检验科生化室简介

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女殊雷
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1 临床检验通讯 2015 年第 1 期 2015 年 05 月 15 日主编 : 陈葳副主编 : 雷金娥喜讯检验科顺利通过中国合格评定国家认可委员会 ISO15189 评审并获得认可证书 2014 年 12 月日, 中国合格评定国家认可委员会 (CNAS) 指派专家组按照 CNAS-CL02 医学实验室质量和能力认可准则等相关要求对我院检验科质量与能力进行现场评审经过评审专家的现场检查, 专家们一致认为, 检验科质量管理体系技术能力等基本符合 ISO15189 的相关要求, 现场评审通过经过检验科全体员工三个月的共同努力完成整改任务, 于 2015 年 5 月 11 日顺利通过 CNAS 的评定并颁发认可证书 CNAS-CL02 医学实验室质量和能力认可准则规定了对医学实验室质量和能力进行认可的专用要求, 包含了医学实验室为证明其按质量体系运行具有技术能力并能提供正确的技术结果所必须满足的要求 CNAS 与国际认可论坛 (IAF) 国际实验室认可合作组织 (ILAC), 太平洋认可合作组织 (PAC) 亚太实验室认可合作组织 (APLAC) 等多个认可组织签订了相互承认协议, 故通过 CNAS 1 认可的医学实验室其质量和技术能力将被签署了该协议的全球大部分发达国家和地区所认可专题介绍流式细胞术的临床应用流式细胞术 (Flow Cytometry, 简称 FCM) 是一种快速准确客观, 同时检测单个微粒 ( 通常是细胞 ) 的多项特性并加以定量的技术通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测, 得到该细胞的光散射和荧光指标, 分析出其体积内部结构 DNA RNA 蛋白质抗原等物理及化学特征 FCM 综合了光学电子学流体力学细胞化学生物学免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术, 具有检测速度快测量指标多采集数据量大分析全面方法灵活等特点, 已从科研实验室进入临床实验室, 成为常规实验诊断的重要手段, 不仅为临床提供了重要的诊断依据, 也使临床实验室的诊断水平实验技术提高到一个新的高度流式技术目前可为临床提供临床诊断性指标和监测性指标, 用于临床疾病的诊断病程监测预后判断一诊断性指标

2 流式细胞术提供的临床诊断性指标主要有 : 1. 免疫表型分型 : 免疫表型分型主要是用来诊断和监测白血病和淋巴瘤常见表型及临床意义 (1) ALL 免疫分型 ALL 亚型常见表型 B- 祖细胞 HLA-DR,CD19,CD20-/+,CD24,CD10,CD34,TdT,cCD ALL 22,cCD79 前 B ALL HLA-DR,CD19,CD20-/+,CD24,CD9,CD10,CD34-,Td T+/- cigm,ccd22,ccd79 B-ALL HLA-DR,CD19,CD20,CD22,CD24,CD10-/+, CD34-, TdT-,sIg T-ALL HLA-DR-/+,CD1,CD2,cCD3,CD5,CD7,CD4+/CD8+,C D10-/+,CD34-/+,TdT, (2) AML 免疫表型 AML 亚型常见表型 M0 MPO,HLA-DR,CD13,CD33,CD34, CD7-/+,TdT-/+ 原始细胞 >90% M1 除 CD15-/+ 类似 M0 原始细胞 >90% M2 MPO,HLA-DR,CD13,CD33, 较 M1CD34 CD15 原始细胞 <90% M3 MPO,HLA-DR(-),CD13,CD33, CD15,CD34-/+, 偶有 CD2 M4,M5 MPO,HLA-DR,CD15,CD14+/-, CD34/+, CD33>CD13,CD4 弱,CD64 如 CD2(+) 应考虑 M4E0 M6 MPO,HLA-DR,CD13+/-,CD33+/-CD34, CD45 弱成熟者表达 GPA M7 MPO,HLA-DR-/+,CD33+/- CD34, CD41, CD61 AML 中,M0 M6 M7 可以通过免疫分型确诊 (3) B 细胞增殖疾病免疫表型常见表型 B-CLL HLA-DR,CD19,CD20,CD5,CD23-/+,CD22TdT-/+, CD10(-),CD11c(-/+),CD79, CD103,CD25, 原始细胞 >90% HLA-DR, CD19,CD20,CD5(-),CD23-/+,CD22, TdT-/+, B-PDL CD103,CD25 HLA-DR,CD19,CD20,CD5(-),CD23-/+,CD22,TdT-/+, HCL CD103,CD25 2. CD55 CD59 和 FLAER, 主要用来诊断和鉴别 2 诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿阵发性睡眠性血红蛋白尿 (PNH) 是一种后天获得性干细胞克隆性疾病, 由于红细胞膜缺陷而引起的溶血病临床上以间歇发作的睡眠后血红蛋白尿为特征由于 GPI 锚磷脂缺乏,CD55 和 CD59 等补体调节蛋白不能连接于细胞膜, 使红细胞对补体的敏感性增加, 发生血管内溶血外周血中红细胞和中性粒细胞膜 CD55 和 CD59 表达下降 CD55 更适合粒细胞 PNH 克隆的鉴定,CD59 适合红细胞 PNH 克隆的鉴定同红细胞相比 PNH 粒细胞生存期限正常, 更能精确反应 PNH 克隆大小, 并不受输血影响气单胞菌溶素 (aerolysin or FLAER) 是一个与荧光素鳌合形成的无活性的细菌蛋白变种衍生物, 来自于通道形成蛋白气单胞菌溶素 (aerolysin), 与其它试剂相比, 在检测 PNH 克隆细胞上,FLAER 的灵敏度很高, 它还可以与其它抗体共同使用, 检测 PNH 克隆细胞的 GPI 相关锚蛋白和非 GPI 相关锚蛋白 3. HLA-B27 的检测, 主要用来鉴别诊断强直性脊柱炎 HLA-B27 是 MHC I 类抗原, 在有核细胞上广泛表达 HLA-B27 的表达与强直性脊柱炎高度相关, 在其它血清阴性骨关节病也有明显表达, 如 : Reiter s 综和症银屑病性关节炎葡萄膜炎等使用流式细胞仪, 可以快速灵敏准确地分析 HLA-B27; 目前临床 HLA-B27 的检测, 国际免疫学会推荐的方法是流式细胞仪检测法 4. 肺泡灌洗液 (BALF)T 细胞亚群的检测, 可以用于诊断结节病和特发性肺间质纤维化, 并与其它疾病进行鉴别

3 肺泡灌洗液 (BALF)T 细胞亚群的检测用来诊断和鉴别诊断结节病和特发性肺间质纤维化 (IPF) 在结节病时,T4 细胞计数明显增高,T4/T8 比值也明显增高在 IPF 时,T8 细胞明显增多, T4/T8 的比值明显降低这种明显的特征只局限于这些疾病的灌洗液, 外周血变化不如 BALF 明显, 主要是因为这两种疾病在肺局部的表现较突出可以用来标记的分化抗原包括 T3 细胞 T4 细胞 T8 细胞, 用流式细胞术来检测淋巴细胞亚群要比传统的免疫组化的方法准确快速, 而且可以同时进行多参数的分析二监测性指标重要的监测指标包括外周血淋巴细胞亚群的计数和干细胞 CD34 的计数临床常用的参数是 T 淋巴细胞异常提示 : T3 T4 T8 B 细胞和 NK 细胞这五个项目近年来, 对于调节性 T 细胞对肿瘤免疫逃逸的监测也逐渐的被用在临床上 T 淋巴细胞 (CD3+): 可以直接杀伤靶细胞, 辅助或抑制 B 细胞产生抗体, 抵御疾病感染肿瘤 B 淋巴细胞 (CD19+): 是体内专职产生抗体执行体液免疫功能, 以清除游离感染病原微生物 NK 细胞 (CD3- CD16+56+): 体内的非特异性免疫细胞, 行使免疫监控功能, 能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用 NK 细胞在第一时间参与感染免疫应答, 清除外来病原体 3

4 中晚期伴转移的肿瘤, 免疫缺陷病及使用免疫抑制剂等 2. NK 细胞数量是肿瘤临床病情判断疗效监测的指标 NK 细胞异常在病毒感染时异尤其突出参测定淋巴细胞亚群可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病, 进行临床干预, 进行免疫调节如 : 1. 器官移植受者口服免疫抑制剂类药物, 因此需要经常性监测受者的免疫功能, 当受者 CD4+/CD8+ 细胞比值小于 0.2 的情况时, 必须立即停用免疫抑制药, 等待免疫功能的适当恢复 2. 当机体免疫力低下细胞免疫功能受抑制时 ( 如 CD3+ CD4+ CD4+/CD8+ ), 适用免疫增强剂, 以提高免疫功能 ; 3. 当机体免疫反应过强 ( 如 CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ ), 适用免疫抑制剂, 抑制机体免疫反应 B 细胞 (CD3-CD19+) 1. 减少 : 见于原发及继发性免疫功能低下, 临床可出现反复发作的呼吸道及消化道感染 ; 还可见于临床严重病毒感染使用免疫抑制药等情况 2. 增加 : 提示机体体液免疫功能被增强, 此时体内高亲和力抗体的产生也增加, 见于临床各种细菌性感染 ; 也见于 B 细胞白血病淋巴瘤 NK 细胞 (CD16+56+) 1. 增加 : 某些病毒感染早期长期使用干扰素及其干扰的诱导物, 骨髓移植后习惯性流产 ; 减少 : 病毒感染 ( 萨科奇病毒脑心肌炎病毒流感病毒 EB 病毒等 ) 恶性肿瘤形成恶化复发, 特别是与 Ⅱ 型超敏反应和移植物抗宿主反应,IL-2 治疗后外周血 NK 细胞数量增加除了淋巴细胞亚群的检测指标之外, 还可以通过流式细胞术来检测 CD34, 可以通过 CD34 的计数评估造血干细胞是否移植成功, 精确计数造血干 / 祖细胞是移植能否成功的关键正常人外周血 CD34 只有 0.1%~0.3%, 非常少 ; 骨髓中 CD34 是外周血的 10 倍左右, 也就是 1%~3% 动员后外周血的 CD34 明显升高, 会升高 10 倍左右, 通常高于 1% 细菌耐药监测一细菌分布 2015 年第 1 季度我院共送检份标本, 分离出非重复病原菌 1274 株, 分离率 10.90%, 其中肠杆菌科细菌 482 株, 占 %, 非发酵菌 202 株, 占 15.85%, 葡萄球菌属 180 株, 占 %, 肠球菌属 171 株, 占 %, 念珠菌 62 株, 占 4.87 % 其中位于前十位的细菌为大肠埃希菌鲍曼不动杆菌金黄色葡萄球菌屎肠球菌肺炎克雷伯菌肺炎亚种铜绿假单胞菌白色念珠菌表皮葡萄球菌粪肠球菌阴沟肠杆菌二耐药性分析肠杆菌科细菌中, 大肠埃希菌 ESBLs 检出率 64%, 比起去年全年有所下降肺炎克雷伯菌 ESBLs 检出率 42.5%, 相比去年全年也有所下降葡萄球菌中金黄色葡萄球菌 MRSA 检出率为 4

5 44.1%, 比起去年全年略有上升, 应引起临床足够的重视表皮葡萄球菌 MRS 的检出率为 59.6% 铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为 23.3%, 比去年全年有下降趋势非发酵菌中, 耐碳氢酶烯类药物的鲍曼不动杆菌 ( 即 CR-AB) 的检出率高达 92%, 比起去年全年 85.6% 的检出率又有了上升, 这也是我院细菌耐药监测中最为突出和严重的问题, 希望引起相关临床科室的高度重视 5

6 责任编辑 : 曾晓艳杨玉琮马晨 6

北京市2011年1-2月份细菌耐药监测结果

北京市2011年1-2月份细菌耐药监测结果卫生部全国细菌耐药监测网 2010 细菌耐药监测结果 ( 基础网 ) 吕媛北京大学临床药理研究所卫生部全国细菌耐药监测网监测网简介成立于 2005 年直接行政管理单位 : 卫生部医政司成立背景国家性质的细菌耐药监测网络细菌耐药抗菌药物管理制定规范技术支持体系 2 监测医院选择临床药理研究所基本覆盖全国各地 ; 三级医院为主成人综合医院为主, 兼顾儿童医院专科医院 ;