511 现代生活方式有着直接的关系 [3] 采用相关变应 原疫苗进行脱敏治疗是治疗过敏性疾病的最佳手 段, 而对于尚未研制出疫苗的过敏症状, 最主要 的治疗方式是采用药物治疗来控制 ( 即对症用 药 ); 但是, 药物治疗并不能改变过敏性疾病的 进程, 因而也就不能从根本上达到治愈的效果 随着生物技

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1 510 王磊, 张影, 曾明 * ( 中国食品药品检定研究院, 北京 ) 探索益生菌在过敏性疾病的预防和治疗中的作用 通过查阅近 3 年来关于益生菌预 防和治疗过敏性疾病方面的文献, 主要从动物实验 人体临床试验以及可能的治疗机制等方面详述了益 生菌与过敏性疾病防治的相关性 动物实验相关文献表明 : 益生菌对过敏性疾病的预防和治疗有 一定的疗效 临床研究相关文献调研结果也表明 : 益生菌对过敏性鼻炎 特应性皮炎 哮喘和食物过敏 等疾病具有一定的治疗效果 对过敏性疾病有治疗效果的益生菌为鼠李糖杆菌 嗜酸乳杆菌 双歧杆菌 等, 益生菌单一菌种和混合益生菌都能起到治疗作用 益生菌能够对过敏性疾病起到预防和治疗 的作用, 尤其是在生命早期, 或者降低宿主患过敏性疾病的概率, 或者使患者的过敏症状减轻甚至消除 但依然存在着诸多问题, 需要继续投入大量工作进行更深入的研究 益生菌 ; 过敏性疾病 ; 预防治疗 ; 动物实验 ; 临床试验 R392.8;G255 A (2018) doi: /j Progress of the Role of Probiotics in the Prevention and Treatment of Allergic Diseases Wang Lei, Zhang Ying, Zeng Ming * (National Institutes for Food and Drug Control, Beijing , China) Abstract Objective: To explore the role of probiotics in the prevention and treatment of allergic diseases. Methods: The literatures about probiotics in the prevention and treatment of allergic diseases in past three years were reviewed. The correlation between the probiotics and the prevention and treatment of allergic diseases was mainly discussed in detail from the following aspects: animal experiments, human clinical trials and possible treatment mechanisms. Results: Literature relevant to animal experiments showed that probiotics had certain effects on the prevention and treatment of allergic diseases. Literature relevant to clinical trial also showed that probiotics had certain therapeutic effects on allergic rhinitis, atopic dermatitis, asthma and food allergy. The probiotics with therapeutic effects on allergic diseases consisted of rhamnosus, lactobacillus acidophilus and bifidobacteria, etc. Both single probiotic strains and the mixed probiotics had therapeutic effects. Conclusion: Probiotics could play a role in the prevention and treatment of allergic diseases, especially in the early stage of life by reducing the probability of a host suffering from allergic diseases or reducing, even eliminating the symptoms of the patients. However, many problems still exist and a lot of work needs to be done to conduct further studies. Keywords: probiotics; allergic diseases; prevention and treatment; animal experiment; clinical trial 过敏性疾病已成为一种普遍的公共健康问 题, 据估计世界上有 30%~40% 的人口正遭受过 敏性疾病的困扰 ; 而且, 过敏性疾病的发生率正 逐年增加, 造成了巨大的医疗负担 [1-2] 过敏性疾 病的影响因素包括产前接触微生物 分娩方式 饮食 药物使用以及接触宠物和家畜等, 与人类 作者简介 : 王磊, 硕士生 ; 研究方向 : 细菌疫苗及微生态制品的质量控制 ;Tel:(010) ; chantengshu@163.com 通信作者 : 曾明, 研究员 ;Tel:(010) ; zengming@nifdc.org.cn

2 511 现代生活方式有着直接的关系 [3] 采用相关变应 原疫苗进行脱敏治疗是治疗过敏性疾病的最佳手 段, 而对于尚未研制出疫苗的过敏症状, 最主要 的治疗方式是采用药物治疗来控制 ( 即对症用 药 ); 但是, 药物治疗并不能改变过敏性疾病的 进程, 因而也就不能从根本上达到治愈的效果 随着生物技术的发展和生物药物研究的深入, 多 项研究显示益生菌对过敏性疾病有一定的预防和 治疗效果 [4] 本文通过查阅近 3 年来关于益生菌预 防和治疗过敏性疾病方面的文献, 主要从动物实 验 人体临床试验以及可能的治疗机制等方面进 行了综述 周龄的 BALB/c 小鼠, 使用 OVA 对小鼠致敏, 发现根据国际粮农组织和世界卫生组织的定义, 小鼠抗 OVA 特异性 IgE 水平显著降低, 而抗 OVA 特 益生菌是指 一类在宿主摄入适当数量时, 能对 其机体带来益处的活的微生物 [5] 大多数益生菌 是人类健康肠道菌群的成员, 传统的发酵乳制品 和相关产品也是其重要来源, 例如双歧杆菌属和 乳酸杆菌属等 [6] 益生菌或肠道菌群如今已经成为 全球研究的热点 肠道菌群在早期研究中更多被 认为和消化 营养作用有关, 新的研究发现肠道 菌群与人类的健康有着多种多样的复杂联系 : 肠 道菌群与肥胖 糖尿病 艾滋病 心血管疾病 肿瘤, 以及本文中讲到的过敏性疾病与免疫等等 都存在着关系, 甚至肠道菌群与自闭症 抑郁 症 帕金森及老年痴呆等精神性疾病有关 [7-10] 益 生菌作为肠道菌群的重要组成部分, 对人类健康 发挥着越来越重要的作用 过敏反应又称超敏反应, 根据其发生机制和 临床特点可分为四型 益生菌治疗过敏性疾病研究 中所指的过敏反应属于 Ⅰ 型超敏反应, 主要是由 IgE 介导的疾病, 如过敏性鼻炎 过敏性哮喘 特 应性皮炎 (AD) 等等 [11] 过敏性疾病发生率呈逐 年上升趋势, 引起过敏反应的过敏原也多种多样, 主要包括花粉 霉菌 螨虫 动物皮屑 昆虫毒 液, 以及食物等 [12] OVA-IgE 水平以及肺部基质金属蛋白酶 9(MMP- [18] 9) 的表达等 Vamshi Saliganti 等利用瑞士白化 小鼠 (Swiss albino mice) 研究鼠李糖乳杆菌 MTCC 近年来, 研究人员利用动物模型对益生菌 预防和治疗过敏疾病进行了多项研究, 为临床研 [13] 究提供了依据 Ondulla T. Toomer 等报道用混 合有嗜酸乳杆菌 (L. acidophilus) 干酪乳杆菌 (Lactobacillus casei) 双裂双岐杆菌 (Bifido bacterium bifidium) 和粪肠球菌 (Enterococcus faecium) 的食物喂养卵清蛋白 (OVA) 致敏的新 生小鼠 (0~10 周 ), 能诱导调节性 T 细胞数量的增 加, 增强转化生长因子 β(tgf-β) 基因表达并 [14] 减少过敏介质 IL-13 等的表达 EMM Velez 等使用 含有保加利亚乳杆菌 (Lactobacillus bulgaricus, 10 8 CFU ml -1 ) 嗜热链球菌 (Streptococcus thermophilus,10 8 CFU ml -1 ) 和副干酪乳杆菌 亚种 CNCMI-1518 的益生菌发酵乳 (PFM) 喂饲 5 异性 IgG 和总分泌型 IgA(S-IgA) 没有发生变化 PFM 能调节 Th 2 反应向 Th 1 反应转变, 增加 IL-10 和 [15] IFN-γ 水平 Hana Kozakova 等将含有鼠李糖乳 杆菌 LOCK0900(L. rhamnosus LOCK0900) 鼠李 糖乳杆菌 LOCK 和干酪乳杆菌 LOCK0919 的混 合益生菌 (Lmix) 定植于近交系 BALB/c 小鼠 (8 周 龄 ),3 周之后用重组桦树花粉致敏原蛋白 Bet v1 致 敏小鼠, 最终结果显示 Lmix 定植能提高肠道上皮的 屏障作用并降低对 Bet v1 的敏感性 ; 血清中抗原特 异性 IgE IgG1 和 IgG2a 水平明显降低, 同时却提高 [16] 了血清中总 IgA 水平和 TGF-β 水平 Bo Yang 等 通过 OVA 敏感小鼠模型研究发现益生菌能够降低 血清中 OVA-IgE 和 OVA-IgG1 水平, 降低脾脏 Th 2 细胞因子的释放并改善腹泻症状 ; 而且通过 16S rrna 分析发现起主要作用的益生菌是粪球菌属和 立克菌属 很多研究人员对单一种属益生菌以及益生菌 [17] 某些成分的效果也进行了研究 Chia-Ta Wu 等 用鼠李糖乳杆菌 GG(LGG) 对 OVA 致敏的哮喘小 鼠模型过敏症状进行预防和治疗试验, 发现 LGG 能显著减少支气管肺泡灌洗液与血清中炎症浸润 细胞和 Th 2 细胞因子数量 ; 并减少血清中特异性 5897 对 OVA 所诱发小鼠过敏症的预防和治疗效果, 发现 MTCC 5897 能减轻新生小鼠过敏症状, 增加 杯状细胞 (goblet) 和小肠中 IgA+ 细胞数量 ; 同时

3 512 显著减少血清中特异性抗 OVA 抗体 (IgE IgG IgG1) 数量以及 IgE/IgG2a 和 IgG1/IgG2a 的比值 ; 促进 IL-4 水平的降低和 TGF-β 水平的增加 Jing [19] Yang 等利用副干酪乳杆菌 L9 和 BALB/c 雌性小鼠 (3 周龄 ) 研究 L9 对小鼠牛 β- 乳球蛋白 (Bovine β-lactoglobulin,blg) 过敏的预防作用, 研究 发现 L9 能上调 CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg 细胞反应, 从 而平衡 Th1/Th2 反应,CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg 细胞数 量在肠系膜淋巴结中上升了 51.85%; 另外,L9 在 肠系膜淋巴结 派尔集合淋巴结和脾脏中能显著 地诱导 CD103 的表达并减少成熟 DC 细胞的数量 [20] Hangeun Kim 等将植物乳杆菌 K8(L. plantarum K8,KCTC 10887BP) 培养后超声波破碎, 制成裂 解物冻干粉, 利用 NC/Nga 小鼠 (6 周龄 ) 进行 AD 的 预防研究, 结果显示口服植物乳杆菌裂解物能有效 抑制 NC/Nga 小鼠皮肤角质层和表皮增厚, 口服 8 周 后皮肤屏障功能损害明显减少 ; 进一步研究证明 该裂解物能通过诱导 IL-12 和 IFN-γ 的产生, 同时 抑制 IL-4 和 IgE 来促使免疫反应向 Th1 发展 Chung- [21] Hsiung Huang 等用罗伊乳杆菌饲养 OVA 过敏小鼠 模型, 发现罗伊乳杆菌能通过调节肠道菌群和增强 肠道免疫耐受来抵抗肠道食物过敏, 并由此认为罗 伊乳杆菌是一种有效的对抗食物过敏的益生菌 上述研究表明, 无论混合益生菌 单一益生 菌, 还是益生菌的某些成分, 在动物实验中对过敏 性疾病有一定的预防和治疗作用 动物实验初步证 明了益生菌对过敏性疾病的预防和治疗效果, 为益 生菌的临床应用提供了重要依据 低镍饮食中的有益补充, 它能通过调节胃肠道的 益生菌虽然在动物模型中证明是有效的, 但人类 和动物在生活环境和饮食习惯上存在着重大差异, 益 生菌是否对人有效还需要得到临床应用的证实 [22] Melanie Rae Simpson 等采用随机双盲对照平 行试验, 让 415 名孕妇在 36 孕周时开始随机服用含 有益生菌鼠李糖杆菌 GG 嗜酸乳杆菌 La-5 和动物 双歧杆菌乳酸亚种 Bb-12(Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bb-12) 的牛乳或安慰剂直到产后 3 个 月,6 年后对他们的孩子进行过敏疾病发病情况的 评估, 发现孕产妇单独摄入益生菌足以长时间地减 少 AD 累计发病率, 而对其他诸如哮喘和过敏性鼻 [23] 炎等过敏性疾病没有显著的效果 I-Jen Wang 等 采用双盲 前瞻性 随机 安慰剂对照的方法, 研究副干酪乳杆菌 (LP) 发酵乳杆菌 (LF) 以 及混合菌对 AD 严重程度 生活质量和儿童免疫标 志物的影响 结果表明 LP+LF 混和益生菌能够减 轻 AD 的严重性, 并能够提高患儿的生活质量, LP+LF 混和益生菌效果优于单一的 LP 或 LF 益生菌 [24] Michele Miraglia Del Giudice 等临床试验发现, 双 歧杆菌合剂 ( 长双歧杆菌 BB536 婴儿双岐杆菌 M-63 和短双歧杆菌 M-16V) 能够显著改善花粉过 敏性鼻炎和间歇性哮喘儿童的过敏症状, 并大大提 高他们的生活质量 对单一益生菌在临床上的研究也取得了一些进 [25] 展 D J Costa 等在花粉过敏性鼻炎患者中就益生 菌副干酪乳杆菌亚种 LP-33 对过敏性鼻炎治疗的有 效性和安全性进行评估, 研究期间患者同时接受氯 雷他定和 H1 抗组胺药治疗 结果显示 LP-33 能显著 改善患者生活质量, 鼻炎患者眼部症状持续改善, [26] 但鼻部症状没有显著变化 Niccoli Antonio A 等 招募了 43 名 0~11 周岁的 AD 患者 ( 男 / 女 =1:1), 每天服用 2 袋 (1 109 CFU/ 袋 ) 唾液乳杆菌 (L. salivarius)ls01(dsm 22775), 连续 8 周后, 改 为每天服用 1 袋, 再连续服用 8 周 在此期间检测 瘙痒指数 (itch index) 和 SCORAD/SCORAD 指数, 结果显示服用 LS01 能够改善 AD 儿童的生活质量 [27] Cinzia Lucia Randazzo 等采用随机双盲对照的方法 研究了罗伊氏乳杆菌 (Lactobacillus reuteri)dsm 对系统性镍过敏综合征 (SNAS) 的治疗效 果, 初步结果显示,DSM 可能是 SNAS 病人 稳态环境来增加胃肠道益生菌种群多样性 Mimi [28] L. Tang 等采用随机双盲对照的方法, 将益生菌 (Lactobacillus rhamnosus CGMCC ) 与花生 口服免疫治疗联合起来 (PPOIT) 进行儿童花生过 敏的研究, 研究显示 PPOIT 疗法能使患儿过敏反应 持续无应答, 在皮肤点刺试验中能使机体对花生抗 原不敏感, 能降低花生特异性 IgE 水平, 同时增加 花生特异性 IgG4 水平 还有研究者从基因方面进行了研究 Angharad [29] R. Morgan 等同样采用双盲随机对照试验的方法, 研究鼠李糖乳杆菌 HN001 和动物双歧杆菌乳酸亚种 HN019 是否能影响湿疹易感基因的表达, 结果显示 服用 HN001 之后, 携带湿疹基因变异体的儿童虽然

4 513 处于湿疹高风险环境中也很少患上湿疹 ;HN019 也 能够防止一些单核苷酸多态性基因 (SNPs) 的影 响,HN001 还能修改严重性湿疹和过敏症风险易 [30] 感基因的易感性 Anna Forsberg 等也采用双盲随 机对照试验的方法, 研究罗伊乳杆菌 ATCC 对 TLR(Toll like receptor) 的识别应答影响, 研 究发现 ATCC 在儿童 12 个月龄时能降低 LTA (lipoteichoic acid) 诱导 CCL4 CXCL8 IL-1β 和 IL-6 产生的反应, 并能在 24 月龄时减少 CCL4 和 IL-1β 的分泌,TLR2 mrna 的表达不受益生菌的 影响, 但益生菌的作用似乎与 TLR mrna 下游因素 的表达有关 同时, 也有一些研究结果显示益生菌对过敏 [31] 性疾病没有效果 Evelyn X. Loo 等进行了一项长 达 5 年的随访研究, 试图证明在生命早期给予益生 菌是否能长期预防治疗过敏性疾病, 结果发现, 在 儿童五周岁时, 罹患哮喘 过敏性鼻炎 湿疹 食 物过敏和吸入性过敏原过敏疾病的概率与对照组没 [32] 有什么不同 Hyeon-Jong Yang 等采用双盲随机对 照的方法, 研究混合益生菌 ( 干酪乳杆菌 鼠李糖 乳杆菌 植物乳杆菌 双歧杆菌乳酸菌等 ) 对儿童 (2~9 岁 ) 中重度 AD 的治疗效果, 发现益生菌能 在 6 周后成功定植于胃肠道, 然而并没有发现益生 [33] 菌对 AD 有治疗和调节的效果 Chiara Nembrini 等 同样通过双盲随机对照临床试验研究副干酪乳杆 菌 NCC 2461 在花粉过敏性鼻炎患者中的抗过敏效 应, 发现与之前的研究结果相反, 口服 NCC 2461 并没有展现出对过敏性鼻炎具有有益的效果 临床试验显示, 益生菌对过敏性鼻炎 AD 哮喘和食物过敏等疾病具有一定的治疗效果 ; 对过敏性疾病有效的益生菌一般为鼠李糖杆菌 嗜酸乳杆菌 双歧杆菌等 ; 益生菌单一菌种和混合益生菌都能起到治疗的作用 但也不能忽视, 有些试验得出了相反的结论, 益生菌对过敏性疾病的治疗研究还不够深入, 其间的许多关系还需要进一步的研究 关于益生菌预防治疗过敏性疾病的机制目前尚不完全清楚, 也没有公认的定论, 根据一些动物实验的研究结果, 大致可以总结出以下几种可能的机制 :1 益生菌通过调节胃肠道环境, 使胃肠道达到稳态平衡 2 益生菌通过诱导免疫细胞释放细胞因子, 改变 Thl/Th2 平衡, 从而促进 Th1 型免疫反应, 抑制 Th2 型免疫反应 3 通过增强调节性 T 细胞的优势, 调节免疫反应 4 减少过敏介质 IL-13 IgE IL-4 IgG1 和 IgG2a 等的表达, 同时增加 IgA IL-10 IFN-γ TGF-β 等的表达 5 通过改变过敏原受体 (TLR) 的敏感性, 缓解过敏症症状 6 在基因水平上改变 mrna 的表达量, 增强过敏耐受性等等 这些机制还有待进一步的研究和验证 益生菌预防治疗过敏性疾病机制见图 1 [34] 注 :1. DC: 树突状细胞 ;2. TJ: 紧密接头 ;3. SCFA: 短链脂肪酸 ;4. IgA: 免疫球蛋白 A;5. IgE: 免疫球蛋白 E; 6. IL: 白细胞介素 ;7. TNF: 肿瘤坏子因子 ;8. 干扰素 :NF-kB;9. 核因子 :kb;10. ROS: 活性氧

5 514 益生菌对人类健康有多种促进作用, 尤其是 益生菌对过敏性疾病的预防和治疗作用越来越受到 人们的重视 从以上文献的调研结果可以看出, 益 生菌对免疫疾病的预防和治疗起到有益的作用 但 是也存在着诸多问题 : 虽然多数研究显示益生菌有 效, 但也有一部分试验结果显示其无效, 研究结果 存在不一致性和不稳定性 ; 益生菌种类繁多, 过敏 性疾病也多种多样, 益生菌与特定过敏性疾病之间 的联系还不是很清楚, 以及人群的差异化也是导致 研究结果不一致的原因之一 ; 益生菌对过敏性疾病 的作用机制尚不清楚, 因而治疗效果评价方法也多 样化, 增加了治疗效果评价难度 因此, 在今后的 研究中, 使用特定有效的益生菌株, 采用统一的方 法和标准, 更能推进对益生菌在过敏性疾病预防和 治疗作用的理解 [1] Neau E,Delannoy J,Marion C,et al. Identification of Three Novel Candidate Probiotic Strains with Prophylactic Properties in a Murine Model of Cow's Milk Allergy [J]. Applied and Environmental Microbiology,2016,82(6): [2] Gern J E. Promising Candidates for Allergy Prevention [J]. The Journal of Allergy and Clinical Immunology,2015, 136(1): [3] Żukiewicz-Sobczak W,Wróblewska P,Adamczuk P, et al. Probiotic Lactic Acid Bacteria and Their Potential in the Prevention and Treatment of Allergic Diseases[J]. 2014,39(1): [4] Van Bever H P,Nagarajan S,Shek L,et al. OPINION: Primary Prevention of Allergy:Will it Soon become a Reality?[J]. Pediatric Allergy & Immunology Official Publication of the European Society of Pediatric Allergy & Immunology,2016,27(1):6-12. [5] M. Araya,L. Morelli,G. Reid,et al. Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food[J]. AIP Conference Proceedings,2002,61(1): [6] Kumar H,Salminen S. Probiotics [J]. Encyclopedia of Food & Health,2016,75: [7] Bhattacharjee S,Lukiw WJ. Alzheimer's Disease and the Microbiome[J]. Frontiers in Cellular Neuroscience, 2013,7(153):1-4. [8] Bested AC,Logan AC,Selhub EM. Intestinal Microbiota,Probiotics and Mental Health:from Metchnikoff to Modern Advances:Part II-contemporary Contextual Research[J]. Gut Pathogens,2013,5(3): [9] Schmidt C. Mental Health:Thinking from the Gut[J]. Nature,2015,518(7540): [10] Hsiao E,Mcbride S,Hsien S,et al. Microbiota Modulate Behavioral and Physiological Abnormalities Associated with Neurodevelopmental Disorders[J]. Cell,2013,155 (7): [11] Kay A B. Allergy and Allergic Diseases. First of Two Parts [J]. New England Journal of Medicine,2001,344(1): [12] European Phamacopoeia Commission. European Pharmacopoeia 9.0[S]. Allergen Products(1063), 2017: [13] Toomer O T,Ferguson M,Pereira M,et al. Maternal and Postnatal Dietary Probiotic Supplementation Enhances Splenic Regulatory T Helper Cell Population and Reduces Ovalbumin Allergen-induced Hypersensitivity Responses in Mice [J]. Immunobiology,2014,219(5): [14] Velez E M,Maldonado Galdeano C,Carmuega E,et al. Probiotic Fermented Milk Consumption Modulates the Allergic Process Induced by Ovoalbumin in Mice [J]. The British Journal of Nutrition,2015,114(4): [15] Kozakova H,Schwarzer M,Tuckova L,et al. Colonization of Germ-free Mice with a Mixture of Three Lactobacillus Strains Enhances the Integrity of Gut Mucosa and Ameliorates Allergic Sensitization [J]. Cellular & Molecular Immunology,2016,13(2): [16] Yang B,Xiao L,Liu S,et al. Exploration of the Effect of Probiotics Supplementation on Intestinal Microbiota of Food Allergic Mice[J]. Am J Transl Res,2017,9(2): [17] Wu C,Chen P,Lee Y,et al. Effects of Immunomodulatory Supplementation with Lactobacillus Rhamnosus on Airway Inflammation in a Mouse Asthma Model.[J]. Journal of Microbiology Immunology and Infection,2016,49(5): [18] Saliganti V,Kapila R,Sharma R,et al. Feeding

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研 發 與 創 新 驗 顯 示, 停 止 攝 食 乳 酸 菌 後, 在 幾 週 內 乳 酸 菌 便 會 消 失, 並 不 會 持 續 存 在 於 腸 道 內, 但 是 短 暫 的 定 殖, 還 是 有 刺 激 腸 道 免 疫 系 統 的 效 果, 尤 其 是 對 服 用 抗 生 素 或 腹 瀉 感 乳 酸 菌 之 保 健 功 效 與 產 品 開 發 撰 文 / 陳 慶 源 黃 崇 真 邱 雪 惠 廖 啟 成 益 生 菌 是 指 具 有 改 善 宿 主 體 內 內 生 性 微 生 物 相 平 衡, 並 有 益 於 宿 主 健 康 的 單 一 或 數 種 微 生 物 一 般 而 言, 益 生 菌 被 認 定 為 活 菌 本 身, 但 是, 近 年 發 現 某 類 益 生 菌 所 衍 生 之 活 性

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