喝 水 的 另 類 功 效 -- 唾 液 α 澱 粉 酶 活 化 在 正 常 年 輕 人 飲 水 後 導 致 低 張 性 血 管 收 縮 現 象 的 生 理 角 色 馬 瑪 宣 1* 呂 志 成 2 蘇 淑 菁 1 李 孟 紘 1 臺 北 市 私 立 復 興 實 驗 高 中 3 2 臺 北 榮 民 總 醫 院 長 庚 大 學 資 訊 工 程 學 系 3 壹 前 言 無 論 是 國 中 高 中 或 是 大 學 課 程, 神 經 系 統 與 內 分 泌 系 統 的 協 調 作 用 一 直 是 生 物 課 程 中 的 重 要 章 節 在 最 新 的 99 課 綱 版 高 中 選 修 生 物 課 程 中, 更 加 入 了 有 關 神 經 內 分 泌 及 免 疫 的 關 係 介 紹 但 是 鮮 為 人 知 的 是, 喝 水 - 這 個 日 常 生 活 中 平 凡 無 奇 的 活 動, 也 能 增 加 交 感 神 經 活 性 以 及 其 他 程 度 不 等 的 心 血 管 生 理 反 應, 甚 至 與 唾 液 α- 澱 粉 酶 分 泌 有 關 本 文 希 望 能 夠 說 明 對 壓 力 與 自 主 神 經 系 統 的 關 係 喝 水 對 於 交 感 神 經 系 統 活 性 的 影 響 唾 液 腺 及 唾 液 α- 澱 粉 酶 等 內 容, 讓 讀 者 更 能 體 會 神 經 與 內 分 泌 協 調 相 關 性 此 外, 筆 者 並 進 行 喝 水 對 於 唾 液 α- 澱 粉 酶 分 泌 影 響 的 實 驗, 其 實 驗 方 法 可 以 作 為 中 小 學 教 師 在 教 授 酵 素 活 性 此 一 章 節 的 進 階 課 程 內 容 參 考 * 為 本 文 通 訊 作 者 貳 壓 力 與 自 主 神 經 系 統 及 內 分 泌 系 統 協 調 作 用 當 個 體 面 對 即 時 性 危 險 短 期 壓 力 時, 刺 激 會 活 化 下 視 丘, 使 交 感 神 經 興 奮, 刺 激 腎 上 腺 髓 質 釋 出 腎 上 腺 素 及 正 腎 上 腺 素, 使 血 糖 升 高 血 壓 升 高 呼 吸 加 速 處 於 緊 張 狀 態 抑 制 消 化 功 能, 有 利 於 個 體 面 對 壓 力 危 險 時 的 及 時 反 應 ; 然 而, 當 個 體 面 對 長 期 壓 力 時 ( 如 升 學 工 作 ), 刺 激 使 下 視 丘 分 泌 促 腎 上 腺 皮 質 素 釋 素, 進 而 使 腦 垂 腺 前 葉 分 泌 促 腎 上 腺 皮 質 素 (ACTH), 使 腎 上 腺 皮 質 分 泌 葡 萄 醣 皮 質 素 及 礦 物 性 皮 質 素, 引 起 鈉 離 子 與 水 分 的 儲 積 增 加 增 加 體 液 容 積 血 壓 上 升, 蛋 白 質 及 脂 質 的 代 謝 異 常, 免 疫 失 調 等 反 應 參 喝 水 對 於 交 感 神 經 系 統 活 性 的 影 響 近 年 來 臨 床 神 經 生 理 學 家 發 現, 喝 水 會 誘 發 程 度 不 等 的 心 血 管 生 理 反 應 自 律 神 經 失 調 的 病 人, 飲 水 473 ml 後 其 血 壓 有 立 即 上 升 30-100 mmhg 的 現 象 ; 另 外 也 - 17 -
科 學 教 育 月 刊 第 364 期 中 華 民 國 102 年 11 月 有 實 驗 發 現, 喝 水 對 於 健 康 的 中 年 或 老 年 人 也 會 造 成 血 壓 些 微 上 升 的 情 形 (11 mmhg), 相 對 於 年 輕 人 體 則 未 觀 察 到 此 升 壓 現 象 (Li et al., 2013) 但 有 研 究 指 出, 年 輕 個 體 喝 水 後, 會 造 成 周 邊 血 管 收 縮, 皮 下 血 流 (Skin Blood Flow) 減 少 的 情 形 此 乃 因 為 喝 水 會 促 使 週 邊 交 感 神 經 系 統 興 奮, 進 而 導 致 血 管 收 縮 所 致 另 外, 喝 水 亦 會 造 成 腦 中 局 部 血 流 增 加, 提 升 其 立 姿 耐 受 力 所 謂 立 姿 耐 受 力 是 指 正 常 人 從 坐 姿 轉 換 成 立 姿, 在 交 感 神 經 系 統 調 節 下, 心 跳 上 升, 血 壓 不 變 ; 但 是 在 自 主 神 經 失 調 的 病 人, 從 坐 姿 轉 換 成 立 姿, 心 跳 不 變, 血 壓 下 降, 此 乃 在 重 力 作 用 之 下, 血 液 向 下 肢 囤 積, 自 主 神 經 適 應 不 良 所 引 起, 稱 之 為 姿 勢 性 低 血 壓 飲 水 生 理 作 用 就 在 臨 床 的 潛 在 應 用, 目 前 確 認 可 以 有 效 緩 解 自 主 神 經 失 衡 病 人 的 立 姿 低 血 壓 與 耐 受 不 良 症 候 群, 也 證 明 可 以 有 效 改 善 正 常 年 輕 人 昏 厥 前 症 候 並 預 防 昏 厥 的 發 生 (Li et al., 2013) 另 外 飲 水 亦 可 以 達 到 降 低 正 常 人 因 捐 血 後 昏 厥 的 發 生 率 (Hanson SA, France CR.,2004) 因 此 推 論 透 過 喝 水 調 節 人 體 自 主 神 經 功 能 的 方 式, 也 許 是 提 升 軍 事 訓 練 如 飛 行 員 飛 行 可 能 面 臨 的 G 力 昏 迷 (G-force induced Loss of Consciousness, G-LOC) 的 棘 手 問 題 可 行 策 略 之 所 謂 大 G 力 昏 迷, 是 指 飛 行 員 由 於 加 速 度 G 力 所 引 起 灰 視 黑 視 進 而 失 去 對 周 圍 環 境 的 知 覺 進 而 造 成 瞬 間 意 識 喪 失 若 症 狀 輕 微 則 有 心 博 過 速 問 題, 造 成 血 液 向 下 肢 囤 積, 使 大 腦 血 液 循 環 降 低 而 引 起 短 暫 性 喪 失 意 識 的 症 狀 然 而, 喝 水 與 自 主 神 經 的 相 互 作 用 關 係 仍 不 清 楚, 可 能 與 水 本 身 的 低 張 特 性, 經 口 進 入 腸 胃 道 系 統 所 引 發 的 生 理 作 用 有 關, 但 仍 有 待 進 一 步 釐 清 其 詳 細 機 轉 (Chu et al., 2013) 肆 唾 液 腺 及 唾 液 澱 粉 酶 的 介 紹 口 腔 內 有 大 小 兩 種 唾 液 腺 (salivary glands), 小 唾 液 腺 散 在 於 各 部 口 腔 粘 膜 內, 如 唇 腺 頰 腺 齶 腺 舌 腺, 大 唾 液 腺 包 括 腮 腺 下 頜 下 腺 和 舌 下 腺 三 對, 它 們 是 位 於 口 腔 周 圍 的 獨 立 的 器 官, 但 其 導 管 開 口 於 口 腔 粘 膜 唾 液 腺 由 不 同 類 型 的 細 胞 組 成, 包 括 腺 泡 細 胞 (acinar cell) 各 種 管 道 系 統 的 細 胞 (various duct system cell), 肌 上 皮 細 胞 (myoepithelial cells) 其 中 腮 腺 (parotid gland) 最 大, 重 約 15-30 克, 略 呈 三 角 楔 形, 位 於 外 耳 道 前 下 方, 咬 肌 後 部 的 表 面, 腺 的 後 部 特 別 肥 厚, 深 入 到 下 頜 後 窩 內 分 泌 物 含 唾 液 澱 粉 酶 多, 黏 液 少 ; 下 頜 下 腺 (submandibular gland) 略 呈 卵 圓 形, 位 於 下 頜 下 三 角 內, 分 泌 物 含 唾 液 澱 粉 酶 少, 黏 液 多 ; 舌 下 腺 (sublingual gland) 最 小, 細 長 而 略 扁 位 於 口 底 粘 膜 深 面 其 排 泄 管 有 大 小 兩 種 小 管 約 有 5-15 條, 直 接 開 口 於 口 底 粘 膜, 分 泌 物 以 黏 液 為 主 唾 液 腺 的 主 要 產 物 為 唾 液 (Humphrey and Williamson,2001) 唾 液 的 成 分 主 要 - 18 -
喝水的另類功效--唾液α澱粉酶活化在正常年輕人飲水後導致低張性血管收縮現象的生理角色 由腺泡細胞產生 在神經刺激的控制之下 上 升 呢 為 了 瞭 解 喝 水 與 唾 液 -α 澱 粉 酶 的 釋放了唾液的成分 而大部分的酶是在腮 關係 我們做了以下的相關實驗 腺 合 成 占 總 量 的 80 唾 液 中 的 α -澱 實 驗 共 有 12 位 健 康 受 測 者 (BMI < 粉 酶 (Salivaryalpha-amylase, saa) 是 其 中 26) 受 測 者 在 實 驗 前 一 天 禁 止 飲 用 高 濃 度 之一最重要的酶 佔總唾液腺所產生蛋白 咖啡 巧克力以及茶葉等食物 實驗當天 質 的 40 至 50 Zakowski and Bruns 必須禁食八小時以上 所有實驗流程須在 1985; Makinen 1989 其 能 將 澱 粉 切 斷 中午以前完成 實驗共分為兩天進行 一 成長短不一的短鏈糊精和少量的低分子糖 天 為 喝 50 ml 的 控 制 組 另 一 天 則 是 喝 500 類 從而使澱粉糊的黏度迅速下降 即起 ml 的 實 驗 組 其 中 兩 天 順 序 採 用 隨 機 分 液化 作用 所以該酶又稱液化酶 作 配 以避免受測者因學習效應而影響實驗 用 溫 度 範 圍 為 60 90 最 適 作 用 溫 度 為 結果 實驗過程中 全程處於安靜 舒適 60 70 作 用 ph 範 圍 為 5.5 7.0 最 的狀態 在喝水之前取一次唾液當作當天 適 ph6.0 Ca2+可 提 高 酶 活 力 的 穩 定 性 的基礎值 收集完成之後才會進行喝水動 Leuchs 在 1831 年 首 次 在 唾 液 中 描 述 這 種 作 並 且 會 在 喝 完 水 之 後 的 25 分 鐘 以 及 酶 Zakowski and Bruns 1985 50 分 鐘 分 別 再 各 取 一 次 唾 液 當 作 喝 水 之 後的影響 圖 2 唾液收集瓶 圖 1 唾腺分部圖 我 們 利 用 唾 液 收 集 管 (Sarstedt, 伍 喝水對於唾液澱粉酶分泌的影 Germany)收 集 受 測 者 唾 液 將 棉 棒 部 分 放 響 根據前人研究 喝水能調節交感神經 入受測者舌下約 3 分鐘 其中禁止受測者 作 用 交 感 神 經 活 性 增 加 能 促 進 唾 液 α-澱 做咬嚼動作 收集完畢之後立即蓋緊上蓋 粉 酶 分 泌 而 喝 水 是 否 能 使 唾 液 α-酶 分 泌 並放入冰桶保存 當天實驗過程結束之 - 19 -
科 學 教 育 月 刊 第 364 期 中 華 民 國 102 年 11 月 後, 會 利 用 高 速 冷 凍 離 心 機 離 心, 其 條 件 設 定 為 3000 rpm,4,15 分 鐘 離 心 完 成 之 後, 唾 液 部 分 會 因 為 重 力 關 係 而 在 唾 液 收 集 管 下 層 將 上 層 蓋 子 移 除 之 後, 將 下 層 唾 液 分 裝 至 三 管 1.5 ml 離 心 管 其 中 第 一 管 為 實 驗 用, 第 二 管 為 重 複 檢 驗 時 使 用, 第 三 管 則 是 保 存 用 ; 分 裝 完 畢 之 後 立 即 將 檢 體 放 入 檢 體 保 存 紙 盒, 存 放 於 -80 以 利 後 續 檢 驗 使 用 檢 驗 試 劑 利 用 Salimetrics 的 salivaryα-amylase assay kit(salimetrics, USA) 其 中 唾 液 α- 澱 粉 酶 受 質 在 使 用 之 前 需 先 放 入 37 水 浴 槽 加 熱, 因 為 唾 液 α - 澱 粉 酶 的 活 性 主 要 是 在 37 會 達 到 高 峰 其 檢 測 原 理 主 要 是 利 用 唾 液 α- 澱 粉 酶 受 質 中 所 含 有 的 2-chloro-p-nitrophenol 鍵 結 上 maltotriose, 接 著 加 入 含 有 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 唾 液 時, 唾 液 α- 澱 粉 酶 就 會 將 其 鍵 結 打 斷, 這 個 時 候 即 可 利 用 405nm 波 長 的 吸 光 值 偵 測 到 2-chloro-p-nitrophenol, 再 利 用 讀 取 到 的 數 值 即 可 換 算 濃 度 收 集 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 活 性 濃 度 值 後, 將 以 Excel 軟 體 進 行 作 圖 及 分 析 利 用 第 25 分 鐘 和 第 50 分 鐘 的 值 去 和 當 天 基 礎 值 (baseline) 做 標 準 化 之 後, 比 較 酶 的 活 性 濃 度 的 變 化 量 利 用 這 個 方 法 比 較 飲 水 在 50mL 及 500mL 之 間 在 唾 液 α- 澱 粉 酶 活 性 濃 度 增 減 的 變 化 量 是 否 有 差 別 圖 表 中 數 值 以 與 原 點 校 正 後 之 百 分 比 平 均 值 表 示,p 值 小 於 0.05 表 示 有 統 計 上 的 顯 著 差 異 由 實 驗 結 果 得 知, 無 論 飲 水 50 ml ( 控 制 組 ) 或 500 ml ( 實 驗 組 ), 唾 液 α- 澱 粉 酶 活 性 濃 度 在 25 分 鐘 及 50 分 鐘 均 比 未 喝 水 時 高 ( 以 未 喝 水 的 唾 液 α- 澱 粉 酶 活 性 濃 度 為 100%), 控 制 組 為 (143.78% ;128.12%) 而 實 驗 組 為 (297.48%; 317.74%) 兩 組 濃 度 從 0 分 鐘 至 25 分 鐘 均 有 成 長 的 趨 勢, 但 至 50 分 鐘 時 控 制 組 有 遞 減 的 趨 勢 若 比 較 兩 組 之 間 在 喝 水 50 ml 及 500 ml 之 間 唾 液 α- 澱 粉 酶 濃 度 增 減 的 變 化 量 是 否 有 差 別, 發 現 飲 水 後 的 唾 液 α- 澱 粉 酶 平 均 濃 度 增 減 的 變 化 量, 且 無 論 在 25 分 鐘 及 50 分 鐘 其 唾 液 α- 澱 粉 酶 活 性 濃 度 均 有 顯 著 性 的 差 異 (p<0.05) (405 nm) 表 1 控 制 組 與 實 驗 組 在 不 同 時 間 點 的 唾 液 α- 澱 粉 酶 濃 度 變 化 Amylase 喝 水 50 ml 喝 水 500 ml Baseline 25 min 50 min Baseline 25 min 50 min Mean 100.00% 143.78% 128.12% 100.00% 297.48% 317.74% - 20 -
喝 水 的 另 類 功 效 -- 唾 液 α 澱 粉 酶 活 化 在 正 常 年 輕 人 飲 水 後 導 致 低 張 性 血 管 收 縮 現 象 的 生 理 角 色 表 2 飲 水 50mL 及 500mL 在 25 分 鐘 及 50 分 鐘 唾 液 α- 澱 粉 酶 濃 度 的 差 異 性 測 定 項 目 標 準 差 平 均 標 準 誤 95% 信 賴 區 間 顯 著 性 P<0.01 25 分 鐘 (Control vs Case) 50 分 鐘 (Control vs Case) Control: 飲 水 50mL 1.06 0.23-0.38 ~ -1.34 0.001 1.40 0.31-0.34 ~ -1.62 0.004 Case: 飲 水 500mL 由 實 驗 結 果 得 知, 喝 水 50 ml 及 500 ml 均 會 促 使 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 分 泌, 其 中 喝 水 500 ml 更 使 酶 的 活 性 濃 度 上 升 達 到 顯 著 差 異 結 合 前 人 的 研 究, 推 論 喝 水 能 使 交 感 神 經 活 性 上 升, 進 而 促 進 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 分 泌 陸 澱 粉 酶 酵 素 活 性 單 位 活 性 單 位 (activity unit) 是 酵 素 活 性 高 低 的 指 標 一 個 活 性 單 位 的 定 義, 是 在 固 定 溫 及 ph 下, 每 分 鐘 可 催 化 1 mmole 基 質 的 活 性 但 很 多 情 況 下, 為 了 操 作 或 計 算 的 方 便, 直 接 用 測 定 產 物 所 得 的 吸 光 值, 除 以 單 位 時 間 來 表 示 活 性, 因 此 活 性 單 位 的 定 義 可 能 不 同 一 般 澱 粉 酶 的 方 式 為 37 度 之 下 的 活 性 為 其 活 性 溫 度, 而 筆 者 的 實 驗 所 使 用 的 kit 為 利 用 第 3 分 鐘 所 得 到 的 吸 光 值 減 掉 第 1 分 鐘 得 到 的 吸 光 值, 所 得 到 的 差 值 代 表 澱 粉 酶 在 這 兩 分 鐘 之 間 催 化 了 多 少 的 基 質 之 後 在 乘 上 體 積, 所 得 到 的 數 值 就 是 活 性 單 位 柒 以 唾 液 澱 粉 酶 反 映 交 感 神 經 活 性 交 感 神 經 的 活 化 控 制 了 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 釋 放 因 此 在 交 感 神 經 活 化 性 高 時, 可 能 預 期 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 增 加 研 究 資 料 顯 示,Gilman 等 人 是 首 先 研 究 唾 液 α- 澱 粉 酶 和 心 理 壓 力 之 間 的 關 係, 將 受 試 者 暴 露 在 高 度 壓 力 長 達 八 天 之 久, 其 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 濃 度 將 升 高 (Gilman et al.,1979) 其 他 研 究 顯 示 不 同 心 理 壓 力 的 情 況 下, 唾 液 α- 澱 粉 酶 也 會 增 加, 如 經 歷 醫 療 程 序 (Yamaguchi et al.,2006), 情 感 圖 片 瀏 覽 (Van Stegeren et al.,2008) 因 此 無 論 在 較 早 或 近 期 的 研 究 壓 力 對 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 的 影 響, 均 發 現 心 理 的 壓 力 可 反 應 在 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 變 化, 且 已 證 明 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 釋 放 是 經 由 控 制 唾 液 腺 的 交 感 神 經 系 統 所 引 出 在 SAM system(sympathetic nervous adrenomedullary system), 刺 激 引 起 SAM 活 性 增 加, 進 而 影 響 腎 上 腺 髓 質 正 腎 上 腺 素 的 分 泌, 血 液 中 上 升 的 正 腎 上 腺 素 引 起 唾 液 α- 澱 粉 酶 的 釋 放 比 較 起 正 腎 上 腺 素, 由 於 唾 液 α- 澱 粉 酶 具 有 反 應 時 間 快 對 刺 激 的 敏 感 度 高 以 及 採 樣 方 便 等 等 的 優 點 ( 如 表 3), 因 此 被 建 議 為 反 映 體 內 有 關 壓 力 對 於 交 感 神 經 系 - 21 -
科 學 教 育 月 刊 第 364 期 中 華 民 國 102 年 11 月 表 3 以 α- 澱 粉 酶 及 正 腎 上 腺 素 反 應 交 感 神 經 活 性 比 較 正 腎 上 腺 素 唾 液 α- 澱 粉 酶 反 應 時 間 較 慢, 延 遲 20~30 分 鐘 較 快, 約 1~ 數 分 鐘 對 刺 激 敏 感 度 較 低 較 高 方 便 性 在 血 液 或 體 液 中 的 濃 度 較 低, 以 拋 棄 式 唾 液 收 集 管 收 集, 不 易 測 量 且 不 易 採 樣 採 樣 方 便 統 活 性 變 化 的 一 個 參 數 (parameter) 或 一 種 生 物 標 誌 物 (biomarker)(chatterton et al., 1996; Nater, 2004 年 ; Rohleder et al.,2004 年 ;Granger et.al., 2007) 捌 飲 水 與 健 康 人 之 所 以 能 在 陸 地 上 成 長, 也 是 因 為 身 體 內 有 一 整 套 完 善 的 儲 水 系 統 這 個 系 統 在 人 體 內 儲 備 了 大 量 的 水, 約 占 體 重 的 75% 正 因 如 此, 人 才 能 在 短 時 間 內 適 應 暫 時 的 缺 水 同 時, 人 體 內 還 有 一 個 乾 旱 管 理 機 制 : 在 人 體 缺 水 時, 嚴 格 分 配 體 內 儲 備 的 水, 並 讓 最 重 要 的 器 官 先 得 到 足 量 的 水 以 及 由 水 輸 送 的 養 分 脫 水, 會 使 生 命 體 的 內 外 結 構 發 生 改 變, 在 身 體 缺 水 最 嚴 重 的 部 位 的 細 胞 開 始 變 皺, 其 內 在 機 能 也 會 受 到 影 響 巴 特 曼 醫 師 (Dr. Feretdoon Batmanghelidj) 研 究 水 在 生 理 機 能 方 面 的 作 用, 發 現 水 與 許 多 疾 病 的 關 係 密 切 以 及 水 相 關 的 治 療 作 用 在 這 幾 十 年 的 研 究 成 果 中 已 發 現, 心 臟 病 和 中 風 白 血 病 和 淋 巴 瘤 消 化 道 疾 病 關 節 炎 腰 痛 頸 肩 痛 高 血 壓 高 膽 固 醇 超 重 哮 喘 和 過 敏 性 咳 嗽 糖 尿 病 失 眠 及 憂 鬱 症 等 疾 病 與 體 內 缺 水 有 非 常 重 要 的 關 係 (Batmanghelidj, 2007) 玖 結 語 許 許 多 多 疾 病 的 病 因 僅 僅 是 身 體 缺 水, 身 體 缺 水 造 成 了 生 理 紊 亂, 最 終 導 致 許 多 疾 病 的 產 生 ; 而 治 療 這 些 疾 病 的 方 法 就 是 飲 用 足 夠 的 水 水 是 天 然 的 保 健 良 藥, 能 夠 解 決 多 種 健 康 問 題 所 以 沒 事 多 喝 水, 多 喝 水 沒 事, 不 但 可 以 提 升 交 感 神 經 活 性, 還 可 以 促 進 人 體 健 康, 遠 離 疾 病 參 考 資 料 A 醫 學 百 科 (http://cht.a-hospital.com/w/%e5% 94%BE%E6%B6%B2%E8%85%BA#.U h78vrunquj) β 互 動 百 科 (http://www.baike.com/wiki/ %CE%B1-%E6%B7%80%E7%B2% 89%E9%85%B6) Batmanghelidj, F. 2007 Your body Many Cries for Water. Chatterton Jr., R.T., Vogelsong, K.M., Lu, Y.C., Ellman, A.B., Hudgens, G.A., 1996. Salivary apha-amylase as a measure of endogenous adrenergic activity. Clin. Physiol. 16, 433-448. Chu YH, Hsu YJ, Lee HS, Ho ST, Tung CS, Tseng CJ, Li MH, Lin TC, Lu CC: The osmopressor response is linked to upregulation of aquaporin-1 tyrosine phosphorylation on red blood cell membranes. Hypertension 2013, 62(1):197-202. - 22 -
喝 水 的 另 類 功 效 -- 唾 液 α 澱 粉 酶 活 化 在 正 常 年 輕 人 飲 水 後 導 致 低 張 性 血 管 收 縮 現 象 的 生 理 角 色 Gilman, S.C., Thornton, R., Miller, D., Biersner, R., 1979. Effects of exercise stress on parotid gland secretion. Horm. Metab. Res. 11, 454. Granger, D.A., Kivlighan, K.T., el-sheikh, M., Gordis, E.B., Stroud, L.R., 2007. Salivary alpha-amylase in biobehavioral research: recent developments and applications. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1098, 122-144. Humphrey, S.P., Willamson, R.T., 2001. A review of saliva: normal composition, flow, and function. J. Prosthet. Dent. 85, 162-169. Lu, C.C., Li, M.H., Ho, S.T., Lu, C.L., Lin J.C., Lin, T.C., Tung, C.S., Tseng, C.J., 2008. Glucose reduces the effect of water to promote orthostatic tolerance. Am J Hypertens; 21:1177-1178. Li MH, Chen PH, Ho ST, Tung CS, Lin TC, Tseng CJ, Huang WS, Lu CC: Lower body negative ressure-induced vagal reaction: role for the osmopressor response? Am J Hypertens 2013, 26(1):5-12. Lu CC, Li MH, Lin TC, Chen TL, Chen RM, Tung CS, Tseng CJ, Ho ST: Water ingestion reduces skin blood flow through sympathetic vasoconstriction. Clin Auton Res 2012, 22(2):63-69. Makinen, K.K., 1989. Salivary enzymes. In: Tenovuo, J.O. (Ed.), Human Saliva: Clinical Chemistry and Microbiology, vol. 2. CRC Press, Boca Raton, 93-119. Nater, U.M., 2004. The Role of Salivary Alpha-Amylase in Stress Research. Cuvillier, Gottingen. Rohleder, N., Nater, U.M., Wolf, J.M., Ehlert, U., Kirschbaum, C., 2004. Psychosocial stress-induced activation of salivary alpha-amylase: an indicator of sympathetic activity? Ann. N.Y. Acad. Sci. 1032, 258-263. Van Stegeren, A.H., Wolf, O.T., Kindt, M., 2008. Salivary alpha amylase and cortisol responses to different stress tasks: impact of sex. Int. J. Psychophysiol. 69, 33-40. Yamaguchi, M., Takeda, K., Onishi, M., Deguchi, M., Higashi, T., 2006. Non-verbal communication method based on a biochemical marker for people with severe motor and intellectual disabilities. J. Int. Med. Res. 34, 30-41. Yamaguchi M., Kanemori T., Kanemarua M., Takai N., Mizunoc Y., Yoshida H., 2004, Performance evaluation of salivary amylase activity monitor. Biosens Bioelectron. 2004 20(3), 491-497. Zakowski, J.J., Bruns, D.E., 1985. Biochemistry of human alpha amylase isoenzymes. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 21, 283-322. - 23 -