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1 2262G2269 9/2018 草业科学 PRATACULTURALSCIENCE 第 35 卷第 9 期 Vol.35,No.9 DOI: /j.issn.1001G G0525 张然, 郑琛, 韩海珠, 雒瑞瑞, 李彦珍, 朱伟. 应用 RusitecGS 系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响. 草业科学,2018,35(10): 2262G2269. ZHANGR,ZHENGC,HAN HZ,LUORR,LIYZ,ZHU W.Efectofmannanoligosaccharidesonruminalfermentationofsheepin aninvitrorusitecgssystem.prataculturalscience,2018,35(10):2262g2269. 应用 RusitecGS 系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响 张然, 郑琛, 韩海珠, 雒瑞瑞, 李彦珍, 朱伟 ( 甘肃农业大学动物科学技术学院, 甘肃兰州 ) 摘要 : 本研究应用 RusitecGS 型人工瘤胃模拟装置, 采用单因素完全随机设计, 在基础饲粮中分别添加 0 0.8% 1.6% 和 2.4% 的甘露寡糖 (mannanoligosaccharides,mos), 测定总产气量 甲烷产量 养分降解率及培养液 ph 总氮 氨氮 尿素氮 蛋白氮和挥发性脂肪酸浓度以及比例的变化, 分析饲粮中添加甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响. 试验共两期, 每期 9d( 预试期 7d, 采样期 2d), 每个处理 4 个重复. 结果表明, 添加甘露寡糖对体外培养液 ph 总氮 氨氮 尿素氮 蛋白氮和总挥发性脂肪酸浓度 各挥发性脂肪酸比例 养分降解率及甲烷产量和总产气量均没有产生显著影响 (P>0.05). 由此可知, 饲粮中添加甘露寡糖在人工瘤胃试验中不会影响瘤胃发酵模式. 关键词 :RusitecGS; 甘露寡糖 ; 瘤胃发酵 ; 绵羊 ; 甲烷产量 ; 养分降解率 ; 挥发性脂肪酸中图分类号 :S826.5 文献标志码 :A 文章编号 :1001G0629(2018)09G2262G08 Effectofmannanoligosaccharidesonruminalfermentationof sheepinaninvitrorusitecgssystem ZHANG Ran,ZHENG Chen,HAN Haizhu,LUO Ruirui,LIYanzhen,ZHU Wei (ColegeofAnimalScienceandTechnology,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070,Gansu,China) Abstract:Inthisstudy,asingleGfactorexperimentaldesignwasusedtoexploretheefectofmannanoligosacG charides(mos)onsheeprumenfermentationusingarusitecgsartificialruminalsystem.thebasaldietwas designedbasedonthestandardchineseramnutrientrequirementsasthecontrol,andthedosesofmoswere 0.8%,1.6%,and2.4%.Theexperimentwasrepeatedtwice;eachstagelastedfor9d,including7dacclimaG tionand2dexperimentation,withfourreplicatesineachtreatment.theresultsshowedthattherewerenosigg nificantinfluencesonph,totalvolatilefatyacid (TVFA)concentration,totalnitrogen,ammonianitrogen, ureanitrogen,proteinnitrogen,ratioofacetate/propionate,acetate,propionate,butyrateandotheracidsof cultivatedfluid,methaneyield,andgasproductionby MOS (P >0.05).Inconclusion,theinvitro modelof ruminalfermentationwasnotafectedbytheadditionofmosusingtherusitecgssystem. Keywords:RusitecGSsystem;mannanoligosaccharides;rumenfermentation;sheep;methaneyield;nutrient degradation;volatilefatyacids Correspondingauthor:ZHENG Chen EGmail:zhengc@gsau.edu.cn 收稿日期 :2017G10G09 接受日期 :2017G12G21 基金项目 : 国家自然科学基金 ( ) 第一作者 : 张然 (1993G), 女, 甘肃白银人, 在读硕士生, 研究方向为动物营养与饲料科学.EGmail: @qq.com 通讯作者 : 郑琛 (1978G), 男, 陕西佳县人, 副教授, 博士, 研究方向为反刍动物营养.EGmail:zhengc@gsau.edu.cn

2 第 9 期张然等 : 应用 RusitecGS 系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响 2263 甘露寡糖 (mannanoligosaccharides,mos) 作为 功能性寡糖的一种, 广泛存在于魔芋粉 瓜儿豆胶 田 菁胶及多种微生物细胞壁内, 有低热 稳定 用量少 无 残留 安全无毒等理化性质, 被称为 化学益生素, 是 最有希望的抗生素替代品之一. 有研究表明, 饲粮中 添加甘露寡糖能在改善动物肠道微生态环境的同时提 [1G2] [3G4] 高免疫力和生产性能, 因此, 深入研究甘露寡糖 在动物生产中的应用具有重要意义. 国内外对甘露寡 糖的研究不论是基础理论还是生产实践应用方面, 多 限于仔猪 家禽等单胃动物, 也多集中在消化道后肠 段, 对反刍动物瘤胃发酵特性和饲料瘤胃降解率的研 究较少 [5]. 反刍动物的瘤胃可看作是一个厌氧性微生 物接种和繁殖的活体发酵罐 [6], 在大量体外模拟瘤胃 发酵的装置中, 可实现连续培养的 RusitecGS 型人工瘤 胃模拟装置更接近活体内瘤胃发酵的真正情况 [7]. 本 研究采用 RusitecGS 型人工瘤胃模拟装置来研究饲粮 中添加不同水平的甘露寡糖对绵羊瘤胃发酵特性的影响, 以期为甘露寡糖在绵羊养殖中的应用提供科学依据. 1 材料与方法 1.1 材料甘露寡糖购自北京奥特奇生物制品 ( 中国 ) 有限公司, 从酿酒酵母细胞中提取, 有效成分含量大于 90%. 1.2 试验动物与饲养管理提供瘤胃液的动物为 5 只装有永久瘤胃瘘管的健康杂种羯羊 ( 白萨福克 小尾寒羊 ), 体重为 (30.00±2.15)kg, 参照中华人民共和国农业行业标准肉羊饲养标准 (NY/T ) 中育成公羊营养需要量 ( 体重 30kg, 日增重 200g), 配制甘露寡糖含量较低的饲粮, 饲粮精粗比为 40 60, 其组成及营养水平如表 1 所列. 表 1 基础饲粮组成及营养水平 Table1 Compositionandnutrientlevelsofthebasaldiet 原料 配比 营养物质 营养水平 Feedstuf Proportion/% Nutrient Nutrientlevel 苜蓿干草 Alfalfahay 13.2 干物质 Drymater(DM) 燕麦草 Taloatgrass 46.0 消化能 Digestiveenergy(DE)/(MJ kg -1 ) 玉米 Corn 28.5 粗蛋白 Crudeprotein(CP)/% 小麦麸 Wheatbran 5.0 消化能 / 粗蛋白 Digestiveenergy/Crudeprotein/(MJ g -1 ) 大豆粕 Soybeanmeal 1.0 钙 Ca/% 0.35 菜籽粕 Rapeseed Meal 5.0 磷 P/% 0.18 食盐 Salt 0.8 添加剂预混料 Additivepremix 0.5 预混料为每千克饲粮提供 Fe38mg,Zn44mg,Cu15mg,I0.5mg,Mn50mg,Se0.3mg,Co0.05mg,VA354IU,VD94.4IU,VE1.06mg; 消化 能为计算值, 其余为实测值, 均以干物质为基础计算. Thepremixprovidedthefolowingperkgofthediet:Fe38mg,Zn44mg,Cu15mg,I0.5mg,Mn50mg,Se0.3mg,Co0.05mg,VA354IU, VD94.4IU,VE1.06mg;DEwasacalculatedvalue,whiletheothersweremeasuredvalues,andcalculatedbasedondrymater. 1.3 试验设计采用单因素完全随机试验设计, 甘露寡糖的添加水平分别为 0 0.8% 1.6% 和 2.4%,RusitecGS 系统的 8 个发酵罐分为 4 个处理组, 每个添加量两个发酵罐, 连续进行两期试验, 即每个处理组有 4 个重复. 每期试验的试验期为 9d, 前 7d 为人工瘤胃系统稳定期, 最后 2d 为采样期. 1.4 人工瘤胃培养流程 人工瘤胃缓冲液的配制人工瘤胃缓冲液的配制参照 McDougal [8] 的配方 人工瘤胃装置人工瘤胃 (RusitecGS) 购自 Sanshin 工业有限公司 ( 东京, 日本 ), 试验条件 : 缓冲液流量为 0.39mL min -1, 流出液口筛网孔径为 1.2 mm, 搅拌机搅拌频率为 4~5 次 min -1, 发酵罐内温 [9] 度为 39, 通入 CO2 至厌氧环境 人工瘤胃操作方法晨饲前从 5 只杂种羯羊瘤胃内的不同部位采集足量瘤胃食糜和瘤胃液, 经 4 层纱布分离固体和液体部分. 瘤胃液灌入已经预热并通有 CO2 的保温瓶中, 灌满后立即盖严瓶口, 迅速转移到实验室并且分装到已安装好水槽 ( 温度设定在 39 ) 的 8 个发酵罐中, 每个发酵罐中装入 400 ml 瘤胃液和等体积的缓冲液. 然后称取 70g( 湿重 ) 固体食糜

3 2264 草业科学第 35 卷 装进尼龙袋 ( 规格 7cm 13cm 孔径 38μm). 在每 个发酵罐中放入两个尼龙袋 ( 一个装有试验饲粮, 另一 个装有固体食糜 ).24h 后, 从发酵罐中移出装固体 食糜的尼龙袋, 同时放入一个新的装有饲粮的尼龙袋. 此后每天移出一个已培养 48h 的尼龙袋, 同时放入一 个新的装有饲粮的尼龙袋, 所有操作在 30 min 内完 成 样品采集采样期第 1 天用集气袋收集培养 24h 的气体 ; 采样期第 2 天, 于换料后收集各个发酵 罐中的尼龙袋, 立即在自来水下冲洗, 然后放入水中浸 泡 45min, 再在中等流速的自来水下漂洗后将尼龙袋 65 烘干, 残渣用于测定干物质 有机物 中性洗涤纤 维 酸性洗涤纤维和粗蛋白质含量. 同时于换料后 和 12h 收集 20 ml 发酵液, 按瘤胃液容积的 1/100 加入饱和 HgCl2 溶液, 立即测定 ph, 然后置于 -20 冷冻保存, 用于测定总氮 氨氮 尿素氮和挥发 性脂肪酸含量. 1.5 测定指标及方法 ph 用酸度计 (PHSG3C, 上海雷磁仪器厂 ) 测定, 产气量用气体流量计 (DCG1,Shinagawa, 日本 ) 测定, 甲烷和挥发性脂肪酸含量用气相色谱仪 (6890N,AgiG lent, 美国 ) 测定, 瘤胃液总氮用凯氏定氮法测定 [10], 瘤 [11] 胃液氨氮用比色法测定, 瘤胃液尿素氮用二乙酰 G 肟法测定, 试剂盒购自南京建成生物工程研究所. 瘤胃液蛋白氮 (mg dl -1 ) 计算公式 : 瘤胃液蛋白氮 = 瘤胃液总氮 - 瘤胃液氨氮 - 瘤胃 液尿素氮. 饲粮及食糜中干物质 粗蛋白质 中性洗涤纤维和 [10] [12] 酸性洗涤纤维含量分别按照杨胜和 vansoest 等 的方法测定. 按下式计算各养分的瘤胃降解率 (%): 瘤胃降解率 =[( 原尼龙袋内的营养物质含量 -48 h 降解后尼龙袋内营养物质含量 )/ 原尼龙袋内的营养 物质含量 ] 100%. 1.6 数据统计分析 试验数据采用 Excel 软件进行初步统计处理, 并 采用 SPSS19.0 软件包对试验数据进行单因素方差分 析, 差异显著时, 采用 Tukey 法 ( 方差齐 ) 或 Tamhane 法 ( 方差不齐 ) 进行多重比较. 2 结果与分析 2.1 体外产气量和甲烷产量 甘露寡糖对总产气量和甲烷产量均未产生显著影 响 (P>0.05), 但随着甘露寡糖添加水平的提高, 甲烷 产量略有降低. 表 2 体外产气量和甲烷产量 Table2 Gasandmethaneproductionin rumenfermentationinvitro 甘露寡糖添加水平 MOSsupplement level/% 甲烷产量 Methane yield/(ml g -1 ) 产气量 Gasproduction/ (ml g -1 ) SEM P 体外养分降解率 饲粮中添加甘露寡糖对各养分的体外降解率均未 产生显著影响 (P>0.05), 也未表现出规律性的变化. 2.3 体外发酵液氮浓度 甘露寡糖添加水平对总氮 氨氮 尿素氮和蛋白氮 浓度均未产生显著影响 (P>0.05)( 表 4). 2.4 体外发酵液 ph 和挥发性脂肪酸浓度 甘露寡糖添加水平对 ph 总挥发性脂肪酸浓度 乙酸 / 丙酸 乙酸 丙酸 丁酸和其他酸比例均未产生显 著影响 (P>0.05)( 表 5). 表 3 体外养分降解率 Table3 Nutrientsdegradationrateinrumenfermentationinvitro 甘露寡糖添加水平 干物质降解率 粗蛋白质降解率 中性洗涤纤维降解率 酸性洗涤纤维降解率 MOSsupplement Degradationrate Degradationrate Degradationrateof Degradationrateof level/% ofdrymater/% ofcrudeprotein/% neutraldetergentfiber/% aciddetergentfiber/% SEM P

4 第 9 期张然等 : 应用 RusitecGS 系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响 2265 表 4 体外发酵液氮浓度 Table4 Nitrogenconcentrationinrumenfermentationinvitro 项目 Item 采样时间 Time/h 露寡糖添加水平 MOSsupplementlevel/% SEM P 总氮 Totalnitrogen/ (mg dl -1 ) 氨氮 Ammonianitrogen/ (mg dl -1 ) 尿素氮 Urinarynitrogen/ (mg dl -1 ) 蛋白氮 Proteinnitrogen/ (mg dl -1 ) 讨论 3.1 饲粮中添加甘露寡糖对体外产气量和甲烷产量 的影响 产气量是反映饲料可发酵程度及瘤胃微生物活性 的重要指标. 有研究表明, 饲料中可发酵的有机物含 量越多, 瘤胃微生物的活性越强, 产气量就越大, 反之, 则产气量减少 [13]. 氢气还原二氧化碳是形成甲烷的 主要途径, 其次乙酸 甲酸和丁酸等挥发性脂肪酸也能 [14] [15] 合成甲烷. 曾燕霞在研究不同精粗比日粮中添 加甘露寡糖对绵羊体外发酵影响时发现, 甘露寡糖的 添加水平对体外产气量和甲烷产量均未产生显著影 响 ; 本研究结果与其一致, 添加甘露寡糖组的总产气量 高于未添加甘露寡糖组, 添加甘露寡糖组的甲烷产量 低于未添加甘露寡糖组, 但均未产生显著差异. 这可 能是由于甘露寡糖添加水平较低 ( 最高 2.4%) 导致瘤 胃微生物利用甘露寡糖发酵的作用不明显, 也可能是 因为体外发酵装置 寡糖种类及添加量 瘤胃液来源或 饲粮组成等不同造成试验结果差异, 具体原因还需要 进一步研究. 3.2 饲粮中添加甘露寡糖对体外养分降解率的影响 本研究中, 各处理组间干物质 粗蛋白质 中性洗 涤纤维和酸性洗涤纤维降解率均差异不显著, 与张爱 [16] [17] 忠和 Mwenya 等的研究结果类似. 这可能是由 于营养物质的消化率主要由营养物质的理化性质决 定, 益生元并不能改变日粮营养物质的消化率, 只能改 [18] [19] 变细菌的数量从而影响纤维的降解率, 如靳露 研究表明, 在基础日粮中添加 2% 的甘露寡糖, 对肉牛 日粮干物质 有机物 粗蛋白 中性洗涤纤维和酸性洗 涤纤维的养分表观消化率无显著影响. 有相关研究认 为 [20G22], 外源添加功能性寡糖可以提高纤维素分解菌 的活性和数量, 改善绵羊瘤胃微生物区系, 加速饲料中 碳水化合物, 尤其是纤维类物质的降解, 提高干物质 粗蛋白质 中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的降解率. [20] [23] 例如林英庭等 刘兵等发现, 添加寡糖可提高绵 羊常用粗饲料干物质 中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维 瘤胃降解率, 这可能是由于不同功能性寡糖对绵羊体 外养分降解率的影响效果不同.

5 2266 草业科学第 35 卷 表 5 体外发酵液 ph 和挥发性脂肪酸浓度 Table5 ThepHandvolatilefatyacidconcentrateinrumenfermentationinvitro 项目 Item 采样时间 Time/h 露寡糖添加水平 MOSsupplementlevel/% SEM P ph TVFA/ (mmol L -1 ) 乙酸 / 丙酸 Acetate/propionate 乙酸 Acetate/% 丙酸 Propionate/% 丁酸 Butyrate/% 其他酸 Otherfatyacid/% 饲粮中添加甘露寡糖对体外发酵液氮浓度的影响瘤胃液总氮主要包括饲粮粗蛋白质降解和再循环进入的氨氮 尿素氮和蛋白氮等. 饲粮蛋白质经瘤胃 细菌和蛋白酶的协同降解被消化利用, 任何细菌或酶活性的改变都会影响饲粮蛋白质的降解. 有研究表明, 饲粮中添加甘露寡糖可促进双歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌群的增殖, 抑制大肠杆菌和沙门氏菌等有害

6 第 9 期张然等 : 应用 RusitecGS 系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响 2267 菌的生长, 改善动物胃肠道微生态环境 [2,24]. 本研究 中, 甘露寡糖对体外发酵液总氮 氨氮 尿素氮和蛋白 氮浓度均没有显著影响. 推测原因可能是, 甘露寡糖 的添加量不足以促进瘤胃内有益菌的增殖, 进而影响 瘤胃微生物对甘露寡糖的利用情况 ; 也可能是因为甘 露寡糖在反刍动物瘤胃内被瘤胃微生物降解, 而这种 降解作用可能导致添加外源寡糖对反刍动物效果甚 [25] 微.Owens 等指出, 饲粮中蛋白质来源的差异 碳 水化合物底物的变化以及粗饲料的加工方式都会影响 瘤胃微生物的合成与代谢. 3.4 饲粮中添加甘露寡糖对体外发酵液 ph 和挥发 性脂肪酸浓度的影响 ph 是评价瘤胃代谢的重要指标, 主要受日粮性质 唾液分泌量和有机酸积累的影响, 它决定着瘤胃微 生物对底物的发酵利用情况 [26]. 瘤胃内 ph 的变动 范围在 5.5~7.5 [27]. 本研究中, 各处理组不同时间点 培养液的 ph 在 7.01~7.17, 在有利于微生物发酵的 范围内, 是因为 RusitecGS 型人工瘤胃发酵罐中瘤胃液 和缓冲液的比例为 1 1, 且缓冲液按一定流速不断流 [28] 入发酵罐及终产物不断排出造成的. 肖宇等报道, 功能性寡糖都有降低奶山羊瘤胃 ph 的作用, 半乳甘 [29] 露寡糖与甘露寡糖的效果尤为明显. 刘光斌等在 采用体外批次培养法研究大豆寡糖对生长绵羊瘤胃发 酵特性的试验中也表明, 饲粮中添 1.2% 1.6% 和 2.0% 的大豆寡糖可以显著降低瘤胃 ph. 本研究同一 时间各处理组间 ph 差异均不显著, 这可能是甘露寡 糖对瘤胃微生物的调控作用相对缓慢从而避免了 ph 出现较大波动 [5]. 挥发性脂肪酸的浓度和比例能够反映瘤胃营养摄 入情况 [30]. 本研究中, 甘露寡糖对总挥发性脂肪酸浓 度 乙酸 / 丙酸 乙酸 丙酸 丁酸和其他酸的比例均没 有产生显著的影响. 这可能是因为甘露寡糖添加水平 较低, 不能显著影响到每种脂肪酸的含量, 或是添加甘 露寡糖后产生的能量不足以为纤维分解菌提供能量, 从而影响纤维分解菌的活性和数量. 本研究与郑琛 [5] 等的研究结果类似. 活体研究表明, 外源添加甘露 寡糖除对食前试羊瘤胃液丁酸百分比产生极显著的影 响外, 对试羊瘤胃液总挥发性脂肪酸浓度 乙酸 丙酸 丁酸和其他酸百分比及乙酸 / 丙酸均没有产生显著影 [5] [31] 响. 但凌宝明等利用营养灌注技术研究了果寡 糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响, 显示出灌注果寡 糖可提高培养液中的挥发性脂肪酸含量, 认为可能是 添加果寡糖后增加了产生挥发性脂肪酸的来源, 或是 果寡糖作为益生元促进了瘤胃内双歧杆菌及其他某些 细菌的增殖, 增强了瘤胃细菌对可发酵碳源的降解能 力. 4 结论 本研究中, 在 RusitecGS 人工瘤胃培养条件下, 添 加甘露寡糖对体外培养液 ph 总挥发性脂肪酸 总 氮 氨态氮 尿素氮和蛋白氮浓度以及乙酸 / 丙酸与乙 酸 丙酸 丁酸 其他酸比例 养分降解率及甲烷产量和 总产气量均没有显著影响, 表明甘露寡糖对体外瘤胃 发酵影响不大. 参考文献 References: [1] 阎桂玲, 袁建敏, 呙于明, 王忠, 刘丹. 啤酒酵母甘露寡糖对肉鸡肠道微生物及免疫机能的影响. 中国农业大学学报,2008, 13(6):85G90. YAN GL,YUANJM,GUO Y M,WANGZ,LIU D.Efectofsaccharomycescerevisiaemannanoligosaccharidesonintestinal microfloraandimmunityinbroilers.journalofchinaagriculturaluniversity,2008,13(6):85g90. [2] 金亚东, 张力莉, 陈绍淑, 徐晓锋. 甘露寡糖添加方式对哺乳期犊牛生长性能 粪便菌群及血清免疫指标的影响. 中国畜牧兽医, 2016,43(11):2922G2930. JIN YD,ZHANGLL,CHENSS,XU XF.EfectofdiferentadditionschemesofmannanoligosaccharideongrowthperformG ance,fecalmicroorganism andserumimmuneindexesofcalves.china Animal Husbandryand Veterinary Medicine,2016, 43(11):2922G2930. [3] 吴峰洋, 陈宝江, 李冲, 刘亚娟, 陈赛娟, 谷子林. 饲粮魔芋甘露寡糖添加水平对生长獭兔生长性能 毛皮质量 屠宰性能和肉品质的影响. 动物营养学报,2017,29(4):1265G1271. WU F Y,CHEN BJ,LIC,LIU YJ,CHEN SJ,GU ZL.Efectsofkonjac mannoseoligosaccharidesupplementallevelon growthperformance,furquality,slaughterperformanceandmeatqualityofgrowingrexrabbits.chinesejournalofanimalnug trition,2017,29(4):1265g1271. [4] PICCOLO G,CENTODUCATIG,MARONOS,BOVERAF,TUDISCOR,NIZZA A.Efectsofthepartialsubstitutionoffish

7 2268 草业科学第 35 卷 mealbysoybeanmealwithorwithoutmannanoligosaccharideandfructooligosaccharideonthegrowthandfeedutilizationof sharpsnoutseabream,diploduspuntazzo(ceti,1777):preliminaryresults.italianjournalofanimalscience,2011,10(3): 195G199. [5] 郑琛. 外源添加 MOS 对绵羊养分消化代谢 瘤胃发酵 消化道食糜流通及免疫的影响. 兰州 : 甘肃农业大学博士学位论文, ZHENGC.Efectsofaddingmannanoligosaccharidesondigestibilityand metabolismofnutrients,ruminalparameters,digesta passageandimmuneofsheep.phdthesis.lanzhou:gansuagriculturaluniversity,2012. [6] 淡瑞芳, 张海涛, 龙瑞军, 鱼小军. 瘤胃微生物生态研究方法评述. 草业科学,2007,24(7):77G82. DAN RF,ZHANG H T,LONGRJ,YU XJ.Researchmethodologyforrumenmicrobialecology.PrataculralScience,2007,24 (7):77G82. [7] 崔彦召, 徐晓明, 张克春. 反刍动物人工瘤胃技术研究及应用. 乳业科学与技术,2011,34(2):90G93. CUIYZ,XU X M,ZHANGKC.Studyandapplicationoftheartificialrumentechnique.JournalDairyScienceandTechnology, 2011,34(2):90G93. [8] MCDOUGALLEI.Studiesonruminantsaliva.1.Thecompositionandoutputofsheep ssaliva.thebiochemicaljournal,1948, 43(1):99. [9] KAJIKAWA H,JIN H,TERADA F,SUGA T.OperationandCharacteristicsofNewlyImprovedand MarketableArtificial Rumen (Rusitec).Tsukuba,Ibaraki,Japan:NationalInstituteofLivestockandGrasslandScience,2003:1G30. [10] 杨胜. 饲料分析及饲料质量检测技术. 北京 : 中国农业大学出版社,1999:19G61. YANGS.FeedAnalysisandFeedQualityInspectionTechnology.Beijing:ChinaAgriculturalUniversityPress,1999:19G61. [11] RHINEED,MULVANEY RL,PRATTEJ,SIMSG K.Improvingtheberthelotreactionfordeterminingammoniuminsoil extractsandwater.soilsciencesocietyofamericajournal,1998,62(2):473g480. [12] VANSOESTPJ,ROBERTSONJB,LEWISB A.Methodsfordietaryfiber,neutraldetergentfiber,andnonstarchpolysacG charidesinrelationtoanimalnutrition.journalofdairyscience,1991,74(10):3583. [13] CLARKJH,KLUSMEYERT H,CAMERON M R.MicrobialproteinsynthesisandflowsofnitrogenfractionstotheduodeG numofdairycows.journalofdairyscience,1992,75(8):2304g2323. [14] 郝正里, 刘世民, 孟宪政. 反刍动物营养学. 兰州 : 甘肃民族出版社,2000:67G69. HAOZL,LIUS M,MENG XZ.RuminantNutrition.Lanzhou:Gansu MinoritiesPress,2000:67G69. [15] 曾燕霞, 陈志龙, 王林, 赵臣, 郑琛. 不同精粗比日粮中添加 MOS 对绵羊体外发酵的影响. 中国畜牧兽医,2016,43(1):68G75. ZENG Y X,CHENZL,WANGL,ZHAOC,ZHENGC.Efectofmannanoligosaccharidestodietswithdiferentconcentrate toforageratiosonruminalfermentationofsheepinvitro.chinaanimalhusbandryandveterinarymedicine,2016,43(1):68g 75. [16] 张爱忠. 酵母培养物对内蒙古白绒山羊瘤胃发酵及其它生理功能调控作用的研究. 呼和浩特 : 内蒙古农业大学博士学位论文, ZHANG AZ.Studieson manipulationofrumenfermentationandotherphysiologicalfunctionsincashmeregoatsbyadding yeastculture.phdthesis.huhhot:innermongoliaagriculturaluniversity,2005. [17] MWENYAB,SAR C,SANTOSO B,KOBAYASHIT,MORIKAWA R.Comparingtheefectsofβ1G4galactoGoligosacchaG ridesandlgcysteinetomonensinonenergyandnitrogenutilizationinsteersfedaveryhighconcentratediet.animalfeedscig enceandtechnology,2005,118(1):19g30. [18] DEB,HOVELLFD,NGAMBIJW W,BARBER W P,KYLEDJ.ThevoluntaryintakeofhaybysheepinrelationtoitsdeG gradabilityintherumenasmeasuredinnylonbags.animalproduction,2010,42(42):111g118. [19] 靳露. 高精料日粮中添加谷氨酰胺和甘露寡糖对肉牛的营养生理效应研究. 重庆 : 西南大学硕士学位论文,2013. JIN L.NutritionalandphysiologicalefectsofsupplementationofglutamineandmannanoligosaccharidesintothehighconcenG tratedietoffinishingsteers.masterthesis.chongqing:southwestuniversity,2013. [20] 林英庭, 祁茹, 王利华, 朱风华, 赵发盛, 胡静. 外源寡糖对山羊瘤胃液酶活及粗饲料瘤胃降解率的影响. 动物营养学报,2014, 26(12):3616G3624. LIN YT,QIR,WANGL H,ZHUF H,ZHAOFS,HUJ.EfectsofexogenousoligosaccharidesonenzymesactivitiesofruG menfluidanddegradationratesofroughagesinrumenoflaoshandairygoats.chinesejournalofanimalnutrition,2014, 26(12):3616G3624.

8 第 9 期张然等 : 应用 RusitecGS 系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响 2269 [21] 祁茹, 温建新, 程明, 汪文鑫, 肖宇, 褚永康, 林英庭. 不同外源寡糖对崂山奶山羊瘤胃微生物区系的影响. 动物营养学报,2012, 24(2):349G357. QIR,WENJX,CHENG M,WANG W X,XIAO Y,CHU Y K,LIN Y T.Diferentexogenousoligosaccharidesafectrumen microfloraoflaoshandairygoats.chinesejournalofanimalnutrition,2012,24(2):349g357. [22] 张学峰. 外源寡糖在绵羊消化道内的降解 转化 利用和流通规律及其对瘤胃微生物区系 免疫和营养物质消化影响的研究. 呼和浩特 : 内蒙古农业大学博士学位论文,2007. ZHANG XF.Studiesonexogenousoligosaccharides degradation,conversionutilizationandpassageinthedigestivetractand itsefectsonmicroflora,immunityandnutrientdigestibilityinsheep.phd Thesis.Huhhot:InnerMongoliaAgriculturalUniG versity,2007. [23] 刘兵, 瞿明仁, 张学峰, 刘光斌, 高民, 张爱忠. 瘤胃灌注大豆寡糖对绵羊消化道内营养物质流通与消化的影响. 畜牧兽医学报, 2008,39(7):915G922. LIU B,QU M R,ZHANG XF,LIU G B,GAO M,ZHANG A Z.Efectsofruminalinfusionofsoybeanoligosaccharideson nutrientflowanddigestioninthegastrointestinaltractinsheep.actaveterinariaetzootechnicasinica,2008,39(7):915g922. [24] 赵晓静. 全营养保健代乳粉及甘露寡糖对犊牛代谢及生长发育影响的研究. 保定 : 河北农业大学硕士学位论文,2005. ZHAO XJ.EfectoffeedingearlyGweanedcalfwithmilkreplacerandBIOGMOSoncalfmetabolismandgrowth.MasterTheG sis.baoding:hebeiagriculturaluniversity,2005. [25] OWENSD,MCGEE M,BOLANDT,O KIELYP.Rumenfermentation,microbialproteinsynthesis,andnutrientflowtothe omasumincatleoferedcornsilage,grasssilage,orwholegcropwheat.journalofanimalscience,2009,87(2):658. [26] 韩奇鹏, 张佩华, 罗玲, 掲红东, 周传社, 陈亮, 孔志伟. 不同来源吸附载体大豆糖蜜对奶牛瘤胃内环境的影响. 草业科学,2016, 33(12):2559G2564. HAN QP,ZHANGP H,LUO L,JIE H D,ZHOUCS,CHENL,KONGZ W.EfectofwheatbranandbeanhulasadsorpG tionsubstratesforsoybean molassesontheruminalenvironmentofdairycows.prataculturalscience,2016,33(12):2559g [27] KRAUSEK M,OETZELGR.Understandingandpreventingsubacuteruminalacidosisindairyherds:AReview.AnimalFeed ScienceandTechnology,2006,126(3):215G236. [28] 肖宇, 王利华, 程明, 祁茹, 褚永康, 林英庭. 功能性寡糖对奶山羊瘤胃发酵功能的影响. 动物营养学报,2011,23(12):2203G XIAO Y,WANGL H,CHENG M,QIR,CHU Y K,LIN YT.Functionaloligosaccharidesafectrumenfermentationofdairy goats.chinesejournalofanimalnutrition,2011,23(12):2203g2209. [29] 刘光斌, 刘兵, 张学峰, 瞿明仁, 高民, 张爱忠, 卢德勋. 不同水平大豆寡糖 (SBOS) 对生长绵羊瘤胃发酵的影响. 江西农业大学学报,2007,29(6):871G875. LIU GB,LIU B,ZHANG XF,QU M R,GAO M,ZHANG AZ,LU DX.AStudyontheefectsofsoybeanonoligosacchaG ridesontherumenfermentationofgrowingsheepinvitro.actaagriculturaluniversitatisjiangxiensis,2007,29(6):871g875. [30] 凌宝明, 瞿明仁, 卢德勋, 刘光斌. 利用体外法研究功能性寡糖对生长绵羊瘤胃发酵特性的影响. 动物营养学报,2007,19(2): 129G134. LINGB M,QU M R,LUDX,LIU GB.Efectsoffunctionaloligosaccharidesontherumenfermentationofthegrowingsheep invitro.chinesejournalofanimalnutrition,2007,19(2):129g134. ( 责任编辑武艳培 )