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动物营养学报 2016,28(5):1515 1524 Chinese Journal of Animal Nutrition doi:10.3969 / j.issn.1006 267x.2016.05.028 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能血清生化指标和粪便微生物菌群的影响高 1 印 1 王国军 2 来航线 1 杨雨鑫 (1. 西北农林科技大学动物科技学院, 杨凌 712100;2. 西北农林科技大学资源环境学院, 杨凌 712100) 摘要 : 本试验旨在研究益生菌发酵苹果渣对早期断奶仔猪生长性能血清生化指标和粪便微生物菌群的影响选择平均体重 (5.87±0.10) kg 断奶仔猪 120 头, 随机分为 5 组 ( 每组设 3 个重复, 每个重复 8 头猪 ) : 负对照组饲喂基础饲粮 ( 不含抗生素 ), 正对照组在基础饲粮中添加 0.1% 的混合型抗生素, 试验组分别饲喂在基础饲粮中添加 4% 6% 8% 益生菌发酵苹果渣的试验饲粮试验期 35 d 结果表明 : 与负对照组相比, 饲粮添加抗生素和 6% 益生菌发酵苹果渣均显著提高断奶仔猪平均日采食量和平均日增重 ( P<0.05), 显著降低料重比粪便中大肠杆菌数量和腹泻率 ( P<0.05) ; 添加抗生素和 6% 益生菌发酵苹果渣可以显著降低血清中尿素氮和总胆固醇的含量 ( P < 0. 05), 显著提高生长激素胰岛素三碘甲状腺原氨酸和甲状腺素含量 ( P < 0.05) 随着益生菌发酵苹果渣添加量的增加, 生长性能腹泻率粪便大肠杆菌数量以及血清中尿素氮总胆固醇和激素指标呈现二次变化趋势 ( P<0.05), 当添加量为 6% 时效果最好与正对照组相比, 添加益生菌发酵苹果渣能极显著增加粪便中菌群总数 ( P<0.01), 而对其他各项指标均无显著影响 ( P>0.05) 由此可见, 添加 6% 益生菌发酵苹果渣能提高断奶仔猪的生长性能, 调节肠道微生态平衡, 降低粪便中大肠杆菌数量和腹泻率, 提高血清中内分泌激素含量, 降低尿素氮和胆固醇含量关键词 : 益生菌发酵苹果渣 ; 断奶仔猪 ; 生长性能 ; 血清生化指标 ; 粪便菌群中图分类号 :S816.6 文献标识码 :A 文章编号 :1006 267X(2016)05 1515 10 2014 年我国的苹果种植面积和产量分别达到了 235.53 万 hm 2 和 3 915 万 t [1], 其中有 25% 用于生产浓缩苹果汁果醋等副产品, 仅浓缩苹果汁产渣量已达 120 万 t [2] 研究发现, 苹果渣中含有丰富的营养成分维生素和苹果酸, 有利于微生物的直接吸收和利用, 可作为家畜的饲料在畜禽中使用, 但作为动物饲料, 其蛋白质含量偏低, 影响了其他成分的利用 [3-5] 因此需采用特定工艺, 通过微生物发酵提高苹果渣中蛋白质含量, 将苹果渣转化为营养丰富的微生物蛋白质饲料, 这是解决苹果渣出路的重要途径之一另有研究指出, 在苹果渣发酵生产饲料蛋白质过程中, 不仅提高了果渣发酵产物的蛋白质含量, 还产生大量生物酶活性肽游离氨基酸等对动物营养具有重要作用的活性成分 [6-8] 在一些研究中发现, 通过发酵产品及其发酵过程中的代谢产物, 可改善仔猪的生长性能肠道健康, 并可替代饲料中抗生素的使用 [9-10] 因此, 本试验拟用发酵苹果渣饲喂家畜, 观察其对断奶仔猪生长性能血清生化指标和粪便菌群的影响, 以为其在家畜生产中应用提供参考依据收稿日期 :2015-12-30 基金 : 国家科技支撑计划黄土高原农果牧复合循环技术集成与示范 ( 2012BAD14B11 ) ; 特色产业创新链农业领域 ( K3320215118) 作者简介 : 高印 (1988 ), 男, 河南方城人, 硕士研究生, 研究方向为动物营养与饲料科学 E mail: gy380671315@163.com 通信作者 : 杨雨鑫, 副教授, 硕士生导师,E mail: yxyang@ nwsuaf.edu.cn

1516 动物营养学报 28 卷 1 材料与方法 1.1 试验动物及试验设计本试验在陕西省兴平市鑫亥畜牧养殖有限责任公司鑫亥生猪良种繁育场进行, 试验共进行 38 d ( 预试期 3 d, 正试期 35 d), 预试期饲喂基础饲粮, 即不含抗生素和益生菌发酵苹果渣, 其组成及营养水平见表 1 试验选取 120 头初始体重为 (5.87±0.10) kg 的 (21±1) 日龄断奶杜长大三元杂交仔猪, 按单因子随机区组设计随机分成 5 组, 每组 3 个重复, 每个重复 8 头仔猪试验分组情况如下 : 负对照 ( NC) 组, 饲喂基础饲粮 ; 正对照 ( PC) 组, 在基础饲粮中添加 0. 1% 的硫酸黏杆菌素杆菌肽锌金霉素混合型抗生素 ; 试验 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 组, 分别在基础饲粮中添加 4% 6% 8% 益生菌发酵苹果渣 1.2 益生菌发酵苹果渣的制备 1.2.1 发酵原料固态发酵培养基, 由果渣油渣尿素 = 17 2 1 组成, 灭菌后基质含水量为 60%; 菌剂主要包括黑曲霉安琪酵母乳酸杆菌和芽孢杆菌 1.2.2 发酵过程将黑曲霉斜面菌种接入装有麸皮培养基的组培瓶中,30 培养 5 d 后, 以 2% 接种量接入装有麸皮培养基的塑料盘,30 培养 10 d, 然后和安琪酵母一起接种到固态发酵培养基中进行固态发酵, 烘干后按一定比例加入乳酸杆菌和芽孢杆菌掺混制成成品 1.2.3 发酵苹果渣成分风干苹果渣添加油渣辅料后, 经复菌发酵剂发酵, 可明显提高饲料中蛋白质含量, 同时添加了能改善动物肠道菌群的乳酸菌和芽孢菌, 使果渣改良为具有提供饲料蛋白质和益生作用的生物活性蛋白质饲料其营养成分如下 : 安琪酵母乳酸杆菌和芽孢杆菌的含量分别为 1.4 10 4 5.5 10 7 和 8.7 10 5 CFU / g; 饲料中粗蛋白质总能多肽和游离氨基酸的含量分别为 29.29% 17.47 MJ / kg 4.04% 0.07%; 蛋白质酶纤维素酶和果胶酶活性分别为 114.06 793.08 和 198.03 U / g 1.3 试验饲粮及饲养管理试验饲粮参照 NRC(2012) 配制, 各组饲粮组成及营养水平见表 1 试验前对猪舍进行彻底地消毒, 并对试验仔猪进行统一驱虫及接种疫苗饲养期间在每天的 07:30 14:30 21:30 进行饲喂, 自由采食和饮水每天准确记录给料量和剩料量, 以计算平均日采食量原料 Ingredients 表 1 试验饲粮组成及营养水平 ( 风干基础 ) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets ( air dry basis) % 玉米 Corn 60.21 60.11 60.77 57.70 56.89 玉米蛋白质粉 Corn gluten meal 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00 小麦次粉 Wheat short 15.00 15.00 10.41 15.00 15.00 麸皮 Wheat bran 1.77 高蛋白质豆粕 High protein soybean meal 16.00 16.00 14.09 9.02 3.62 益生菌发酵苹果渣 Probiotic fermented apple pomace 4.00 6.00 8.00 鱼粉 ( 秘鲁 ) Fish meal ( Peru) 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 发酵豆粕 Fermented soybean meal 0.40 0.40 2.86 6.48 石粉 Limestone powder 1.29 1.29 1.29 1.29 1.29 磷酸氢钙 CaHPO 4 0.31 0.31 0.35 0.35 0.37 氯化钠 NaCl 0.35 0.35 0.35 0.35 0.34 碳酸氢钠 NaHCO 3 0.02 0.02 0.01 0.01 0.02 沸石粉 Zeolite powder 0.20 0.20 0.62 0.99 1.48 氯化胆碱 Choline chloride 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05

5 期高印等 : 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能血清生化指标和粪便微生物菌群的影响 1517 续表 1 L- 赖氨酸盐酸盐 L Lys HCl 0.46 0.46 0.52 0.56 0.60 DL- 蛋氨酸 DL Met 0.04 0.04 0.06 0.07 0.09 L- 苏氨酸 L Thr 0.10 0.10 0.13 0.16 0.18 L- 色氨酸 L Try 0.02 0.02 0.03 0.04 0.04 抗生素 Antibiotic 0.10 植酸酶 Phytase 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 香味剂 Flavor 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 预混料 Premix 1) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels 2) 消化能 DE / ( MJ / kg) 14.00 14.00 14.00 14.00 14.00 粗蛋白质 CP 18.00 18.00 18.00 18.00 18.00 钙 Ca 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 总磷 TP 0.43 0.43 0.41 0.41 0.41 总赖氨酸 Total Lys 1.14 1.14 1.16 1.16 1.16 可消化赖氨酸 Digestible Lys 1.04 1.04 1.04 1.04 1.04 蛋氨酸 Met 0.31 0.31 0.33 0.33 0.34 蛋氨酸 + 半胱氨酸 Met+Cys 0.57 0.57 0.57 0.57 0.57 苏氨酸 Thr 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 色氨酸 Try 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 1) 预混料为每千克饲粮提供 Premix provided the following per kg of diets:va 12 000 IU,VD 3 2 400 IU,VE 30 IU,VK 3 3.2 mg,vb 1 2.4 mg,vb 2 8 mg,vb 6 4 mg,vb 12 32 μg, 叶酸 folic acid 1.32 mg, 生物素 biotin 124 μg, 烟酰胺 nicotinamide 34 mg, 泛酸 pantothenic acid 20 mg,cu 180 mg,fe 100 mg,zn 100 mg,mn 5.2 mg,se 0.48 mg,i 0.26 mg 2) 计算值 Calculated values 1.4 样品的采集与处理 1.4.1 粪样的采集在试验期第 7 14 21 28 和 35 天, 于饲喂前分别从每个重复随机选取 3 头试验仔猪, 采集新鲜粪样混匀后取 10 g 放入 10 ml 灭菌好的离心管中, 加入甘油置于 -80 冰箱保存, 用于粪便微生物菌群的测定 1.4.2 血样的采集及血清的制备分别于试验的第 21 天和第 35 天从每组的每个重复随机选取 1 头猪, 前腔静脉采血 10 ml, 倾斜放置 30 min,3 000 r / min 离心 15 min, 收集血清,-20 低温冷藏, 用于血清生化指标的测定 1.5 测定指标与方法 1.5.1 生长性能分别于试验开始和结束时空腹称重, 根据初重和末重计算平均日增重每天记录各组的采食量, 计算平均日采食量和料重比每天 16:30 观察仔猪粪便情况, 记录腹泻头数, 计算腹泻率腹泻率 ( %)= [ 总腹泻次数 / ( 总头数试验天数 ) ] 100 1.5.2 血清生化指标血清生化指标 : 葡萄糖 ( GLU) 尿素氮 ( UN) 总蛋白 ( TP) 白蛋白 ( ALB) 甘油三酯 ( TG) 和总胆固醇 ( TC) 含量采用试剂盒法测定 ; 血清激素指标 : 生长激素 ( GH) 胰岛素 ( INS) 三碘甲状腺原氨酸 ( T 3 ) 和甲状腺素 ( T 4 ) 含量采用酶联免疫吸附测定 ( ELISA) 试剂盒进行测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所 1.5.3 粪便微生物菌群采用平板稀释法和最大可能数 ( MPN) 法对粪便样品中的菌群总数和大肠杆菌进行计数菌群总数 : 根据样品批次不同, 选择 10-4 ~ 10-6 连续稀释度的 3 个样品匀液, 分别吸取 1 ml 于无菌平皿内, 每个稀释度做 2 个平皿同时, 分

1518 动物营养学报 28 卷别吸取 1 ml 空白稀释液加入 2 个无菌平皿内作空白对照, 并及时将 15 ~ 20 ml 冷却至 46 的平板计数琼脂培养基 [ 放置于 (46±1) 恒温水浴箱中保温 ] 倾注平皿, 并转动平皿使其混合均匀待琼脂凝固后, 将平板翻转,( 37 ± 1) 培养 ( 48 ± 2) h 菌落计数以菌落形成单位 ( CFU) 表示每个稀释度的菌落数采用 2 个平板的平均值, 平均值乘以相应稀释倍数作为每克样品中菌落总数结果大肠杆菌 : 选择 10-4 ~ 10-6 连续稀释度的 3 个样品匀液, 每个稀释度接种 3 管月桂基硫酸盐胰蛋白胨 ( LST) 肉汤, 每管接种 1 ml,(37±1) 培养 (24± 2) h, 观察倒管内是否有气泡产生,( 24 ± 2) h 产气者进行复发酵试验, 如未产气则继续培养至 (48±2) h, 产气者进行复发酵试验未产气者为大肠菌群阴性用接种环从产气的 LST 肉汤管中分别取培养物 1 环, 移种于煌绿乳糖胆盐肉汤 ( BGLB) 管中,(36±1) 培养 (48 ±2) h, 观察产气情况产气者, 计为大肠菌群阳性管按确证的大肠菌群 LST 阳性管数, 检索 MPN 表, 报告每克样品中大肠菌群的 MPN 值 1.6 数据处理采用 SPSS 17.0 统计软件进行单因素方差分析 ( one way ANOVA), 并用 Duncan 氏法进行多重比较利用 t 检验, 比较 PC 组与添加 4% 6% 8% 益生菌发酵苹果渣组的差异线性和二次检验饲粮中随着益生菌发酵苹果渣添加量的增加对仔猪各项测定指标的影响以 P < 0.05 为差异显著性判断标准, 以 P<0.01 为差异极显著判断标准 2 结果与分析 2.1 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能的影响由表 2 可知, 各组之间初始重无显著差异 ( P> 0.05) ; 与 NC 组和 Ⅲ 组相比, 其他组末重显著提高 ( P<0.05) ;Ⅱ 组平均日增重较 NC 组 Ⅰ 组和 Ⅲ 组分别极显著提高了 4. 90% 2. 44% 和 4. 84% ( P < 0.01),PC 组显著高于 NC 组和 Ⅲ 组 ( P<0.05) ; 与 NC 组相比, Ⅱ 组平均日采食量极显著提高了 2.45%( P<0.01),PC 组和 Ⅰ 组平均日采食量也显著提高 ( P<0.05) ;PC 组和 Ⅱ 组料重比极显著低于 NC 组和 Ⅲ 组 ( P<0.01) 与 PC 组相比, 饲粮中添加益生菌发酵苹果渣对试验全期的料重比有提高的趋势 ( P = 0.077) 随着饲粮中添加益生菌发酵苹果渣比例的增加, 仔猪的平均日增重平均日采食量和料重比呈现二次变化趋势 ( P <0.05), 其中 6% 添加组效果最好 Table 2 表 2 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能的影响 Effects of probiotic fermented apple pomace on growth performance of weaned piglets SEM P 值 P value NC vs. AP PC vs. AP 线性 Linear 二次 Quadratic 初始重 Initial weight / kg 5.78 5.79 5.79 5.78 5.79 0.01 0.924 0.969 0.797 末重 Final weight / kg 16.46 Cc 16.88 ABa 16.72 Bb 16.98 Aa 16.47 Cc 0.06 0.289 0.278 0.001 平均日增重 ADG / g 305.05 Cc 316.97 ABab 312.40 Bb 320.01 Aa 305.25 Cc 1.71 0.293 0.285 0.001 平均日采食量 ADFI / g 445.02 Bb 451.25 ABa 451.36 ABa 455.91 Aa 445.58 Bb 1.21 0.921 0.365 0.001 料重比 F / G 1.46 Aa 1.42 Bb 1.44 ABab 1.42 Bb 1.46 Aa 0.01 0.077 0.589 0.008 同行数据肩标相同小写字母或无字母表示差异不显著 ( P>0.05), 肩标不同小写字母表示差异显著 ( P<0.05), 肩标不同大写字母表示差异极显著 ( P<0.01) 下表同 In the same row, values with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference ( P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference ( P<0.05), and with different capital letter superscripts mean ex tremely significant difference ( P<0.01). The same as below. AP: 益生菌发酵苹果渣组, 下表同 AP mean probiotic fermented apple pomace groups, the same as below.

5 期高印等 : 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能血清生化指标和粪便微生物菌群的影响 1519 2.2 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪腹泻率的影响由表 3 可知, 试验 1 ~ 21 d,pc 组 Ⅰ 组和 Ⅱ 组较 Ⅲ 组的腹泻率分别显著下降了 17.98% 13.47% 和 15.73%( P<0. 05),PC 组比 NC 组显著下降了 15.11%( P<0.05),Ⅰ 组和 Ⅱ 组与 NC 组相比分别下降了 10. 45% 和 14. 29% ( P > 0. 05) 试验 22 ~ 35 d,nc 组和 Ⅲ 组较 PC 组和 Ⅱ 组显著升高 ( P < 0.05), 同时,Ⅰ 组较 NC 组显著下降 ( P < 0. 05) 可见, 无论前期还是后期, 腹泻率随着益生菌发酵苹果渣添加量的增加都是先下降后升高, 呈现二次变化趋势 ( P<0.05), 且 6% 添加组腹泻率最低 Table 3 表 3 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪腹泻率的影响 Effects of probiotic fermented apple pomace on diarrhea rate of weaned piglets SEM PC vs. AP P 值 P value NC vs. AP 线性二次 Linear Quadratic 1 ~ 21 d 18.86 ab 16.01 c 16.89 bc 16.45 bc 19.52 a 0.47 0.191 0.673 0.012 22 ~ 35 d 11.46 a 7.99 c 8.68 bc 7.64 c 10.42 ab 0.48 0.399 0.189 0.003 2.3 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响由表 4 可知, 各组血清 TP ALB GLU 和 TG 含量差异均不显著 ( P > 0. 05), 但 Ⅱ 组和 PC 组血清 TP 和 ALB 含量较 NC 组均有明显上升在 UN 含量方面, 与 NC 组相比, 试验 21 d PC 组和 Ⅱ 组分别下降了 34.67% 和 38.21% ( P < 0.05), 试验 35 d PC 组和 Ⅱ 组分别下降了 15. 94% 和 16. 52% ( P<0.05) ; 在 TC 含量方面, 与 NC 组相比,PC 组 Ⅰ 组和 Ⅱ 组均呈下降趋势, 且差异显著 ( P<0.05) 随着益生菌发酵苹果渣添加量的增加, 血清 UN 和 TC 含量呈现二次变化趋势 ( P<0.05), 且试验 21 d 血清 TC 含量呈线性降低 ( P = 0.011) 与 PC 组相比, 益生菌发酵苹果渣组各血清生化指标均无显著变化 ( P > 0.05) 结果表明, 在饲粮中添加 6% 益生菌发酵苹果渣可以明显升高血清中 TP 和 ALB 含量, 显著降低 UN 和 TC 含量 2.4 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清激素指标的影响由表 5 可知, 与 NC 组和 Ⅲ 组相比,PC 组和 Ⅱ 组血清 GH INS T 3 和 T 4 含量都显著升高 ( P < 0.05), 其中 PC 组和 Ⅱ 组血清 GH 含量升高达到极显著水平 ( P<0.01) 随着益生菌发酵苹果渣添加量的增加, 试验 21 d 血清 INS T 3 T 4 含量均呈现先上升后降低的二次趋势 ( P < 0. 05), 血清 GH 含量有二次变化趋势 ( P = 0.059) ; 试验 35 d 血清 GH INS T 3 含量呈现先上升后降低的二次趋势 ( P<0.05) 结果表明, 饲粮添加 6% 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清 GH INS T 3 和 T 4 含量的影响最为明显 2.5 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪粪便微生物菌群的影响由表 6 可知, 在整个饲养阶段,PC 组总菌数均显著低于 NC 组和益生菌发酵苹果渣组 ( P < 0.05), 益生菌发酵苹果渣组较 NC 组呈明显上升趋势, 但差异不显著 ( P>0.05) 在大肠杆菌方面, 与 NC 组和 Ⅲ 组相比, 第 7 天 PC 组和 Ⅱ 组极显著降低 ( P < 0. 01 ), 第 14 和 21 天显著降低 ( P < 0.05) ; 第 28 和 35 天, 与 NC 组相比,PC 组 Ⅰ 组和 Ⅱ 组均显著降低 ( P<0.05),Ⅲ 组也明显下降, 但差异不显著 ( P>0.05) 随着益生菌发酵苹果渣添加量的增加, 大肠杆菌呈现显著的二次变化趋势 ( P<0.05) PC 组与益生菌发酵苹果渣组相比, 菌群总数极显著下降 ( P<0.01) 结果表明, 在仔猪断奶饲粮中添加益生菌发酵苹果渣可以明显地提高菌群总数, 降低大肠杆菌数, 其中以 6% 添加量效果最佳

1520 动物营养学报 28 卷 Table 4 表 4 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响 Effects of probiotic fermented apple pomace on serum biochemical indicators of weaned piglets SEM P 值 P value NC vs. AP PC vs. AP 线性 Linear 二次 Quadratic 21 d 总蛋白 TP / ( g / L) 53.13 58.50 54.27 58.43 53.80 0.93 0.284 0.483 0.163 白蛋白 ALB / ( g / L) 27.20 29.17 27.23 29.60 27.10 0.54 0.262 0.729 0.354 尿素氮 UN / ( mmol / L) 4.24 a 2.77 b 3.93 ab 2.62 b 4.40 a 0.25 0.266 0.649 0.026 葡萄糖 GLU / ( mmol / L) 5.11 5.47 5.28 5.50 5.16 0.09 0.403 0.696 0.232 总胆固醇 TC / ( nmol / L) 1.79 a 1.49 b 1.54 b 1.33 b 1.48 b 0.05 0.202 0.011 0.032 甘油三酯 TG / ( mmol / L) 0.30 0.37 0.34 0.36 0.31 0.01 0.636 0.750 0.165 35 d 总蛋白 TP / ( g / L) 53.03 58.60 54.90 58.90 54.60 0.92 0.267 0.329 0.138 白蛋白 ALB / ( g / L) 27.57 28.83 27.37 29.13 27.13 0.40 0.391 0.911 0.351 尿素氮 UN / ( mmol / L) 3.45 a 2.90 bc 3.15 abc 2.88 c 3.32 ab 0.08 0.239 0.318 0.030 葡萄糖 GLU / ( mmol / L) 5.08 5.41 5.18 5.52 5.12 0.10 0.541 0.680 0.341 总胆固醇 TC / ( nmol / L) 1.63 a 1.31 b 1.36 b 1.31 b 1.43 ab 0.04 0.476 0.053 0.016 甘油三酯 TG / ( mmol / L) 0.33 0.38 0.36 0.38 0.33 0.01 0.402 0.726 0.041 Table 5 表 5 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清激素指标的影响 Effects of probiotic fermented apple pomace on serum hormone indicators of weaned piglets SEM PC vs. AP P 值 P value NC vs. AP 线性 Linear 二次 Quadratic 21 d 生长激素 GH / ( ng / ml) 2.26 b 2.73 a 2.36 ab 2.75 a 2.25 b 0.08 0.172 0.557 0.059 胰岛素 INS / ( μiu / ml) 32.83 b 39.28 a 35.36 ab 39.25 a 32.62 b 0.97 0.156 0.663 0.021 三碘甲状腺原氨酸 T 3 / ( ng / ml) 1.31 b 1.79 a 1.44 ab 1.75 a 1.32 b 0.07 0.108 0.527 0.044 甲状腺素 T 4 / ( ng / ml) 35.38 b 42.58 a 37.67 ab 42.67 a 35.16 b 1.15 0.165 0.638 0.040 35 d 生长激素 GH / ( ng / ml) 2.41 Bb 2.81 Aa 2.59 ABab 2.83 Aa 2.41 Bb 0.06 0.184 0.550 0.006 胰岛素 INS / ( μiu / ml) 34.45 b 41.50 a 37.64 ab 41.62 a 34.41 b 1.09 0.216 0.658 0.025 三碘甲状腺原氨酸 T 3 / ( ng / ml) 1.46 b 1.74 a 1.55 ab 1.76 a 1.45 b 0.04 0.189 0.629 0.020 甲状腺素 T 4 / ( ng / ml) 38.47 b 43.56 a 38.27 b 43.60 a 37.97 b 0.88 0.106 0.585 0.108 3 讨论 3.1 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能的影响仔猪断奶后容易出现采食量下降免疫力降低生长停滞和腹泻等一系列的早期断奶应激综合征, 严重影响早期断奶仔猪的成活率和养猪业的经济效益本试验中添加的益生菌发酵苹果渣是由新鲜果渣通过由酵母菌乳酸菌和芽孢杆菌组成的混合型微生态制剂固态发酵制得益生菌发酵苹果渣中除了含有大量活菌, 还有益生菌代谢产生的蛋白质酶淀粉酶和纤维素酶以及活性

5 期高印等 : 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能血清生化指标和粪便微生物菌群的影响 1521 肽和游离氨基酸, 可以提高仔猪的消化能力和饲料利用率, 进而提高生长性能此外, 芽孢杆菌和酵母菌等好氧菌的代谢为肠道乳酸菌的繁殖提供良好的厌氧环境从而产生大量乳酸, 抑制致病性大肠杆菌的大量繁殖 : 一方面使肠道 ph 降低, 改善肠道微生态平衡, 提高消化能力 [11-12], 提高动物的免疫力, 降低发病率和腹泻率 ; 另一方面, 可以改善饲粮的适口性, 提高动物采食量 Table 6 表 6 益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪粪便微生物菌群的影响 Effects of probiotic fermented apple residue on fecal microbial flora of weaned piglets SEM PC vs. AP P 值 P value 线性 Linear NC vs. AP 二次 Quadratic 7 d 菌群总数 Total bacteria / [ lg( CFU / g) ] 大肠杆菌 E. coli / ( MPN / g) 14 d 菌群总数 Total bacteria / [ lg( CFU / g) ] 大肠杆菌 E. coli / ( MPN / g) 21 d 菌群总数 Total bacteria / [ lg( CFU / g) ] 大肠杆菌 E. coli / ( MPN / g) 28 d 菌群总数 Total bacteria / [ lg( CFU / g) ] 大肠杆菌 E. coli / ( MPN / g) 35 d 菌群总数 Total bacteria / [ lg( CFU / g) ] 大肠杆菌 E. coli / ( MPN / g) 6.94 a 6.17 b 7.03 a 7.03 a 7.21 a 0.12 0.001 0.185 0.724 5.67 Aa 4.33 Bb 5.29 ABa 4.48 Bb 5.74 Aa 0.18 0.058 0.529 0.005 6.93 a 6.29 b 7.06 a 7.05 a 7.17 a 0.10 0.001 0.265 0.971 5.27 a 4.23 b 4.81 ab 4.08 b 5.15 a 0.16 0.261 0.426 0.028 6.99 a 6.29 b 7.04 a 7.05 a 7.13 a 0.11 0.002 0.531 0.901 5.12 a 4.10 b 4.53 ab 4.07 b 4.93 a 0.14 0.218 0.320 0.011 7.04 a 6.47 b 7.06 a 7.10 a 7.12 a 0.08 0.002 0.594 0.989 5.03 a 4.04 b 4.13 b 4.00 b 4.67 ab 0.14 0.478 0.267 0.008 6.99 a 6.39 b 7.01 a 7.05 a 7.09 a 0.09 0.003 0.645 0.923 4.81 a 4.11 b 4.13 b 4.08 b 4.68 ab 0.11 0.496 0.606 0.007 从本试验结果来看, 并非益生菌发酵苹果渣的添加比例越高, 断奶仔猪的生长性能越好, 存在一个最佳添加量的问题在综合平均日增重平均日采食量料重比和腹泻率指标基础上, 添加 6% 益生菌发酵苹果渣和 PC 组效果最好, 可以显著提高仔猪平均日增重和平均日采食量, 降低料 [13] 重比和腹泻率, 提高生长性能吴红翔等研究表明, 用 3% 苹果渣发酵饲料代替基础饲粮饲喂鹌鹑, 能够改善鹌鹑蛋品质, 提高生产性能 García [14] 等研究发现, 在饲粮中添加益生菌能明显改善断奶仔猪生长性能, 提高饲料转化率, 减少腹泻的发生, 提高养殖效益这都与本试验的结果基本一致 3.2 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响仔猪血清生化指标可综合反映机体的新陈代谢状况比如血清中 TP 和 UN 含量能够准确反映动物机体对蛋白质的代谢吸收情况和饲粮中氨

1522 动物营养学报 28 卷基酸的平衡状况 [15-16] 本试验中各组血清 TP 和 ALB 含量均无显著变化, 但添加 6% 益生菌发酵苹果渣可以显著降低血清 UN 含量, 表明益生菌发酵苹果渣可以增加机体氮沉积量, 有利于蛋白质合成, 促进生长发育, 这可能与益生菌发酵苹果渣中 [17] 的活性肽和游离氨基酸含量密切相关曾李等研究表明, 渣类饲料通过益生菌发酵后能够显著提高饲粮中小肽寡肽和游离氨基酸的含量, 从而提高饲粮中蛋白质利用率, 有利于提高动物生长性能血脂和脂蛋白含量反映了机体在稳态下的代谢调节, 特别是脂肪酸在脂肪组织和肝脏之间循环的基本调节 [18] 血清中 TG 和 TC 含量可反映脂肪在动物机体的代谢状况本试验各组间血清 TG 含量没有显著变化, 但当益生菌发酵苹果渣添加量达到 6% 时, 血清 TC 含量较 NC 组显著降低, 表明在饲粮中添加一定比例的益生菌发酵苹果渣能提高机体对脂肪的利用能力, 从而为蛋白质的合成提供能量, 促进机体的生长发育, 进而提高仔猪的生长性能 3.3 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪血清激素水平的影响下丘脑 - 垂体 - 靶器官轴上 GH INS 和甲状腺激素等激素对动物生长起重要的调节作用 [19] GH 处于生长轴的中心环节, 其主要生理作用是促进蛋白质沉积和骨骼生长, 具体表现为通过胰岛素样生长因子 ( IGF) 促进氨基酸进入细胞, 加强 DNA RNA 的合成进而促进蛋白质合成, 促进机体呈正氮平衡对于仔猪来说,GH 是提高蛋白质沉积的主要生理因子 INS 是调控机体糖代谢的主要激素, 能够促进组织细胞对葡萄糖的摄取和利用, 加速糖原合成, 还能够促进细胞对氨基酸的摄取抑制蛋白质分解和糖原异生, 利于细胞的生长 [19] 同时,INS 还可与 GH 协同促进机体的生长发育甲状腺激素对蛋白质的合成具有重要作用, 并且可通过调节糖类和脂肪的代谢来促进器官和组织的分化 T 3 是甲状腺激素在动物体内发挥生理作用的主要部分, 主要通过调控垂体中 GH 基因的表达和 GH 的合成以及调节 INS 水平来促进蛋白质的合成, 影响动物的生长发育本试验结果表明, 在断奶仔猪饲粮中添加 6% 益生菌发酵苹果渣可使体内与生长有关的内源激素 ( GH INS 和甲状腺激素 ) 含量有显著性升高, [20] 从而促进生长王书凤等研究发现, 在饲粮中添加组合抗生素可显著提高内源激素 ( GH ISN 和 [21] T 3 ) 含量 ; 卢昱屹等研究发现, 在仔猪饲粮中添加 10% 和 20% 的发酵豆粕可以显著提高血清中 GH 含量, 促进生长, 降低料重比以上研究结果都与本试验一致 3.4 添加益生菌发酵苹果渣对断奶仔猪粪便微生物菌群的影响断奶应激的主要表现之一是仔猪肠道微生物菌群之间比例失调, 使肠道优势菌群发生更替, 致使大肠杆菌沙门氏菌等一些致病菌或者条件致病菌大量繁殖, 打破肠道微生态平衡, 排放内毒素或产生其他毒副作用, 从而引起机体消化机能紊乱, 导致动物生长性能下降有研究发现, 在仔猪断奶阶段应用以乳酸菌为主的单一或者复合益生菌能够干预并纠正肠道微生态体系失衡现象, 从而保证其良好生长性能发挥 [11,22] [23] Dong 等研究表明, 为断奶仔猪饲喂益生菌可以显著降低粪便中大肠杆菌的数量, 提高生长性能和免疫力本试验研究表明, 在断奶仔猪饲粮中添加 6% 益生菌发酵苹果渣能够显著降低粪便中大肠杆菌数量, 对病原菌具有较好的抑菌效果, 说明在饲粮中添加适宜水平的益生菌发酵苹果渣产生了与抗生素相似的结果, 从而降低腹泻率, 提高生长性能 4 结论 1 饲粮添加益生菌发酵苹果渣可显著提高断奶仔猪平均日增重和平均日采食量, 显著降低料重比 2 饲粮添加益生菌发酵苹果渣可显著降低断奶仔猪粪便中大肠杆菌数量, 降低腹泻率 3 断奶仔猪饲粮中益生菌发酵苹果渣较为适宜的添加量为 6% 参考文献 : [ 1 ] 赵玉山. 我国苹果市场新特点及 2015 年产销预测 [ J]. 果农之友,2015(8) :3-4,31. [ 2 ] 王永涛, 廖小军. 苹果加工副产物综合利用问题亟待解决 [ J]. 农业工程技术 : 农产品加工业,2014( 10) : 33. [ 3 ] GAZALLI H, MALIK A H, SOFI A H, et al. Nutri tional value and physiological effect of apple pomace [ J]. International Journal of Food Nutrition and Safe ty,2014,5( 1) :11-15.

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1524 动物营养学报 28 卷 Probiotic Fermented Apple Pomace Affects Growth Performance, Serum Biochemical Indicators and Fecal Microbial Flora of Weaned Piglets GAO Yin 1 WANG Guojun 1 LAI Hangxian 2 YANG Yuxin 1 ( 1. College of Animal Science and Technology, Northwest A & F University, Yangling 712100, China; 2. College of Natural Resources and Environment, Northwest A & F University, Yangling 712100, China) Abstract: This study was conducted to evaluate the effects of probiotic fermented apple pomace on growth per formance, serum biochemical indicators and fecal microbial flora of weaned piglets. A total of 120 weaned pig lets with an average initial body weight of (5.87±0.10) kg were randomly assigned to 5 groups with 3 repli cates per group and 8 pigs per replicate. Pigs were allotted to 5 diets, including a basal diet ( without antibiotic, negative control group), a basal diet+0.1% hybrid antibiotics ( positive control group) and three experimental diets supplemented with probiotic fermented apple pomace at the levels of 4%, 6% and 8% in the basal diet, respectively. The experiment lasted for 35 d. Results showed that, compared with negative control group, anti biotic and 6% probiotic fermented apple pomace supplementation got higher average daily gain and average dai ly feed intake ( P<0.05), but lower feed / gain, fecal E. coli population and diarrhea rate ( P<0.05). Antibiot ic and 6% probiotic fermented apple pomace supplementation also significantly decreased serum urea nitrogen and total cholesterol contents ( P<0.05), while significantly increased growth hormone, insulin, triiodothyro nine and thyroxine contents ( P<0.05). With the increasing of probiotic fermented apple pomace supplemental level, growth performance, diarrhea rate, fecal E. coli population, serum urea nitrogen, total cholesterol and hormone indices showed quadratic effect changes ( P<0.05), with 6% probiotic fermented apple pomace sup plementation got the best effect. Compared with positive control group, probiotic fermented apple pomace sup plementation extremely significantly increased the total number of fecal bacteria ( P<0.01), but did not signifi cantly affect the other indices ( P>0.05). It is concluded that dietary supplementation of 6% probiotic fermen ted apple pomace can improve growth performance and serum endocrine hormones, regulate intestinal flora bal ance, and reduce fecal E. coli population, diarrhea rate, serum urea nitrogen and cholesterol of weaned piglets. [ Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28( 5) :1515 1524] Key words: probiotic fermented apple pomace; weaned piglet; growth performance; serum biochemical indi cators; fecal microbial flora Corresponding author, associate professor, E mail: yxyang@ nwsuaf.edu.cn ( 责任编辑田艳明 )