目 录 1 真 菌 真 菌 的 定 义 真 菌 的 分 类 真 菌 的 特 性 真 菌 病 真 菌 病 的 概 念 真 菌 感 染 性 疾 病 的 分 类 (1,3)-β-D 葡 聚 糖...4

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1 侵 袭 性 真 菌 感 染 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 定 量 检 测 鲎 试 验 指 南 因 专 业 而 崛 起, 因 专 注 而 发 展 以 信 誉 赢 得 尊 重, 以 品 质 求 得 市 场 厦 门 市 鲎 试 剂 实 验 厂 有 限 公 司 Chinese Horseshoe Crab Reagent Manufactory, CO., Ltd., Xiamen.China

2 目 录 1 真 菌 真 菌 的 定 义 真 菌 的 分 类 真 菌 的 特 性 真 菌 病 真 菌 病 的 概 念 真 菌 感 染 性 疾 病 的 分 类 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 本 质 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 特 点 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 检 测 的 意 义 鲎 试 验 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 意 义 鲎 试 验 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 特 点 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 鲎 试 验 检 测 的 机 理 鲎 试 验 定 量 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 反 应 机 理 ELx808 IU 检 测 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 原 理 鲎 试 验 定 量 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 配 套 设 备 及 试 剂 微 生 物 检 测 系 统 Elx808( 配 套 IU) 微 生 物 检 测 系 统 Elx808 的 适 用 范 围 微 生 物 检 测 系 统 Elx808 的 特 点 鲎 试 验 专 业 分 析 软 件 :TALgent TALgent Mini-T 微 型 便 携 式 干 式 恒 温 仪 鲎 试 剂 (TAL) 实 验 过 程 标 准 曲 线 的 建 立 样 本 检 测 真 菌 葡 聚 糖 检 测 配 套 耗 材

3 1 真 菌 1.1 真 菌 的 定 义 真 菌 (fungus) 是 一 种 真 核 细 胞 微 生 物 细 胞 结 构 比 较 完 整, 有 细 胞 壁 和 完 整 的 核, 不 含 叶 绿 素, 无 根 茎 叶 的 分 化, 少 数 为 单 细 胞, 大 多 为 多 细 胞, 由 丝 状 体 和 孢 子 组 成 真 菌 种 类 繁 多, 有 10 余 万 种, 大 多 对 人 体 无 害, 有 的 甚 至 有 益, 但 有 些 真 菌 能 引 起 人 类 畜 禽 和 鱼 类 疾 病, 其 中 一 些 霉 菌 还 产 生 毒 素, 直 接 或 间 接 地 危 害 人 类 和 动 物 的 健 康 主 要 真 菌 病 有 曲 霉 菌 病 念 珠 菌 病 冠 癣 及 黄 曲 霉 毒 素 所 致 的 中 毒 等 1.2 真 菌 的 分 类 表 1 真 菌 的 分 类 侵 害 人 体 部 位 真 菌 分 类 菌 属 菌 种 肺 肝 脾 肠 心 脑 膜 淋 巴 结 骨 口 鼻 粘 膜 阴 道 皮 肤 指 甲 白 色 念 珠 类 酵 母 菌 念 珠 菌 属 菌 酵 母 菌 类 隐 球 菌 属 新 隐 球 菌 球 孢 子 菌 属 组 织 胞 浆 菌 属 孢 子 丝 菌 二 相 真 菌 属 芽 生 菌 属 地 丝 菌 属 厌 酷 球 孢 子 菌 荚 膜 组 织 胞 浆 菌 申 克 氏 孢 子 丝 菌 皮 炎 芽 生 菌 白 色 地 丝 菌 霉 菌 类 曲 霉 菌 属 烟 色 曲 霉 菌 丝 状 菌 毛 霉 菌 属 丛 生 毛 霉 菌 + + 青 霉 菌 属 某 些 青 霉 菌 真 菌 的 特 性 生 长 条 件 为 温 度 22 ~36, 湿 度 95%~100%,pH 5~6.5 不 耐 热,100 时 大 部 分 真 菌 在 短 时 间 内 死 亡, 但 低 温 条 件 下 可 长 期 存 活 紫 外 线 和 X 射 线 均 不 能 杀 死 真 菌, 甲 醛 石 炭 酸 碘 酊 和 过 氧 乙 酸 等 化 学 消 毒 剂 均 能 迅 速 杀 灭 真 菌 抗 真 菌 药 物 对 孢 子 作 用 弱, 需 要 症 状 消 失 后 持 续 用 药 一 段 时 间 1

4 2 真 菌 病 2.1 真 菌 病 的 概 念 由 真 菌 引 起 的 疾 病 称 为 真 菌 病 主 要 分 为 念 珠 菌 病 隐 球 菌 病 曲 菌 病 毛 霉 菌 病 及 放 线 菌 病 等, 尤 其 是 深 部 真 菌 感 染, 目 前 在 临 床 上 的 发 病 率 出 现 了 逐 渐 增 加 的 趋 势, 近 年 来, 临 床 上 随 着 广 谱 抗 生 素 激 素 和 免 疫 抑 制 剂 以 及 各 种 导 管 插 管 等 治 疗 手 段 的 广 泛 应 用, 其 患 者 的 菌 群 分 布 发 生 了 很 大 变 化, 真 菌 引 起 的 感 染 越 来 越 多, 尤 其 是 深 部 真 菌 感 染 的 发 病 率 日 渐 增 高, 另 外 对 于 免 疫 功 能 低 下 患 者, 如 HIV 感 染 者, 糖 尿 病 患 者, 外 科 大 手 术 术 后 患 者 等, 也 易 发 生 深 部 机 会 性 真 菌 感 染 其 中, 病 原 菌 多 以 念 珠 菌 为 主, 感 染 部 位 以 下 呼 吸 道 为 主 深 部 真 菌 感 染 对 患 者 的 健 康 与 生 命 构 成 严 重 威 胁 2.2 真 菌 感 染 性 疾 病 的 分 类 浅 部 真 菌 病 浅 部 真 菌 病 简 称 为 癣 皮 肤 癣 菌, 其 特 点 是 亲 角 质 蛋 白, 侵 犯 人 和 动 物 的 皮 肤 毛 发 甲 板, 引 起 的 感 染 统 称 为 皮 肤 癣 菌 病, 简 称 癣 多 数 按 发 病 部 位 命 名, 少 数 按 皮 损 形 态 的 传 统 命 名 皮 肤 癣 菌 病 为 接 触 传 染 深 部 真 菌 病 深 部 真 菌 病 是 指 侵 害 皮 肤 粘 膜 和 内 脏 的 真 菌 所 引 起 的 感 染 病 原 菌 的 种 类 有 很 多 种 这 些 病 原 菌 广 泛 存 在 于 土 壤 动 物 粪 便 乳 汁 中, 主 要 通 过 接 触 污 染 的 土 壤 或 经 呼 吸 道 消 化 道 而 感 染, 只 有 少 数 真 菌 具 有 接 触 传 染 性 深 部 真 菌 病 可 发 生 于 体 内 各 脏 器, 其 病 变 特 征 是 : 肉 芽 肿 性 炎 症 坏 死 脓 肿 溃 疡 瘘 管 结 缔 组 织 增 生 和 形 成 结 节 饲 料 中 广 泛 添 加 抗 菌 药 物, 可 能 是 发 生 深 部 真 菌 病 的 重 要 原 因 诱 发 深 部 真 菌 病 的 因 素 真 菌 一 般 不 产 生 外 毒 素, 其 致 病 作 用 可 能 与 真 菌 在 体 内 繁 殖 引 起 的 机 械 性 损 伤 以 及 所 产 生 的 酶 类 酸 性 代 谢 产 物 有 关 目 前, 诱 发 深 部 真 菌 病 的 因 素 有 : (1) 慢 性 消 耗 性 疾 病, 如 恶 性 肿 瘤 糖 尿 病 和 尿 毒 症 等, 可 使 机 体 免 疫 功 能 和 抵 抗 力 降 低 (2) 长 期 使 用 广 谱 抗 生 素, 敏 感 的 细 菌 被 抑 制, 消 除 了 正 常 菌 群 中 与 真 菌 相 拮 抗 的 细 菌, 使 真 菌 得 以 大 量 繁 殖 有 些 抗 生 素 可 促 进 某 些 真 菌 的 生 长 2

5 (3) 肾 上 腺 皮 质 激 素 可 抑 制 炎 症 反 应 和 纤 维 细 胞 增 生, 并 可 稳 定 细 胞 内 溶 酶 体 的 膜, 阻 止 其 中 酶 的 释 放, 进 而 影 响 中 性 粒 细 胞 和 巨 噬 细 胞 溶 解 杀 灭 微 生 物 的 作 用 (4) 大 剂 量 X 线 照 射 抗 肿 瘤 药 物 和 免 疫 抑 制 剂 都 能 抑 制 骨 髓, 使 中 性 粒 细 胞 和 巨 噬 细 胞 减 少, 机 体 的 免 疫 功 能 和 抵 抗 力 降 低 (5) 治 疗 用 长 时 间 静 脉 插 管, 留 置 导 尿 管 和 大 手 术, 可 引 起 局 部 损 伤, 成 为 真 菌 侵 入 的 门 户, 在 机 体 抵 抗 力 低 落 时 从 而 在 体 内 繁 殖 致 病 深 部 真 菌 感 染 的 特 点 a. 真 菌 感 染 时 一 搬 不 产 生 内 毒 素 和 外 毒 素, 致 病 机 理 不 明 b. 真 菌 感 染 时 致 病 力 一 般 较 弱, 大 都 情 况 是 随 机 体 免 疫 低 下 时 发 生 c. 感 染 菌 种 的 变 化, 白 念 珠 菌 感 染 率 下 降 ; 热 带 念 珠 菌, 近 平 滑 念 珠 菌, 克 柔 念 珠 菌, 光 滑 念 珠 菌 等 感 染 率 增 多 d. 真 菌 感 染 早 期 症 状 无 特 异 性, 往 往 被 原 发 病 掩 盖, 病 程 长, 发 现 较 晚, 死 亡 率 高, 真 菌 感 染 病 学 中 写 到, 真 菌 院 内 感 染 死 亡 率 为 90% 条 件 性 致 病 性 真 菌 种 类 念 珠 菌 病, 曲 霉 病, 隐 球 菌 病 等, 其 多 侵 染 免 疫 功 能 受 损 的 宿 主 细 胞 常 见 于 引 起 IFI 的 病 原 菌 深 部 真 菌 感 染 诊 治 中 的 问 题 a. 深 部 真 菌 感 染 发 病 率 增 加, 尤 其 在 重 症 加 强 治 疗 病 房 (ICU) 患 者 b. 误 诊 率 高 : 1984 年 ~ 1997 年, 医 院 深 部 真 菌 误 诊 率 30%, 美 国 Muglistom1985 年 耳 真 菌 病 误 诊 率 为 90% c. 真 菌 感 染 与 院 内 感 染 关 系 密 切, 美 国 80 年 代 末 真 菌 感 染 占 院 内 感 染 的 10% d. 危 险 因 素 较 多 如 : 年 龄, 肿 瘤, 移 植, 抗 生 素, 激 素 等 e. 抗 真 菌 药 物 品 种 少, 价 格 贵, 因 副 作 用 大 而 难 以 预 防 用 药, 耐 药 显 现 多 等 问 题 f. 没 有 指 导 临 床 用 药 的 可 靠 指 标 深 部 真 菌 感 染 的 临 床 检 测 a. 直 接 方 法 : 是 组 织 或 渗 出 物 中 可 分 离 培 养 出 致 病 真 菌 特 点 : 耗 时 长, 3

6 并 由 于 大 量 广 谱 抗 生 素 的 广 泛 使 用, 其 培 养 阳 性 率 也 是 很 低 b. 辅 助 方 法 : 临 床 表 现, 免 疫 学, 病 理 学, 影 像 学 检 查 等 特 点 : 观 察 期 不 确 定, 费 时 费 力, 特 征 性 不 明 显, 并 对 医 师 的 专 业 水 平 要 求 高 c. 鲎 试 验 : 通 过 检 测 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 含 量, 判 断 是 否 有 真 菌 感 染, 耗 时 短, 灵 敏 度 高, 特 异 性 强 ( 关 于 鲎 试 验 检 测 真 菌 感 染 的 优 点 在 4.2 将 详 细 说 明 ) d.gm 实 验 : 曲 霉 属 半 乳 甘 露 聚 糖 抗 原 检 测 判 断 是 否 曲 霉 属 真 菌 感 染 e. 真 菌 的 抗 原 抗 体 及 代 谢 产 物 的 血 清 学 检 查 和 真 菌 核 酸 检 测 (PCR 技 术 ) 3 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 图 1 真 菌 细 胞 壁 结 构 图 3.1 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 本 质 葡 聚 糖 广 泛 存 在 于 真 菌 细 胞 壁 中, 占 其 干 燥 重 量 的 80%-90% 其 中 (1,3)- β-d 葡 聚 糖 占 真 菌 壁 成 分 50% 以 上, 是 真 菌 细 胞 壁 上 的 特 有 成 分, 其 形 式 以 (1,3) -β- 糖 苷 键 连 接 的 葡 萄 糖 残 基 骨 架 作 为 主 链, 分 支 状 (1,6)-β-D 葡 萄 糖 残 基 作 为 侧 链 4

7 3.2 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 特 点 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 对 热 极 为 稳 定, 高 压 121 并 不 能 使 其 灭 活 在 念 珠 菌 和 曲 霉 菌 细 胞 壁 中 含 量 较 多, 对 鲎 试 验 灵 敏, 而 隐 球 菌 中 含 量 较 少, 则 需 要 较 高 灵 敏 度 的 鲎 试 剂 才 能 检 出 当 真 菌 进 入 人 体 血 液 或 深 部 组 织 后, 经 吞 噬 细 胞 的 吞 噬 消 化 等 处 理 后,(1,3)-β-D 葡 聚 糖 可 从 胞 壁 中 释 放 出 来, 从 而 使 血 液 及 其 它 体 液 中 含 量 增 高 当 真 菌 在 体 内 含 量 减 少 时, 机 体 免 疫 系 统 可 将 其 清 除 在 浅 部 真 菌 感 染 中,(1,3)-β-D 葡 聚 糖 未 被 释 放 出 来, 故 其 在 体 液 中 的 量 不 增 高 4 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 检 测 的 意 义 4.1 鲎 试 验 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 意 义 a. 真 菌 在 自 然 界 中 分 布 很 广, 其 细 胞 壁 主 要 成 分 为 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 b. 深 部 真 菌 感 染 : 是 指 侵 犯 机 体 皮 下 组 织, 内 脏 器 官 及 中 枢 神 经 系 统 的 真 菌 性 疾 病 c. 目 前, 深 部 真 菌 感 染 已 成 为 免 疫 功 能 低 下 患 者 发 病 和 死 亡 最 常 见 的 原 因 常 见 有 念 珠 菌 病 孢 子 丝 菌 病 隐 珠 菌 病 曲 霉 病 毛 霉 菌 病 马 尔 尼 菲 青 霉 菌 病 组 织 孢 浆 菌 病 以 及 球 孢 子 副 球 孢 子 菌 病 等 临 床 病 症 d. 当 真 菌 进 入 人 体 血 液 或 深 部 组 织 后, 经 吞 噬 细 胞 的 吞 噬 消 化 等 处 理, (1,3)-β-D 葡 聚 糖 可 从 胞 壁 中 释 放 出 来, 从 而 使 血 液 及 其 它 体 液 ( 如 尿 脑 脊 液, 腹 水, 胸 水 等 ) 中 1-3--β-D 葡 聚 糖 含 量 增 高 e. 当 真 菌 在 体 内 含 量 减 少 时, 机 体 免 疫 可 迅 速 清 除 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 而 在 浅 部 真 菌 感 染 中,(1,3)-β-D 葡 聚 糖 未 被 释 放 出 来, 故 其 在 体 液 中 的 量 不 增 高 f. 有 研 究 报 道 葡 聚 糖 在 念 珠 菌 血 症 时 明 显 升 高, 将 其 用 于 念 珠 菌 血 症 的 早 期 诊 断 明 显 优 于 传 统 的 培 养 法 和 血 清 学 诊 断 试 验 h. 另 据 文 献 报 道, 检 测 葡 聚 糖 含 量 不 能 用 于 隐 球 菌 感 染 的 诊 断, 可 能 因 为 隐 球 菌 在 免 疫 缺 陷 患 者 体 内 生 长 缓 慢, 并 形 成 厚 荚 膜 有 体 外 实 验 表 明, 新 生 隐 球 菌 产 生 的 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 量 比 念 珠 菌 和 曲 霉 菌 少 i. 但 也 有 文 献 报 道 新 生 隐 球 菌 感 染 后 血 清 葡 聚 糖 升 高 也 十 分 明 显 所 以, 有 关 隐 球 菌 感 染 后 葡 聚 糖 的 变 化 还 有 待 进 一 步 试 验 验 证 5

8 4.2 鲎 试 验 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 特 点 鲎 试 验 测 定 葡 聚 糖 可 以 很 快 得 到 结 果, 在 实 践 中 不 必 等 待 真 菌 培 养 的 结 果, 对 临 床 医 生 采 取 积 极 的 治 疗 提 供 依 据 动 态 快 速 检 测, 不 受 血 中 抗 生 素 和 酶 等 的 影 响 所 有 真 菌 的 细 胞 膜 上 都 含 有 (1,3)-β-D 葡 聚 糖, 而 其 他 微 生 物 动 物 及 人 的 细 胞 成 分 和 细 胞 外 液 都 不 含 这 种 成 分, 因 此 在 机 体 的 体 液 中 检 测 到 (1,3) -β-d 葡 聚 糖 是 诊 断 深 部 真 菌 感 染 的 有 效 依 据 不 能 确 定 菌 种, 但 能 肯 定 是 否 有 真 菌 感 染 指 导 临 床 科 学 合 理 的 使 用 抗 真 菌 药 物 当 检 测 到 标 本 中 葡 聚 糖 含 量 较 高 时, 即 刻 予 以 系 统 治 疗, 不 必 等 鉴 定 出 种 属 早 期 诊 断 由 于 深 部 真 菌 感 染 增 多 且 复 杂, 早 期 症 状 无 特 异 性, 往 往 被 原 发 病 掩 盖, 病 程 长, 发 现 较 晚, 死 亡 率 高 因 此 对 深 部 真 菌 感 染 治 疗 成 败 的 关 键 在 于 早 期 诊 断 而 鲎 试 验 测 定 葡 聚 糖 灵 敏 度 高, 可 在 深 部 真 菌 感 染 早 期 提 供 有 力 的 诊 断 依 据 快 速 诊 断 完 成 一 次 鲎 试 验 检 测 葡 聚 糖 只 需 半 天 就 可 出 报 告, 而 真 菌 感 染 就 医 的 患 者, 往 往 病 情 严 重, 传 统 的 微 生 物 分 离 培 养 与 鉴 定 需 要 时 间 较 长, 患 者 在 等 待 期 间 有 可 能 病 情 加 重, 甚 至 死 亡 因 此, 鲎 试 验 在 真 菌 感 染 检 测 中 是 最 便 捷 有 效 的 方 法 指 导 用 药 快 速 确 定 真 菌 感 染 后, 积 极 使 用 抗 真 菌 药 物 为 临 床 选 用 副 作 用 小, 疗 效 高, 价 格 昂 贵 的 药 物 提 供 准 确 的 依 据 评 价 用 药 应 用 抗 真 菌 药 物 后, 再 次 用 鲎 试 验 检 测 葡 聚 糖 变 化, 为 评 价 选 用 药 物 的 正 确 性 提 供 依 据 监 护 病 程 鲎 试 验 的 快 速 性 准 确 性 进 一 步 在 监 护 深 部 真 菌 感 染 易 感 人 群 的 病 发 状 态, 为 深 部 真 菌 感 染 易 感 人 群 争 取 第 一 时 间 的 治 疗 得 到 了 充 分 体 现 动 态 观 察 对 易 感 人 群 进 行 实 时 跟 踪 检 测, 及 时 发 现 病 情 加 以 治 疗, 为 临 床 疗 效 起 着 重 要 作 用 也 进 一 步 证 实 了 鲎 试 验 在 动 态 观 察 中 有 着 重 大 的 效 果 6

9 5 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 鲎 试 验 检 测 的 机 理 5.1 鲎 试 验 定 量 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 反 应 机 理 图 2 鲎 试 验 定 量 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 反 应 机 理 5.2 ELx808 IU 检 测 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 原 理 鲎 试 剂 中 含 有 对 葡 聚 糖 敏 感 的 G 因 子 和 会 形 成 凝 胶 的 凝 固 蛋 白 当 葡 聚 糖 激 活 G 因 子 形 成 活 化 的 G 因 子, 会 近 一 步 激 活 凝 固 蛋 白 形 成 凝 胶 在 凝 胶 形 成 的 过 程 中, 反 应 液 的 OD 值 逐 步 升 高 反 应 液 OD 达 到 某 一 预 设 值 的 反 应 时 间 是 和 反 应 液 葡 聚 糖 的 浓 度 成 反 比 例 关 系 的 微 生 物 检 测 仪 Elx808 监 控 反 应 液 中 OD 值 的 动 态 变 化, 通 过 TALgent 软 件 处 理 数 据, 做 成 标 准 曲 线, 再 根 据 标 准 曲 线 自 动 计 算 出 反 应 液 中 葡 聚 糖 浓 度 图 3 实 验 反 应 的 实 时 曲 线 图 7

10 图 4 标 曲 曲 线 6 鲎 试 验 定 量 测 定 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 的 配 套 设 备 及 试 剂 6.1 微 生 物 检 测 系 统 Elx808( 配 套 IU) 图 5 微 生 物 检 仪 Elx808( 配 套 IU) 6.2 微 生 物 检 测 系 统 Elx808 的 适 用 范 围 微 生 物 检 测 系 统 Elx808( 配 套 IU) 适 用 于 药 品 生 物 制 品 疫 苗 医 疗 器 械 透 析 液 透 析 水 空 血 袋 及 食 品 水 质 细 菌 内 毒 素 ( 热 原 ) 定 量 检 测 临 床 上 可 快 速 定 量 检 测 血 液 尿 液 等 体 液 中 的 细 菌 内 毒 素 含 量 为 革 兰 氏 阴 性 菌 感 染 进 行 早 期 诊 断, 尤 其 能 为 因 内 毒 素 释 放 导 致 的 多 器 官 功 能 障 碍 综 合 征 (MODS), 全 身 炎 性 反 应 综 合 征 (SIRS), 脓 毒 症 (sepsis) 等 疾 病 提 供 准 确 的 检 测 数 据 微 生 物 检 测 系 统 Elx808( 配 套 IU) 同 时 也 适 用 于 真 菌 霉 菌 (1,3)-β-D 葡 聚 糖 定 量 检 测, 可 用 于 早 期 快 速 诊 断 侵 袭 性 真 菌 感 染 (IFD), 为 侵 袭 性 真 菌 8

11 感 染 的 治 疗 提 供 准 确 的 依 据 适 用 于 ELISA 及 各 种 酶 标 检 测, 是 医 院 检 测 科 微 生 物 科 血 透 中 ICU 患 者 各 级 血 站 等 科 室 的 重 要 仪 器 6.3 微 生 物 检 测 系 统 Elx808 的 特 点 a. 功 能 强 大, 可 配 合 我 公 司 多 种 方 法 ( 显 色 基 质 法, 动 态 浊 度 法, 动 态 显 色 法 ) 鲎 试 剂 使 用 b. 快 速 定 量 60min 即 可 完 成 实 验, 最 快 15min 出 结 果 c. 灵 敏 度 搞 灵 敏 度 高, 检 测 内 毒 素 限 值 可 达 0.001EU/mL, 葡 聚 糖 限 值 可 达 5pg/mL d. 仪 器 使 用 96 孔 微 版 :96 孔 微 板 规 格 国 际 标 准 化, 最 小 化 安 瓿 直 径 及 厚 度 差 异 的 影 响 ; 可 多 至 12 孔 同 时 加 样,96 个 样 品 同 时 检 测, 另 可 配 备 自 动 化 操 作 系 统, 提 高 工 作 效 率, 消 除 人 为 误 差 微 量 操 作, 减 少 试 剂 用 量 e. 试 剂 成 本 低, 我 公 司 配 套 试 剂 长 期 稳 定 供 货 仪 器 配 合 我 公 司 定 量 法 鲎 试 剂, 成 本 仅 为 进 口 同 类 产 品 几 分 之 一 f. 仪 器 配 套 专 业 的 细 菌 内 毒 素 和 真 菌 葡 聚 糖 检 测 软 件, 操 作 更 为 简 便 6.4 鲎 试 验 专 业 分 析 软 件 :TALgent TALgent 是 一 个 功 能 强 大 的 细 菌 内 毒 素 和 真 菌 葡 聚 糖 糖 分 析 软 件, 赋 予 用 户 数 据 采 集 与 处 理 最 大 的 灵 活 性 TALgent 的 特 点 : 图 6 鲎 试 验 专 业 分 析 软 件 :TALgent 具 有 临 床 应 用 版 本 和 药 品 检 测 版 本 ; 9

12 可 同 时 进 行 细 菌 内 毒 素 和 真 菌 葡 聚 糖 检 测 ; 检 测 结 果 自 动 计 算 样 品 内 毒 素 和 葡 聚 糖 含 量, 自 动 计 算 样 品 回 收 率 ; 附 带 计 算 器 功 能 可 计 算 细 菌 内 毒 素 限 值 ; 自 动 扣 除 样 品 对 照 ; 支 持 多 条 标 准 曲 线 同 时 运 行 ; 支 持 线 性 和 多 项 式 曲 线 拟 合 模 型 ; 读 取 的 原 始 数 据 实 时 备 份 ; 版 布 局 可 以 在 数 据 采 集 前 或 后 任 意 设 置 ; 启 动 OD 可 以 在 数 据 前 或 后 任 意 设 置 ; 归 零 化 期 可 以 在 数 据 采 集 前 或 后 任 意 设 置 ; 数 据 采 集 后 可 以 采 用 启 动 时 间 和 最 大 速 率 等 分 析 方 法 处 理 ; 所 有 的 数 据 曲 线 图 表 可 输 出 到 MSExcel; 不 同 用 户 权 限 设 置 ; 配 套 专 家 数 据 库 和 远 程 技 术 帮 助 6.5 TALgent Mini-T 微 型 便 携 式 干 式 恒 温 仪 TALgent Mini-T 微 型 便 携 式 干 式 恒 温 仪 是 一 款 采 用 微 电 脑 控 制 和 半 导 体 制 冷 技 术 制 造 的 恒 温 金 属 浴 产 品, 重 量 轻, 控 温 精 度 高, 制 样 平 行 性 好, 专 用 于 样 品 的 恒 温 处 理 及 凝 胶 法 鲎 试 剂 的 温 育 其 特 点 是 体 积 小, 重 量 轻, 具 有 即 时 温 度 显 示 时 间 递 减 显 示 自 动 故 障 检 测 及 蜂 鸣 器 报 警 功 能, 同 时 拥 有 温 度 偏 差 校 准 功 能, 便 捷 的 模 块 更 换, 便 于 清 洁 与 消 毒, 为 仪 器 的 清 洁 保 养 提 供 了 便 利 12V 直 流 电 源 输 入, 内 置 超 温 保 装 置, 可 适 用 于 车 载 电 源 图 7 TALgent Mini-T 微 型 便 携 式 干 式 恒 温 仪 10

13 6.6 鲎 试 剂 (TAL) 图 8 海 洋 节 肢 动 物 鲎 图 9 鲎 血 提 取 得 生 物 制 剂 鲎 试 剂 7 实 验 过 程 7.1 标 准 曲 线 的 建 立 标 准 曲 线 浓 度 梯 度 配 制 从 真 菌 葡 聚 糖 检 测 试 剂 盒 标 准 品 中 取 (1,3)-β-D 葡 萄 糖 标 准 品 1 支, 加 入 1mL 溶 解 液, 在 漩 涡 混 合 器 上 剧 烈 震 荡 2 分 钟 以 上, 得 到 浓 度 为 10000pg/mL 的 葡 聚 糖 溶 液, 再 配 制 浓 度 为 1000pg/mL 100pg/mL 的 葡 聚 糖 标 准 溶 液 配 制 方 法 如 下 : 10000pg/ 支 1mL 10000pg/mL 0.1mL 0.9mL 1000pg/mL 0.1mL 0.9mL 100pg/mL 注 : 横 线 上 方 为 加 入 葡 聚 糖 标 准 溶 液 的 量, 下 方 为 在 空 安 瓿 中 加 入 的 溶 解 液 的 量, 每 步 稀 释 均 需 在 漩 涡 混 合 器 上 混 匀 30 秒 以 上 样 品 70 处 理 取 0.1mL 阴 性 对 照 液 ( 即 溶 解 液 ) 及 浓 度 为 10000pg/mL 1000pg/mL 100pg/mL 的 标 准 葡 聚 糖 溶 液, 加 入 到 0.9mL 葡 聚 糖 检 品 处 理 液 中, 混 匀 后 得 浓 度 为 1000pg/mL 100pg/mL 10pg/mL 的 标 准 品 混 合 液 70 保 温 10 分 钟, 取 出 后 立 即 放 入 冷 水 中 冷 却 加 入 鲎 试 剂 置 于 检 测 仪 器 中 检 测 取 处 理 后 的 阴 性 对 照 液 各 浓 度 定 量 标 准 品 混 合 液 0.2 ml 加 入 鲎 试 剂 中, 溶 解 后 移 取 0.1mL 至 除 热 原 96 孔 微 板 中, 放 置 于 光 学 检 测 仪 器 中 检 测 反 应 结 束 后, 软 件 自 动 进 行 标 准 曲 线 拟 合 11

14 7.1.4 质 量 控 制 a. 阴 性 对 照 的 启 动 时 间 比 标 准 曲 线 最 低 点 的 启 动 时 间 至 少 大 120 秒 b. 线 性 相 关 系 数 r 0.98 c. 以 上 要 求 需 在 同 一 次 实 验 中 同 时 满 足, 否 则 本 次 实 验 无 效, 应 重 新 进 行 实 验 7.2 样 本 检 测 样 本 要 求 适 用 标 本 类 型 : 血 浆 血 浆 标 本 采 集 : 用 无 热 原 肝 素 钠 抗 凝 真 空 采 血 管 采 集 静 脉 血 2mL, 进 行 3000rpm 离 心 60s, 分 离 得 到 富 含 血 小 板 的 血 浆 标 本 保 存 和 运 送 : 样 本 可 立 即 用 于 测 试, 也 可 保 存 于 -20 待 测, 保 存 期 为 1 个 月 检 验 方 法 取 0.1mL 血 浆 样 本, 加 入 到 0.9mL 葡 聚 糖 检 品 处 理 液 中, 混 匀 后 70 保 温 10 分 钟, 取 出 后 立 即 放 入 冷 水 中 冷 却 取 处 理 后 的 血 浆 样 本 混 合 液 0.2 ml 加 入 鲎 试 剂 中, 轻 轻 振 摇 溶 解 鲎 试 剂 后 移 取 0.1mL 至 除 热 原 96 孔 微 板 中, 放 置 于 微 生 物 检 测 仪 ELx808IU 中 检 测, 反 应 结 束 后 自 动 计 算 出 样 本 真 菌 (1,3)-β-D 葡 萄 糖 含 量 参 考 值 ( 参 考 范 围 ) 正 常 血 浆 中 真 菌 (1,3)-β-D 葡 萄 糖 含 量 <10pg/mL 检 验 结 果 解 释 检 测 结 果 阳 性 表 明 该 样 本 有 (1,3)-β-D 葡 萄 糖 存 在, 但 并 不 表 示 该 样 本 一 定 存 在 真 菌 活 菌 检 测 结 果 阴 性 表 示 该 样 本 (1,3)-β-D 葡 萄 糖 低 于 参 考 值 检 验 方 法 的 局 限 性 本 试 剂 盒 只 能 检 测 真 菌 (1,3)-β-D 葡 萄 糖 含 量, 不 能 区 分 真 菌 种 属 本 试 剂 盒 不 能 检 测 出 不 产 生 或 产 生 很 少 (1,3)-β-D- 葡 聚 糖 的 隐 球 菌 及 接 合 菌 12

15 7.2.6 产 品 性 能 指 标 a. 阳 性 符 合 率 : 检 测 5 份 阳 性 参 考 品 均 为 阳 性 b. 阴 性 符 合 率 : 检 测 5 份 阴 性 参 考 品 均 为 阴 性 c. 灵 敏 度 : 5pg/mL d. 线 性 相 关 系 数 r : r 0.98 e. 批 内 精 密 度 :CV 20% 8 真 菌 葡 聚 糖 检 测 配 套 耗 材 厦 门 市 鲎 试 剂 实 验 厂 有 限 公 司 提 供 无 热 原 无 葡 聚 糖 试 管 微 板 吸 头 等 各 种 真 菌 葡 聚 糖 和 细 菌 内 毒 素 检 测 实 验 耗 材 专 业 高 品 质 的 真 菌 葡 聚 糖 和 细 菌 内 毒 素 检 测 实 验 耗 材 是 您 实 验 成 功 的 保 证 产 品 订 购 信 息 : 微 生 物 检 测 系 统 Elx808( 配 套 IU) 品 名 规 格 标 准 配 置 : (1)Elx808(IU) 主 机 ( 含 5 个 波 长 滤 光 片 : 微 生 物 检 测 系 统 ( 适 用 于 真 菌 β- 葡 聚 糖 检 测 及 细 菌 内 毒 素 检 测 ) 630nm) (2) 专 业 检 测 软 件 TALgent (3) 干 热 恒 温 仪 (4) 漩 涡 混 匀 器 (5) 可 调 移 液 器 两 只 :A μl B μl (6) 不 含 电 脑, 用 户 另 购 产 品 类 别 : 真 菌 葡 聚 糖 检 验 试 剂 品 名 真 菌 葡 聚 糖 检 测 试 剂 盒 ( 动 态 浊 度 法 ) 真 菌 葡 聚 糖 检 测 试 剂 盒 ( 动 态 浊 度 法 ) 标 准 品 规 格 20 测 试 / 盒 一 套 产 品 类 别 : 无 葡 聚 糖 无 热 原 实 验 耗 材 13

16 产 品 名 称 除 热 原 试 管,5 支 / 包 除 热 原 采 样 瓶 除 热 原 96 孔 微 板 ( 可 拆 式 ) 除 热 原 96 孔 微 板 ( 带 盖 ) 除 热 原 吸 头 (200ul) 除 热 原 吸 头 (200ul) 除 热 原 吸 头 (1000ul) 除 热 原 吸 头 (1000ul) 规 格 10 75mm 10mL/ 瓶 8 孔 12 条 96 孔 / 个 5 支 / 包 96 支 / 盒 4 支 / 包 96 支 / 盒 有 机 玻 璃 试 管 架 14

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