研 发 前 沿 目 前 临 床 主 流 推 荐 的 质 子 泵 抑 制 剂 联 合 抗 生 素 根 除 H. pylori 方 案 随 着 抗 生 素 耐 药 率 的 增 高 逐 渐 出 现 根 除 率 下 降 的 问 题. 因 此 在 寻 求 新 的 抗 生 素 使 用 方 案 的 同 时 已 有
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- 瞒 郦
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1 在 线 投 稿 : 帮 助 平 台 : DOI: /wcjd.v23.i6.949 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 2 月 28 日 ; 23(6): ISSN (print) ISSN (online) 2015 年 版 权 归 百 世 登 出 版 集 团 有 限 公 司 所 有. 研 究 快 报 RAPID COMMUNICATION 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 热 配 伍 对 幽 门 螺 旋 杆 菌 的 体 外 抑 菌 实 验 陈 智 龙, 吕 永 慧, 王 玎, 涂 星 陈 智 龙, 吕 永 慧, 广 州 中 医 药 大 学 附 属 广 州 市 中 医 医 院 脾 胃 科 广 东 省 广 州 市 王 玎, 广 州 中 医 药 大 学 中 药 学 院 广 东 省 广 州 市 涂 星, 广 州 中 医 药 大 学 第 一 附 属 医 院 临 床 药 学 部 广 东 省 广 州 市 陈 智 龙, 在 读 博 士, 主 要 从 事 中 医 药 治 疗 内 科 疾 病 的 临 床 研 究. 国 家 科 技 部 十 一 五 国 家 科 技 支 撑 计 划, No. 2007BAI20B094 作 者 贡 献 分 布 : 吕 永 慧 主 要 完 成 课 题 的 设 计 与 指 导, 参 与 全 部 研 究 过 程, 提 供 实 验 所 需 经 费, 论 文 修 改 ; 陈 智 龙 负 责 试 剂 采 购, 数 据 处 理 与 分 析 及 论 文 的 撰 写 ; 王 玎 负 责 菌 种 购 买 试 剂 配 制 观 测 指 标 测 定 及 汇 总, 论 文 的 修 改 ; 涂 星 负 责 实 验 相 关 资 料 收 集 与 论 文 修 改. 通 讯 作 者 : 吕 永 慧, 教 授, 主 任 医 师, , 广 东 省 广 州 市 荔 湾 区 珠 玑 路 16 号, 广 州 中 医 药 大 学 附 属 广 州 市 中 医 院 脾 胃 科. scaltor@163.com 电 话 : 收 稿 日 期 : 修 回 日 期 : 接 受 日 期 : 在 线 出 版 日 期 : In vitro bacteriostatic activity of Qingre Huashi Shuwei formula and its hot-cold drug combinations against Helicobacter pylori Zhi-Long Chen, Yong-Hui Lv, Ding Wang, Xing Tu Zhi-Long Chen, Yong-Hui Lv, Department of Spleen and Stomach, Guangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou , Guangdong Province, China Ding Wang, School of Chinese Materia Medica, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou , Guangdong Province, China Xing Tu, Clinical Pharmacy Department, the First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou , Guangdong Province, China Supported by: the National 11 th "Five-Year" Technology Support Program of the Ministry of Science and Technology of China, No. 2007BAI20B094 Correspondence to: Yong-Hui Lv, Professor, Chief Physician, Department of Spleen and Stomach, Guangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, 16 Zhuji Road, Liwan District, Guangzhou , Guangdong Province, China. scaltor@163.com Received: Revised: Accepted: Published online: Abstract AIM: To compare the in vitro bacteriostatic activity of Qingre Huashi Shuwei formula and its hot-cold drug combinations against Helicobacter pylori (H. pylori). M E T H O D S : T h e m i n i m a l i n h i b i t o r y concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of Qingre Huashi Shuwei formula and its hot-cold drug combinations against H. pylori were determined using agar diffusion method and dilution method. RESULTS: The bacterostasis circle diameters of Qingre Huashi Shuwei formula, hot drug group, cold drug group, and antibiotics were mm ± 1.12 mm, 3.13 mm ± 0.82 mm, mm ± 0.95 mm, and mm ± 1.33 mm, respectively. The MIC of Qingre Huashi Shuwei formula was 7.81 mg/ml, and the MBC was mg/ml. CONCLUSION: Qingre Huashi Shuwei formula and its cold drug combination perform better in terms of in vitro bacteriostatic activity against H. pylori, and the bacteriostatic activity of Qingre Huashi Shuwei formula against H. pylori mostly comes from its cold drugs Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved. 背 景 资 料 幽 门 螺 旋 杆 菌 (H e l i c o b a c t e r pylori, H. pylori ) 感 染 普 遍 存 在 于 全 球 范 围 内. 而 其 在 我 国 的 感 染 率 高 达 半 数 以 上. 现 有 的 研 究 已 经 充 分 证 明 其 为 慢 性 胃 炎 胃 溃 疡 胃 癌 等 疾 病 的 重 要 诱 因. 寻 求 根 除 H. pylori 感 染 有 效 方 案 成 为 目 前 医 学 研 究 的 热 点. 同 行 评 议 者 陈 卫 昌, 教 授, 苏 州 大 学 附 属 第 一 医 院 消 化 内 科 WCJD 949
2 研 发 前 沿 目 前 临 床 主 流 推 荐 的 质 子 泵 抑 制 剂 联 合 抗 生 素 根 除 H. pylori 方 案 随 着 抗 生 素 耐 药 率 的 增 高 逐 渐 出 现 根 除 率 下 降 的 问 题. 因 此 在 寻 求 新 的 抗 生 素 使 用 方 案 的 同 时 已 有 大 量 学 者 开 始 寻 求 其 他 治 疗 方 法, 如 益 生 菌, 中 药 等, 并 取 得 了 一 定 成 果. 相 关 报 道 目 前 大 量 的 实 验 研 究 及 临 床 观 察 提 示 清 热 燥 湿 类 中 药 及 方 剂 中 药 对 于 H. pylori 有 显 著 的 杀 灭 作 用. Key Words: Qingre Huashi Shuwei formula; Helicobacter pylori ; Bacteriostatic activity; Minimal inhibitory concentration; Minimum bactericidal concentration Chen ZL, Lv YH, Wang D, Tu X. In vitro bacteriostatic activity of Qingre Huashi Shuwei formula and its hotcold drug combinations against Helicobacter pylori. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2015; 23(6): URL: DOI: 摘 要 目 的 : 探 讨 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 热 配 伍 对 幽 门 螺 旋 杆 菌 (Helicobacter pylori, H. pylori ) 的 体 外 抑 制 作 用. 方 法 : 运 用 琼 脂 扩 散 法 液 体 稀 释 法 考 察 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 热 配 伍 对 H. pylori 的 最 低 抑 菌 浓 度 (minimal inhibitory concentration, MIC) 与 最 低 杀 菌 浓 度 (minimum bactericidal concentration, MBC). 结 果 : 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 热 性 配 伍 组 寒 性 配 伍 组 和 抗 生 素 组 的 抑 菌 环 直 径 分 别 为 mm±1.12 mm 3.13 mm±0.82 mm mm±0.95 mm mm±1.33 mm, 清 热 化 湿 舒 胃 方 的 MIC 为 7.81 mg/ml, MBC 为 mg/ml. 结 论 : 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 性 配 伍 组 对 H. pylori 具 有 较 好 的 抑 制 作 用, 且 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 H. pylori 的 抑 制 作 用 可 能 是 由 寒 性 药 物 黄 芩 和 蒲 公 英 实 现 的 年 版 权 归 百 世 登 出 版 集 团 有 限 公 司 所 有. 关 键 词 : 清 热 化 湿 舒 胃 方 ; 幽 门 螺 旋 杆 菌 ; 抑 菌 作 用 ; 最 低 抑 菌 浓 度 ; 最 低 杀 菌 浓 度 核 心 提 示 : 本 文 针 临 床 验 方 清 热 化 湿 舒 胃 方 进 行 幽 门 螺 旋 杆 菌 (Helicobacter pylori, H. pylori ) 外 抑 菌 试 验. 并 将 其 组 成 中 药 按 药 性 寒 热 进 行 分 组 对 比. 结 果 提 示 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 性 配 伍 组 对 H. pylori 具 有 较 好 的 抑 制 作 用, 且 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 H. pylori 的 抑 制 作 用 可 能 是 由 寒 性 药 物 黄 芩 和 蒲 公 英 实 现 的. 陈 智 龙, 吕 永 慧, 王 玎, 涂 星. 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 热 配 伍 对 幽 门 螺 旋 杆 菌 的 体 外 抑 菌 实 验. 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015; 23(6): URL: com/ /23/949.asp DOI: org/ /wcjd.v23.i 引 言 幽 门 螺 旋 杆 菌 (Helicobacter pylori, H. pylori ) 是 慢 性 胃 炎 及 消 化 性 溃 疡 发 生 和 复 发 的 重 要 因 素, 在 脾 胃 湿 热 和 胃 络 淤 血 型 胃 炎 患 者 的 体 内 阳 性 率 较 高 [1,2]. 清 热 化 湿 舒 胃 方 是 广 州 市 中 医 院 脾 胃 科 吕 永 慧 主 任 治 疗 H. pylori 相 关 性 胃 炎 的 经 验 方, 由 姜 厚 朴 佩 兰 蒲 公 英 等 11 味 药 组 成, 具 有 清 热 化 湿, 和 中 舒 胃 之 功 效, 主 要 用 于 治 疗 脾 胃 湿 热 型 慢 性 胃 炎 及 胃 溃 疡. 方 中 寒 热 并 用, 辛 开 苦 降, 清 脾 胃 之 湿 热, 泻 脾 胃 之 湿 浊, 攻 补 兼 施, 临 床 疗 效 较 为 肯 定 [3]. 抗 生 素 对 照 组 的 用 药 选 择 参 考 既 往 相 关 研 究 用 法 [4]. 本 研 究 拟 根 据 药 物 的 寒 热 属 性 将 全 方 拆 分 为 寒 性 组 热 性 组 与 全 方 进 行 对 比, 进 行 体 外 抗 菌 活 性 实 验, 探 讨 清 热 化 湿 舒 胃 方 治 疗 H. pylori 感 染 所 致 的 胃 肠 道 疾 病 的 机 制, 为 进 一 步 研 究 奠 定 基 础. 1 材 料 和 方 法 1.1 材 料 SⅡ 悉 尼 H. p y l o r i 菌 株 ( 澳 大 利 亚 悉 尼 大 学 微 生 物 实 验 室 ). 姜 厚 朴 15 g( 批 号 : ) 佩 兰 10 g( 批 号 : ) 蒲 公 英 15 g( 批 号 : ) 广 藿 香 10 g( 批 号 : ) 紫 苏 梗 15 g( 批 号 : ) 枳 壳 15 g( 批 号 : ) 均 购 自 广 东 省 药 材 公 司 中 药 饮 片 厂 ; 茯 苓 15 g( 批 号 : ) 白 术 15 g( 批 号 : ) 熟 党 参 15 g( 批 号 : ) 黄 芩 15 g( 批 号 : ) 甘 草 6 g( 批 号 : ) 均 购 自 广 州 至 信 中 药 饮 片 有 限 公 司 ; 经 广 州 中 医 药 大 学 第 一 附 属 医 院 药 学 部 鉴 定 均 为 符 合 2010 版 中 国 药 典 规 定 并 加 工 炮 制 合 格 的 饮 片 ; 庆 大 霉 素 ( 批 号 : , 国 药 集 团 容 生 制 药 有 限 公 司 ); 氨 苄 青 霉 素 ( 批 号 : , 北 京 悦 康 凯 悦 制 药 有 限 公 司 ); 阿 奇 霉 素 ( 批 号 : , 国 药 集 团 国 瑞 药 业 有 限 公 司 ); H. pylori 培 养 基 ( 杭 州 天 和 微 生 物 有 限 公 司 ). 隔 水 式 恒 温 培 养 箱 ( 上 海 三 发 科 学 仪 器 有 限 公 司 ); 立 式 电 热 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 ( 上 海 申 安 医 疗 器 械 厂 ). 1.2 方 法 供 试 液 的 制 备 : 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 : 取 饮 片 146 g, 用 纱 布 包 裹 加 蒸 馏 水 浸 泡 30 min, 煎 煮 2 次, 每 次 30 min, 将 2 次 药 液 混 合, 纱 布 醋 滤 去 渣, 旋 转 蒸 发 仪 减 压 浓 缩 至 含 生 药 量 1 g/ml, 高 压 灭 菌 后 装 入 已 灭 菌 的 玻 璃 瓶 中 4 冷 藏 备 WCJD 950
3 用. 寒 性 组 : 取 蒲 公 英 黄 芩 各 30 g 按 上 述 处 理 方 法, 同 法 制 备 即 得. 热 性 组 : 取 除 蒲 公 英 和 黄 芩 外 的 其 他 药 物 饮 片 各 30 g, 按 上 述 处 理 方 法, 同 法 制 备 即 得. 抗 生 素 组 : 取 庆 大 霉 素 400 mg 氨 苄 青 霉 素 2 g 和 阿 奇 霉 素 5 g, 用 无 菌 生 理 盐 水 溶 解 并 定 容 至 100 ml, 即 得 含 庆 大 霉 素 氨 苄 青 霉 素 和 阿 奇 霉 素 分 别 为 mg/ml 的 混 合 抗 生 素 溶 液 H. pylori 菌 液 的 制 备 : 取 Skirrow 平 板, 密 集 划 线 接 种 H. pylori 培 养 物, 与 37 微 需 氧 环 境 (50 ml/l O 2, 100 ml/l CO 2, 850 ml/l N 2 ) 中 培 养 72 h, 用 灭 菌 生 理 盐 水 洗 下 菌 苔, 混 匀. 采 用 快 速 尿 素 酶 试 验 (rapid urease test, RUT) [5] 过 氧 化 氢 酶 试 验 和 涂 片 革 兰 染 色 后 显 微 镜 下 观 察 对 菌 种 进 行 鉴 定 [6-8]. 对 鉴 定 为 阳 性 的 菌 液 以 灭 菌 生 理 盐 水 溶 液 溶 解, 酶 标 仪 于 550 nm 处 测 定 其 A 值, 使 其 值 在 之 间, 即 得 CFU/mL 的 菌 液, 4 冷 藏 备 用 琼 脂 扩 散 法 测 定 抑 菌 环 直 径 : 取 Skirrow 培 养 基, 将 H. pylori 菌 液 均 匀 涂 布 在 其 表 面, 将 无 菌 牛 津 杯 等 距 离 置 于 培 养 基 表 面, 每 种 药 液 做 6 个 平 行 孔. 用 无 菌 吸 管 分 别 吸 取 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 寒 性 组 热 性 组 药 液 混 合 抗 生 素 药 液 0.2 ml, 注 入 牛 津 杯 中. 将 培 养 基 置 于 37 微 需 氧 环 境 中 培 养 72 h, 测 定 抑 菌 环 直 径 液 体 稀 释 法 测 定 最 低 抑 菌 浓 度 (minimal inhibitory concentration, MIC) 最 低 杀 菌 浓 度 (minimum bactericidal concentration, MBC): 根 据 抑 菌 环 直 径, 选 取 抑 菌 效 果 最 佳 的 配 伍 组 合, 采 用 液 体 稀 释 法 测 定 MIC 和 MBC. 取 最 佳 抑 菌 配 伍 组 合 药 液, 用 培 养 基 倍 比 稀 释 成 的 9 个 稀 释 度, 每 支 试 管 含 药 培 养 基 1.00 ml, 分 别 加 入 0.05 ml 菌 液. 另 取 3 支 试 管, 其 中 1 支 加 培 养 基 1.00 ml 和 0.05 ml 菌 液, 1 支 加 培 养 基 1.00 ml 作 为 对 照 组, 另 1 支 加 1.00 ml 培 养 基 0.05 ml 菌 液 和 0.20 ml 抗 生 素 混 合 液. 置 于 37 微 需 氧 环 境 中 培 养 72 h, 观 察 结 果, 以 液 体 未 变 浑 浊 的 最 高 稀 释 度 作 为 试 验 药 物 的 MIC. 依 次 将 未 见 细 菌 生 长 的 各 管 培 养 物 接 种 于 平 板 上, 置 于 37 微 需 氧 环 境 中 培 养 72 h, 以 未 长 菌 的 最 高 稀 释 度 作 为 试 验 药 物 的 MBC [9]. 统 计 学 处 理 所 有 资 料 采 用 S P S S17.0 进 行 统 计 分 析, 均 为 计 量 资 料, 以 mean±sd 表 表 1 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 热 配 伍 对 幽 门 螺 旋 杆 菌 抑 菌 环 直 径 的 影 响 (mean±sd, n = 5) 分 组 a P <0.05 vs 抗 生 素 组 ; c P <0.05 vs 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 ; e P <0.05 vs 寒 性 药 物 组. 示, 对 样 本 先 进 行 方 差 齐 性 检 验, 方 差 齐 时 用 One-way ANOVA 检 验, 并 采 用 LSD 分 析 比 较 ; 方 差 不 齐, 采 用 非 参 数 秩 和 检 验, 先 用 Kruskal- Wallis H test 比 较 总 的 差 异, 再 用 Mann-Whitney U test 进 行 两 组 之 间 比 较. 以 P <0.05 为 差 异 有 统 计 学 意 义. 2 结 果 2.1 H. pylori 的 鉴 定 显 微 镜 下 观 察 可 见 典 型 的 螺 旋 状 或 S 状 弯 曲, 偶 见 杆 状 或 圆 球 状, 菌 体 一 端 或 两 端 有 多 根 带 鞘 鞭 毛, 革 兰 氏 染 色 呈 阴 性, 运 动 活 泼, 均 以 长 度 约 3-5 μm, 宽 度 约 0.8 μm( 图 1A, B); 快 速 尿 素 酶 试 验 显 示 与 细 菌 尿 素 酶 比 色 定 性 检 测 试 剂 盒 接 触 部 分 在 2 min 左 右 变 成 紫 红 色, 呈 阳 性 结 果 ( 图 1C); 过 氧 化 氢 酶 试 验 可 见 平 皿 上 出 现 大 量 的 气 泡, 呈 阳 性 结 果 ( 图 1D). 结 果 表 明, H. pylori 培 养 成 活. 2.2 抑 菌 环 直 径 的 测 定 结 果 与 抗 生 素 组 比 较, 其 他 3 组 的 抑 菌 环 直 径 均 明 显 降 低, 提 示 抗 生 素 的 对 H. pylori 的 体 外 抑 制 效 果 最 好, 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 和 寒 性 药 物 组 对 H. pylori 有 较 好 的 抑 制 作 用. 热 性 药 物 组 的 抑 菌 环 与 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 相 比 显 著 降 低 (P <0.05), 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 与 寒 性 药 物 组 的 抑 菌 环 差 异 无 统 计 学 意 义, 提 示 寒 性 药 物 组 对 H. pylori 的 体 外 抑 制 作 用 和 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 的 抑 制 作 用 相 当, 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 H. pylori 的 体 外 抑 制 作 用 主 要 是 寒 性 药 物 发 挥 作 用. 抑 菌 环 直 径 (mm) 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 14.30±1.12 a 热 性 药 物 组 3.13±0.82 ace 寒 性 药 物 组 13.93±0.95 a 抗 生 素 组 23.25± MIC MBC 测 定 结 果 由 表 1 可 知 清 热 化 湿 舒 胃 方 组 和 寒 性 药 物 组 的 抑 菌 环 直 径 差 异 无 统 计 学 意 义, 故 选 取 抑 菌 效 果 最 佳 的 清 热 化 湿 舒 胃 方 作 为 研 究 对 象, 测 定 MIC 和 MBC, 结 果 如 表 2. 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 H. pylori 的 MIC 为 7.81 mg/ml, MBC 为 mg/ml, 在 试 验 检 测 的 浓 度 范 围 内 (0.98 mg/ml mg/ml). 创 新 盘 点 本 文 针 对 临 床 验 方 清 热 化 湿 舒 胃 方 进 行 H. pylori 体 外 抑 菌 试 验. 并 首 次 将 其 组 成 中 药 按 其 药 性 的 寒 热 分 组, 对 比 其 抑 菌 效 果. 从 而 进 一 步 了 解 清 热 化 湿 舒 胃 方 杀 灭 H. pylori 的 作 用 机 制. 应 用 要 点 清 热 化 湿 舒 胃 方 体 外 抑 菌 试 验 证 明 其 对 于 H. pylori 具 有 明 显 的 体 外 抑 菌 作 用. 为 其 临 床 应 用 提 供 了 实 验 依 据. WCJD 951
4 名 词 解 释 最 低 抑 菌 浓 度 : 指 的 是 抑 制 细 菌 生 长 所 需 的 最 小 药 物 浓 度 ; 最 低 杀 菌 浓 度 : 定 义 为 在 一 定 条 件 下, 使 绝 大 多 数 微 生 物 被 杀 死, 但 允 许 有 最 少 量 微 生 物 存 活 的 药 物 最 低 浓 度. 两 者 是 反 映 药 物 抑 菌 能 力 的 指 标. A C B D 图 1 H. pylori 的 显 微 鉴 别 和 生 化 鉴 别 结 果. A: 显 微 观 察 ( 200); B: 显 微 观 察 ( 800); C: 过 氧 化 氢 酶 试 验 结 果 ; D: 快 速 尿 素 酶 试 验. H. pylori : 幽 门 螺 旋 杆 菌. 表 2 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 幽 门 螺 旋 杆 菌 的 抑 菌 作 用 测 定 结 果 试 管 号 倍 比 稀 释 度 药 物 含 量 (mg/ml) 试 管 观 察 结 果 菌 落 生 长 情 况 透 明 透 明 透 明 透 明 透 明 透 明 透 明 6 个 菌 落 浑 浊 18 个 菌 落 浑 浊 52 个 菌 落 11 培 养 基 0.00 透 明 - 12 培 养 基 + 菌 液 0.00 浑 浊 380 个 菌 落 13 培 养 基 + 菌 液 + 抗 生 素 0.00 透 明 - 1 为 液 体 未 变 浑 浊 的 最 高 稀 释 度, 即 试 验 药 物 的 MIC 为 7.81 mg/ml; 2 为 未 长 菌 的 最 高 稀 释 度, 即 试 验 药 物 的 MBC 为 mg/ml. MIC: 最 低 抑 菌 浓 度 ; MBC: 最 低 杀 菌 浓 度. 3 讨 论 [10] 流 行 病 学 调 查 结 果 显 示, 我 国 为 H. pylori 高 感 染 地 区, 感 染 率 高 达 40%-60%. 其 中, 广 东 地 区 的 H. pylori 感 染 率 高 达 42.01%, 而 西 藏 地 区 [11,12] H. pylori 的 感 染 率 更 高 达 84.62%. 有 报 告 指 出 H. pylori 感 染 与 消 化 性 溃 疡 胃 黏 膜 相 关 淋 巴 组 织 淋 巴 癌 萎 缩 性 胃 炎 胃 癌 等 疾 病 的 发 生 密 切 相 关. 以 往 主 流 的 H. pylori 感 染 的 根 除 主 要 采 用 三 联 治 疗 方 案, 取 得 了 一 定 的 治 疗 效 果. 但 近 年 因 出 现 抗 生 素 耐 受 不 良 反 应 以 及 复 发 等 问 题, H. pylori 的 根 除 率 已 受 到 了 显 著 影 响 [13]. [14-16] 目 前 相 关 研 究 已 经 表 示 其 对 于 H. pylori 的 清 除 率 已 开 始 下 降, 并 低 于 甚 至 远 低 于 理 想 值. [17] 而 最 新 共 识 意 见 所 提 倡 的 铋 剂 四 联 方 案 虽 清 除 率 较 理 想, 但 伴 随 而 来 的 不 良 反 应 及 铋 累 积 引 发 的 潜 在 不 安 全 因 素 也 不 容 忽 视. 已 有 不 少 学 者 开 始 将 H. pylori 清 除 方 案 从 单 纯 的 三 联 根 除 方 案 转 向 配 合 更 为 安 全 易 为 患 者 所 接 受 的 中 药 微 生 态 制 剂 等 治 疗 方 案, 并 取 得 了 一 定 的 疗 效 [11,18]. 中 药 作 为 H. pylori 清 除 的 辅 助 方 案, 在 多 项 研 究 中 已 经 证 明 其 确 切 的 治 疗 价 WCJD 952
5 值 [19,20], 并 存 在 较 大 的 挖 掘 潜 力. 但 目 前 相 关 研 究 相 对 缺 乏, 仍 需 进 行 大 量 的 实 验 与 临 床 研 究. 在 既 往 研 究 中, 清 热 解 毒 类 药 物 被 认 为 具 有 抗 H. pylori 作 用 : 已 有 研 究 发 现 黄 连 蒲 公 英 [21] 黄 芩 大 黄 金 银 花 鱼 腥 草 土 茯 苓 白 花 蛇 舌 草 木 香 高 良 姜 党 参 黄 芪 甘 草 等 具 有 一 定 的 抗 H. pylori 作 用. 本 研 究 发 现 清 热 化 湿 舒 胃 方 的 寒 性 药 物 组 : 黄 芩 和 蒲 公 英, 其 抑 菌 环 直 径 与 全 方 组 差 异 无 统 计 学 意 义, 表 明 清 热 化 湿 舒 胃 方 体 外 抗 H. pylori 活 性 可 能 来 自 黄 芩 和 蒲 公 英. 清 热 化 湿 舒 胃 方 以 清 热 燥 湿, 行 气 和 胃 为 治 则, 选 用 具 有 健 脾 燥 湿 行 气 功 效 的 药 物 和 具 有 清 热 解 毒 燥 湿 功 效 的 药 物 组 方, 全 方 寒 热 互 用 以 调 和 脾 胃 之 阴 阳, 补 泻 兼 施 以 顾 脾 胃 之 虚 实. 在 本 研 究 中 发 现, 在 琼 脂 扩 散 法 中 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 H. pylori 的 抑 制 作 用 与 寒 性 配 伍 组 差 异 无 统 计 学 意 义, 但 均 优 于 热 性 配 伍 组, 说 明 寒 性 配 伍 组 与 清 热 化 湿 舒 胃 方 对 H. pylori 的 抗 菌 作 用 相 当, 这 也 正 与 黄 芩 和 蒲 公 英 的 药 理 作 用 相 符 合, 体 现 了 清 热 化 湿 舒 胃 方 清 热 燥 湿, 行 气 和 胃 的 配 伍 原 则. 方 中 热 性 配 伍 虽 无 明 显 的 抑 菌 作 用, 但 其 可 能 与 修 复 H. pylori 感 染 所 致 胃 肠 道 损 伤 有 关, 还 有 待 进 一 步 研 究. 4 参 考 文 献 1 王 彦. H. pylori 相 关 性 慢 性 胃 炎 证 素 研 究 及 中 医 药 治 疗 的 疗 效 评 价 研 究. 北 京 : 北 京 中 医 药 大 学, 陈 润 花, 刘 敏, 陈 亮, 师 宁, 余 求 祥, 丁 霞. 幽 门 螺 杆 菌 相 关 性 慢 性 胃 炎 中 医 证 候 分 布 特 点 文 献 研 究. 中 华 中 医 药 杂 志 2013; 28: 陈 芳. 清 热 化 湿 法 联 合 西 药 治 疗 HP 相 关 性 胃 炎 临 床 疗 效 观 察. 广 州 : 广 州 中 医 药 大 学, 刘 翔. 胃 内 菌 群 对 H. pylori 定 植 的 影 响 和 双 歧 杆 菌 治 疗 H. pylori 感 染 的 有 效 性 研 究. 长 沙 : 中 南 大 学, 王 艳 荣, 张 秋 瓒. 质 子 泵 抑 制 剂 对 幽 门 螺 杆 菌 快 速 尿 素 酶 法 检 测 的 影 响. 中 国 现 代 医 学 杂 志 2011; 21: 刘 莉, 刘 都 礼, 李 佽, 陈 志 英. 检 测 胃 幽 门 螺 旋 杆 菌 三 种 染 色 方 法 比 较. 华 西 医 学 2010; 25: 邢 同 印, 陈 锦 凤, 王 震. 快 速 尿 素 酶 试 验 中 反 应 液 配 置 方 法 的 改 良 研 究. 现 代 消 化 及 介 入 诊 疗 2012; 17: 李 植 飞, 唐 祖 年, 戴 支 凯. 土 荆 芥 果 实 挥 发 油 GC-MS 分 析 及 其 生 物 活 性 研 究. 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志 2013; 19: 江 滟, 马 莹, 茅 向 军, 沈 祥 春. 宝 铎 草 提 取 物 体 外 抗 菌 活 性 的 研 究. 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志 2013; 19: 张 万 岱, 胡 伏 莲, 萧 树 东, 徐 智 民. 中 国 自 然 人 群 幽 门 螺 杆 菌 感 染 的 流 行 病 学 调 查. 现 代 消 化 及 介 入 诊 疗 2010; 15: Malfertheiner P, Megraud F, O'Morain CA, Atherton J, Axon AT, Bazzoli F, Gensini GF, Gisbert JP, Graham DY, Rokkas T, El-Omar EM, Kuipers EJ. Management of Helicobacter pylori infection--the Maastricht IV/ Florence Consensus Report. Gut 2012; 61: [PMID: DOI: /gutjnl ] 12 甘 英 辉, 严 欢, 程 正. 中 药 治 疗 幽 门 螺 杆 菌 感 染 的 研 究 进 展. 湖 南 中 医 杂 志 2014; 30: Mégraud F, Lehours P. Helicobacter pylori detection and antimicrobial susceptibility testing. Clin Microbiol Rev 2007; 20: [PMID: DOI: /CMR ] 14 Yan X, Zhou L, Song Z, Xue Y, Wang Y, Bai P, Hou X, Xu S, Chen M, Xiong L, Li Z, Du Y, Lin S. Sequential therapy for Helicobacter pylori eradication in adults compared with triple therapy in China: a multiple center, Prospective, randomized, controlled trial (abstract). Helicobacter 2011; 16: Zheng Q, Chen WJ, Lu H, Sun QJ, Xiao SD. Comparison of the efficacy of triple versus quadruple therapy on the eradication of Helicobacter pylori and antibiotic resistance. J Dig Dis 2010; 11: [PMID: DOI: /j x] 16 Malfertheiner P, Bazzoli F, Delchier JC, Celiñski K, Giguère M, Rivière M, Mégraud F. Helicobacter pylori eradication with a capsule containing bismuth subcitrate potassium, metronidazole, and tetracycline given with omeprazole versus clarithromycin-based triple therapy: a randomised, open-label, non-inferiority, phase 3 trial. Lancet 2011; 377: [PMID: DOI: /S (11) ] 17 刘 文 忠, 谢 勇, 成 虹, 吕 农 华, 胡 伏 莲, 张 万 岱, 周 丽 雅, 陈 烨, 曾 志 荣, 王 崇 文, 萧 树 东, 潘 国 宗, 胡 品 津. 第 四 次 全 国 幽 门 螺 杆 菌 感 染 处 理 共 识 报 告. 现 代 消 化 及 介 人 诊 疗 2012; 17: 龚 芳 红, 贺 松, 张 德 纯, 郭 亚 楠. 国 内 益 生 菌 制 剂 清 除 幽 门 螺 杆 菌 感 染 临 床 疗 效 的 Meta 分 析. 中 国 微 生 态 学 杂 志 2009; 21: 张 丽 颖. 中 药 联 合 标 准 三 联 疗 法 提 高 幽 门 螺 杆 菌 根 除 率 的 临 床 疗 效 评 价 研 究. 北 京 : 中 国 中 医 科 学 院, 张 万 岱. 中 西 医 结 合 提 高 幽 门 螺 杆 菌 根 除 率 的 探 讨. 医 学 与 哲 学 2012; 33: 刘 清 华, 林 渊, 邱 颂 平. 单 味 中 药 散 剂 清 除 幽 门 螺 杆 菌 的 实 验 研 究. 2011; 42: 同 行 评 价 本 实 验 设 计 思 路 清 晰. 对 临 床 常 用 方 清 热 化 湿 舒 胃 方 及 其 寒 性 药, 热 性 药 进 行 H. pylori 体 外 抑 菌 试 验, 有 一 定 的 创 新 性. 结 果 提 示 该 方 的 体 外 抑 菌 能 力 可 能 来 自 寒 性 药 组 中 的 黄 芩 及 蒲 公 英. 为 临 床 推 广 应 用 该 方 提 供 了 实 验 依 据. 编 辑 : 韦 元 涛 电 编 : 闫 晋 利 WCJD 953
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