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1 生物制品实验动物质量控制生物制品实验动物分为生物制品生产用实验动物和检定用实验动物 生产用实验动物是指用于生物制品生产的实验动物, 检定用动物则是用于生物制品检定的实验动物 本通则是对生物制品生产用和检定用实验动物微生物与寄生虫学的质量控制要求 实验动物的管理应符合国家相关要求 一 实验动物微生物学等级分类按照实验动物携带微生物与寄生虫情况进行等级分类, 分为普通级 清洁级 无特定病原体级和无菌级实验动物 普通级实验动物 [conventional (CV) animal] 系指不携带所规定的重要人兽共患病和烈性传染病病原的实验动物 清洁级实验动物 [clean (CL) animal] 系指不携带普通级实验动物的病原, 并且不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体的实验动物 无特定病原体级实验动物 [specific pathogen free (SPF) animal] 系指不携带普通级和清洁级实验动物的病原, 并且不携带主要潜在感染或条件致病和对科学研究干扰大的病原体的实验动物 无菌级实验动物 [Germ Free (GF) animal] 指无可检出的一切生命体的实验动物 SPF 鸡胚是指由 SPF 鸡所产的受精卵, 在符合生物制品生产条件下, 经孵化后所生成的鸡胚 疫苗生产与检定应采用适宜级别的实验动物, 具体应符合相关各

2 论的要求 二 检测要求 1 外观要求实验动物应外观健康 无异常 2 微生物与寄生虫学检测项目常用实验动物检测要求见表 1-8 必须检测项目, 在日常检查时必须定期检测 ; 必要时检测项目, 在供应商评估或者怀疑有感染时进行检查, 根据需要而定 3 实验动物质量检测频率一般不少于 3 个月 表 1 生物制品生产用 检定用小鼠微生物与寄生虫学检测项目 检测项目 检定用清洁级 SPF 级 生产用 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 Lymphocytic Choriomeningitis Virus (LCMV) 汉坦病毒 Hantavirus (HV) 鼠痘病毒 Ectromelia Virus (Ect.) 小鼠肝炎病毒 Mouse Hepatitis Virus (MHV) 仙台病毒 Sendai Virus (SV) 小鼠肺炎病毒 Pneumonia Virus of Mice - (PVM) 呼肠孤病毒 Ⅲ 型 Reovirus type Ⅲ (Reo- - 3) 小鼠细小病毒 Minute Virus of Mice (MVM) - 小鼠脑脊髓炎病毒 Theiler s Mouse Encephalomyelitis Virus(TMEV) - 小鼠腺病毒 Mouse Adenovirus (Mad) - 多瘤病毒 Polyoma Virus (POLY) - 小鼠诺如病毒 (Murine Norovirus,MNV) - - 沙门菌 Salmonella spp. 假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis 小肠结肠炎耶尔森菌 Yesinia enterocolitica

3 皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi 念珠状链杆菌 Streptobacillus moniliformis 支原体 Mycoplasma spp. 鼠棒状杆菌 Corynebacterium kutscheri 泰泽病原体 Tyzzer's organism 大肠杆菌 O115 a,c,k(b)escherichia coli O115 a,c,k(b) 嗜肺巴斯德杆菌 Pasteurella - pneumotropica 肺炎克雷伯杆菌 Klebsiella pneumoniae - 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus - 肺炎链球菌 Streptococcus pnemoniae - 乙型溶血性链球菌 β - hemolyticstreptococcus - 绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa - 螺杆菌 (Helicobacter spp.) - 牛棒状杆菌 ( Corynebacterium bovis, C.bovis) - - 体外寄生虫 ( 节肢动物 )Ectoparasites 弓形虫 Toxoplasma gondii 兔脑原虫 Encephalitozoon cuniculi 卡氏肺孢子虫 Pneumocystis carinii 全部蠕虫 All Helminths 鞭毛虫 Flagellates - 纤毛虫 Ciliates - 注 : 必须检测项目, 要求阴性, 必要时检测项目, 要求阴性,- 不要求检测 表 2 生物制品生产用地鼠微生物与寄生虫学检测项目 检测项目 清洁级 SPF 级 小鼠肝炎病毒 Mouse hepatitis virus (MHV) - 小鼠细小病毒 Minute virus of mice(mvm) - 小鼠脊髓灰质炎病毒 Mouse poliovirus(mpv) - 仙台病毒 Sendai virus(s V) 汉坦病毒 Hantaan virus(hv) - 淋巴脉络丛脑膜炎病毒 Lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV) 猴病毒 5 Simian virus 5(SV5) - 大鼠 K 病毒 Kilham rat virus(krv) - 吐兰病毒 Toolans H-a virus(h-a V) -

4 地鼠多瘤病毒 Hamster polyoma virus(hpv) - 逆转录病毒 Retroviruses - 呼肠孤 3 型病毒 respiratory enteric orphan virus 3(Reo-3) - 小鼠肺炎病毒 Pneumonia virus of mice(pvm) - 沙门氏菌 Salmonella spp 皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi 多杀巴斯德杆菌 Pasteurella multocida 支气管败鲍特菌 Bordetella bronchiseptica 泰泽病原体 Tyzzer, s organism 嗜肺巴斯德杆菌 Pasteurella pneumotropica - 肺炎克雷伯杆菌 Klbsiella pneumotropiae - 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus - 绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa - 支原体 Mycoplasmas - 分枝杆菌 Mycobacteria - 假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis - 小肠结肠炎耶尔森菌 Yersinia enterocolitica - 念珠状链球菌 Streptococcus moniliformis - 体外寄生虫 ( 节肢动物 )Ectoparasites 弓形虫 Toxoplasma gondii 爱美尔球虫 Eimaria spp. 全部蠕虫 All Helminths 鞭毛虫 Flagellates 注 : 必检项目, 要求阴性 ; 必要时检测, 要求阴性 ;- 不要求检测 表 3 生物制品生产用长爪沙鼠微生物与寄生虫学检测项目 检测项目淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 Lymphocytic choriomeningitis (LCMV) 汉坦病毒 Hantaan virus (hantavirus) 小鼠肝炎病毒 Mouse hepatitis virus (MHV) 仙台病毒 Sendai virus 小鼠肺炎病毒 Pneumonia virus of mice (PVM) 呼肠孤病毒 III 型 Reovirus 3 (REO-3) 小鼠脑脊髓炎病毒 GDVII (TMEV) virus 小鼠微小病毒 Mouse minute virus (MMV) 沙门菌 Salmonella spp. 皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi 泰泽病原体 Clostridium piliforme 检测要求

5 支原体 Mycoplasma spp. 多杀巴斯德杆菌 pasteurellaceae 支气管鲍特杆菌 Bordetella bronchiseptica 大肠埃希菌 0115a,c:K(B)Escherichia coli 0115a, c:k(b) 嗜肺巴斯德杆菌 Pasteurella pneumotropica 肺炎克雷伯杆菌 Klebsiella pneumoniae 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 鼠棒状杆菌 Corynebacterium kutscheri 绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa 肺炎链球菌 Streptococcus pneumoniae 乙型溶血性链球菌 β-hemolytic Streptococcus 产酸克雷伯杆菌 Klebsiella oxytoca 螺杆菌 Helicobacter spp. 幽门螺旋杆菌 Helicobacter pylori 体外寄生虫 Ectroparasites 弓形虫 Toxoplasma gondi 全部蠕虫 All Helminths 鼠三毛滴虫 Tritrichomonas muris 兔脑原虫 Encephalitozoon cuniculi(ecun) 卡氏肺孢子虫 Pneumocystis carinii(pcar) 鞭毛虫 Flagellates 纤毛虫 Ciliares 注 : 必须检测项目, 要求阴性 ; 必要时检测项目, 要求阴性 表 4 生物制品检定用家兔微生物与寄生虫学检测项目 检测项目 普通级 清洁级 沙门菌 Salmonella spp. 假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis 小肠结肠炎耶尔森菌 皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi 多杀巴斯德杆菌 pasteurellaceae - 泰泽病原体 Clostridium piliforme - 兔出血症病毒 Rabbit hemorrhagic disease virus(rhdv) 体外寄生虫 ( 节肢动物 )Ectroparasites - 弓形虫 Toxoplasma gondi - 兔脑原虫 Encephalitozoon cuniculi(ecun) - 爱美尔球虫 Eimeria spp. -

6 卡氏肺孢子虫 Pneumocystis carinii(pcar) - 全部蠕虫 All Helminths - 注 : 必须检测项目, 要求阴性 ; 必要时检测项目, 要求阴性 ; 可以免疫,- 不要求 检测 表 5 生物制品生产用 检定用猴微生物与寄生虫学检测项目 检测项目 检定用 生产用 猕猴疱疹病毒 1 型 (B 病毒 )Cercopithecine Herpesvirus Type 1(BV) 麻疹病毒 (measles virus) - 猿猴空泡病毒 40(Simian vacuolating virus 40, SV40) - 猴副流感病毒 5 型 (simian parainfluenza virus 5,SV5) - 猴泡沫病毒 simian foamy virus - 沙门菌 Salmonella spp 皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi 志贺菌 Shigella spp 结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis 体外寄生虫 ( 节肢动物 ) Ectoparasites 弓形虫 Toxoplasma gondii 注 : 必须检测项目, 要求阴性 ; 必要时检测项目, 要求阴性 ;- 不要求检测 表 6 生物制品检定用豚鼠微生物与寄生虫学检测项目 检测项目 普通级 清洁级 SPF 级 淋巴脉络丛脑膜炎病毒 Lymphocytic choriomeningitis virus(lcmv) 仙台病毒 Sendai virus(s V) - 小鼠肺炎病毒 Pneumonia virus of mice(pvm) - - 呼肠孤 3 型病毒 respiratory enteric orphan virus 3 (Reo-3) - - 沙门氏菌 Salmonella spp 假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis - - 小肠结肠炎耶尔森菌 Yersinia enterocolitica - - 念珠状链球菌 Streptococcus moniliformis - - 皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi - - 多杀巴斯德杆菌 Pasteurella multocida - 支气管败鲍特菌 Bordetella bronchiseptica - 泰泽病原体 Tyzzer, s organism -

7 嗜肺巴斯德杆菌 Pasteurella pneumotropica - - 肺炎克雷伯杆菌 Klbsiella pneumotropiae - - 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus - - 肺炎链球菌 Streptococcus pneumoniae - - 乙型溶血性链球菌 β-hemolytic Streptococcus - - 绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa - - 体外寄生虫 ( 节肢动物 )Ectoparasites 弓形虫 Toxoplasma gondii 全部蠕虫 All Helminths - 鞭毛虫 Flagellates - 纤毛虫 Ciliares - - 注 : 必检项目, 要求阴性 ; 必要时检测, 要求阴性 ;- 不要求检测 表 7 生物制品生产用马微生物与寄生虫学检测项目 检测项目 马传贫病毒 Equine infectious anemia virus 马鼻疽 Glanders 布氏杆菌病 Brucellosis 马副伤寒 paratyphoidfever 马流行性感冒 Equine innuenza 马鼻腔肺炎 Equine rhinopneumonitis 检测要求 注 : 必须检测项目, 要求阴性 ; 必要时检测项目, 要求阴性 表 8 生物制品生产用 SPF 鸡胚微生物学检测项目 检验项目检测要求参考检测方法鸡白痢沙门菌 Salmonella pullorum SPA, IA, TA AGP, HI,ELISA, 禽流感病毒 A 型 Avian Influenza Virus (Type A) RT-PCR 传染性支气管炎病毒 Infectious Bronchitis Virus AGP, SN, HI,ELISA 传染性法氏囊病病毒 Infectious Bursal Disease Virus AGP, SN,ELISA 传染性喉气管炎病毒 Infectious Laryngotracheitis AGP, SN,ELISA Virus 新城疫病毒 Newcastle Disease Virus HI,ELISA 禽痘病毒 Fowl Pox Virus AGP,CO 马立克病病毒 Marek's Disease Virus AGP

8 检验项目检测要求参考检测方法 副鸡嗜血杆菌 Haemophilus paragallinarum SPA,ELISA,CO, 多杀巴斯德菌 Pasteurella multocida AGP,CO,IA 禽腺病毒 Ⅲ 群 (EDS)Avian Adenovirus Group Ⅲ( 含 减蛋综合征病毒 ) IA HI,ELISA 鸡毒支原体 Mycoplasma gallisepticum SPA, HI,ELISA 滑液囊支原体 Mycoplasma synoviae SPA, HI,ELISA 禽脑脊髓炎病毒 Avian Encephalomyelitis Virus 淋巴白血病病毒 Lymphoid Leukosis virus( 禽白血病 病毒 (Avian leukosis Virus) AGP,EST, SN, ELISA ELISA 网状内皮增生症病毒 Reticuloendotheliosis Virus AGP,ELISA 禽呼肠孤病毒 ( 病毒性关节炎 )Avian Reovirus AGP,ELISA 禽腺病毒 Ⅰ 群 Avian Adenovirus Group I AGP 鸡传染性贫血病毒 Chicken Infectious Anaemia Virus IFA,ELISA,PCR 禽结核 (Avian Tuberculosis) CO,PCR 禽副流感病毒 (Avian Parainfluenza Virus) HI 注 1: 必须检测项目, 要求阴性 ; 必要时检测项目, 要求阴性 注 2: SPA, 血清平板凝集试验 ;IA, 病原菌分类 ;AGP, 琼脂扩散试验 ;HI, 血凝抑制试验 ;CO, 临床观察 ; ELISA, 酶联免疫吸附试验 ;EST, 胚敏感试验 ;SN, 血清中和试验 ;TA, 试管凝集试验 ;IFA. 间接免疫荧光试验 AGG; 凝集 ; AGP: 琼脂凝胶沉淀法, 该技术适用于每周进行测试 EIA: 酶免疫分析 ;Hi: 血凝抑制 ; IS: 免疫组化染色 ;VN: 病毒中和 三对实验动物供应商的要求 为了从源头对实验动物进行质量控制, 应选择符合要求的实验 动物供应商, 并提供质量合格证明

9 课题承担单位 : 中国食品药品检定研究院 协作单位 : 国家卫健委科学技术研究所 北京科兴生物制品有限公司 中国医科院医学实验动物研究所 华兰生物疫苗有限公司 舒泰神 ( 北京 ) 生物制药股份有限公司 未名生物工程有限公司

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