Microsoft Word gc090467王媛媛g.doc
|
|
|
- 亚朽 井
- 4 years ago
- Views:
Transcription
1 生物工程学报 Chin J Biotech 2010, January 25; 26(1): journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN cjb@im.ac.cn 2010 CJB, All rights reserved. 生物技术与方法 SM22 启动 SCAP 真核表达质粒的构建及其在 CHO 细胞中的表达 王媛媛 1, 胡接力 1, 崔静 1, 黄爱龙 1, 阮雄中 1,2, 陈压西 1 重庆医科大学附属第二医院教育部感染性疾病分子生物学重点实验室脂质研究中心, 重庆 Center for Nephrology, Royal Free and University College Medical School, University College London, Royal Free Campus, London, UK 摘 要 : 为建立平滑肌特异的固醇调节元件结合蛋白 (SREBP) 的裂解激活蛋白 (SCAP) 超表达的转基因小鼠, 深入 探讨 SCAP 的功能, 本实验构建了由平滑肌特异蛋白 SM22 启动子 (psm22) 启动仓鼠 SCAP 443 位点突变体 SCAP (D443N) 的真核表达质粒, 并在仓鼠卵巢细胞 (CHO) 验证其表达 利用巢式 PCR 从小鼠肝脏组织提取的基因组中扩增得到 psm22 基因 先将其插入 pmd-t 载体, 构建 T-SM22, 对 psm22 测序后, 通过双酶切将 psm22 克隆到 pgl3-control-luc 中, 成为 pgl3-sm22-luc 转染 pgl3-sm22-luc 到血管平滑肌 (VSMCs) 中, 通过检测荧光素酶 (Luc) 值观察 psm22 在 VSMCs 内的启动活性 利用 PCR 从 ptk-hsv-scap (D443N) 质粒中扩增出 SCAP (D443N) 后克隆入 pgl3-control 中, 成为 pgl3-scap 然后再将 psm22 克隆入 pgl3-scap 中, 成为表达质粒 pgl3-sm22-scap (D443N) 转染表达质粒到 CHO 细胞, 用 real-time PCR 和 Western blotting 验证 SCAP (D443N) 的表达 结果证实 psm22 在体外 VSMCs 中能启动 Luc 的表达 ; 表达质粒 pgl3-sm22-scap (D443N) 酶切及测序结果正确 ; 将其转染到 CHO 细胞后, 与转染 pgl3-control 的对照细胞相比 SCAP (D443) mrna 和蛋白表达显著增强 关键词 : SM22, 启动子,SREBP 裂解激活蛋白, 质粒构建, 基因表达, 转染 1 Construction of pgl3-sm22-scap (D443N) eukaryotic expression vector and its expression in CHO cells Yuanyuan Wang 1, Jieli Hu 1, Jing Cui 1, Ailong Huang 1, Xiongzhong Ruan 1,2, and Yaxi Chen 1 1 Center for Lipid Research, Key Laboratory of Molecular Biology on Infectious Diseases, Ministry of Education, Second Affiliated Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing , China 2 Center for Nephrology, Royal Free and University College Medical School, University College London, Royal Free Campus, London, UK Abstract: The experiment was designed to investigate the function of SREBP cleavage-activating protein (SCAP) mutant (D443N) by constructing an eukaryotic expressive vector using a smooth muscle specific promoter SM22 (pgl3-sm22-scap(d443n)). SM22 promoter (psm22) was amplified from genome DNA of mice by nested PCR, and then cloned into pmd-t vector. The SM22 promoter fragment released from the vector by Kpn I and Hind III digestion was sub-cloned into pgl3-control-luc vector, to form Received: July 25, 2009; Accepted: September 29, 2009 Supported by: National Natural Science Foundation of China (Nos , , , ), Natural Science Foundation of Chongqing (No. 2008BA5016). Corresponding author: Yaxi Chen and Xiongzhong Ruan. Tel: ; Fax: ; zlcyxi@sina.com 国家自然科学基金 (Nos , , , ), 重庆市自然科学基金 (No. 2008BA5016) 资助
2 王媛媛等 : SM22 启动 SCAP 真核表达质粒的构建及其在 CHO 细胞中的表达 115 pgl3-sm22-luc. The activity of psm22 in human vascular smooth muscle cells (VSMCs) was tested using Dual-Luciferase Reporter System. SCAP(D443) mutant amplified from plasmid ptk-hsv-scap(d443n) and psm22 from mice liver were cloned into pgl3-control vector to construct pgl3-sm22-scap(d443n) which was transfected into Chinese hamster ovary cells (CHO) to test SCAP(D443) expression by real-time PCR and Western blot. The sequence and construction of pgl3-sm22-scap(d443n) were correct. SM22 promoter activity initiated the expression of luciferase in VSMCs and also drove SCAP(D443) expression in transfected CHO cells. The pgl3-sm22-scap(d443n) eukaryotic expression vector was successfully constructed and the recombinant vector provides a powerful approach in investigating the function and regulation of SCAP and also in producing vascular smooth muscle specific SCAP transgenic mice. Keywords: SM22, promoter, SREBP cleavage-activating protein, plasmid construction, gene expression, transfection 固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白 (SCAP) 是存在于内质网的细胞内胆固醇敏感器, 也是固醇调节元件结合蛋白 (SREBP) 的锚定蛋白, 在调节细胞内胆固醇水平中起着非常关键的作用 [1] 当细胞内胆固醇缺乏时, 它可以将 SREBP 从内质网运送至高尔基体发生裂解, 裂解的活性片段进入细胞核, 引起在启动子区域含有胆固醇调节元件 (SRE) 的下游靶基因转录激活, 从而导致细胞对胆固醇的合成和摄取增加 相反, 在细胞内胆固醇过负荷时, SCAP 与内质网上的固定蛋白胰岛素诱导基因 (Insig-1,2) 结合, 将 SREBP 锚定在内质网而不向高尔基体转运, 从而停止对下游靶基因 ( 如 LDL 受体和 HMG CoA 还原酶 ) 的转录激活 本研究室大量的前期研究表明, 当肝细胞内过度表达 SCAP, 可以导致肝细胞内脂质摄取与合成增加及脂肪肝发生 [2] ; 当血管平滑肌细胞 SCAP 过度表达时, 亦会导致胆固醇异常积聚, 形成泡沫细胞 [3] 虽然野生型 SCAP 过表达时会引起胆固醇对 LDL 受体负反馈调节失调, 但当 SCAP 基因位于胆固醇敏感区的第 443 个密码子存在点突变时,SCAP 将不再受细胞内胆固醇水平的反馈调节, 这样会彻底打破细胞内胆固醇对靶基因的负反馈调节 [4] 同时, 平滑肌特异蛋白 SM22 启动子在体外能够广泛表达, 而在体内却具有在动脉平滑肌上的表达特异性 [5] 因此, 本实验选定 SCAP (D443N) 突变体与 SM22 启动子 (psm22), 首次构建了 pgl3-sm22-scap (D443N) 真核表达质粒, 为今后建立血管平滑肌特异的 SCAP 超表达转基因小鼠 深入探讨 SCAP 的功能及动脉粥样硬化发生的新机制奠定了基础 1 材料和方法 1.1 材料中国仓鼠卵巢细胞 (CHO) ( 重庆医科大学教育部感染性疾病分子生物学重点实验室 ); 血管平滑肌细胞株 (VSMCs) ( 英国 Buckinghamshire,TCS cell works);dmem-f12 培养基 优等胎牛血清 ( 赛默飞世尔化学制品有限公司 ); 载体 pmd18-t DNA 聚合酶 T4 DNA 连接酶及限制性内切酶 BglⅡ XbaⅠ BamHⅠ KpnⅠ Hind Ⅲ SalⅠ ( 大连宝生物工程有限公司 ); 蛋白提取试剂盒 ( 凯基生物科技发展有限公司 );BCA 蛋白定量试剂盒 ( 北京鼎国生物技术有限公司 ); 转染试剂 Lipofectamine TM ( 美国 Invitrogen 公司 ); 质粒提取试剂盒, 质粒载体 pgl3-control pgl3-enhancer pegfp-n1, 双荧光素酶报告基因检测系统 ( 美国 Promega 公司 ); 质粒 ptk-hsv-scap-t7(d443n) 及兔源抗 SCAP 多克隆抗体 ( 英国 UCL 大学皇家自由医学院肾脏病研究中心惠赠 );DNA 提取试剂盒 ( 德国 QIAGEN 公司 ); 兔源抗 β-actin 多克隆抗体 羊抗兔 HRP 标记二抗 ( 美国 santa cluz 公司 ); 引物合成 ( 上海生工生物工程有限公司 ) 1.2 方法 细胞培养 CHO 细胞株在含 10% 优等胎牛血清 100 U/mL 青霉素 100 mg/ml 链霉素的 DMEM-F12 培养基中, VSMCs 细胞在 20% 优等胎牛血清 100 U/mL 青霉素 100 mg/ml 链霉素的 DMEM-F12 培养基中, 均于 20% O 2 5% CO 2 75% N 2 的常氧孵箱中 37 培养
3 116 ISSN CN /Q Chin J Biotech January 25, 2010 Vol.26 No pgl3-sm22-luc 质粒的构建 然后将 psm22 克隆入 pegfp-n1, 再用 BamHⅠ 和 [5] 参考 Moessler 等的研究结果, 设计两对引物 BglⅡ 将其酶切克隆到用 BamHⅠ 处理的 F1 R1 和 F2 R2 ( 表 1) 做巢式 PCR 扩增 psm22 先用外引物 F1 R1 对小鼠肝脏的基因组 DNA 进行扩增, 再利用内引物 F2 R2 对上述 PCR 产物重新扩增获得全长为 2188 bp 的 psm22 序列 然后将 psm22 的 PCR 产物插入 pmd18-t 载体, 成为 T-SM22 由于 psm22 可以正反两种方向插入 pmd18-t, 对 T-SM22 进行酶切鉴定, 挑选出酶切位点 KpnⅠ 位于 psm22 上游 Hind Ⅲ 位于其下游的质粒进行酶切, 然后将切出的 psm22 片段克隆入 pgl3-control-luc 中, 成为 pgl3- SM22-Luc 表 1 PCR 扩增引物序列设计 Table 1 Primers used in the study Primers Sequence (5' 3 ) F1 GGCCCCAGGAATGTGTTTC CTTCTC R1 TCTGCTCCCATGACTTGCACTTACA F2 TCCACCATGTTTTTATAGCTCTTGG R2 AAGGCTTGGTCGTTTGTGGACTGGA F3 GATAGATCTATGACCCTGACTGAAAGGCTGCGT R3 CATTCTAGATCAGTCCAGTTTCTCCAGCAC F4 TGCCCTGAGGCTCTTTTCC pgl3-scap 质粒中 (BamHⅠ 和 BglⅡ 为同尾酶 ) 由 于 psm22 能以正反两种方向与 pgl3-scap 进行连 接, 利用酶切筛选出 psm22 和 SCAP 方向一致的正 确克隆后, 获得 pgl3-sm22-scap(d443n) DNA 测序 DNA 测序由本实验室完成, 采用 ABI PRISM 3100 genetic Analyzer 全自动测序仪, 双脱氧链末端 终止法, 对 T-SM22 和 pgl3-sm22-scap(d443n) 中 的 psm22 及 SCAP 序列进行测序 同一片段经正反 两个方向分别进行测序反应 psm22 在 VSMCs 细胞中的启动活性测定 VSMCs 转染 : 按照转染试剂说明于转染前 1 天 接种细胞入 24 孔板,24 h 后至细胞长至 90% 汇合 时, 每孔分别定量加入 pgl3-sm22-luc 或 pgl3- control-luc ( 阳性对照 ) 或 pgl3-enhancer ( 阴性对 照 ) 0.8 μg 和 prl-tk 内参照质粒 0.1 μg, 按照 DNA (μg): 脂质体 (μl) 为 1:4 的比例转染 VSMCs,4 h 后 换液, 继续培养 24 h 报告基因活性检测 : 转染 24 h 后按照双荧光素 R4 F5 R5 TCGTGGATGCCACAGGATT CTGGCAGTAGATGTGTTCCGATT CAGTACGTGATTCCGGATTTCC 酶 (Luc) 报告基因检测系统试剂说明裂解细胞, 检 测 Luc 活性 分别计算 Firefly Luc/Rellina Luc 的比 值, 以 pgl3-control-luc 和 pgl3-enhance 转染细胞 pgl3-sm22-scap(d443n) 质粒的构建 pgl3-scap 质粒的构建 ( 图 1): 根据 GenBank (Accession No. U67060) 中的 SCAP 序列信息设计一对引物 F3 R3 ( 表 1), 从质粒 ptk-hsv-scap- T7(D443N) 中扩增出 SCAP 片段, 使 SCAP 上游含有 BglⅡ 酶切位点和 ATG 翻译起始密码子, 下游含有 XbaⅠ 酶切位点 用 BglⅡ 和 XbaⅠ 酶切 pgl3-control 质粒和 SCAP 的 PCR 产物, 将线性带有粘性末端的全长 SCAP cdna 和 pgl3 载体大片段置于 16 过夜连接, 转化入大肠杆菌 DH5α, 小量提取获得的质粒 pgl3-scap pgl3-sm22-scap(443n) 质粒构建 ( 图 1): 用 BamHⅠ 和 SalⅠ 酶切 T-SM22, 使 psm22 上游含有 BamHⅠ 的酶切位点, 下游含有 SalⅠ 的酶切位点, 作为对照, 比较判断 psm22 的启动活性 pgl3-sm22-scap(d443n) 真核表达质粒的表达 CHO 细胞的转染 : 按照转染试剂说明, 转染前一天接种合适密度的细胞至 10 cm 细胞培养皿,24 h 后待细胞长至 90% 汇合时, 按照 DNA (μg): 脂质体 (μl) 为 1:1.3 的比例分别转染 pgl3-sm22-scap (D443N) pgl3-control 和 pgl3-scap 至 CHO 细胞, 于 4 h 后换液,36~48 h 后提取细胞总 mrna 和胞浆蛋白 Real-time PCR 检测 SCAP 基因的转录 : 将 CHO 细胞的总 RNA 逆转录为 cdna, 设计两对引物, 仓鼠 β-actin 引物 F4 R4 和仓鼠 SCAP 引物 F5 R5 ( 表 1) 进行 real-time PCR, 根据结果进行相对
4 王媛媛等 : SM22 启动 SCAP 真核表达质粒的构建及其在 CHO 细胞中的表达 117 定量分析 Western blotting 检测 SCAP 蛋白的表达 : 收集细胞提取胞浆蛋白后,50 μg/ 孔上样量进行 5% 和 8% SDS-PAGE 电泳, 分离 SCAP 和 β-actin, 转膜后以 5% 的脱脂奶粉于 TBST 中室温封闭 1 h, 然后用相应的一抗和二抗进行杂交, 最后用 ECL 显色 1.3 统计学分析 试验数据以均数 ± 标准差 ( 分析采用组间比较的 t 检验 x s ) 表示, 统计学 图 1 Fig. 1 pgl3-sm22-scap(d443n) 质粒的构建 Construction of plasmid pgl3-sm22-scap (D443N).
5 118 ISSN CN /Q Chin J Biotech January 25, 2010 Vol.26 No.1 2 结果 2.1 重组真核表达质粒 pgl3-sm22-scap (D443N) 的构建与鉴定 由于巢式 PCR 获得的 psm22 PCR 产物可以以正 反两种方向插入到 pmd18-t 中, 所以需用酶切的方 法挑选出所需方向的克隆, 即 BamHⅠ 和 Kpn I 位点 位于 psm22 上游的 T-SM22 质粒 如果插入方向与预 期相符, 用 Spe I 和 Hind Ⅲ 双酶切克隆质粒即得到约 4.4 kb 和 460 bp 的两条片段 ( 图 2) 由于 BamHⅠ 和 BglⅡ 是同尾酶, 当 psm22 以这两个酶从 pegfp-sm22 中切出, 插入由 BglⅡ 单酶切的 pgl3-scap 质粒时, 也会出现正反方向两种插入形式 用酶切的方法挑选出所需方向的克隆, 即选出 BglⅡ 和 BamHⅠ 的粘末端连接位于 psm22 的上游,BglⅡ 和 BglⅡ 粘末端的连接位于下游的克隆为目的质粒, 如果插入方向与预期相符, 用 BamHⅠ 和 BglⅡ 双酶切就可得到 4.3 kb 和 5.0 kb 两条酶切片段 ( 图 3) 2.2 psm22 及 SCAP 基因的测序对质粒 T-SM22 和 pgl3-sm22-scap 中的 psm22 及 SCAP 序列进行全长测序, 结果表明 [5] psm22 与文献报道的序列同源性达 99%,SCAP 与购买于 ATCC 的质粒 ptk-hsv-scap-t7(d443n) 中的 SCAP 序列一致并存在 SCAP 第 1327 个碱基 G A 的突变, 即第 443 个密码子天冬氨酸 (D) 天冬酰胺 (N) 的突变 ( 图 4) 2.3 psm22 启动子在 VSMCs 细胞中的活性测定 Luc 测定结果显示,SM22 在 VSMCs 中具有启动子活性 pgl3-enhancer 阴性对照的测定值为 0.23, pgl3-control-luc 的阳性对照值为 0.88 (P<0.05 vs pgl3-enhancer),pgl3-sm22-luc 的测定值为 1.21 (P<0.05 vs pgl3-enhancer) ( 图 5) 2.4 Real-time PCR 检测细胞内 SCAP mrna 的表达设计内参 β-actin 引物 F4 R4 和 SCAP 引物 F5 R5 ( 表 1) 进行 real-time PCR 结果显示, 转染 SCAP (D443N) 的 T 组与转染 pgl3-control 的 C1 组和转染 pgl3-scap 的 C2 组比较,SCAP mrna 表达均有明显的提高 T 组与 C1 组比较 SCAP mrna 有 22 倍的升高 (P<0.05), 两者有显著性差异 ( 图 6) 图 2 T-SM22 的双酶切鉴定 Fig. 2 Characterization of T-SM22 by enzyme digestion. 1: DNA marker; 2: T-SM22 digested with Hind III and Spe I; 3: T-M22 plasmid. 图 3 pgl3-sm22-scap 的双酶切鉴定 Fig. 3 Characterization of pgl3-sm22-scap by enzyme digestion. 1: DNA marker; 2: pgl3-sm22-scap plasmid; 3: pgl3-sm22-scap digested with BamH I and Bgl II. 图 4 SCAP 基因测序 Fig. 4 Sequencing of SCAP.
6 王媛媛等 : SM22 启动 SCAP 真核表达质粒的构建及其在 CHO 细胞中的表达 pgl3-sm22-scap 在细胞内的蛋白表达 利用 Western blotting 技术, 以 β-actin 作为内参, 检测分别转染了 pgl3-control pgl3-scap 及 pgl3-sm22-scap(d443n) 的 CHO 细胞的 SCAP 蛋 白表达 正常条件下,CHO 细胞中有少量正常 SCAP 的蛋白表达, 但在转染了 pgl3-sm22-scap (D443N) 后,SCAP 蛋白超表达, 表达量明显高于 对照组 ( 图 7) 图 5 双荧光素酶报告基因检测 psm22 启动子活性 Fig. 5 Promoter activity of psm22 detected by dual-luciferase reporter gene assay. NC: transfected with pgl3-enhancer; T: transfected with pgl3-sm22-luc; PC: transfected with pgl3-control-luc. * P<0.05 compared with NC group. 图 6 SCAP mrna 的 real-time PCR 结果 Fig. 6 SCAP mrna level examined by real-time PCR. C1: CHO cells transfected with pgl3-control; C2: CHO cells transfected with pgl3-scap; T: CHO cells transfected with pgl3-sm22-scap (D443N). *P<0.05 compared with C1 group. 图 7 Westem blotting 检测 pgl3-sm22-scap 在 CHO 细胞中的蛋白表达 Fig. 7 Expression of SCAP protein in CHO cells (Western blotting). 1: CHO cells transfected with pgl3-control; 2: CHO cells transfected with pgl3-scap; 3: CHO cells transfected with pgl3-sm22-scap (D443N). 3 讨论 正常生理条件下, 由于 SCAP 能敏感地感受到细胞内脂质的变化, 从而有效地控制细胞胆固醇的合成和摄取, 防止泡沫细胞的形成 然而, 在受外界因素如炎症的刺激下,SCAP 和 SREBP 的表达异常增加, 以致没有足够的内质网滞留分子, 如 Insig-1 来锁住 SCAP, 导致即使在高细胞内胆固醇浓度的情况下, 仍然运载 SREBP 到高尔基体内裂解激活, 并激活其下游靶基因 LDL 受体和 HMG CoA 还原酶的表达, 导致细胞 ( 如 VSMCs, 肾脏系膜细胞 ) 无控制地摄取和合成 LDL 胆固醇, 形成泡沫细胞 [3,6] 当第 443 个密码子存在点突变的 SCAP 即 SCAP (D443N) 存在于细胞内时, 细胞将完全打破胞外胆固醇的负反馈调节,SCAP (D443N) 不受限制地运载 SREBP2 至细胞核 [4] 因此选择将 SCAP (D443N) 过表达于细胞内将更有利于泡沫细胞的生成 平滑肌特异蛋白 SM22 是一种在平滑肌中含量丰富的蛋白 将 SM22 进行克隆后发现, 它可以显著地表达于体外的不同系统, 而与这种泛宿主性表达不同的是,SM22 在体内同其他平滑肌标志蛋白一样严格特异地表达于平滑肌细胞, 而本实验所构建质粒中的 psm22 启动子包含了从 SM22 的转录起始位点至其上游 446 bp 的序列, 这一区域介导了它在体内动脉平滑肌上的特异性表达 [5] 本实验证实 psm22 在 VSMCs 中具有启动子活性 由于 VSMCs 为原代培养细胞, 转染效率有限, 且细胞本身 SCAP 含量丰富, 不利于质粒的表达鉴定 而 CHO 细胞作为脂代谢相关基因的低背景细胞广泛运用于脂代谢的研究 [7-8], 鉴于 psm22 在体外细胞的泛宿主性及 SCAP (D443N) 来源于突变的 CHO 细胞系, 本实验构建了由 psm22 启动 SCAP (D443N) 的真核表达质粒瞬时转染于野生型的 CHO 细胞, 进行表达鉴定 结果发现转染后的 CHO 细胞内 SCAP mrna 及蛋白的表达量都远远高于未转染组, 证实构建的真核表达质粒能够正常表达于体外细胞 结合质粒酶切鉴定及测序结果表明质粒构建成功 由于 SCAP (D443N) 的特殊生物学功能, pgl3-sm22-scap(d443n) 质粒的成功构建对于进
7 120 ISSN CN /Q Chin J Biotech January 25, 2010 Vol.26 No.1 一步在体内研究 SCAP 的各种调节功能及其在动脉 硬化发生的作用具有重要意义 ; 同时也为下一步采 [9-10] 用原核微注射技术得到动脉平滑肌 SCAP (D443N) 特异表达的转基因小鼠提供了材料 REFERENCES [1] Adams CM, Brown MS, Goldstein JL, et al. Cholesterol and 25-hydroxycholesterol inhibit activation of SREBPs by different mechanisms, both involving SCAP and insigs. J Biol Chem, 2004, 279: [2] Ma KL, Ruan XZ, Powis SH, et al. Inflammatory stress exacerbates lipid accumulation in hepatic cells and fatty livers of apolipoprotein E knockout mice. Hepatology, 2008, 48(3): [3] Ruan XZ, Moorhead JF, Tao JL, et al. Mechanisms of dysregulation of low-density lipoprotein receptor expression in vascular smooth muscle cells by inflammatory cytokines. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2006, 26(5): [4] Hua X, Nohturfft A, Goldstein JL, Brown MS, et al. Sterol resistance in CHO cells traced to point mutation in SREBP cleavage-activating protein. Cell, 1996, 87: [5] Moessler H, Mericskay M, Li Z, et al. The SM22 promoter directs tissue-specific expression in arterial but not in venous or visceral smooth muscle cells in transgenic mice. Development, 1996, 122: [6] Ruan XZ, Varghese Z, Powis SH, et al. Dysregulation of LDL receptor under the influence of inflammatory cytokines: a new pathway for foam cell formation. Kidney Int, 2002, 60: [7] Russell A, DeBose-Boyd, Brown MS, et al. Transport-dependent proteolysis of SREBP: relocation of site-1 protease from Golgi to ER obviates the need for SREBP transport to Golgi. Cell, 1999, 99: [8] Gong Y, Lee JN, Lee P, et al. Sterol-regulated ubiquitination and degradation of Insig-1 creates a convergent mechanism for feedback control of cholesterol synthesis and uptake. Cell Metabolism, 2006, 3: [9] Simons JP, McClenaghan M, Clark AJ. Alteration of the quality of milk by expression of sheep beta-lactoglobulin in transgenic mice. Nature, 1987, 328: [10] al-shawi R, Kinnaird J, Burke J, et al. Expression of a foreign gene in a line of transgenic mice is modulated by a chromosomal position effect. Mol Cell Biol, 1990, 10(3): 科学出版社科学出版中心生命科学分社新书推介 生物能源技术与工程化 ( 应用生物技术大系 ) 张百良著 年 12 月出版 内容简介本书是一本研究生物能源技术与工程化的专著, 内容包括生物能源技术及生物能源资源现状与评价 ; 高效厌氧生物反应器 生物燃气燃烧设备研制及应用 ; 生物甲醇 生物乙醇 生物柴油生产工艺及技术 ; 生物质成型燃料技术与设备研发 工程化及评价 本书集中体现了生物能源技术和设备的研究思路 技术路线 研究方法 试验过程及应用效果, 具有突出的创新性和实践性 本书适用于生物能源 环境工程 生物化工 农业工程等领域的科研及工程技术人员, 也可作为高等院校相关专业研究生的参考用书 欢迎各界人士邮购科学出版社各类图书 ( 免邮费 ) 邮购地址 : 北京东黄城根北街 16 号科学出版社科学出版中心生命科学分社邮编 : 联系人 : 李韶文 ( ) 周文宇 ( ) 更多精彩图书请登陆网站 欢迎致电索要书目
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P 生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
Admin
目 录 党 旗 飘 扬 刘 新 民 书 记 在 我 院 纪 念 中 国 共 产 党 成 立 八 十 九 周 年 暨 创 先 争 优 活 动 推 进 大 会 上 的 讲 话 4 续 写 佳 绩 再 创 辉 煌 巩 固 成 果 创 先 争 优 我 院 隆 重 召 开 纪 念 中 国 共 产 党 成 立 八 十 九 周 年 暨 创 先 争 优 活 动 推 进 大 会 8 医 海 撷 英 泌 尿 外 科 成
Microsoft Word - 360145.doc
项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通
![240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通](/thumbs/42/22943812.jpg "240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通")
2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
g kg - 1 decoction respectively 10 ml kg - 1 once a day for 10 weeks during making model. After 10 weeks according to the method of
19 7 LDL-C LDL-R 谢慧臣 1, 刘芬 1*, 田春漫 1, 向靖 2 2, 杨强 ( 1. 湖北民族学院医学院中西医结合教研室, 湖北恩施 445000; 2. 湖北民族学院医学院附属医院中西医结合科, 湖北恩施 445000) LDL LDL-R Wistar 60 7. 2 10-4 g kg - 1 0. 25 0. 5 1. 0 g kg - 1 10 1 10 10 LDL
深度重医第二期10(copy)
: 2013 年 10 月 第 2 期 总 第 002 期 主 管 单 位 主 办 单 位 重 庆 市 教 育 委 员 会 重 庆 医 科 大 学 本 刊 编 委 会 构 成 主 任 雷 寒 吴 小 翎 重 庆 医 科 大 学 校 长 重 庆 医 科 大 学 党 委 书 记 成 员 冯 跃 林 陈 志 勇 董 志 邓 世 雄 谢 鹏 黄 爱 龙 杨 竹 田 杰 重 庆 医 科 大 学 党 委 副 书
隋晓丹, 等. 中医药防治非酒精性脂肪肝病的研究进展 和总酚酸均能通过促进脂质代谢及抗脂质过氧 2 中药复方研究 化作用达到治疗NAFLD的作用. 而总体疗效上 很多医家结合临床辨证制定方剂, 通过实验药 丹参总酚酸优于丹参总酮. 路帅等[2]实验证实丹 理研究及临床疗效观察证实许多中药复方对 参能
![隋晓丹, 等. 中医药防治非酒精性脂肪肝病的研究进展 和总酚酸均能通过促进脂质代谢及抗脂质过氧 2 中药复方研究 化作用达到治疗NAFLD的作用. 而总体疗效上 很多医家结合临床辨证制定方剂, 通过实验药 丹参总酚酸优于丹参总酮. 路帅等[2]实验证实丹 理研究及临床疗效观察证实许多中药复方对 参能](/thumbs/41/22704776.jpg "隋晓丹, 等. 中医药防治非酒精性脂肪肝病的研究进展 和总酚酸均能通过促进脂质代谢及抗脂质过氧 2 中药复方研究 化作用达到治疗NAFLD的作用. 而总体疗效上 很多医家结合临床辨证制定方剂, 通过实验药 丹参总酚酸优于丹参总酮. 路帅等[2]实验证实丹 理研究及临床疗效观察证实许多中药复方对 参能")
wcjd@wjgnet.com 世界华人消化杂志 2013年6月28日; 21(18): 1708-1713 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 文献综述 REVIEW 中医药防治非酒精性脂肪肝病的研究进展 隋晓丹, 邓厚波, 刘铁军 背景资料 非酒精性脂肪肝 病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是21世
穨1.PDF
1 J Chin Med 14(1): 1-15, 2003 (2002 7 9 2002 11 5 2003 1 29 ) 1 04-22340047Fax:04-22342508E-mail:jcmt22@ms38.hinet.net 2 2 3 () 3 ( ) () () 4 4 () 5 () 6 1. 2. 3. 7 4. 8 1. 5 2. 3. 4. 9 6 10 11 12 13
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
![380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂](/thumbs/43/23114460.jpg "380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂")
中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
第二部分
中 国 农 通 报 0,7(04):478-48 Chinese Agricultural Science Bulletin 基 于 网 络 平 台 的 生 物 统 计 改 革 及 实 践 效 果 分 析 袁 文, 彭 惠 茹, 张 洪 亮, 刘 文 欣, 华 金 平, 苏 胜 宝, 孔 繁 玲 ( 中 国 农 大 科 技 术 发 展 研 究 院, 北 京 0093; 中 国 农 大 农 与 生 物
H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
中 草 药
中 草 药 致 谢 李 沛 赵 继 敏 郑 智 敏 江 亚 楠 等 病 理 生 理 学 教 研 室 老 师 在 实 验 中 给 予 的 指 导 和 帮 助 狄 建 彬 顾 振 纶 赵 笑 东 钱 培 刚 蒋 小 岗 郭 次 仪 中 草 药 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 10 年 8 月 1324 LDL C 非常明显升高 (
Microsoft Word - 2.v3n1.gjtm.docx
Theory of carduonephric disharmony and irritable bowel syndrome Xia-min Lu 1, Min Lu 1 Nanjing University of Traditional Chinese Medicine, Nanjing, China Department of Digestive System, Jiangsu Integrated
時間
104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012
标题
摇 878 环 球 中 医 药 2015 年 7 月 第 8 卷 第 7 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, July 2015,Vol 郾 8, No 郾 7 慢 性 前 列 腺 炎 外 治 法 治 疗 进 展 综 述 莫 旭 威 摇 王 彬 摇 李 海 松 摇 赵 冰 摇 刘 洋 揖 摘 要 铱 摇 目 前 慢 性 前 列 腺 炎 的 治 疗 已 经
5-25袁宏钧.indd
第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
< F63756D656E D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA36C6DA2DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D36A3A92E6D6469>
1. 530023 2. 530001 3. 530001 DCP 100 DCP 47 53 3 HOMA -IR HOMA - IR P
高 云 钟良军 张源明 周晓欢 梁 平 徐 隽 探讨兔牙周炎对动脉粥样硬化炎性因子的影响及抗生素对其的作用 将 只雄性新西兰大白兔随机分为 组 组为对照组 组为牙周炎组 组为动脉粥样硬化组 组为牙周炎 动脉粥样硬化组 组为干预组 牙周炎 动脉粥样硬化 替硝唑组 各组分别按照实验设计进行相应干预处理 周末处死动物 检测牙周指标 血清中总胆固醇 三酰甘油 高密度脂蛋白胆固醇 低密度脂蛋白胆固醇 反应蛋白
实 践 探 讨 高 丽 : 从 少 数 民 族 大 学 生 的 阅 读 需 求 看 民 族 院 校 图 书 馆 的 资 源 建 设 有 区 域 性 和 民 族 性 很 强 的 传 统 学 科 特 色 学 科 及 优 势 学 科, 因 此 图 书 馆 的 资 源 建 设 也 要 顺 应 这 一 特 性
中 国 科 技 资 源 导 刊 ISSN 1674-1544 2010 年 7 月 第 42 卷 第 4 期 72-77 CHINA SCIENCE & TECHNOLOGY RESOURCES REVIEW ISSN 1674-1544 Vol.42 No.4 72-77,Jul. 2010 从 少 数 民 族 大 学 生 的 阅 读 需 求 看 民 族 院 校 图 书 馆 的 资 源 建 设 高
第16卷 第2期 邯郸学院学报 2006年6月
第 18 卷 第 4 期 邯 郸 学 院 学 报 2008 年 12 月 Vol.18 No.4 Journal of Handan College Dec. 2008 赵 文 化 研 究 论 赵 都 邯 郸 与 赵 国 都 城 研 究 问 题 朱 士 光 ( 陕 西 师 范 大 学 历 史 地 理 研 究 所, 陕 西 西 安 710062) 摘 要 : 战 国 七 雄 之 一 的 赵 国 都 城
:PGL3-insulinLuciferase 11 50%, Lipofectine2000, sense primer:ataacgcgtgtcgactct AGAGT PGL3-insulinluciferase RenilaLucif
,2012,33(4):10-15 ProgressinVeterinary Medicine PGL3-insulinLuciferase * ( 361005) : PGL3-Basic 2 (insulin Ⅱ promoter) β MIN6,, : ; ; ; :Q782 :A :1007-5038(2012)04-0010-06,,, [6-8] 9.7% 15.5% [1] 6000,
标题
DOI:10. 15942 / j. jcsu. 2016. 03. 001 成 都 体 育 学 院 学 报 2016 年 ( 第 42 卷 ) 第 3 期 Journal of Chengdu Sport University Vol. 42 No. 3. 2016 成 都 体 育 学 院 建 设 体 育 特 色 鲜 明 多 学 科 协 调 发 展 的 高 水 平 应 用 研 究 型 大 学 冶
医学科研方法
医 学 科 研 方 法 主 讲 苏 秀 兰 细 胞 生 物 学 教 授 第 一 讲 绪 论 一 概 念 : 在 医 学 科 学 研 究 活 动 中, 运 用 科 学 的 实 践 和 理 论 思 维 的 技 巧, 充 分 发 挥 自 己 的 智 慧, 去 寻 找 观 念 世 界 与 现 实 世 界 之 间 的 联 系 或 规 律, 从 而 发 现 新 现 象, 提 出 新 理 论 的 手 段 二 医
Microsoft Word - 2016 重庆会议通知8-15
第 二 届 全 国 肿 瘤 代 谢 年 会 首 届 中 美 肿 瘤 代 谢 高 峰 论 坛 第 一 届 肿 瘤 代 谢 与 代 谢 组 学 技 术 基 础 理 论 学 习 班 会 议 通 知 尊 敬 的 专 家 您 好 : 为 推 动 肿 瘤 代 谢 研 究, 总 结 并 普 及 肿 瘤 代 谢 研 究 经 验 及 新 技 术 新 方 法, 落 实 首 届 全 国 肿 瘤 代 谢 学 术 成 果,
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
从菜鸟到高手-手把手教你qPCR教程II
从 菜 鸟 到 高 手 - 手 把 手 教 你 qpcr 教 程 II --- 定 量 PCR 原 理 常 见 问 题 分 析 和 数 据 统 计 分 析 前 言 由 于 Real-time qpcr 的 众 多 优 点, 现 在 已 经 是 生 命 科 学 领 域 的 一 项 常 规 技 术 越 来 越 多 的 研 究 文 章 中 涉 及 RT-PCR 的 实 验, 也 基 本 上 被 real-time
<30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D34A3A92E6D6469>
212 绎 Vol.14 No.5 ScienceDirect 阴 元元 元元 / 99978 5 doi: 1.3969/j.issn.1674-3849.212.5.3 2 1 29 72.7% 21 27.1% 24.26% 1 [1] 1 2 21 7.85 [2] 1 29 21% 662 26 9.38 211 3.8 27.2% 1 212-3-26 212-1-19 元 UL16/9-Y4/CMS/WYT1/ICMS
临床路径管理模式下医疗服务流程的关键环节分析
临 床 路 径 管 理 模 式 下 医 疗 服 务 流 程 的 关 键 环 节 分 析 郭 淑 岩 陶 红 兵 曲 豪 柯 晓 华 刘 鹏 珍 梁 婧 摘 要 采 取 文 献 综 述 相 关 资 料 分 析 和 医 生 意 愿 调 查 等 方 法 找 出 影 响 医 院 临 床 路 径 管 理 服 务 流 程 的 主 要 环 节, 邀 请 已 经 开 展 临 床 路 径 的 医 院 相 关 人 员
陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等
生物技术通报 研究报告 IOTECHNOLOGY ULLETIN 05, (0):6- 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的 检测 陆睿 宋绍征 祁正强 葛欣 邵宾 成勇 江苏省转基因动物制药工程研究中心扬州 5009 摘 要 人组织纤溶酶原激活剂 ht-pa 是临床血栓疾病治疗的主要生物药品应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有 报道但重组人纤溶酶原激活剂 rhpa 在转基因动物中表达尚未见报道
<46495420446F63756D656E7428452D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D32303134C4EA2DB5DA34C6DA2DC4BFC2BC2D34C6DA2E6D6469>
绎 1 援 401331 2. 400030 3. 400020 4. 400080 5. 400012 88 44 44 猿 孕 约 0.05 ESR 悦 CRP RF 孕 约 0.05 doi: 10.11842/wst.2014.04.018 R593.22 A Rheumatoid Arthritis RA 44 19 25 32 耀 75 47.71 依 8.53 5 耀 28 4.39
JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct /35 TU3521 P315.
31 5 2011 10 JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct. 2011 1000-1301 2011 05-0075 - 09 510405 1 /35 TU3521 P315. 8 A Earthquake simulation shaking table test and analysis
10.11648.j.si.20160402.18
Science Innovation 2016; 4(2): 65-71 http://www.sciencepublishinggroup.com/j/si doi: 10.11648/j.si.20160402.18 ISSN: 2328-7861 (Print); ISSN: 2328-787X (Online) Case Study on Career Plan of College's Students
932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio
2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu
Microsoft Word - _6-15_--CCMP93-CT-107.doc
Yearbook of Chinese Medicine and Pharmacy, 23(6),303-320,2005 中 醫 藥 年 報 第 23 期 第 6 冊 編 號 :CCMP93-CT-107 補 中 益 氣 湯 抑 制 多 種 惡 性 細 胞 腫 瘤 生 長 機 轉 的 體 外 細 胞 與 肺 氣 虛 老 鼠 模 型 之 先 驅 研 究 沈 建 忠 長 庚 大 學 中 醫 系 摘 要
Microsoft Word - 16周同.doc
生物工程学报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1697-1704 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved
600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合
HGC27 MKN45 SGC7901 MGC803 BGC823 AGS GES μl ATCC RPMI X F12K Sigma SDS-PAGE PBS 4 d CCK-8 Tris-base Biosharp 10% CCK μ
516 1002-0217 2017 06-0516 - 05 3 1,2, 1, 1, 1 1. 210029 2. 244000 3 RT-PCR Western-blot RNA CCK-8 Western-blot P < 0. 05 P < 0. 001 LC3Ⅱ P < 0. 001 P62 P < 0. 001 3 R 735. 2 A DOI 10. 3969 / j. issn.
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1. 1. 2 500 730 2 5 1 1 1. 1. 3 739 127 116 712 265 3 143 50 2 2 1 13 2 14 3 15 4 16 5 17 6 18 7 19 8 20 9
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1006-446X 2011 12-0001-28 1 2 2 1. 201800 2. 510070 R 244. 9 A 1 1. 1 3 2000 1. 1. 1 1973 3 52 299 31 136 100 32 1 13 2011-10 -20 1 2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU
Microsoft Word - 1843-1847 tb20110372 何颖
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn DEC 20, 2011, 8(12): 184 1847 2011 by Institute of Microbiology, CAS 高 校 教 改 纵 横 基 于 建 构 主 义 学 习 理 论 的 微 生 物 学 实 验 课 程 教 学 新 模 式 何 颖 廖 国 建 谢 建 平 * ( 西 南
标题
2016 年 5 月 西 南 民 族 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 423 卷 期 第 3 期 Journal 谢 of 琪 Southwest ꎬ 等 :C++ University 程 序 设 计 for 实 Nationalities( 验 教 学 微 课 Natural 的 设 计 Science 与 实 现 Edition) May 2016 Vol 42 No 3 doi:10
untitled
年 老 力 類 理 理 行 年 度 易 行 便 念 更 裡 數 不 老 行 理 類 年 了 4 1 年 率 連 葉 令 令 葉 糖 流 4 2 年 老 不 了 歷 年 ~ 年 論 年 了 異 念 不 易 類 類 林 濾 流 理 不 年 年 數 ~ 年 數 ~ 量 年 年 年 年 年 六 理 年 年 類 年 年 年 年 異 年 年 來 念 不 讀 老 不 論 率 理 4 3 年 列 濾 刺 度 濾 刺
: A Hc SFV 125 toxin serotype A. Keywords: Semliki Forest virus, RNA replicon, botulinum neurotoxin serotype A, C-terminal fragment of heavy-chain rec
生物工程学报 Chin J Biotech 2008, January 25; 24(1): 124-129 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2008 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved. 研究简报
United Nations ~ ~ % 2010
42 3 2018 5 Vol. 42 No. 3 May 2018 38 Population Research 2014 60 3% ~ 4% 10% 60 +
Superoxide dismutase,sod (O 2. ), SOD O 2., SOD psod SODhCu,Zn-SOD, Cys 111 Ala 111 groesl rbcs polya Kan r pesodt111 Synechococcus sp.pcc7942 groesl
CATALOGUE Abstract 1 1. Preface 1. 1 SOD Brief introduction 5 1. 2 Human SOD 14 1. 3 The study of cyanobacterium gene engineering19 1. 4 The purperse and meaning of the study 25 2. Material and methods
Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRRT2 gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin Chen
Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRR gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin hen,, Yu Lin, Zhi-Qi Xiong 3, Wei Wei, Wang Ni,, uo-he an
17
49 1 ( ) Vol. 49 No. 1 2009 1 Journal of Henan University (Social Science) Jan. 2009 () ()? (, 475001) :, () ; ;2500 3000,,, : ; ; ; ;; :B812092 : A : 1000-5242 (2009) 01-0016 - 06 :2008211217 :(1929 -
202,., IEC1123 (1991), GB8051 (2002) [4, 5],., IEC1123,, : 1) IEC1123 N t ( ). P 0 = 0.9995, P 1 = 0.9993, (α, β) = (0.05, 0.05), N t = 72574 [4]. [6
![202,., IEC1123 (1991), GB8051 (2002) [4, 5],., IEC1123,, : 1) IEC1123 N t ( ). P 0 = 0.9995, P 1 = 0.9993, (α, β) = (0.05, 0.05), N t = 72574 [4]. [6](/thumbs/41/22593815.jpg "202,., IEC1123 (1991), GB8051 (2002) [4, 5],., IEC1123,, : 1) IEC1123 N t ( ). P 0 = 0.9995, P 1 = 0.9993, (α, β) = (0.05, 0.05), N t = 72574 [4]. [6")
2013 4 Chinese Journal of Applied Probability and Statistics Vol.29 No.2 Apr. 2013 (,, 550004) IEC1123,,,., IEC1123 (SMT),,,. :,,, IEC1123,. : O212.3. 1. P.,,,, [1 5]. P, : H 0 : P = P 0 vs H 1 : P = P
[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig
![[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig](/thumbs/91/106435555.jpg "[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig")
40 6 2011 6 Vol.40 No.6 Infrared and Laser Engineering Jun. 2011 808 nm 2000 W 1 1 1 1 2 2 2 2 2 12 (1. 710119 2. 710119) : bar 808 nm bar 100 W 808 nm 20 bar 2 000 W bar LIV bar 808 nm : : TN248.4 TN365
Microsoft Word - ED-774.docx
journal.newcenturyscience.com/index.php/gjanp Global Journal of Advanced Nursing Practice,214,Vol.1,No.1 The practicality of an improved method of intravenous infusion exhaust specialized in operating
人10 漢儒董仲舒的人性論試探.DOC
330 330340 CHIA-NAN ANNUAL BULLETIN VOL. 30, PP. 330 340, 2004 331 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) 1. (8) 332 2. (9) (15) 333 3. (10) 4. 334 (11) 335 (12) (13) 1. 336 2. (14) 3. 337 4. 5. 6. 338 1. 69 2. 321
SVM OA 1 SVM MLP Tab 1 1 Drug feature data quantization table
38 2 2010 4 Journal of Fuzhou University Natural Science Vol 38 No 2 Apr 2010 1000-2243 2010 02-0213 - 06 MLP SVM 1 1 2 1 350108 2 350108 MIP SVM OA MLP - SVM TP391 72 A Research of dialectical classification
62 互 動 性 裝 置 藝 術 對 幼 保 系 學 生 壓 力 情 緒 療 癒 影 響 之 案 例 探 究 62 壹 緒 論 一 研 究 背 景 與 動 機 根 據 財 團 法 人 董 氏 基 金 會 於 2008 年 1 對 大 學 生 主 觀 壓 力 來 源 與 憂 鬱 情 緒 相 關 性 研
幼 兒 教 保 研 究 期 刊 2015 第 15 期 61 互 動 性 裝 置 藝 術 對 幼 保 系 學 生 壓 力 情 緒 療 癒 影 響 之 案 例 探 究 陳 麗 媜 李 依 儒 陳 麗 安 盧 奕 帆 鍾 羽 芃 明 新 科 技 大 學 幼 兒 保 育 系 摘 要 現 今 大 學 生 因 面 臨 各 種 壓 力 而 經 常 產 生 憂 鬱 的 情 緒 適 當 的 壓 力 紓 解 及 良
strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a
32 2 Vol. 32 No. 2 2011 4 Journal of Jinan University Medicine Edition Apr. 2011 HepG2 1 1 2 1 1 1 1. 510632 2. 510080 HepG2 MTT WST-8 HepG2 PI Annexin V-FITC /PI Western blotting HepG2 - P < 0. 01 HepG2
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
标题
Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇
13期
中 国 农 学 通 报,9():- Chinese Agricultural Science Bulletin 药 百 合 种 子 萌 发 及 染 色 体 倍 性 检 测 吴 昀, 马 怡 迪, 张 琳, 夏 宜 平 ( 浙 江 大 学 农 业 与 生 物 技 术 学 院 园 艺 系 / 农 业 部 园 艺 植 物 生 长 发 育 与 品 质 调 控 重 点 开 放 实 验 室, 杭 州 ) 摘 要
4期
中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京
穨131.PDF
131 J Chin Med 13(3): 131-143, 2002 1,2 3 1 1 3 2 (2001 7 18 2001 12 11 2002 1 17 ) 28 508 1237042 89-08-13 89-11-13 I.S.S. Score 35 04-7256166 3205 132 89-08-03 89-08-03 89-09-13 1 2 89-09-28 89-10-25
荧光定量PCR
荧 光 定 量 PCR 荧 光 定 量 PCR 原 理 荧 光 定 量 PCR 最 早 称 TaqMan PCR, 后 来 也 叫 Real-Time PCR, 是 美 国 PE(Perkin Elmer) 公 司 1995 年 研 制 出 来 的 一 种 新 的 核 酸 定 量 技 术 该 技 术 是 在 常 规 PCR 基 础 上 加 入 荧 光 标 记 探 针 或 相 应 的 荧 光 染 料
~ ~
* 40 4 2016 7 Vol. 40 No. 4 July 2016 35 Population Research 2014 1 2016 2016 9101. 0 40 49. 6% 2017 ~ 2021 1719. 5 160 ~ 470 100872 Accumulated Couples and Extra Births under the Universal Tw o-child
35 2 2011 3 Vol. 35 No. 2 March 2011 83 Population Research * 2 100872 Birth Interval between First and Second Child and Its Policy Implications Liu Shuang Zou Mingru Abstract Using data of international
7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0
论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0 ".. " - 23 )"." ( ).)") 4. " ' $ 7 " #$%"$8 &' + +." 0"3 / 3 3( 0 ) %.% "(% 2). +.) ")( ) (
穨75.PDF
75 J Chin Med 14(2): 75-85, 2003 (2002 8 20 2002 12 24 2003 1 8 ) 1 2 3 4 5 6 7 50 : 04-22340047 : 04-22342508E-mail: jcmt22@ms38.hinet.net 76 8 9 1180 1251 10 () 11 77 12 13 ( ) 14 (1) (2) () (1) (2)
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
关 于 学 生 手 册 的 说 明 为 规 范 南 开 大 学 现 代 远 程 教 育 学 院 各 项 教 学 教 务 管 理, 加 强 对 学 习 中 心 管 理 人 员 的 工 作 指 导, 特 汇 编 本 学 生 手 册 学 院 将 根 据 实 际 情 况, 不 断 修 订 完 善 该 学 生
南 开 大 学 现 代 远 程 教 育 学 院 School of Modern Distance Education, Nankai University ( 教 学 教 务 管 理 规 定 ) 学 生 手 册 ( 内 部 资 料 ) 二 一 年 十 二 月 汇 编 关 于 学 生 手 册 的 说 明 为 规 范 南 开 大 学 现 代 远 程 教 育 学 院 各 项 教 学 教 务 管 理, 加
dl t i = CT Lij V = n l ij v - 1 j j = 1 t L ij CT v 4 1 CT BCT BridgeCT 196km m 44. 5km % E Vp = 槡 ρ CT R b = 0.
12 39 CT 1 2 3 1. 067000 2. 067000 3. 100191 CT CT CT CT U446 B 1673-6052 2011 12-0039 - 04 2000 24 2003 31 2009 62 6 5 57 13 23% 2003 50% 20% ~ 30% CT 2001 CT 2004 CT 16 CT 2006 CT BCT BridgeCT T CT 40
1 2 3 GARCH GARCH α > 0 α i > 0 p α i + q β j < 1 i = 1 j = 1 α < 0 β < 0 p α i + q β j < 1 i = 1 j = 1 1. GARCH α + β > 1 α β α > 0 β < 1 α + β > 1 4
27 6 2017 JOURNAL OF UNIVERSITY OF JINANSocial Science Edition Vol. 27 No. 6 2017 GARCH 1 2 2 1. 4750002. 475000 2016 6 6 GARCH GARCH F832. 51 A 1671-3842201706 - 0129-11 GARCH 1 2 EARCH 3 4 17BJY194 1
Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug GPS,,, : km, 2. 51, , ; ; ; ; DOI: 10.
22 4 2017 8 Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug. 2017 150080 GPS,,, : 27. 36 km, 2. 51, 110. 43, ; ; ; ; DOI: 10. 15938 /j. jhust. 2017. 04. 015 U469. 13 A 1007-2683
中國傳統醫學及養生保健學說中，與經脈及穴道有密不可分的關係
1 The Analysis of Meridian Point Bioenergy of Shian Kung Practices in Different Seasons Chieng Chien-Min National Kaohsiung University of Applied Sciences Abstract The current paper aims at examining the
第 37 卷 第 5 期 自 然 论 坛 亿, 相 当 于 总 人 口 的 1/4; 到 2050 年, 比 重 将 达 到 1/3, 相 当 于 三 个 人 中 就 有 一 个 老 年 人 2013 年 上 海 市 60 岁 及 以 上 老 年 人 口 为 387.62 万 人, 占 总 人 口
Chinese Journal of Nature Vol. 37 No. 5 NATURE FORUM doi:10.3969/j.issn.0253-9608.2015.05.007 医 学 模 式 和 健 康 服 务 12 姚 志 洪 1 中 国 科 学 院 上 海 健 康 科 学 研 究 所, 上 海 200025;2 上 海 交 通 大 学 医 学 院 附 属 瑞 金 医 院, 上 海 200025
43 14. 45 3 7 220 1 2 cm /s 2 1. 5 3 1 4 c d 1 /40 1 /4 1 /9 600 0. 129 6 7 1 /6 400 1 /256 000 1. 5 2 2 2. 1 /m /Hz /kn / kn m 6 6 0. 1 ~ 50 600 1 80
43 14 2013 7 Building Structure Vol. 43 No. 14 Jul. 2013 * 1 1 1 2 3 3 3 2 2 1 100013 2 430022 3 200002 1 40 ETABS ABAQUS TU355 TU317 +. 1 A 1002-848X 2013 14-0044-04 Compairion study between the shaking
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
Microsoft Word 聂雪梅.doc
4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 聂雪梅 *, 李立, 孙利, 高飞 (, 100123) 摘要 : 2011 12,, 2007~2011,,,, 关键词 : ; ; ; ; Trade and notification situation on food import and export
/MPa / kg m - 3 /MPa /MPa 2. 1E ~ 56 ANSYS 6 Hz (a) 一阶垂向弯曲 (b) 一阶侧向弯曲 (c) 一阶扭转 (d) 二阶侧向弯曲 (e) 二阶垂向弯曲 (f) 弯扭组合 2 6 Hz
31 3 Vol. 31 No. 3 218 9 Journal of Shijiazhuang Tiedao University Natural Science Edition Sep. 218 1 1 2 1 2 1 1. 543 2. 543 U462. 3 217-2 - 16 A 295-373 218 3-63 - 6 1-4 5-7 8-11 1 11 11 398 mm 86 mm
护国运动时期云南都督府的“拥护共和”奖功制度
Open Journal of Historical Studies 历 史 学 研 究, 2016, 4(1), 1-8 Published Online January 2016 in Hans. http://www.hanspub.org/journal/ojhs http://dx.doi.org/10.12677/ojhs.2016.41001 Protection Republic Award
. 3. MOOC 2006 MOOC Automated Text Marker 2014 e-rater Yigal et al MOOC Coursera Edx 97
23 3 2017 6 Open Education Research Vol. 23 No. 3 Jun. 2017 1 2 1 2 1. 100875 2. 100875 PPT G434 A 1007-2179 2017 03-0096-09 Coursera Edx MOOC 100 2 3- social network services SNS 4 2008 2009 2017-03-
穨17.PDF
17 J Chin Med 14(1): 17-31, 2003 (2002 7 9 2002 12 24 2003 1 8 ) 1 2 50 : 04-22340047 : 04-22342508E-Mail: jcmt22@ms38.hinet.net 18 3 4 19 () 5 1. 2. 3. 4. 5. 20 ( ) 6 1. 2. 3. () 7 1. 21 1 2 3 4 5 6 2.
名称未設定
127 Insulin IR Glucose transport GLUT4 P P IRS PI3K P GLUT4 Akt/PKB GSK-3 P Inactive GSK-3 Active GS Active GS Inactive P Glycogen synthesis 128 129 IRS-1 PH PTB 1242 IRS-2 PH PTB NGDY NDQY 1338 IRS-3
助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
研 究 与 技 术 蚕 蛹 壳 聚 糖 复 合 止 血 材 料 的 制 备 及 凝 血 性 能 初 探 陈 超, 单 其 艳, 杨 铭, 蓝 广 芊, 吴 大 洋 ( 西 南 大 学 纺 织 服 装 学 院, 重 庆 400716) 摘 要 : 探 讨 以 蚕 蛹 壳 聚 糖 (CS) 和 明 胶 (GEL) 为 主 要 原 料 制 备 复 合 止 血 材 料 的 工 艺 及 凝 血 效 果 首 先
林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
Microsoft Word - 6微调 _1_
国 际 中 医 中 药 杂 志 2016 年 6 月 第 38 卷 第 6 期 Int J Trad Chin Med, June 2016, Vol. 38, No.6 481 国 外 传 统 医 学 管 理 模 式 探 讨 一 带 一 路 胡 艳 敏 李 宗 友 徐 俊 李 彦 文 王 俊 文 姜 威 赵 阳 摘 要 传 统 医 学 以 其 在 疾 病 治 疗 及 预 防 保 健 中 的 确 切
業 用 地 出 讓 最 低 價 標 準 不 得 低 於 土 地 取 得 成 本 土 地 前 期 開 發 成 本 和 按 規 定 收 取 的 相 關 費 用 之 和 工 業 用 地 必 須 採 用 招 標 拍 賣 掛 牌 方 式 出 讓 其 出 讓 價 格 不 得 低 於 公 佈 的 最 低 價 標
我 們 為 一 間 所 有 運 營 均 在 中 國 進 行 的 甲 級 物 流 設 施 供 應 商 以 下 為 對 我 們 在 中 國 的 業 務營運有重大關係的中國法律及法規概要 項目的開發 開發用地 儘 管 中 國 的 所 有 土 地 均 歸 國 家 或 集 體 所 有 然 而 個 人 及 企 業 可 獲 得 土 地 使 用 權 及 持 有 有關土地使用權作開發用途 全 國 人 民 代 表 大
条款
中 银 保 险 有 限 公 司 国 内 贸 易 信 用 保 险 (C 款 ) 条 款 1. 承 保 范 围 1.01 被 保 险 人 所 获 得 的 保 障 我 们 是 特 别 条 款 中 所 称 的 保 险 人 我 们 向 您, 即 特 别 条 款 中 所 称 的 被 保 险 人, 签 发 本 保 单, 并 就 本 保 单 收 取 保 险 费 根 据 保 单 的 条 款 和 条 件, 如 果 由