2009/08/10

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1 National Taiwan Sport University The influence of ingestion glucose and BCAA before endurance exercise on cytokine concentration in hypoxia environment

2 2009/08/10

3 ( ) (branched chain amino acid,bcaa) (carbohydrate) 25.5± ±1.8cm 69.86±2.8kg 38.2±1.8ml min -1 kg -1 BCAA ( BCAA 12g) CHO ( 75g/250ml) BCAA+CHO (12g+75g/250ml) PLA(250ml) (15% O %V O 2max 90 85%V O 2max -6(IL-6) (white blood cell) (lymphocyte) (neturophil) (cortisol) (insulin) (glucose) IL-6 TNF-α BCAA+glucose glucose BCAA ( p=0.019,0.011) I

4 Abstract Ingestion of carbohydrate (CHO) and branched-chain amino acids (BCAAs) before exercise might improve exercise performance. However the effects on exercise induced immune stress in hypoxia environment are still unclear. We recruited 7 health adult male( age: 25.5 ± 0.6 yrs, height: 168.4±1.8cm, weight: 69.86±2.8kg, VO2max: 38.2±1.8ml min -1 kg -1 ) to participate in this study. All subjects completed 4 experimental trials, BCAA (ingesting BCAAs 12g/250ml), CHO (ingesting glucose 75g/250ml), BCAA+CHO (ingesting BCAA+glucose 12g+ 75g/250ml), PLA(placebo 250ml) in a randomized order. After overnight fasting, subject were asked to ingested the test drinks and rest in the hypoxia chamber ( O 2 15% ) for 60 mins before undertaking the exercise. Subjects exercised at 50%V O 2 max for 90mins on a cycle ergometer, then the intensity increased to 85% VO 2 max until volitional fatigue. After exercise, subjects were asked to rest for 2 hours in the hypoxia champer. Blood samples and saliva samples were collected before exercise, at 30min intervals during exercise, at fatigue, and every hour during post-exercise. Plasma samples were analyzed for IL-6, TNF-α, cortisol, insulin, and glucose concentrations. White blood cell, lymphocyte, neturophil numbers were also measured. The results showed that there were no significant changes in plasma cytokines and saliva IgA during 4 trials. White blood cell, lymphocyte, and neturophil numbers were increased following exercise. The current results suggested ingesting CHO and BCAAs before exercise in acute hypoxia environment did not change cytokine secretion. However, the peripheral white blood cell were increased. Key words: hypoxia, BCAAs, cytokine II

5 III... I Abstract... II...III BCAA 叁 cortisol

6 10 IgA IL TNF-α IV

7 cortisol IgA IL TNF-α...47 V

8 VI

9 (upper 1

10 respiratory tract infection,urti) (cortisol) (Bassit et al., 2002) TNF-α TNF-α (URTI) BCAA 2

11 BCAA (acute hypoxia) 15% 2500m (BCAA, branched chain amino acid) valine leucine isoleucine IgA (cytokine) B T 3

12 4

13 (Nieman, Henson, Austin, & Brown, 2005) BCAA BCAA 5

14 B ( 2004 ) T T 2 T (T helper cell) T (T cytotoxic cell) T (cytokine) B T ( 2004 ) (Nielsen & Pedersen, 2007) -6(interleukin-6, IL-6) 6

15 (Nielsen & Pedersen, 2007) IL-6 (Pedersen, Steensberg, & Schjerling, 2001) IL-6 IL-6 (Steensberg et al., 2000) IL-6 Mohamed-Ali 30% IL-6 (Mohamed-Ali et al., 1997) IL-6 (Lyngso, Simonsen, & Bulow, 2002) IL-6 B IL-6 (TNF) (Nielsen & Pedersen, 2007) IL-6 TNF-α (Petersen & Pedersen, 2005; Starkie, Ostrowski, Jauffred, Febbraio, & Pedersen, 2003) TNF-α IL-6 TNF-α (Petersen & Pedersen, 2005) Nieman, Johanssen, Lee, & Arabatzis(1990) (upper respiratory tract infection,urti) 7

16 (Nieman, Johanssen, Lee, & Arabatzis, 1990) Tiollier (2005) IgA (Tiollier et al., 2005) URTI Nieman, Henson, Austin & Brown (2005) 15 ( 30 ) (leukocytes) (nature killer cells) IL-6 60%~65%VO 2max URTI (Nieman et al., 2005) Matthews (2002) % URTI (Matthews et al., 2002) IgA IgA URTI Neville,Glesson & Folland (2008) IgA URTI URTI (Neville, Gleeson, & Folland, 2008) IgA 8

17 (Meeuwsen, Hendriksen, & Holewijn, 2001) (erythropoietin, EPO ) (Levine & Stray-Gundersen, 1997) Levine & Stray-Gundersen (1997) 39 (LHTL) (LHTH) M 4 LHTH LHTL (hemoglobin) EPO Wehrlin, Zuest, Hallen, & Marti(2006) 17 2 Levin(1997) EPO 24 EPO (Levine & Stray-Gundersen, 1997) 9

18 (Mazzeo, 2008) IL-6 IL-6 (vascular endothelial growth factor, VEGF) (Motro, Itin, Sachs, & Keshet, 1990) IL-6 EPO IL-6 EPO (Faquin, Schneider, & Goldberg, 1992) (cortisol) Mazzeo (2000) IL-6 IL-6 IL-6 β -Adrenergic IL-6 β -Adrenergic α -Adrenergic α -Adrenergic IL-6 IL-6 (Mazzeo, 2005) Wang, Lin, Cheng, & Wong (2007) 2 (15%O 2 ) (12%O 2 ) IL-6 10

19 IL-10 (Wang, Lin, Cheng, & Wong, 2007) 4800m 6~8 (Roach et al., 2000) ATP Achten (2003) 45 75g glucose 11

20 (Achten & Jeukendrup, 2003) Brundle,Thayer & Taylor(2000) 17 ( ) 0.4g/kg 250ml % VO 2max (Brundle, Thayer, & Taylor, 2000) (Achten, 2003) (Glesson et.al, 1998 Costa et.al, 2005) glutamine cortisol (Bacurau et.al, 2002) Glesson (1998) cortisol Bishop (2001) 12 12

21 (HIGH trial) (LOW trial) 1 60% W max cortisol HIGH tria LOW trial (Bishop, Walsh, Haines, Richards, & Gleeson, 2001a) (cytokine) LOW trial IL-6 HIGH trial IL-6 (ctecholamines) IL-6 (Bishop, Walsh, Haines, Richards, & Gleeson, 2001b) Costa (2005) 32 (12gCHO kgbw 1 day 1 ) cortisol IgA cortisol IgA (Costa, Jones, Lamb, Coleman, & Williams, 2005) cortisol IgA URTI 13

22 (Fulco et al., 2007) BCAA BCAA leucine isoleucine valine Goldberg Chang(1978) BCAA (Chang & Goldberg, 1978) BCAA 70g(Achten & Jeukendrup, 2003) BCAA BCAA Isoleucine lymphocyte( ) (eosinophil) neutrophil ( ) isoleucine neutrophil lymphocyte (Burns, 1975) leucine isoleucine, valine(calder, 2006) leucine (Wagenmakers, 1999) leucine valine (Calder, 2006) Bassit (2002)

23 BCAA BCAA TNF-α IL-1 IL-4 IFN-γ (Bassit et al., 2002) IFN-γ (macrophage) IFN-γ TNF-α IL-1 IL-4 BCAA 9 CHO BCAA (Madsen, MacLean, Kiens, & Christensen, 1996) BCAA IL-6 TNF-α Wang, Lin, Cheng, & Wong(2007) IL-6 TNF-α TNF-α IL-6 15

24 BCAA (Negro, Giardina, Marzani, & Marzatico, 2008) BCAA CHO BCAA URTI 16

25 叁 BCAA glucose (VO2max) 75W 3 25W (CORTEX, METAMAX 3B, Leipzig,Germany) (V O 2max) 4 glucose BCAA BCAA +glucose 10 17

26 ( ) (250ml H 2 O) ( ) 75g/250ml ( Wako Pure Chemical Industries, Ltd, Osaka Japan.) ( )BCAA BCAA ( Optimum BCAA Powder, Aurora, USA.)( 5.6 g L-Leucine 2.5g, L-isoleucine 1.25g, L-valine 1.25g )12g 250ml ( )BCAA+glucose BCAA12g 75g glucose/250ml 50% VO 2max 90 85%V O 2max 2300m ( 15% ) ( 1) ( ) 2 ( ) 18

27 1h ( ) 1h 50% VO 2 max ml*kg -1 85% VO 2max 15 ( ) 2h ( ) : 10ml (EDTA) 1500g C 2-20 C 19

28 ( ) IgA (Enzyme-linked immunoassay, ELISA) ( ) IL-6 TNF-α : (Enzyme-linked immunoassay, ELISA) (ebiosicience, San Diego, USA) ( ) glucose Quick Auto Neo Glu-HK (SHINO, Tokyo, Japan) (Hitachi 7020, Hitachi Science systems, Ltd, Lbaranki, Japan) 340 nm 450 nm G-6-PD 1. Glucose + ATP G-6-P+ADP 2. G-6-P+NADP + 6-Phosphoglucoin acid + NADPH+H + ( ) (Roche Diagnostics,Mannheim, Germany) Streptavidin Anti-insulin AB-biotin Anti-insulin 20

29 AB-Ru(bpy)32+ (Roche Elecsys 1010/2010, Roche Diagnostics, Mannheim, Germany ( ) Cortisol (Electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA) Roche Elecsys 2010 Elecsys Cortisol Cortisol Cortisol Danazol Cortisol Cortisol Elecsys Cortisol ( Cat.No ) 100 R1 Anti-cortisol-Ab~biotin( )1 9ml Anti-cortisol ( )90ng/ml MES 100 mmol/l PH6.0 R2 Cortisol-peptide~Ru(bpy) 3 2+ ( ) 1 9 ml Cortisol ( ) 25 ng/ml danazol20 µg/ml MES 100 mmol/l PH 6.0 ( ) Sysmax KX-21N (KOBE,JAPAN) 21

30 ± (two-way ANOVA) 4 (one-way ANOVA) P < 0.05 Bonferroni 22

31 25.5± ±1.8cm 69.86±2.8kg 38.2±1.8ml min -1 kg -1 (white blood cell) ( 2) ( lymphocyte )( 3) 60 BCAA+glucose placebo ( p=0.04 ) ( 4) BCAA glucose (p=0.019) BCAA BCAA+glucose (p=0.017) glucose BCAA(p=0.00) BCAA+glucose(p=0.002) placebo(p=0.013) 23

32 ( neutrophil )( 5) ( 6) BCAA BCAA+glucose (p=0.025) glucose (p=0.027) (cortisol) ( 7) baseline (p=0.023) (p=0.005) ( 8) BCAA CHO ( p=0.028 ) BCAA+CHO ( p=0.005 ) CHO ( p=0.036 BCAA+CHO ( p=0.013 ) BCAA CHO ( p=0.039 ) BCAA+CHO ( p=0.031 )PLA( p=0.029 ) ( insulin ) ( 9) BCAA+CHO CHO PLA ( p=0.005 p=0.021 ) BCAA+CHO CHO BCAA ( p=0.007 p=0.028 ) baseline( p=0.045) IL-6( 11) TNF-α ( 12) 24

33 ( 10) A(IgA) 25

34 IgA BCAA glucose cortisol (Rohde, MacLean, Hartkopp, & Pedersen, 1996) (McCarthy & Dale, 1988) CHO BCAA cortisol CHO cortisol (Mitchell et al., 1998) CHO cortisol glucose glucose glucose (Mitchell et al., 26

35 1990) cortisol (Pedersen, Rohde, & Ostrowski, 1998) Li & Cheng, (2007) CHO cortisol CHO cortisol cortisol (Li & Cheng, 2007) IgA IgA IgA CHO IgA (Wu et al, 2009) IgA BCAA glucose IgA IL-6 (Wang et al., 2007) (Starkie et al., 2003) BCAA (Bassit et al., 2002) CHO IL-6 (Lancaster, Jentjens, Moseley, Jeukendrup, & Gleeson, 2003) TNF-α 27

36 IgA IL-6 (Lyngso et al., 2002) 28

37 ( )( 2004 ) Achten, J., & Jeukendrup, A. E. (2003). The effect of pre-exercise carbohydrate feedings on the intensity that elicits maximal fat oxidation. Journal of Sports Sciences, 21, (12), Bacurau, R. F., Bassit, R. A., Sawada, L., Navarro, F., Martins, E., Jr., & Costa Rosa, L. F. (2002). Carbohydrate supplementation during intense exercise and the immune response of cyclists. Clinical Nutrition, 21(5), Bassit, R. A., Sawada, L. A., Bacurau, R. F., Navarro, F., Martins, E., Jr., Santos, R. V., et al. (2002). Branched-chain amino acid supplementation and the immune response of long-distance athletes. Nutrition, 18(5), Bishop, N. C., Walsh, N. P., Haines, D. L., Richards, E. E., & Gleeson, M. (2001a). Pre-exercise carbohydrate status and immune responses to prolonged cycling: I. Effect on neutrophil degranulation. International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism, 11(4), Bishop, N. C., Walsh, N. P., Haines, D. L., Richards, E. E., & 29

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42 Nieman, D. C., Henson, D. A., Austin, M. D., & Brown, V. A. (2005). Immune response to a 30-minute walk. Medicine and Science in Sports and Exercise, 37(1), Nieman, D. C., Johanssen, L. M., Lee, J. W., & Arabatzis, K. (1990). Infectious episodes in runners before and after the Los Angeles Marathon. The Journal of Sports Medicine and Physical Fitness, 30(3), Pedersen, B. K., Rohde, T., & Ostrowski, K. (1998). Recovery of the immune system after exercise. Acta Physiologica Scandinavica, 162(3), Pedersen, B. K., Steensberg, A., & Schjerling, P. (2001). Muscle-derived interleukin-6: possible biological effects. The Journal of Physiology, 536(Pt 2), Petersen, A. M., & Pedersen, B. K. (2005). The anti-inflammatory effect of exercise. Journal of Applied Physiology, 98(4), Roach, R. C., Maes, D., Sandoval, D., Robergs, R. A., Icenogle, M., Hinghofer-Szalkay, H., et al. (2000). Exercise exacerbates acute mountain sickness at simulated high altitude. Journal of Applied Physiology, 88(2), Rohde, T., MacLean, D. A., Hartkopp, A., & Pedersen, B. K. (1996). The immune system and serum glutamine during a triathlon. European Journal of Applied Physiology and Occupational Physiology, 74(5),

43 Starkie, R., Ostrowski, S. R., Jauffred, S., Febbraio, M., & Pedersen, B. K. (2003). Exercise and IL-6 infusion inhibit endotoxin-induced TNF-alpha production in humans. FASEB Jounral, 17(8), Steensberg, A., van Hall, G., Osada, T., Sacchetti, M., Saltin, B., & Klarlund Pedersen, B. (2000). Production of interleukin-6 in contracting human skeletal muscles can account for the exercise-induced increase in plasma interleukin-6. Journal of Physiology, 529 Pt 1, Tiollier, E., Gomez-Merino, D., Burnat, P., Jouanin, J. C., Bourrilhon, C., Filaire, E., et al. (2005). Intense training: mucosal immunity and incidence of respiratory infections. European Journal of Applied Physiology, 93(4), Wagenmakers, A. J. (1999). Amino acid supplements to improve athletic performance. Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care, 2(6), Wang, J. S., Lin, H. Y., Cheng, M. L., & Wong, M. K. (2007). Chronic intermittent hypoxia modulates eosinophil- and neutrophil-platelet aggregation and inflammatory cytokine secretion caused by strenuous exercise in men. Journal of Applied Physiology, 103(1),

44 1 36

45 12 10 BCAA CHO BCAA+CHO PLA (*10 3 ul) 8 6 # base pre-ex30 pre-ex EX30 EX60 EX90 post-ex R1h R2h 2 CHO BCAA # P<.05 37

46 5 4 BCAA CHO BCAA+CHO PLA (*10 3 ul) 3 2 # 1 0 base pre-ex30 pre-ex EX30 EX60 EX90 post-ex R1h R2h 3 placebo BCAA+CHO #P<.05 38

47 50 # 40 (*10 3 ul) BCAA CHO BCAA+CHO PLA & 0 base pre-ex30 pre-ex EX30 EX60 EX90 post-ex R1h R2h 4 BCAA CHO BCAA+CHO # P<.05 CHO & P<.05 39

48 10 8 BCAA CHO BCAA+CHO PLA (*10 3 ul) base pre-ex30 pre-ex EX30 EX60 EX90 post-ex R1h R2h 5 40

49 80 60 # NEUT% BCAA CHO BCAA+CHO PLA 0 base pre-ex30 pre-ex EX30 EX60 EX90 post-ex R1h R2h 6 BCAA CHO BCAA+CHO #P<.05 41

50 BCAA CHO BCAA+CHO PLA uu/ml 400 # & base pre-ex post-ex R2h 7 cortisol base pre-ex # P<.05 post-ex R2h & P<.05 42

51 160 # & # BCAA CHO BCAA+CHO PLA 100 Y Data base pre-ex30 pre-ex Ex30 Ex60 Ex90 post-ex R2h 8 BCAA CHO CHO+BCAA # P<.05 PLA CHO CHO+BCAA & P<.05 43

52 80 60 BCAA CHO BCAA+CHO PLA # uu/ml & 0 base pre-ex post-ex R2h 9 PLA BCAA CHO CHO+BCAA #P<.05 post-ex base &P<.05 44

53 (mg/dl) BCAA CHO BCAA+CHO PLA 0 base pre-ex EX30 EX60 post-ex R1h R2h 10 IgA 45

54 6 5 4 BCAA CHO BCAA+CHO PLA uu/ml base pre-ex post-ex R2h 11 IL-6 46

55 40 30 BCAA CHO BCAA+CHO PLA uu/ml base pre-ex30 pre-ex Ex30 12 TNF-α 47

56 1 ( ) A BCAA %V O 2max 85%V O 2max ( ) 48

57 2 (cm)/ (kg) / ( ) ( ) ( ) ( ) 49

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untitled 北 立 om65726@yahoo.com.tw 量 復 六 carbohydrates lipid protein vitamins minerals water (1 =4 ) (1 =4 ) (1 =9 ) (1 =7 ) 量 ATP-PC Glycolysis Aerobic Oxidation ATP -PC Glycolysis http://www.science.smith.edu/departme

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