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1 博士研究生学位论文 论文题目 : 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆 鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 姓名 : 纪方兴 学号 : 学院 : 北京大学临床肿瘤学院专业 : 生化与分子生物学导师 : 寿成超教授 完成时间 : 二〇一一年五月
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3 姓名 : 纪方兴院系 : 临床肿瘤学院学号 : 北京大学医学部学位论文原创性声明和使用授权说明 原创性声明 本人郑重声明 : 所呈交的学位论文, 是本人在导师的指导下, 独立进行研究工作所取得的成果 除文中已经注明引用的内容外, 本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体, 均已在文中以明确方式标明 本声明的法律结果由本人承担 论文作者签名 : 导师签名 : 年月日 学位论文使用授权说明 本人完全了解北京大学医学部关于收集 保存 使用学位论文的规定, 即 : 按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本 ; 学校有权保存学位论文的印刷本和电子版, 并提供目录检索与阅览服务 ; 学校可以采用影印 缩印 数字化或其它复制手段保存论文 ; 在不以赢利为目的的前提下, 学校可以公布论文的部分或全部内容 请选择图书馆发布时间 : 即时发布 一年后发布 二年后发布 ( 保密论文需注明, 并在解密后遵守此规定 ) 论文作者签名 : 导师签名 : 年月日
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5 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 本研究受到首都医学发展科研基金重点项目 ( ) 的资助, 在此表示诚挚的感谢!
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7 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 目 录 中文摘要...5 Abstract...7 前言...9 第一部分 COC166-9-Ag 在卵巢癌组织中的表达检测及临床意义一 实验材料 ( 一 ) 组织标本 ( 二 ) 随访 ( 三 ) 试剂及仪器 二 实验方法 ( 一 ) 免疫组化流程 ( 二 ) 结果判定标准 ( 三 ) 数据统计 三 实验结果 ( 一 ) 免疫组化检测 IGHG1 在卵巢癌中的表达 ( 二 ) COC166-9-Ag 的表达与临床病理学参数的关系 ( 三 ) COC166-9-Ag 的表达与卵巢癌患者的预后显著相关 四 讨论与小结 第一部分小结 第二部分 COC166-9-Ag 的分离纯化及其鉴定一 实验材料 ( 一 ) 质粒 载体 菌株 引物及其它分子克隆试剂 ( 二 ) 细胞株 细胞培养相关材料与实验动物 ( 三 ) 亲和层析柱制备与抗原鉴定的主要材料 ( 四 ) 主要溶液及试剂配制 : 常规实验试剂 细胞培养主要试剂
8 北京大学博士学位论文 3. 细菌培养主要试剂 DNA 分析试剂 裂解细菌用试剂 蛋白电泳 Western Blot IP 分析试剂 酶联免疫吸附 (ELISA) 检测用试剂 亲和层析试剂 ( 五 ) 主要仪器和设备 : 二 实验方法 ( 一 ) 单克隆抗体 COC166-9 的纯化及亚类和活性的鉴定 单克隆抗体 COC166-9 的纯化 单克隆抗体 COC166-9 类及亚类测定 ELISA 鉴定单克隆抗体 COC166-9 的活性 Western Blot 鉴定单克隆抗体 COC166-9 的活性 免疫细胞化学 (IHC) 鉴定单克隆抗体 COC166-9 的活性 ( 二 ) 单克隆抗体 COC166-9 对应抗原 (COC166-9-Ag) 的分离纯化 单克隆抗体 COC166-9 亲和层析柱的制备 COC166-9-Ag 的分离纯化 Wesstern Blotting 检测纯化抗原 ( 三 ) 卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原的鉴定 卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原指纹图谱分析 竞争 ELISA 鉴定卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原 竞争免疫组化鉴定卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原 免疫沉淀 (IP) 鉴定卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原 GST-IGHG1 重组蛋白载体的构建 表达及鉴定 myc-ighg1 重组蛋白载体的构建 表达及其蛋白鉴定 小鼠抗 COC166-9-Ag 血清的制备和免疫活性鉴定 三 实验结果 ( 一 ) 抗卵巢癌单克隆抗体 COC166-9 的特异性鉴定 单抗 COC166-9 的纯化与定量
9 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 2. 单克隆抗体类及亚类测定 ELISA 鉴定单克隆抗体 COC166-9 与卵巢癌腹水蛋白的反应 Western Blot 鉴定单克隆抗体 COC166-9 的反应特性 免疫细胞化学 (IHC) 检测单克隆抗体 COC166-9 与卵巢癌细胞的反应活性 亲和层析分离纯化单抗 COC166-9 抗原 COC166-9-Ag Western Blotting 检测亲和层析分离获得的抗原 COC166-9-Ag 纯化抗原的考马斯亮蓝染色 纯化抗原指纹图谱的分析 竞争 ELISA 鉴定亲和层析纯化抗原 竞争免疫组化鉴定获得的卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原的特异性 免疫沉淀 (IP) 鉴定卵巢癌单抗 COC166-9 对应抗原 ELISA 鉴定用纯化抗原免疫小鼠后获得的多抗血清反应特异性 免疫组织化学和细胞化学鉴定用纯化抗原免疫小鼠后获得的多抗血清的反应特异性 原核表达质粒 pgex-4t-1-ighg1 的构建及表达产物与单抗 COC166-9 的反应检测 真核表达质粒 pcdna3-myc-ighg1 的构建及表达产物与 COC166-9 的反应检测 四 讨论与小结 第二部分小结 第三部分 COC166-9-Ag 对肿瘤细胞表型的影响一 实验材料 ( 一 ) 细胞 ( 二 ) 主要试剂及材料 二 实验方法 ( 一 ) 细胞增殖实验 ( 二 ) Transwell 细胞迁徙实验 ( 三 )Transwell 细胞侵袭实验 ( 四 ) 统计分析方法
10 北京大学博士学位论文 三 实验结果 ( 一 ) 细胞增殖实验 单抗 COC166-9 能抑制抗原表达阳性卵巢癌细胞的增值能力 纯化抗原 COC166-9-Ag 能促进抗原表达阴性卵巢癌细胞的增值 ( 二 ) 细胞体外迁移实验 单抗 COC166-9 能抑制抗原阳性卵巢癌细胞的迁移能力 纯化抗原 COC166-9-Ag 能促进抗原阴性卵巢癌细胞的体外迁移 ( 三 ) 细胞体外侵袭实验 单抗 COC166-9 能抑制抗原阳性卵巢癌细胞的侵袭能力 亲和层析纯化 COC166-9 抗原能促进 IGHG1 阴性卵巢癌细胞的体外侵袭能力 四 讨论与小结 第三部分小结 全文总结及主要创新点 参考文献...68 文献综述...71 个人简历...82 致谢
11 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在判断卵巢癌预后中的意义 博士研究生 : 纪方兴 导师 : 寿成超教授 专业 : 生化和分子生物学 学院 : 北京大学临床肿瘤学院 摘要 COC166-9 是由北大人民医院妇瘤中心研制的的抗卵巢癌单克隆抗体, 但其对应抗原 (COC166-9-Ag) 及抗原表达的临床意义尚不清楚 在本研究中, 我们用单抗 COC166-9 对 111 例具有五年以上随访资料的卵巢癌标本进行了免疫组化检测及统计分析, 结果表明, 卵巢癌组织的 COC166-9-Ag 表达阳性率为 53.1%, 并与肿瘤复发具有显著的相关性 (P<0.001);Kaplan-Meier 单因素结果显示, COC166-9-Ag 表达阳性患者的总生存期和无病生存期均显著低于表达阴性患者 (P=0.026;P=0.002);Cox 多因素分析显示,COC166-9-Ag 可作为影响卵巢癌患者总生存率 (HR=2.145,P=0.027) 和无病生存率 (HR=2.383,P=0.013) 的潜在独立预后指标 为了对 COC166-9-Ag 进行鉴定, 我们运用亲和层析 MALDI-TOF-MS 质谱分析 免疫细胞化学 ELISA 和 Western Blot 等方法的研究结果提示,COC166-9-Ag 为人免疫球蛋白 gamma-1 重链恒定区 (IGHG1) 蛋白 ; 用纯化抗原和人免疫球蛋白在免疫组化 ELISA 等实验中均可竞争抑制 COC166-9 与相应抗原的结合 为了对鉴定的抗原进行进一步的验证, 我们用纯化了的抗原制备了小鼠多抗血清, 用免疫组化和免疫细胞化学实验证明, 该多抗血清与单抗 COC166-9 有同样的免疫反应谱 ; 从阳性卵巢癌细胞中克隆获得的 IGHG1 基因原核和真核表达产物, 均可被单抗 COC166-9 特异性识别, 上述结果从不同角度进一步确定了单抗 COC166-9 的抗原为 IGHG1 为了探讨肿瘤细胞表达 IGHG1 的生物学功能, 我们观察了 IGHG1 及单抗 COC166-9 对卵巢癌细胞表型的影响 结果表明 :IGHG1 对抗原表达阴性细胞 HOC1A 具促增殖 迁移和侵袭的能力, 对抗原表达阳性细胞 Caov-3 无作用 ; 而单抗 COC166-9 则能抑制抗原表达阳性细胞 Caov-3 的增殖 迁移和侵袭, 对抗原表达阴性细胞 HOC1A 的增殖 迁移和侵袭能力无影响 5
12 北京大学博士学位论文 上述结果表明, 单抗 COC166-9 有可能用于对卵巢癌患者预后的判断 ; 单抗 COC166-9 的对应抗原为 IGHG1, 能促进肿瘤细胞的增殖 迁移和侵袭, 在卵巢癌的肿瘤发生发展 中可能起重要作用 关键词 : 卵巢癌 ; 单克隆抗体 COC166-9, 预后, 抗原鉴定,IGHG1 6
13 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 Identification of the Antigen for Monoclonal Antibody COC166-9 and Prognostic Significance of its Expression in Ovarian Cancer Ph.D. Candidate: Fangxing Ji Supervisor: Prof. Chengchao Shou Peking University School of Oncology Major: Biochemistry and Molecular Biology Abstract COC166-9 is an ovarian cancer-specific monoclonal antibody prepared by Gynecologic Oncology Center, Peking University People s Hospital. However, the antigen for COC166-9 (COC166-9-Ag)has not been identified, and the clinical significance of COC166-9-Ag expression remains unknown. In this study, expression of COC166-9-Ag was detected by immunohistochemistry using COC166-9 in tumor tissues from 111 ovarian cancer patients with more than 5-year follow-up. The results showed that the rate of positive COC166-9-Ag expression was 53.1%. Expression of COC166-9-Ag was strongly correlated with the cancer recurrence (P<0.001). Kaplan-Meier survival curves demonstrated that patients with COC166-9-Ag-positive tumors had substantially shorter overall survival (P=0.026) and disease free survival (P=0.002). Positive COC166-9-Ag was also shown to be an independent predictive factor for overall survival (HR=2.454,P=0.016) and disease free survival (HR=2.331,P=0.021) in multivariate analysis using the Cox regression model. Using immunocytochemistry, immunoaffinity column chromatography, Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Western Blot analysis, immunoreactive protein bands detected by COC166-9 from ovarian cancer cell lysates were identified as human immunoglobulin gamma-1 heavy chain constant region (IGHG1). Immunohistochemistry and ELISA analysis revealed that the reaction of COC166-9 with COC166-9-Ag could be competitively inhibited either by human IgG or by purified antigen. Additionally, we generated the polyclonal anti-coc166-9-ag serum in BALB/c mice, which exhibited the same expression pattern as COC166-9 in immunocytochemitry and immunohistochemistry. Finally, 7
14 北京大学博士学位论文 we cloned full-length cdna of IGHG1 from ovarian cancer cell Caov-3. And it was proved that both of the prokaryoticly and eukaryoticly expressed IGHG1 could be detected by COC The experiments showed that the exogenous COC166-9-Ag could promote the proliferation, migration and invasion of COC166-9-Ag-negtive ovarian cancer cell HOC1A, whereas it had no influence on the phenotypes of COC166-9-Ag-positive ovarian cancer cell Caov-3. Correspondingly, COC166-9 inhibited the proliferation, migration and invasion of Caov-3, whereas it had no influence on the phenotypes of HOC1A. In summary, our results suggest that IGHG1 is the antigen of monoclonal antibody COC It may serve as a potential diagnostic and prognostic marker for ovarian cancer and may play an important role in ovarian cancer development. Key Words: ovarian cancer, monoclonal antibody COC166-9, prognosis, antigen cloning, IGHG1 8
15 抗卵巢癌单抗 COC166-9 抗原的克隆鉴定及其在卵巢癌预后判断中的应用 前 言 卵巢癌是最常见的恶性肿瘤之一, 在全球范围内, 其发病率在逐年增加 由于卵巢癌发病隐匿, 早期没有明显症状, 病人就诊时多数患者已处于中晚期, 故五年生存率较低 [1] 目前, 临床作为卵巢癌的肿瘤标志物很少,CEA 和 CA125 作为卵巢癌的主要标志物用于临床检测但其特异性不高, 在早期卵巢癌病人的检出率较低 [2] 因此需要寻找有高度敏感性及特异性 能用于进行病程追踪和治疗反应 对预后进行评估, 并有助于早期发现转移和复发的新的肿瘤标志物 COC166-9 是北京大学人民医院妇科肿瘤中心在上世纪八十年代用上皮型卵巢癌组织粗提液免疫小鼠后经细胞融合制备获得的一株单克隆抗体, 其与卵巢癌有较好的组织反应特异性 [3] 单抗 COC166-9 在卵巢癌的表达率在 75% 以上, 与正常和非肿瘤组织极少发生交叉 [4] 其与同位素的交联物能明显延长荷瘤小鼠的生存期[5] 用该抗体制备获得的抗独特型抗体 (Ab2)6B11 能成功诱导出淋巴细胞对卵巢细胞的有效杀伤作用 [6-7], 并能诱导产生可与卵巢癌细胞特异结合的抗抗独特型抗体 (Ab3)[8-9] 通过与上海生源医药研究有限公司的合作, 目前已完成对具抗原内影像的抗独特型抗体 6B11 的微型化改造及临床前相关研究的主要工作 [10-12], 并拟作为卵巢癌疫苗试用于临床 单抗 COC166-9 虽然对卵巢癌有良好的反应特异性和敏感性, 无论是与同位素的标记物或是与免疫毒素的偶联物, 还是源自 COC166-9 的小分子抗独特型疫苗, 均展示出良好的潜在临床应用前景, 但由于其对应抗原分子 COC166-9-Ag 迄今尚未获得克隆和鉴定, 阻碍了它在临床的应用, 同时也严重影响了相关产品的进一步开发和对其相关分子机制的研究 在本研究中我们首先系统检测并分析了 COC166-9-Ag 在卵巢癌中表达的临床意义, 然后通过亲和层析 质谱鉴定和多种免疫学方法的相互验证, 确定了该抗原为人免疫球蛋白 gamma-1 重链恒定区 (IGHG1), 最后通过卵巢癌细胞的表型实验初步探讨了 IGHG1 的生物学功能 9
16 北京大学博士学位论文 第一部分 COC166-9-Ag 在卵巢癌组织中的表达检测及临床意义 前期实验结果表明, 单抗 COC166-9 与卵巢癌有较好的组织反应特异性, 与正常和非肿瘤组织极少发生交叉 为了进一步探讨单抗 COC166-9 对应抗原 (COC166-9-Ag) 在卵巢癌中的表达情况及临床意义, 本研究首先选择了有完整临床病理和随访 5 年以上资料的 111 例原发卵巢癌患者的石蜡标本, 用免疫组织化学方法检测了卵巢癌组织中 COC166-9-Ag 的表达水平, 并分析了其与临床参数及预后的相关性 一 实验材料 ( 一 ) 组织标本收集北京大学人民医院妇科肿瘤中心 2001 年 1 月至 2005 年 12 月间有完整临床和随访资料的原发卵巢癌患者的存档蜡块 111 个原发灶蜡块 肿瘤分期参照国际抗癌联盟 (Union Internationale Contre Le Cancer,UICC) 的 TNM 分期标准 组织标本的使用通过人民医院人民委员会的批准 ( 该部分标本由人民医院妇科肿瘤中心提供 ) ( 二 ) 随访随访方式为门诊复查 信访和电话随访相结合 ; 对上述病例进行了 5 年以上的随访, 中位随访为 61 个月 无病生存期 (Disease Free Survival,DFS) 是指从手术之日至转移 / 复发或最后一次随访时间 ; 总生存期 (Overall Surivival,OS) 是指从手术之日至死亡或最后一次随访时间 所有患者资料完整, 并受到严格保密 ( 三 ) 试剂及仪器 APES(3-Aminopropyl Trie thoxysilane) 中性树胶 30% H 2 O 2 抗人 IgG 抗体均为北京中杉金桥生物技术有限公司产品 ;HRP 标记的组化检测试剂盒 (ENVISION TM System HRP Mouse) 购自 DAKO 公司 ; 苏木精购自 Sigma 公司 ; 其余生化试剂均购自北京化学公司, 为国产分析纯 图像采集系统为 Applied Imaging Corp 产品 COC166-9 单抗腹水由人民医院妇科肿瘤中心提供 10
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
: TNM TNM 2
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2000.11 2000.11 2000 11 Abstract: Background: The development of autoantibodies in the sera of patients with cancers has been described, but the mechanism is still not clear. Objective: The aim of this
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项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
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第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
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考生编号政治政治分外语外语分科目 1 科目 1 分科目 2 科目 2 分总分专业代码专业名称考试方式报名号 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 药理学全国统考 思想政治理论
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材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
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258 中 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) J Cent South Univ (Med Sci) 2016, 41(3) http://www.csumed.org DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2016.03.006 www.csumed.org/xbwk/fileup/pdf/201603258.pdf 上 皮 细 胞 黏 附 分 子 表 达 与 乳 腺
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Time Estimation of Occurrence of Diabetes-Related Cardiovascular Complications by Ching-Yuan Hu A thesis submitted in partial fulfillment of the requi
Time Estimation of Occurrence of Diabetes-Related Cardiovascular Complications by Ching-Yuan Hu Master of Science 2011 Institute of Chinese Medical Sciences University of Macau Time Estimation of Occurrence
( s y s t e m ) ( s t r e s s ) (stress model) ( s y s t e m ) [ ] [ 5 ] C o x [ 3 ] 1 [ 1, 2 ] [ 6-8 ] [ 9 ] Tw Fam Med Res 2003 Vol.1 No.1 23
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1, 4 1, 2 3 1 4 1, 2 1977 E n g e l 1999 5 1 ( 1 ) ( 2 ) ( 3 ) ( 4 ) ( 5 ) 2003 1 2 2-32 stress model, stress analysis [ 1 ] ( p s y c h o g e n e s i s ) (holism) (biomedical model) ( r e d u c t i o
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6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 赵 1, 凯 2, 贾彦博 3*, 王啸 2, 丁枫芸 2, 肖海龙 3, 黄建萍 3 (1., 310058; 2., 310019; 3., 310022) 摘要 : 目的 ELISA 方法, Balb/c 4, ELISA,,, ELISA 结果,
p53,ki-67 及 E- 钙黏蛋白在三阴性乳腺癌中的表达及预后雷珍, 等 309 Keywords In TNBC, p53 expression was associated with tumor size, TNM stage and histological grade (all P<5)
308 临床与病理杂志 J Clin Pathol Res 2017, 37(2) http://lcbl.amegroups.com doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2017.02.015 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2017.02.015 p53,ki-67 及 E-
南通大学杂志社 南通大学学报 医学版. */(& 0 1&( () (' / ' '-& -' (- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志
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864 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 863 曲 妥 珠 单 抗 联 合 多 西 紫 杉 醇 治 疗 Her-2 阳 性 乳 腺 癌 的 临 床 研 究 * 周 永 安, 刘 训 碧 黄 石 市 中 心 医 院 ( 普 爱 院 区 ) 乳 腺 肿 瘤 外 科, 湖 北 黄 石 435000 摘 要 : 目 的 探 析 注 射 用 曲
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《中国科学》A、E、G与F小开本版式设计
222 E 2006, 36(2): 222~234 * 1** 1,2 1,2 1,2 1,2 3 3 1 1 1,2 (1., 100080; 2., 100039; 3., 200031),. ;,,.. 20 90 (human genome project, HGP), ; HGP 2003, 21. (proteomics) ; (computational proteomics),,,
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鼻 腔 鼻 窦 恶 性 肿 瘤 的 回 顾 分 析 及 TrkB 的 表 达 Retrospective analysis and TrkB expression of the malignant tumor in nasal cavity and sinuses 研 究 生 : 李 丽 娟 学 号 : 90001402 年 级 : 2000 级 ( 七 年 制 ) 学 院 : 北 京 大 学 第
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硕 士 专 业 学 位 论 文 论 文 题 目 鲍 温 病 临 床 病 理 特 征 和 几 种 治 疗 方 法 比 较 的 分 析 研 究 研 究 生 姓 名 指 导 教 师 姓 名 禚 欣 欣 康 定 华 专 业 名 称 皮 肤 性 病 学 研 究 方 向 皮 肤 肿 瘤 与 皮 肤 病 理 论 文 提 交 日 期 2013 年 4 月 I 鲍 温 病 临 床 病 理 特 征 和 几 种 治 疗
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時間
104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專
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第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
66 a T. S. Kuhn 2 b a b Thomas Kuhn disciplinary matrix examplars or shared examples incommensurability
J Chin Med 20(1,2): 65-78, 2009 65 1 1 1,3 1,3 1,2 1 2 3 98 01 16 98 05 07 1 33378 123 03-3196200 2613 03-3298995 tcmchh@mail.cgu.edu.tw, chenlien@seed.net.tw 66 a T. S. Kuhn 2 b a b Thomas Kuhn1962-78
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-- Managing Traditional Temples A Case Study of Representative Temples in CHIA-YI i Abstract This research used the methodology of field study historical comparative research, and qualitative interview
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结 直 肠 癌 (, ) 是 消 化 道 最 常 见 的 恶 性 肿 瘤 之 一, 死 亡 率 在 世 界 上 排 名 第 位, 在 我 国 排 名 第 位, 每 年 约 有 万 人 死 于 发 生 发 展 的 病 理 机 制 十 分 复 杂, 目 前 认 为 基 因 突 变 是 癌 变 过 程 中
中 国 病 理 生 理 杂 志, ( ): - 杂 志 网 址 : : [ 文 章 编 号 ] - ( ) - - 可 变 剪 接 在 结 肠 癌 与 正 常 组 织 间 的 * 差 异 表 达 陶 敏, 黄 良 祥, 蔡 鹏 威, 晋 龙, 吴 文 冰, 曾 长 青, 黄 毅, 伍 严 安 ( 福 建 医 科 大 学 省 立 临 床 医 学 院, 福 建 省 立 医 院, 福 建 福 州 ) [
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宋学红 徐晓红 毕 蕙 魏丽惠 首都医科大学附属北京朝阳医院妇产科 北京 北京大学第一医院妇产科 北京大学人民医院妇产科 首都医科大学附属北京妇产医院妇瘤科 宫颈肿瘤 子宫颈筛查 Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó Ò Ó ¹ º» ¼ ¹ º» ¼ Ò Ó Ò Ó Ñ Ñ Ó Ò Ó Ñ Ò Ó Ò Ó Ñ Ñ Ò Ó Ò Ó Ñ Ñ Ò Ó
CD + 4 CD + 25 T The role of CD + 4 CD + 25 Regulatory T cells in the pathogenesis of vitiligo CD + 4 CD + 25 T The role of CD + 4 CD + 25 Regulatory T cells in the pathogenesis of vitiligo 7000064 2008
The role of chronic inflammation in pathogenesis of cervical spondylosis. Supervisor: Prof. Cai Qinlin, Prof. Wang Shaobo. Graduate student: Wang Shen
79 102 HE 1 102 45 44.1% 45 37 LCA 32 KP-1 5 KP-1 2 3 MRI 1-2 3 MRI 4 1 The role of chronic inflammation in pathogenesis of cervical spondylosis. Supervisor: Prof. Cai Qinlin, Prof. Wang Shaobo. Graduate
為 減 少 腫 瘤 治 療 時 間, 提 高 治 療 過 程 的 舒 適 度, 降 低 因 身 體 蠕 動 而 造 成 劑 量 給 予 的 不 確 定 性, 提 升 治 療 的 精 確 度, 增 加 腫 瘤 局 部 控 制 率, 避 免 正 常 組 織 接 受 到 不 必 要 的 劑 量, 降 低
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... (1)....(3)..(5)... (22) (22)......(22)... (22)... (23)....(33)... (33)....(34)....(47)....(51).....(52)......(61)......(62)
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認識膀胱腫瘤(Bladder Tumor)
頭 頸 癌 手 冊 我 的 姓 名 : 認 識 頭 頸 部 腫 瘤 ( ) 看 診 醫 院 : 財 團 法 人 長 庚 紀 念 醫 院 手 術 日 期 : 我 的 醫 師 : 個 案 管 理 師 : 聯 絡 方 式 : 長 庚 紀 念 醫 院 編 印 目 錄 : 前 言 前 言 頭 頸 部 的 構 造 及 功 能 頭 頸 癌 的 疾 病 介 紹 頭 頸 癌 的 主 要 症 狀 頭 頸 癌 的 預 防
by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2
论 著 临 床 研 究 doi: 0.7499/j.issn.008-8830.204.2.007 郑 州 市 城 区 儿 童 哮 喘 的 流 行 病 学 调 查 及 发 病 相 关 因 素 分 析 赵 坤 宋 桂 华 古 华 倩 2 刘 爽 3 张 岩 郭 彦 荣 (. 河 南 中 医 学 院 第 一 附 属 医 院 儿 科 医 院, 河 南 郑 州 450000; 2. 杭 州 市 余 杭 区
2006中國文學研究範本檔
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2015 1 330 GLOBAL EDUCATION Vol. 44 No1 2015 / 300387 / 300387 20 20 1926 20 1912 1912 1918 1919 34 1919 1921 1 1922 1923 1925 7 100 2 1922 3 1923 5 1923 1924 4 1927 1949 20 1. 20 5 35 2. 20 20 1927 1949
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Carboxymethylpachymaran CMP Pachyman 1 1 3 70 National Cancer Center Research Institute( Tsukijin Tokyo 4 1979 CMP CMP CMP CMP 1 1. CMP S180 H22 50 mg/kg, 100mg/kg, 200mg/kg 5mg/kg, 10mg/kg, 100mg/kg H
University of Science and Technology of China A dissertation for master s degree Research of e-learning style for public servants under the context of
中 国 科 学 技 术 大 学 硕 士 学 位 论 文 新 媒 体 环 境 下 公 务 员 在 线 培 训 模 式 研 究 作 者 姓 名 : 学 科 专 业 : 导 师 姓 名 : 完 成 时 间 : 潘 琳 数 字 媒 体 周 荣 庭 教 授 二 一 二 年 五 月 University of Science and Technology of China A dissertation for
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HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 硕 士 学 位 论 文 MASTER S DEGREE DISSERTATION 80 后 女 硕 士 生 择 偶 现 状 以 武 汉 市 七 所 高 校 为 例 POST-80S FEMALE POSTGRADUATE MATE SELECTION STATUS STUDY TAKE WUHAN SEVEN UNIVERSITIES
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5 6 Vol. 5 No. 6 2014 6 Journal of Food Safety and Quality Jun., 2014 icelisa 王伟华 1, * 田木星 1, 韩占江 2 (1. /, 843300; 2. /, 843300) 摘要 : 目的, icelisa( ) 方法, CPF-H1 CPF-H2,,, icelisa, 结果 ;, ; ; icelisa, : PBST,
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攝 影 作 品 觀 看 順 序 的 變 因 探 討 An Analysis of Photography Viewing Paths 戴 孟 宗 Tai, Meng-Tsung Ph.D. 國 立 臺 灣 藝 術 學 圖 傳 播 藝 術 學 系 副 教 授 Department of Graphic Communication Arts. National Taiwan University of
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研究論文 Assessment of Effectiveness of Passenger Seatbelt Reminder on Using Belt Rate - Toward Introducing Its Assessment in the New Car Assessm
研究論文 20144158 Assessment of Effectiveness of Passenger Seatbelt Reminder on Using Belt Rate - Toward Introducing Its Assessment in the New Car Assessment - Motoyuki Akamatsu Shinji Shimaoka Since use of
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2013 绎 Vol.15 No.4 阴 元元 450002 Ki-6772 Wistar 6 5 mg kg -1 30 0.8 mg kg -1 7.5 15.0 22.5 g kg -1 1 30 Ki-67 TUNEL Ki-67 P
国内高等医学院校基础医学二级学科评价结果（1）
国内高等校基础医学二级学科竞争力评价简介 北京大学医学图书馆参考国内外各项评价指标体系, 建立了一套基础医学二级学科竞争力评价指标体系 分别从人才队伍 科学研究和教学成果三方面一共涉及 34 项指标, 对全国 39 家校的 12 个基础医学二级学科进行了评价 我们已经连续做了 4 年的评价,2012 年度的评价结果见下表或 http://library.bjmu.edu.cn/ 名 次 2012 年度国内高等校基础医学二级学科评价结果
第 卷 3 $ 家族 是由 以及 这四个成员组成 该家族蛋白可 以参与肿瘤细胞增殖 浸润以及血管生成 研究显示 家族蛋白与多种肿瘤的临床病例特征及预 后相关 如胃癌 乳腺癌及非小细胞肺癌等 国内外目前关于 家族蛋白在结直肠癌中的报道还相对较少 而且绝大多数是关于单个 家族成员的研究 如 等 关于 家
第 卷第 期 年 月!"#!# $%# 临床医学 $ 家族蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义 刘传渊 钟 武 夏来阳 王 建 肖荷芳 余路虎 江西省赣州市人民医院 南昌大学附属赣州医院 胃肠疝外科 病理科 检验科 江西赣州 摘要 目的 通过检测表皮生长因子受体 家族蛋白在结直肠癌组织中的表达水平 探讨 家族蛋白在结直肠癌发生发展中的作用及其临床意义 方法 采用免疫组化及荧光定量 方法检测 例手术切除的结直肠癌组织及正常肠黏膜组织中
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75 J Chin Med 14(2): 75-85, 2003 (2002 8 20 2002 12 24 2003 1 8 ) 1 2 3 4 5 6 7 50 : 04-22340047 : 04-22342508E-mail: jcmt22@ms38.hinet.net 76 8 9 1180 1251 10 () 11 77 12 13 ( ) 14 (1) (2) () (1) (2)
基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting
國立中山大學學位論文典藏.PDF
Mina MBA91. 91 6 Abstract This research describes the value chain development of Taiwan foundry industry s investment in China and analyzes how the foundry firm establishes its value chain and strategy
Microsoft Word - 20031044陈昌华.doc
分 类 号 :R2 单 位 代 码 :10315 密 级 : 学 号 :20031044 2006 届 硕 士 研 究 生 毕 业 论 文 玄 麦 止 咳 颗 粒 对 阴 虚 风 燥 型 临 床 疗 效 和 气 道 阻 力 的 影 响 学 科 专 业 学 位 类 型 研 究 方 向 研 究 生 中 医 内 科 临 床 临 床 医 学 专 业 学 位 呼 吸 病 学 陈 昌 华 导 师 朱 佳 南 京
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HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 硕 士 学 位 论 文 MASTER S DEGREE DISSERTATION 女 性 主 义 视 角 下 女 大 学 生 就 业 性 别 歧 视 现 状 研 究 以 华 中 农 业 大 学 为 例 RESEARCH ON THE STATUS OF GENDER DISCRIMINATION IN EMPLOYMENT FOR FEMALE
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
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368 detected by Western blot expressed at all phases. The p21 protein was expressed in a few cells by immunohistochemistry, but p21 could not detected
367 (human lens epithelial cells, HLEC) E (cyclin dependent kinase 2, CDK 2 ) (cyclin2 dependent2kinase inhibitor, CKI) p21, HLEC (posterior capsule opacification, PCO) HLEC HLE2B3, ; ; RNA (reverse transcription
985 Journal of CUPL No.2 A Bimo nt hly Mar ch 2 0 1 0 ABSTRACTS Getting to the Root and Compromising China with the West: Rebuilding the Chinese Legal System 5 Yu Ronggen /Professor,
( ) ChinJJointSurg(ElectronicEdition), February, Vol., No. Totalkneearthroplastyinrheumatoidstiforankylosed knees SUN Tie-zheng, LU Hou-shan.Arthritis
孙铁铮吕厚山 孙铁铮, 副主任医师, 副教授, 硕士研究生导师 年毕业于北京大学, 获得医学博士学位, 在北京大学人民医院关节病诊疗研究中心工作 ; 年曾 赴美国纽约 BethIsrael 医学中心关节病诊疗研究中心进修学习人工关节置换和 关节镜技术 ; ~ 年赴美国哈佛大学麻省总医院骨科研修 目前在北京 大学人民医院关节病诊疗研究中心从事关节疾病的诊断和外科治疗 年和 年连续获得两项国家自然科学基金课题资助,
THE APPLICATION OF ISOTOPE RATIO ANALYSIS BY INDUCTIVELY COUPLED PLASMA MASS SPECTROMETER A Dissertation Presented By Chaoyong YANG Supervisor: Prof.D
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2014 3 Mar. 2014 2 Arab World Studies No.2 D815 30 2010 http://www.siyassa.org.eg/newscontent/3/111/1782. 42 2010 2011 2011 2011 5 62 http://www.al-watan.com/viewnews.aspx?n=e6b9c4a2-0e79-4800-8833-273c7f436595&d=20
福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析
福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑
课题调查对象：
1 大 陆 地 方 政 府 大 文 化 管 理 职 能 与 机 构 整 合 模 式 比 较 研 究 武 汉 大 学 陈 世 香 [ 内 容 摘 要 ] 迄 今 为 止, 大 陆 地 方 政 府 文 化 管 理 体 制 改 革 已 经 由 试 点 改 革 进 入 到 全 面 推 行 阶 段 本 文 主 要 通 过 结 合 典 型 调 查 法 与 比 较 研 究 方 法, 对 已 经 进 行 了 政 府
不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体混合感染调查
不 明 原 因 发 热 病 人 钩 端 螺 旋 体 和 巴 尔 通 体 感 染 调 查 王 跃 兵, 向 东, 杨 发 莲, 彭 海 燕, 于 彬 彬, 杨 慧 云 南 省 地 方 病 防 治 所, 云 南 大 理 671000 摘 要 : 目 的 了 解 不 明 原 因 发 热 病 人 钩 端 螺 旋 体 和 巴 尔 通 体 的 感 染 状 况 方 法 用 显 微 镜 凝 集 实 验 方 法 检
2015 2 363 44
20152 363 CONTEMPORARY FINANCE & ECONOMICS NO.2, 2015 Serial NO.363 : F830.93 : A : 1005-0892 (2015) 02-0043-12 DOI:10.13676/j.cnki.cn36-1030/f.2015.02.005 43 2015 2 363 44 45 2015 2 363 F i,t,t T i t
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1 Tunghai University Chinese Literature Department Doctoral Dissertation AdvisorProfessor Lee Li-shin Research into Tang Dynasty Poetry about Amusement Activities AuthorChen Cheng-ping July 3,2006 2 3
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1. (74)16 5-30 2. (61) 3. (84) : 4. (51) 5. (76) 6. (52) 7. (82) - : 267-276 :: 8. (86) 9. (84) 140 243-255 10. (88) 11. (86) 115-144 12. (51) 408-425 13. (6) 33-36 14. (67) 15. (19) 16. ( ) (72) 17. (75)
Shanghai International Studies University THE STUDY AND PRACTICE OF SITUATIONAL LANGUAGE TEACHING OF ADVERB AT BEGINNING AND INTERMEDIATE LEVEL A Thes
上 海 外 国 语 大 学 硕 士 学 位 论 文 对 外 汉 语 初 中 级 副 词 情 境 教 学 研 究 与 实 践 院 系 : 国 际 文 化 交 流 学 院 学 科 专 业 : 汉 语 国 际 教 育 姓 名 : 顾 妍 指 导 教 师 : 缪 俊 2016 年 5 月 Shanghai International Studies University THE STUDY AND PRACTICE
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i YouTube was established in 2005 until now only more than 3 years. Although it was established just more than 3 years, it has already become the one of multitudinous video shares website that most people
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2018 3 40 2 Modern Law Science Mar. 2018 Vol. 40 No. 2 1001-2397 2018 02-0041 - 16 100872 DF092 A DOI 10. 3969/j. issn. 1001-2397. 2018. 02. 03!"# 1 2017-12 - 05 2017 17CFX006 1. 1982 M. 1997 73-146 216-244.