镧对铽荧光增强效应测定药物加替沙星胶囊中的加替沙星含量
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1 Pharmacy Information 药 物 资 讯, 2012, 1, Published Online November 2012 ( Determination the Gatifloxacin Drug Content in Gatifloxacin Capsule by Effect of Lanthanum on Terbium Fluorescence Enhancement Effect * Yuehui Zhao 1,2, Ye Li 1, Bo Tan 2, Lili Ma 2, Guanqiao Wang 3, Gang Li 1, Dongxue Song 1, Abdu Ahmed Abdullah 1, Jihui Zheng 1, Yuguang Lv 1# 1 College of Pharmacy, Jiamusi University, Jiamusi 2 Jiamusi City Drug Control, Jiamusi 3 Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang # yuguanglv@163.com Received: Aug. 20 th, 2012; revised: Sep. 22 nd, 2012; accepted: Oct. 5 th, 2012 Abstract: To study fluorescence of the forth generation of quinolones gatifloxacin and the rare earth ion complexes. Apply fluorescence spectrophotometry detects the fluorescence intensity of gatifloxacin and the rare earth ion complexes. Through the surface active agent, change ph and the emitting ions were added to enhance the fluorescence intensity to achieve the establishment of a high sensitivity, high selectivity of the fluorescent system. Tb 3+ -GFLX-SDS system can be strongly emitted by La 3+, the best ph 7.5, GFLX mol L 1, 0.1 mol L 1 NH 4 Cl-HCl. The fluorescence enhancement mechanism was discussed. Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS new system was established. Rare earth element analysis for the study, biological and pharmaceutical analysis has potential applications for rare earth complexes of a quinolone-related research provide a theoretical and experimental basis. A test method based on this co-luminescence system was applied to the determination of the medicine content with satisfactory results. Keywords: Rare Earth Ions; Quinolone; Gatifloxacin; Fluorescence Spectrophotometry 镧 对 铽 荧 光 增 强 效 应 测 定 药 物 加 替 沙 星 胶 囊 中 的 * 加 替 沙 星 含 量 赵 悦 辉 1,2, 李 烨 1, 谭 博 2, 马 丽 丽 2, 王 冠 乔 3, 李 刚 1, 宋 冬 雪 1,Abdu Ahmed Abdullah 1, 郑 极 慧 1 1#, 吕 玉 光 1 佳 木 斯 大 学 药 学 院, 佳 木 斯 2 佳 木 斯 市 食 品 药 品 检 验 所, 佳 木 斯 3 沈 阳 药 科 大 学, 沈 阳 # yuguanglv@163.com 收 稿 日 期 :2012 年 8 月 20 日 ; 修 回 日 期 :2012 年 9 月 22 日 ; 录 用 日 期 :2012 年 10 月 5 日 摘 要 : 探 讨 第 四 代 喹 诺 酮 类 药 物 加 替 沙 星 与 稀 土 离 子 铽 离 子 形 成 的 配 合 物 的 荧 光 特 性 应 用 荧 光 分 光 光 度 计 测 定 药 物 加 替 沙 星 与 稀 土 离 子 铽 离 子 形 成 的 配 合 物 的 荧 光 强 度, 通 过 加 入 表 面 活 性 剂 加 入 共 发 光 离 子 La 3+ 改 变 溶 液 的 ph 等 增 敏 方 法 选 择 最 佳 条 件 镧 对 该 体 系 具 有 较 强 的 荧 光 增 强 效 应, 最 佳 的 ph 值 为 7.5, 选 用 0.1 mol L 1 NH 4 Cl-HCl 效 果 最 佳, 加 替 沙 星 的 最 佳 浓 度 为 mol L 1 对 荧 光 新 体 系 的 荧 光 增 强 作 用 的 机 理 进 行 了 初 步 探 讨, 最 终 建 立 了 Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 新 体 系, 上 述 研 究 对 于 稀 土 元 素 分 析 生 物 和 药 物 分 析 都 具 * 资 助 信 息 : 黑 龙 江 省 科 技 厅 科 研 项 目 (B201015), 佳 木 斯 大 学 研 究 生 创 新 科 研 项 目 专 项 资 金 (YJSCX JD), 佳 木 斯 大 学 重 大 培 育 科 研 项 目 (LZP ),2012 年 佳 木 斯 大 学 大 学 生 创 新 创 业 训 练 计 划 校 级 项 目 (2012xjo55,A-37), 黑 龙 江 省 中 医 药 管 理 局 科 研 项 目 (ZHY12-Z195) 及 黑 龙 江 省 教 育 厅 科 研 项 目 ( ) # 通 讯 作 者 Copyright 2012 Hanspub 15
2 有 潜 在 的 应 用 价 值, 为 稀 土 和 喹 诺 酮 类 药 物 配 合 物 的 相 关 研 究 提 供 了 一 定 的 理 论 和 实 验 基 础, 可 以 用 于 测 定 人 工 合 成 样 品 和 制 剂 的 含 量, 该 方 法 选 择 性 好, 灵 敏 度 高, 结 果 令 人 满 意 关 键 词 : 稀 土 离 子 ; 喹 诺 酮 类 ; 加 替 沙 星 ; 荧 光 分 光 光 度 法 1. 引 言 喹 诺 酮 类 药 物 的 出 现, 创 造 了 合 成 抗 生 素 的 新 时 代 [1] 自 从 1962 年 由 美 国 Lesher 等 人 开 发 第 1 个 喹 诺 酮 药 物 萘 啶 酸 以 来 [2,3], 此 类 药 物 的 发 展 非 常 迅 速, 已 成 为 最 有 希 望 最 具 活 力 的 抗 生 素 研 究 领 域 之 一 喹 诺 酮 类 药 物 由 于 氟 喹 诺 酮 的 发 现 改 变 了 早 期 作 为 次 要 药 物 的 印 象, 以 它 很 强 的 抗 菌 活 性, 抗 菌 谱 广 高 效 生 物 利 用 率 高 不 良 反 应 少 半 衰 期 长 组 织 分 布 广, 在 适 应 于 多 种 系 统 的 感 染 的 治 疗 和 良 好 的 体 内 动 态 背 景 下, 作 为 对 全 身 抗 感 染 症 等 有 效 优 点 而 确 立 了 可 与 β- 内 酰 胺 类 抗 生 素 相 匹 敌 的 重 要 地 位 其 发 展 趋 势 将 有 可 能 超 过 β- 内 酰 胺 药 物, 成 为 21 世 纪 抗 感 染 药 物 的 主 要 品 种 [4] 喹 诺 酮 类 药 物 (4-quinolones) 又 称 吡 啶 酮 酸 类, 由 于 该 类 药 物 的 结 构 中 均 具 有 喹 诺 酮 母 核 结 构, 因 此 而 命 名, 属 于 化 学 合 成 抗 菌 药 第 一 个 喹 诺 酮 类 药 物 萘 啶 酸 (Nalidixic Acid) 自 1962 年 合 成 以 来, 此 类 药 物 品 种 数 量 迅 速 增 加, 至 目 前 为 止 已 发 展 为 四 代 几 十 个 品 种 喹 诺 酮 类 药 物 具 有 抗 菌 谱 广 口 服 吸 收 好 半 衰 期 长 等 很 多 优 点, 在 临 床 上 已 经 被 广 泛 的 应 用, 尤 其 在 治 疗 铜 绿 假 单 胞 菌 和 革 兰 阴 性 杆 菌 感 染 上 取 得 到 了 一 定 效 果 所 以 对 喹 诺 酮 类 药 物 分 析 检 测 方 法 的 要 求 也 越 来 越 高, 建 立 一 种 具 有 高 选 择 性 高 灵 敏 度 快 捷 的 分 析 检 测 方 法 已 经 成 为 很 多 工 作 者 的 重 要 研 究 课 题 喹 诺 酮 类 药 物 主 要 是 通 过 抑 制 细 菌 DNA 螺 旋 酶 A 亚 单 位 和 ( 或 ) 拓 扑 异 构 酶 Ⅳ [5] [6] 的 活 性 和 阻 断 DNA 复 制 为 主 要 作 用 机 制 的 抑 制 DNA 螺 旋 酶 主 要 用 于 革 兰 阴 性 菌 中, 拓 扑 异 构 酶 Ⅳ 主 要 是 在 革 兰 阳 性 菌 中 随 着 喹 诺 酮 类 药 物 在 临 床 上 的 广 泛 应 用, 细 菌 对 喹 诺 酮 类 药 物 的 耐 药 性 呈 上 升 的 趋 势 表 现 在 耐 药 细 菌 的 种 类 不 断 增 多, 耐 药 程 度 不 断 增 加, 给 临 床 治 疗 带 来 困 难 喹 诺 酮 选 择 性 地 抑 制 细 菌 的 DNA 回 旋 酶, 该 酶 为 DNA 拓 扑 异 构 酶 Ⅱ 中 的 一 种, 但 对 哺 乳 动 物 拓 扑 异 构 酶 Ⅱ 的 作 用 微 弱, 是 一 类 选 择 性 优 异 的 药 物 荧 光 分 析 是 指 利 用 某 些 物 质 在 紫 外 光 照 射 下 产 生 荧 光 的 特 性 及 其 强 度 进 行 物 质 的 定 性 和 定 量 的 分 析 的 方 法 包 括 直 接 荧 光 分 析 法 和 间 接 荧 光 分 析 法 它 的 特 点 是 快 速 简 便 灵 敏 度 高 选 择 性 好, 近 几 年 在 传 统 的 荧 光 分 光 光 度 法 的 基 础 上, 一 些 新 的 技 术 方 法 的 建 立 和 应 用, 在 很 多 领 域 得 到 了 广 泛 应 用 主 要 是 为 了 避 免 血 尿 样 品 中 内 源 性 荧 光 物 质 的 干 扰 [5-17] 多 种 喹 诺 酮 类 药 物 可 以 用 稀 土 离 子 作 为 荧 光 探 针 法 来 测 定, 并 且 有 多 篇 文 献 报 道 [18-20] 在 测 定 司 帕 [21] 沙 星 的 新 方 法 中 杜 黎 明 等 利 用 亚 硝 酸 来 氧 化 司 帕 沙 星 生 成 了 新 的 荧 光 物 质, 使 得 荧 光 强 度 增 强 利 用 司 帕 沙 星 与 卤 素 反 应 产 物 具 有 荧 光 特 性 [22], 卤 素 能 增 强 荧 光 进 而 建 立 测 定 司 帕 沙 星 的 新 方 法 本 文 建 立 了 第 四 代 喹 诺 酮 类 药 物 加 替 沙 星 与 稀 土 离 子 铽 形 成 的 荧 光 新 体 系, 并 用 于 药 物 制 剂 的 分 析 测 定, 该 方 法 选 择 性 好, 灵 敏 度 高, 结 果 令 人 满 意 2. 实 验 部 分 2.1. 仪 器 与 试 剂 仪 器 仪 器 970CRT 荧 光 分 光 光 度 计 ph 酸 度 计 FA4 型 电 子 天 平 试 剂 试 剂 加 替 沙 星 标 准 品 三 氯 化 铽 (TbCl 3 6H 2 O) 三 氯 化 镧 (LaCl 3 6H 2 O) 十 二 烷 基 磺 酸 钠 十 二 烷 基 苯 磺 酸 钠 NH 4 Ac NH 4 C l 2.2. 实 验 方 法 公 司 上 海 仪 器 分 析 制 作 总 厂 德 国 sartorius 上 海 实 验 仪 器 厂 有 限 公 司 公 司 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 北 京 方 正 稀 土 科 技 有 限 公 司 北 京 方 正 稀 土 科 技 有 限 公 司 邢 台 天 骄 化 工 科 技 有 限 公 司 济 南 百 顺 化 工 有 限 公 司 北 京 化 工 厂 天 津 市 凯 通 化 学 试 剂 有 限 公 溶 液 的 配 制 GFLX 储 备 液 (l mol L 1 ): 精 密 称 取 已 干 燥 至 恒 重 的 GFLX 标 准 品 g, 逐 滴 加 入 Copyright 2012 Hanspub
3 mol L 1 盐 酸 溶 液 使 其 溶 解, 定 容 至 100ml 容 量 瓶 Tb 3+ 储 备 液 ( mol L 1 ) : 精 密 称 取 TbCl 3 6H 2 O g, 加 水 溶 解, 定 容 至 100 ml 容 量 瓶 中, 使 用 时 逐 级 稀 释 La 3+ 储 备 液 ( mol L 1 ) : 精 密 称 取 LaCl 3 6H 2 O g, 加 水 溶 解, 定 容 至 100 ml 容 量 瓶 中, 使 用 时 逐 级 稀 释 SDS 储 备 液 ( mol L 1 ): 精 密 称 取 SDS g, 加 水 溶 解, 转 移 至 100 ml 容 量 瓶 中, 加 水 稀 释 到 刻 度 SDBS 储 备 液 ( mol L 1 ): 精 密 称 取 SDBS g, 加 水 溶 解, 转 移 至 100 ml 容 量 瓶 中, 加 水 稀 释 到 刻 度 β-cd 溶 液 (l mol L 1 ): 精 密 称 取 β-cd g, 加 适 量 水 溶 解, 转 移 至 100 ml 容 量 瓶 中, 加 水 稀 释 至 刻 度 CTMAB 溶 液 ( mol L 1 ): 精 密 称 取 CTMAB g, 加 水 溶 解, 转 移 至 100 ml 容 量 瓶 中, 加 水 稀 释 到 刻 度 GA 溶 液 (l%): 精 密 称 取 GA g, 加 适 量 水 溶 解 至 100 ml 容 量 瓶 中, 加 水 稀 释 到 刻 度 NH 4 Cl-HCl 缓 冲 液 (0.1 mol L 1,pH 6.0): 称 取 NH 4 Cl g 加 水 溶 解 至 100 ml 容 量 瓶 中, 用 盐 酸 调 节 PH 至 6.0 NH 4 Ac-HAc 缓 冲 液 (0.1 mol L 1 ): 称 取 NH 4 Ac g 加 水 溶 解 至 100 ml 容 量 瓶 中, 使 用 时 用 HAc 调 至 所 需 要 的 ph 值 KH 2 PO 4 -NaOH 缓 冲 液 (0.1 mol L 1 ): 称 取 KH 2 PO g 加 水 溶 解 至 100 ml 容 量 瓶 中, 使 用 时 调 至 所 需 要 的 ph 值 Tris-HCl 缓 冲 液 (0.1 mol L 1 ): 称 取 Tris g, 加 适 量 水 溶 解 至 100 ml 容 量 瓶 中, 使 用 时 调 至 所 需 要 的 PH 值 NaAc-HAc 缓 冲 液 (0.1 mol L 1 ): 称 取 NaAc 3 H 2 O g 加 水 溶 解 至 100 ml 容 量 瓶 中, 使 用 时 调 至 所 需 要 的 ph 值 所 用 试 剂 除 标 明 含 量 者 均 为 分 析 纯, 实 验 用 水 为 二 次 蒸 馏 水 实 验 过 程 于 25 ml 比 色 管 中 依 次 加 入 mol L 1 Tb 3+ 溶 液, mol L 1 La 3+ 溶 液, mol L 1 GFLX 溶 液, mol L 1 SDS 溶 液, NH 4 Cl-HCl 缓 冲 液 (0.1 mol L 1, ph 6.0), 加 水 稀 释 10 ml 后 摇 匀, 室 温 放 置 15 min, 用 1 cm 荧 光 池, 在 激 发 波 长 330 nm, 发 射 波 长 545 nm 条 件 下 测 定 荧 光 强 度, 激 发 光 谱 的 狭 缝 宽 度 为 10 nm, 发 射 光 谱 的 狭 缝 宽 度 为 5 nm 3. 结 果 与 讨 论 3.1. 荧 光 光 谱 Tb 3+ (1),GFLX(2),GFLX-Tb 3+ (3),GFLX-Tb 3+ - SDS(4),Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS(5) 体 系 的 发 射 光 谱 如 图 1 所 示 Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 体 系 的 激 发 峰 在 330 nm 处, 选 330 nm 为 本 体 系 的 激 发 波 长 发 射 光 谱 中 1 和 2 分 别 为 Tb 3+ 溶 液 和 GFLX 溶 液 的 荧 光 峰, 两 者 在 545 nm 处 的 荧 光 强 度 很 弱, 均 不 能 检 测 到 Tb 3+ 的 特 征 荧 光 曲 线 3 为 GFLX-Tb 3+ 配 合 物 的 荧 光 光 谱, 在 图 谱 上 能 看 到 到 此 二 元 体 系 在 545 nm 处 的 荧 光 峰, 但 是 荧 光 强 度 不 强 曲 线 4 为 GFLX-Tb 3+ -SDS 体 系 的 荧 光 光 谱, 通 过 加 入 一 定 量 的 SDS 表 面 活 性 剂 后,SDS 在 水 溶 液 中 形 成 胶 束, 有 效 的 保 护 了 处 于 激 发 单 重 态 的 稀 土 离 子 少 受 或 不 受 溶 剂 分 子 的 碰 撞, 减 少 了 能 量 损 失, 使 Tb 3+ 的 特 征 荧 光 有 了 明 显 增 强 而 曲 线 5 为 Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 配 合 物 在 激 发 波 长 330 nm 激 发 下, 于 493 nm,545 nm,586 nm 和 623 nm 处 出 现 的 wavelength/nm 实 验 条 件 :GFLX, mol L 1 ;Tb 3+, mol L 1 ;La mol L 1 ;SDS, mol L 1 ;NH 4 Cl-HCl,0.01 mol L 1 ph 6.0 Figure 1. Excitation and emission spectra: 1. Tb 3+, 2. GFLX, 3. GFLX-Tb 3+, 4. GFLX-Tb 3+ -SDS, 5. Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 图 1. 发 射 光 谱 :1. Tb 3+, 2. GFLX, 3. GFLX-Tb 3+, 4. GFLX-Tb 3+ -SDS, 5. Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 4 Copyright 2012 Hanspub 17
4 Tb 3+ 特 征 荧 光 峰, 分 别 对 应 于 Tb 3+ 的 5 D 4-7 F 6, 5 D 4-7 F 5, 5 D 4-7 F 4 和 5 D 4-7 F 3 电 子 跃 迁 其 中 以 545 nm 处 荧 光 强 度 最 大, 故 选 择 545 nm 为 发 射 波 长 与 曲 线 3 相 比, La 3+ 的 加 入 使 体 系 的 发 光 强 度 增 大 5 倍 3.2. ph 的 影 响 GFLX 属 于 第 四 代 喹 诺 酮 类 药 物, 由 于 GFLX 结 构 中 含 有 羧 基, 其 酸 效 应 可 能 会 影 响 GFLX-Tb 配 合 物 的 配 位 平 衡, 而 稀 土 元 素 在 ph 高 的 环 境 中 可 能 形 成 稀 土 氢 氧 化 物 而 破 坏 配 位 平 衡, 并 以 沉 淀 的 形 式 析 出, 因 此 控 制 体 系 ph 值 对 配 合 物 稳 定 性 是 至 关 重 要 的 本 文 在 ph 4.0~10.0 范 围 内 测 定 了 Tb 3+ -La 3+ - GFLX-SDS 体 系 的 荧 光 强 度, 其 结 果 见 图 2 实 验 结 果 表 明 ph 在 6.0~7.0 范 围 内 体 系 荧 光 最 强, 故 选 择 6.5 作 为 最 佳 PH 值 实 验 表 明, 不 同 的 缓 冲 溶 液 对 体 系 的 荧 光 强 度 也 有 很 大 的 影 响, 固 定 ph 值 为 6.5 试 验 了 以 下 5 种 缓 冲 溶 液 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响, NH 4 Ac-HAc 缓 冲 液,Tris-HCl 缓 冲 液,NaAc-HAc 缓 冲 液,NH 4 Cl-HCl 缓 冲 液,KH 2 PO 4 -NaOH 缓 冲 液, 实 验 结 果 表 明 0.01 mol L 1 Tris-HCl 效 果 最 佳, 用 量 为 1.0 ml 3.3. La 3+ 浓 度 的 影 响 光 强 度 随 其 浓 度 的 增 加 而 增 加 当 La 3+ 离 子 浓 度 为 mol L 1 时 体 系 的 荧 光 强 度 达 到 最 大 ; 而 La 3+ 浓 度 再 增 加 时, 荧 光 强 度 就 开 始 下 降 因 此, 本 实 验 中 选 择 La 3+ 浓 度 为 mol L 1 作 进 一 步 研 究 3.4. 表 面 活 性 剂 的 影 响 不 同 的 表 面 活 性 剂 对 Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 不 同, 本 文 对 以 下 5 种 表 面 活 性 剂 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 进 行 了 考 察, 结 果 见 表 1 实 验 结 果 发 现, 非 离 子 表 面 活 性 剂 (GA,β-CD) 和 阳 离 子 表 面 活 性 剂 (CTMAB) 的 增 敏 能 力 不 大, 而 阴 离 子 表 面 活 性 剂 SDS 与 SDBS 的 增 敏 效 果 较 好, 其 中 又 以 SDS 效 果 最 佳, 所 以 本 文 选 择 SDS 作 为 增 敏 的 表 面 活 性 剂 SDS 的 浓 度 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 见 图 4, 结 果 表 明 SDS 的 浓 度 在 ~ mol L 1 范 围 内 体 系 的 荧 光 强 度 能 保 持 最 大, 所 以 本 实 验 中 选 择 SDS 的 浓 度 为 mol L 试 剂 的 加 入 顺 序 与 体 系 的 时 间 稳 定 性 本 文 考 察 了 10 种 不 同 的 试 剂 加 入 顺 序 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响, 结 果 见 表 2 实 验 结 果 表 明, 依 次 加 1000 本 文 考 察 了 共 发 光 离 子 La 3+ 浓 度 对 体 系 的 影 响, 实 验 结 果 如 图 3 所 示 当 La 3+ 离 子 浓 度 较 小 时, 其 荧 C La /10-3 实 验 条 件 :GFLX, mol L 1 ; Tb 3+, mol L 1 ; SDS, mol L 1 ; NH 4 Cl-HCl, 0.01 mol L 1 ph 6.0 Figure 3. La 3+ concentration effects on the fluorescence intensity 图 3. La 3+ 浓 度 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 ph 10 Table 1. Different surfactants effects on the fluorescence intensity 表 1. 不 同 表 面 活 性 剂 的 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 实 验 条 件 :GFLX, mol L 1 ; Tb 3+, mol L 1 ; La mol L 1 ; SDS, mol L 1 Figure 2. ph effects on the fluorescence intensity 图 2. ph 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 表 面 活 性 剂 SDS SDBS CTMAB GA β-cd 荧 光 强 度 Copyright 2012 Hanspub
5 标 准 曲 线 在 最 佳 实 验 条 件 下, 建 立 了 GFLX 的 浓 度 与 荧 光 强 度 之 间 的 工 作 曲 线, 其 结 果 表 明,GFLX 在 ~ mol L 1 范 围 内 与 荧 光 强 度 呈 良 好 的 线 性 关 系 相 关 系 数 r 2 为 , 线 性 方 程 : If = C GFLX 检 出 限 mol L 样 品 含 量 测 定 和 方 法 对 照 C SDS /10-3 实 验 条 件 :GFLX, mol L 1 ; Tb 3+, mol L 1 ; La mol L 1 ; Tris-HCl, 0.01 mol L 1 ph 6.0 Figure 4. SDS concentration effects on the fluorescence intensity; 图 4. SDS 浓 度 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 Table 2. Joined the order of the fluorescence intensity 表 2. 加 入 顺 序 对 体 系 荧 光 强 度 的 影 响 A B C D E 强 度 1 La 3+ Tb 3+ GFLX SDS NH 4 Cl-HCl GFLX Tb 3+ La 3+ SDS NH 4 Cl-HCl La 3+ GFLX Tb 3+ SDS NH 4 Cl-HCl Tb 3+ La 3+ SDS GFLX NH 4 Cl-HCl Tb 3+ SDS La 3+ GFLX NH 4 Cl-HCl Tb 3+ SDS GFLX La 3+ NH 4 Cl-HCl Tb 3+ GFLX La 3+ SDS NH 4 Cl-HCl NH 4 Cl-HCl Tb 3+ GFLX La 3+ SDS GFLX La 3+ Tb 3+ NH 4 Cl-HCl SDS Tb 3+ La 3+ GFLX SDS NH 4 Cl-HCl 入 Tb 3+ 溶 液,La 3+ 溶 液,GFLX 溶 液,SDBS 溶 液, NH 4 Cl-HCl 缓 冲 液 (0.1 mol L 1,pH 6.0), 为 最 佳 加 入 顺 序 在 最 佳 实 验 条 件 下, 体 系 配 好 后 即 产 生 荧 光, 5 min 后 荧 光 强 度 达 最 大, 且 在 2 h 内 基 本 不 变, 随 时 1 间 延 长 体 系 荧 光 强 度 呈 下 降 趋 势 故 实 验 溶 液 荧 光 强 度 的 测 定 应 选 在 配 制 完 成 后 15 min, 此 时 灵 敏 度 最 大, 准 确 度 最 高 3.6. 干 扰 物 质 的 影 响 在 最 佳 实 验 条 件 下, 固 定 加 替 沙 星 浓 度 为 mol L 1, 对 体 内 常 见 Cu 2+,Fe 3+ 等 离 子 的 影 响 进 行 了 研 究 在 相 对 误 差 为 ±10% 范 围 内, 干 扰 物 质 的 最 大 容 许 浓 度 如 表 3 所 示 实 验 表 明, 大 部 分 的 离 子 对 本 实 验 影 响 较 小 本 方 法 亦 应 用 于 加 替 沙 星 胶 囊 的 含 量 测 定 取 诺 加 替 沙 星 星 胶 囊 10 粒 经 称 重 研 细 称 取 溶 解 过 滤 转 移 后, 采 用 标 准 曲 线 法 进 行 测 定 该 产 品 标 示 量 为 100 mg/ 粒, 测 得 量 为 98.6 mg/ 粒, 回 收 率 为 98.6%,RSD = 1.2% (n = 5) 本 文 用 新 建 立 的 GFLX-Tb 3+ -SDBS 荧 光 体 系 和 紫 外 分 光 光 度 法 分 别 对 加 替 沙 星 注 射 液 中 GFLX 的 含 量 进 行 测 定, 其 结 果 见 表 4, 结 果 表 明 两 种 方 法 测 得 的 含 量 差 别 不 大 加 替 沙 星 : 批 号 H50846, 规 格 100 mg/50ml, 结 果 表 明 荧 光 法 简 便 准 确 4. 结 论 稀 土 离 子 荧 光 探 针 方 法 在 得 到 广 泛 应 用 的 同 时 对 它 的 灵 敏 度 选 择 性 以 及 体 系 稳 定 性 的 要 求 也 越 来 越 高, 目 前 主 要 通 过 1) 表 面 活 性 剂 加 入 ;2) 在 稀 土 二 元 配 合 物 中, 另 一 个 配 位 体 的 引 进, 即 协 同 配 体 ( 或 第 二 配 体 );3) 稀 土 共 发 光 效 应 三 个 方 面 来 改 善 共 [23] 发 光 效 应 也 叫 协 同 发 光 效 应 是 加 入 第 二 种 不 发 光 的 稀 土 元 素, 可 使 稀 土 有 机 配 合 物 荧 光 体 系 荧 光 强 度 明 显 增 大 的 现 象 利 用 共 发 光 效 应 测 定 稀 土 元 素 以 及 Table 3. Maximum permissible concentration of interference material 表 3. 干 扰 物 质 的 最 大 允 许 浓 度 干 扰 物 质 最 大 允 许 浓 度 (mol L 1 ) Cu 2+ 2, SO Fe 3+, Cl Al 3+, Cl Mg 2+ 2, SO Ca 2+, Cl K +, Cl Na +, Cl Zn 2+, 2 SO Copyright 2012 Hanspub 19
6 Table 4. Gatifloxacin levels 表 4. 加 替 沙 星 的 含 量 样 品 批 号 标 记 浓 度 (100 mg/50ml) 标 记 浓 度 (100 mg/50ml) 2012Z Z Z 协 同 发 光 机 理, 灵 敏 度 和 体 系 的 稳 定 性 极 大 提 高 [24,25] 本 文 在 加 替 沙 星 和 铽 的 荧 光 体 系 下, 通 过 表 面 活 性 剂 加 入, 使 得 该 体 系 的 荧 光 强 度 得 到 了 明 显 的 提 高, 增 强 了 约 5 倍 并 详 细 研 究 了 Tb 3+ -La 3+ -GFLX-SDS 体 系 的 荧 光 光 谱 特 性 和 对 本 体 系 具 有 一 定 影 响 作 用 因 素 的 确 定 通 过 上 面 一 系 列 的 实 验, 最 终 建 立 了 Tb 3+ - La 3+ -GFLX-SDS 新 体 系, 并 且 用 此 方 法 测 定 加 替 沙 星 该 方 法 操 作 简 便, 不 需 要 对 样 品 进 行 复 杂 的 预 处 理, 灵 敏 度 高, 选 择 性 好, 适 用 于 注 射 剂 中 加 替 沙 星 的 含 量 测 定, 结 果 表 明 荧 光 法 简 便 准 确 5. 致 谢 在 此 感 谢 黑 龙 江 省 科 技 厅 科 研 项 目 (B201015), 佳 木 斯 大 学 研 究 生 创 新 科 研 项 目 专 项 资 金 (YJSCX JD), 佳 木 斯 大 学 重 大 培 育 科 研 项 目 (LZP ),2012 年 佳 木 斯 大 学 大 学 生 创 新 创 业 训 练 计 划 校 级 项 目 (2012xjo55,A-37), 黑 龙 江 省 中 医 药 管 理 局 科 研 项 目 (ZHY12-Z195) 及 黑 龙 江 省 教 育 厅 科 研 项 目 ( ) 对 本 文 研 究 工 作 的 大 力 支 持 参 考 文 献 (References) [1] 陈 超 森, 曾 卓, 熊 淑 群. 喹 诺 酮 类 药 物 的 研 究 进 展 [J]. 精 细 化 工 中 间 体, 5, 35(5): 1-5. [2] 陈 磊, 高 忠 良, 刘 雁 等. 喹 诺 酮 类 药 物 母 环 的 衍 变 及 合 成 研 究 [J]. 精 细 石 油 化 工 进 展, 5, 6(11): [3] 王 玉 成, 王 秀 云, 郭 慧 元. 近 年 我 国 喹 诺 酮 类 抗 菌 剂 的 研 究 进 展 [J]. 中 国 医 药 工 业 杂 志, 4, 35(3): [4] 粱 诚. 氟 喹 诺 酮 类 药 物 生 产 现 状 与 研 究 进 展 [J]. 精 细 与 专 用 化 学 品, 5, 13(5): 1-3. [5] 连 宁, 孙 春 燕, 赵 慧 春. 加 替 沙 星 的 荧 光 光 度 法 测 定 [J]. 分 析 测 试 学 报, 2, 21: [6] M. Cordoba-Borrego, M. Cordoba-Diaz, I. Bernabe, Cordoba- Diaz. Determination of norfloxacin by fluorescence in the presence of different antacids: Quantification of analytical interferences. Journal of PHarmaceutical and Biomedical Analysis, 1996, 8(14): [7] A. Navalón, O. Ballesteros, R. Blanc and J. L. Vílchez. Determination of ciprofloxacin in human urine and serum samples by solid-phase spectrofluorimetry. Talanta, 0, 5(52): [8] 仲 宣 惟. 荧 光 光 度 法 测 定 氟 罗 沙 星 胶 囊 含 量 [J]. 天 津 药 学, 0, 12: [9] 徐 莉 英 等. 诺 氟 沙 星 在 胶 束 体 系 中 的 荧 光 分 析 方 法 [J]. 理 化 检 验 化 学 分 册, 2, 38: [10] 王 静 萍, 杜 黎 明, 许 庆 琴. 环 丙 沙 星 在 胶 束 体 系 中 的 荧 光 特 性 研 究 及 应 用 [J]. 光 谱 学 与 光 谱 分 析, 2, 22(2): [11] 高 建 华, 陈 彬, 菅 军 伟. 血 清 中 盐 酸 洛 美 沙 星 的 测 定 及 荧 光 光 谱 特 性 [J]. 郑 州 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ), 0, 32(4): [12] 颜 承 农, 上 官 风 云, 潘 祖 亭 等. 盐 酸 芦 氟 沙 星 的 荧 光 光 谱 分 析 法 研 究 [J]. 分 析 科 学 学 报, 3, 19(2): [13] 杜 黎 明, 王 静 萍, 范 哲 锋, 叶 玉 香. 氧 氟 沙 星 在 胶 束 体 系 中 的 荧 光 特 性 及 应 用 [J]. 分 析 化 学, 2, 30(1): [14] M. C. Mahedero, D. Bohoyo, F. Salinas and T. Ardila. Improvement sineuro Pimsensitized fiuorimetric determination of demeelocyelin and methacyeline. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 5, 37(5): [15] C. Y. Chen, C. C. Guo and W. Jiang. Rapid determination minoeyeline in Pharmaeutieal for mulations and humanne/serumsam Plesbase on the minoeyeline-europiurn-sodiutndode eylbenzene sulfonate lumineseenc system. Analytical Letters, 9, 42(11): [16] C. X. Sun, J. H. Yang, L. Li, et al. Advances in the study of luminescence probes for proteins. Journal of Chromatography B, 4, 803(1): [17] 吕 玉 光, 赵 悦 辉, 李 刚, 王 莹, 李 烨 等. 采 用 荧 光 光 谱 法 测 定 谷 氨 酸 诺 氟 沙 星 氯 化 钠 注 射 液 中 诺 氟 沙 星 的 含 量 [J]. 中 国 卫 生 检 验 杂 志, 2012, 8: 1-3. [18] M. Rizk, Y. El-Shabrawy. Fluorimetric determination of aminoglycoside antibiotics using lanthanide probe ion spectroscopy. Talanta, 1995, 42(12): [19] 童 裳 伦, 项 光 宏, 黄 迪 金 等. 表 面 活 性 剂 敏 化 铽 离 子 荧 光 探 针 对 氧 氟 沙 星 的 测 定 [J]. 分 析 化 学, 4, 32(5): [20] 周 静, 杜 黎 明, 陈 彩 萍. 铽 - 培 氟 沙 星 的 荧 光 特 性 研 究 及 培 氟 沙 星 的 测 定 [J]. 光 谱 学 与 光 谱 分 析, 4, 24(6): [21] 杜 黎 明, 晋 卫 军, 董 川 等. 司 帕 沙 星 - 亚 硝 酸 荧 光 体 系 性 质 的 研 究 及 应 用 [J]. 化 学 通 报 ( 论 文 摘 要 ), 0, 4: [22] 杜 黎 明, 范 哲 锋, 郭 全 娥. 司 帕 沙 星 与 卤 素 反 应 产 物 的 荧 光 特 性 及 其 应 用 [J]. 分 析 化 学, 1, 29(3): [23] L. Li, J. H. Yang, X. Wu, et al. Analysis of guanosine-50-monophosphate at nm level based on the columinescence effect of Tb-Gd-GMP system. Journal of Luminescence, 4, 109(1): [24] C. X. Sun, J. H. Yang and L. Li. Advances in the study of luminescence probes for proteins. Journal of Chromatography B, 4, 803(2): [25] L. Wang. Spectrofluorimetric determination of trace amounts of Europium(Ⅲ) ion with Lutetium(Ⅲ)-sparfloxacin-sodium dodecyl sulfate luminescence enhancement system. Analytical Sciences, 4, 20(1): Copyright 2012 Hanspub
ph ph ph Langmuir mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 3 CO 2-3 PO mg /L 5 p
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