标题

Size: px

Start display at page:

Download "标题"

粕枚禄
5 years ago
Views:

1 第 29 卷第 6 期大连海洋大学学报 Vol. 29 No 年 1 2 月 JOURNAL OF DALIAN OEAN UNIVERSITY Dec DOI: / J. ISSN 文章编号 : (2014) 复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的药动学及残留消除规律 1 韩冰 2 1, 杨洪波 2, 王荻 1 1, 卢彤岩 (1 郾中国水产科学研究院黑龙江水产研究所, 黑龙江哈尔滨 ; 2 郾上海海洋大学水产与生命学院, 上海 ) 摘要 : 采用高效液相色谱法, 研究了以 50 mg / kg ( 体质量 ) 的剂量在口灌给药条件下, 复方磺胺甲噁唑 ( 甲氧苄啶颐磺胺甲噁唑 = 1 颐 5) 在松浦镜鲤 yprinus carpio Songpu 体内的药动学与残留消除规律结果表明 : 单次给药后, 甲氧苄啶在血浆和肌肉中的药时关系符合一级吸收一室开放模型, 在肝胰脏和中的药时关系符合一级吸收二室开放模型, 磺胺甲噁唑在血浆肌肉肝胰脏和中的药时关系符合一级吸收二室开放模型 ; 每天一次连续 5 d 给药后, 甲氧苄啶于第 15 天开始低于 0 郾 05 mg / kg, 磺胺甲噁唑于第 9 天开始低于 0 郾 10 mg / kg 研究表明, 在本试验条件下, 建议休药期不低于 15 d 关键词 : 松浦镜鲤 ; 复方磺胺甲噁唑 ; 药动学 ; 药物残留中图分类号 : S948 摇摇摇摇文献标志码 : A 摇摇松浦镜鲤 yprinus carpio Songpu 是中国水产科学研究院黑龙江水产研究所在德国镜鲤选育系 F 4 代基础上, 采用混合选择方法选育 3 代后培育出的新品种, 具有体型好背部高而厚生长快抗寒力强繁殖力高体表基本无鳞等特点, 是中国当今淡水名优品种重点开发对象之一复方磺胺甲噁唑 (Sulfonamides, SAs) 又名复方新诺明, 是磺胺类药物磺胺甲噁唑 ( Sulfame 鄄 thoxazole, SMZ) 与磺胺增效剂甲氧苄啶 ( Trime 鄄 thoprim, TMP) 按 5 颐 1 的比例混合组成的制剂因其具有抗菌谱广抗菌活性大性质稳定吸收迅速价格低廉等优点, 对水产动物的疖疮病细菌性烂鳃病竖鳞病打印病细菌性败血症等治疗效果良好, 被广泛应用于水产养殖生产中目前, 关于复方磺胺甲噁唑在水产动物中的药动学研究不多 [1-6], 并且细菌菌株对磺胺类药物容易产生耐药性已经得到广泛认同 [7-8] 摄食含磺胺类药物残留的食物后会在人体内蓄积, 当药物蓄积到一定浓度时会对人体机能产生损害, 可产生过敏尿结晶造血紊乱和致癌等毒性反应 [9-10] 因此, 磺胺类药物在动物源性食品中的残留越来越受到重视中国农业行业标准 NY 无公害食品水产品中渔药残留限量规定, 水产品中甲氧苄啶残留的最高限量为 50 滋 g / kg, 磺胺类药物残留的总量不得超过 100 滋 g / kg 本研究中, 对复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的药动学以及残留消除规律进行研究, 旨在了解用药效果与用药安全之间的关系, 科学地指导松浦镜鲤养殖中复方磺胺甲噁唑的合理使用 1 摇材料与方法 1 郾 1 摇材料试验用松浦镜鲤体质量为 (89 郾 57 依 13 郾 91) g, 由黑龙江水产研究所呼兰试验基地提供试验在自动循环水鱼缸中进行, 试验期间持续充气, 水温保持在 (20 依 0 郾 5) 益试验鱼暂养 7 d, 期间投喂全价基础饲料试验药品有 : 甲氧苄啶标准品, 含量为 99 郾 5% ( 德国 Dr 郾 Ehrenstorfer, 批号 10121); 磺胺甲噁唑标准品 ( 德国 Dr 郾 Ehrenstorfer, 批号 10405) 含量为 99 郾 5% ; 复方磺胺甲噁唑粉 ( 北京鑫洋水产高新技术有限公司, 批号 ) 100 g 中含 8 郾 33 g SMZ 和 1 郾 67 g TMP; 二氯甲烷 ( A 郾 R) 乙腈 (HPL) 冰乙酸 (HPL) 正己烷 (HPL) 等均摇收稿日期 : 摇基金项目 : 公益性行业 ( 农业 ) 科研专项 ( ); 现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目 (ARS-46) 摇作者简介 : 韩冰 (1989 ), 男, 硕士研究生 h_ bing1022@ 163 郾 com 摇通信作者 : 卢彤岩 (1967 ), 女, 博士, 研究员 lutongyan@ hotmail 郾 com

2 第 6 期韩冰, 等 : 复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的药动学及残留消除规律 619 为市售分析纯试验仪器主要有戴安 U-3000 高效液相色谱仪 (ThermoFisher 公司 ) 3K15 离心机 (Sigma 公司 ) FJ 200-S 调速混匀器 ( 上海标准模型厂 ) T-214 电子天平 ( 赛多利斯仪器系统有限公司 ) MD200-2 氮吹仪 ( 杭州奥盛仪器有限公司 ) 1 郾 2 摇方法 1 郾 2 郾 1 摇给药方法与样品的采集摇 (1) 药动学试验以有效成分 50 mg / kg( 体质量 ) 的剂量单次对松浦镜鲤口灌复方磺胺甲噁唑粉混悬液 (30% 乙醇配制 ), 于停药后第 0 郾 25 0 郾 50 0 郾 75 1 郾 0 1 郾 h 随机选取 6 尾试验鱼, 采集血 ( 经 3 译肝素钠抗凝后离心吸取血浆 ) 肝胰脏肌肉组织样品, 编号后保存于冰箱 ( -20 益 ) 中备用 (2) 残留量试验以有效成分 50 mg / kg ( 体质量 ) 的剂量, 每天一次, 连续 5 d 对松浦镜鲤口灌复方磺胺甲噁唑粉混悬液 ( 用 30% 乙醇配制 ), 于停药后第 1 天至第 15 天每天随机选取 6 尾试验鱼, 采集血 ( 经 3 译肝素钠抗凝后离心吸取血浆 ) 皮肌肉等可食用组织, 编号后保存于冰箱 ( -20 益 ) 中备用 1 郾 2 郾 2 摇标准储备液的配制摇准确称取甲氧苄啶和磺胺甲噁唑标准品各 0 郾 004 g, 分别溶于 20 ml 流动相中, 各自配制成 200 滋 g / ml 的标准储备液, 于 4 益下避光保存使用时用流动相稀释成所需浓度的标准溶液 1 郾 2 郾 3 摇样品的前处理摇 (1) 血浆样品从冰箱 ( -20 益 ) 中取出血浆样品, 于室温下自然解冻后摇匀, 精确吸取 200 滋 L 于 2 ml 离心管中, 然后加入 1 ml 甲醇, 震荡 2 min, 以 r / min 离心 5 min, 吸取上清液于 10 ml 离心管中剩余残渣再加入 1 ml 甲醇重复提取, 震荡 2 min, 以 r / min 离心 5 min, 合并上清液于上述离心管中, 重复此步骤一次将含有 3 次提取液的 10 ml 离心管于 40 益下用氮气吹干, 残渣用 1 ml 流动相溶解, 加入 1 ml 正己烷除脂, 震荡 2 min, 以 8000 r / min 离心 3 min, 下层液过 0 郾 22 滋 m 有机相滤头后待测 (2) 肝胰脏皮肌肉组织样品准确称取 1 g 组织放入 50 ml 离心管中, 加入 4 ml 二氯甲烷, 以 r / min 匀浆 30 s, 再用 3 ml 二氯甲烷清洗刀头 30 s, 合并提取液于上述离心管中, 震荡 2 min, 以 8000 r / min 离心 5 min, 吸取全部上清液于 15 ml 离心管中剩余残渣加入 4 ml 二氯甲烷重复提取, 震荡 2 min, 以 8000 r / min 离心 5 min, 合并上清液于上述 15 ml 离心管中, 重复此步骤一次将含有 3 次提取液的 15 ml 离心管于 40 益下用氮气吹干, 残渣用 1 ml 流动相溶解, 加入 1 ml 正己烷除脂, 震荡 2 min, 以 5000 r / min 离心 3 min, 下层液过 0 郾 22 滋 m 有机相滤头后待测 1 郾 2 郾 4 摇色谱条件摇色谱柱为 Waters Spherisorb ODS2-18 柱 (4 郾 6 mm 伊 250 mm, 5 滋 m), 柱温为 30 益 ; 流动相为乙腈颐 1% 乙酸溶液颐 0 郾 4% 乙酸铵溶液 = 20 颐 40 颐 40 ( 体积比 ), 流速为 1 郾 0 ml / min; 进样量为 20 滋 L, 紫外检测波长为 270 nm 1 郾 2 郾 5 摇标准曲线的绘制摇准确移取甲氧苄啶标准储备液, 依次稀释成郾 5 0 郾 1 0 郾 05 滋 g / ml 的标准工作液 ; 准确移取磺胺甲噁唑标准储备液, 依次稀释成郾 5 0 郾 1 0 郾 05 滋 g / ml 的标准工作液过 0 郾 22 滋 m 有机相滤头后通过 HPL-UV 进行测定以峰面积为纵坐标, 质量浓度为横坐标绘制标准曲线, 分别求出回归方程和相关系数 1 郾 2 郾 6 摇回收率和精密度的测定摇每种组织 ( 血浆皮肝胰脏肌肉 ) 的回收率试验均设置 3 个浓度组, 每个浓度组组织中药物的添加水平分别为玉 (1 mg / kg 或 mg / L TMP+5 mg / kg 或 mg / L SMZ) 域 (2 mg / kg 或 mg / L TMP + 10 mg / kg 或 mg / L SMZ ) 芋 ( 10 mg / kg 或 mg / L TMP + 50 mg / kg 或 mg / L SMZ) 取 1 g 空白组织, 各组添加标准液的总体积均为 1 ml, 每种浓度设置 3 个重复, 静置一段时间后, 按照样品前处理的方法处理后进行测定各试验组在同一天内分别测定 3 次, 在一周内不同天测定 3 次, 计算不同浓度下样品的相对标准偏差, 计算日内和日间精密度 1 郾 3 摇数据处理标准曲线药 - 时曲线和消除曲线采用 Mi 鄄 crosoft Excel 软件绘制 ; 药动学模型拟合及参数计算使用 3P97 软件处理 2 摇结果 2 郾 1 摇标准曲线与最低检测限应用本试验建立的检测方法, TMP 和 SMZ 的最低检测限均为 0 郾 01 mg / L 以标准溶液质量浓度

3 620 大连海洋大学学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇第 29 卷为横坐标 x, 以峰面积为纵坐标 y, 绘制标准曲线结果表明 : TMP 和 SMZ 在 0 郾 05 ~ 100 mg / L 范围内线性关系良好, 经计算其相关指数 ( R 2 ) 均为 0 郾 9999, 线性回归方程分别为 y = 0 郾 4218x-0 郾 0069 和 y = 1 郾 0512x-0 郾郾 2 摇回收率与精密度本试验条件下, 在玉域芋 3 个质量浓度添加水平下, TMP 和 SMZ 在各组织中的平均回收率分别为 73% ~ 84% 82% ~ 92% ( 表 1) 测得的日内精密度为 2 郾 27% 依 0 郾 69%, 日间精密度为 4 郾 02% 依 0 郾 77% TMP 在肝胰脏中的药时关系符合一级吸收二室开放模型, 其代谢方程分别为肝 = 45 郾 674e -0 郾 418 t +5 郾 850e -0 郾 061 t -51 郾 524e -1 郾 052 t, = 20 郾 673e -0 郾 076 t +0 郾 352e -0 郾 001 t -21 郾 025e -0 郾 751 t SMZ 在鲤血浆肌肉肝胰脏和中的药时关系均符合一级吸收二室开放模型, 其方程分别为血 = 395 郾 318e -0 郾 520 t +4 郾 618e -0 郾 0 14 t - 摇摇摇摇 399 郾 936e -0 郾 605 t, 肌 = 73 郾 281e -0 郾 320 t +4 郾 298e -0 郾 016 t - 摇摇摇摇 77 郾 579e -0 郾 532 t, 肝 = 98 郾 828e -0 郾 474 t +0 郾 229e -0 郾 019 t - 摇摇摇摇 99 郾 057e -1 郾 197 t, 2 郾 3 摇药时曲线与主要药动学参数 = 21 郾 215e -0 郾 387 t +0 郾 215e -0 郾 033 t - 摇摇摇摇 21 郾 430e -1 郾 540 t TMP 在鲤血浆肌肉中的药时关系符合一级吸收一室开放模型, 其代谢方程分别为血 = 1 郾 656 (e -0 郾 083 t -e -1 郾 318 t ), 肌 = 6 郾 560 (e -0 郾 079 t -e -0 郾 297 t ) 各采样时间点, 不同组织中 TMP 及 SMZ 含量的变化如图 1 所示 TMP 和 SMZ 在松浦镜鲤体内主要药代动力学参数如表 2 所示表 1 摇 TMP 和 SMZ 在不同组织中的平均回收率组织 tissues Tab 郾 1 摇 Recovery of trimethoprim (TMP) and sulfamethoxazole (SMZ) in different tissues % TMP / (mg kg -1 或 mg L -1 ) SMZ / (mg kg -1 或 mg L -1 ) 血浆 plasma 84 郾 30 依 1 郾郾 69 依 1 郾郾 11 依 1 郾郾 95 依 1 郾郾 06 依 2 郾郾 14 依 1 郾 26 肌肉 muscle 76 郾 54 依 2 郾郾 64 依 0 郾郾 26 依 1 郾郾 66 依 1 郾郾 48 依 2 郾郾 22 依 0 郾 78 肝胰脏 hepatopancreas 75 郾 51 依 1 郾郾 89 依 1 郾郾 38 依 1 郾郾 51 依 1 郾郾 38 依 1 郾郾 44 依 1 郾 03 kidney 74 郾 27 依 1 郾郾 15 依 1 郾郾 03 依 1 郾郾 53 依 1 郾郾 51 依 2 郾郾 41 依 1 郾 87 皮 skin 78 郾 66 依 1 郾郾 44 依 2 郾郾 01 依 1 郾郾 08 依 2 郾郾 85 依 1 郾郾 00 依 1 郾 38 2 郾 4 摇残留消除规律各采样时间点, TMP 和 SMZ 在不同组织中的质量浓度见表 3 由表 3 可以看出, 在停止给药 24 h 后, SMZ 在松浦镜鲤体内的残留量仍然维持在较高的水平, 并且高于 TMP 在相应各组织中的残留量随着停药时间的延长, SMZ 在松浦镜鲤体内的消除要快于 TMP, 并于停药后第 8 天开始在各组织中的残留量低于 TMP, 于第 9 天开始低于 0 郾 10 mg / kg 而 TMP 在肌肉和皮中的残留量降到 0 郾 06 mg / kg 后, 消除开始极其缓慢最终, TMP 在各组织中的残留量于停药后第 15 天开始低于 0 郾 05 mg / kg Fig 郾 1 摇图 1 摇松浦镜鲤 4 种组织中 TMP 和 SMZ 浓度与时间的关系曲线 oncentration-time curve of TMP and SMZ in four tissues of Songpu mirror carp yprinus carpio Songpu

4 第 6 期韩冰, 等 : 复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的药动学及残留消除规律 621 表 2 摇 TMP 和 SMZ 在松浦镜鲤体内主要药代动力学参数摇 Tab 郾 2 摇 Pharmacokinetic parameters of TMP and SMZ in Songpu mirror carp yprinus carpio Songpu after oral adminis 鄄 tration 参数 parameters 血浆 plasma 肌肉 muscle TMP 肝胰脏 hepatopancreas kidney 血浆 plasma 肌肉 muscle SMZ 肝胰脏 hepatopancreas kidney 分布相的零时截距 A / (mg L -1 ) 1 郾郾郾郾郾郾郾郾 215 分布速率常数琢 / h -1 0 郾郾郾郾郾郾 387 消除相的零时截距 B / (mg L -1 ) 5 郾郾郾郾郾郾 215 消除速率常数茁 / h -1 0 郾郾郾郾郾郾郾郾 033 药物吸收速率常数 ka / h -1 1 郾郾郾郾郾郾郾郾 540 延滞时间 T L / h 0 郾郾郾郾郾郾郾 156 分布相半衰期 T 1 / 2 琢 / h 1 郾郾郾郾郾郾 790 消除相半衰期 T 1 / 2 茁 / h 8 郾郾郾郾郾郾郾郾 243 吸收相半衰期 T 1 / 2 ka / h 0 郾郾郾郾郾郾郾郾 450 药物自周边室到中央室的一级转运速率 K 21 / h -1 0 郾郾郾郾郾郾 037 药物自中央室的消除速率 K 10 / h -1 0 郾郾郾郾郾郾 339 药物自中央室到周边室的一级转运速率 K 12 / h -1 0 郾郾郾郾郾郾 044 药时曲线下总面积 AU / (mg L -1 h -1 ) 18 郾郾郾郾郾郾郾郾 463 体积内总消除率 L (s) / (L kg -1 h -1 ) 0 郾郾郾郾郾郾 053 达峰时间 T max / h 2 郾郾郾郾郾郾郾郾 199 峰浓度 max / (mg kg -1 ) 或 (mg L -1 ) 1 郾郾郾郾郾郾郾郾 160 表观分布容积 V d / (L kg -1 ) 6 郾郾郾郾郾郾郾郾 107 表 3 摇 TMP 和 SMZ 在松浦镜鲤 3 种组织中的残留浓度摇摇 Tab 郾 3 摇 Residual concentrations of TMP and SMZ in three tissues of Songpu mirror carp yprinus carpio Songpu mg / kg or mg / L 采样时间 / d time 3 摇讨论 TMP 浓度 TMP concentration SMZ 浓度 SMZ concentration 肌肉 muscle 皮 skin 血浆 plasma 肌肉 muscle 皮 skin 血浆 plasma 1 4 郾 121 依 1 郾郾 307 依 2 郾郾 012 依 1 郾郾 554 依 3 郾郾 871 依 12 郾郾 472 依 8 郾郾 466 依 0 郾郾 670 依 0 郾郾 608 依 0 郾郾 575 依 1 郾郾 016 依 1 郾郾 609 依 2 郾郾 231 依 0 郾依 0 郾郾 419 依 0 郾郾 018 依 0 郾郾 069 依 0 郾郾 840 依 0 郾郾 188 依 0 郾郾 593 依 0 郾郾 207 依 0 郾郾 520 依 0 郾郾 518 依 0 郾郾 606 依 0 郾郾 120 依 0 郾郾 276 依 0 郾郾 098 依 0 郾郾 229 依 0 郾郾 272 依 0 郾郾 515 依 0 郾郾 106 依 0 郾郾 271 依 0 郾郾 088 依 0 郾郾 135 依 0 郾郾 076 依 0 郾郾 118 依 0 郾郾 083 依 0 郾郾 195 依 0 郾郾 065 依 0 郾郾 069 依 0 郾郾 201 依 0 郾郾 114 依 0 郾郾 066 依 0 郾郾 176 依 0 郾郾 059 依 0 郾郾 052 依 0 郾郾 154 依 0 郾郾 055 依 0 郾郾 063 依 0 郾郾 131 依 0 郾郾 053 依 0 郾郾 044 依 0 郾郾 055 依 0 郾郾 049 依 0 郾郾 058 依 0 郾郾 082 依 0 郾郾 045 依 0 郾郾 015 依 0 郾郾 041 依 0 郾郾 036 依 0 郾郾 056 依 0 郾郾 060 依 0 郾郾 039 依 0 郾郾 015 依 0 郾郾 022 依 0 郾郾 033 依 0 郾郾 055 依 0 郾郾 058 依 0 郾郾 027 依 0 郾郾 013 依 0 郾郾 023 依 0 郾郾 029 依 0 郾郾 053 依 0 郾郾 056 依 0 郾郾 023 依 0 郾郾 011 依 0 郾郾 023 依 0 郾郾 018 依 0 郾郾 051 依 0 郾郾 049 依 0 郾郾 019 依 0 郾郾 009 依 0 郾郾 020 依 0 郾郾 018 依 0 郾郾 049 依 0 郾郾 040 依 0 郾郾 018 依 0 郾郾 012 依 0 郾郾 013 依 0 郾郾 1 摇复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的药动学特征本试验中, TMP 在血浆肌肉中的药物浓度与时间的关系符合一级吸收一室开放模型, 这与艾 [6] 晓辉等报道 TMP 在草鱼血浆中的药动学模型为二室模型不同 SMZ 在血浆肌肉肝胰脏中的药物浓度与时间的关系均符合一级吸收二室开 [11] 放模型, 这与王群等报道的 SMZ 在鲈血液中 [5] 曲志娜等报道的 SMZ 在大菱鲆肌肉中袁科平 [12] 等报道的 SMZ 在罗非鱼血浆和肌肉中的药动模 [6] 型为一室模型不同, 而与艾晓辉等报道的 SMZ

5 622 大连海洋大学学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇第 29 卷 [5] 在草鱼血浆和肌肉中曲志娜等报道的 SMZ 在 [13] 大菱鲆血液中范克俭报道的 SMZ 在中国明对虾血液中的药动模型为二室模型相同这些模型的差异, 一方面与试验对象的种属差异有关, 另一方面也可能与试验条件有关, 包括给药剂量水温采样时间等由本试验结果可以看出, 给药后 0 郾 25 h 时, 鲤肝胰脏中 TMP 和 SMZ 的含量均明显超过其他组织, 说明两种药物进入松浦镜鲤体内后, 具有明显的首过效应冶而初始几个采样时间点 SMZ 在血浆中的含量也明显高于肌肉和脏组织中, 且 0 郾 25 h 时组织中的药物含量略高于 0 郾 5 h 和 0 郾 75 h, 据此推测, SMZ 从肠道被吸收进入肝胰脏后, 有一部分药物直接经肝胰脏进入血液循环, 因此, 血浆中的药物来源出现了肠道吸收和肝胰脏释放的叠加, 从而造成血浆中 SMZ 含量明显偏高的情况从药 - 时曲线可以看出, SMZ 出现了明显的双峰现象出现双峰乃至多峰现象的机制被认为可能是肠 - 肝循环和胃肠道的多部位吸收 [14], 而肠 - 肝循环又被认为是产生双峰或者多峰现象最有可能的一种机制, 如果存在肠 - 肝循环, 则第二峰的浓度要低于第一峰 [15-16] 本试验中, 松浦镜鲤 4 种组织中 SMZ 在给药后 24 h 出现的第二峰值均小于第一峰值, 这一现象与肠 - 肝循环引起的药 - 时曲线双峰的情况完全相符 T max T 1 / 2 ka ka 是反映药物吸收速率的重要指标, 茁和 T 1 / 2 茁则是反映药物消除速率的重要指标本试验中, 松浦镜鲤口服复方磺胺甲噁唑后, 对比 TMP 在 4 种组织中的 ka T 1 / 2 ka T max 值, 发现 TMP 在肌肉中的吸收速率明显低于其他 3 种组织, 并且达峰浓度 max 也明显低于肝胰脏组织 ; 同时, TMP 在肌肉中的茁值大于肝胰脏组织, T 1 / 2 茁值明显小于肝胰脏和, 由此发现, TMP 在肌肉中的消除速率也较肝胰脏迅速同样, 通过对比以上各参数, 发现 SMZ 在松浦镜鲤肌肉中, 相对于肝胰脏和表现为吸收慢消除慢的特征艾晓 [17] [5] 辉等对 SMZ 在草鱼体内的研究以及曲志娜等对 SMZ 在大菱鲆体内的研究都发现, SMZ 在肌肉中的药动学行为有类似的特点 3 郾 2 摇复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的残留消除规律对于动物源性食品中药物残留的检测, 一般只选取可食性组织, 中国农业行业标准 NY 无公害食品水产品中渔药残留限量中提到的鱼类中药物残留的检测对象为肌肉和皮考虑到肌肉中有血管的分布, 因此, 本研究中选取血浆皮肌肉作为检测对象, 进行复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的残留消除规律研究在 (20 依 0 郾 5) 益水温条件下, 以有效成分 50 mg / kg ( 体质量 ) 的剂量, 每天一次, 连续 5 d 对松浦镜鲤口灌复方磺胺甲噁唑粉混悬液后, TMP 和 SMZ 在停药的前 3 d 均出现了明显的下降趋势在停药后的第一天, SMZ 在血浆皮和肌肉中的残留量均远大于 TMP, 但在停药后第 7 天在肌肉中以及停药后第 8 天在血浆和皮中, SMZ 残留量开始低于 TMP 说明 TMP 在松浦镜鲤体内较 SMZ 消除缓慢, 尤其是到停药第 7 天后, TMP 在肌肉和皮中消除速度极其缓慢, 由此发现, 复方磺胺甲噁唑休药期制定的主要影响因素应该是 TMP 的消除速度 3 郾 3 摇复方磺胺甲噁唑的效果评价与休药期根据新编渔药手册记载, 磺胺类药物对敏感菌的最小抑菌浓度 ( MI) 多为 0 郾 1 ~ 0 郾 5 mg / L [18], 而报道的 SMZ 对水产养殖常见致病菌的 MI 为 0 郾 4 ~ 1 郾 6 mg / L [19] 考虑到 SMZ 在与 TMP 联合使用的情况下抗菌作用更强 [20], 抗菌效果可增加数倍, 因此, 复方磺胺甲噁唑对致病菌的 MI 值理应较 SMZ 低但是, 目前对于复方磺胺甲噁唑对水产常见致病菌的 MI 研究极其缺乏, 仅见 [21] 宋学宏等报道了复方新诺明对 1996 年苏州地区育苗场罗氏沼虾暴发性疾病病原菌的 MI 为 0 郾 5 mg / L 如果以 0 郾 5 mg / L 作为参考值, 复方磺胺甲噁唑以 50 mg / kg ( 体质量 ) 的剂量一次给药后, 其在松浦镜鲤体内血浆肌肉肝胰脏和中 72 h 内的浓度均能起到杀菌和抑菌效果而以 50 mg / kg ( 体质量 ) 剂量每天一次连续 5 d 给药后, 其在松浦镜鲤血浆肌肉和皮中的浓度在停药后 6 d 内可以起到杀菌和抑菌效果在 (20 依 0 郾 5) 益水温条件下, 松浦镜鲤按有效成分 50 mg / kg ( 体质量 ) 的剂量, 每天一次, 连续 5 d 口灌复方磺胺甲噁唑后, 由检测结果可以发现, 各组织中 SMZ 和 TMP 的含量分别于停药后第 9 天和第 15 天开始低于中国规定的磺胺类与增效剂最高残留限量 ( 磺胺类为 100 滋 g / kg, TMP 为 50 滋 g / kg) 因此, 单独对松浦镜鲤使用复方磺胺甲噁唑时, 按 50 mg / kg ( 体质量 ) 的剂量, 每天 1 次, 连续 5 d 口灌复方磺胺甲噁唑后, 其休药期 (WDT) 可定为 15 d

6 第 6 期韩冰, 等 : 复方磺胺甲噁唑在松浦镜鲤体内的药动学及残留消除规律 623 参考文献 : [1] 摇 Samuelsen O B,Lunestad B T,Jelmert A. Pharmacokinetic and ef 鄄 ficacy studies on bath-administering potentiated sulphonamides in Atlantic halibut,hippoglossus hippoglossus L. [ J]. Journal of Fish Diseases,1997,20(4): [2] 摇 Ueno R. Pharmacokinetics and bioavailability of sulfamonomethox 鄄 ine in cultured eel[ J]. Fish Pathology,1998,33(4): [3] 摇 Kleinow K M,Beilfuss W L,Jarboe H H,et al. Pharmacokinetics, bioavailability,distribution,and metabolism of sulfadimethoxine in the rainbow trout ( Oncorhynchus mykiss)[ J]. anadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences,1992,49(5): [4] 摇 Kazuaki U,Takaiko A,Ryuji U. Pharmacokinetics and metabolism of sulfamonomethoxine in rainbow trout ( Oncorhynchus mykiss ) and yellowtail (Seriola quinqueradiata) following bolus intravascu 鄄 lar administration[ J]. Aquaculture,1997,153:1-8. [5] 摇曲志娜, 赵思俊, 王玉东, 等. 磺胺甲噁唑在大菱鲆体内药代动力学及残留消除规律的研究 [J]. 中国兽药杂志,2009,43(2): [6] 摇艾晓辉, 刘长征, 刘义平. 复方新诺明在草鱼体内的药代动力学及消除规律 [J]. 水产学报,2004,28( 增刊 ): [7] 摇 Barnes H,Hastings T S,Amyes S G B. Aquaculture antibacteri 鄄 als are antagonized by seawater cations[ J]. Journal of Fish Disea 鄄 ses,1995,18: [8] 摇 Oppergaard H,S 覬 rum H,Gravningen K. In vitro antimicrobial ac 鄄 tivity of sulfachlorpyridazine and sulfadiazine in combination with trimethoprim against bacterial fish pathogen [ J]. Journal of Fish Diseases,1995,18: [9] 摇 Dixon-Holland D E,Katz S E. ompetitive direct enzyme-linked immunosorbent assay for detection of sulfamethazine residues in swine urine and muscle tissue[ J]. Journal-Association of Official Analytical hemists,1987,71(6): [10] 摇 Ko E,Song H,Park J H. Direct competitive enzyme-linked immu 鄄 nosorbent assay for sulfamethazine[j]. Journal of Veterinary Med 鄄 ical Science,2000,62(10): [11] 摇王群, 孙修涛, 刘德月, 等. 复方新诺明在鲈鱼体内的药物代谢动力学研究 [J]. 海洋科学,2001,25(2): [12] 摇袁科平, 艾晓辉. 磺胺甲噁唑在罗非鱼体内的药代动力学及组织浓度研究 [J]. 水利渔业,2008,28(3): [13] 摇范克俭. 土霉素和新诺明在中国明对虾体内的药代动力学研究 [D]. 青岛 : 中国海洋大学,2005. [14] 摇魏凤环, 王永刚, 罗佳波. 药动学多峰现象研究概况 [ J]. 中国药学杂志,2005,40(23): [15] 摇刘秀红, 王群, 李健. 氯霉素在牙鲆体内的药代动力学及残留消除规律研究 [ J]. 集美大学学报 : 自然科学版,2003,8(4): [16] 摇王慧. 噁喹酸在养殖牙鲆 ( Paralichthys olivaceus) 体内的残留消除规律研究 [D]. 青岛 : 中国海洋大学,2006. [17] 摇艾晓辉, 刘长征, 周运涛. 不同水温和给药方式下磺胺甲噁唑在草鱼体内的药动学研究 [ J]. 水生生物学报,2005,29(2): [18] 摇农业部新编渔药手册编撰委员会. 新编渔药手册 [ M]. 北京 : 中国农业出版社,2005:192. [19] 摇孙玉增, 刘慧慧, 秦华伟, 等. 磺胺甲基异噁唑在大菱鲆体内的代谢动力学研究 [J]. 渔业科学进展,2009,30(6): [20] 摇韩冰, 杨洪波, 王荻, 等. 复方磺胺甲恶唑在鲫组织中高效液相色谱检测法的建立与残留消除规律 [ J]. 食品安全质量检测学报,2014,5(2): [21] 摇宋学宏, 李蒙英, 吴康, 等. 罗氏沼虾幼体暴发性疾病药物防治 [J]. 淡水渔业,1997,27(5): Pharmacokinetics and residues of compound sulfamethoxazole in Songpu mirror carp yprinus carpio Songpu HAN Bing 1,2, YANG Hong-bo 1,2, WANG Di 1, LU Tong-yan 1 (1. Heilongjiang River Fisheries Research Institute, hinese Academy of Fishery Sciences, Harbin , hina; 2. ollege of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai , hina) Abstract: The pharmacokinetics and residues of compound sulfamethoxazole ( trimethoprim 颐 sulfamethoxazole = 1 颐 5) was studied in Songpu mirror carp yprinus carpio Songpu exposed to oral administration at 50 mg / kg body weight by means of HPL. The results showed that the concentrations versus time of trimethoprim ( TMP) in plasma and muscle were well described by one-department open model with first-order absorption. However, the concen 鄄 trations versus time of trimethoprim in hepatopancreas and kidney were well described by two - department open model with first-order absorption after a single oral administration. The concentrations versus time of sulfamethox 鄄 azole( SMZ) in plasma, muscle, hepatopancreas and kidney were well described by a two-department open model with first-order absorption. The residues in Songpu mirror carp by oral administration for 5 d once a day was found to be less than the maximum residue limit (MRL) (0. 05 mg / kg) at the day 15 for TMP and to be less than MRL (0. 10 mg / kg) at the day 9 for SMZ. The findings indicate that the withdrawal time should be 15 d after adminis 鄄 tration in these conditions. Key words: yprinus carpio Songpu; compound sulfamethoxazole; pharmacokinetics; residue

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min 25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.