SOLA SPE 小柱和96孔板 技术指南

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1 Thermo Scientific SOLA SPE 小柱和 96 孔板技术指南 请一起见证革命无与伦比的性能

2 请一起见证革命新一代 SPE Thermo Scientific SOLA 产品将彻底改变固相萃取 (SPE) 技术 首个无筛板 SPE 产品系列提供更优良的重现性以及更洁净 更一致的萃取结果 SOLA 产品与传统的 SPE 去磷脂和蛋白沉淀产品相比具有无与伦比的性能 包括 : 更高的重现性 更高水平的萃取物洁净度 更少的溶剂要求 增强的灵敏度 SOLA 产品生产使用专利的制造工艺, 将聚乙烯筛板材料和基质组分融为均一的吸附柱床, 从而无需筛板, 避免了传统小柱式 SPE 产品通常存在的问题 ( 图 1) 图 1:SOLA 消除了传统 SPE 的常见问题

3 这种制造工艺还能从组份中去除可萃取的杂质, 从而得到更加洁净的样品萃取物 SOLA 产品具有更低的故障率 更快的分析速度和更少的溶剂要求, 这些对于当今的实验室环境至关重要 SOLA 产品增强的性能让分析结果更加可信, 同时分析成本更低, 并且操作简单, 也无需复杂的方法开发 传统的 SPE 小柱和孔板都在两层筛板之间装填了松散的硅胶粉末或聚合物材料 这些填充床在生产和运输过程中容易沉降或流失 这会导致相沟流效应和填料不可重复性, 降低回收率和分析结果的重现性 ( 图 2) 图 2: 传统 SPE 产品存在的问题 技术指南 3

4 技术信息 下面的内容着重强调了 SOLA 产品相比传统散装 SPE 产品的多种优势 更高的重现性和回收率 图 3 显示了 SOLA 产品分析三化合物 ( 咖啡因 氢化可的松 卡马西平 ) 时的重现性和回收率, 以及与其它两种相同填料重量的竞争产品的比较 数据显示即使是采用竞争产品推荐的通用方法,SOLA 产品也较优 误差带表明, 对于每种样品,SOLA 产品的结果一致性都明显优于传统的 SPE 产品, 能够确保您每次都获得正确的结果 SOLA 精度 (%RSD) 2.7 竞争产品 (i) 精度 (%RSD) 21.8 竞争产品 (ii) 精度 (%RSD) 7.8 1% 9% 8% 7% 6% 5% 4% 3% 2% 1% % SOLA 图 3:SOLA 的重现性和回收率显著高于其它产品 咖啡因氢化可的松卡马西平 方法 SOLA 精密度 (%RSD) 竞争产品 (i) 精密度 (%RSD) 竞争产品 (ii) 精密度 (%RSD) 活化 : 平衡 : 上样 : 冲洗 : 洗脱 : 2μL 甲醇 2μL 水 1mL 样品 2μL 5% 甲醇水溶液 2μL 甲醇 4 技术指南

5 提高重现性 图 4 显示了 SOLA 产品分析三种化合物 ( 咖啡因 氢化可的松 卡马西平 ) 时的重现性, 以及与其它两种相同填料重量的竞争产品的比较 数据显示 SOLA 产品对于所有三个测试样品均具有一致的回收率 传统的竞争性 SPE 产品 (i) 显示, 平均每四个样品中有一个显著较低的回收率 这导致结果不一致 相比之下, SOLA 产品具有明显更高的重现性, 这对于高通量研究至关重要 图 5 进一步说明了 SOLA 产品更高的重现性, 图中显示 SOLA 产品相比其它两种相同填料重量的竞争产品具有更佳的一致性 咖啡因 12.% 1.% 8.% 6.% 4.% 2.%.% 氢化可的松 12.% 1.% 8.% 6.% 4.% 2.%.% 卡马西平 12.% 1.% 8.% 6.% 4.% 2.%.% 图 4: 竞争产品与 SOLA 产品相比, 结果不一致 SOLA 图 5:SOLA 产品相比竞争性产品具有更佳的一致性 技术指南 5

6 血浆的重现性 由于本身性质, 生物基质如血浆难以获得可重复的结果 SOLA 产品卓越的性能特性确保即使是分析这些复杂的基质也能够提供更高重现性 这些特性已经由使用 SOLA 96 孔板从人血浆中提取罗苏伐他汀 (rosuvastatin) 得到证实 图 6 显示了整板萃取固定浓度分析物的精密度数据 这能够通过图 7 更直观的看到, 图中显示了随机选择的罗苏伐他汀叠加色谱图 罗苏伐他汀 (96 次重复的面积 ) d6- 罗苏伐他汀 (96 次重复的面积 ) 响应率 (96 次重复 ) 精密度 (%RSD) 图 6: 罗苏伐他汀精密度 (%RSD) 数据 图 7: 罗苏伐他汀叠加色谱图 更高的灵敏度和更少的溶剂消耗 图 8 显示 SOLA 产品即使在使用少量的萃取溶剂时, 也能够得到出色的回收率, 从而得到更高浓度的分析物并提高灵敏度 此外, 减少的样品 缩短的干燥时间以及更少的溶剂用量能够进一步节省成本和时间 这种小体积萃取很难使用传统的 SPE 产品进行 见图 9: 图 8: 洗脱液体积较小时,SOLA 产品能够得到高回收率, 提高样品浓度及灵敏度 6 技术指南

7 SOLA 产品在小萃取体积时的回收率和重现性显著优于传统的竞争产品 1.% 8.% % 回收率 6.% 4.% 2.%.% -2.% 15µL 2µL 25µL 误差带表明, 对于每种样品, SOLA 的结果一致性都明显优于传统的 SPE 产品 这能确保每次都获得正确的结果, 即使是小洗脱体积的条件下也是如此 在这种小洗脱体积条件下, 传统的 SPE 产品无法在重现性和回收率水平上与 SOLA 产品竞争 SOLA 咖啡因 1.% 8.% % 回收率 6.% 4.% 2.%.% -2.% 15µL 2µL 25µL 咖啡因 氢化可的松和卡马西平在洗脱体积为 15µL 时, SOLA 产品的回收率水平显著高于竞争性 SPE 产品 SOLA 氢化可的松 1.% 8.% 6.% % 回收率 4.% 2.%.% -2.% 15µL 2µL 25µL SOLA 卡马西平 图 9: 小洗脱体积时 SOLA 产品的回收率和重现性 技术指南 7

8 萃取物洁净度 SOLA 产品的专利生产工艺能够提供更清洁的产品, 从而得到更洁净的样品萃取物 如图 1 所示, SOLA 产品和传统的 SPE 竞争产品 (i) 分别经乙腈 二氯甲烷和甲醇洗脱后的结果比较 1 9 SOLA 竞争产品 (i) 乙腈洗脱结果比较 :SOLA 产品与竞争产品 (i) 1 9 SOLA 竞争产品 (i) 二氯甲烷洗脱结果比较 :SOLA 产品与竞争产品 (i) 1 9 SOLA 竞争产品 (i) 甲醇洗脱结果比较 :SOLA 产品与竞争产品 (i) 图 1:SOLA 产品的清洁度显著优于其它 SPE 竞争产品 (i) 8 技术指南

9 相比其它样品制备技术, 如蛋白沉淀和去磷脂板,SOLA 产品为样品萃取物提供更好的选择性 更优异的重现性和洁净度 如图 11, 图中显示了相应技术的 MS 等高线图 由图可知 SOLA 产品能够提供更洁净的样品萃取物, 为您的分析结果提供更高的可靠性 m/z 6 m/z 蛋白沉淀 去磷脂板 使用 SOLA AX 能够显著消除干扰 m/z SOLA AX 图 11: 蛋白沉淀 去磷脂板和 SOLA AX 的 MS 等高线图 技术指南 9

10 如果在初次样品制备过程中未能去除基质干扰, 可能会导致样品间严重的磷脂残留 图 12 显示了后续空白进样的 MS 等高线图 如图所示, 蛋白沉淀和去磷脂产品相比 SOLA 产品明显具有更多的残留 去除磷脂对于降低离子抑制 实现更高的 MS 检测灵敏度 以及提高分析结果可靠性至关重要 这还能够避免昂贵的色谱柱和系统维护需求 m/z 6 m/z 蛋白沉淀 去磷脂板 后续的空白进样显示 SOLA AX 具有干净的 MS 等高线图 m/z SOLA AX 1 技术指南 图 12: 后续空白进样的 MS 等高线图 蛋白沉淀 去磷脂和 SOLA AX

11 SOLA 产品使用方法 前面的数据显示 SOLA 产品优于传统 SPE 产品的性能, 即使是使用竞争厂商指定的方法 下述的通用 SOLA 产品方法将作为大多数样品萃取实验方案的起始步骤 小柱和 96 孔板的通用方法 SOLA 反相 SOLA CX 混合模式阳离子交换 SOLA AX 混合模式阴离子交换 活化 : 5µL 甲醇 平衡 : 5µL 水 上样 : 5 至 5µL 样品, 流 1mL/min 清洗 : 5µL 5% 甲醇水溶液 洗脱 : 2µL - 5µL 甲醇 活化 : 平衡 : 5µL 甲醇 5µL 含 1% 甲酸水溶液 上样 : 5 至 5µL 样品, 流速 1mL/min 含 1% 甲酸清洗 1: 5µL 含 1% 甲酸的水溶液清洗 2: 5µL 含 1% 甲酸的甲醇溶液洗脱 : 2µL - 5µL 含 1% 氢氧化铵的甲醇 活化 : 平衡 : 5µL 甲醇 5µL 含 1% 氢氧化铵的水溶液 上样 : 5 至 5µL 样品, 流速 1mL/min 含 1% 氢氧化铵清洗 1: 5µL 含 1% 氢氧化铵的水溶液清洗 2: 5µL 含 1% 氢氧化铵的甲醇溶液洗脱 : 2µL - 5µL 含 1% 甲酸的甲醇溶液 更多应用 SOLA 产品提高您的样品制备的建议, 请访问色谱资源中心 (Chromatography Resource Center), 网址为 技术指南 11

12 使用 SOLA CX 分析尿液中的 Beta 阻断剂阿替洛尔 吲哚洛尔 美托洛尔 普萘洛尔 阿普洛尔 SOLA CX SPE 方案 产品 : SOLA CX 1mg/mL 小柱 p/n 基质 : 尿液 活化 : 5µL 甲醇 平衡 : 5µL 水 上样 : 2µL 加标尿液 清洗 1: 25µL 水 +.1% 甲酸 清洗 2: 25µL 甲醇 +.1% 甲酸 洗脱 : 25µL 8:2 (v/v) DCM:IPA + 5% 氢氧化铵 吹干 : 氮气 复溶 : 2µL 9:1 (v/v) 水 : 甲醇 HPLC 条件 仪器 : 色谱柱 : 流动相 A: 流动相 B: Thermo Scientific HPLC Thermo Scientific Accucore C18 5μm 5 x 2.1mm p/n 水 +.1% 甲酸甲醇 +.1% 甲酸 梯度 : t/min %A %B 流速 :.7mL/min 柱温 : 45 C 进样体积 : 1μL 检测器波长 : 22nm mau 化合物阿替洛尔吲哚洛尔美托洛尔普萘洛尔阿普洛尔 精度 (% RSD) % 回收率 应用说明

13 使用 SOLA 进行 LC-MS/MS 方法检测人血浆中的恩纳普利和依那普利拉恩纳普利 依那普利拉 贝那普利 (IS) SOLA SPE 方案 产品 : SOLA 1mg/2mL 96 孔板 p/n 基质 : 人血浆 活化 : 1mL 甲醇 平衡 : 1mL 水 上样 : 2µL 含内标物的加标人血浆 清洗 : 2µL 水 +.1% 甲酸 洗脱 : 2 x 2μL 甲醇 + 2% 氨 吹干 : 氮气 复溶 : 2μL 9:1 (v/v) 水 : 甲醇 HPLC 条件 仪器 : 分析柱 : 流动相 A: 流动相 B: Thermo Scientific HPLC Thermo Scientific Hypersil GOLD 1.9μm, 5 x 2.1mm p/n 水 +.1% 甲酸乙腈 +.1% 甲酸 梯度 : t/min %A %B 流速 :.6mL/min 柱温 : 7 C 进样体积 : 2.5µL MS 条件 化合物 % 回收率精度 (%RSD) 仪器 : Thermo Scientific TSQ Vantage 离子化条件 : HESI 极性 : 正 喷雾电压 : 3V 气化室温度 : 317 C 鞘气压力 : 52psi 离子吹扫压力 : psi 辅助气压力 : 43psi 毛细管温度 : 37 C 解聚电压 : V 碰撞压力 : 1.5 循环时间 (s):.2 Q1 (FWHM):.7 Q3 (FWHM):.7 准确度 (% 标准差 ) 恩纳普利 依那普利拉 化合物恩纳普利依那普利拉贝那普利 (IS) 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碰撞能量 (ev) S-lens 恩纳普利 依那普利拉 应用说明 13

14 使用 SOLA CX 从人血浆中分离碱性和中性物质普鲁卡因胺 阿米替林 氢化可的松 泼尼松龙 孕酮 (IS) SOLA CX SPE 方案 产品 : SOLA CX 1mg/mL 小柱 p/n 基质 : 人血浆和尿液 活化 : 1µL 甲醇 平衡 : 1µL 水 上样 : 35µL 样品 清洗 : 35µL 水 + 2% 甲酸 洗脱液 1: 35µL 甲醇 洗脱液 2: 35µL 甲醇 + 5% 氨 稀释或酌情吹干后复溶 mau 中性内标 ( 上方曲线 ), 碱性内标 ( 下方曲线 ) 显示共流出化合物 2 和 HPLC 条件 仪器 : 色谱柱 : 流动相 A: 流动相 B: 纯标准品 Thermo Scientific HPLC Thermo Scientific Accucore RP-MS 2.6μm, 5 x3mm p/n mM 醋酸铵乙腈 梯度 : t/min %A %B 流速 :.8mL/min 柱温 : 25 C 进样体积 : 1μL 检测器波长 : 254nm 化合物 % 回收率 精密度 (% RSD) 1. 普鲁卡因胺 普萘洛尔 阿密曲替林 孕酮 内标 5. 氢化可的松 泼尼松龙 mau 碱性物萃取 尿液 化合物 % 回收率 精密度 (% RSD) 1. 普鲁卡因胺 普萘洛尔 阿密曲替林 孕酮 内标 5. 氢化可的松 泼尼松龙 mau 化合物 % 回收率 精密度 (% RSD) 1. 普鲁卡因胺 普萘洛尔 阿密曲替林 孕酮 内标 5. 氢化可的松 泼尼松龙 应用说明 中性物萃取 血浆

15 使用 SOLA CX 进行 LC-MS/MS 方法检测人血浆中的 HCTZ 和氯沙坦 HCTZ 氯沙坦 利尿磺胺 (furosemide) (IS) SOLA CX SPE 方案 产品 : SOLA CX 1mg/mL 小柱 p/n 基质 : 人血浆 活化 : 1mL 甲醇 平衡 : 1mL 水 上样 : 1µL 含内标物的加标人血浆 清洗 : 2µL 水 +.1% 甲酸 洗脱 : 2µL 乙腈 + 3% 氨 吹干 : 氮气 复溶 : 1µL 8:2 (v/v) 水 : 乙腈 HPLC 条件 仪器 : 色谱柱 : 流动相 A: 流动相 B: Thermo Scientific HPLC Thermo Scientific Accucore aq, 2.6 µm, 5 x 2.1mm p/n 水 +.1% 甲酸乙腈 +.1% 甲酸 梯度 : t/min %A %B 流速 :.4mL/min 柱温 : 4 C 进样体积 : 2.5µL % 回收率精密度 (%RSD) 准确度 (% 标准差 ) 低 QC 高 QC 低 QC 高 QC 氯沙坦 HCTZ MS 条件 仪器 : Thermo Scientific TSQ Vantage 离子化条件 : HESI 极性 : + 氯沙坦 / - HCTZ 和利尿磺胺 喷雾电压 : 3V 气化室温度 : 3 C 鞘气压力 : 6psi 离子吹扫压力 : psi 辅助气压力 : 3psi 毛细管温度 : 3 C 解聚电压 : V 碰撞压力 : 1.5 循环时间 (s):.5 Q1 (FWHM):.7 Q3 (FWHM):.7 氯沙坦 HCTZ 化合物 HCTZ 氯沙坦 利尿磺胺 (IS) 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碰撞能量 (ev) S-lens 应用说明 15

16 使用 SOLA CX 进行 UV 方法检测人血浆中的三环类抗抑郁剂三环类抗抑郁剂 SOLA CX SPE 方案 产品 : SOLA CX 1mg/mL 小柱 p/n 基质 : 人血浆 活化 : 5µL 甲醇 平衡 : 5µL 水 上样 : 45µL 1:2 血浆 + 1mM PBS 缓冲液 (ph 6.) 清洗 1: 5µL 水 +.1% 甲酸 清洗 2: 5µL 甲醇 +.1% 甲酸 洗脱 : 5µL 乙腈 + 5% 氢氧化铵 吹干 : 氮气不加热 复溶 : 15µL 8:2 (v/v) 水 : 乙腈 HPLC 条件 仪器 : Thermo Scientific HPLC 色谱柱 : Thermo Scientific Hypersil GOLD 3μm, 15 x 2.1mm p/n 流动相 : 7:3 (v/v) 水 +.1% 甲酸 / 乙腈 +.1% 甲酸 运行时间 : 7.5 分钟 流速 :.4mL/min 柱温 : 3 C 进样体积 : 1μL 检测器波长 : 254 nm mau 化合物多塞平米帕明阿米替林曲米帕明 (IS) 精密度 (%RSD) % 回收率 应用说明

17 使用 SOLA 进行 LC-MS/MS 方法检测人血浆中的卡培他滨卡培他滨 SOLA SPE 方案 产品 : SOLA 1mg/mL 小柱 p/n 基质 : 人血浆 活化 : 5μL 甲醇 平衡 : 5μL 水 上样 : 2μL 加标血浆 清洗 : 2μL 8:2 (v/v) 水 : 甲醇 洗脱 : 25μL 甲醇 吹干 : 氮气 复溶 : 2μL 水 HPLC 条件 仪器 : 色谱柱 : 流动相 A: 流动相 B: Thermo Scientific HPLC Thermo Scientific Accucore PFP 2.6μm, 3 x 2.1mm p/n 水乙腈 梯度 : t/min % A %B 流速 : 1.mL/min 柱温 : 4 C 进样体积 : 1μL MS 条件 化合物 仪器 : Thermo Scientific TSQ Vantage 离子化条件 : HESI 极性 : 负 喷雾电压 : 25V 气化室温度 : 35 C 鞘气压力 : 75psi 离子吹扫压力 :.5psi 辅助气压力 : 45psi 毛细管温度 : 3 C 解聚电压 : V 碰撞压力 : 1.5 循环时间 (s):.5 Q1 (FWHM):.7 Q3 (FWHM):.7 卡培他滨 精密度 (%RSD) 2.3 % 回收率 73.2 卡培他滨 化合物卡培他滨卡培他滨 -D8 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碰撞能量 (ev) S-lens 应用说明 17

18 总结 相比传统的 SPE 产品,SOLA 产品具有 : 显著提高的重现性 更佳的一致性和更高的回收率 更高的萃取物洁净度 更低的溶剂要求 增强的灵敏度 更高的样品通量 在当今严苛的实验室环境中, 结果的重现性和可靠性以及成本的节约是最基本的要求, SOLA 产品是增加可靠性并确保第一次和每一次分析都获得成功的必不可少的工具 传统的 SPE 将被淘汰 请与 SOLA 产品一起见证这场革命 产品信息 : SOLA 产品具有 1mg/mL 小柱和 1mg/2mL 96 孔板形式可供选择 SOLA SPE 小柱 描述 柱床重量 柱体积 (ml) 货号 数量 SOLA 1mg 1mL SOLA CX 1mg 1mL SOLA AX 1mg 1mL SOLA 96 孔板 描述 柱床重量 柱体积 (ml) 货号 数量 SOLA 1mg 2mL SOLA CX 1mg 2mL SOLA AX 1mg 2mL 更多关于方法开发和应用的信息, 请访问 : 18 技术指南

19 我们在应用和方法开发方面无与伦比的产品组合和经验将帮助您面对任何仪器上的任何挑战 您将发现最全面的色谱耗材产品组合和环境采样产品 试剂和标样 GC 色谱柱和附件 HPLC 和 LC-MS 环境采样 样品瓶和瓶盖 样品制备 色谱资源中心请搜索我们包含上千应用的数据库网址 :

20 色谱工作者资源 Thermo Scientific HyperSep 色谱柱应用说明书我们全新的 SPE 应用说明书包括超过 15 种应用说明专注于制药 / 生物技术 环境 食品安全和法医解决方案 请访问 色谱资源中心我们基于网络的资源中心可为您提供技术支持 应用 技术指导以及文献, 以帮助您改善色谱分离 请访问 Thermo Fisher Scientific Inc 保留所有权利 所有商标都是 Thermo Fisher Scientific Inc. 及其子公司所有 规格 条款和价格如有变更, 恕不另行通知 并非所有产品在所有国家 ( 地区 ) 都有提供 有关详细信息, 请联系您本地的销售代表 美国和加拿大 法国 +33 () 德国 +49 () 或 21 英国 +44 () 日本 中国 印度 澳大利亚 (free call domestic) 新西兰 (free call domestic) 所有其他地区 +44 () 技术支持北美 北美以外地区 +44 () BRCCSSOLA1111

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