$$$ #! 水 $ 产 $ 学 $ 报 卷 成鱼鱼种的营养需要研究较少 目前也未见关于吉富罗非鱼成鱼鱼种阶段对 需求量的研究 因此 本实验通过考察不同含量水平 对吉富罗非鱼生长性能 鱼体成分 部分血清生化指标 肝脏 积累量及肝脏转酮醇酶基因表达量等影响 确定吉富罗非鱼对饲料中 的需要量 为吉富罗非
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- 懿受 邹
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1 第 卷第 期!"# 年 月 $ 水 $ 产 $ 学 $ 报!!"# 文章编号 "!!! %!&"#!"#! %!# %!' ""!""& #$%&!"!! & 吉富罗非鱼对饲料中维生素 : 的需要量 任 $ 春 " $ 文 $ 华 " $ 黄 $ 凤 $ 蒋 $ 明 吴 $ 凡 $ 刘 $ 伟 $ 田 $ 娟 $ 杨长庚 $ 吴金平 " 华中农业大学水产学院 湖北武汉 $!!! 中国水产科学研究院长江水产研究所 农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室 湖北武汉 $! 摘要 采用维生素 2 " 含量为!!' 对照组!# ""!"" 和 '! #5 的 & 种纯化饲料 分别饲养初始体质量为 & +"# 的吉富罗非鱼 " 周 研究 对其生长性能 部分血清生化指标 肝脏 蓄积量及转酮醇酶基因表达量的影响 以确定其对饲料 的需要量 结果显示 随着饲料中 含量增加 吉富罗非鱼增重率先呈线性增加后趋于稳定 当饲料中 含量为 ""! ""'! #5 时增重率达最大 吉富罗非鱼肝脏 含量随着饲料 含量增加不断增大 当增加到! #5 后趋于稳定 饲料中缺乏 显著提高血清丙酮酸含量!!# 但对全鱼水分 粗脂肪 粗蛋白 灰分无显著性影响 (!!# 饲料中添加 显著提高血清高密度脂蛋白胆固醇和肝脏转酮醇酶基因表达量!!# 饲料中 含量大于 "" #5 各组的肝脏转酮醇酶活性显著高于 含量小于!# #5 组!!# 折线回归分析表明 吉富罗非鱼 & # 获得最佳生长时对饲料 需要量为 ""& #5 肝脏 蓄积量达到最大时 对 的需要量为!& #5 关键词 吉富罗非鱼 维生素 2 " 需要量 生长中图分类号 & $$$$$$$$$$$$ 文献标志码 $$ 维生素 2 " 6 1 / 2 " 又名硫胺素 在体内主要以硫胺素焦磷酸 ( 的辅酶形式存在 在 酮酸 如丙酮酸和 酮戊二酸 的氧化脱羧和磷酸戊糖途径的转酮醇基中起着十分重要的作用 " 大量的研究表明其亦是维持鱼类正常生长 生理功能所必需的水溶性 2 族维生素之一 饲料中缺乏 会导致虹鳟 + % 斑点叉尾 # ( 厌食 生长缓慢 神经紊乱 运动失调 过度应激 鲤 $( ( # 和黄尾 ' & 缺乏 会出现鳍充血 神经过敏 色素减退和皮下出血 到目前为止 国内外学者对鱼类 需要量 开展了一些研究工作 如斑点叉尾需要量为 "! #5 鲈 * )( 为 # ' # #5 虹鳟为 "! #5 鲤为!# #5 草鱼 $ ( 为 ""& #5 目前关于罗非鱼 需要量也有一些报 "! 道 等研究表明 饲料中添加 # #5 可以满足奥尼罗非鱼 + 正常生长 饲料中添加 # #5 可以满足红罗非鱼 + + 营养需求 "" 吉富品系罗非鱼 4(+ 是一种具有较 " 高营养价值和经济价值的鱼类 现成为中国一个重要养殖品种 生长速度较其他罗非鱼品系提高 #! 其对 的需要量可能与其他品系的罗非鱼有一定的差别 另外 当前对罗非鱼 收稿日期!"'!'"'$$$ 修回日期!"'""' 资助项目 现代农业产业技术体系专项 ' 公益性行业 农业 科研专项!"!!!! 通信作者 文 $ 华 ' 8*/:3 :0 "& &
2 $$$ #! 水 $ 产 $ 学 $ 报 卷 成鱼鱼种的营养需要研究较少 目前也未见关于吉富罗非鱼成鱼鱼种阶段对 需求量的研究 因此 本实验通过考察不同含量水平 对吉富罗非鱼生长性能 鱼体成分 部分血清生化指标 肝脏 积累量及肝脏转酮醇酶基因表达量等影响 确定吉富罗非鱼对饲料中 的需要量 为吉富罗非鱼全价配合饲料的开发和利用提供理论依据 "$ 材料与方法 实验饲料以酪蛋白 明胶为蛋白源 玉米油和豆油为脂肪源 糊精为糖源的纯化饲料为基础饲料 在基础饲料中分别添加 惠兴生化试剂有限公司 质量百分数 '!!#"!!!'! # 5 共配制 & 种实验饲料 表 " 高效液相色谱法测得 & 种饲料 含量分别为!!'!# ""!""'! #5 原料经粉碎后过 &! 目筛 准确称质量后逐级混匀 加适量水用绞肉机加工成直径! 条状 电风扇吹干后 破碎成长约! 圆柱形颗粒料 %! 保存备用 实验鱼和实验方法实验鱼由广西罗非鱼国家级育种实验场提供 用基础饲料在长江水产研究所室内循坏水养殖系统养殖桶 #!! 中驯养 周后挑选体质健壮 规格均匀的吉富罗非鱼 初始平均体质量 & +"# 随机分配于 "' 个桶中 每桶 "# 尾 随机分成 & 个组 每组 个重复 分别投喂 & 组实验饲料 每天分两次投喂!!"&!! 表观饱食投喂 每周称重 " 次 养殖实验持续 " 周 每日 ""!! 换水一次 换水量占总体积约 " # 观察记录水温 实验鱼摄食及死亡情况 饲养期间的水温 # 溶解氧高于 #! # 总氨氮低于!# # 样品采集 测定与计算养殖 " 周 实验鱼饥饿 : 后测定每个桶的实验鱼总重量并记录尾数 从每个桶随机取 & 尾鱼 尾用于全鱼粗蛋白 粗脂肪 水分和灰分测定 尾测量其体长 体质量 从尾静脉采血后进行解剖 迅速分离内脏和肝脏 并称其重量 计算脏体比和肝体比 并保留肝脏样品 用于肝脏 含量和转酮醇酶活性测定 血液在 静置 : 后!!!!# / 离心 "! / 取上清液 用于部分生化指标的检测 肝脏 肌肉 全鱼置 %! 冰箱中保存待测 另随机取 尾鱼 在无菌条件下采取肝脏 先放入液氮冷冻过夜 然后置于 %'! 保存 用于肝脏转酮醇酶基因表达量的检测 表 基础饲料配方及其基础营养成分组成 +& (!" $&1"! '"'!) ' $"! 酪蛋白 & +* / 明胶 * 1 / 糊精 *91! / 玉米油 &!/ 豆油 +. 原料 /!* */1 矿物盐预混料 /*!!* 9 含量 # & /1*/1 维生素预混料 6 1 /!* 9 " 氯化胆碱 &: /*&:! * 纤维素 &*3 +* 总计 1 1 "!! 营养成分 (!&"!'# '"!"! ' #!# ""# 水分 +13!* " 粗蛋白 &!3 *! 1* / 粗脂肪 &!3 *% 1 & ' 灰分 +: && 注 " 维生素预混料由下列成分组成 # 预混料 核黄素 "! 泛酸钙 "! "' 生物素!& 盐酸吡哆醇 叶酸 "# 肌醇!!' 维生素 '' 磷酸镁 &! 烟酸 &!# ' 维生素 醋酸酯 #! 维生素, 视黄醇醋酸酯!!! 和维生素 "!! 再用微晶纤维素添加至 " 矿物盐预混料由下列成分组成 # 预混料 磷酸二氢钙 " #' 乳酸钙 硫酸亚铁 " # 硫酸镁 " 磷酸二氢钠 ' 氯化钠 # 氯化铝!"# 碘酸钾!" # 氯化钾 # 氯化铜!" 硫酸锰!'! 氯化钴 " 和硫酸锌 再用微晶纤维素添加至 " 1*+ "1:* 6 1 / 913!* +3 * 1:* % 8 / # 913!*! 0 % 6 /"!& & 3 /1 1:*/ 1*"! "'0 1 /!&.! 9 /*:.! &:! *% & & "# / + 1!!' +&!0.' ' / : +: 1*' &!/ & 1 / & & &!#'1 & :*!. &*1 1* #! */ /*!*1 / &*1 1*!!! / &: *& %*!!! /!* */1+8*!* 31* 8 1: &! '&*3 +*1 " 1:* /*! 913!*+3 * 1:*% 8 / # *1 " #' # * & " # " ' # &!"#,!" #, # 3!" /!'! & " / / /!* */1+8*!* 31* 8 1: &! '&*3 +*1 "
3 期任 $ 春 等 吉富罗非鱼对饲料中维生素 2 " 的需要量 $$ #" $$ 相关计算公式如下 成活率 +3!6 6! 1* )"!!! 1 #!! " 增重率 8* :1 /! 1* )4 )"!! %3/ %#3/ 0#3/ 饲料效率 %** *% & */&. ) %3/ % #3/ 0%- 肥满度 & / 1 / % &1! #& )"!! /0 肝体比 :* & )"!! "/0 / # 脏体比 6 +&*! + 1 & / *9 )"!! 1/0/ & 式中! 1 为终末尾数!! 为初始尾数 #3/ 为初始体质量 %3/ 为终末体质量 / 为鱼体质量 为鱼体长 & "/ 为肝脏质量 1/ 为内脏质量 %- 为饲料总消耗量 #3/ 为初始总体质量 %3/ 为终末总体质量 全鱼和饲料的水分含量采用 "!# 恒温干燥失重法测定 粗蛋白采用凯氏定氮法 粗脂肪采用索氏抽提法 灰分采用马福炉灰分法测定 饲料 42("!!!! 和肝脏 42(&# %!!' 的 含量采用高效液相色谱法检测 血清中高密度脂蛋白胆固醇含量和碱性磷酸酶活性采用.+ *9 全自动生化分析仪 :* 9 '!! 测定 血清丙酮酸含量测定采用南京建成生物技术有限公司测试盒测定 肝脏转酮醇酶活性测定采用上海蓝源生物科技有限公司测试盒测定 肝脏转酮醇酶基因 (, '!!# 表达检测采用荧光定量法 荧光染料采用的是 (, 公司的 2!* 9 ( 7 ( ( +* 3+ 扩增条件 # 预变性 # / # 变性 "# +&! 退火 "# + 延伸! + 共! 个循环 " " 为内参 引物序列 (, 上游 # '4(44(( 4 4( (4((4' 下游 # ' 44(4(( ((( (44' 4' " 上游 # '4 4 ( (4 (44 (((' " 下游 # '4 4 ( ( ((' ( ' 4' &!!! -4 德国 荧光定量 仪测 $ 1 值 每个反应管的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数 $ 1 值越大 拷贝数越少 根据 %$ 1 " 相对定量法计算其相对表达量 统计分析 采用 "! 统计软件中 /*'). 方差分析和 "3/& / 氏多重比较法 实验结果用平均值 + 标准差表示 差异水平为!!# $ 结果 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼生长性能 饲料效率及形体指标的影响经过 " 周饲养 吉富罗非鱼增重率随着饲料中 含量增加呈现先增加后稳定的趋势 其中 ""!""'! #5 组鱼体增重率 显著高于!!'!# #5 组!!#!# #5 组鱼体增重率显著高于对照组!!# 表 饲料效率随着饲料 含量不断提高 其中!""'! #5 组的饲料效率显著高于对照组!!# 脏体比随着饲料中 含量呈先增大后稳定的趋势 其中 ""!""'! #5 组的脏体比显 表 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼生长性能 饲料效率及形体指标的影响 6 #! $"! &!)" " '(!!),&.!)& & # $ "#"# $ $ "$"#' ;+!" " 饲料 含量 # #5 *1!. 1: / *6*+!!'!# ""! "" '! 初始质重 # 2) & + & +" & +" &# + & &' +" & +" 末体质量 # 2) ' +! +' 0 "'" +"" 0& #! +" & "' + & #' +' & 增重率 # )4 & + '! +& 0 ' +#" &! # +& & &' +& &! +#& & 饲料效率! +!!! +!!#!' +!!# 0!" +!!& 0!! +!! 0! +!! 0 脏体比 # ' ' +! '&! +! +! 0 " +! 0 & +!# 0 " +! 0 肝体比 # & +! & +!! +! 0 # +! # +! # +! 肥满度 # #& # +! &' +! 0! +! 0& " +! & &' +!" 0 &! +! 0 成活率 # "!! "!! "!! "!! "!! "!! 注 同行数据后凡有一个相同小写字母者表示差异不显著 (!!# 下同 1*+ * /+ / 1:*+ * /*+:! / + *+3 *!+&! 1*1*!!*/ 1+ / % & /1. %*!*/1 *1*! /* 0. "3/& / +1*+1 (!!# (:*+ * +0* 8
4 $$$ # 水 $ 产 $ 学 $ 报 卷 著高于其他组!!# 肝体比随着饲料中 含量增加呈先增大后减小的趋势 其中 "" #5 组肝体比达到最大且显著高于其他实验组!!# 而其他实验组之间肝体比没有显著差异 (!!# 实验鱼肥满度随着饲料中 含量增加呈先增大后减少的趋势 其中! #5 组肥满度达到最大且显著高于其他组!!# "" #5 组鱼体肥满度显著高于对照组!!# 各个组吉富罗非鱼成活率均为 "!! 应用折线模型分析得到 吉富罗非鱼达到最大生长时 对饲料 的需要量为 ""& #5 图 " 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼体成分的影响饲料中添加 对吉富罗非鱼全鱼水分 粗脂肪 粗蛋白 灰分含量无显著性影响 (!!# 表 吉富罗非鱼全鱼水分含量为 &!!# 全鱼粗蛋白含量为 "#! "# 全鱼 粗脂肪含量为 "!& "" 全鱼灰分含量为 # & 图 吉富罗非鱼增重率与饲料中 -: 含量的折线回归关系 +",:& " '"'!)&!" ')"!. $"! &!)" " % $.",)!, " &! ;+!" " 表 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼体成分的影响 6 #! $"! &!)" " % ' $ # '"!" ;+;!" " 饲料 含量 # #5 *1!. 1: / *6*+!!'!# ""! "" '! 水分 # +13!* && +!& & +!# &! +!& &" +!' & +!'!# +!# 粗蛋白 # &!3 *! 1* / "#" +!& "#! +!# "#& +! "# +! "#" +! "# +! 粗脂肪 # &!3 *% 1 "" +!# "!& +!& ""& +!# ""# +!& "! +!# ""! +! 灰分 # +: & +!! #! +!!' +!! & +!!' +!! & +!! 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼部分血清生化指标的影响饲料 含量对吉富罗非鱼血清中丙酮酸 高密度脂蛋白胆固醇 总胆固醇的含量及碱性磷酸酶活性有显著影响!!# 表 饲料中添加 显著降低血清丙酮酸含量和提高血清高密度脂蛋白胆固醇含量!!# 但血清丙酮酸和血清高密度脂蛋白胆固醇含量在各 添加组间无显著性差异 (!!# 随着饲料中 含量增加 血清碱性磷酸酶活性呈先增大后减小趋势 其中!""'! #5 组血清碱性磷酸酶活性显著高于!!'!# "" #5 组!!# 血清总胆固醇含量呈先上升后稳定趋势 其中 ""!""'! #5 组血清总胆固醇含量显著高于!!'!# #5 组!!# 表 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼部分血清生化指标的影响 6 #! $"! &!)" " % ' '&( "#) "# "$"#' ;+!" " 饲料 含量 # #5 *1!. 1: / *6*+!!'!# ""! "" '! 丙酮酸 # #.!36 1* "! +!! 0!## +!!!# +!!!#! +!!!# +!!!#! +!!" 碱性磷酸酶 # # "'' +"' " +"& 0!' +" 0 +" &! +" 0& +"# 0& 高密度脂蛋白胆固醇 # # "!& +!!& "! +!!& 0! +!!' 0! +!! 0!" +!!& 0 "! +!! 0 总胆固醇 # # (' &! +!&! &' +!! #!" +!# 0 ' +! 0 && +! 0 +! 0
5 期任 $ 春 等 吉富罗非鱼对饲料中维生素 2 " 的需要量 $$ # 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼肝脏 -: 含量 肝脏转酮醇酶活性及肝脏转酮醇酶基因表达的影响饲料中 对吉富罗非鱼肝脏 含量 肝脏转酮醇酶活性 肝脏转酮醇酶基因表达量有显著影响!!# 表 # 随着饲料 含量增加 肝脏 含量 肝脏转酮醇酶活性呈先增加后稳定的趋势 其中 ""!""'! # 5 组显著高于!!'!# #5 组!!# 肝脏转酮醇酶基因表达量先增大后稳定的趋势 其中!# ""!""'! #5 肝脏转酮醇酶基因表达量显著高于对照组!!# 但各添加组之间无显著差异 (!!# 根据饲料 含量与实验鱼肝脏 含量的关系 经折线回归分析 发现实验鱼肝脏蓄积量达最大时 吉富罗非鱼对饲料中 的需要量为!& #5 图 表 饲料 -: 含量对吉富罗非鱼肝脏 -: 含量 转酮醇酶活性及转酮醇酶基因表达量的影响 6 #! $"! &!)" " % ' )!"#!)" "!& '! ' #!"%"!!& '! '1&''" ;+!" " 饲料 含量 # #5 *1!. 1: / *6*+!!'!# ""! "" '! 肝脏 含量 # # :* 1 &1: / & /1*/1 转酮醇酶活性 # #5 1! /+5*1 +* & 转酮醇酶基因表达量 1! /+5*1 +**9!*++ /! +!!! # +!!" 0!# +!! &! # +!!! & +!!! & +!! #! +! # + &" + 0 & +! 0 &' +! 0 &#& + 0 "!! +! "&! +!" 0 " ' +!" 0 " +!" 0 "'" +!" 0 "' +!" 0 图 吉富罗非鱼肝脏 -: 含量与饲料中 -: 含量的折线回归关系 +", :& " '"'!)&!" ')"!. $"! &!)" " $)!"#!)" " # #!&!" ;+!" " $ 讨论本实验中 未添加 组吉富罗非鱼除生长缓慢外 未发现明显的缺乏症 这一结果与对草鱼 大菱鲆 ' ( * "# 斜带石斑鱼 ( ( "& 和幼建鲤 $( ( 6!) " 研究结果相似 但有研究表明 当饲料中缺乏 大鳞大麻哈鱼 + 6 "' 鲤 # 奥尼罗非 鱼 "! 黄尾 & ' 和虹鳟会出现厌食 生长缓慢 神经过敏 不正常抽搐 肌肉萎缩 运动失调等症状 本实验未出现以上 缺乏症的原因可能是吉富罗非鱼初始体质量 & 相对较大 其组织对 蓄积能力相对较强 并且生长相对缓慢 因而体内贮存的 和基础饲料中的 在本养殖周期内足以维持其正常生理功能 如果延 "! 长养殖周期 实验鱼可能出现缺乏症 等 用未添加 饲料对种不同大小的奥尼罗非鱼连续投喂实验 初始体质量为 #! 在 & 周出现神经缺乏症 而初始体质量为 & 在第 周 ' 就出现神经缺乏症! 1 等报道虹鳟随着体质量的增大 缺乏症的出现时间推迟 已有研究表明 饲料中添加 能提高幼建鲤 " 斑点叉尾 虹鳟 ' "" 红罗非鱼特定生长率 存活率 改善饲料和蛋白利用效率 在本实验中 饲料中添加 能改善吉富罗非鱼饲料效率 提高其脏体比 增重率 本结果与以上研究结果一致 本实验以增重率为评价指标 经过折线回归分析 吉富罗非鱼 的需要量为 ""& #5 低于奥尼罗非鱼 "! # #5 红罗非鱼 "" # #5 其主要原因可能是本实验采用的实验鱼的初始体质量相对较大 另外不同品
6 $$$ # 水 $ 产 $ 学 $ 报 卷 系的罗非鱼 其对饲料 需要量也可能存在一定差异 不同品系的罗非鱼对 的需要量是否存在差异 需要在同一实验条件进行比较研究 在本实验条件下吉富罗非鱼 需要量与其他鱼类比较 低于鲈 " # #5 太平洋鲑 ++ "! "# #5 黄尾 "" #5 与草鱼 ""& #5 幼建鲤 " "! #5 虹鳟 ' "! #5 斑点 叉尾 "! #5 需要量相一致 但高于鲤 #!# #5 需要量 组织中 蓄积量常作为确定水产动物需要量的评价指标 " 本实验结果显示 随着饲料 含量的增加 肝脏 含量呈上升趋势 达到最适需要量后趋向稳定 这一结果与赵智勇! 等研究结果相一致 ( +:! 等研究也发现 随着饲料 含量增加 虹鳟肝脏 含量也出现了相似的变化趋势 并发现虹鳟肝脏 含量对饲料 添加水平比其他指标更敏感 可以作为虹鳟 需要量的评价指标 本实验以肝脏 含量为评价指标 通过折线回归分析获得吉富罗非鱼对饲料 需要量为!& #5 本实验表明 饲料中添加 能显著降低血 "! ' 清丙酮酸含量 与 等和! 1 等得出的结果一致 这是因为丙酮酸脱氢酶是 依赖性酶 可促进丙酮酸脱羧成乙酰辅酶 降低丙 " % 酮酸的含量 鱼体内丙酮酸过多会影响机体的有氧氧化作用 而饲料中添加 在一定程度上可以防止丙酮酸的过度堆积 饲料中添加 能提高高密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇的含量 这可能是因为 参与磷酸戊糖途径为脂肪酸的合成提供烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 " 饲料中添加 利于脂肪酸的合成 进而促进脂类物质的合成 除了在三羧酸循环中促进 酮酸 如丙酮酸和 酮戊二酸 的氧化脱羧外 还作为转酮醇酶辅酶参与磷酸戊糖途径 研究表明 饲料 "# 中添加一定量 能显著提高大菱鲆血淋巴! 的转酮醇酶活性 +3 1 等对虹鳟的研究也发现 饲料中添加 能显著提高虹鳟红细胞的转酮醇酶活性 而对肝脏的转酮醇酶活性无显 "& 著变化 3 / 等研究表明 随着饲料 含量增加 斜带石斑鱼肝脏转酮醇酶活性不断提高 本实验研究发现 饲料中添加 可以提高吉富 & 罗非鱼肝脏转酮醇酶活性和肝脏转酮醇酶基因的表达量 随着饲料 含量的增加 肝脏转酮醇酶基因表达量与肝脏转酮醇酶活性呈先增大后稳 # 定的趋势 :*3 等研究发现 转酮醇酶蛋白合成速率及 含量减少导致转酮醇酶蛋白含量减少 进而导致转酮醇酶活性降低 以上报道表明 饲料中 在肝脏中磷酸化后 一定程度上通过影响肝脏转酮醇酶基因的表达来影响肝脏转酮醇酶活性 进而影响磷酸戊糖途径 $ 小结 随着饲料 含量增加 吉富罗非鱼增重率 特定生长率 肝脏 含量先增加后稳定 而饲料效率 肝脏转酮醇酶活性及肝脏转酮醇酶基因表达量显著增加 血清丙酮酸显著降低 以增重率和肝脏 蓄累量为评价指标 吉富罗非鱼 & # 对饲料!& #5 参考文献 需要量分别为 ""& 和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
7 期任 $ 春 等 吉富罗非鱼对饲料中维生素 2 " 的需要量 $$ ##!*73!* */1+ %*)( %!6 1 /+ 1 6! 3+! 81: +1 *+ 3!/ % :*$ / &* / / 6*! ! & */&*!!" +3 " ' % "! 仲维仁 张淑华 鲈鱼不同生长阶段对维生素需求的研究 浙江海洋学院学报 自然科学版!!" 增 " ' %"! ' $! 1 /!, 1 / )(:*1: / *% & */&. + /+ /!*73!* */1 %! /0 8 1! 31 ' &:! + / +: :.+. / 2 &:* +1!."'&" %"! $ : " *1!.. ' / + 1 % & & / 1: /*!*73!* */1 %!! ++ &! $ ( % / *! / " )3: / 3 ;: /! &313! / 6*!+ 1.!! 赵智勇 草鱼鱼种对肌醇 叶酸和维生素 2 " 营养需要量的研究 武汉 华中农业大学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黄慧华 硫胺素对幼建鲤生长性能 消化吸收功能和免疫功能的影响 雅安 四川农业大学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张婧 熊正英 维生素 2 " 缺乏对运动能力的影响 安康师专学报!! "# & % ' $ / 4(: / * *! *!!*+*/1,/ 8* * / 31! 1 /) +: / 1 / " /1*!/ 1 / %* & */&*+ /+1 131*!*++ "& "& %"&& #$ :*3, / + / " */*4 * /!* 3&1 /+ % 1! /+5*1 +* / 1: /*' *% & */1! 10! / 3!/ %*3! &:* +1!. "&& &' %&"
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