中 草 药 = = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷 = 第 NQ 期 =OMNS 年 T 月 OQUP 以 同 时 评 价 几 种 药 物 代 谢 酶 的 活 性, 即 给 予 多 种 相 对 低 剂 量 的 探 针 药 物, 通 过 检
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- 纱被 缪
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1 OQUO 中 草 药 = = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷 = 第 NQ 期 =OMNS 年 T 月 参 麦 注 射 液 对 大 鼠 细 胞 色 素 mqrm 酶 亚 型 活 性 的 影 响 张 国 勇 1, 王 双 虎 2, 张 青 莲 1, 周 云 芳 1. 丽 水 市 人 民 医 院 药 剂 科, 浙 江 丽 水 丽 水 市 人 民 医 院 临 床 药 学 实 验 室, 浙 江 丽 水 323 2* 摘 要 : 目 的 用 Cocktail 探 针 药 物 法 研 究 参 麦 注 射 液 对 大 鼠 细 胞 色 素 P45 酶 (CYP45)6 种 亚 型 活 性 的 影 响 方 法 将 SD 大 鼠 随 机 分 组, 实 验 组 ip 给 予 参 麦 注 射 液 (1 ml/kg), 对 照 组 ip 给 予 等 量 生 理 盐 水, 诱 导 7 d, 分 别 以 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 作 为 CYP1A2 CYP2B1 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 和 CYP3A4 的 探 针 药 物 UPLC-MS/MS 法 检 测 大 鼠 血 浆 中 探 针 药 物 的 血 药 浓 度, 采 用 DAS3. 软 件 估 算 药 动 学 参 数 结 果 与 对 照 组 相 比, 非 那 西 丁 安 非 他 酮 和 奥 美 拉 唑 的 AUC ~ CL 和 C max 显 著 降 低 (P<.5), 甲 苯 磺 丁 脲 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 的 AUC ~ CL 和 C max 无 显 著 性 差 异 结 论 参 麦 注 射 液 对 大 鼠 CYP1A2 CYP2B1 和 CYP2C19 亚 型 的 活 性 有 明 显 的 抑 制 作 用, 而 对 CYP2C9 CYP2D6 和 CYP3A4 亚 型 的 活 性 无 显 著 性 影 响 关 键 词 : 参 麦 注 射 液 ; 细 胞 色 素 P45;Cocktail 探 针 药 物 法 ;UPLC-MS/MS 法 ;CYP1A2;CYP2B1;CYP2C9;CYP2C19; CYP2D6;CYP3A4 中 图 分 类 号 :R285.5 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : (216) alf: 1.751/j.issn bffect of phenmai fniection on isoforms of cytochrome mqrm enzymes in rats= ZHANG Guo-yong 1, WANG Shuang-hu 2, ZHANG Qing-lian 1, ZHOU Yun-fang 2 1. Department of Pharmacy, The People s Hospital of Lishui, Lishui 323, China 2. Laboratory of Clinical Pharmacy, The People's Hospital of Lishui, Lishui 323, China Abstract: lbjective To investigate the effects of Shenmai Injection (SMI) on activities of six isoforms of cytochrome P45 (CYP45) by Cocktail probe drugs in rats. jethods SD rats were randomly divided into SM group and blank control group, which were given SMI (1 ml/kg) or normal saline for 7 d. Phenacetin, bupropion, tolbutamide, omeprazole, metoprolol, and midazolam were used as probe drugs for CYP1A2, CYP2B1, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, and CYP3A4. The UPLC-MS/MS method was used to determine the concentration of probe drugs in rat plasma, and the pharmacokinetic parameters were estimated by DAS3.. oesults Compared with the blank control group, AUC ~, CL, and C max of phenacetin, bupropion, and omeprazole were significantly decreased (P <.5). However, no significant difference of plasma concentration and pharmacokinetics for tolbutamide, metoprolol, and midazolam was shown between SMI group and the blank control group. Conclusion SMI can inhibit CYPlA2, CYP2B1, and CYP2C19 activities significantly, but has no effect on the activities of CYP2C9, CYP2D6, and CYP3A4. hey words: Shenmai Injection; cytochrome P45; Cocktail probe drugs; UPLC-MS/MS; CYP1A2; CYP2B1; CYP2C9; CYP2C19; CYP2D6; CYP3A4 参 麦 注 射 液 是 由 等 量 的 人 参 和 麦 冬 提 纯 后 混 合 制 成 的 中 药 注 射 液, 其 有 效 成 分 主 要 有 人 参 皂 苷 麦 冬 黄 酮 麦 冬 皂 苷 及 微 量 人 参 多 糖 等 [1], 具 有 益 气 固 脱 养 阴 生 津 生 脉 的 功 效 临 床 用 于 治 疗 冠 状 动 脉 粥 样 硬 化 病 毒 性 心 肌 炎 心 力 衰 竭 房 颤 肺 心 病 粒 细 胞 减 少 等 症 [2-4] 细 胞 色 素 P45 (CYP45) 酶 系 是 参 与 各 种 体 内 药 物 代 谢 的 重 要 组 成 部 分 该 酶 可 被 药 物 等 外 源 物 诱 导 或 抑 制, 导 致 其 水 平 和 活 性 的 改 变, 从 而 直 接 影 响 药 物 在 体 内 的 血 药 浓 度 动 力 学 变 化 以 及 后 续 生 物 学 效 应 CYP45 酶 检 测 主 要 有 体 内 和 体 外 2 种 方 法 Cocktail 探 针 药 物 法 是 最 常 用 的 体 内 检 测 法, 它 可 ======================================== 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 浙 江 省 中 西 医 结 合 学 会 临 床 药 学 科 研 基 金 ( 康 恩 贝 专 项,214LYK7) 作 者 简 介 : 张 国 勇 (1976 ), 男, 副 主 任 药 师, 主 要 从 事 医 院 药 学 工 作 Tel: (578) * 通 信 作 者 周 云 芳 (1969 ), 男, 主 任 药 师, 主 要 从 事 临 床 药 理 学 和 药 物 代 谢 组 学 研 究 Tel: (578) zyf288@126.com
2 中 草 药 = = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷 = 第 NQ 期 =OMNS 年 T 月 OQUP 以 同 时 评 价 几 种 药 物 代 谢 酶 的 活 性, 即 给 予 多 种 相 对 低 剂 量 的 探 针 药 物, 通 过 检 测 生 物 样 本 中 每 种 探 针 药 物 的 血 浆 动 力 学 从 而 获 取 多 个 代 谢 酶 的 活 性 信 息 [5-6] 在 临 床 应 用 中, 参 麦 注 射 液 常 与 其 他 药 物 联 合 应 用, 有 发 生 药 物 相 互 作 用 的 可 能, 并 由 此 改 变 相 关 药 物 的 血 药 浓 度, 甚 至 引 起 不 良 反 应 的 发 生 此 前 关 于 参 麦 注 射 液 对 药 物 代 谢 酶 影 响 的 研 究 相 对 较 少 [7], 缺 乏 该 注 射 液 对 药 物 代 谢 酶 影 响 的 基 础 数 据 目 前 大 多 是 采 用 紫 外 分 光 光 度 计 高 效 液 相 色 谱 紫 外 法 (HPLC-UV) 和 高 效 液 相 色 谱 荧 光 法 (HPLC-FID) 检 测 探 针 药 物 浓 度, 但 是 受 限 制 于 检 测 限 和 分 离 程 度, 尤 其 是 检 测 限 的 影 响 [8-9] 高 效 液 相 联 用 质 谱 法 (HPLC-MS/MS) 也 用 于 Cocktail 探 针 血 药 浓 度 的 检 测, 检 测 器 离 子 源 主 要 有 APCI 源 和 ESI 源 [1-14] 本 研 究 通 过 超 高 效 液 相 串 联 三 重 四 级 杆 质 谱 法 (UPLC-MS/MS) 快 速 高 效 和 稳 定 地 检 测 大 鼠 血 浆 中 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 的 血 药 浓 度, 分 别 以 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 作 为 CYP1A2 CYP2B1 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 和 CYP3A4 的 探 针 药 物, 研 究 参 麦 注 射 液 对 药 物 代 谢 酶 亚 型 的 影 响, 为 临 床 合 理 用 药 提 供 依 据 N 材 料 NKN 仪 器 ACQUITY I-Class 超 高 效 液 相 色 谱 仪 sample manager FTN 自 动 进 样 器 binary solvent manager 四 元 泵 Masslynx 4.1 色 谱 工 作 站 和 XEVO TQD 三 重 四 级 杆 质 谱 仪 ( 美 国 Waters 公 司 );Milli-Q 纯 水 机 ( 美 国 Millipore 公 司 );584R 低 温 高 速 离 心 机 ( 德 国 Eppendorf 公 司 );TE411-L 电 子 天 平 ( 北 京 赛 多 利 斯 仪 器 系 统 有 限 公 司 );HH-S2 水 浴 锅 ( 北 京 诺 基 公 司 ) NKO 试 药 参 麦 注 射 液 ( 正 大 青 春 宝 药 业 有 限 公 司, 批 号 BJ1374), 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 对 照 品 ( 加 拿 大 Toronto Research Chemicals 公 司, 质 量 分 数 98%, 批 号 分 别 为 P1669 B O359 D ); 地 西 泮 ( 美 国 Sigma 公 司, 质 量 分 数 99%, 批 号 );HPLC 色 谱 级 甲 醇 乙 腈 ( 美 国 Fisher Scientific 公 司 ); 其 余 常 规 化 学 试 剂 均 为 分 析 纯 ( 北 京 化 学 试 剂 公 司 ) NKP 动 物 清 洁 级 SD 大 鼠, 体 质 量 (3±2)g, 由 温 州 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心 提 供, 实 验 动 物 使 用 许 可 证 号 SYXK( 浙 )21-15 O 方 法 与 结 果 OKN== 分 组 及 给 药 = 将 SD 大 鼠 随 机 分 成 2 组, 每 组 6 只, 分 别 为 参 麦 注 射 液 组 和 对 照 组, 参 麦 注 射 液 组 大 鼠 ip 参 麦 注 射 液 1 ml/kg, 对 照 组 大 鼠 ip 同 体 积 的 生 理 盐 水, 连 续 给 药 7 d, 于 第 7 天 晚 禁 食 第 8 天 2 组 大 鼠 均 ig 给 予 6 种 探 针 药 物 的 混 合 对 照 品 溶 液 ( 安 非 他 酮 非 那 西 丁 甲 苯 磺 丁 脲 美 托 洛 尔 咪 达 唑 仑 和 奥 美 拉 唑 的 剂 量 分 别 为 mg/kg), 并 分 别 于 ig 给 药 后 5 3 min 及 h 时 间 点 进 行 尾 部 采 血.3 ml, 将 全 血 置 于 肝 素 化 的 EP 管 中,3 r/min 离 心 1 min, 取 血 浆 于 2 冷 冻 保 存 OKO 血 浆 处 理 方 法 取 血 浆 样 品 1 μl, 加 入 2 μl 地 西 泮 ( 内 标, 2 ng/μl), 再 加 入 2 μl 冰 乙 腈 沉 淀 并 涡 旋 2 min, 将 样 品 在 4 下 13 r/min 离 心 1 min, 转 移 2 μl 上 清 液 至 新 的 进 样 瓶, 并 取 2 μl 上 样 检 测 OKP rmic 条 件 色 谱 柱 为 Acquity UPLC BEH C 18 柱 (1 mm 2.1 mm,1.7 μm); 流 动 相 为 乙 腈 (A)- 水 ( 含.1% 甲 酸,B), 梯 度 洗 脱 ( 表 1), 体 积 流 量 为.4 ml/min, 柱 温 4, 进 样 量 为 2 μl, 内 标 为 地 西 泮 表 N rmic 梯 度 洗 脱 程 序 qable N dradient elution=of=rmic= t/min A/% B/% OKQ 质 谱 条 件 质 谱 条 件 电 喷 雾 离 子 化 源 (ESI), 正 离 子 检 测 模 式 扫 描 范 围 m/z 1~1 5 毛 细 管 电 压 2.5 kv, 锥 孔 电 压 15 V, 离 子 源 温 度 15, 脱 溶 剂 气 温 度 5, 锥 孔 气 流 量 5 L/h, 脱 溶 剂 气 流 量 1 L/h, 氩 气 流 量.15 ml/min Masslynx V4.1 软 件 是 用 来 操 作 仪 器 和 获 得 数 据 的, 质 谱 多 反 应 监 测 (MRM) 的 信 息 见 表 2
3 中草药= = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷= 第 NQ 期= OMNS 年 T 月 OQUQ 表O joj 信息 qable O fnformation sheet of joj= OKR 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 驻留时间/s 锥孔电压/V 碰撞电压/V 非那西丁 安非他酮 奥美拉唑 美托洛尔 甲苯磺丁脲 地西泮 咪达唑仑 OKT 对照品溶液的配制 标准曲线的绘制 分别精密吸取空白血浆 1 μl 置于 1.5 ml 离 分别精密称取非那西丁 安非他酮 甲苯磺丁脲 奥美拉唑 美托洛尔和咪达唑仑对照品 1 mg 置于 心管中 加入质量浓度分别为 ml 量瓶中 加.5 ml 乙腈溶解 并以 Milli-Q 纯 μg/ml 非那西丁 安非他酮 化水稀释至刻度 即得质量浓度为 1 mg/ml 的非那 甲苯磺丁脲 奥美拉唑 美托洛尔和咪达唑仑对照 西丁 安非他酮 甲苯磺丁脲 奥美拉唑 美托洛尔 品稀释液 1 μl 混匀 配制质量浓度分别为 2 5 和咪达唑仑对照品储备液 精密称取地西泮对照品 ng/ml 用甲醇溶解并稀释 得到 1 μg/ml 的内标溶液 的系列探针药物血浆溶液 并按照 2.2 项方法处 OKS 系统适应性及专属性考察 理 在 2.3 和 2.4 项色谱和质谱条件下测定 取空白血浆 各探针药物对照品溶液及给混合 记录峰面积 以探针药物和地西泮 内标 的峰面 探针药物 1 h 的血浆样品各 2 μl 按照 2.3 项和 积比值为纵坐标 Y 相应的探针药质量浓度为横 2.4 项条件进样测定 结果非那西丁 安非他酮 坐标 X 用最小二乘法进行线性回归 求算探针 甲苯磺丁脲 奥美拉唑 美托洛尔和咪达唑仑的保 药物在 2 2 ng/ml 或 2 2 ng/ml 内线性关系 留时间分别为 良好 回归方程和最低定量限见表 3 平行制备分别 min 地西泮的保留时间为 2.52 min 相互之间分离 含 2 ng/ml 探针药的 6 份血浆样品 处理后进行色 良好并在相应的离子通道中 相互之间没有干扰 谱分析 得探针药方法回收率平均为 17.33% RSD 提取离子流图及总离子流图见图 1 为 5.39% 药物最低定量限回收率 RSD 均 15% 空白血浆 血浆样品 1.16 对照品 1.16 A B t/min A-奥美拉唑 B-咪达唑仑 C-地西泮 D-甲苯磺丁脲 F E D C G H 2.75 E-美托洛尔 F-安非他酮 G-非那西丁 H-总离子流图 A-omeprazole B-midazolam C-diazepam D-tolbutamide E-metoprolol F-bupropion G-phenacetin H-TIC 图N 空白血浆 探针药物对照品溶液及给探针药物 N=h 大鼠血浆样品的离子流图 cigk N qfc of blank=plasmai=reference=substancei=and=plasma=sample=of=rats=administrated=with=probe=drugs=for=n=h= =
4 中 草 药 = = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷 = 第 NQ 期 =OMNS 年 T 月 OQUR 表 P S 种 探 针 药 物 的 回 归 方 程 和 相 关 系 数 qable P oegression equations=and correlation coefficients for six probe drugs= 探 针 药 物 回 归 方 程 相 关 系 数 线 性 范 围 /(ng ml 1 ) 最 低 定 量 限 /(ng ml 1 ) 安 非 他 酮 Y= X ~2.5 美 托 洛 尔 Y= X ~2.5 咪 达 唑 仑 Y= X ~2.5 非 那 西 丁 Y= X ~2.5 奥 美 拉 唑 Y= X ~2.5 甲 苯 磺 丁 脲 Y= X ~2.5 = OKU 精 密 度 和 准 确 度 考 察 配 制 质 量 浓 度 为 ng/ml 的 安 非 他 酮 丁 脲 血 浆 样 品 溶 液, 按 照 2.2 项 处 理, 并 分 别 于 h 取 样 进 行 进 样 测 定, 结 果 发 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 血 浆 样 品 溶 液, 质 量 浓 度 为 ng/ml 非 那 西 丁 和 甲 苯 磺 丁 脲 血 浆 样 品 溶 液, 按 照 2.2 项 处 理, 进 样 测 定, 并 分 别 在 1 d 内 和 连 续 3 d 内 进 样, 依 法 测 定 (n=6) 计 算 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 的 日 内 和 日 间 精 密 度 RSD, 每 个 质 量 浓 度 水 平 测 定 6 次, 用 标 准 曲 线 的 回 归 方 程 计 算 样 品 的 测 定 质 量 浓 度 与 配 制 的 理 论 质 量 浓 度 比 较, 计 算 相 对 回 收 率, 表 示 方 法 的 准 确 度, 结 果 见 表 4 现 各 质 量 浓 度 下 各 药 物 峰 面 积 的 RSD 均 小 于 5.%, 表 明 样 品 中 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 在 24 h 内 稳 定 同 法 将 3 种 质 量 浓 度 的 孵 育 体 系 置 于 8 冰 箱 中 保 存, 分 别 于 第 天 解 冻, 依 法 测 定, 结 果 发 现 各 质 量 浓 度 的 RSD 均 小 于 5.%, 表 明 样 品 在 8 条 件 下 存 放 至 少 1 个 月 稳 定 OKNM 提 取 回 收 率 试 验 配 制 质 量 浓 度 为 ng/ml 的 安 非 他 酮 OKV 稳 定 性 考 察 配 制 质 量 浓 度 为 ng/ml 的 安 非 他 酮 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 血 浆 样 品 溶 液, 质 量 浓 度 为 ng/ml 非 那 西 丁 和 甲 苯 磺 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 血 浆 样 品 溶 液, 质 量 浓 度 为 ng/ml 非 那 西 丁 和 甲 苯 磺 丁 脲 血 浆 样 品 溶 液, 并 经 过 2.2 项 处 理 进 行 进 样 测 定, 进 样 分 析 得 峰 面 积 (A 1 ); 另 取 空 白 血 浆 经 表 Q 探 针 药 物 的 精 密 度 准 确 度 回 收 率 和 基 质 效 应 E x ±si n Z SF qable Q mrecisioni accuracyi extraction=recoveryi and matrix effect of six probe drugs E x ±si n Z SF= 精 密 度 RSD/% 准 确 度 /% 药 物 ρ/(ng ml 1 ) 日 内 日 间 日 内 日 间 提 取 回 收 率 /% 基 质 效 应 /% 安 非 他 酮 美 托 洛 尔 咪 达 唑 仑 非 那 西 丁 奥 美 拉 唑 甲 苯 磺 丁 脲
5 OQUS 中 草 药 = = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷 = 第 NQ 期 =OMNS 年 T 月 过 2.2 项 处 理, 并 在 洗 脱 液 中 加 入 相 应 质 量 浓 度 的 对 照 品 和 内 标 溶 液, 进 样 分 析 得 峰 面 积 (A 2 ), 每 个 质 量 浓 度 水 平 测 定 6 次, 计 算 该 质 量 浓 度 样 品 的 药 物 提 取 回 收 率 及 RSD, 结 果 见 表 4 = OKNN 基 质 效 应 考 察 取 空 白 血 浆 1 μl, 加 入 2 μl 冰 乙 腈 沉 淀 并 涡 旋 2 min, 将 样 品 在 4 下 13 r/min 离 心 1 min, 再 加 入 2 μl 地 西 泮 (2 ng/μl) 以 及 安 非 他 酮 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 3 个 质 量 浓 度 ng/ml( 平 行 6 个 样 品 ), 非 那 西 丁 和 甲 苯 磺 丁 脲 3 个 质 量 浓 度 ng/ml ( 平 行 6 个 样 品 ) 后 混 匀, 取 2 μl 进 样 检 测, 记 录 各 药 物 的 峰 面 积 (A 3 ), 并 与 相 应 质 量 浓 度 的 对 照 品 溶 液 直 接 进 样 测 得 的 峰 面 积 (A 4 ) 比 较, 计 算 基 质 效 应 结 果 见 表 4 内 标 地 西 泮 的 平 均 基 质 效 应 为 (92.31±5.78)%, 表 明 基 质 基 本 不 干 扰 检 测 OKNO S 种 探 针 药 物 的 药 J 时 曲 线 参 麦 注 射 液 组 和 对 照 组 的 SD 大 鼠 ig 探 针 药 物 后, 按 2.2 项 下 方 法 操 作, 测 得 6 种 探 针 药 物 的 血 药 浓 度, 其 药 - 时 曲 线 见 图 2 OKNP 统 计 学 处 理 药 动 学 参 数 采 用 DAS 3. 软 件 计 算 应 用 SPSS 16. 软 件 进 行 统 计 分 析, 所 有 数 据 以 x ± s 表 示, 各 探 针 的 药 动 学 参 数 差 异 采 用 t 检 验, 方 差 不 齐 时 采 用 t 检 验 各 探 针 药 物 的 药 动 学 参 数 见 表 5 血 药 浓 度 /(μg ml 1 ) 非 那 西 丁 参 麦 注 射 液 对 照 奥 美 拉 唑 安 非 他 酮 美 托 洛 尔 血 药 浓 度 /(μg ml 1 ) 咪 达 唑 仑 甲 苯 磺 丁 脲 图 O 大 鼠 体 内 探 针 药 物 的 药 J 时 曲 线 cigk O ConcentrationJtime curves of probe drugs in rats=in vivo= 表 R 大 鼠 血 浆 中 S 种 探 针 药 物 的 主 要 药 动 学 参 数 E x ±si n Z SF qable R jain pharmacokinetic parameters of six probe drugs in plasm=of rats=e x ±si=n=z=sf= 参 数 单 位 对 照 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 咪 达 唑 仑 AUC ~ ng h ml ± ± ± ± ± ±34.3 t 1/2 h.898± ± ± ± ±.298.8±.46 CL L h kg ± ± ± ± ± ±48.86 C max ng ml ± ± ± ± ± ±19.7 参 数 单 位 参 麦 注 射 液 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 咪 达 唑 仑 AUC ~ ng h ml ± * 35.84±13.95 * ± ±25.7 ** 49.8± ±38.49 t 1/2 h 1.752± ± ± ± ± ±.26 CL L h kg ±.792 * 314.1±112.6 **.5± ±9.81 ** 22.79± ±31.27 C max ng ml ± ±9.39 * ± ±54.4 * ±37.18 * 85.38±36.3 与 对 照 组 比 较 : * P<.5 ** P<.1 * P < ** P <.1 vs control group
6 中 草 药 = = Chinese=qraditional=and=eerbal=arugs= = 第 QT 卷 = 第 NQ 期 =OMNS 年 T 月 OQUT P 讨 论 CYPlA2 CYP2E1 和 CYP3A4 是 CYP45 酶 系 中 重 要 的 药 物 代 谢 酶, 代 谢 许 多 临 床 药 物 CYPlA2 主 要 在 肝 脏 表 达, 人 类 CYPlA2 占 肝 脏 CYP45 总 量 的 13%, 参 与 咖 啡 因 非 那 西 丁 普 萘 洛 尔 维 拉 帕 米 丙 咪 嗪 等 2 多 种 药 物 的 代 谢 CYP2E1 参 与 对 乙 酰 氨 基 酚 异 烟 肼 氟 烷 他 莫 昔 芬 等 常 用 药 物 的 代 谢 而 CYP3A 是 CYP45 酶 系 中 最 重 要 的 成 分, 参 与 催 化 5% 以 上 的 临 床 治 疗 药 物, 如 红 霉 素 卡 马 西 平 咪 达 唑 仑 辛 伐 他 汀 尼 非 地 平 等 [14] 大 多 数 药 物 进 入 体 内 后, 其 消 除 方 式 分 为 2 种 : 一 种 是 不 经 代 谢 而 直 接 以 原 型 排 出 体 外, 另 一 种 是 药 物 被 代 谢 后 以 代 谢 物 的 形 式 排 出 体 外, 而 药 物 在 体 内 代 谢 第 一 步 为 I 相 反 应, 催 化 I 相 反 应 关 键 的 代 谢 酶 即 为 P45 酶,CYP45 由 许 多 同 工 酶 组 成, 是 近 年 来 药 理 毒 理 学 研 究 的 热 点, 对 阐 明 药 物 间 相 互 作 用 和 指 导 临 床 用 药 有 重 要 的 作 用 本 课 题 就 从 药 物 代 谢 酶 的 角 度, 研 究 参 麦 注 射 液 对 CYP45 酶 的 影 响 与 对 照 组 相 比, 非 那 西 丁 安 非 他 酮 和 奥 美 拉 唑 的 AUC ~ CL 和 C max 有 显 著 性 的 降 低 (P<.5), 甲 苯 磺 丁 脲 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 的 药 动 学 参 数 无 显 著 性 差 异 实 验 表 明, 参 麦 注 射 液 对 大 鼠 CYP1A2 CYP2B1 和 CYP2C19 亚 型 的 活 性 有 明 显 的 抑 制 作 用, 而 对 CYP2C9 CYP2D6 和 CYP3A4 亚 型 的 活 性 无 显 著 性 影 响 本 实 验 最 大 的 优 点 是 采 用 UPLC-MS-MS 法 检 测 血 浆 中 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 质 量 浓 度, 色 谱 峰 单 一, 定 量 下 限 低, 可 以 检 测 到 1 ng/ml, 可 以 检 测 到 48 h 以 后, 完 全 符 合 应 用 中 的 定 量 需 要, 绝 大 多 数 药 物 浓 度 均 落 在 该 线 性 范 围 内 本 实 验 采 用 Acquity UPLC BEH C 18 柱 (1 mm 2.1 mm,1.7 μm) 检 测 一 个 样 本 仅 需 要 3 min, 同 时 采 用 梯 度 洗 脱 的 方 法, 对 于 血 浆 样 本 有 很 好 的 洗 脱 作 用,95% 乙 腈 冲 洗.5 min 可 以 将 血 浆 中 的 杂 质 有 效 地 冲 出 色 谱 柱, 可 以 达 到 快 速 稳 定 检 测 血 浆 中 非 那 西 丁 安 非 他 酮 甲 苯 磺 丁 脲 奥 美 拉 唑 美 托 洛 尔 和 咪 达 唑 仑 质 量 浓 度 本 研 究 为 参 麦 注 射 液 的 临 床 用 药 奠 定 坚 实 的 基 础, 为 临 床 合 理 用 药 提 供 依 据 参 考 文 献 [1] 吴 茵, 魏 欣, 张 黎 媛, 等. HPLC-MS/MS 法 同 时 测 定 参 麦 注 射 液 7 种 主 要 有 效 成 分 [J]. 中 草 药, 214, 45(18): [2] 曹 旭 东, 丁 志 山, 陈 建 真. 参 麦 注 射 液 药 理 及 临 床 研 究 进 展 [J]. 中 国 中 医 药 信 息 杂 志, 21, 17(3): [3] 叶 小 勇. 参 麦 注 射 液 联 合 奥 曲 肽 治 疗 急 性 胰 腺 炎 的 疗 效 观 察 [J]. 现 代 药 物 与 临 床, 215, 3(8): [4] 熊 克 朝, 李 泽 君, 李 志 刚, 等. 参 麦 注 射 液 致 RBL-2H3 细 胞 脱 颗 粒 的 研 究 [J]. 药 物 评 价 研 究, 215, 38(2): [5] 叶 蓁, 朱 玲 玲, 周 权. 利 用 体 内 探 针 法 考 察 植 物 药 和 天 然 产 物 对 人 体 细 胞 色 素 P45 和 P- 糖 蛋 白 活 性 的 影 响 [J]. 中 国 现 代 应 用 药 学, 212, 29(7): [6] 吴 慧, 陈 作 忠, 彭 向 前, 等. 复 方 丹 参 滴 丸 对 人 肝 脏 药 物 代 谢 酶 CYP1A2 活 性 的 影 响 [J]. 中 国 药 房, 28, 19(15): [7] 李 傅 冬, 沈 毅. 参 麦 注 射 液 治 疗 冠 心 病 疗 效 与 安 全 性 的 Meta 分 析 [J]. 中 国 中 药 杂 志, 212, 37(23): [8] Li Q, Liu Y, Jiao J, et al. Assessment of effects of IR and IPC on activities of cytochrome P45 isozymes in rats by a five-drug cocktail approach [J]. Drug Dev Ind Pharm, 214, 4(2): [9] Zhai X, Lu Y. Development and validation of a simple LC method for the determination of phenacetin, coumarin, tolbutamide, chlorzoxazone, testosterone and their metabolites as markers of cytochromes 1A2, 2A6, 2C11, 2E1 and 3A2 in rat microsomal medium [J]. Pharmazie, 213, 68(1): [1] 姚 珏 成, 倪 健, 韩 婧, 等. 黄 芩 提 取 物 对 细 胞 色 素 P45 酶 的 影 响 [J]. 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志, 212, 18(2): [11] Zhou Y F, Wang S H, Ding T, et al. Evaluation of the effect of apatinib (YN968D1) on cytochrome P45 enzymes with cocktail probe drugs in rats by UPLC- MS/MS [J]. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 214, 973C: [12] Malati C Y, Robertson S M, Hunt J D, et al. Influence of Panax ginseng on cytochrome P45 (CYP) 3A and P-glycoprotein (P-gp) activity in healthy participants [J]. J Clin Pharmacol, 212, 52(6): [13] 赵 文 婷, 张 波, 李 湘 晖, 等. 疏 血 通 注 射 液 对 大 鼠 细 胞 色 素 P45 酶 6 种 亚 型 活 性 的 影 响 [J]. 中 药 新 药 与 临 床 药 理, 212, 23(4): [14] Spaggiari D, Geiser L, Daali Y, et al. A cocktail approach for assessing the in vitro activity of human cytochrome P45s: An overview of current methodologies [J]. J Pharm Biomed Anal, 214, 11:
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绎 1 2 1. 8300112 援 830000 CNKI 1979-20121989-2013 PubMed/MEDLINE Jadad Cochrane RevMan 5.2.0 Meta 4 360 Meta OS WMD 95%-0.48-0.81-0.160.04-0.150.22 RR 95% 1.671.292.151.220.354.20 doi: 10.11842/wst.2014.08.030
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