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1 2017 年 5 月第 27 卷第 5 期 中国比较医学杂志 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE May, 2017 Vol. 27 No. 5 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌多重 PCR 方法的建立与初步应用 技术方法 祝岩波 1, 郑龙 1, 尤红煜 1, 王璇 2, 梁晓亮 1, 刘健敏 1, 张东明 1, 连伟光 1, 栗彦宁 1 1, 王俊霞 (1 河北省实验动物重点实验室, 河北医科大学实验动物学部, 石家庄 ; 2 河北医科大学第二医院, 石家庄 ) 摘要 目的建立金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌多重 PCR 检测方法, 为实验动物细菌检测提供快速 灵敏 简便的方法 方法根据金黄色葡萄球菌 nuc 基因 绿脓杆菌 LasI 基因 肺炎克雷伯杆菌 PhoE 基因和细菌通用 16S rrna 基因设计出特异性引物 ; 经过多重 PCR 引物浓度和退火温度的优化, 特异性和敏感性的检测, 建立多重 PCR 体系 应用该 PCR 体系对人工感染标本 实验动物粪便样本进行验证检测, 与传统检测方法对比 结果多重 PCR 分别扩增出金黄色葡萄球菌 (153 bp) 绿脓杆菌(600 bp) 肺炎克雷伯杆菌 (368 bp) 和通用 (520 bp) 的目的条带 多重敏感性为 10 pg, 特异性检测未从其他细菌中检测出目的条带 应用建立的多重 PCR 体系检测出不同组合的人工感染标本, 从 76 只粪便检测出绿脓杆菌阳性 1 例, 与传统检测方法结果一致 结论本文建立的多重 PCR 方法具有特异 灵敏 简便 快速等优点, 为实验动物微生物的快速检测提供了可靠的方法 关键词 金黄色葡萄球菌 ; 绿脓杆菌 ; 肺炎克雷伯杆菌 ; 多重 PCR 中图分类号 R 33 文献标识码 A 文章编号 (2017) doi: j. issn Establishment and application of a multiplex PCR method in Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae ZHU Yan bo 1,ZHENG Long 1,YOU Hong yu 1,WANG Xuan 2,LIANG Xiao liang 1,LIU Jian min 1, ZHANG Dong ming 1,LIAN Wei guang 1,LI Yan ning 1,WANG Jun xia 1 (1 Department of key laboratory Animal Hebei Province, laboratory Animal Hebei Medical University, Shijiazhuang ,China; 2 The Second Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang ,China) Abstract Objective Aiming at detecting Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae in laboratory animals,the paper provides a rapid,sensitive and simple test method. Methods According to Staphylococcus aureus nuc gene,pseudomonas aeruginosa LasI gene,klebsiella pneumonia PhoE gene and general 16S rrna gene, designed specific primers ; Through the optimization of multiplex PCR primer concentrations and annealing temperature, the specificity and sensitivity of detection, establishing multiplex PCR system. Application of the PCR system test specimens of artificial infections and experiment animal feces is compared with traditional test method. Results Multiplex PCR amplification of Staphylococcus aureus ( 153 bp), Pseudomonas aeruginosa ( 600 bp) with Klebsiella pneumoniae (368 bp) and general (520 bp). The multiplex sensitivity for the purpose of 10pg, specificity of detection was [ 基金项目 ] 国家科技支撑计划 (2015BAI07B02-05) [ 作者简介 ] 祝岩波 ( ), 女, 硕士研究生, 专业 : 动物学 E mail: @ qq. com [ 通讯作者 ] 王俊霞 ( ), 女, 教授, 研究方向 : 从事微生物检验 E mail: @ 163. com
2 中国比较医学杂志 2017 年 5 月第 27 卷第 5 期 Chin J Comp Med, May 2017,Vol. 27. No not detected from other pathogens. Application of establishing multiplex PCR system to detect the artificial positive samples, and detect 1 Pseudomonas aeruginosa positive case in 76 fecals. Conclusions This paper established the multiplex PCR method which has the advantages of specific, sensitive, simple and rapid, and provides a reliable way for rapid test in laboratory animals microbiology. Key words Staphylococcus aureus; Pseudomonas aeruginosa; Klebsiella pneumoniae; Multiplex PCR 金黄色葡萄球菌 ( Staphylococcus aureus, S. aureus ) 绿脓杆菌 ( Pseudomonas aeruginosa, P. aeruginosa ) 和肺炎克雷伯杆菌 ( Klebsiella pneumoniae,k. pneumoniae) 均为人畜共患病的条件致病菌, 是我国 SPF 级别实验动物大鼠 小鼠 豚鼠 地鼠 兔等必须排除的病原体 三种病原体在实验动物机体免疫功能低下 实验刺激等情况下, 可能导致呼吸道和消化道等疾病, 严重感染甚至造成动物死亡 [1] 近几年实验动物质量监测结果显示, 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌等条件致病菌阳性时有发生 [2-4] 目前我国实验动物微生物等级及监测标准 GB / T , GB / T ,GB / T , 针对上述三种条件致病菌采用的是传统的分离培养和生化鉴定方法进行检测, 此种方法费时费力, 而且实验人员需要具备较高的专业素质 目前分子生物学方法对于细菌 病毒的检测已得到广泛应用, 本研究探讨了多重 PCR 方法对上述三种细菌进行检测的方法, 为建立快速 准确和简便的检测方法提供实验依据 1 材料和方法 1 1 实验材料 菌株本实验所用菌种金黄色葡萄球菌 (ATCC6538) 由石家庄市疾控中心惠赠, 绿脓杆菌 (CMCC10110) 多杀巴氏杆菌 支气管败血性波氏杆菌由中国食品药品检定研究院惠赠, 肺炎克雷伯杆菌 ( CMCC46117) 购自广东省微生物菌种保藏中心 支原体分离 细菌 Bacteria 金黄色葡萄球菌 S. aureus 绿脓杆菌 P. aeruginosa 肺炎克雷伯杆菌 K. pneumoniaea 通用引物 Universal primer 基因 Genes nuc LasI PhoE 16S rrna 表 1 引物序列 Tab. 1 The primer sequences 株, 大肠杆菌, 志贺菌, 乙型溶血性链球菌本室保存 动物样本随机抽检来自河北省实验动物中心, 河北医科大学第三医院和河北医科大学第四医院动物实验室的共计 76 只清洁级活体动物粪便样本及回盲部内容物, 其中包含 21 只大鼠,36 只小鼠,6 只豚鼠,5 只地鼠,8 只兔 引物根据金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌的特异性区域设计相应引物, 引物基因 引物序列 产物长度和文献出处见表 1 引物由生工生物工程 ( 上海 ) 股份有限公司合成 试剂普通营养琼脂培养基, 营养肉汤培养基, 甘露醇氯化钠琼脂培养基 ( SP),NAC 液体培养基,NAC 琼脂培养基,DHL 琼脂平皿, 血琼脂平皿, 均购自北京三药科技开发公司 ; 细菌基因组 DNA 提取试剂盒, 粪便基因组 DNA 提取试剂盒购自天根生化科技有限公司 细菌生化鉴定管购自杭州天和微生物试剂有限公司 ; Mix 购自康为世纪 ; Tris 购自 Solarbio 公司 ;DNA Ladder 购自南京诺唯赞生物科技有限公司 ; 琼脂糖 Agarose 购自 BIOWEST 公司 ; 核酸染料 ExRed 购自北京庄盟国际生物基因科技有限公司 仪器所用微量分光光度计为 NanoDrop 为基因公司 ; PCR 仪为美国 ABI 9700; 凝胶成像系统为美国 UVPGDS 8000 引物序列 (5-3 ) Primer sequences nuc1 1:CACCTGAAACAAAGCATCCTAA nuc1 2:TATACGCTAAGCCACGTCCAT LasI F :ATGATCGTACAAATTGGTCGG LasI R :GTCATGAAACCGCCAGTC KP1:TGGCCCGCGCCAGGGTTCGAAA KP2:GATGTCGTCATCGTTGATGCCCAG Uni16S1:AGAGTTTGATCCTGGCTCAG Uni16S2:GCGGCTGCTGCACG 产物长度 (bp) Product size 文献出处 Reference 153 bp [4] 600 bp [5] 368 bp [6] 520 bp [7]
3 ９６ １ ２ 实验方法 １ ２ １ 细菌 ＤＮＡ 的提取 标准菌株复苏培养后 天根细菌基因组 ＤＮＡ 提 取试剂盒提取基因组 ＤＮＡ 操作根据试剂盒说明进 行 经紫外分光光度计检测 测取各菌株的浓度 １ ２ ２ 粪便 ＤＮＡ 的提取 收集活体动物粪便用天根粪便基因组 ＤＮＡ 提 取试剂盒按照使用说明提取基因组 ＤＮＡ １ ２ ３ 多重 ＰＣＲ 反应体系和反应条件 ＰＣＲ 反应体系为 ５０ μｌ 包括 Ｍｉｘ ２５ μｌ 引物 ６ ５ μｌ 金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯杆菌和绿脓 杆菌反应 体 系 终 浓 度 分 别 ０ ２ μｍｏｌ Ｌ 通 用 引 物 ０ ０５ μｍｏｌ Ｌ ＤＮＡ ３ μｌ 反应条件为 ９４ ５ ｍｉｎ ９４ ３０ ｓ ６０ ３０ ｓ ７２ ３０ ｓ 共 ３０ 个循环 ７２ ７ ｍｉｎ ＰＣＲ 产物在 ２ ５ 琼脂糖凝胶中 １２０ Ｖ 电泳 ３０ ｍｉｎ １ ２ ４ 特异性检测 用所建立的多重 ＰＣＲ 体系分别扩增多杀巴氏 杆菌 支气管败血性波氏杆菌 支原体分离株 大肠 杆菌 志贺菌 乙型溶血性链球菌来检测所建方法 的特异性 １ ２ ５ 敏感性检测 将金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯杆和绿脓杆菌 的 ＤＮＡ 按 照 １ １ １ 混 合 并 做 １０ 倍 系 列 稀 释 至 １０ ５ 倍浓度 每种浓度取 ３ μｌ 作为 ＰＣＲ 反应模板 不同稀释浓度病原体模板质量分别为 １０ ｎｇ １ ｎｇ １００ ｐｇ １０ ｐｇ １ ｐｇ １００ ｆｇ 检验多重 ＰＣＲ 的敏感性 １ ２ ６ 应用 将金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯杆菌和绿脓杆 菌分别混入动物粪便中 提取粪便 ＤＮＡ 使用三种 病原菌多重 ＰＣＲ 方法扩增 收集 ２１ 只大鼠 ３６ 只小 鼠 ６ 只豚鼠 ５ 只地鼠 ８ 只兔共 ７６ 份动物粪便 提 取粪便 ＤＮＡ 使用三种病原菌多重 ＰＣＲ 方法检测 将阳性扩增产物测序 测序结果与 Ｇｅｎｅｂａｎｋ 公布序 列进行比对 将回盲内容物根据国家标准的传统 检测方法分离培养鉴定 将其结果与多重 ＰＣＲ 结果 进行比对 ２ 结果 ２ １ ＰＣＲ 引物浓度和退火温度的优化 分别对金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯杆菌和绿脓 杆菌进行单重 ＰＣＲ 实验 结果显示金黄色葡萄球菌 扩增出 １５３ ｂｐ 产物 肺炎克雷伯杆菌扩增出３６８ ｂｐ产 物 绿脓杆菌扩增出 ６００ ｂｐ 产物 细菌通用引物扩增 出 ５２０ ｂｐ 产物 多重 ＰＣＲ 体系引物浓度优化 当 ３ 种病原菌引物浓度均为 ０ ２ μｍｏｌ Ｌ 时 比较通用引 物浓度分别为 ０ ２ ０ １ ０ ０５ ０ ０２５ μｍｏｌ Ｌ时扩增效 果 结果显示通用引物浓度 ０ ０５ μｍｏｌ Ｌ 时 四条扩 增条带较均一清晰 见图 １Ａ 多重 ＰＣＲ 扩增体系 退火温度优化 结果显示 ６０ 退火温度时 四条扩增 条带较清晰均匀 见图 １Ｂ ２ ２ 特异性 用建立的多重 ＰＣＲ 方法扩增多杀巴氏杆菌 支 气管败血性波氏杆菌 支原体 大肠杆菌志贺菌和 乙型溶血性链球菌 结果显示只出现一条细菌通用 引物扩增目的条带 无其他阳性产物 见图 ２ ２ ３ 敏感性 三种病原菌金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯杆菌 和绿脓杆菌多重 ＰＣＲ 敏感性实验结果显示 每种病 原菌 ＤＮＡ 最低检测质量均为 １０ ｐｇ 见图 ３ 注 Ａ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ ４ 金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯杆菌和绿脓杆菌引物浓度均为 ０ ２ μｍｏｌ Ｌ 通用引物浓度分别为 ０ ２ μｍｏｌ Ｌ ０ １ μｍｏｌ Ｌ ０ ０５ μｍｏｌ Ｌ ０ ０２５ μｍｏｌ Ｌ Ｂ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ ４ 退火温度分别 ５６ ５８ ６０ ６２ 图１ 多重 ＰＣＲ 引物浓度和退火温度的优化 Ｎｏｔｅ Ａ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ ４ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｐｒｉｍｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｓ ０ ２ μｍｏｌ Ｌ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｐｒｉｍｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｓ ０ ２ μｍｏｌ Ｌ ０ １ μｍｏｌ Ｌ ０ ０５ μｍｏｌ Ｌ ０ ０２５ μｍｏｌ Ｌ Ｂ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ ４ ａｎｎｅａｌｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｉｓ ５６ ５８ ６０ ６２ Ｆｉｇ １ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ ｉｎ ｐｒｉｍｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ａｎｎｅａｌｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
4 ９７ 注 Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ 阳性对照 ２ 多杀巴氏杆菌 ３ 支气管败血性波氏杆菌 ４ 支原体 ５ 大肠杆菌 ６ 志贺菌 ７ 乙型溶血性链球菌 图２ 多重 ＰＣＲ 特异性 Ｎｏｔｅ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ２ Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｍｕｌｔｏｃｉｄａ ３ Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ ４ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ５ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ６ Ｓｈｉｇｅｌｌａ ７ β ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ Ｆｉｇ ２ ２ ４ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ 应用 使用多重 ＰＣＲ 方法对人工感染的粪便 ＤＮＡ 样 本进行扩增 结果显示与预期结果一致 并无非特 异性产物扩增 见图 ４ 用多重 ＰＣＲ 体系对收集的 ７６ 份动物粪便 ＤＮＡ 检测 结果显示有一例样本在 约 ６００ ｂｐ 处有一条扩增条带 与绿脓杆菌扩增产物 条带 大 小 相 似 见 图 ５ 送 测 序 测 序 结 果 与 Ｇｅｎｅｂａｎｋ 绿脓杆菌 ＤＮＡ 序列一致 ３ 讨论 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌 属于人畜共患病的病原菌 均属我国 ＳＰＦ 级实验动 物必须排除的病原菌 目前我国实验动物的金黄 色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌的检测仍 采用国家标准推荐的传统的分离培养方法和生化 鉴定 该方法经典 准确 但操作繁琐 费时 实验 条件限定和检测人员的主观判定使得该方法各检 注 Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ ６ 质量分别为 １０ ｎｇ １ ｎｇ １００ ｐｇ １０ ｐｇ １ ｐｇ １００ ｆｇ 图３ 多重 ＰＣＲ 敏感性 Ｎｏｔｅ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ ６ Ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｉｓ １０ ｎｇ １ ｎｇ １００ ｐｇ １０ ｐｇ １ ｐｇ １００ ｆｇ Ｆｉｇ ３ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ 测室之间易出现结果的差异 ２ ３ 因此急需建立一 种快速 准确的新检测方法 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌 ＰＣＲ 方法早已在微生物检测中应用 但之前方法每 次只能检测一种细菌 检测效率低 工作量大 影响 了广泛的应用 ８ 本文根据金黄色葡萄球菌 ｎｕｃ 基 因 绿脓杆菌 ＬａｓＩ 基因 肺炎克雷伯杆菌 ＰｈｏＥ 基因 和细菌通用 １６Ｓ ｒｒｎａ 基因设计出特异性引物建立 了可以同时检测三种实验动物条件致病菌的三重 ＰＣＲ 方法 并在反应体系中加入由 １６Ｓ ｒｒｎａ 基因 设计的细菌通用引物 作为内质控 在病原菌检测 中可以根据通用引物扩增条带的情况判定反应体 系是否完好及评估体系中加入的模板质量 在多重 ＰＣＲ 条件的优化过程中 金黄色葡萄球 菌 肺炎克雷伯杆菌和绿脓杆菌引物浓度均为 ０ ２ μｍｏｌ Ｌ 通 用 引 物 浓 度 为 ０ ２ ０ １ ０ ０５ ０ ０２５ μｍｏｌ Ｌ 时 均可获得四条带 但在通用引物浓度为 注 Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ 阳性对照 ２ 阴性对照 ３ ８ 正常粪便 ４ ９ 加金黄色葡萄球菌 ５ １０ 加绿脓杆菌 ６ １１ 加肺炎克 雷伯杆菌 ７ １２ 加金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌 图４ 多重 ＰＣＲ 的人工感染标本检测结果 Ｎｏｔｅ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ２ Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ３ ８ Ｎｏｒｍａｌ ｆｅｃｅｓ ４ ９ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ５ １０ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ６ １１ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ７ １２ Ｔｈｒｅｅ ｂａｃｔｅｒｉａ Ｆｉｇ ４ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｓａｍｐｌｅｓ
5 ９８ 注 Ａ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ 阳性对照 ２ 阴性对照 ３ １２ 小鼠粪便样本 Ｂ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ 阳性对照 ２ 阴 性对照 ３ １２ 小鼠粪便样本 １３ １７ 大鼠粪便样本 图５ 多重 ＰＣＲ 粪便样本检测结果 Ｎｏｔｅ Ａ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ２ Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ３ １２ Ｆｅｃａｌ ｓａｍｐｌｅ ｏｆ ｍｉｃｅ Ｂ Ｍ １００ ｂｐ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ １ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ２ Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ３ １２ Ｆｅｃａｌ ｓａｍｐｌｅ ｏｆ ｍｉｃｅ １３ １７ Ｆｅｃａｌ ｓａｍｐｌｅ ｏｆ ｒａｔｓ Ｆｉｇ ５ Ｆｅｃｅｓ ｓａｍｐｌｅｓ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ ０ ０５ μｍｏｌ Ｌ 时可获得更明亮均一的条带 在此引 物浓度基础上 对退火温度优化 四个温度均可扩 增出目的片段 但 ６０ 最优 同时 其特异性和敏感 性良好 因此可以达到一个比较满意的效果 因三种病原体均存在于动物粪便中 考虑粪便 ＤＮＡ 提取物可能影响多重 ＰＣＲ 反应特异性 本研究 将金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌三 种病原菌分别混入到动物粪便中 提取总 ＤＮＡ 多 重 ＰＣＲ 方法扩增结果与预期结果一致 能够准确的 检测出不同的菌株组合 并且没有非特异性扩增 为了验证本方法在实际实验动物病原菌检测中应 用性 在多家实验动物单位取材 取回盲内容物应 用传统分离培养的检测方法 结果为一例绿脓杆菌 感染阳性 同时取相应的实验动物的活体粪便 提 取粪便 ＤＮＡ 使用多重 ＰＣＲ 方法检测三种病原菌 结果显示在 ７６ 份活体动物粪便中均可以扩增出通 用条带 检测到一例绿脓杆菌感染阳性 与传统方 法获得一样的结果 初步验证本方法的可行性 本 文建立的多重 ＰＣＲ 方法旨在活体检测 便于对活体 动物进行长期的微生物监测 达到质量控制标准 总之 在下面工作中 将进一步扩大检测样本量验 证本方法的准确性和实用性 本方法有良好的重复性 操作简单 快速 成本 较低 可以在实验动物微生物检测中进一步应用 参考文献 １ 田克恭 贺争鸣 刘群 等 实验动物疫病学 Ｍ 北京 中国 ２ 邢进 高正琴 冯育芳 等 北京地区 ２００８ ２０１１ 年实验动物 ３ 农业出版社 ２０１５ 绿脓杆菌检测结果与分析 Ｊ 实验动物科学 ２０１２ ２９ ３ ２４ ２６ 冯育芳 邢进 付瑞 等 实验动物金黄色葡萄球菌的实验室 检测能力 验 证 结 果 评 价 Ｊ 中 国 实 验 动 物 学 报 ２０１６ ２４ ２ １９５ １９８ ４ 胡瑜 金黄色葡萄球菌耐热核酸酶的功能鉴定及表达调控 ５ Ａｇｈａｍｏｌｌａｅｉ Ｈ Ｍｏｇｈａｄｄａｍ ＭＭ Ｋｏｏｓｈｋｉ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｄ 上海交通大学 ２０１３ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｂｙａ ｔｒｉｐｌｅｘ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｓｓａｙｂａｓｅｄ ｏｎ ｌａｓｉ Ｒ ａｎｄ ｇｙｒｂ ｇｅｎｅｓ Ｊ Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ ２０１５ ８ ４ ３１４ ３２２ ６ 冯洁 谢建云 胡建华 等 ３ 种条件致病菌三重 ＰＣＲ 检测方法的 ７ Ｒｅｇｉｓｔｅｒ ＫＢ ＤｅＪｏｎｇ ＫＤ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ 建立及初步应用 Ｊ 中国畜牧兽医 ２０１５ ４２ ６ １３８９ １３９５ ＰＣＲ ｆｏｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ ａｎｄ Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌ ａｍｕｌｔｏｃｉｄａ ｆｒｏｍ ｓｗｉｎｅ Ｊ Ｖｅｔ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２００６ １１７ ２ ４ ８ ２０１ ２１０ 冯洁 谢建云 冯丽萍 等 培养法和 ＰＣＲ 法用于实验大 小鼠 细菌检测的比较分析 Ｊ 中国比较医学杂志 ２０１５ ２５ ８ ２３ ２６ 收稿日期 ２０１６ １１ ２８
标题
2017 年 8 月第 27 卷第 8 期 中国比较医学杂志 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE August, 2017 Vol. 27 No. 8 技术方法 实验动物四种病原体多重 PCR 方法的建立与应用 祝岩波 1, 徐增年 1, 魏世锦 2, 郑龙 1, 尤红煜 1, 孟钰榕 1, 刘福英 1, 梁晓亮 3 1, 王俊霞 (1. 河北省实验动物重点实验室,
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷
50 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱 研 究 * 胡 建 兰, 邵 萌, 余 林 中 南 方 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 广 东 广 州 510515 摘 要 : 目 的 研 究 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱, 建
200 31 5 SWAN 0. 01 0. 01 6 min TITAN Thunder Identification Tracking Analysis SWAN TITAN and Nowcasting 19 TREC Tracking Radar Echo by Correlaction T
31 1 2013 3 Journal of Arid Meteorology Vol. 31 No. 1 March 2013. SWAN J. 2013 31 1 199-205. doi 10. 11755 /j. issn. 1006-7639 2013-01 - 0199 SWAN 730020 2011 7 7 SWAN SWAN 2012 2 SWAN 1006-7639 2013-01
Acta Lab Anim Sci Sin October 2013 Vol. 21. No. 5 http / /primerexplorer. jp /elamp /in- ELISA dex. html LA-320C 1. 4 LAMP ETEC
2013 10 21 5 ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA October 2013 Vol. 21 No. 5 檵 檵檵檵檵檵檵檵檵檵 100071 LAMP ETEC GenBank LT S60731. 1 LAMP LAMP PCR LAMP 100 pg /μl PCR 10 27 LAMP PCR PCR 33. 3% LAMP 60
124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na
![124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na](/thumbs/91/105785327.jpg "124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na")
河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,
Microsoft Word - 201506定版
56 Chinese Journal of Library and Information Science for Traditional Chinese Medicine Dec. 2015 Vol. 39 No. 6 综 述 中 医 药 学 语 言 系 统 研 究 综 述 于 彤, 贾 李 蓉, 刘 静, 杨 硕 *, 董 燕, 朱 玲 中 国 中 医 科 学 院 中 医 药 信 息 研 究 所,
标题
摇 1524 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 中 医 证 型 研 究 进 展 综 述 扶 伟 摇 徐 立 然 摇 马 秀 霞 摇 孟 鹏 飞 摇 宋 夕 元 摇 李 亮 平 摇 李 正 摇 丁 雪 摇 邱 荃 摇 杨 超 华 揖 摘 要 铱 摇 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 的 治 疗 过 程 中 因 其 病 因 复 杂, 临 床 症 状 多 样, 辨 证 分 型 及 临 床 疗 效 评
Microsoft Word - 4期中文目次.doc
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 4 期 2014 年 2 月 509 UPLC-MS/MS 法 快 速 检 测 减 肥 类 保 健 品 中 13 种 非 法 添 加 化 学 成 分 朱 健, 裘 一 婧, 沈 国 芳 杭 州 市 食 品 药 品 检 验 研 究 院, 浙 江 杭 州 310017 摘 要 : 目 的 建 立 保
Microsoft Word 钟 玮-二校
7 7 Vol. 7 No. 7 2016 7 Journal of Food Safety and Quality Jul., 2016 * 钟玮, 张宁, 刘玉萍, 范一灵, 杨美成 (, 201203) 摘要 : 目的 方法, (RiboPrinter ) 结果 CODE 1~9, CODE 10 Z 2; 10 CFU/g, 10 结论 关键词 : ; ; ; ; Proficiency testing
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
标题
医 药 导 报 2016 年 8 月 第 35 卷 第 8 期 803 特 约 稿 鱼 腥 草 制 剂 上 市 后 安 全 性 再 评 价 吴 健 鸿 1 ꎬ 杨 晓 燕 2 ꎬ 柳 强 妮 2 ꎬ 尹 平 2 2 ꎬ 曾 繁 典 (1. 武 汉 药 品 医 疗 器 械 检 验 所 ꎬ 武 汉 430075ꎻ2. 华 中 科 技 大 学 同 济 医 学 院 ꎬ 武 汉 430030) 摘 要 目 的
标题
摇 878 环 球 中 医 药 2015 年 7 月 第 8 卷 第 7 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, July 2015,Vol 郾 8, No 郾 7 慢 性 前 列 腺 炎 外 治 法 治 疗 进 展 综 述 莫 旭 威 摇 王 彬 摇 李 海 松 摇 赵 冰 摇 刘 洋 揖 摘 要 铱 摇 目 前 慢 性 前 列 腺 炎 的 治 疗 已 经
1 : 97,,, ; , , ; :, h 15. 2, h ,, 1,, 3, : 1 1 d, 2 2 d;, , , 0812
28 1 2010 3 : 1006-7639 (2010) - 01-0096 - 06 Journal of A rid M eteorology Vol. 28 No. 1 March, 2010,,,, (, 050081) : 2008, 3, 10 a 2008 12 3 5 3 T213 ( EC),, : T213 EC, T213, : ; ; : P458. 1 + 22 : A,,,
* CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI /j. issn X Incipient Fault Detection in Papermaking Wa
2 *. 20037 2. 50640 CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI 0. 980 /j. issn. 0254-508X. 207. 08. 004 Incipient Fault Detection in Papermaking Wastewater Treatment Processes WANG Ling-song MA Pu-fan YE Feng-ying XIONG
5期xin
中 国 农 学 通 报 2014,30(5):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 筛 选 及 生 长 曲 线 测 定 喻 华 英, 李 启 峰 ( 塔 里 木 大 学 动 物 科 学 学 院, 新 疆 阿 拉 尔 843300) 摘 要 : 为 探 究 犊 牛 腹 泻 病 中 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 形 成
附件2：
中国实验动物学会团体标准 实验动物肿瘤坏死因子 α 转基因关节炎小鼠模型饲养繁育规范 编制说明 联系人 : 李舸 联系电话 :15011983691 编制单位 : 广东省实验动物监测所 时 间 : 2016 年 10 月 25 日 中国实验动物学会团体标准 人肿瘤坏死因子 α 转基因关节 炎小鼠模型饲养繁育规范 编制说明 GB/T1.1 2009 1 2011A081401005 2013B040400007
<453A5CCAB3C6B7BFC6D1A73131C4EA3134C6DA5C3134C6DA5C3032B7D6CEF6>
227 ELISA 刘 沙 洲 1,2, 桑 小 雪 1, 欧 阳 华 学 3, 雷 绍 荣 3, 白 林 含 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 学 院, 四 川 成 都 610065;2. 成 都 市 食 品 药 品 检 测 中 心, 四 川 成 都 610045; 3. 四 川 省 农 业 科 学 院 分 析 测 试 中 心, 四 川 成 都 610066) 目 的 : 比 较
mm ~
16 3 2011 6 Vol 16 No 3 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Jun 2011 1 2 3 1 150040 2 150040 3 450052 1 3 4 > 1 ~ 3 > > U414 A 1007-2683 2011 03-0121- 06 Shrinkage Characteristics of
第 05 期 董房等 : 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 WEB 1 2 总体功能及组成 2.1 总体功能 1 2 3Web 2.2 结构组成 Web WEB WEB 2.3 系统各模块接口关系
电子科学技术 Electronic Science & Technology 电子科学技术第 02 卷第 05 期 2015 年 9 月 Electronic Science & Technology Vol.02 No.05 Sep.2015 年 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 董房 1,2, 刘洋 2, 王储 2 2, 刘赞 (1. 上海交通大学, 上海,200240; 2. 上海卫星工程研究所,
Microsoft Word 苟伟民_二校
8 1 Vol. 8 No. 1 2017 1 Journal of Food Safety and Quality Jan., 2017 2011~2015 苟伟民 *, 徐雪梅 (, 133000) 摘要 : 目的 2011~2015,, 方法 2013 2011~2015 1069 结果 1069 115, 10.76% 17.65% (3/17) 15.79% (3/19) 11.76% (4/34)
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
< 1+1 <! " #$% &!"#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) "' )!"#$%&' (1% ( )* " + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物
213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2BBCDACB7BDB7A8BCECB2E2D2D2D0CDB8CED1D7D1AAC7E5D1A7B1EAD6BECEEFB5C4BDE1B9FBB1C8BDCF2D31362E646F63>
不 同 方 法 检 测 乙 型 肝 炎 血 清 学 标 志 物 的 结 果 比 较 王 岚 沈 立 松 ( 上 海 第 二 医 科 大 学 附 属 新 华 医 院 检 验 科, 上 海 200092) 摘 要 : 目 的 探 讨 不 同 方 法 在 乙 肝 血 清 学 标 志 物 临 床 检 测 中 的 应 用 价 值 方 法 用 3 种 试 剂 (EIA TRF MEIA) 对 乙 肝 初 诊 患
Mnq 1 1 m ANSYS BEAM44 E0 E18 E0' Y Z E18' X Y Z ANSYS C64K C70C70H C /t /t /t /mm /mm /mm C64K
25 4 Vol. 25 No. 4 2012 12 JOURNAL OF SHIJIAZHUANG TIEDAO UNIVERSITY NATURAL SCIENCE Dec. 2012 1 2 1 2 3 4 1 2 1. 050043 2. 050043 3. 3300134. 450052 ANSYS C80 C80 125 ac70 0 U24 A 2095-0373201204-0017-06
第 03 期 刘高军等 : 基于 CNONIX 的 XML 与 EXCEL 相互转换技术研究 XML XML CNONIX XML EXCEL EXCEL EXCEL EXCEL CNONIXEXCEL XML EXCEL CNONIX XML EXCEL CNONIX 1 CNONIX 数据元分析
电子科学技术电子科学技术第 02 卷第 03 期 Electronic 2015 年 Science 5 月 & Technology Electronic Science & Technology Vol.02 No.03 May.2015 年 基于 CNONIX 的 XML 与 EXCEL 相互转换技术研究 刘高军, 李丹, 程利伟, 钱程, 段然 ( 北方工业大学计算机学院, 北京,100144)
Microsoft Word - 8 期中文目次.doc
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学
2012 11 43 11 855 35-80 55 P < 0. 05 1. 2. 2 168 - P < 0. 05 53 31. 5% 48 28. 6% α = 2α /k k - 1 α = 0. 05 k = 3 α = 0. 016 7 P < 20 0. 016 7 2 40 2.
854 林 伟 1, 程 金 妹 2* 2, 王 英 歌 1 350000 2 * E-mail chengjinmei0687@ sina.com 目 的 方 法 2008-01 ~ 2012-01 结 果 10. 43% 3. 93% P < 0. 05 34. 4% 30. 4% P > 0. 05 7 d 0. 63% 7 d P < 0. 05 结 论 R763 A 1007-6611 2012
P. C Evelyn. M. Duvall 2 quality of life cabana
2012 3 193 POPULATION JOURNAL No. 3. 2012 Tot. No. 193 100871 2008 Logit C913. 6 A doi 10. 3969 /j. issn. 1004-129X. 2012. 03. 004 1004-129X 2012 03-0031 - 11 2011-12 - 10 10JJD840001 1962-2010 1% 60 1.
Microsoft Word - 4839-4843 20150924002-李建煌-二校 全出
6 12 Vol. 6 No. 12 215 12 Journal of Food Safety and Quality Dec., 215 ONPG 李 建 煌 1, 姚 蕾 1, 李 玉 优 1, 李 焕 仪 1, 何 亮 辉 1, 姜 春 宝 2, 曹 维 强 (1., 51852; 2., 5166) 1* 摘 要 : 目 的 βd(onitrophenylβdgalactopyranoside,
/MPa / kg m - 3 /MPa /MPa 2. 1E ~ 56 ANSYS 6 Hz (a) 一阶垂向弯曲 (b) 一阶侧向弯曲 (c) 一阶扭转 (d) 二阶侧向弯曲 (e) 二阶垂向弯曲 (f) 弯扭组合 2 6 Hz
31 3 Vol. 31 No. 3 218 9 Journal of Shijiazhuang Tiedao University Natural Science Edition Sep. 218 1 1 2 1 2 1 1. 543 2. 543 U462. 3 217-2 - 16 A 295-373 218 3-63 - 6 1-4 5-7 8-11 1 11 11 398 mm 86 mm
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
PCA+LDA 14 1 PEN mL mL mL 16 DJX-AB DJ X AB DJ2 -YS % PEN
21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
AFLP % 1. 1 DNA 5 RAPD DNA 0. 1g % ~ ph 6 10 DNA 9 40μl TE SSR STS 20ng /L
2012 13 2 201-206 Journal of Plant Genetic Resources / 071001 41 SSR 21 SSR 41 52 2 ~ 4 2. 5 Shannon 0. 21 ~ 1. 40 0. 73 5. 54 3 7 9 13. 16% ~ 186. 49% 5. 48 6 11 SSR Genetic Diversity of Peanut Arachis
Microsoft Word 万 超_二校 75
8 1 Vol. 8 No. 1 2017 1 Journal of Food Safety and Quality Jan., 2017 PCR 万 超 1, 蒋丹 1*, 吕泉 2, 丁健 1, 林长军 1 (1., 116001; 2., 115000) 摘要 : 目的 SYBR Green PCR SYBR Green PCR 方法 CoxⅠ, SYBR Green PCR PCR, DNA
211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont
210 毛 果 芸 香 碱 联 合 拉 坦 前 列 素 治 疗 原 发 性 急 性 闭 角 型 青 光 眼 的 疗 效 观 察 符 元 党 1, 郑 振 优 2, 林 再 雄 2, 周 吉 良 1. 昌 江 黎 族 自 治 县 中 西 医 结 合 医 院, 海 南 昌 江 572700 2. 海 南 医 学 院 附 属 医 院 眼 科, 海 南 海 口 570100 1 摘 要 : 目 的 探 讨
学校代号 10199 学 号20092209134
学 校 代 号 10199 学 号 20092209134 硕 士 学 位 论 文 中 药 塌 渍 护 理 干 预 联 合 超 声 雾 化 对 小 儿 肺 炎 喘 嗽 的 临 床 观 察 研 究 Traditional Chinese medicine collapse stains nursing intervention to joint of ultrasonic atomizer infantile
Microsoft Word - 19王建华.doc
2012 年 12 月 图 学 学 报 December 2012 第 33 卷 第 6 期 JOURNAL OF GRAPHICS Vol.33 No.6 工 程 图 学 计 算 机 辅 助 教 学 实 践 与 思 考 王 建 华, 郝 育 新, 刘 令 涛 ( 北 京 信 息 科 技 大 学 机 电 学 院, 北 京 100192) 摘 要 : 随 着 计 算 机 技 术 的 迅 猛 发 展 和
by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2
论 著 临 床 研 究 doi: 0.7499/j.issn.008-8830.204.2.007 郑 州 市 城 区 儿 童 哮 喘 的 流 行 病 学 调 查 及 发 病 相 关 因 素 分 析 赵 坤 宋 桂 华 古 华 倩 2 刘 爽 3 张 岩 郭 彦 荣 (. 河 南 中 医 学 院 第 一 附 属 医 院 儿 科 医 院, 河 南 郑 州 450000; 2. 杭 州 市 余 杭 区
第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序
河 南 农 业 科 学 王 兴 涛 罗 俊 滕 蔓 樊 剑 鸣 鄂 巍 禹 斌 刘 力 张 改 平 利 用 技 术 对 河 南 省 某 规 模 化 猪 场 乙 脑 疑 似 病 例 的 种 猪 精 液 进 行 分 析 从 部 分 样 本 中 扩 增 出 与 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 基 因 和 基 因 具 有 高 度 同 源 性 的 预 期 产 物 在 日 龄 乳 鼠 脑 内 接 种 种 猪
中国科技论文在线中文稿件模板
# 针 刺 治 疗 过 敏 性 鼻 炎 取 穴 规 律 探 析 ** 张 佳 佳, 陈 晟, 郭 盛 楠, 赵 吉 平 ( 北 京 中 医 药 大 学 东 直 门 医 院 ) 5 摘 要 : 变 应 性 鼻 炎 (AR) 已 成 为 全 球 性 常 见 病 针 刺 治 疗 本 病 疗 效 独 特 且 相 关 的 临 床 报 道 数 量 较 多 本 文 通 过 对 针 刺 治 疗 AR 相 关 文 献
Microsoft Word - A201202-493_1329751213.doc
5 10 15 20 25 BP 神 经 网 络 在 中 国 创 业 板 企 业 成 长 性 预 测 研 究 ** 孙 静 稳, 刘 金 平 ( 中 国 矿 业 大 学 管 理 学 院, 江 苏 徐 州 221116) 摘 要 : 根 据 创 业 板 企 业 的 高 科 技 和 高 成 长 性 特 点, 成 为 金 融 证 券 市 场 热 门 关 注 的 对 象, 其 成 长 性 研 究 是 资 本
38 張 元 素 歸 經 引 經 理 論 研 究 本 文 以 張 元 素 著 述 為 主 要 材 料, 采 用 上 海 涵 芬 樓 景 印 元 杜 思 敬 濟 生 拔 粹 刊 本 4 ; 醫 學 啟 源 為 任 應 秋 點 校 本, 任 本 以 明 成 化 八 年 刊 本 為 底 本, 旁 校 上
J Chin Med 24(1): 37-47, 2013 37 1 1,2, * 1,2 1,2 1 2 101 04 09 101 09 26 張 元 素, 字 潔 古, 金 代 易 州 ( 河 北 易 水 ) 人, 他 學 識 淵 博, 臨 證 經 驗 豐 富, 善 於 化 裁 古 方 他 建 立 了 以 臟 腑 辨 證 為 核 心 的 臨 床 證 治 體 系, 創 新 了 用 藥 理 論,
H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
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2013 绎 Vol.15 No.4 阴 元元 450002 Ki-6772 Wistar 6 5 mg kg -1 30 0.8 mg kg -1 7.5 15.0 22.5 g kg -1 1 30 Ki-67 TUNEL Ki-67 P
临床路径管理模式下医疗服务流程的关键环节分析
临 床 路 径 管 理 模 式 下 医 疗 服 务 流 程 的 关 键 环 节 分 析 郭 淑 岩 陶 红 兵 曲 豪 柯 晓 华 刘 鹏 珍 梁 婧 摘 要 采 取 文 献 综 述 相 关 资 料 分 析 和 医 生 意 愿 调 查 等 方 法 找 出 影 响 医 院 临 床 路 径 管 理 服 务 流 程 的 主 要 环 节, 邀 请 已 经 开 展 临 床 路 径 的 医 院 相 关 人 员
标题
第 33 卷 第 3 期 医 学 研 究 与 教 育 Vol.33 No.3 2016 年 6 月 Medical Research and Education Jun.,2016 本 文 引 用 : 张 建 红, 刘 盼 英, 李 远, 等. 真 性 红 细 胞 增 多 症 的 中 医 辨 证 用 药 规 律 与 转 化 医 学 研 究 [ J ]. 医 学 研 究 与 教 育, 2016, 33
助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
研 究 与 技 术 蚕 蛹 壳 聚 糖 复 合 止 血 材 料 的 制 备 及 凝 血 性 能 初 探 陈 超, 单 其 艳, 杨 铭, 蓝 广 芊, 吴 大 洋 ( 西 南 大 学 纺 织 服 装 学 院, 重 庆 400716) 摘 要 : 探 讨 以 蚕 蛹 壳 聚 糖 (CS) 和 明 胶 (GEL) 为 主 要 原 料 制 备 复 合 止 血 材 料 的 工 艺 及 凝 血 效 果 首 先
Revit Revit Revit BIM BIM 7-9 3D 1 BIM BIM 6 Revit 0 4D 1 2 Revit Revit 2. 1 Revit Revit Revit Revit 2 2 Autodesk Revit Aut
60 2 2016 2 RAILWAY STANDARD DESIGN Vol. 60 No. 2 Feb. 2016 1004-2954201602-0071-06 BIM 1 1 2 2 1 1. 7140992. 710054 BIM BIM 3D 4D nd BIM 1 3D 4D Revit BIM BIM U442. 5TP391. 72 A DOI10. 13238 /j. issn.
p 3 p 4 p 5 p 6 p 7 p 8 p 9 p 10 p 11 θ 1 θ 2 θ 3 θ 4 θ 5 θ 6 θ 7 θ 8 θ 9 θ d 1 = 0 X c 0 p 1 p 2 X c 0 d pi p j p i p j 0 δ 90
22 4 2017 8 Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug. 2017 1 1 1 1 2 2 2 1. 150080 2. 150080,,,, ; ; ; DOI: 10. 15938 /j. jhust. 2017. 04. 001 TP273 A 1007-2683 2017 04-0001-
Microsoft Word - 20120619-188_editing
固 定 时 间 - 离 子 选 择 性 电 极 浓 度 直 读 法 快 速 测 定 腐 竹 中 的 硼 砂 魏 姜 勉 1 高 向 阳 1 * 张 娜 (1 河 南 农 业 大 学 食 品 科 学 技 术 学 院, 郑 州, 450002, 中 国 ; 2 郑 州 科 技 学 院, 郑 州,450064, 中 国 ) 2 摘 要 : 为 建 立 一 种 快 速 测 定 食 品 中 硼 砂 的 新 方
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8 1 Vol. 8 No. 1 2017 1 Journal of Food Safety and Quality Jan., 2017 2 * 王利刚, 张磊, 张婧, 费云滟, 付莎莉, 吴丹, 屠大伟 (, 401121) 摘要 : 目的 mini-vidas 2, 2 方法, 3, 3 结果 mini-vidas, mini-vidas, 3 结论 mini-vidas,,, mini-vidas
福 建 农 业 学 报 科 技 示 范 和 推 广 科 技 成 果 产 生 效 益
福 建 农 业 学 报 林 梅 陈 奇 榕 农 业 科 技 创 新 模 式 绩 效 评 价 指 标 体 系 建 立 的 原 则 农 业 科 技 创 新 模 式 绩 效 评 价 指 标 体 系 基 本 框 架 福 建 农 业 学 报 科 技 示 范 和 推 广 科 技 成 果 产 生 效 益 林 梅 等 福 建 农 业 科 技 创 新 模 式 绩 效 评 价 指 标 体 系 的 研 究 编 制 专 家
rights and interests of doctors and patients. But it is insufficient jurisprudential basis and legitimacy crisis of legal forms through the form of mi
1 Vol. 3 6 No. 1 36 2 0 1 8 1 Hebei Law Science Jan. 2 0 1 8 DOI 10. 16494 /j. cnki. 1002-3933. 2018. 01. 011 511436 DF36 A 1002-3933 2018 01-0117-13 Study on the Jurisprudential Basis on the Implementation
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5 2 Vol. 5 No. 2 2014 2 Journal of Food Safety and Quality Feb., 2014 PCR 郭凤柳, 熊蕊, 刘晓慧 *, 赵同欣, 王娜, 颜红 (, 071051) 摘要 : 目的 5 PCR, 4 PCR, 方法 DNA, PCR,, 结果,, 56, 75%; 15, 6.7%; 5, 20%; 2, 1,, 结论 PCR DNA, pg
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P 
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an tai yin 安 胎 饮 775 ba wei dai xia fang 八 味 带 下 方 756 ba zhen tang 八 珍 汤 600 ba zheng san 八 正 散 601 bai he gu jin tang 百 合 固 金 汤 680 bai hu jia ren shen tang 白 虎 加 人 参 汤 755 bai hu tang 白 虎 汤 660 bai
国 际 中 医 中 药 杂 志 2014 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 Int J Trad Chin Med, February 2014, Vol. 36, No.2 103 2012 年 10 月, 笔 者 作 为 北 京 中 医 药 大 学 东 方 医 院 管 理 部 门 代 表,
102 国 际 中 医 中 药 杂 志 2014 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 Int J Trad Chin Med, February 2014, Vol. 36, No.2 新 加 坡 中 央 医 院 调 研 学 习 先 进 医 院 管 理 模 式 国 外 传 统 医 学 周 春 宇 曹 建 春 赵 京 枢 韩 振 蕴 常 洞 赜 谢 玉 晗 曹 春 婕 孙 静 宜 刘 金 民 摘 要
中医教育-2016-2版
2016 年 03 月,35(2) 中 医 教 育 ECM 1 校 长 论 坛 中 医 药 特 色 人 才 培 养 的 探 索 与 思 考 # 梁 繁 荣 刘 旭 光 王 飞 李 勇 王 振 兴 ( 成 都 中 医 药 大 学 成 都 611137) 摘 要 : 我 国 中 医 教 育 事 业 和 卫 生 事 业 的 发 展 进 入 到 一 个 新 的 历 史 阶 段, 深 化 医 药 卫 生 体
2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来
![2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来](/thumbs/42/22962570.jpg "2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来")
针 灸 临 床 杂 志 2012 年 第 28 卷 第 6 期 1 临 床 研 究 针 刀 治 疗 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 的 临 床 研 究 向 伟 明 1, 丁 思 明 1, 张 秀 芬 2, 权 五 成 2, 唐 吉 莲 1, 杨 友 金 1, 黄 涣 强 1, 颜 勋 1, 曾 晓 宇 1, 朱 传 芳 1 1, 张 雄 ( 1. 重 庆 市 梁 平 县 第 二 人 民 医 院,
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%
![[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%](/thumbs/88/115539847.jpg "[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%")
38 2 2016 4 -- 1,2, 100190, 100083 065007 -- 0.25 mm 2.0 mm d 10 = 0.044 mm 640 3 300. Richardson--Zaki,,, O359 A doi 10.6052/1000-0879-15-230 EXPERIMENTAL STUDY OF FLUID-SOLID TWO-PHASE FLOW IN A VERTICAL
王 声 文 等 :GNC62 数 控 系 统 组 态 和 设 备 调 试 设 计 2 GNC62 系 统 组 态 设 计 原 理 2 2 [1] 2 A I/O 1 293
![王 声 文 等 :GNC62 数 控 系 统 组 态 和 设 备 调 试 设 计 2 GNC62 系 统 组 态 设 计 原 理 2 2 [1] 2 A I/O 1 293](/thumbs/41/22322199.jpg "王 声 文 等 :GNC62 数 控 系 统 组 态 和 设 备 调 试 设 计 2 GNC62 系 统 组 态 设 计 原 理 2 2 [1] 2 A I/O 1 293")
工 业 技 术 创 新 工 第 02 业 技 卷 术 第 创 03 新 期 Industrial 2015 年 Technology 6 月 Innovation Industrial Technology Innovation Vol.02 No.03 Jun.2015 GNC62 数 控 系 统 组 态 和 设 备 调 试 设 计 王 声 文, 白 彦 庆, 刘 庆 宏, 孙 振, 黄 岩 (
标题
第 13 卷 摇 第 2 期 2014 年 6 月 北 京 林 业 大 学 学 报 ( 社 会 科 学 版 ) Journal of Beijing Forestry University ( Social Sciences) Vol. 13 摇 No. 2 Jun. 摇 2014 芍 药 作 为 中 国 爱 情 花 冶 之 史 考 于 晓 南 1,2, 苑 庆 磊 1 1, 郝 丽 红 (1. 北
Microsoft Word 阚式绂-二校
7 6 Vol. 7 No. 6 2016 6 Journal of Food Safety and Quality Jun., 2016 1 O157 阚式绂 1, 黄裕 1*, 王明明 (1., 518005; 2., 518083) 2 摘要 : 目的 sznjo23 方法 sznjo23, 结果 CT-SMAC, CHROMagar O157 VITEK 2 Compact, 96% O157,,
Ansys /4 Ansys % 9 60% MU10 M m 1 Fig. Actual situation of measured building 1 Fig. 1 First floor plan of typical r
0 5 011 10 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 0 No. 5 Oct. 011 1004-4574 011 05-0018 - 06 1 3 1. 41008. 41008 3. 410000 7 0. 10g 7 0. 15g 3. 1% 5% P64. 3 A Field test and numerical simulations of seismic
68 2012 11 the requirements of load - bearing rescue and turning of the large fire engine can be served as an outdoor safety area. 5 The second floor
2012 11 11 170 JOURNAL OF RAILWAY ENGINEERING SOCIETY Nov 2012 NO. 11 Ser. 170 1006-2106 2012 11-0067 - 06 1 2 ( 1. 苏 州 设 计 研 究 院 股 份 有 限 公 司, 江 苏 苏 州 215021; 2. 苏 州 市 消 防 支 队, 江 苏 苏 州 215021) 1 2 3 4
1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法
![1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法](/thumbs/40/22057924.jpg "1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法")
1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广
g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
李 栋 陈 德 元 国 防 将 性 能 测 量 与 层 次 化 动 态 雷 达 图 可 视 化 方 法 相 结 合 提 出 了 一 种 空 间 通 信 网 性 能 仿 真 新 方 法 构 建 了 仿 真 系 统 平 台 同 时 在 分 析 空 间 通 信 网 性 能 参 数 的 基 础 上 提 出 了 一 种 改 进 的 双 分 组 对 路 径 带 宽 测 量 方 法 并 利 用 空 间 通 信 网
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4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 聂雪梅 *, 李立, 孙利, 高飞 (, 100123) 摘要 : 2011 12,, 2007~2011,,,, 关键词 : ; ; ; ; Trade and notification situation on food import and export
' ' 1 2 1956-1966 1956 1966 1957 1 50 2 1978 21 30 3 1966-1977 1966 5 1976 10 1984 1 1978-1978 80 3 1978 119
33 Vol. 33 1 Journal of Hubei Normal University Philosophy and Social Science No. 1 2013 ( 湖 北 师 范 学 院 文 学 院, 湖 北 黄 石 435002) 新 中 国 成 立 以 来, 大 学 生 价 值 观 的 变 迁 总 体 上 来 说 经 历 了 两 个 大 的 阶 段, 即 改 革 开 放 前 的
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
42 11, 2004, 100 ; MAHM- 40% [ 1 ] MOD [ 14 ] PCR,, [ 2-3 ] 2001 PCR,, ; [ 4 ] 5% 15% , 95%,, 30%, 80% [ 2, 5] PCR, ( Streptococcus agalactia
![42 11, 2004, 100 ; MAHM- 40% [ 1 ] MOD [ 14 ] PCR,, [ 2-3 ] 2001 PCR,, ; [ 4 ] 5% 15% , 95%,, 30%, 80% [ 2, 5] PCR, ( Streptococcus agalactia](/thumbs/51/28000550.jpg "42 11, 2004, 100 ; MAHM- 40% [ 1 ] MOD [ 14 ] PCR,, [ 2-3 ] 2001 PCR,, ; [ 4 ] 5% 15% , 95%,, 30%, 80% [ 2, 5] PCR, ( Streptococcus agalactia")
11 3 2 0 1 5 6 South China Fisheries Science Vol. 11, No. 3 Jun., 2015 doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-0780. 2015. 03. 007 PCR,,,,,, (,, 530021) : ( Streptococcus agalactiae), cfb TaqMan PCR,, ; DNA 3. 42
~ 4 mm h 8 60 min 1 10 min N min 8. 7% min 2 9 Tab. 1 1 Test result of modified
30 1 2013 1 Journal of Highway and Transportation Research and Development Vol. 30 No. 1 Jan. 2013 doi 10. 3969 /j. issn. 1002-0268. 2013. 01. 004 1 2 2 2 2 1. 400074 2. 400067 240 U416. 217 A 1002-0268
第 02 期 1 医 疗 信 息 现 状 20% EMR Electronic Medical Record HIS HIS [1-2] 40 2011 张 肖 等 : 基 于 大 数 据 的 医 疗 健 康 创 新 应 用 2 大 数 据 环 境 下 医 疗 数 据 特 征 分 析 PC [3]
![第 02 期 1 医 疗 信 息 现 状 20% EMR Electronic Medical Record HIS HIS [1-2] 40 2011 张 肖 等 : 基 于 大 数 据 的 医 疗 健 康 创 新 应 用 2 大 数 据 环 境 下 医 疗 数 据 特 征 分 析 PC [3]](/thumbs/42/23099865.jpg "第 02 期 1 医 疗 信 息 现 状 20% EMR Electronic Medical Record HIS HIS [1-2] 40 2011 张 肖 等 : 基 于 大 数 据 的 医 疗 健 康 创 新 应 用 2 大 数 据 环 境 下 医 疗 数 据 特 征 分 析 PC [3]")
电 子 科 学 技 术 电 第 02 子 科 卷 学 第 技 02 术 期 Electronic 2015 年 Science 3 月 & Technology Electronic Science & Technology Vol.02 No.02 Mar.2015 年 基 于 大 数 据 的 医 疗 健 康 创 新 应 用 张 肖, 杨 锦 洲, 王 志 勇 ( 中 国 联 通 研 究 院, 北
2月5期aa
中 国 农 学 通 报 212,28():2-27 Chinese Agricultural cience Bulletin 血 清 11 型 鸭 疫 里 默 氏 菌 的 分 离 鉴 定 1,2 2, 2, 2, 2, 2, 2, 杨 晓 辉, 程 龙 飞, 陈 红 梅, 施 少 华, 傅 光 华, 万 春 和, 黄 瑜 ( 1 福 建 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所, 福 州
Microsoft Word - 8986.doc
中 国 美 学 与 解 释 学 札 记 胡 晓 明 ( 华 东 师 范 大 学 中 文 系 ) 摘 要 : 这 篇 文 章 是 笔 者 读 书 心 得 之 汇 集, 虽 然 是 偶 成, 但 是 却 包 含 了 对 中 国 美 学 及 解 释 学 的 理 解 和 关 心 关 键 词 : 美 学 ; 解 释 学 中 图 分 类 号 :G0 文 献 标 识 码 : 一 中 国 美 学 中 的 身 体 日
第 卷 第 期 年 月 水 生 生 物 学 报 肠 丫 搔蒸霎 原 位杂 交 和 原 位 技 术在 鱼 类基 因 定位 中 的 应 用 黄 袁仕 取 梅 朱作言 中 国科 学 院 水 生 生 物 研 究 所 淡 水 生 态 与 生 物 技 术 国 家 重 点 实验 室 武 汉 陕 西 师 范 大学 生 命 科 学 院 西 安 # 万 尸 了夭 如 趾 郑 人 扭寿 卿 关 键词 艺 只 妙 毛山知
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7 1 Vol. 7 No. 1 2016 1 Journal of Food Safety and Quality Jan., 2016 2013~2014 朱静鸿 *, 龚云伟, 李月婷, 武艳立 (, 130033) 摘要 : 目的 方法 2013 结果 2013~2014 11 433, 74, 17.09%, 42 21 9 2 2013 2014 (x 2 =0.09, P>0.05)
福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析
福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑
220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原
![220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原](/thumbs/42/22870184.jpg "220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原")
29 赵 哲, 张 泰 铭, *, 方 宣 启 2, 向 凤 琴, 乔 君 喜, 朱 蓉 (. 中 南 大 学 化 学 化 工 学 院, 湖 南 长 沙 40083;2. 湖 南 省 食 品 质 量 监 督 检 验 所, 湖 南 长 沙 40002) 通 过 向 稳 态 体 系 溴 酸 钠 - 硫 酸 锰 - 硫 酸 - 丙 酮 中 加 入 不 同 的 茶 饮 料, 获 得 来 自 不 同 产 家
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7 9 Vol. 7 No. 9 2016 9 Journal of Food Safety and Quality Sep., 2016 A B C 1, 代晓航 2 1,, 郭灵安 2*, 魏超 (1., 610066; 2. ( ), 610066) 1, 2 摘要 : 目的 3 SEA SEB SEC 方法, 10 4 CFU/g ( ) 10 2 CFU/g ( ),, 8 25, GB
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不 同 人 群 对 护 理 硕 士 专 业 学 位 能 力 培 养 和 课 程 设 置 认 知 的 比 较 研 究 姚 雅 青 王 爱 敏 李 茜 茜 刘 钰 [ 摘 要 ] 目 的 : 了 解 护 理 专 家 及 硕 士 研 究 生 主 要 生 源 对 专 业 学 位 研 究 生 能 力 培 养 课 程 设 置 和 教 学 方 法 的 认 知 及 差 异 方 法 : 采 用 问 卷 调 查 结 合
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第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
2006年顺德区高中阶段学校招生录取分数线
2014 年 顺 德 区 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 录 取 根 据 佛 山 市 办 提 供 的 考 生 数 据, 现 将 我 区 2014 年 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 的 录 取 公 布 如 下 : 一 顺 德 一 中 录 取 分 第 1 志 愿, 总 分 585, 综 合 表 现 评 价 A, 考
全球健康研究中心-中文
2 3 4 5 6 Dr. Qianli Wang Institute of Microbiology, Chinese Academy of Science, A one health perspective on avian influenza and the live poultry trade in China Ron Halbrooks Medical Doctor, Sutton Station
km km mm km m /s hpa 500 hpa E N 41 N 37 N 121
32 2 2014 4 Journal of Arid Meteorology Vol. 32 No. 2 Apr 2014. 08. 03 J. 2014 32 2256-262 LU Guirong WANG Wen YU Huaizhenget al. The Influence of Damrey Typhoon on 08. 03 Rainstorm Process in Rizhao of
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Research Paper 研究报告 Acta Microbiologica Sinica 48(11) 1526~1531; 4 November 2008 ISSN 0001-6209; CN11-1995/Q http://journals.im.ac.cn 变性高效液相色谱检测食品中致泻性大肠杆菌 徐君怡 1, 曹际娟 1*, 郑秋月 1, 赵昕 1 2, 闫平平 ( 1 116015)
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国 际 中 医 中 药 杂 志 2016 年 6 月 第 38 卷 第 6 期 Int J Trad Chin Med, June 2016, Vol. 38, No.6 481 国 外 传 统 医 学 管 理 模 式 探 讨 一 带 一 路 胡 艳 敏 李 宗 友 徐 俊 李 彦 文 王 俊 文 姜 威 赵 阳 摘 要 传 统 医 学 以 其 在 疾 病 治 疗 及 预 防 保 健 中 的 确 切