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- 琏 周
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5 1-1 UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的分析 TSKgel UP-SW3 UHPLC HPLC A TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 15 cm B UHPLC-SEC 1.7 μm (4.6 mm ID. 15 cm mmol/l (ph SO4 mmol/l Na +.5 % NaN3.35 ml/ 25 UV 28 nm 5 μl - IgG UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的高分辨率 快速分析 UP-SW3 2 G3SWXL UP-SW3 G3SWXL A TSKgel G3SW XL 5 μm (7.8 mm ID. 3 cm 2 B TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 3 cm mmol/l (ph mmol/l Na2SO4 +.5 % NaN3 A 1. ml/ B.35 ml/ 25 UV 28 nm μl - IgG ~ 3 ~
6 1-3 SEC 法对抗体药物的超快速分析 TSKgel SuperSW mab HTP HPLC :.5mL/ : 5.MPa Rs / 1.91 :.35mL/ : 3.6MPa R s / 2.13 TSKgel SuperSW mab HTP (4.6 mm ID 15 cm.2 mol/l (ph % NaN3.5 ml/(.35 ml/( UV 28 nm 25 μl - IgG SEC 法对抗体多聚体 ( 二聚体以上 的分析 TSKgel UltraSW Aggregate 1.mL/.2mL/ TSKgel UltraSW Aggregate (7.8 mm 3 cm ID..2 mol/l (ph % NaN ml/ UV (28 nm 25 μl 5 g/l ~ 4 ~
7 1-5 SEC 法对单链抗体 (scfv 的分析 G3SWXL scfv µg scfv + % (v/v x concentrated HCP solution A.1 M acetate +.2 M NaCl ph 3.5 B.1 M acetate +.5 M NaCl ph CV 4 % 75 B CV % B Toyopearl MX-Trp-65M TSKgel G3SW XL.1 M sodium phosphate sodium +.1 M sulfate ph SEC 法对各种抗体药物的分析实例 I TSKgel G3SWXL Rs 2 TSKgel G3SW XL (7.8 mm ID 3 cm ( mmol/l 2PO4 + KH mmol/lna2so4 ph 6.6:IPA=9:1 1. ml/ μl R.T. A ( ~ 5 ~
8 1-7 SEC 法对各种抗体药物的分析实例 II TSKgel G3SWXL Rs 2 TSKgel G3SW XL (7.8 mm ID 3 cm 5 mmol/lpb+3 mmol/lnacl (ph ml/ μl R.T. B ( SEC 法对各种抗体药物的分析实例 III TSKgel G3SWXL Rs 2 TSKgel G3SW XL(7.8 mm ID 3 cm 5 mmol/lpb+3 mmol/lnacl (ph ml/ μl R.T. C ( ~ 6 ~
9 1-9 SEC 法对各种抗体药物的分析实例 IV TSKgel G3SWXL TSKgel G3SW XL(7.8 mm ID 3 cm 5 mmol/lpb+3 mmol/lnacl (ph ml/ μl R.T. D ( SEC 法对各种抗体药物的分析实例 V TSKgel SuperSW mab HR Rs 2 TSKgel SuperSW mab HR (7.8 mm ID 3 cm mmol/lkh 2PO4 + mmol/lna2so4 (ph ml/ μl R.T. E ( ~ 7 ~
10 TOSOH BIOSCIENCE 1-11 SEC 法对各种抗体药物的分析实例 VI TSKgel SuperSW mab HR Norm Rs TSKgel SuperSW mab HR (7.8 mm ID 3 cm mmol/lpb+ mmol/lnacl (ph ml/ μl R.T. F ( SEC SuperSW3 Half-Fab mab TSKgel SuperSW3 4 μm (4.6 mm ID 3 cm mmol/l+ mmol/l ph % NaN3.35 ml/ FLD (λex: 28 nm λem: 35 nm 3 μl ~ 8 ~
11 1-13 IEC 法对抗体的分析对比实例 SP-STAT CM-STAT TSKgel SP-STAT TSKgel CM-STAT (4.6 mm ID cm A mmol/l (ph 7. B mmol/l +5 mmol/l NaCl (ph 7. -% B (3 UV28 nm 1 ml/ μl G ( 1-14 IEC 法对抗体中电荷异构体的分析 I TSKgel SP-STAT 9 Norm. 14 TSKgel SP-STAT (4.6 mm ID cm 12 A mmol/lpb (ph 6.5 B mmol/lpb + 1 mol/l NaCl (ph 6.5 ( B% 4.5 ml/ 2 μl H ( ~ 9 ~
12 TOSOH BIOSCIENCE 1-15 IEC 法对抗体中电荷异构体的分析 II TSKgel CM-STAT TSKgel CM-STAT (4.6 mm ID cm A mmol/lhac-naac (ph 6. B mmol/lhac-naac + 1 mol/l NaCl (ph 6. ( B% 25.5 ml/ μl I ( 1-16 IEC 法对抗体中电荷异构体的分析 III TSKgel CM-STAT TSKgel CM-STAT (4.6 mm ID cm A mmol/lpb (ph 7.5 B mmol/lpb + mmol/l NaCl(pH 7.5 ( B% 3.8 ml/ μl J ( ~ ~
13 1-17 IEC 法对抗体中电荷异构体的分析 IV TSKgel Q-STAT 6 Norm. 8 6 TSKgel Q-STAT (4.6 mm ID cm A mmol/ltris-hcl (ph 9. B mmol/ltris-hcl + 1 mol/l NaCl (ph 9. ( B% ml/ μl K ( 1-18 HILIC 法分离单克隆抗体的糖链 (PA 化寡糖 Rs=1.26 TSKgel Amide-8 3 μm (2. mm ID. 15 cm A mmol/l (ph B 75%B 75 (-5 5% B (5-8.5 ml/ (Ex.315 nm Em.38 nm 4 5 μl PA ( ~ 11 ~
14 AB 标记糖链的 LC-MS 分析 TSKgel Amide-8 2μm (2. mm I.D. 15 cm A 5 mmol/l (ph 5.7 B 75%B ( %B (5-3.3 ml/ 4 2-AB N IgG ( 8 pg (8% (A ex. 33 nm 4 (B MS ESI positive SIM 2-1 SEC 法对抗体片段的分析实例 I TSKgel SuperSW mab HR Rs TSKgel SuperSW mab HR (7.8 mm ID 3 cm mmol/lpb+ mmol/lnacl (ph ml/ μl R.T. A ( ~ 12 ~
15 2-2 SEC 法对抗体片段的分析 II TSKgel SuperSW mab HR 1.8( ACN Rs TSKgel SuperSW mab HR (7.8 mm ID 3 cm mmol/lpb+ mmol/lnacl (ph 6.8 : ACN= 9:1.8 ml/ μl R.T. B ( 2-3 SEC 法对抗体片段的分析 III TSKgel SuperSW mab HR TSKgel SuperSW mab HR (7.8 mm ID 3 cm mmol/lpb+ mmol/lnacl(ph 6.8:ACN=9:1.8 ml/ μl R.T. C ( Rs ~ 13 ~
16 2-4 IEC 法对抗体片段中异构体的分析 I TSKgel CM-STAT 2. 7 TSKgel CM-STAT (4.6 mm cm ID Rs A 5 mmol/lpb (ph 5. B 5 mmol/lpb + 1 mol/l NaCl (ph 5. ( B%.8 ml/ μl D ( 2-5 IEC 法对抗体片段中异构体的分析 II TSKgel Super Q-5PW TSKgel Super Q-5PW (7.5 mm ID 7.5 cm A mmol/ltris-hcl (ph 8.5 B mmol/ltris-hcl + 1 mol/l NaCl (ph 8.5 ( B% ml/ μl E ( ~ 14 ~
17 2-6 HIC 法对抗体片段的分析实例 I Antibody TSKgel Phenyl-5PW (5 mm ID 5 cm A mmol/ltris-hcl + 242SO4 mol/l (ph (NH8.6 B mmol/ltris-hcl (ph 8.6 ( B%.6 ml/ μl F ( 15 Fragments HIC 法对抗体片段的分析实例 II TSKgel Butyl-NPR TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID cm A mmol/ltris-hcl + 242SO4 mol/l (ph (NH8. B mmol/ltris-hcl (ph 8. ( B% ml/ μl G ( ~ 15 ~
18 2-8 HIC 法对抗体片段的分析实例 III TSKgel Butyl-NPR TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID cm A mmol/ltris-hcl + 242SO4 mol/l (ph (NH8. B mmol/ltris-hcl (ph 8. ( B% ml/ μl H ( 2-9 HIC 法对抗体片段的分析实例 IV TSKgel Butyl-NPR TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID cm A mmol/ltris-hcl + 242SO4 mol/l (ph (NH8.6 B mmol/ltris-hcl (ph 8.6 ( B% ml/ μl I ( ~ 16 ~
19 2- HIC 法对抗体片段的分析实例 V TSKgel Butyl-NPR 6 Norm TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID cm A 25 mmol/lpb SO4 mol/l (ph (NH7.3 B 25 mmol/lpb (ph 7.3 ( B%.5 ml/ μl J ( 2-11 HIC 法对抗体片段的分析实例 VI TSKgel Butyl-NPR TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID cm A mmol/ltris-hcl + 242SO4 mol/l (ph (NH8. B mmol/ltris-hcl (ph 8. ( B% ml/ μl K ( ~ 17 ~
20 2-12 RPC 法对抗体片段的分析实例 I TSKgel Protein C TSKgel Protein C4-3 (4.6 mm 15 cm ID A H 2O.1%TFA B ACN.1%TFA ( B% UV214 nm 1. ml/ 55 μl L ( RPC 法对抗体片段的分析实例 II Fab Fc F(ab 2 Fc Fab F(ab 2 TSKgel Protein C4-3 (4.6 mm 15 cm ID A H 2O/ACN/TFA = 9//.5 (v/v/v B H 2O/ACN/TFA = /8/.5 (v/v/v % - % B in 45 4 UV2 nm μl IgG ~ 18 ~
21 2-14 RPC 法分离抗体 IgG 的重链和轻链 TSKgel ProteinC4-3 IgG-A IgG-B IgG-A IgG-B IgG-B 215 nm light chain light chain hydrophilic variant heavy chain heavy chain IgG-A IgG-B TSKgel Protein C4-3 ( 4.6 mm 15 cm ID A H 2O/ACN/TFA = 9//.5 (v/v/v B H 2O/ACN/TFA = /8/.5 (v/v/v % % B (45 5 UV215nm μl IgG-A ( IgG-B ( ( 3-1 HIC 法分离曲妥珠单抗和 ADC 药物 Trastuzumab DAR=2 DAR=4 ADC DAR= DAR=6 TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID. cm A 25 mmol/l (ph mol/l B 25 mmol/l (ph 7. / 2- = 8 / 2 % B.5 ml/ UV (28 nm μl.24 g/l ADC (Herceptin-vcMMAE 2.2 g/l DAR= ~ 19 ~
22 3-2 SEC 法分离 ADC 药物 SEC ADC UP-SW3 ADC. AU UP-SW3 SuperSW mab HR G3SWXL Min TSKgel UP-SW 3 (4.6 mm ID 3 cm TSKgel Super SW mab HR (4.6 mm ID 3 cm TSKgel G3SWXL (7.8 mm ID 3 cm (5 mmol/l PB + 5 mmol/l NaCl + mmol/l Arg.:IPA=95:5.35 ml/(up-sw3.5 ml/ (SuperSW mab HR.5 ml/ (G3SWXL 5 μl R.T ADC 1 1 mg/ml 3-3 有机溶剂对 ADC 在分离效果的影响 ADC % IPA %IPA 15 %IPA 5 25%IPA TSKgel Butyl-NPR (4.6 mm ID cm A.25 mol/lpb SO4(pH mol/l (NH7. B.25 mol/lpb:ipa=different ratio (ph 7. %B ( UV28 nm.5 ml/ μl ADC mg/ml ~ ~
23 3-4 ph 梯度 盐浓度对 ADC 分离效果的影响 TSKgel SP-STAT ADC 2 2 ph TSKgel SP-STAT (4.6 mm ID cm A 25 mmol/lnaac-hac (ph 4.5 B A+1 mol/l NaCl (ph ml/ μl R.T ADC 2.8 mg/ml TSKgel SP-STAT (4.6 mm ID cm A mmol/lmes+25 mmol/lhepes + mmol/l NaCl (ph 4.5 B mmol/lmes+25 mmol/lhepes + mmol/l NaCl (ph.8.5 ml/ μl R.T ADC 2.8 mg/ml ~ 21 ~
24 TOSOH BIOSCIENCE 产品一览表 ( TSKgel UP-SW3 TSKgel UP-SW3 TSKgel SuperSW mab HR TSKgel SuperSW mab HTP TSKgel UltraSW Aggregate TSKgel SuperSW TSKgel SuperSW3 TSKgel SuperSW3 TSKgel SuperSW3 TSKgel GSW XL TSKgel G3SW XL TSKgel G4SW XL 2 μm 2 μm 4 μm 4 μm 3 μm 4 μm 4 μm 4 μm 4 μm 5 μm 5 μm 8 μm 4.6 mm ID 15 cm 4.6 mm ID 3 cm 4.6 mm ID 15 cm 7.8 mm ID 3 cm 7.8 mm ID 3 cm 4.6 mm ID 3 cm 1. mm ID 3 cm 2. mm ID 3 cm 4.6 mm ID 3 cm 7.8 mm ID 3 cm 7.8 mm ID 3 cm 7.8 mm ID 3 cm TSKgel Q-STAT 7 μm 4.6 mm I.D.. cm 27μeq/g-drygel Cl TSKgel Q-STAT TSKgel SP-STAT μm 7 μm 3. mm I.D. 3.5 cm 4.6 mm I.D.. cm 27μeq/g-drygel 23μeq/g-drygel Cl - Na TSKgel SP-STAT μm 3. mm I.D. 3.5 cm 23μeq/g-drygel Na TSKgel CM-STAT 7 μm 4.6 mm I.D.. cm μeq/g-drygel Na TSKgel CM-STAT μm 3. mm I.D. 3.5 cm μeq/g-drygel Na TSKgel DEAE-NPR 2.5 μm 4.6 mm I.D. 3.5 cm.1 eq/l Cl TSKgel DNA-NPR TSKgel SP-NPR TSKgel SP-NPR 2.5 μm 2.5 μm 2.5 μm 4.6 mm I.D. 7.5 cm 4.6 mm I.D. 3.5 cm 4.6 mm I.D. 5. cm.1 eq/l.1 eq/l.1 eq/l Cl - Na + Na (nm TSKgel Phenyl-5PW TSKgel Ether-5PW TSKgel Butyl-NPR TSKgel Butyl-NPR μm μm 2.5 μm 2.5 μm 7.5 mm I.D. 7.5 cm mm I.D. 7.5 cm mm I.D. 3.5 cm mm I.D. cm ~ 22 ~
25 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 TSKgel Amide-8 2 μm 2 μm 2 μm 2 μm 2 μm 2 μm 3 μm 3 μm 3 μm 3 μm 2. mm ID 5 cm 2. mm ID cm 2. mm ID 15 cm 3. mm ID 5 cm 3. mm ID cm 3. mm ID 15 cm 2. mm ID 5 cm 2. mm ID 15 cm 4.6 mm ID 5 cm 4.6 mm ID 15 cm TSKgel Protein C4-3 TSKgel Protein C4-3 TSKgel Protein C4-3 TSKgel Protein C4-3 TSKgel Protein C4-3 TSKgel Protein C4-3 3 μm 3 μm 3 μm 3 μm 3 μm 3 μm 2. mm I.D. 5 cm 2. mm I.D. cm 2. mm I.D. 15 cm 4.6 mm I.D. 5 cm 4.6 mm I.D. cm 4.6 mm I.D. 15 cm ~ 23 ~
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