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1 重温经典 引领创新 金品 服务科研 北京全式金生物技术有限公司
2 Easy 克隆技术 快速 高效 1+1 TransStart 最好的热启动技术 TransStart FastPfu 快速高保真酶 TransDirect PCR 无需纯化 gdna 的 PCR TransScript 高温反转录酶 All-in-One 简单到极致的反转录 EasySee Western Blot 可视化 TransLipid 新型转染试剂 Double Luciferace 报告基因检测的生力军
3 研发指导理念 原理创新, 使用便捷 Fast Easy
4 Easy 克隆技术
5 开发思路 操作简单 : 载体 + 片段 反应快速 : 酶本身具有的特性 连接高效 : 连接反应成为双分子作用过程
6 常规的连接是一个三分子共同反应的过程 TA 克隆中粘性末端仅有一个碱基, 因此较高的 DNA 浓度和较高 T4 连接酶浓度是获得较高连接效率的前提 环化过程恰恰与连接过程相反, 过高的 DNA 浓度和 T4 连接酶浓度会增加分子间相互作用促进串连体 (concatemer) 形成 通常情况下, 克隆效率 ( 连接产物转化效率, 而不是克隆阳性率 ) 低于 0.1%
7 拓扑异构酶的功能
8 ASY 克隆原理 连接反应成为一个双分子作用的过程
9 EASY 克隆 利用 Vaccina Virus Topoisomerase (TOPO), 与载体结合 ( 牛痘病毒的拓扑异构酶 ) 酶特点 由 314 个氨基酸组成 识别 5 -C/TCCTT-3 同时具有限制性内切酶 (nick enzyme) 和连接酶的功能 工作所需缓冲液条件宽泛 不需要外界提供能量 >80% 的连接反应在 2 分钟之内即可完成
10 传统 TA 载体和 TOPO 载体稳定性 自连率的比较 vector ddt P da PCR product da P Tdd vector
11 载体的选择 EASY 克隆和 T4 DNA Ligase 克隆比较 (TOPO 载体和普通 TA 载体比较 ) PCR 产物 EASY 克隆 无需纯化可直接用于克隆 ( 若无杂带和引物二聚体 ) T4 DNA 连接酶克隆 需要纯化 (PCR 缓冲液抑制连接 ) 反应时间 / 温度 5 分钟 / 室温 (20 o C-37 o C) 操作 载体 + 片段 过夜 (12-16 小时 )/12-16 o C 载体 + 片段 + 缓冲液 + T4 连接酶 + 水 克隆阳性率 /+++ 克隆数 ++/ 连接大片段 +/++,++++(T5) ++/+++
12 克隆感受态细胞的选择 Trans10 Trans5α Trans1-T1 Trans109 Trans110 名称 (Top10) (DH5α) (Mach1-T1) (JM109) (JM110) Trans1-Blue (XL1-Blue) Trans2-Blue (XL10-Gold) TransStbl3 (Stbl3) 适用范围 适用于毒基因的克隆具有硫链霉素抗性 普遍使用 具有 T1 T5 噬菌体抗性, 在液体培养基中生长速度快 同源重组率低, 适合含有重复序列的基因克隆 不会对质粒进行甲基化修饰 适合转化去甲基化的 DNA 适用于大质粒 DNA 和重组产物的转化降低片段大小的偏爱性, 可用于文库构建具有四环素 氯霉素抗性 适用于慢病毒及其它逆转录病毒载体的复制
13 无缝拼接基因克隆
14 peasy-uni Seamless Cloning and Assembly Kit 原理 : 同源重组 使用条件 : 引物设计时在片段末端引入重叠序列 应用 : 可将任意方法线性化后的载体与片段连接
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17 引物设计方式
18 几种载体构建方法的比较 方法酶切 + 连接 TOPO 克隆同源重组 原理 利用限制行内切酶切割载体 片段 产生相匹配的末端, 然后用 T4 连接酶连接起来 利用 TOPO 酶的双重活性, 实现快速连接 利用重组酶, 将任意片段与任意载体连接 特点 连接具有方向性克隆数多 需要酶切位点阳性率较低步骤繁琐, 需要回收片段耗时费力 简单 快速 高效 只能连接特定载体 ( 多用于克隆 ) 连接无方向性克隆数较少 1 载体加 1 片段 简单 : 载体 + 片段 +mix 高效 :95% 以上通用性 : 任意载体 + 片段无缝 : 任意位置都可设计为连接位点, 且连接位点处无多余序列方向性 : 定向连接一次连接多个片段长片段 (5+15 kb) 拓展功能强大 引物合成成本高
19 TransStart 热启动技术
20 开发思路 PCR 酶性能 扩增能力 ; 特异性 ; 保真性 扩增能力, 特异性方面, 热启动酶的效果最好
21 开发思路 热启动方法 化学封闭 抗体封闭 基因改造 共同特点 : 封闭 DNA 聚合酶的活性中心, 常温下酶活受限, 加热后释放酶活 DNA 聚合酶活性中心不只一个, 所以无法完全封闭酶活
22 不同热启动方法比较 化学封闭法 (HotStar Qiagen) 需要预加热 (10 min) 步骤, 损伤 DNA 样品, 降低酶活 抗体封闭法 (Platinum IVTG) 利用 Taq 抗体 ( 来源于哺乳动物 ), 有残留 DNA 污染的潜在风险 酶的催化活性域不唯一, 酶的催化活性域不唯一无法 100% 封闭酶活, 无法 100% 封闭酶活 基因改造 (TransTaq-T TransTaq HiFi TransGen) 不使用抗体, 无需预加热 酶的催化活性域不唯一, 改造后的酶仍然无法 100% 封闭酶活
23 开发思路 反其道而行之 不针对酶本身进行封闭, 而是封闭引物与模板, 让酶的活性无用武之地? 如何封闭?
24 TransStart 热启动原理 双封闭法 利用两种高效的蛋白, 分别与引物和模板结合, 阻断低温下引物形成二聚体 以及阻断酶与模板的结合, 使引物与模板不被 DNA polymerase 所利用, 有效地封闭 DNA 的合成 高效小蛋白相对模板引物过量, 封闭效率达 100% 随 PCR 变性步骤的进行, 两种蛋白失活, 释放出引物与模板参与扩增反应
25 TransStart 双封闭法原理
26 TransStart 热启动技术的应用 TransStart Taq DNA Polymerase 新型热启动酶 双封闭法, 提高扩增能力, 增强扩增特异性
27 TransStart Taq 扩增能力和特异性比较 M M:Trans2K Plus DNA Marker 1:DMD1, 0.3kb 2:Numb, 0.3kb 3:P53, 0.5kb 4:P1P2, 1.2kb 左道为非热启动 Taq DNA 聚合酶右道为 TransStart Taq DNA 聚合酶
28 TransStart 热启动技术的应用 TransStart Taq DNA Polymerase TransStart TopTaq DNA Polymerase TransStart Green qpcr SuperMix TransStart Green qpcr SuperMix UDG TransStart Top Green qpcr SuperMix TransStart Probe qpcr SuperMix
29 TransStart Green qpcr SuperMix UDG 数据的准确 具有 TransStart Green qpcr SuperMix 的所有特点 采用 UDG 酶和 dutp 组合, 有效防止 PCR 产物的交叉污染 ( 得到的 CT 值比实际 CT 值小或其它影响 ) 原理 :dutp 取代 dttp, 扩增产物中 U 取代了 T, 如果有 PCR 产物的残留污染, 在孵育步骤时 (50 2 min),udg 酶可以消化含 U 的 PCR 产物, 而不会影响含 T 的模板, 去除污染 随后的变性步骤 ( min ), 彻底失活 UDG 酶, 避免了降解新的扩增产物的可能
30 TransStart Tip Green qpcr SuperMix 全封闭法 TransStart Tip 新型热启动酶利用三种蛋白封闭模板 引物利用特殊的化学物质和 DNA 聚合酶结合, 封闭 DNA 聚合酶 将化学封闭技术与 TransStart 热启动技术相结合实现全封闭, 与双封闭法 TransStart TopTaq 相比 : 灵敏度更高特异性更高扩增能力更强适用范围更广
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32 TransStart FastPfu 快速高保真酶
33 开发思路 PCR 酶性能 扩增能力 ; 特异性 ; 保真性 保真方面,Pfu 酶的效果较好
34 目前世界上, 保真性相对优秀的酶为 Pfu 系列 多用于基因功能的研究 定点突变等要求高保真的实验 最主要的缺点 聚合速度慢, 仅有 0.5 kb/min 以定点突变试验为例, 一般需要 5 小时以上甚至十余小时, 大大制约了实验进度 扩增能力较 Taq 系列酶弱 开发思路
35 保真性 速度 Pfu 酶能否和 Taq 酶具有同样的扩增速度呢? 但一般认为, 合成速度的提升, 往往会以牺牲保真性为代价 如何在提高聚合速度的同时还能确保保真性, 成为改造 Pfu 酶必须解决的问题
36 快速高保真酶 TransStart FastPfu FastPfu Fly 改造原理 : 对 EasyPfu 酶进行基因改造, 对酶的不同催化活性域进行突变, 在提高扩增速度与扩增效率的同时, 还提高了保真性 解决了扩增速度与保真性的矛盾
37 TransStart FastPfu DNA Polymerase 快速 : Plasmid DNA: 4 kb/min, cdna Genomic DNA: 2 kb/min 速度 :FastPfu 是传统 Pfu 的 4~8 倍 ( 传统 Pfu: 0.5 kb/min) 保真性 :FastPfu 是传统 Pfu 的 3 倍
38 TransStart FastPfu Fly DNA Polymerase 更高的扩增效率 更快的速度 FastPfu Fly: FastPfu: 更高的保真性 FastPfu Fly: FastPfu: 2~6 kb/min 2~4 kb/min 是传统 Pfu 的 6 倍是传统 Pfu 的 3 倍
39 TransStart FastPfu FastPfu Fly 与 EasyPfu 酶扩增速度比较
40 实验数据 Human cdna 模板 M M2 M1:1 Kb Plus DNA Ladder M2:Trans15K DNA Marker 1:ACTR 3.5 kb 2 hrs 14 min 2:VIN 4.6 kb 2 hrs 34 min 3:Pol 6.8 kb 3 hrs 09 min 4:APC 8.5 kb 3 hrs 41 min 5:Dynein 12.3 kb 4 hrs 48 min
41 实验数据 Human Genomic DNA 模板 M M2 M1:1 Kb Plus DNA Ladder M2:Trans15K DNA Marker 1:Rhod 2.0 kb 1 hrs 19 min 2:β-globin 3.0 kb 1 hrs 27 min 3:Rhod 4.17 kb 1 hrs 29 min 4:Factor IX 7.5 kb 3 hrs 25 min 5:serum albumin 12.4 kb 4 hrs 48 min
42 实验数据 Plasmid DNA 模板 M M2 M1:Trans15K DNA Marker M2:Trans15K DNA Marker 1:UDG 7.0 kb 1 hrs 36 min 2:LN 10.0 kb 1 hrs 55 min 3:Fang 14.7 kb 2 hrs 26 min
43 TransDirect PCR 无需纯化 gdna 的 PCR
44 开发思路 大量样本的高通量检测 : 先提基因组 DNA, 然后 PCR gdna 提取, 不仅费时, 而且样品之间的污染是一个严重问题 模板裂解液直接扩增? 成分复杂, 杂质很多, 含有强 PCR 抑制剂
45 开发思路 有效裂解组织 抗抑制能力强 扩增能力强的聚合酶 适合于不同材料
46 TransDirect Animal Tissue PCR Kit TransDirect Plant Tissue PCR Kit TransDirect Blood PCR Kit 针对不同组织类型的裂解液系统 2 TransDirect PCR SuperMix 核心 TransBD Taq DNA 聚合酶通过 Gene Shuffling 技术获得的第二代 Taq DNA 聚合酶具有极强的抗抑制能力 使用方便裂解液 / 血液直接作为模板, 只加入引物和水, 使 SuperMix 溶液的浓度为 1 即可进行反应
47 TransDirect Plant Tissue PCR Kit
48 TransDirect Animal Tissue PCR Kit
49 M TransDirect Blood PCR Kit M M M M 人血肝素抗凝 M 人血 EDTA 抗凝 人血新鲜
50 TransScript 高温反转录酶
51 开发思路 对于 GC 含量高或具有复杂结构的 RNA 模板 ( 水稻 小鼠等 ), 反转录困难 关键 : 高温打开 RNA 模板的复杂结构, 在高温条件下合成 cdna 无法打开复杂结构, 利用常规反转录酶 (37-42 ) 无法合成完整的 cdna, 而且在高温条件下, 常规反转录酶活性会很快丧失 开发耐高温的反转录酶
52 Trans RT 酶系列产品改造原理 DNA 聚合酶活性域 RNaseH 活性域
53 Trans RT 系列产品性能比较 产品合成长度反应温度灵敏度保真性适合高 GC 复杂模板 EasyScript RT 8 kb 42 TransScript RT 12 kb 42 TransScript II RT 15 kb TransScript-Uni RT 12 kb 42 TransScript Fly RT 20 kb 42-65
54 TransScript-Uni One-Step gdna Removal and cdna Synthesis SuperMix 超高热稳定性, 反应温度宽广 :42-65 最佳反应温度 分钟反应,5 秒钟失活 gdna Removal 无 RNaseH 活性 合成片段 20 kb
55 M M NCBP 2.5 kb VIN 4.6 kb 以 100 ng Human total RNA 反转录 cdna 为模板,PCR 扩增. M: Trans2K Plus II 1: TS II 2~6: TS-Uni,
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57 Anchored Oligo(dT) Primer 的优点
58 All-in-One 让反转录简单到极致
59 常规反转录体系 模板 引物 dntps 反应缓冲液 (ph 值, 离子强度, Mg 2+ ) RI 酶
60 优化的反转录体系 SuperMix 模板 引物 Rxn Mix All-in-One dntps 反应缓冲液 (ph 值, 离子强度, Mg 2+ ) Enzyme Mix RI 酶
61 First -Strand Synthesis Other First -Strand Synthesis Kit RNA Trans First -Strand Synthesis SuperMix RNA TransScript All-in-One First- Strand cdna Synthesis SuperMix RNA Primer Primer Buffer dntps 2 RT Reaction Mix All-in-One RT Enzyme RNase Inhibitor RT/RI Enzyme Mix
62 All-in-One 除 RNA 模板外, 所有组分预混完毕, 最大程度简化操作 优化的引物 Mix:Oligo dt/random Primer, 高效反转录各类模板
63 DNA 去除与 RT 同时进行 材料 ( 培养细胞 组织等 ) 模板制备 (RNA 提取 ) DNA 去除 /RT RNA cdna DNase I 处理 RNA (genomic DNAMinus) 反转录 cdna 合成步骤 /DNA 去除步骤同时进行 RTase 失活 / DNase I 失活同时进行
64 AT321 AH321 AT341 AH341 TransScript All-in-One First-Strand cdna Synthesis SuperMix for PCR TransScript II All-in-One First-Strand cdna Synthesis SuperMix for PCR TransScript All-in-One First-Strand cdna Synthesis SuperMix for qpcr(one-step gdna Removal) TransScript II All-in-One First-Strand cdna Synthesis SuperMix for qpcr(one-step gdna Removal) 操作简单 反应快速 高兼容性 合成效率高 RT 同步去除 gdna
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66 常规反转录条件 变性 65~70 5 min 失活 min Add RNA Primer 退火 min 随机引物 延伸 37~42 50 min 1.5 h 冰浴 2 min Add dntps Buffer RI RTase 结束
67 All-in-One for PCR 失活 85 5 min 延伸 42~55 30 min 35 min Add All-in-one RNA H 2 O only! 结束
68 All-in-One for qpcr 失活 85 5 sec 延伸 42~55 15 min 15 min Add All-in-one RNA (gdna Remover) H 2 O only! 结束
69 TransScript Fly First-Strand cdna Synthesis SuperMix cdna 5 分钟快速合成, 世界最快, 国际首创 5 分钟反应,5 秒钟失活 无 RNaseH 活性 合成片段 12 kb
70 M T F T F T F T F T F T F 以 100 ng Human total RNA 反转录 cdna 为模板,PCR 扩增 35 个循环, 在 1% 琼脂糖凝胶上电泳分析 M: Trans2K Plus II DNA Marker 1: REPA 1.8 kb 2: NCBP2.5 kb 3: ACTR 3.5 kb 4: VIN 4.6 kb 5: Pol6.8 kb 6: APC 8.5 kb T: TransScript RT F: TransScript-Fly
71 EasySee Western Blot 可视化
72 开发思路 Western Blot 后, 需将 X 光片与 NC 膜或 PVDF 膜比对, 确认 Marker 与样品相对位置, 操作繁琐且不准确 开发可以直接曝光的 Marker, 在一张 X 光片上同时看到 Marker 与样品, 实现 Western Blot 可视化
73 发光原理 利用能与抗体结合的蛋白质作为 Marker 的发光条带 Marker 的广泛适用性 : 能够与不同的二抗结合, 应用于不同的 Western Blot 实验
74 发光原理 条带含有 IgG IgM 结合位点, 本身即相当于一抗, 直接与二抗结合 广泛适用于各种抗体, 满足广大客户需求 可与目的蛋白条带同时结合抗体 用同样标记抗体来检测
75 EasySee Western Marker
76 EasySee II Western Marker
77 TransLipid 高效 低毒的新型阳离子脂质体转染试剂
78 阳离子脂质体转染试剂 目前应用最为普遍的转染试剂,Invitrogen 公司的 Lipofectamine 2000 Transfection Reagent(LF2K) 是其代表 双层膜结构的脂双分子层, 表面带正电荷, 可通过静电作用将 DNA 分子包裹入内 也能被表面带负电的细胞膜吸附, 通过融合或内吞作用将 DNA 传递入细胞
79 开发思路 无论是与 DNA 分子的结合, 还是与细胞膜的相互作用, 都依赖于正负电荷的相互作用 开发思路 改变脂质体表面的电荷状态
80 改造原理 通过化学修饰, 改变脂质体表面的电荷状态, 从而提高脂质体对核酸的装载效率 通过化学修饰, 改变脂质体表面的电荷状态, 增强脂质体对细胞膜的亲和性 通过化学修饰, 调节脂膜的流动性, 降低脂膜的通透性, 增加了脂质体在体外的稳定性
81 实验数据 LF2K 1:2.5 ( 推荐比例 ) 1:1.25 1:2.5 1:5 1:1.25 1:2.5 1:5 HEK 293T, different DNA/Translipid Ratio
82 实验数据 HeLa,different time
83 实验数据 Control: LF2K TransLipid HEK 293T
84 TransLipid 已成功转染的细胞种类 ( 请登陆 细胞转染的实验细节 Advanced transfection with Lipofectamine 2000 reagent: Primary neurons, sirna, and high-throughput application. Methods. 33 (2004)
85 Double Luciferase 荧光素酶报告基因系统
86 开发思路 传统报告基因 ( 如 β-gal,cat,gfp 等 ) 检测方法虽然应用广泛, 但是在灵敏度 线性范围 有无内源活性干扰以及操作难易程度等方面, 却存在着很大局限性 荧光素酶报告基因系统可以很好地避免以上限制因素
87 荧光素酶报告基因 萤火虫荧光素酶报告基因 (Firefly Luciferase) 海肾荧光素酶报告基因 (Renilla Luciferase)
88 荧光素酶的生物发光原理 562 nm 480 nm 生物发光与荧光蛋白发光的区别 : 是否需要激发光源 更加灵敏, 动力学范围更广
89 荧光素酶作为报告基因的优势 背景低, 哺乳动物细胞中无内源表达活性 操作简便, 检测迅速, 所有操作半小时内完成 灵敏度高, 可检测低至 ~10 20 摩尔荧光素酶分子, 适合弱启动子 低水平表达调控基因的检测 检测范围广, 线性范围达 10 7 数量级
90 Double Luciferase 是双报告系统的上佳之选 为什么要使用双报告基因系统 实验结果受多种因素的影响 不同处理间细胞状态与数目的差异 不同处理间转染效率的差异 不同处理间细胞裂解效率的差异 为消除系统误差, 需要对不同处理样品的结果进行归一化处理 双报告系统中, 以一个报告基因作为系统内参 归一化反应 = 萤火虫荧光素酶活性 海肾荧光素酶活性
91 双荧光素酶报告基因系统的优势 传统双报告基因系统, 以 β-gal CAT GUS Luc 等混搭, 灵敏度不同, 检测方法不同, 需要分别检测, 费时费力 双荧光素酶报告系统, 两种荧光素酶检测方法相同, 采用同一种裂解液 在同一个试管中即可完成两种酶活性的检测, 省时省力, 灵敏度高, 检测范围广
92 荧光素酶报告基因的检测流程 第一步 : 细胞裂解 移除培养基, 用 1 PBS 润洗 加入 1 Cell Lysis Buffer 转移至 EP 管中, 离心收集上清
93 萤火虫荧光素酶底物 第二步 : 荧光素酶活性检测 海肾荧光素酶底物 -- 在淬灭上一个荧光反应的同时, 启动下一个荧光反应 双荧光素酶报告基因检测 Double-Luciferase Reporter Assay Kit
94 应用领域 研究基因转录调控元件 ( 如启动子 / 增强子 ) 研究信号转导通路 ( 如 p53, NF-kB 通路 ) 研究 mirna 的靶标 (3 -UTR) 研究蛋白对 RNA 的降解作用 ( 如抗病毒蛋白降解病毒 RNA) 研究蛋白 - 蛋白相互作用 ( 快速 灵敏 定性 定量 ) 药物筛选 ( 特异靶点, 高灵敏性, 高通量筛选 )
95 实验数据
96 Easy 克隆技术 快速 高效 1+1 TransStart 最好的热启动技术 TransStart FastPfu 快速高保真酶 TransDirect PCR 无需纯化 gdna 的 PCR TransScript 高温反转录酶 All-in-One 简单到极致的反转录 EasySee Western Blot 可视化 TransLipid 新型转染试剂 Double Luciferace 报告基因检测的生力军
97 谢谢! 北京全式金生物技术有限公司
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重温经典 引领创新 金品 服务科研 北京全式金生物技术有限公司 www.transgen.com.cn Easy 克隆技术 快速 高效 1+1 TransStart 最好的热启动技术 TransStart FastPfu 快速高保真酶 TransDirect PCR 无需纯化 gdna 的 PCR All-in-One 简单到极致的反转录 EasySee Western Blot 可视化 TransLipid
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重温经典 引领创新 金品 服务科研 北京全式金生物技术有限公司 Easy 克隆技术 快速 高效 1+1 Flycut 快速限制性内切酶 TransStart 最好的热启动技术 FastPfu 快速高保真酶 TransDirect PCR 无需纯化 gdna 的 PCR TransScript 高温反转录酶 All-in-One 简单到极致的反转录 EasySee Western Blot 可视化 Luciferace
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魅力 PCR 酶与缓冲液的珠联璧合 北京全式金生物技术有限公司 上篇 下篇 PCR 历史与原理 反应体系与条件的优化 PCR 酶分类 特殊要求的 PCR PCR 酶性能 常见问题与对策 PCR 历史与原理 PCR 与 Mullis 1972 年 U.C. Berkeley 博士学位 1979 年 进入 Cetus 公司 1983 年 顿悟 PCR 原理 1986 年 6 月 首次将 Taq 酶应用于
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
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驾驭反转录 从实验的成败到前沿技术 北京全式金生物技术有限公司 www.transgen.com.cn :400-898-0321 反转录酶概述 RNA 模板制备与反转录 反转录实验策略 反转录的应用 反转录酶概述 反转录酶发现历史 反转录酶简介 1975 年诺贝尔生理和医学奖 David Bahirsore Howard Martin Tersin Renato Dulbecco 1975 年诺贝尔生理和医学奖
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
PCR专题改.doc
Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
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驾驭反转录 从实验的成败到前沿技术 北京全式金生物技术有限公司 www.transgen.com.cn 反转录酶概述 RNA 模板制备与反转录 反转录实验策略 反转录的应用 反转录酶概述 反转录酶发现历史 反转录酶简介 1975 年诺贝尔生理和医学奖 David Bahirsore Howard Martin Tersin Renato Dulbecco 1975 年诺贝尔生理和医学奖 Baltimore,
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魅力 PCR 酶与缓冲液的珠联璧合 北京全式金生物技术有限公司 PCR 原理和収展 PCR 酶的分类 PCR 酶的性能 PCR 技术的类型 反应体系与条件的优化 PCR 检测中的常见问题 PCR 原理 PCR:Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反应核心 : 耐热 DNA 聚合酶 PCR 技术的収展 第一代 PCR 定性 PCR 技术, 借助电泳对扩增反应的终产物迚行半定量及定性分析
荧光定量PCR
荧 光 定 量 PCR 荧 光 定 量 PCR 原 理 荧 光 定 量 PCR 最 早 称 TaqMan PCR, 后 来 也 叫 Real-Time PCR, 是 美 国 PE(Perkin Elmer) 公 司 1995 年 研 制 出 来 的 一 种 新 的 核 酸 定 量 技 术 该 技 术 是 在 常 规 PCR 基 础 上 加 入 荧 光 标 记 探 针 或 相 应 的 荧 光 染 料
124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na
![124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na](/thumbs/91/105785327.jpg "124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na")
河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,
四折特惠区目录号 规格 批号 到期日 库存 2014 目录价 特惠价 ER1951 AjuI 100 units /3/ ER1951 AjuI 100 units /3/ ER0725 BclI 3
三折特惠区目录号 规格 批号 到期日 库存 2014 目录价 特惠价 K1631 RevertAid H Minus First Strand cdna Synthesis Kit 20 react 00139956 2015/2/28 1 795 238 K1632 RevertAid H Minus First Strand cdna Synthesis Kit 100 react 00141899
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
未命名-1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 ss a c y e vg 13 14 15 16 17 18 19 H 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 发现生命的螺旋 克里克在提出 中心法则 时曾指出 遗传信息是沿 Ｄ Ｎ Ａ - Ｒ Ｎ Ａ - 蛋白质的方向流动的 遗传信息不可能从 Ｒ Ｎ Ａ 回到 Ｄ Ｎ
Thermo Scientific 分子克隆完全解决方案
molecular biology 分子克隆完全解决方案 用于酶切 修饰和凝胶分析的工具 PCR 试剂和耗材 用于核酸纯化的试剂盒 Thermo Scientific 分子生物学工具 PCR 克隆试剂盒, 克隆酶和核酸纯化试剂盒 限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest 快速限制性内切酶品质优异, 用于快速 DNA 酶切 我们所有的 176 种 FastDigest 快速内切酶在
國防大學國防醫學院生理學研究所碩士論文
1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 (6) 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery) 24 (5B) 1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery)
荧光素酶及其相关应用
荧光素酶及其相关应用 原平皓生物 2010 年 6 月 4 日 主要内容 一 生物发光的概念二 荧光素酶三 荧光素酶报告基因技术四 荧光素酶在 ATP 检测中的应用五 荧光素酶的其他应用六 相关检测仪器 一 生物发光的概念 荧光 需要激发光源 荧光物质受激发后发射光子 发光 生物发光 化学发光 自发光能量由反应提供 荧光 荧光检测需要激发光源 发射光的能量来源于激发光 荧光反应为瞬时反应 E = h
討論
MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5
生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
p501-hjx
Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase P501-d1/d2/d3 Vazyme biotech co., ltd. 使用说明书 Version 7.1 目录 Contents 01/ 产品概述... 02 02/ 产品组分... 02 03/ 保存条件... 02 04/ 单位定义... 02 05/ 质量控制... 02 06/ 实验流程... 03 06-1/
书 名 : 作 者 : 出 版 社 : 出 版 时 间 :
书 名 : 作 者 : 出 版 社 : 出 版 时 间 : 20 60, 20 80,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, 2004. 2. 28 1.? ( 1 ) 2.? ( 1 ) 3.? ( 2 ) 4.? ( 3 ) 5.? ( 4 ) 6.? ( 5 ) 7.? ( 5 ) 8.? ( 5 ) 9.? ( 6 ) 10.? ( 7 ) 11.? ( 8 ) 12.? ( 9 )
摘要
中 華 民 國 第 五 十 一 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 物 科 組 別 : 高 中 組 作 品 名 稱 : 不 給 糖 就 搗 蛋 - 蛀 牙 細 菌 的 抑 制 關 鍵 詞 :Bacillus horikoshii 轉 糖 鏈 球 菌 蛀 牙 編 號 : 摘 要 : 本 實 驗 的 目 的 是 希 望 能 找 出 人 類 牙 齒 上 的 主 要 菌
网址 : 电话 : 客服电话微信 : 邮箱 : 地址 : 烟台市开发区珠江路 32 号留创园 3 号楼 E 栋 247 室 Gel Free cl
Gel Free cloning TM 不跑胶载体构建试剂盒 Gel Free Cloning TM Kit Gel Free cloning 技术是一种简单 快速并且高效的载体构建技术, 可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点 该技术不受酶切位点限制, 也不需要线性化质粒, 只需要两步 PCR 即可将目的片段构建到载体的任意位点, 具有省时, 简便的特点 克隆阳性率可达 90% 以上 Gel Free
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通过这场讲座, 您可以了解 : 问题 1: 了解分子克隆常见方法及原理 问题 2: 解决克隆实验的难题, 提升成功率
匠心品质, 快乐科研 分子克隆技术实验流程 Molecular Cloning Workflow 孟文举上海翊圣生物科技有限公司产品主管 2018.09 Good Science,Good Products 通过这场讲座, 您可以了解 : 问题 1: 了解分子克隆常见方法及原理 问题 2: 解决克隆实验的难题, 提升成功率 重组 DNA 技术 基因影响性状 定义 : 目的是将不同的 DNA 片段 (
Protein Labeling and Detection
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材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
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2,200 A [2004]119 2004 7 23 A 2,200 7.30 / 2004 7 22 1400-1800 2004 7 20 1 http://www.smers.com.cn http://www.stock2000.com.cn 2 2004 7 20 DAANGENECO. LTD.OFSUNYAT-SENUNIVERSITY 12 13 15 15 16 16 19
Microsoft Word - 200804368.doc
动 物 学 研 究 2008,Aug. 29(4):368-372 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research doi:10.3724/sp.j.1141.2008.04368 利 用 修 饰 的 随 机 引 物 构 建 非 洲 爪 蟾 酵 母 双 杂 交 定 向 cdna 文 库 武 景 阳 1,2, 李 朝 翠 1, 孔 清 华 1,2, 毛
Phanta
Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase P505-d1/d2/d3 www.vazyme.com Vazyme biotech co., ltd. 使用说明书 Version 7.1 目录 Contents www.vazyme.com 01/ 产品概述... 02 02/ 产品组分... 02 03/ 保存条件... 02 04/ 单位定义... 02 05/
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
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疾 病 名 马 尔 堡 病 毒 病 英 文 名 Marburg virus disease 别 名 Marburg disease; 马 堡 病 毒 病 ; 马 尔 堡 病 ICD 号 A98.3 病 因 和 发 病 机 制 研 究 的 进 展 1. 病 因 研 究 进 展 马 尔 堡 病 毒 病 (MVD) 是 由 丝 状 病 毒 科 马 尔 堡 病 毒 (MBV) 引 起 的 一 种 出 血 性
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I...1...4...12...21...27...30...36...42...48...54...59...64...69...75...83...88...93...96... 103 DNA... 109 DNA... 115... 129... 133... 144... 146... 148... 151... 156... 160... 162... 168... 178 II 1
生命科学_一_.doc
I...1...3...6...7...12...13...13 7700...16...16...19...24...24...28...32...36...39...41...45...45...52...53...53...54...59 II...61...63...64...66...68...70 DNA 50...71...75 ----...75...76...78...80...81...83...85...86...88...91
八周年庆特别推荐 细胞培养及检测 TransSerum TM HQ Fetal Bovine Serum TransLipid HL Transfection Reagent TransDetect TM Double-Luciferase Reporter Assay Kit TransDetec
周年 全力以赴为科研, 事 ( 式 ) 在人为莫待天 金榜题名终须有, 八载春秋风云间 周而复始不辞苦, 年增岁长志定坚 欢度一季春光美, 庆得威名扬万千 八载风雨易春秋, 欢庆不忘与君同! 值此全式金生物八周年庆典之际, 衷心感谢长期以来支持和关爱我们的新老朋友, 您的鼓励让我们勇往直前, 您的信任让我们坚定不移 一路走来, 您见证了我们的努力和成长, 也见证了我们从平凡走向卓越的辉煌 我们将一如既往秉承
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ISSN 0255-6162 GPN 2006900031 287 93 11 20 161-2 02 26531318 http://www.nlfd.gov.tw 1 2 3 287 4 287 5 44 93 13 1 monocrotophos 0.40 ppm 105 1300 99% 6 3 44 106 93 13 1 0.40 ppm 403 40 7 DNA (HPLC) DNA
<6D F726E61BDE2BEF6B7BDB0B82DD0DEB8C E657073>
组织样本 mirna 提取细胞样本 mirna 提取全血样本 mirna 提取 TaqMan mirna 反转录试剂盒 通过 HG TaqMan mirna 定量 PCR 试剂盒检测 microrna 1-4 2 3 4 5-6 7-8 7 8 9 B1802 mirna 25T/100T 500/1600 B1803 mirna 25T/100T 500/1600 D1802 HG TaqMan
从菜鸟到高手-手把手教你qPCR教程II
从 菜 鸟 到 高 手 - 手 把 手 教 你 qpcr 教 程 II --- 定 量 PCR 原 理 常 见 问 题 分 析 和 数 据 统 计 分 析 前 言 由 于 Real-time qpcr 的 众 多 优 点, 现 在 已 经 是 生 命 科 学 领 域 的 一 项 常 规 技 术 越 来 越 多 的 研 究 文 章 中 涉 及 RT-PCR 的 实 验, 也 基 本 上 被 real-time
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PCR 条形码试剂盒方案器材和耗材 Oxford NANOPORE Technologies Oxford Nanopore Technologies Oxford Science Park, Oxford OX4 4GA, UK
PCR 条形码试剂盒方案器材和耗材 Nanopore Technologies Science Park, OX4 4GA, UK support@nanoporetech.com www.nanoporetech.com PCR 条形码试剂盒的器材和耗材 PCR 条形码基因组 DNA 英文 器材 Hula mixer (gentle rotator mixer) Hula 混匀仪 ( 低速旋转式混匀仪
Code No
Code No. R045Q 研究用 PrimeSTAR Max DNA Polymerase 说明书 v201702da 目 录 内容 页码 制品说明 1 制品内容 1 保存 1 PCR 反应液的配制 1 PCR 反应条件 1 参数优化 2 PrimeSTAR Max DNA Polymerase 的特点 3 扩增产物的 Agarose Gel 电泳 克隆和测序 7 Troubleshooting
Microsoft Word - tck-103-4y-10-1(衛生)
103 學 年 度 技 術 校 院 四 年 制 與 專 科 學 校 二 年 制 統 一 入 學 測 驗 衛 生 與 護 理 類 ( 專 一 ) 試 題 試 題 分 析 : 今 年 衛 護 類 專 一 ( 基 礎 生 物 ) 部 分, 考 題 概 念 簡 單, 選 項 敘 述 也 不 繁 瑣, 且 大 部 分 皆 為 考 古 題 相 關 概 念, 要 拿 高 分 甚 至 滿 分 都 不 是 太 困 難
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
Microsoft Word - 4--冯政夫_news_.doc
海洋无脊椎动物组织总 RNA 提取方法的探讨 冯政夫, 王琳, 李文侠, 部凡, 胡彦江, 朱伟 (, 266109) 摘要 : RNA 提取是分子生物学研究的基础实验, 由于海洋无脊椎动物组织结构以及体成分的特殊性, 导致现有的 RNA 提取方法不能完全胜任此工作 作者以刺参 (Apostichopus japonicus) 栉孔扇贝 (Chlamys farreri) 和凡纳滨对虾 (Litopenaeus
國家圖書館典藏電子全文
- 143-1. 2. 1 60 30 1959 8 1998 pp.544~48 - 144-3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. ( ) 10. 11. 12. 13. - 145 - -i 2. 13. -i -ii 2 1993 6 pp.46~51 3 1993 pp.69~76 p.552 4 1985 5 pp.257~58 - 146-1. 3. 5. 7. 9. ( ) 11.
2. 对 DNA 载 体 的 控 制 元 件 和 选 择 标 记 的 序 列 与 来 源, 如 : 真 核 启 动 子 增 强 子 终 止 序 列 抗 生 素 抗 性 标 记 等 进 行 分 析 建 议 避 免 使 用 抗 青 霉 素 或 其 它 饽 邗 0 房 咕 氐 目 剐 员 昙 牵 好 使
预 防 用 DNA 疫 苗 临 床 前 研 究 技 术 指 导 原 则 一 前 言 DNA 疫 苗 是 将 外 源 目 的 基 因 片 段 构 建 在 DNA 质 粒 中, 重 组 后 的 DNA 导 入 机 体 后 可 表 达 目 的 蛋 白, 目 的 蛋 白 刺 激 机 体 产 生 特 异 性 免 疫 学 反 应 而 达 到 预 防 某 种 疾 病 的 生 物 制 剂 该 指 导 原 适 用 于
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/ DNA DNA Clean & Concentrator DCC 讓您笑嘻嘻! DM TEL (02)2720-2215 TEL (05)2844-162 TEL (03)6684-5 8 6 TEL (06)2890-665 TEL (04)2463-3591 TEL (07)3470-143 免付費客服專線 讓您笑嘻嘻!... 1 Zymo Clean-Spin Technology spin
文章
农 学 学 报 2014,4(11):80-84 Journal of Agriculture www.caaj.org 海 带 属 配 子 体 DNA 提 取 及 ISSR-PCR 体 系 优 化 李 言, 崔 翠 菊, 罗 世 菊, 李 晓 捷, 赵 聚 萍, 赛 珊, 钱 瑞, 武 瑞 娜 ( 山 东 东 方 海 洋 科 技 股 份 有 限 公 司 / 国 家 海 藻 工 程 技 术 研 究
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論 : 類 90028 老 寧 : 量 力 狀 力 降 了 力 便 料 不 不 立 不 利 療 了 不 度 狀 不 度 類 狀 up regulate TLR 類 : 葉 Discorea yam 來 神 1 益 益 精 列 料 料 兩 類 1. 來 殺 2. 淋 識 力 B APC macrophage monocyte immature dendritic cell idc 淋 2 Dendritic
臧晓南 张学成 王高歌 刘金姐 张晓辉 刘 滨 对两种丝状蓝藻 钝顶节旋藻和盐泽螺旋藻 在基因工程中常用作选择试剂的 种抗生素 氯霉素 氨苄青霉素 红霉素 链霉素 卡那霉素 庆大霉素和新霉素 的敏感性作比较实验 结果表明 两种蓝藻对抗生素的敏感性既有共同的特点 也有 明显的差异 它们对红霉素 氯霉素和链霉素最敏感 致死浓度分别为 和 两种蓝藻对氨苄青霉素比较敏感 的氨苄青霉素即可抑制 和 的生长 但
目录 1. 产品描述 试剂盒特点 产品组分及储存条件 一般注意事项 操作步骤 ) RNA 样本处理 ) 逆转录反应 ) Real-Time PCR ) 终点法 RT-PCR
技术手册 上海普洛麦格生物产品有限公司 Eastep RT Master Mix Kit 产品目录号 : LS2050, LS2052, LS2054 1 目录 1. 产品描述... 3 2. 试剂盒特点... 3 3. 产品组分及储存条件... 4 4. 一般注意事项... 4 5. 操作步骤... 5 1) RNA 样本处理... 5 2) 逆转录反应... 6 3) Real-Time PCR...
Microsoft Word - GBI 产品单页V3
致力于提供生命科学创新产品! 2012 分子生物学创新产品 GBI 无缝克隆技术 GBI Direct PCR 技术 高效转染试剂 高端生物技术服务 上海诺晶生物科技有限公司 无缝克隆试剂盒 致力于提供生命科学创新产品! --- 全新重组技术将目标 DNA 片段精准插入载体! --- 突破传统, 无需内切酶和连接酶! --- 省钱省时, 分子实验室的必备! GBI 无缝克隆和组装技术是一种新的 快速
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
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213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58
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![12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL](/thumbs/91/106935627.jpg "12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL")
( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
G e n e C o p o eia TM Expressway to Discovery Luc-Pair Duo-Luciferase Assay Kit 双荧光素酶检测试剂盒 2.0 Cat. No. LF001 (100 reactions, 可对应原有货号 LPFR-P010
G e n e C o p o eia TM Expressway to Discovery Luc-Pair Duo-Luciferase Assay Kit 2.0 - 双荧光素酶检测试剂盒 2.0 Cat. No. LF001 (100 reactions, 可对应原有货号 LPFR-P010) Cat. No. LF002 (300 reactions, 可对应原有货号 LPFR-P030)
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2-1 DNA 1 DNA(plasmid DNA) pet21ahmyh hmyh (6A C) BL-21 Gold strain, 2003 2-1 pet21ahmyh Qiagen mini-preparation kit DNA DNA DNA( hmyh ) DNA( hmyh ) DNA DNA 2-2 DNA DNA AS-PCR 2 DNA DNA genomic DNA 30
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第 十 讲 茎 尖 分 生 组 织 培 养 2012 年 秋 季 上 节 课 内 容 回 顾 1) 什 么 是 体 细 胞 无 性 系 变 异, 其 遗 传 基 础 包 括 哪 些? 体 细 胞 无 性 系 变 异 : 植 物 外 植 体 经 组 织 细 胞 培 养 的 脱 分 化 和 再 分 化 过 程 后, 再 生 植 株 中 产 生 的 异 于 亲 本 的 变 异 遗 传 基 础 包 括 :
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G+ G+ G- b 作用机制 不可逆地结合到细菌核糖体 ５０Ｓ亚基 的靶位上 抑制细菌蛋白质合成?１４元大环内酯类阻断 肽酰基ｔ ＲＮＡ移位?１６元大环内酯类抑制 肽酰基的转移反应?与５０Ｓ亚基上的Ｌ２７ Ｌ２２蛋白质结合 促使 肽酰基ｔ ＲＮＡ从核糖体 上解离 对哺乳动物核糖体无影响 erythromycin erythromycin erythromycin 5% 5% clarithromycin
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全 球 科 技 革 命 生 化 科 技 之 衝 擊 劉 承 揚 http://mail.tku.edu.tw/cyliu/ 生 化 科 技 之 衝 擊 基 因 解 碼 基 因 工 程 的 產 物 基 因 療 法 微 生 物 與 複 製 人 奈 米 生 醫 技 術 晶 片 科 技 生 化 科 技 的 衝 擊 1 細 胞 典 型 動 物 細 胞 中 各 個 胞 器 :⑴ 核 仁 ;⑵ 細 胞 核 ;⑶
g kg - 1 decoction respectively 10 ml kg - 1 once a day for 10 weeks during making model. After 10 weeks according to the method of
19 7 LDL-C LDL-R 谢慧臣 1, 刘芬 1*, 田春漫 1, 向靖 2 2, 杨强 ( 1. 湖北民族学院医学院中西医结合教研室, 湖北恩施 445000; 2. 湖北民族学院医学院附属医院中西医结合科, 湖北恩施 445000) LDL LDL-R Wistar 60 7. 2 10-4 g kg - 1 0. 25 0. 5 1. 0 g kg - 1 10 1 10 10 LDL
浙 江 药 品 检 验
二 OO 六 年 第 五 期 ( 总 第 13 期 ) 本 期 导 读 二 OO 六 年 三 月 二 十 日 他 山 之 石 赴 山 东 上 海 两 省 市 药 检 所 考 察 报 告 药 检 动 态 我 所 参 加 全 省 药 品 安 监 注 册 工 作 会 议 金 华 所 延 胡 索 单 味 浓 缩 ( 配 方 ) 颗 粒 临 床 前 研 究 通 过 成 果 鉴 定 经 验 交 流 溶 血 试
2015年臺灣國際科學展覽會
2015 年 臺 灣 國 際 科 學 展 覽 會 優 勝 作 品 專 輯 作 品 編 號 080003 參 展 科 別 生 物 化 學 作 品 名 稱 CYP11A1 導 致 非 類 固 醇 生 成 細 胞 的 粒 線 體 形 變 CYP11A1 Changes Mitochondrial Morphology in Nonsteroidogenic Cells 得 獎 獎 項 大 會 獎 : 一
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创 业 板 风 险 提 示 本 次 股 票 发 行 后 拟 在 创 业 板 市 场 上 市, 该 市 场 具 有 较 高 的 投 资 风 险 创 业 板 公 司 具 有 业 绩 不 稳 定 经 营 风 险 高 退 市 风 险 大 等 特 点, 投 资 者 面 临 较 大 的 市 场 风 险 投 资 者 应 充 分 了 解 创 业 板 市 场 的 投 资 风 险 及 本 公 司 所 披 露 的 风 险
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检 验 过 程 临 床 PCR 检 验 标 本 的 处 理 保 存 及 核 酸 提 取 方 法 医 师 申 请 检 验 项 目 申 请 患 者 准 备 患 者 识 别 样 本 采 集 样 本 运 送 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 分 析 测 定 样 本 处 理 分 析 前 分 析 中 分 析 后 报 告 临 床 应 用 烟 台 市 烟 台 山 医 院 赵 善 娜 结 合 临 床 资 料 分 析 结 果 并 确 认 出
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Phire Hot StartII DNA 聚合酶
重 要 提 示 Phusion 人 源 样 本 直 接 PCR 试 剂 盒 产 品 货 号 :F-150,200rxns x 20μl 变 性 温 度 为 98 C 退 火 温 度 与 众 多 常 规 DNA 聚 合 酶 ( 如 Taq DNA 聚 合 酶 ) 不 同, 具 体 请 参 照 6.3 延 伸 时, 若 扩 增 子 片 段 1kb, 则 延 伸 时 间 设 定 为 15s 即 可 ; 若
细胞凋亡检测 doc
[ - 1 - ] cell apoptosis detection BMS306FI rh Annexin V FITC KIT 300 test 5000 ANNEXIN V rh Annexin V FITC KIT 200 test 4880 BMS306FI/100T rh Annexin V FITC KIT 100 test 2850 BMS306FI/c rh Annexin V FITC
程汉良 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 陈淑吟 对文蛤 青蛤 硬壳蛤 江户布目蛤 薄片镜蛤 和菲律宾蛤仔 种帘蛤科贝类和 个地理种 群文蛤 大连 连云港 湛江 防城港 的细胞色素 氧化酶亚基 基因片段的核苷酸序列进行了分析 以探讨这一序列在种质鉴定 种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值 测序结果 表明 所有物种扩增片段长度均为 序列 含量 明显高于 含量 物种间共有变异位点 个 其中简约信息位点
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疾 病 名 柯 萨 奇 病 毒 感 染 英 文 名 coxsackie virus infections 缩 写 别 名 ICD 号 A08.3 概 述 柯 萨 奇 病 毒 感 染 是 由 柯 萨 奇 病 毒 引 起 的 病 毒 性 感 染 性 疾 病 临 床 表 现 复 杂 多 样, 有 无 菌 性 脑 膜 炎 脑 炎 心 肌 炎 心 包 炎 流 行 性 胸 肌 痛 疱 疹 性 咽 峡 炎 等,
2010 Q4 SPL
CELL CULTURE 系列 Flask 系列 25 T 70125 5/200 75T 70175 5/100 175T 72175 5/40 25 T, filter 70025 5/200 75 T, filter 70075 5/100 175 T, Filter 71175 5/40 Cell culture dish 系列 3.5 cm dish 20035 10/500 6 cm dish
实时定量PCR的全套解决方案
18-07 高效率逆转录试剂盒 First Strand cdna Synthesis Kit ReverTra Ace -α- (Code No. FSK-101) 使用说明书 科研用 TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN 目录 1 简介... 1 2 RT-PCR 法的原理... 2 3 试剂盒的组成... 3 4 操作步骤...
Method
PfNPC 5% O 10% AB 4, RPMI 5% CO 2 37 5 100% 30 sec 10% Giemsa 15 mins 100x oil-immersion lens parasitemia parasitemia 10 15% Parasitemia multiple invasion 4 Panel A B C parasitemia parasitemia 2% *Parasitemia
如何迎接 临床基因诊断实验室 验收
如 何 迎 接 临 床 基 因 诊 断 实 验 室 验 收 江 苏 省 临 床 检 验 中 心 许 斌 质 量 管 理 的 历 史 质 量 控 制 (Quality Control,QC) 良 好 实 验 室 实 践 准 则 (Good Laboratory Practice,GLP), 质 量 保 证 (Quality assurance, QA) 质 量 体 系 认 证 及 实 验 室 认 可
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Easy Cloning T-vector (pec-t) 目录号 :T003 ... 1 pec-t... 2 Easy Cloning T-vector... 2 2 Taq Master Mix... 5 2 Fast Taq Master Mix... 7 DL2000 Plus DNA Marker... 9 PCR A... 10 PCR... 10 SinoBio Easy Cloning
Microsoft Word - A201007-5462.doc
血 管 瘤 型 禽 白 血 病 的 诊 断 * 王 锡 增, 张 丹 英 ( 厦 门 正 大 农 牧 有 限 公 司, 厦 门 360019) 摘 要 : 禽 白 血 病 是 由 反 转 录 病 毒 科 禽 白 血 病 / 肉 瘤 病 毒 群 病 毒 (AL/SV) 引 起 的 禽 类 多 种 肿 瘤 性 疾 病 的 总 称, 感 染 率 高, 发 病 率 低,AL/SV 可 通 过 水 平 和 垂
经 无 数 次 的 提 取 和 提 纯, 最 终 得 到 一 小 匙 东 西 这 种 东 西 在 显 微 镜 下 呈 现 出 针 状 晶 体 的 形 状, 在 水 中 溶 解 后 得 到 一 种 带 乳 光 的 汁 液 当 他 将 少 许 溶 液 涂 抹 健 康 烟 叶 上 几 天 后, 这 烟 叶
生 命 的 历 程 什 么 是 生 命 生 命 是 什 么? 人 类 是 生 命 体 的 一 类, 他 们 有 组 织 器 官 等 形 体 上 的 相 同 之 处, 但 也 有 性 别 年 龄 肤 色 等 巨 大 的 差 别 ; 我 们 知 道 成 千 上 万 种 动 物 植 物 直 至 微 生 物 都 是 生 命 体, 因 为 它 们 同 人 类 一 样 都 有 产 生 生 长 衰 老 及 消 亡
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品 试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度 未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna
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:,, : : ( 800 : 200433) : 7871092 1/ 16 : 10.75 : 260 520 1998 6 1 1998 6 1 :12 000 ISBN 7-81060-013-3/ R012 : 22.00 ,,,,,,,,,,, 12, 4,, WH O, 270,, ( ),,,,,,,,,,,,,,,,,, 1998 6 8 1 11 15 20 27 31 35 55
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第 卷第 期 年 月 "## $%# - 基础医学 含 '- 野生及突变结合位点的胰岛素受体 '6,78&' 区报告基因载体的构建和鉴定 王美晨 王 璇 蓝 茜 李 癑 刘 莉 伊 静 李 靖 宋刘梅 马莎蕊 宁启兰 李冬民 西安交通大学医学部 遗传学与分子生物学系 环境与疾病相关基因教育部重点实验室 级临床医学七年制 级临床医学五年制 陕西西安 ( 摘要 目的 利用 6< *%&$%', :%''"D$"
2014 年 本 科 教 学 质 量 报 告 2015 年 6 月
2014 年 本 科 教 学 质 量 报 告 2015 年 6 月 目 录 学 校 概 况 1 第 一 部 分 本 科 教 学 基 本 情 况 3 一 办 学 定 位 3 二 本 科 人 才 培 养 目 标 及 服 务 面 向 3 三 教 学 工 作 中 心 地 位 落 实 情 况 4 四 在 校 生 情 况 4 第 二 部 分 师 资 队 伍 4 一 师 资 数 量 与 结 构 4 二 教 师 教
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
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德 國 麻 疹 & 先 天 性 德 國 麻 疹 教 材 製 作 : 高 銓 吟 共 同 製 作 : 陳 如 欣 醫 師 楊 効 偉 醫 師 巫 坤 彬 科 長 簡 大 任 副 組 長 陳 昶 勳 組 長 聯 絡 方 式 電 話 :02-23959825 轉 3781 電 子 郵 件 :0918@cdc.gov.tw 製 作 日 期 :2006 年 3 月 更 新 日 期 :2007 年 10 月 大
材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响
水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况
2011年06月期刊.cdr
TRIPLEX BIOSCIENCES 2011 年 6 月 总 第 14 期 XIBAO YU FENZI ZHENDUAN 细 胞 与 分 子 诊 断 CELLULAR AND MOLECULAR DIAGNOSIS 泰 普 生 物 科 学 ( 中 国 ) 有 限 公 司 TRIPLEX INTERNATIONAL BIOSCIENCES(CHINA) CO.,LTD. 泰 普 生 物 参 展
何文田官立中學
( ): 1995 2004 1996 : 1995 2 (+) 6 1) (+) 2) 3) 3.(c) (3 ) 2005 1¾ 4) a) 酶 4.(c) Q 1.(c) Q 4.(a) Q - --- 酶 酶 酶 - (2 ) (5 ) 酶 酶 (6 ) 酶 (8 ) (2 ) 4.(c) Q -- 3.(b) Q --- 酶 ph 酶 ph (8 ) 酶 (11 ) b) 4.(a) Q
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（精校版）陕西省语文卷文档版（含答案）-2011年普通高等学校招生统一考试.doc
绝 密 启 封 前 2015 年 普 通 高 等 学 校 招 生 全 国 统 一 考 试 生 物 试 题 ( 江 苏 卷 ) 一 单 项 选 择 题 : 本 部 分 包 括 20 题, 每 题 2 分, 共 计 40 分 1. 下 列 关 于 淀 粉 脂 肪 蛋 白 质 和 核 酸 4 种 生 物 分 子 的 叙 述, 正 确 的 是 ( ) A. 都 能 被 相 应 的 酶 水 解 B. 都 是
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概述 Muta-direct 定点突变试剂盒使用说明 Muta-direct 定点突变试剂盒可以在克隆于质粒 DNA 序列的特定位点诱导突变, 理论上可以保证突 变率达到 100%, 整个实验过程简单快捷 只有两步, 而不需要用到 M13 载体和甲基化步骤 该试剂盒 可以诱导某个已知基因的特定碱基进行定点突变 再突变成野生型 密码子突变 插入或者缺失等, 因 此可以用于功能基因组学和蛋白质组学的研究