检验科生化室简介

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1 临床检验通讯 2016 年 第 2 期 2016 年 08 月 02 日 主 办 检 验 科 主 编 :陈 葳 微生物室组合项目介绍 副 主 编 :王 亚 文 组成检测条 此检测项目敏感性是 86% 特异性 为了方便临床医生开具检验单 也为了方便患 为 94% 者留取标本 1 份标本检测多种项目 已现开展 2. 标本要求 了 4 个项目组合 1 尿液 用于肺炎诊断 1. 血培养双侧双套组合 尿液样本 2ml 尿常规用螺口带盖试管 包括 血培养及鉴定 2 +厌氧菌培养及鉴定 2 将尿液收集在标准容器中 如果 24 小时内测定 2. 脑脊液病原学四项 室温保存 此外 将尿液在 2-8 保存 包括 隐球菌抗原检测+特殊细菌涂片检查 新型 或冷冻保存 可存放 14 天 硼酸可用作防腐剂 隐球菌 +一般细菌涂片检查+结核菌涂片检查 必要时可将尿液标本用防漏容器在 2-8 或冷冻条 3. 一般细菌培养+涂片组合 血培养除外 件下运送 包括 一般细菌培养及鉴定+一般细菌涂片检查 2 脑脊液 用于脑膜炎诊断 4. 痰涂片 3 项组合 脑脊液 1ml 无菌试管 包括 一般细菌涂片检查+结核菌涂片检查+真菌 根据标准程序收集脑脊液 测试前脑脊液在室 涂片检查 温 只能贮存 24 小时 冷藏 2-8 感染快速检测项目介绍 或冷冻 -20 可贮存至 1 周 一 肺炎链球菌抗原检测 注 所有标本均要室温 轻轻旋匀 1.检测原理 3.临床意义 肺炎链球菌抗原检测是一种薄膜免疫层析试 肺炎链球菌是肺炎的常见病原 主要感染儿童 验 用于检测人类尿液和脑积液中肺炎球菌的可溶 和老年人 近年来 肺炎链球菌对抗生素的耐药性 性抗原 兔抗肺炎链球菌抗体被吸附到硝酸纤维素 也日益流行 给临床治疗带来困难 通过检测尿液 膜上作为样本线 对照抗体作为另一条线吸附到同 中肺炎链球菌抗原 C多糖抗原 对肺炎链球菌肺 一膜上 结合有可视粒子的兔抗肺炎链球菌抗体和 炎进行诊断 具有较高的灵敏度和特异度 同时尿 抗种抗体干燥结合到惰性带条纹的膜结合到一起 液标本留取方便 此外 可以对脑脊液进行检测用 1

2 于诊断肺炎链球菌性脑膜炎 心 呕吐 脑膜刺激征一般较明显 锥体束征多较 4. 注意事项 轻 且出现较晚 使用过肺炎链球菌疫苗后 48h 内可能造成假阳 2 肺隐球菌病-呼吸科 性结果 疫苗对肺炎球菌脑膜炎患者的影响未做确 肺部是隐球菌侵入的门户 原发性肺部感染一 定 因此 建议使用肺炎链球菌疫苗后 5 天内不要 般症状较轻 约有 1/3 病例无症状 又有自愈倾向 进行肺炎链球菌检测 初发常有上呼吸道感染的症状 继而表现为支气管 二 隐球菌抗原检测 肺炎 可有咳嗽 咳痰 胸部隐痛 痰中可有大量 1.检测原理 菌体 支气管灌洗液的培养或乳胶凝集试验阳性率 隐球菌抗原检测试剂盒 胶体金免疫层析法 较高 3 皮肤黏膜隐球菌病-皮肤科 应用免疫层析方法对血清 血浆 全血 静脉血和 末梢血 和脑脊液中隐球菌多个种属(包括新型隐 10% 15%的隐球菌病患者出现皮肤损害 原 球菌和哥特隐球菌)的荚膜多糖抗原进行定性或半 发型较为少见 继发型多由系统性感染经上行播散 定量检测 而来 2.样本要求 4 免疫缺陷人群-感染科 器官移植科 ICU 等 样本类型 脑脊液 血浆和血清样本 新型隐球菌作为一种机会性感染真菌 主要侵 取样量 脑脊液至少 1ml 血液样本至少 2ml 犯免疫缺陷人群 如器官移植患者以及 AIDS 患者 及时送检 及使用免疫抑制剂人群等 3.临床意义 5 儿童脑膜炎-儿科 1 可在隐球菌感染初期即能够实现诊断 大幅度 儿童由于免疫系统不健全 也容易被隐球菌感 降低病死率 染 一般儿童的脑脊液样本都会做隐球菌筛查 2 同时可提供准确可靠的检测结果 指导临床医 6 其他部位的隐球菌病 生正确合理用药 骨和关节以及前列腺 肝 脾 淋巴结等组织 3 通过快速 半定量检测 及时反映病情 有助 和器官均可受累 但都较为少见 或常伴发于中枢 于药效评价及预后 神经系统隐球菌病及肺隐球菌病 4.适用科室 三 真菌 (1-3)-β-D-葡聚糖检测 G 实验 1 中枢神经系统隐球菌病-神经内科 1.检测原理 真菌 (1-3)-β-D-葡聚糖能特异性激活反应主剂 隐球菌侵犯中枢神经系统最常见 可呈急性 亚急性或慢性过程 表现为脑膜炎的症状 体征 中的 G 因子 凝固酶原等发生酶的反应从而引起 起病多较缓 开始可为上呼吸道感染症状 轻度头 吸光度的变化 据此进行定量 痛 低热 体温波动在 后头痛逐渐 2.样本要求 加重 少数也可开始即出现剧烈头痛 高热 伴恶 用专用的无热原真空采血管 可与细菌内毒素检 2

3 测共用同一血标本 确保使用试管等器具无菌 志 无热原 静脉采血 4ml 抽血后 2h 内送检 常规 2 血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高 将其用 病人早上用药治疗前采血/取样 血透患者透析前 于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法 采血 和血清学诊断试验 虽然检测 1-3 -β-d 葡聚糖 3.影响因素 只能提示有无真菌侵袭性感染 不能确定为何种真 产生假阳性的原因 菌 但也可能转化为一种优势 因近年来 一些罕 1 使用白蛋白 免疫球蛋白等静脉制剂 见的条件致病真菌也可引起深部感染 这就要求一 2 阿莫西林/克拉维酸等抗生素 种能迅速确定有无深部真菌感染的方法 因系统抗 3 铜绿假单胞菌 细菌菌血症的患者 真菌药物种类较少 抗菌谱较广 且不因真菌种类 4 多发性骨髓瘤患者 而异 当检测到标本中的 1-3 -β-d 葡聚糖含量 5 血液透析用纤维素膜 较高时 可给予以系统治疗 不必耗时等待鉴定出 4.结果解读 种属 否则会贻误最佳治疗时机 结果 阴性值 阈值范围 小于 60pg/ml 结果判读 四 细菌内毒素检测 无宿主因素和临床表现-排除感染 1.检测原理 存在宿主因素 72 小时再次检测 通过对内毒素与反应主试剂中的相应 C 因子形 有宿主因素和/或临床表现 6-24 小 阳性值 灰色区间 大于 时复查确认 动态监测一周两次 100pg/ml 如不具备宿主因素和侵袭性真菌 成凝固蛋白过程的动态检测 对内毒素浓度进行定 感染临床症状也不要轻易诊断 量分析 pg/ml 结合临床动态观察 48 小时后检测 2.样本要求 5.临床意义 1 血标本 用专用的无热原真空采血管 可与 G 1 真菌 (1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌 实验共用一个血标本 静脉采血 4ml 抽血后 细胞壁的抗原成分 其它微生物 动物及人的细胞 2h 内送检 若不能及时检测 应将血清转移至无 成分和细胞外液均不含有 深部真菌感染患者中血 热原转移管内 在-20 冰箱中冷冻保存 一周内 浆 (1-3)- β -D- 葡 聚 糖 含 量 增 高, 两 者 存 在 相 关 使用 性 当真菌进入人体血液或深部组织后 经吞噬 2 透析液 透析用水 需用无热源转移管或注射 细胞的吞噬 消化代谢后 1-3 -β-d 葡聚糖可 器等无热源容器存放标本 从胞壁中释放出来 从而使血液或其它 体液中 3.临床意义 1-3 -β-d 葡聚糖含量增高 当真菌在体内含量 作为革兰阴性菌细胞壁包层中的脂多糖成份 减少时 机体免疫可迅速对其清除 而在浅部真菌 具有多种的生物活性 微量的内毒素进入机体将会 感染中 1-3 -β-d 葡聚糖未被释放出来 故其 出现发热 血压降低 寒颤 引起 DIC 内毒素败 在体液中的量不增高 它在血液及无菌体液中的存 血症等一系列临床反应 因此内毒素快速定量检 在可以很大程度上视为 IFI 深部真菌感染 的标 测 将对临床对症治疗具有很深的现实意义 人体 3

4 4.可能导致假阳性的影响因素: 血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染 具有重要的参考价值 尤其对重症病人 感染病人 在某些情况下 新生儿 多发性损伤 烧伤 以及其他有严重创伤等疾病的病人均有更为重要 大型手术 延长或严重的心源性休克 降钙素原 的临床意义 检测血浆内毒素含量有助于早期判断 PCT 的升高可能与感染无关 通常很快回到正 感染类型及是否存在内毒素血症 有利于临床及早 常值 病毒感染 变态反应 自身免疫疾病和移植 诊治疾病 排斥不会引起降钙素原 PCT 显著升高 4.结果解读(血标本) 5.降钙素原的临床应用: 结果 阈值范围 结果判读 阴性值 小于 10pg/ml 阴性 存在宿主因素 72 小时再次检测 阳性值 大于 20pg/ml 灰色区间 10-20pg/ml 建议再次采血以确诊并且结合临床症 1 估脓毒血症严重程度 2 预测患者抗感染治疗的疗效 状综合诊断 临床观察期 建议动态采血检测 5. 影响因素 产生假阳性的影响因素 1 应用纤维膜进行血液透析的患者 2 某些纱布或医疗物品中含有葡聚糖 3 某些品牌的静脉制剂 白蛋白 凝血因子 免 疫球蛋白等 4 使用某些含有热源的器具存放放标本等 六 艰难梭菌检查--艰难梭菌感染毒素检测 五 降钙素原 PCT 检测 1.概述: 1.降钙素原概述 艰难梭菌是自然出现 形成孢子的革兰氏阳性 自 1993 年首次报道血清降钙素原水平与细菌 厌氧杆菌 广泛存在于土壤和动物肠道内 艰难梭 感染有关以来 各类研究表明 PCT 正在越来越 菌相关性疾病 CDAD 目前被定义为抗生素治疗 多地被认为是细菌感染和脓毒症的良好的特异性 诱导的院内感染 为导致腹泻和结肠炎的重要原因 标记物 从而成为临床诊断中的一个重要工具 对 之一 临床约 20%抗生素相关性腹泻由艰难梭菌 于细菌感染和脓毒症 尤其是使用高灵敏度 全定 产毒素引起 由于产生的孢子使细菌具有耐热 耐 量 PCT 检测不仅可以进行早期的诊断 提高临床 干燥 以及多种化学物质 包括消毒剂 等特性 对细菌感染诊断的准确性 因此极易造成院内爆发感染流行 2.检测原理: 2.艰难梭菌毒素检测方法学: 采用 ELFA(酶联免疫荧光法) 艰难梭菌 AB(CDAB)检测试剂采用酶联荧光免 3.样本要求 疫分析技术 (ELFA) 对大便标本中的艰难梭菌毒 标本类型 血清(红帽管) 2-3ml 随时送检 素 AB 进行定性检测 协助诊断艰难梭菌相关性疾 4

5 病(CDAD) 二 耐药性分析 3.标本采集要求 分离数量位于前十位的细菌的耐药性数据分析 新鲜大便样本 1 小时内 及时送检 如下图 根据统计分析 我院耐药形势依然严峻 送检实验室及时间 微生物室 送检周一至周五 多重耐药菌检出率具体见下表 2016 年第 2016 年第 年第 2 季 2 季度 季度检出 度检出率% 检出率% 率% 上季 去年同季 耐药类型 本季度 度 度 下情况的腹泻(一天三次以上腹泻)患者应进行艰 CRE 大肠杆菌 难梭菌检查+ 艰难梭菌 A&B 毒素检测 高危人群 CRE 肺炎克雷伯 CR-PA CR-AB MRSA 屎肠 2.9 屎肠 2 屎肠 0 粪肠 0 粪肠 3.4 粪肠 时间 报告时间 当日 4.抗生素相关性腹泻的送检指征: 实验室诊断以有症状疾病作为检测标准 对以 菌 包括 1 长期使用抗生素的人 克林霉素 氨苄西林 阿莫西林 头孢类抗生素和氟喹诺酮类药物与 CDI 风险增加最为相关 VRE 2 长时间停留在医疗机构中的人 注 3 老年人 65 岁 CRE 耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌 4 有严重基础疾病的人 CR-PA 耐碳氢霉烯类铜绿假单胞菌 5 免疫缺陷的人 CR-AB 耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌 细菌耐药监测 MRSA 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 一 细菌分布 VRE 耐万古霉素肠球菌 2016 年第 2 季度我院共送检 份标本 分 离出非重复病原菌 2611 株 分离率 18.67% 其中 肠杆菌科细菌 972 株 占 37.23% 非发酵菌 524 株 占 20.07% 葡萄球菌属 302 株 占 11.57% 肠球菌属 341 株 占 13.06% 念珠菌 170 株 占 6.51% 其中分离数量位于前十位的细菌为大肠 埃希菌 肺炎克雷伯菌 屎肠球菌 鲍曼不动杆菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 白色念珠菌 嗜 麦芽窄食单胞菌 粪肠球菌 表皮葡萄球菌 细菌 分布与上季度相比 大肠埃希菌依然位于首位 其 余细菌分布变化不大 见下图 5

6 6

7 4.感染科细菌分布 三 重点科室 2016 年 1-6 月份细菌分布 1.肝胆外科细菌分布 5.呼吸 RCU 细菌分布 2.神经外科细菌分布 6.肾移植科细菌分布 3.中心 ICU 细菌分布 7.神内 ICU 细菌分布 7

8 8.血液内科细菌分布 9.新生儿科细菌分布 责任编辑 雷金娥 曾晓艳 马晨 8

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