为 :QTc = QT / RR;c. 晕厥和尖端扭转不能同时参与评分 ;d. 静息心律低于同龄正常值 2 个百分位数 ;e. 同一家族成员不能同时用家族史 A B 两项评分评分 <1 表示低概率 ; 1< 评分 <4 表示中等概率 ; 评分 4 表示高概率 ( 明确诊断 ); 法 10

14 1.2.2 ECG 分析采用 Bazett s 公式测量体表 ECG 上 QTc 间期,QTc 间期测量采用标准肢体 II 导联, 从 QRS 起始处开始测量到 T 波回落至等电位线处如 II 导联 T 波不清楚, 则测量 V5 导联 QTc 间期 T 波与 U 波重叠或难以分辩时, 参照多个导联以确定 T 波终点根据患者临床表现及 ECG 上 ST-T 形态进行 LQTS 亚型的初步判断危险分层根据 Priori 危险分层方法进行 11, 同时参考 QTc 性别年龄心脏事件发作及家族成员情况家族遗传模式分析第一步, 若系谱中有血缘关系的男性全是患者, 表现为父传子, 子传孙, 无一例外, 而女性全部正常, 判断为 Y 连锁遗传病第二步, 若系谱中出现患者的双亲之一是患者, 并表现为连续遗传的现象 ; 而当双亲无病时, 子代也全部正常, 判断为显性遗传病查第三步反之, 当双亲都正常时, 子女也可能出现患者, 判断为隐性遗传病查第四步第三步, 若系谱中女性患者多于男性患者, 并且男性患者的女儿全部是患者, 儿子全部正常 ; 女性患者的子女可能是患者, 也可能正常, 判断为 X 连锁显性遗传病若系谱中男性与女性发病机会均等, 即致病基因的遗传与性别无关, 为常染色体显性遗传病第四步, 若系谱中男性患者远多于女性患者, 常常只能见到男性患者, 不见或罕见女性患者, 并且有交叉遗传现象, 判断为 X 连锁隐性遗传病男性与女性发病机会均等, 且系谱中患者的分布是散发的, 并且有近亲结婚发病率增高的现象, 判断为常染色体隐性遗传病, 代表 QTc 延长者,, ECG 正常的家族成员,, 表示没有 ECG 资料者,, 死亡的家族成员, 先证者 (+)(-) 分别表示基因检测阳性及阴性数字代表 ECG 上 QTc 间期分析家族遗传模式时同时考虑到可能有非孟德尔式遗传及不完全外显等可能血电解质分析对所有患者进行血电解质分析, 包括 Na +, K +, Cl, Ca 2+ 的检测检测方法按临床常规检查进行患者治疗根据患者的临床表现检查结果及 LQTS 亚型分析进行常规治疗, 包括生活方式的改变药物治疗及 LCSD 药物治疗包括 β 受体阻滞剂钾及美西律等 β 受体阻滞剂首选普萘洛尔, 初始剂量为 1mg/kg 体重, 目标剂量为 2mg/kg 体重或最大耐受剂量, 其他可选择药物为美托洛尔或缓释型美托洛尔对诊断不明确的患者同时服用美西律 50mg,tid 根据血钾情况适当口服补钾 0.5~1 g/d, 每个月复查血钾一次, 如血钾低于 4.0 mmol/l 时继续口服钾剂治疗综合考虑 11

15 多方面因素后对部分患者进行 LCSD 治疗, 术后仍辅以药物治疗随访每半年进行电话或门诊随访, 随访内容包括患者及家族成员是否有晕厥发作心电图,Holter, 血电解质检查, 必要时复查超声心动图 2. 统计学分析计量资料以均数 ± 标准差表示利用 SPSS 17.0 软件处理数据, 多组间均数的比较采用方差分析, 有显著差异者用 LSD 检验, 两组间均数的比较采用独立样本 t 检验 P<0.05 为差异有统计学意义结果 1. LQTS 患者家系基本临床资料诊断治疗及随访结果共对 12 个 LQTS 家系进行了详细的临床资料收集及分析 12 名先证者中 9 女 3 男, 平均年龄 21.3 岁 (9~66 岁 ) 临床诊断 LQT2 共 10 名,LQT1 共 1 人, LQT3 共 1 人先证者 1: 男,9 岁, 汉族, 主因 2 月前晕厥一次来诊患者 2 月前于下车后行走约 20 米, 突然晕倒, 当时呼之不应, 双目凝视, 口唇青紫, 尿失禁患儿父亲立即给予人工胸外按压抢救后患儿神志恢复恢复后无特殊不适后就诊于当地医院,ECG 示 QT 间期延长, 后按心肌炎治疗约 2 周 ( 具体用药不详 ) 出院后又于外院行 ECG 示 QT 间期延长, 未行特殊处理心肌酶谱检查正常自发病以来, 无夜间阵发性呼吸困难, 无双下肢水肿 ; 精神食欲尚可, 大小便正常, 睡眠尚可既往体健, 无紫绀及晕厥史家系图见图 1A 辅助检查 : 患者标准 12 导联心电图示窦性心律, 电轴不偏,QTc 470~533 ms,st-t 在多个导联表现为低平双峰, 见图 1B; 心脏超声 Holter 及 MRI 检查无明显异常其父亲标准 12 导心电图示 QTc = 526 ms, 无晕厥史患者母亲心电图无异常改变其母亲的直系家属中无类似症状发作初步诊断为 LQT 2 型根据 Schwartz 评分, 该患者评分为 6 分, 考虑为高度可能的 LQTS Priori 危险分层为低危患者服用心得安治疗, 剂量为 1mg/kg 体重随访 23 个月, 未再发作晕厥 12

16 A B: 图 1 A: 先证者 1 家系图家族中无明确心脏性猝死史共 6 名成员表现为 QTc 延长 B: 先证者 1 心电图, 多个导联出现 T 波低平,QTc 间期 533 ms, 当时血钾 3.8 mmol/l 经补钾治疗后复查, 心电图 QTc 波动于 470~500 之间 13

<4D6963726F736F667420576F7264202D20ECFAD0C0D0C0C2DBCEC4CCE1BDBB6F7665722E646F63>

<4D6963726F736F667420576F7264202D20ECFAD0C0D0C0C2DBCEC4CCE1BDBB6F7665722E646F63> 硕士专业学位论文论文题目鲍温病临床病理特征和几种治疗方法比较的分析研究研究生姓名指导教师姓名禚欣欣康定华专业名称皮肤性病学研究方向皮肤肿瘤与皮肤病理论文提交日期 2013 年 4 月 I 鲍温病临床病理特征和几种治疗