674 生命的化学 2013 年 33 卷 6 期综述 Exendin-4( 艾塞那肽 ) 和 Liraglutide injection ( 利拉鲁肽 / 诺和力 ), 在临床上治疗 T2DM 的效果显著, 也被大量应用于神经退行性疾病的研究中 GLP-1 与其脑内广泛分布的 GLP-1 受体 (

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1 生命的化学, 2013, 33(6): 熊慧, 等. 用抗糖尿病药物 GLP-1 及其类似物治疗阿尔茨海默病 用抗糖尿病药物 GLP-1 及其类似物治疗阿尔茨海默病 熊慧, 邓艳秋 * ( 天津医科大学基础医学院病理生理学教研室, 天津 ) 摘要 : 流行病学和基础研究表明阿尔茨海默病 (Alzheimer's disease, AD) 与 2 型糖尿病 (type 2 diabetes mellitus, T2DM) 存在密切关联 :T2DM 是 AD 的危险因素之一 ; 而 AD 脑内也出现胰岛素信号异常 胰岛素抵抗状态, 因而被称为 第 3 类型的糖尿病 近年来治疗 T2DM 的新药 胰高血糖素样肽 -1 (glucagon-like peptide-1, GLP-1) 及其类似物, 已被证实具有神经保护作用, 且能改善 AD 模型的记忆和认知功能, 为 AD 治疗药物的研究提供了新的策略 关键词 : 阿尔茨海默病 ;2 型糖尿病 ; 胰高血糖素样肽 -1 Research progress of treatment for Alzheimer's disease using anti-diabetic drug GLP-1 and its analogue XIONG Hui, DENG Yanqiu* (Department of Pathophysiology, Basic Medical College, Tianjin Medical University, Tianjin , China) Abstract: Epidemiological evidence and basic research have shown that there is a close relationship between Alzheimer's disease (AD) and type 2 diabetes mellitus (T2DM). T2DM is one of the risk factors for AD, while AD brain appears insulin signaling abnormity and insulin resistance, supporting the hypothesis that AD is "type 3 diabetes". Recent new drugs anti-t2dm glucagon-like peptide-1 (GLP-1) and its analogs, have shown neuroprotective effects and can improve memory and cognitive function of AD model, which holds promise as a novel strategy for AD treatment. Key words: Alzheimer's disease; type 2 diabetes; glucagon-like peptide-1 阿尔茨海默病 (Alzheimer s disease, AD) 是一种以认知和记忆功能的进行性减退为主要临床特征的神经退行性疾病 AD 脑内主要表现有皮质弥漫性萎缩 神经细胞的缺失及退化 突触衰竭 突触丢失和神经元死亡等, 病理改变包括神经细胞内由过度磷酸化的 Tau 和神经丝 (neurofilament, NF) 蛋白形成的神经原纤维缠结 (neurofibrillary tangle, NFT) [1] 神经细胞间由 β 淀粉样蛋白 (β-amyloid, Aβ) 沉积构成的老年斑 (senile plaque, SP) 等 [2] 然而 AD 的发病机制目前尚不明确, 近年研究发现 AD 与 2 型糖尿病 (type 2 diabetes mellitus, T2DM) 具有密切的关联 [3] 流行病学调查显示 T2DM 导致 AD 和血管性痴呆风险增加 2~5 倍 [4] AD 患者脑内出现胰岛素缺乏及胰岛素抵抗, 并伴随葡萄糖摄入和代谢减弱, 中枢胰岛素信号传导通路障碍 [5] 在基础研究和临床应用中发现利用胰岛素及胰岛素增敏剂等糖尿病治疗药物干预 AD, 可提高 AD 模型和 AD [6] 患者的认知能力并改善脑内的 AD 样病变 近年被批准用于治疗 T2DM 的新药 胰高血糖素样肽 -1(glucagon-like peptide 1, GLP-1) 的类似物 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金项目 ( ; ) 第一作者 : 熊慧 (1988-), 女, 硕士生, xionghui0305@126.com * 通信作者 : 邓艳秋 (1966-), 女, 博士, 教授, dengyanqiu66@gmail.com

2 674 生命的化学 2013 年 33 卷 6 期综述 Exendin-4( 艾塞那肽 ) 和 Liraglutide injection ( 利拉鲁肽 / 诺和力 ), 在临床上治疗 T2DM 的效果显著, 也被大量应用于神经退行性疾病的研究中 GLP-1 与其脑内广泛分布的 GLP-1 受体 (GLP-1 receptor, GLP-1R) 结合, 发挥重要的神经保护作用, 可能对防治 AD 的发生和发展具有一定的作用 本文对 AD 与 T2DM 的关联 GLP-1 及其类似物的结构与功能及对 AD 治疗作用的研究进展做一综述 1 AD 与 T2DM 的关联 T2DM 是一种复杂的多因素导致胰岛素调节障碍的代谢性疾病, 持续的高血糖状态以及胰岛素的缺乏会增加肥胖 胰岛素抵抗和中枢神经系统损伤等继发性病变, 其共同的相互作用可能导致神经元死亡 大脑功能和结构的慢性损伤 T2DM 还增加轻度认知功能障碍 (mild cognitive impairment, MCI) 的患病率,MCI 被认为是趋向于 AD 的过度状态, 可增加神经退行性疾病的患病风险并最终导致认知功能障碍 T2DM 代谢紊乱的关键是胰岛素抵抗, 而在 AD 脑内也发现有类似胰岛素抵抗的情况 AD 脑内胰岛素和胰岛素样生长因子 (insulinlike growth factor-i, IGF) 等利用障碍, 导致靶组织的胰岛素受体 (insulin receptor, IR) 对胰岛素的敏感性降低以及胰岛素信号异常 越来越多的证据表明 AD 本质上也是一种代谢性疾病, 如 AD 脑对葡萄糖的利用减弱, 脑内胰岛素信号通路异常, 进行性发展致神经退行性疾病 研究发现 AD 脑内胰岛素 /IGF 调控基因异常与 Aβ 增加和神经细胞骨架损伤密切相关 [7] 随着 AD 脑的基础代谢减弱, 胰岛素抵抗介导的能量代谢障碍也会引起氧化应激的异常, 产生过量活性氧基团 (reactive oxygen species, ROS), 造成炎症 DNA 损伤 线粒体功能障碍, 加重细胞损伤并最终诱导细胞凋亡 [8] AD 脑内减弱的糖代谢可能引起 O-GlcNAc 糖基化水平减少, 其同一位点修饰的蛋白质磷酸化作用失调, 使 Tau 和 NF 过度磷酸化导致神经元骨架蛋白损伤 此外, 实验研究中的 AD 与 T2DM 模型均可由链脲佐菌素 (streptozotocin, STZ) 制备,STZ 是一种葡萄糖胺 - 亚硝基脲复合物, 在外周破坏胰岛细胞导致葡萄糖和能量代谢障碍, 诱导糖尿病样症状 ; 在中枢可以阻断胰岛素受体自身磷酸化, 干 扰内源性酪氨酸激酶活性而导致胰岛素信号转导通路障碍, 并影响脑内葡萄糖转运子 (glucose transporter, GLUT) 的功能使葡萄糖摄入和代谢障碍 [9], 因而可诱导进行性认知功能障碍和学习记忆减退的 AD 样症状 2 GLP-1 及其类似物的结构及在外周的作用 GLP-1 是一种肠促胰岛素, 是胰高血糖素原基因转录修饰后的产物 胰高血糖素原基因在胰岛 α 细胞中表达生成的胰高血糖素原, 在肠粘膜 L 细胞中被前激素转换酶 (proprotein convertase 1, PC1) 剪切为 GLP-1(1-37), 经加工修饰后形成两种生物活性形式的肽链 :GLP-1(7-37) 和 GLP-1(7-36) 酰胺 GLP-1 易被体内二肽酰肽酶 IV(dipeptidyl-peptidase IV, DPP-IV) 在 ALa 8 氨基酸位点处裂解成 GLP-1(9-37) 和 GLP-1(9-36) 酰胺而失活, 半衰期不足 5 分钟, 不适合 T2DM 的临床治疗 GLP-1 的类似物艾塞那肽是从美洲毒蜥蜴的唾液中提取的 GLP-1R 激动剂, 其生物活性和生物效应增加, 并且半衰期延长 [10] 利拉鲁肽是在 GLP-1 分子结构的 34 位赖氨酸被精氨酸取代, 并于第 26 位赖氨酸上增加了一个由谷氨酸介导的 16 碳棕榈脂肪酸侧链, 抵抗 DPP-IV 的降解, 延长药物半衰期达到 12 h [11] 人体产生的 GLP-1 易被降解而失活, 其类似物艾塞那肽和利拉鲁肽不仅具有 GLP-1 的生物效应, 也可延长药物在体内的半衰期, 是近年批准作为治疗 T2DM 的新药 GLP-1 通过与 GLP-1R 结合发挥其生物学功能, 在治疗 T2DM 方面具有良好的降糖功效 GLP-1R 属于 G 蛋白偶联的胰高血糖素受体家族, 分布于胰岛 肺 脑 心脏 胃肠道及肾脏等 GLP-1 以葡萄糖浓度依赖性方式促进胰岛 β 细胞分泌胰岛素, 并减少胰岛 α 细胞分泌胰高血糖素 [12], 从而降低血糖, 同时在血糖浓度较低时减少胰岛素的分泌, 维持血糖平衡 GLP-1 也是胰腺细胞生长因子和胰岛细胞量调节因子, 能够刺激 β 细胞增殖和分化 诱导干细胞及胰岛前体细胞分化为胰岛素分泌细胞或胰岛 β 细胞 减少 β 细胞的凋亡, 以稳定胰岛 β 细胞数量和改善其功能 [13] GLP-1 还能增加胰岛素的敏感性, 在血糖浓度较高时如餐后 GLP-1 可减少肝糖释放, 促进外周组织对葡萄糖

3 熊慧, 等. 用抗糖尿病药物 GLP-1 及其类似物治疗阿尔茨海默病 675 的利用, 而且不依赖于胰岛素和胰高血糖素 3 GLP-1 及其类似物治疗 AD 的研究进展 GLP-1 不仅在外周降低血糖保护胰岛 β 细胞, 改 善 T2DM 的症状, 在中枢也具有保护神经元的功 能, 用于神经退行性疾病治疗的研究领域 GLP-1R 广泛存在于中枢神经系统中, 如下丘脑 皮层 海马 纹状体 黑质 脑干等, 外周生成的 GLP-1 可通过血脑屏障, 与脑内的受体结合, 发挥神经 保护作用 研究报道利拉鲁肽能够改善 APP SWE / PS1 ΔE9 (APP/PS1) 转基因 AD 模型的认知记忆功能, 减少神经退行性病变 [14], 艾塞那肽能改善大鼠的 海马相关行为, 减轻认知障碍 [15] 因此 GLP-1 及其 类似物在 AD 治疗药物的研究方面具有良好的应用 前景 3.1 参与 AD 脑胰岛素信号下游通路的调节 AD 脑内胰岛素信号异常直接导致脑胰岛素和 胰岛素受体的功能障碍, 使胰岛素信号失调, 致 使 Aβ 沉积 脑葡萄糖代谢异常 血管功能改变 脂质代谢异常和炎症 / 氧化应激等 [16] 胰岛素参与 神经递质释放 促进神经组织生长发育 影响认 知功能, 其在脑内含量的高低也与神经退行性疾 病的发展相关 [17] GLP-1 通过 GLP-1R 介导, 可参 与胰岛素信号下游通路的调节 GLP-1 与 GLP-1R 结合激活 G- 蛋白偶联的环磷酸腺苷 (cyclic AMP, camp), 激活蛋白激酶 A(protein kinase, PKA) 和下 游底物分子磷脂酰肌醇 -3 蛋白激酶 (phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K), 激活 Ca 2 + 离子通道, 促 进神经细胞的功能如递质的释放 ;PI3K 通路不仅 与突触的可塑性有关, 而且与 Aβ 引起的记忆减退 有重要关联 [18] ;PI3K 和蛋白激酶 B(protein kinase B, PKB/Akt) 结合, 能够降低糖原合成酶激酶 3 (glycogen synthase kinase-3, GSK-3) 的磷酸化, GSK-3β 参与调节 AD 脑内 Tau 蛋白的过度磷酸化, 对 AD 脑内 NFT 病变具有重要影响 [19] 而且, GLP-1 及其类似物能改善 AD 脑内胰岛素以及胰岛 素受体底物 (insulin receptor substrate, IRS) 的抵抗状 态 胰岛素受体底物 -1(insulin receptor substrate-1, IRS-1) 的丝氨酸残基在 S 616 S 636 和 S 312 的磷酸化水 平直接关系到 IR 反应的敏感性, 与下游的胰岛素 信号通路紧密联系, 在 AD 脑内及 AD 动物模型中 表现异常 研究发现 AD 脑内 PS 616 是调节胰岛素抵 抗的关键, 与 Aβ 斑块沉积的 AD 病变相关,GLP-1 的类似物利拉鲁肽增加 AD 模型脑内 PS 616 水平, 改 善 IR 状态, 降低星形胶质细胞和小胶质细胞的数 量以及减少 Aβ 斑块 [20] 此外,GLP-1 通过 PI3K-AKT 途径调节胰岛素 敏感性分子 GLUT,GLUT 参与将葡萄糖由神经细 胞外转运至神经元内的催化过程, 因而对脑内葡 萄糖的摄取至关重要 研究报道 GLP-1 可通过激活 GLUT 的转位促进脑内葡萄糖代谢, 并维持脑内血 糖平衡 [21] GLP-1 通过 GLP-1R 介导激活 PKA 和 PI3K 等信号分子, 因此可补偿 AD 脑内受损的胰岛 素信号, 参与调节神经元的生长 分化 再生及 修复等 [22], 发挥神经保护作用 3.2 保护神经细胞减少凋亡 神经元大量缺失 神经细胞凋亡与 AD 脑内的 神经退行性病变密切相关 GLP-1 的神经保护作用 对调节神经细胞的生存与凋亡有重要影响 GLP-1 作为一种神经营养因子能够促进神经突起生长并 减少神经元和突触的氧化损伤, 促进神经轴突的 生长 防止神经元兴奋性细胞死亡等 [23] ;GLP-1 通 过介导胰岛素信号通路下游 PKA-PI3K 等分子, 激 活下游丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen-activated protein kinase, MAPK), 这一通路激活下游编码的基因和 转录因子的表达, 促进生成细胞生长和修复所必 需的蛋白质, 与促进神经细胞和突触的生长 调 节海马突触的可塑性 增加学习与记忆能力等功 能有关 [24] 此外,GLP-1 及其类似物可保护培养的 神经细胞抵抗营养因子缺乏诱导的氧化应激损伤 及细胞凋亡 [25] 3.3 抵御 Aβ 损伤 AD 患者大脑海马以及皮质内聚集大量 Aβ 斑 块,Aβ 毒性诱导神经退行性病变并损伤学习记忆 能力 研究表明 GLP-1 可减少 Aβ 的产生和沉积 拮抗 Aβ 的神经毒性 抵御 Aβ1-42 诱导的神经细胞 死亡, 保护神经元免受 Aβ 损伤 [26] 在体实验表明 利拉鲁肽减少 AD 模型小鼠脑内 Aβ 斑块的沉积, 减 少记忆功能障碍 [14] GLP-1 与 GLP-1R 结合通过 G 蛋 白偶联激活 PKA 信号促使 APPα 分泌酶活性增加, 从而水解 Aβ 片段, 减少 Aβ 的形成和沉积 ; 而且, AD 脑内持续增加的 Aβ 导致细胞内的 Ca 2+ 浓度升高,

4 676 生命的化学 2013 年 33 卷 6 期综述 钙超载直接导致细胞的变性坏死, 而 GLP-1 激活的 PKA 分子能够促进钙离子通道开放, 进而维持细胞内的钙稳态, 防止 Aβ 诱导的细胞内钙超载 [27] ; 此外,Aβ 诱导的突触功能障碍和长时程增强 (longterm potentiation, LTP) 效应的减弱有关,LTP 是传入神经受到强直刺激后使突触传递出现的长时间增强效应, 与神经系统突触可塑性和存贮信息机制相关,GLP-1 通过激活 PKA, 兴奋谷氨酸转运体 增加海马齿状回的谷氨酸摄取, 从而调节神经递质的释放和突触传递, 增强 LTP, 防止 Aβ 诱导的突触可塑性障碍 [28] 3.4 减少 Tau 蛋白异常过度磷酸化 AD 脑内过度磷酸化的 Tau 蛋白聚积在细胞胞体和轴突内, 形成 NFT 聚集, 引起轴突转运障碍, 影响神经元的形态和功能并最终导致神经退行性变 Tau 蛋白异常过度磷酸化可能是其相应调节酶类蛋白激酶或磷酸激酶活性改变所致, 如 GSK3 直接参与调节 Tau 蛋白磷酸化 [19],MAPK 通路中的细胞外信号调节激酶 (extracellular signal regulated kinase, ERK) 和 Jun-N 末端激酶 / 应激活化蛋白激酶 (Jun N-terminal kinase/stress activated protein kinase, JNK/SAPK), 直接或间接参与诱导 Tau 蛋白的过度磷酸化和聚集 [24] GLP-1 改善胰岛素信号通路中 Akt GSK3 等激酶的活性, 对 Tau 蛋白磷酸化的调节有重要影响 已有研究证明 GLP-1 及其类似物艾塞那肽可降低脑内 Tau 蛋白的过度磷酸化并提高 AD 模型的学习记忆能力 [29] 艾塞那肽通过 PKB/ Akt 途径调节 GSK-3β 的活性, 使其 Ser9 位的磷酸化水平增加, 进而调节 Tau 蛋白磷酸化 [30] 4 结语目前对 AD 的治疗尚缺乏有效的药物, 而鉴于 T2DM 与 AD 的相关性以及 GLP-1 的神经保护作用, 利用 GLP-1 干预 AD 成为近年研究热点 GLP-1 通过改善 AD 脑内受损胰岛素信号 胰岛素抵抗以及糖代谢障碍, 参与调节神经元的生长 分化 再生 修复及凋亡, 发挥神经保护作用 而且大量研究已证实 GLP-1 及其类似物能够减少神经元凋亡 抵御 Aβ 毒性和减少 Tau 蛋白过度磷酸化等 AD 发生的病理表现, 明显改善 AD 模型的认知记忆能力 因此,GLP-1 及其类似物在改善 AD 的 神经退行性病理改变以及治疗方面具有潜在应用 价值 参考文献 [1] Attems J, Thal DR, Jellinger KA. The relationship between subcortical tau pathology and Alzheimer's disease. Biochem Soc Trans, 2012, 40: [2] Takata K, Kitamura Y, Taniguchi T. Pathological changes induced by amyloid-β in Alzheimer's disease. Yakugaku Zasshi, 2011, 131: 3-11 [3] Duarte AI, Candeias E, Correia SC, et al. Crosstalk between diabetes and brain: glucagon-like peptide-1 mimetics as a promising therapy against neurodegeneration. Biochim Biophys Acta, 2013, 1832: [4] Xu WL, von Strauss E, Qiu CX, et al. Uncontrolled diabetes increases the risk of Alzheimer's disease: a population-based cohort study. Diabetologia, 2009, 52: [5] Candeias E, Duarte AI, Carvalho C, et al. The impairment of insulin signaling in Alzheimer's disease. IUBMB Life, 2012, 64: [6] Craft S, Baker LD, Montine TJ, et al. Intranasal insulin therapy for Alzheimer disease and amnestic mild cognitive impairment: a pilot clinical trial. Arch Neurol, 2012, 69: [7] De la Monte SM. Brain insulin resistance and deficiency as therapeutic targets in Alzheimer's disease. Curr Alzheimer Res, 2012, 9: [8] Padurariu M, Ciobica A, Hritcu L, et al. Changes of some oxidative stress markers in the serum of patients with mild cognitive impairment and Alzheimer s disease. Neurosci Lett, 2010, 469: 6-10 [9] Labak M, Foniok T, Kirk D, et al. Metabolic changes in rat brain following intracerebroventricular injections of streptozotocin: a model of sporadic Alzheimer's disease. Acta Neurochir Suppl, 2010, 106: [10] Kim H, Lee J, Kim TH, et al. Albumin-coated porous hollow poly(lactic-co-glycolic acid) microparticles bound with palmityl-acylated exendin-4 as a long-acting inhalation delivery system for the treatment of diabetes. Pharm Res, 2011, 28: [11] Barnett AH. The role of GLP-1 mimetics and basal insulin analogues in type 2 diabetes mellitus: guidance from studies of liraglutide. Diabetes Obes Metab, 2012, 14: [12] Jendle J, Martin SA, Milicevic Z. Insulin and GLP-1 analog combinations in type 2 diabetes mellitus: a critical review. Expert Opin Investig Drugs, 2012, 21:

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