154 水生生物学报 35 卷阳山黄金鲥鱼养殖场人工养殖近两年 2010 年 5 月, 对池养 2 冬龄美洲鲥进行了多次人工繁殖试验, 成功促使池养美洲鲥亲鱼自然产卵, 获得美洲鲥受精卵 10 万余粒受精卵孵化受精卵置于上下直径分别为 0.9 m 和 1.2 m 水深 1.2 m 的圆锥形桶内进

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1 第 35 卷第 1 期水生生物学报 Vol. 35, No 年 1 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA Jan., DOI: /SP.J 美洲鲥胚胎及仔稚鱼的发育 1,2 洪孝友 1,2 朱新平 1 陈昆慈 1 潘德博 1 李凯彬 (1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所, 广州 ; 2. 上海海洋大学水产与生命学院, 上海 ) 摘要 : 对美洲鲥 (Alosa sapidissima) 早期生活史阶段的生长发育特征进行了观察和测量, 描述了胚胎和仔稚鱼的生长发育特征美洲鲥受精卵球形无油球, 为沉性卵, 卵径 mm 在水温孵化条件下, 经过 82h 孵化出膜, 根据其胚胎发育过程的形态特征, 胚胎发育分为受精卵卵裂期囊胚期原肠胚期神经胚期器官形成期和出膜期 7 个发育阶段美洲鲥初孵仔鱼全长为 (8.56±0.36) mm, 其卵黄囊体积为 (4.57±0.77) mm 3 1 日龄仔鱼脑部发育明显, 口张开, 肛门开通, 胸鳍形成 2 日龄仔鱼卵黄囊体积 (0.71±0.23) mm 3, 只有刚孵化的 15.54% 3 日龄仔鱼经过 1d 的混合营养期, 卵黄被完全吸收, 4 日龄仔鱼完全营外源性营养, 卵黄囊的体积 (V) 随孵化时间 (h) 的变化方程为 V=4.1583e h (R 2 =0.9901) 此后, 背鳍鳍条尾鳍鳍条臀鳍鳍条和腹鳍鳍条相继在晚期仔鱼出现, 9 日龄仔鱼尾椎开始弯曲, 21 日龄仔鱼尾椎弯曲完成 27 日龄鱼鳞开始形成, 到 33 日龄稚鱼全身披鳞, 个体发育进入幼鱼期, 仔稚鱼期间的生长模型方程为 : TL=0.0049D D (R 2 =0.9885, TL 为全长, D 为日龄 ) 关键词 : 美洲鲥 ; 胚胎 ; 仔鱼 ; 稚鱼 ; 形态 ; 发育中图分类号 : Q958.8 文献标识码 : A 文章编号 : (2011) 鲥亚科 (Alosinae) 鱼类是鲱形总目 (Clupeomorpha) 鲱形目(Clupeiformes) 鲱科(Clupeidae) 中最大型的一类, 其中大多数属于溯河洄游性鱼类鲥亚科西鲱属 (Alosa) 的美洲鲥 (Alosa sapidissima), 分布在北美洲东西沿岸的河流和海洋中, 其与濒临灭绝的中国鲥 (Tenualosa reevesii) 一样均是有较高营养价值和经济价值的溯河产卵洄游性鱼类在美国, 一些学者对美洲鲥的增殖放流进行了研究, 分析了盐度 [1 3] [4,5] 温度对美洲鲥仔稚鱼幼鱼生长及死亡率的影响, 对美洲鲥的资源起到了很好的保护作用我国在 21 世纪初开始引进美洲鲥受精卵并进行驯养, 养殖效果并不理想, 在有些地区, 如珠江三角洲的池塘养殖, 几乎没有成功的例子在美洲鲥的驯养过程中, 我国一些学者对其生物学特征 [6,7] 苗种培育养殖 [6,8] [9] 幼鱼营养需求及运输中应激 [10] 反应等做了一些研究, 但仍有许多问题需要进一步的研究和解决国外主要在 20 世纪年代对美洲鲥早期生活史阶段进行了研究, Marcy [11] 观察描叙美洲鲥受精卵的发育过程 ; Lippson, et al. [12] 简单概括了美洲鲥的早期生活史阶段发育, 以此来区别其他的鲱科仔稚鱼 ; Johnson, et al. [13] 通过对美洲鲥的仔稚鱼的生长发育进行观察测量, 表明形态测量不能作为辨别人工培育的和野生的美洲鲥方法 ; 然而却没有对美洲鲥胚胎发育和胚后发育进行较为连续详细的研究为此, 本研究对美洲鲥早期生活史阶段的形态及发育特征等基础生物学进行了观察描述, 以期为了解其胚胎及其仔稚鱼生长发育规律, 同时为规模化苗种培育工作提供基础数据 1 材料与方法实验材料 2008 年 6 月, 成功孵化购自美国西部俄勒冈州河流的美洲鲥鱼受精卵, 在广东清远收稿日期 : ; 修订日期 : 基金项目 : 广东省科技兴渔项目 (A200901E03) 资助作者简介 : 洪孝友 (1985 ), 男, 湖北广水人 ; 硕士研究生 ; 研究方向为种质资源与遗传育种 hongxiaoyou1216@163.com 通讯作者 : 朱新平 (1964 ), 男, 研究员, 博士生导师 ; zhuxinping_1964@yahoo.com.cn

2 154 水生生物学报 35 卷阳山黄金鲥鱼养殖场人工养殖近两年 2010 年 5 月, 对池养 2 冬龄美洲鲥进行了多次人工繁殖试验, 成功促使池养美洲鲥亲鱼自然产卵, 获得美洲鲥受精卵 10 万余粒受精卵孵化受精卵置于上下直径分别为 0.9 m 和 1.2 m 水深 1.2 m 的圆锥形桶内进行孵化, 底部不间断的进水, 孵化水温胚胎发育观察将胚胎发育时期细分为受精卵卵裂期囊胚期原肠胚期神经胚期器官形成期和出膜期 7 个发育阶段, 每一发育阶段根据发育特征再细分各发育期每次观察卵数不少于 30 粒, 当其 50% 以上发育至某个时期则作为该发育阶段的起始时间, 从前一发育期到下一发育期的时间则为间隔时间, 记录每个发育期的水温胚胎发育积温 = 胚胎发育历时水温利用 OPTION 解剖镜对美洲鲥整个胚胎发育过程进行连续活体观察, 用 Nikon4500 相机拍照胚胎发育早期每 10min 左右观察 1 次, 到达囊胚期后每 0.5h 左右观察 1 次, 每次观察取样 30 粒发育时间以 50% 以上受精卵到达该期的时间为准仔鱼培育养殖用水为山泉水, 水温 , 仔鱼孵化出来的第 3 天, 开始投喂刚孵化的卤虫无节幼体每隔 3h 投喂 1 次, 每天 (7: 00 22: 00)6 次在孵化桶培育到 13 日龄, 仔鱼体长 (15.55 ±1.06) mm 时移到室内 3.0 m 3.5 m, 水深 0.45 m 的水泥池进行培养用气石增氧白天注水控温, 水温控制在每 2h 投喂用小球藻强化过的卤虫, 每天 (7: 00 22: 00)8 次, 每次投喂量达到饱和, 每天吸污一次至 19 日龄开始, 在投喂强化过的卤虫之前, 先投喂山东烟台生产的升索牌微粒子配合饲料进行驯化培育, 培育到 30 日龄仔鱼时则全部投喂微颗粒饲料采样测量与观察从仔鱼出膜第 1 天开始取样进行测量与观察 1 4 日龄仔鱼, 白天 4 6h 取样一次, 夜间 (00: 00) 再取样一次 ; 5 10 日龄仔鱼早 (7: 30), 晚 (18:30) 各取样一次 ; 日龄, 每天早上 (8: 00) 取样一次 ; 日龄每 2 天取样一次, 27 日龄后, 则为每 3 天取样一次每次在同一孵化桶或者是培养池取样, 每次随机取样 30 尾随机取样的仔稚鱼用 10% 酒精处死, 然后用解剖镜观察仔稚鱼不同发育时期的形态特征器官发育, 使用目测微尺或游标卡尺测量其全长体长肛前距头长眼径和卵黄囊长短径, 相机拍照数据统计卵黄囊体积 (mm 3 ) 可依照公式 : V=4/3π R/2 (r/2) 2 计算, 式中 : R 为卵黄囊长径 (mm), r 为卵黄囊短径 (mm) 用 Office Excel 进行数据处理 SPSS 15.0 拟合全长和日龄关系的生长模型 Photoshop cs2 进行图片大小修剪等处理, 实验结果以平均值 ± 标准差表示 2 结果 2.1 胚胎发育实验获得受精卵 10 万余粒, 孵化率约为 10% 美洲鲥受精卵在水温下, 经过 82h 孵化出膜, 胚胎发育时间过程 ( 表 1) 受精卵美洲鲥受精卵球形, 透明, 无油球, 沉性卵吸水后膜径 mm 受精后 35min, 受精卵的卵质由植物极流向动物极形成盘状突起, 即为胚盘期 ( 图版 Ⅰ-1) 卵裂期胚盘经裂为 2 个大小相等的分裂球, 此为 2 细胞期美洲鲥的受精卵的卵裂方式与其他硬骨鱼类相同, 属盘状卵裂 ( 图版 Ⅰ-2) 受精后 60min, 完成第 1 次卵裂, 先是在胚盘中央出现裂痕, 并且逐渐加深, 最后卵裂纵沟把胚盘分裂成 2 个细胞, 为经裂 ; 受精后 80min, 在与第一次卵裂面的垂直线上纵裂, 把两个细胞分别一分为二, 完成第 2 次卵裂, 进入 4 细胞期 ( 图版 Ⅰ-3) 1h50min 第 3 次分裂, 进入 8 细胞期, 8 个细胞前后排列 ( 图版 Ⅰ-4) 2h22min 进入 16 细胞期, 细胞大小开始出现不一 ( 图版 Ⅰ-5) 受精后 2h47min 3h25min 受精卵分别进入了 32 细胞期 ( 图版 Ⅰ-6) 64 细胞期 ( 图版 Ⅰ-7) 此后随着细胞的不断分裂, 在受精后 5h30min, 细胞分裂进行到了多细胞期, 在胚盘处形成多层排列隆起的实心细胞团 ( 图版 Ⅰ-8) 囊胚期受精后 8h10min, 细胞进一步分裂, 在受精卵动物极囊胚处形成高高的隆起, 此为高囊胚期 ( 图版 Ⅰ-9) 之后胚层细胞向下移动, 囊胚层的高度明显降低, 到受精后 9h50min, 则看不到明显的突起 ( 图版 Ⅰ-10), 此时为胚胎发育的低囊胚期原肠胚期受精后 13h, 囊胚层细胞下包卵黄体, 下包边缘整齐, 胚盘下包达 1/3, 胚胎发育进入原肠早期 ( 图版 Ⅰ-11) 之后囊胚层继续下包,

3 1 期洪孝友等 : 美洲鲥胚胎及仔稚鱼的发育 h40min 下包达 1/2( 图版 Ⅰ-12), 为原肠中期当受精 19h50min 左右, 胚盘继续下包到 2/3 处, 胚环继胚胎发育时期 Stage Tab. 1 续向植物极靠近, 胚环改为胚孔 ( 图版 Ⅰ-13), 即到表 1 美洲鲥胚胎发育时序 Time table of Alosa sapidissima embryonic development 发育时间 Developing time (h:min) 水温 Water Temperature ( ) 积温 Sum of temperature ( h) 图版号 Plate list 受精卵 Fertilized egg 0: 胚盘期 Blastoderm stage 0: I-1 2 细胞期 2-cell stage 1: I-2 4 细胞期 4-cell stage 1: I-3 8 细胞期 8-cell stage 1: I-4 16 细胞期 16-cell stage 2: I-5 32 细胞期 32-cell stage 2: I-6 64 细胞期 64-cell stage 3: I-7 多细胞期 Multi-cell stage 5: I-8 高囊胚期 High blastula stage 8: I-9 低囊胚期 Low blastula stage 9: I-10 原肠早期 Early gastrula stage 13: I-11 原肠中期 Middle gastrula stage 17: I-12 原肠后期 Late gastrula stage 19: I-13 神经胚期 Neural stage 22: I-14 肌节出现期 Somites appear stage 28: I-15 尾芽期 Tail bud stage 37: I-16 尾鳍出现期 Appearance of caudal fin 39: I-17 肌肉效应期 Muscular contraction 43: I-18 心跳期 Heart-beating stage 50: I-19 出膜前期 Pre-hatching stage 56: I-20 出膜期 Hatching stage 82: 了胚胎发育的原肠后期神经胚期胚孔关闭后, 形成胚体受精 22h15min 后, 两侧神经褶向正中央愈合, 形成神经管, 神经管前端膨大隆起, 开始分化, 形成前中后三个脑泡 ( 图版 Ⅰ-14) 胚体后部的中胚层不断分化, 受精后 28h35min, 形成体节 ( 图版 Ⅰ-15) 器官形成期随着胚体的发育, 胚体肌节继续分化增多, 肌节清晰可见, 头部结构越来越复杂, 晶体耳囊出现, 受精后 37h 尾芽离开卵黄囊 ( 图版 Ⅰ-16) 随着尾芽的伸长, 39h40min 在尾芽的边缘表皮外突成皮褶状的鳍 ( 图版 Ⅰ-17), 此时即为尾鳍出现期 43h 胚体缓慢而轻微地收缩, 胚体进入的肌肉效应期 ( 图版 Ⅰ-18), 此时随着胚体的发育, 尾部不断伸长 50h15min 可以看到美洲鲥胚体有明显的心脏跳动 ( 图版 Ⅰ-19), 随着时间的推移, 跳动的越来越厉害, 同时尾部脱离卵黄囊的部位越来越大出膜期胚体靠尾部的力量不断地在卵膜内翻滚摆动, 头部或者是尾部破膜而出 ( 图版 Ⅰ-20) 82h 大部分受精卵孵化出膜, 出膜的仔鱼躯体细小, 而卵黄囊较大, 没有油球, 活动能力较弱, 常静止水底, 偶尔靠尾部的摆动浮到水面, 然后自由沉到水底 2.2 仔稚鱼发育早期仔鱼刚出膜的仔鱼全长 mm, 体长 (8.38±0.37) mm, 卵黄囊椭圆形, 长径 (2.26±0.11) mm 约占全长的 1/4, 短径 (1.96±0.13) mm, 体积为 (4.57±0.77) mm 3 胸鳍原基形成, 卵黄囊上有大量半透明的星状斑纹 ( 表 2) 出膜 10h 的仔鱼眼睛布满黑色素, 心脏跳动清晰可见, 口张开, 直肠形成, 可见仔鱼脑部面积比刚孵化时明显要大, 此时仔鱼已会简单游动出膜 14h 的仔鱼胸鳍鳍条开始出现, 不时扇动口裂变大, 肛门开通, 脑部进一步发育变大 1 日龄仔鱼卵黄囊

4 156 水生生物学报 35 卷长径 (1.77±0.12) mm, 短径 (1.46±0.18) mm, 体积不到刚孵化时的一半此时仔鱼眼睛突出, 卵黄囊上发育阶段 stage Tab. 2 孵出时间 Time after hatching (h/d) 方的体肌节清晰可见, 肠道背部边缘分布着星状黑色素, 4 对鳃弓原基开始形成表 2 美洲鲥仔稚鱼发育时期形态度量 Morphological measure of larval and juvenile of Alosa sapidissima development stage 卵黄囊体积 Volume of yolk sac (mm 3 ) 全长 Total length (mm) 头长 Head length (mm) 肛前距 Preanal length (mm) 眼径 Eye diameter (mm) 体高 Body height (mm) 早期 0h 4.57± ± ± ± ±0.03 Ⅱ-1 仔鱼 6h 3.38± ± ±0.37 Ⅱ-2 Early 10h 2.72± ± ±0.23 Ⅱ-3 larvae 14h 2.21± ± ±0.11 Ⅱ-4 stage 1d 2.01± ± ± ± ±0.05 Ⅱ-5 图版号 Plate list 32h 1.33± ± ±0.39 Ⅱ-6 2d 0.71± ± ± ± ±0.02 Ⅱ-7 3d 0.33± ± ± ± ±0.01 Ⅱ-8 晚期 4d 11.49± ± ± ± ±0.07 Ⅱ-9 仔鱼 6d 12.50± ± ± ± ±0.15 Ⅱ-10 Late 9d 13.68± ± ± ± ±0.29 Ⅱ-11 larvae 11d 15.71± ± ± ± ±0.11 Ⅱ-13 stage 13d 17.03± ± ± ± ±0.18 Ⅱ-15 17d 20.17± ± ± ± ±0.23 Ⅱ-17 23d 23.07± ± ± ± ±0.37 Ⅱ-19 稚鱼期 27d 26.15± ± ± ± ±0.35 Ⅱ-20 Juvenile 30d 27.21± ± ± ± ±0.57 Ⅱ-21 stage 33d 33.10± ± ± ± ±0.50 Ⅱ-22 出膜 32h 的仔鱼下颌骨形成, 颊部明显直肠变粗, 直肠前段有些膨大, 稍微弯曲, 直肠边缘有较多的枝状黑色素胸鳍扩大, 辐射状鳍条清楚, 快速扇动, 全身肌节清晰可见 2 日龄仔鱼卵黄囊长径 (1.41±0.13) mm, 短径 (0.98±0.17) mm, 体积只有刚孵化的 15.54% 口张合速度加快, 尾部脊索部位开始有分支状色素, 前肠明显分化为食道和略为膨大的胃 3 日龄仔鱼卵黄囊长径 (1.15±0.12) mm, 短径 (0.74±0.19) mm, 卵黄囊即将完全吸收肠道有食物胸鳍增大, 背部鳍膜变厚变大, 四对鳃弓原基清晰可见晚期仔鱼 4 日龄仔鱼体长 (11.23±0.69) mm, 卵黄囊已被完全吸收, 开始转化为外源性营养, 背鳍原基可见, 头骨变厚, 开始不透明, 头盖骨开始形成仔鱼发现食物后, 划动胸鳍身体弯成 S 型的攻击态, 然后迅速挺直身体前冲捕食 6 日龄仔鱼背鳍鳍条可见, 鱼体在身体后半部的体侧中部有 4 8 个排成一排的星状黑色素, 个体间大小差异变大 9 日龄仔鱼臀鳍原基褶膜变宽变厚, 尾椎骨稍微上翘, 尾鳍鳍条开始发育 10 日龄仔鱼体测中部一排星状黑色素变多, 并延伸到身体的前半部 ( 图版 Ⅱ-12) 11 日龄仔鱼尾鳍鳍条清晰可见, 肠道壁上色素增大成带状 12 日龄仔鱼臀鳍开始出现 ( 图版 Ⅱ-14) 13 日龄仔鱼尾柄上的一排星状斑纹延至头部, 总的数量不多 15 日龄臀鳍鳍条明显 ( 图版 Ⅱ-16) 17 日龄仔鱼腹鳍开始出现, 体侧面的星状黑色素现在扩至全身, 分布无规律, 背部斑纹较密集在灯光下, 仔鱼成群在池水上层不停的做有规律的顺时针或逆时针运动 21 日龄仔鱼尾椎弯曲完成, 仔鱼的鳔明显充气 ( 图版 Ⅱ-18) 23 日龄仔鱼, 鳔在腹腔背部, 身体 1/2 段靠前, 鳔长 (2.03±0.68) mm, 心脏贯通到背主动脉尾主动

5 1 期洪孝友等 : 美洲鲥胚胎及仔稚鱼的发育 157 脉, 红色血液清晰可见鳃盖骨右下方幽门盲囊出现, 尾鳍开始分叉稚鱼期 27 日龄仔鱼体长 (22.79±1.08) mm, 银白色的腹膜已覆盖整个内腔, 鱼体背部尾柄有金属光泽, 鳞片开始形成 30 日龄仔鱼尾柄体侧面开始有大量鳞片, 全身大部分已经不透明 33 日龄仔鱼鱼体全身披鳞, 鱼体变态完成, 美洲鲥从稚鱼进入幼鱼阶段卵黄囊体积变化美洲鲥仔鱼卵黄囊的体积变化为 V=4.1583e h (R 2 =0.9901)( 图 1) 可见美洲鲥的卵黄囊吸收的较快, 在孵化后不到 1d 的时候卵黄囊已经吸收过半, 2d 的时候则剩下 1/5 不到美洲鲥仔稚鱼生长模型美洲鲥仔稚鱼的全长和日龄进行回归分析, 建立的仔稚鱼的拟合生长模型 ( 图 2): TL=0.0049D D (R 2 = ), 线性方程为 TL=0.6613D (R 2 = ) 图 1 美洲鲥仔鱼卵黄囊体积变化 Fig. 1 Volume of changes of yolk sac in Alosa sapidissima larvae 图 2 美洲鲥仔稚鱼的生长 Fig. 2 Growth of Alosa sapidissima larvae, juveniles 3 讨论 3.1 美洲鲥的胚胎发育美洲鲥受精卵膜径 mm, 没有油球, 在水温孵化条件下, 经过 82h 孵化出膜, 积温为 h, 这和 Greene, et al. [14] 报道的美洲鲥受精卵孵化公式较吻合 : log e (D)= log e (T), D 为孵化天数, T 为水温 ( ), 24 时, 孵化时间为 3d; 27 时, 孵化时间为 2d 同为鲥亚科的中国鲥受精卵膜径为 mm, 卵黄囊中有集中的油球 10 多颗, 随着发育集中为 2 3 颗, 在水温下, 孵化时间分别约为 17 19h 和 13 16h [15], 积温均不到 550 h, 与美洲鲥受精卵孵化时间和积温均不同 3.2 美洲鲥胚后仔鱼发育分期根据胚后发育仔鱼卵黄囊吸收, 体表器官以及营养方式的变化, 可以将美洲鲥分为早期仔鱼晚期仔鱼稚鱼和幼鱼在水温下, 4

6 158 水生生物学报 35 卷日龄仔鱼卵黄完全吸收, 进入后期仔鱼美洲鲥仔鱼经过 23d 的生长, 鱼体的运动器官已发育完全, 进入稚鱼期 27 日龄的仔鱼鱼体开始有鳞片出现, 至 33 日龄, 美洲鲥全身披满鳞片, 鱼体完成了从稚鱼到幼鱼的发育, 进入了幼鱼期而若依据形态变化, 主要是尾椎弯曲来划分仔稚幼鱼各期 [16], 则美洲鲥的晚期仔鱼可以细分为弯曲前仔鱼期弯曲仔鱼期弯曲后仔鱼期 Johnson [13] 报道美洲鲥仔鱼体长为 12 15mm 时开始进入弯曲期, 本研究美洲鲥尾椎弯曲从 9 日龄 [ 体长 (13.31±1.15) mm, n=30] 开始到 21 日龄仔鱼结束, 再经过 5d 生长, 仔鱼从弯曲后仔鱼期进入稚鱼期而唇 (Hemibarbus labeo) [17] 的弯曲期仔鱼为 9 12 日龄仔鱼 ( ) 高体革 (Scortum barcoo) [18] 为 5 17 日龄仔鱼 ( ) 条石鲷(Oplegnathus fasciatus) [19] 为日龄仔鱼 ( ), 大黄鱼 (Pseudosciaena crocea) [20] 则为日龄仔鱼 ( ) 不同种类的鱼, 因卵黄囊大小仔稚鱼期持续时间和发育速度等不同, 它们的弯曲期起始时间和持续时间也不相同 3.3 生长美洲鲥刚孵化仔鱼全长为 mm [(8.56±0.36) mm], 卵黄消失时美洲鲥体长为 mm [(11.23±0.69) mm], 与 Marcy [21] 测得美洲鲥刚孵化全长为 mm 卵黄囊消失体长为 [22] mm 的结果相仿中国鲥在初孵仔鱼全长为 mm [(2.63±0.22 )mm, n=5], 卵黄囊消失时全长约在 7.0 mm, 日龄 (D, d) 与全长 (TL, mm) 的生长直线回归方程为 TL= D+0.94, (5 D 30, R 2 =0.9940), 而美洲鲥的生长直线回归方程为 TL=0.6613D , (0 D 33, R 2 =0.9842) 可见美洲鲥初孵仔鱼要比中国鲥大, 但是没有中国鲥长得快, 美洲鲥平均日增全长 mm, 而中国鲥为 mm 中国鲥有两个死亡高峰, 一个是 4 5d 卵黄囊吸收完毕时, 另一个是 7 8d 的油球吸收完毕时候, 其认为是仔鱼没有得到必要数量的适口饵料 [23] 而美洲鲥 3 日龄仔鱼开始摄食, 4 日龄仔鱼便完成了从混合营养到外源营养的转化, 且仔鱼没有油球, 混合营养期只有 1d 左右, 与秘鲁鱼 (Engraulis ringens) [24] 比目鱼(Platichthys flesus) [25] 鱼 (Miichthys miiuy) [26] 等相类似, 因此在这个关键时刻容易遭受饥饿, 从而会导致高死亡率 [27 29], 这也许是国内养殖美洲鲥仔稚鱼成活率低的一个重要原因本实验严格控制水温以及投喂适口饵料保证了仔鱼高的成活率, 达到 88% 混合营养期作为鱼类早期发育的一个重大的临界期 [27], 延迟初次摄食时间将会导致鱼类低的存活率和较差的生长状况, 因此在此阶段除了注意环境条件外, 适时的在一定密度下添加适口性开口饵料就显得非常重要参考文献 : [1] Chittenden M E. Salinity tolerance of young American Shad, Alosa sapidissima [J]. Chesapeake Science, 1973, 14: [2] Limburg K E, Ross R M. Growth and mortality rates of larval American shad, Alosa sapidissima, at different salinities [J]. Estuaries and Coasts, 1995, 18: [3] Zydlewski J, McCormick S D. The ontogeny of salinity tolerance in the American shad, Alosa sapidissima [J]. Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences, 1997, 54: [4] Chittenden M E. Responses of young American Shad, Alosa sapidissima, to low temperatures [J]. Transactions of the American Fisheries Society, 1972, 101: [5] Lankford Jr T E, Targett T E. Low-temperature tolerance of age-0 Atlantic Croakers: recruitment implications for U.S. Mid-Atlantic Estuaries [J]. Transactions of the American Fisheries Society, 2001, 130(2): [6] Pan T S, Li H Y, Hou G J. Biological characteristics and bigsized fingerling rearing of Alosa sapidissima [J]. Reservoir Fisheries, 2006, 26(4): [ 潘庭双, 李海洋, 侯冠军. 美洲鲥鱼的生物学特性及大规格苗种培育技术. 水利渔业, 2006, 26(4): 33 34] [7] Du H, Wei Q W. Biological characteristics and resource status of Alosa sapidissima [J]. Freshwater Fisheries, 2004, 34(1): [ 杜浩, 危起伟. 美洲鲥的生物学特征及资源状况. 淡水渔业, 2004, 34(1): 62 64] [8] Wu W H, Wang B, Shi W, et al. Study on culture technology of American shad (Alosa sapidissima) on a large scale I. Juveniles culturing [J]. Chinese Journal of Fisheries, 2004, 17(2): [ 吴文化, 王斌, 师伟, 等. 美洲鲥鱼苗种规模化养殖技术研究 I. 稚鱼培育. 水产学杂志, 2004, 17(2): 61 64] [9] Yang K, Zhang J, Wang L Q, et al. Effects of different dietary protein contents on the growth of American shad juveniles [J]. Fisheries Science, 2008, 27(11): [ 杨坤, 张静, 汪留全, 等. 不同饲料蛋白水平对美洲鲥幼鱼生长

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8 160 水生生物学报 35 卷 STUDY ON THE DEVELOPMENT OF THE EMBRYO AND LARVA OF AMERICAN SHAD, ALOSA SAPIDISSIMA HONG Xiao-You 1,2, ZHU Xin-Ping 1,2, CHEN Kun-Ci 1, PAN De-Bo 1 and LI Kai-Bin 1 (1. Pearl River Fisheries Research Institute Chinese of Fishery Sciences, Guangzhou , China; 2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai , China) Abstract: The American shad (Alosa sapidissima) is a potential aquaculture species with high economic value just like the Chinese shad (Tenualosa reevesii). The fertilizing eggs of American shad were introduced from West coast of American in 2008 and the observation of morphological development of larva and juvenile of American shad were carried on. Under the water temperature of , the duration of hatching lasted 82h, according to the morphological characteristics, the embryonic development of Alosa sapidissima may be divided into 7stages: the fertilized egg stage, the cleavage stage, the blastula stage, the gastrula stage, the neural stage, the organogenesis stage and the hatching stage. The fertilizing egg of Alosa sapidissima was spherical, semibuoyant and no oil globule with diameter of mm. The total length of the newly hatched larva was (8.56±0.36) mm and the volume of the yolk sac was (4.57±0.77) mm 3 by using the formula of V=4/3π R/2 (r/2) 2. The mouth and anus opened during 1 day after hatching (DAH), meanwhile the brain began to development and the pectoral fin had formed. The volume of the yolk sac of the 2-day-old larva was (0.71±0.23) mm 3, just 15.54% of the newly hatched larva. Larva growth and development depend on the energy of yolk sac from newly hatched larva to 3DAH. Then larva entered a mixed feeding stage, finally the larva exhausted all the yolk sac and undertaken exogenous feeding stage in 4DAH, the relationship between the volume of the yolk sac (V) and the hour after hatching (h) was V=4.1583e h (R 2 =0.9901). Then the dorsal fin, caudal fin rays, anal fin rays and pelvic fin rays appeared in the late-stage larva and meanwhile the notochord flexion began on 9DAH. Fin ray of each fin completely developed. The scale occurred on 27DAH, the ontogeny of 33DAH juvenile went into the fingerling stages. The regression equation of the relationship between body total length (TL) and age in days (D) was TL=0.0049D D (R 2 =0.9885). Key words: Alosa sapidissima; Embryonic; Larvae; Juvenile; Morphological; Development

9 1期洪孝友等: 美洲鲥胚胎及仔稚鱼的发育图版Ⅰ 161 PlateⅠ 1. 胚盘期; 2. 2 细胞期; 3. 4 细胞期; 4. 8 细胞期; 细胞期; 细胞期; 细胞期; 8. 多细胞期; 9. 高囊胚期; 10. 低囊胚期; 11. 原肠早期; 12. 原肠中期; 13. 原肠后期; 14. 神经胚期; 15. 肌节出现期; 16. 尾芽期; 17. 尾鳍出现期; 18. 肌肉效应期; 19. 心跳期; 20. 出膜前期 1. Blastoderm stage; 2. 2-cell stage; 3. 4-cell stage; 4. 8-cell stage; cell stage; cell stage; cell stage; 8. Multi-cell stage; 9. High blastula stage; 10. Low blastula stage; 11. Early gastrula stage; 12. Middle gastrula stage; 13. Late gastrula stage; 14. Neural stage; 15. Somites appear stage; 16. Tail bud stage; 17. Appearance of caudal fin; 18. Muscular contraction; 19. Heart-beating stage; 20. Pre-hatching stage

10 162 水生生图版Ⅱ 物学报 35 卷 Plate Ⅱ 1. 刚出膜仔鱼; 2. 出膜 6h 仔鱼; 3. 出膜 10 小时仔鱼; 4. 出膜 14h 仔鱼; 5. 1 日龄仔鱼; 6. 出膜 32h 仔鱼; 7. 2 日龄仔鱼; 8. 3 日龄仔鱼; 9. 4 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄仔鱼; 日龄稚鱼; 日龄稚鱼; 日龄稚鱼; 日龄幼鱼 1. Newly hatched larva; 2. 6 hours after hatching; hours after hatching; hours after hatching; 5. 1-day old larva after hatching; hours after hatching; 7. 2-day old larva after hatching; 8. 3-day old larva after hatching; 9. 4-day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old larva after hatching; day old juvenile after hatching; day old juvenile after hatching; day old juvenile after hatching

人工催产干法授精孵化胚胎发育观察

人工催产干法授精孵化胚胎发育观察金万昆俞丽杨建新张慈军高永平赵宜双王春英人工催产干法授精孵化胚胎发育观察胚盘隆起细胞期细胞期细胞期细胞期细胞期多细胞期囊胚早期囊胚中期囊胚晚期原肠早期原肠中期原肠晚期神经胚期胚孔封闭期眼泡出现期尾芽期晶体出现期肌肉效应期心脏搏动期孵出期日龄仔鱼日龄仔鱼日龄仔鱼日龄仔鱼感谢中国水产科学院黑龙江水产研究所沈俊宝研究员的悉心指导