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1 2016 年 11 月第 23 卷第 11 期中国中医药信息杂志 131 中药调节细胞色素 P450 酶活性的方法学研究概述 周盛会 1,2 2, 汤浩 1. 宁夏医科大学药学院, 宁夏银川 ;2. 甘肃省人民医院药剂科, 甘肃兰州 摘要 : 本文通过检索 PubMed( 美国国家医学图书馆信息检索系统 ) 中国知识资源总库(CNKI) 中国生物医学文献数据库 (CBM) 及中国学术期刊数据库 ( 万方数据 ) 等中外文数据库十几年来有关中药调节药物代谢细胞色素 P450 酶 (CYP450) 的期刊文献, 主要从 CYP450 体内体外研究方法方面进行归纳 整理和分析, 为今后中药调节 CYP450 酶研究提供参考 关键词 : 细胞色素 P450; 检测方法 ; 中药 ; 综述 DOI: /j.issn 中图分类号 :R285.5 文献标识码 :A 文章编号 : (2016) Review of Methodology Study on Regulating Cytochrome P450 Activity by TCM ZHOU Sheng-hui 1,2, TANG Hao 2 (1. College of Pharmacy, Ningxia Medical University, Yinchuan , China; 2. Department of Pharmacy, Gansu Provincial Hospital, Lanzhou , China) Abstract: Through searching literature about cytochrome P450 from PubMed, CNKI, CBM and Wanfang database in the recent 10 years, this article concluded, summarized and analyzed vivo and vitro research methods of cytochrome P450 to provide references for the study on TCM cytochrome P450 enzyme. Key words: cytochrome P450; methodology; TCM; review 随着临床应用和研究的不断深入, 中药有关的不良反应逐渐受到重视 有临床证据显示, 中药与西药合用后可能发生药物之间的相互作用, 包括不良反应, 如银杏与华法令合用后有加重出血的倾向 [1] 贯 [2] 叶连翘与茚地那韦合用降低疗效等 中药与临床药物联合使用时, 因药物代谢而产生的相互作用发生率最高, 与药物体内代谢关系最大的酶是细胞色素 P450 (CYP450) 该酶系可被多种药物诱导或抑制, 且有显著个体差异 因此, 鉴定更多由 CYP450 催化代谢的药物, 研究其基因表达与调控的分子机制, 阐明酶个体差异和种族差异的机理, 能够为临床合理用药提供实验依据, 做到用药剂量个体化, 提高疗效, 减少不良反应 兹从中药成分的 CYP450 研究方法方面综述近年来国内外所报道的研究成果, 为中药有效成分对 CYP450 同工酶活性影响研究提供参考 1 细胞色素 P450 概述 CYP450 又称肝药酶, 在哺乳动物中, 主要分布于肝脏, 在肺 皮肤 肠道也有少量表达 CYP450 基金项目 : 甘肃省技术研究与开发专项计划 (1105TCYA024); 甘肃省卫生行业计划项目 (GSWSKY ) 通讯作者 : 汤浩, gsyy_th@sina.cn 因其蛋白质种类的多样性及其底物的重叠性, 使 CYP450 酶系可以催化多种类型的反应, 不仅对许多外来物质如农药及其他环境有毒物质具有代谢作用, 还参与一些具有重要生理功能的内源性物质如激素 脂肪酸等的代谢, 在生物体中起十分重要的作用 与临床药物代谢密切相关, 常检测的 CYP450 酶亚型有 CYP1A2 2A6 2C 2D6 2E1 和 3A4, 分别约占总 P450 酶代谢药物的比例为 4% 2% 12% 20% 2% 和 55%, 占肝脏总 CYP450 含量的比例分别为 13% 4% 20% 4% 7% 和 30% 2 细胞色素 P450 的研究方法 2.1 体内研究近年来, 随着现代色谱技术如高效液相色谱法 (HPLC) 液相- 质谱联用法 (LC-MS/MS) 及超高效液相色谱法 (UPLC) 的迅猛发展, 鸡尾酒 (Cocktail) 探针药物法已取代了传统探针药物法用于 CYP450 酶活性的测定 Cocktail 探针药物法通过同时使用 2 种及以上特定探针底物而描述药代动力学特征性变化的实验, 以研究药物对 CYP450 酶亚型活性的诱导或抑制作用, 该法可同时检测多种药物代谢酶的活性, 将个体差异的影响降至最低, 还可在单个实验过程获得多个代谢途径的信息, 能真实客观反映药物在体内的代谢特征, 但不足之处在于 CYP450 同工酶具

2 132 Chinese Journal of Information on TCM Nov.2016 Vol.23 No.11 有底物交叉性 Cocktail 探针药物法结合了现代色谱技术, 大大提高了多组分复杂样本中物质检出的有效性 准确性及检测速率, 已成为研究 CYP450 最主要 最常用的体内方法 动物体内研究目前主要采用 Wistar 和 SD [3] 两种品系大鼠进行 CYP450 酶活性的研究 王氏等 建立 SD 大鼠血浆中非那西丁与其代谢物对乙酰氨基酚含量的 HPLC 测定而确证甘草水提液对 CYP1A2 [4] 有明显诱导作用 ;Xiao 等分别用双氯芬酸 咪达唑仑 右美沙芬 氯唑沙宗和奥美拉唑作为探针药物, 结合 LC-MS 研究胡黄连苷对 CYP2C9 3A4 2D6 [5] 2E1 和 2C19 的影响 ;Hu 等用 Cocktail 探针药物法结合 HPLC 测定黄芩对 4 种主要 CYP450 酶活性的影响, 显示黄芩对 CYP1A2 存在抑制作用, 降低其活性, 可能会导致经此酶代谢的其他药物代谢减慢, 血药浓度升高, 作用时间延长 由于种属差异的广泛存在, 直接将动物体内实验数据外推至人体内药物相互作用有时并不准确, 因此, 动物体内实验只可用于初步预测药物间相互作用 人体内研究由于 CYP450 酶的多态性, 药 物作用广泛存在种属和个体差异, 所以, 在动物体内研究基础上, 应在人体内进行药物对 CYP450 活性的 [6] 研究 肖氏等采用 Cocktail 探针药物法结合 LC-MS/MS, 以咪达唑仑作为探针底物, 测定金雀异黄酮在人体内对 CYP3A 活性的影响, 结果金雀异黄酮对体内 CYP3A 酶活性具有显著诱导作用, 并建议临床使用时应注意经 CYP3A 代谢的药物与金雀异黄 [7] 酮合用时可能发生的潜在相互作用 Stewart 等采用 UPLC-MS/MS 与 Cocktail 法联用测定人血浆和尿中 6 种 CYP450 的探针药物和代谢产物浓度, 用于评估 CYP450 表型特征 但该法因受试者的限制而难以广泛开展 2.2 体外研究 体外实验的优点是适合所有由 CYP450 代谢的化学物质的代谢研究, 排除其他因素干扰, 直接观察酶对底物的选择代谢性, 为体内实验提供可靠的依据 近年来, 体外实验的研究方法主要有肝微粒体孵育法 肝细胞培养法 肝脏组织切片法 原位肝脏灌流法 基因重组 P450 酶系及微透析法等, 各体外实验方法优缺点对比见表 1 表 1 体外实验方法优缺点比较 名称优点缺点参考文献 肝微粒体孵育法肝微粒体制备方法简单, 可长时间在低温环境中保存, 制备微粒体设备要求高 [8-17] 代谢速度快, 实验时间短, 重现性好, 便于大量操作, 代谢条件易控制, 代谢物样品便于积累可供进一步研究 肝细胞培养法原代肝细胞培养能为药物代谢的研究提供最接近体内情况的体外环境, 具有较好的体外实验重现性, 既能保持与体内一致的 CYP450 酶水平, 又维持着肝脏的代谢功能, 实验数据可靠, 可为临床合理用药提供科学依据 因存在个体差异, 肝细胞标本来源较少, 无法普及 于科研及临床 [8,10,12,18-20] 肝癌细胞培养肝癌细胞系繁殖速度加快, 易于培养主要用于研究病理状态下中药有效成分对 CYP450 [21-25] 的影响 Chang Liver 细胞培养细胞培养方便, 条件稳定, 且对人体细胞内环境的符合 主要用于病毒学 生化和恶性肿瘤相关的转移研究 [26-27] 肝脏切片法 程度介于原代肝细胞与肿瘤细胞之间 采用组织切片机将肝脏切成厚度一致的切片, 将对细胞 的创伤降至最低 对药物的摄取及代谢率均较低, 且需要长期培养 [28] 原位肝脏灌流法 适用于药动学 代谢性药物相互作用 肝提取率 首过 对代谢研究的范围仅限于肝脏, 无法避免受肝门静 [29-32] 效应 药物对肝脏的作用等多方面的研究 脉和动脉血流 神经和激素等内源性物质对肝脏代 谢的影响 重组人 CYP450 酶法 可排除物种间的差异, 快速大量筛选抑制剂, 常用于药 物开发早期的代谢筛选 需要建立大量模拟人体的 CYP450 亚型重组蛋白 [15-16,33-35] 微透析法组织损伤小, 取样少, 可定量分析, 可连续监测只能用于小分子药物, 且实验中涉及外科手术以及 [31,36] 繁琐的微透析系统, 较少用于肝药酶代谢研究

3 2016 年 11 月第 23 卷第 11 期中国中医药信息杂志 肝微粒体孵育法微粒体是指在细胞匀浆和差速离心过程中获得的由破碎内质网自我融合形成近似球形的膜囊泡状结构, 直径大约 100 nm, 是异质性的集合体 肝 ( 或其他组织 ) 微粒体体外温孵实验是采用从肝脏 ( 或其他组织 ) 提取的微粒体, 加入还原型辅酶 Ⅱ(NADPH) 再生系统, 在体外模拟生理环境进行代谢反应, 采用 HPLC HPLC-MS 等测定方法对原型药及代谢产物进行测定的一种体外代谢实验方法 有研究将人肝微粒体 各 CYP450 同工酶底物 (2A6- 香豆素 2C9- 双氯芬酸 3A4- 睾酮 ) 及不同浓度的花青素加入 NADPH 再生系统共同孵育, 采用 HPLC 测定各同工酶底物相应的羟基代谢产物, 通过计算 Vmax 和 KM 值确定酶的活性, 结果显示花青素可抑制 CYP2A6 2C9 3A4 活性 [8] 基于以上特点, 肝微粒体孵育法广泛应用于体外药物代谢转化研究中 见表 2 表 2 肝微粒体法研究中药有效成分对 CYP450 同工酶活性的影响 中药有效成分微粒体来源 代谢酶 探针药物 活性影响参考文献 刺五加苷 B 大鼠肝脏 CYP2C9 甲苯磺丁脲 [9] 刺五加苷 E CYP2D6 右美沙芬 穿心莲内酯 大鼠肝脏 CYP2C 甲苯磺丁脲 [10] 黄芩苷 大鼠肝脏 CYP2D 右美沙芬 [11] CYP3A 右美沙芬 龙胆苦苷 人肝脏 CYP1A2 非那西汀 [12] CYP2A6 香豆素 CYP2E1 氯唑沙宗 CYP3A4 睾酮 厚朴酚 人肝脏 CYP1A2 非那西汀 [13] CYP2C8 阿莫地喹 CYP2C9 双氯芬酸 CYP2C19 美芬妥因 马钱子碱 人肝脏 CYP3A4 咪达唑仑 [14] 黄连素 人肝脏 CYP2C9 甲苯磺丁脲 [15] CYP2C19 美芬妥因 CYP3A4 睾酮 黄酮 / 黄酮醇 人肝脏 CYP2C9 双氯芬酸 [16] 花青素 人肝脏 CYP3A4 睾酮 [8] CYP2C9 双氯芬酸 CYP2A6 香豆素 甘草次酸 人肝脏 CYP2C9 双氯芬酸 [17] CYP2C19 美芬妥因 CYP3A4 睾酮 注 : 表示活性影响为诱导, 表示活性影响为抑制 肝细胞培养法肝细胞培养法主要提供细胞水平上吸收 分布 代谢和排泄的综合信息, 为代谢性药物相互作用 临床合理用药 毒理学等方面提供有效的分析手段和理想的体外模型 常用的肝细胞模 型有原代肝细胞培养 肝癌细胞培养及 Chang Liver 细胞培养 见表 3 表 3 肝细胞培养法研究中药有效成分对 CYP450 同工酶活性的影响 中药有效成分 细胞系种类 代谢酶 活性影响参考文献 龙胆苦苷 人原代肝细胞 CYP1A2 [12] CYP2A6 CYP2E1 CYP3A4 花青素 人原代肝细胞 CYP2B6 [8] CYP2C9 CYP2A6 CYP3A4 水飞薊素 人原代肝细胞 CYP1A2 [18] CYP2B6 CYP2E1 CYP3A4 穿心莲内酯 人原代肝细胞 CYP1A2 [10] CYP2C9 穿心莲内酯 大鼠原代肝细胞 CYP1A2 [10] CYP2C11 CYP3A1 穿心莲内酯 小鼠原代肝细胞 CYP1A1/2 [19] CYP1B1 莴苣苦素 猪原代肝细胞 CYP1A2 [20] CYP2A19 CYP2C33 CYP2D25 CYP3A29 人参皂苷 HepG2 CYP1A1/2 [21] CYP3A4 桂叶山牵牛 HepG2 CYP1A1/2 [22] CYP2B6 CYP3A7 CYP2D6 CYP2E1 丹参酮 HepG2 CYP1A1/2 [37] 阿魏酸 / 异阿魏酸 HepG2 CYP1A1 [23] 银杏内酯 B HepG2 CYP3A4 [24] 补骨脂素 / 异补骨脂素 HepG2 CYP1A1 [25] 黄芩苷 Chang Liver CYP2C9 [27] CYP2C19 CYP3A4 槲皮素 Chang Liver [26] CYP2C9 注 : 表示活性影响为诱导, 表示活性影响为抑制, 无箭头表示无 明显作用

4 134 Chinese Journal of Information on TCM Nov.2016 Vol.23 No 原代肝细胞培养法原代肝细胞能够为药物代谢研究提供最接近体内情况的体外环境, 但因肝细胞来源少 标本的异源性 培养条件的异源性等原 [10] 因, 限制了其应用 Dumrongsak 等采用两步胶原酶灌注法制得人和大鼠肝细胞进行培养, 将培养的肝细胞与穿心莲内酯共同培养 3 d, 提取肝细胞中蛋白和 RNA, 结合分子生物学方法检测穿心莲内酯对人和大鼠肝细胞中蛋白及 mrna 影响, 结果显示穿心莲内酯显著降低 CYP2C9 和 3A4 蛋白及 mrna 表达 (P<0.05), 说明穿心莲内酯通过调节 2C9 和 3A4 mrna 的表达发生药物 - 药物间相互作用 随着原代肝细胞培养技术水平的不断提高, 该技术已广泛用于有关 P450 酶方面的研究 肝癌细胞培养法 HepG2 Hep 3b 等细胞株由于是肿瘤来源细胞, 生物学形态发生了显著改变, 繁殖速度加快, 易于培养, 故常用肝癌细胞株代替原代肝细胞作为体外诱导模型, 结合分子生物学技术如 PCR Western blot 和免疫组化检测 CYP450 mrna 及蛋白的表达 有学者培养 HepG2 细胞研究丹参酮对 CYP1A2 活性的影响, 通过 RT-PCR 和 Western blot 检测其 mrna 和蛋白表达,mRNA 和蛋白水平均上调, 表明丹参酮对 CYP1A2 有诱导作用 [37] Chang Liver 细胞培养法 Chang Liver, 即人张氏肝细胞,1954 年从非恶性瘤的人体组织中建立, 广泛用于病毒学 生化和恶性肿瘤相关的转移研究, 该细胞上皮细胞样, 贴壁生长, 对人体细胞内环境与人体内环境的符合程度介于原代肝细胞与肿瘤 [26] 细胞之间, 培养方便, 条件稳定 袁氏等研究银杏叶提取物及其黄酮类单体成分对 Chang Liver 细胞中 CYP3A4 和 CYP2C9 活性影响, 发现银杏叶提取物和槲皮素诱导 Chang Liver 细胞中 CYP3A4 mrna 及蛋白的表达, 槲皮素抑制了该细胞中 CYP2C9 mrna 和蛋白表达, 而银杏叶提取物对 CYP2C9 mrna 和蛋白表达没有影响 这些结果为银杏叶提取物与其他药物相互作用提供了理论基础, 有助于提高联合用药的有效性和安全性 肝脏切片法肝脏切片作为体外模型应用于中药有效成分对 CYP450 诱导作用的研究已有多年 有学者采用组织切片机将琼脂糖包埋的肝脏样本切成厚度一致 ( 直径为 8 mm) 切片进行培养, 结合分子生物学方法从 mrna 角度探究 β- 萘黄酮对 CYP1A2 2B1 3A1 mrna 的诱导作用, 结果 β- 萘黄酮显著诱导 CYP1A2 2B1 的 mrna 表达 [28] 该 法将对细胞的创伤降至最低, 但对药物的摄取及代谢率也较低, 且需长期培养, 因而限制其作为筛选药物模型的应用, 如能克服这些缺点, 将会得到更广泛的应用 原位肝脏灌流法原位肝脏灌流是模拟体内药物代谢的一种有效模型, 在动物躯体内 肝脏的原位上进行插管手术及灌注, 适用于药动学 代谢性药物相互作用 肝提取率 首过效应 药物对肝脏的作 [29] 用等多方面的研究 Dostalek 等将大鼠麻醉后在门静脉插入玻璃套管, 预灌注 20 min 后加入含有相应底物 (CYP2C9- 甲苯磺丁脲 CYP3A4- 咪达唑仑 CYP2D6- 右美沙芬 ) 的灌流液, 以 25 ml/min 流速分别在 mim 取灌流液, 结合 HPLC 检测底物代谢物的产量, 从恒定的灌流压和灌流速率 灌流液的 ph 值 耗氧量 肝重及肉眼观察等方面监测肝活性 由于该方法对代谢研究的范围仅限于肝脏, 无法避免受肝门静脉和动脉血流 神经和激素等内源性物质对肝脏代谢的影响, 相对于肝微粒体孵育法和肝细胞培养法, 较少用于肝药酶代谢的研究 重组人细胞色素 P450 酶法体外重组技术是近年发展起来的一项实验技术, 随着分子生物学和重组技术的快速发展,CYP450 的体外重组研究也取得了较快进展 该法需要建立大量模拟人体的 CYP450 亚型重组蛋白, 通过一些结构修饰来真正模拟人体代谢过程, 例如修饰后在大肠杆菌表达的 CYP450 蛋白 [15] 酶, 能很好用于结构分析 Li 等为探究参与黄连素一相代谢的主要 CYP450 亚型酶, 利用重组人 CYP450 酶, 选取野生型棒状杆菌的昆虫细胞作为表达系统进行黄连素代谢物结构分析, 结果显示,CYP2D6 CYP1A2 CYP3A4 是将黄连素转化成代谢物唐松草分定和去亚甲基小檗碱的主要亚型酶 目前该法常用于结构研究所需要的 CYP450 表达系统有大肠杆菌和昆虫细胞 [30] 微透析法微透析法是一种在生物活体内进行微量化学采样与检测的方法, 可按一定时间间隔连续收集透析液, 不经预处理便可直接检测透析液中待 [31] 测生物活性物质水平 Chang 等为研究水飞蓟素和曲唑酮联合用药可能发生的相互作用, 采用微透析技术结合 HPLC, 利用 PE 管给 SD 大鼠股静脉插管给予曲唑酮, 监测血浆中曲唑酮浓度 结果显示, 水飞蓟素在正常剂量下对曲唑酮的药动学参数无显著影响, 提示其与曲唑酮合用相对安全 3 展望 临床上常发生由 CYP450 酶活性变化引起的药物

5 2016 年 11 月第 23 卷第 11 期中国中医药信息杂志 135 不良反应,P450 酶系被诱导或抑制, 导致药物本身或联用药物疗效降低或毒性增加, 影响了药物的治疗作用 在体动物实验能够真实客观反映药物在体内的代谢特征, 但因种属和个体差异的存在, 体内实验数据无法完全反映药物在人体内的代谢情况及药物相互作用, 因此, 建立体外预测方法也十分有必要 体外实验排除了其他因素的干扰, 能够直接观察药物对酶活性的影响, 可为进一步设计在体实验提供指导 但因体内体外相关性不强, 体外实验数据预测体内药物相互作用依然面临挑战 所以, 体内与体外实验结合研究药物对 CYP450 酶活性的影响, 预测药物之间相互作用, 指导临床合理用药, 具有十分重要的意义 在上述体内体外实验方法的基础上优化建立新方法十分重要 近年来也研制出了硅片模型 [38] 干细 [39] 胞模型等新的检测方法, 待其完善成熟之后, 将有力推动中药在药物代谢方面的研究 参考文献 : [1] EMST E. Possible interactions between synthetic and herbal medicinal products. Part 1 : a systematic review of indirect evidence[j]. Perfusion,2000,13:4-15. [2] PISCITELLI S C, BURSTEIN A H, CHAITT D, et al. Indinavir concentrations and St John's wort[j]. Lancet,2000, 355: [3] 王新敏, 彭蕴茹, 景欣悦, 等.HPLC 法测定大鼠血浆 微粒体中非那西丁 与其代谢物含量及其应用 [J]. 中国药理学通报,2013,29(4): [4] XIAO Y J, JIANG Z Z, YAO J C, et al. Investigation of picroside's impacts on the P450 activities using a cocktail method[j]. Chin J Nat Med,2008,6(4): [5] HU Z S, WANG Z, ZHANG Y, et al. Simultaneous evaluation of the influence of Scutellaria baicalensis Georgi on CYP450 by Cocktail probe drugs[j]. Chin Hosp Pharm J,2010,30(2): [6] 肖昌琼, 周宏灏. 金雀异黄酮在体内对 CYP3A 活性的影响 [J]. 中国临床 药理学治疗学,2011,16(6): [7] STEWART N A, BUCH S C, CONRADS T P, et al. A UPLC-MS/MS assay of the cocktail :six CYP probe-drug/metabolites from human plasma and urine using stable isotope dilution[j]. Analyst,2011, 136(3): [8] SROVNALOVA A, SVECAROVA M, MICHAELA K Z, et al. Effects of anthocyanidins and anthocyanins on the expression and catalytic activities of CYP2A6, CYP2B6, CYP2C9, and CYP3A4 in primary human hepatocytes and human liver microsomes[j]. Journal of Agriculiural and Food Chemistry,2014,62: [9] GUO X Y, LIU Y, LIN Z P, et al. Effects of Eleutheroside B and Eleutheroside E on activity of cytochrome P450 in rat liver microsomes[j]. BMC Complementary & Alternative Medicine,2014,14: 1-7. [10] DUMRONGSAK P, NADEGE B, CATHERINE A, et al. Effects of Andrographis paniculata extract and Andrographolide on hepatic cytochrome P450 mrna expression and monooxygenase activities after in vivo administration to rats and in vitro in rat and human hepatocyte cultures[j]. Chemico-Biological Interactions,2009, 179: [11] TIAN X, CHENG Z Y, HE J, et al. Concentration-dependent inhibitory effects of baicalin on the metabolism of dextromethorphan, a dual probe of CYP2D and CYP3A, in rats[j]. Chemico-Biological Interactions,2013,203: [12] YATING D, WANG L, YANG Y, et al. In vitro inhibition and induction of human liver cytochrome P450 enzymes by gentiopicroside : potent Effect on CYP2A6[J]. Drug Metab Pharmacokinet,2013,28(4): [13] JEONG H U, KONG T Y, KWON S S, et al. Effect of honokiol on cytochrome P450 and UDP-glucuronosyltransferase enzyme activities in human liver microsomes[j]. Molecules,2013,18: [14] LI X, WANG K, WEI W, et al. In vitro metabolism of brucine by huamn liver microsomes and its interactions with CYP substrates[j]. Chemico-Biological Interactions,2013,204: [15] LI Y, REN G, WANG Y X, et al. Bioactivities of berberine metabolites after transformation through CYP450 isoenzymes[j]. Journal of Translational Medicine,2011,9: [16] SI D Y, WANG Y, ZHOU Y H, et al. Mechanism of CYP2C9 inhibition by flavones and flavonols[j]. Drug Metabolism and Disposition, 2009,37(3): [17] LI L, JUAN X, HONG P Z, et al. In vitro metabolism of glycyrrhetic acid by human cytochome P450[J]. Acta Pharmaceutica Sinica,2011,46(1): [18] DOEHMER J, GABRIELE W, GERARD P M, et al. Assessment of a dry extract from milk thistle (Silybum marianum) for interference with human liver cytochrome-p450 activities[j]. Toxicology in Vitro,2011,25: [19] JARUCHOTIKAMOL A, JARUKAMJORN K, SIRISANGTRAKUL W, et al. Strong synergistic induction of CYP1A1 expression by andrographolide plus typical CYP1A inducers in mouse hepatocytes[j]. Toxicology and Applied Pharmacology,2007,224: [20] MARTIN K R, CHRISTINA L K, BO E. Regulation of cytochrome P450 mrna expression in primary porcine hepatocytes by selected

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