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1 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 BD 生 物 科 学 部 安 妮

2 主 要 内 容 1 流 式 细 胞 术 概 述 2 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 免 疫 应 用 血 液 应 用 肿 瘤 应 用

3 流 式 细 胞 技 术 是 什 么 Flow Cytometry Flow:Fluid Cyto:Cell Metry:Measurement 流 式 细 胞 术 -- 在 流 动 状 态 中 检 测 细 胞 或 颗 粒 的 各 项 特 性 ; -- 特 异 性 强 灵 敏 度 高 速 度 快 并 能 实 现 多 参 数 分 析 ; -- 可 检 测 的 样 本 种 类 多 样 : 各 种 细 胞 ( 如 外 周 血, 骨 髓, 细 针 穿 刺, 灌 洗 液, 实 体 组 织, 悬 浮 或 贴 壁 培 养 的 细 胞 ), 微 生 物, 人 工 合 成 微 球 等 ; 血 清 血 浆 培 养 上 清 细 胞 裂 解 液

4 流 式 细 胞 仪 的 组 成 液 流 系 统 : 形 成 层 流 系 统, 聚 焦 细 胞 光 学 系 统 : 产 生 和 收 集 光 学 信 号 电 子 系 统 : 光 信 号 转 化 为 电 信 号, 尽 心 信 号 处 理

5 流 式 原 理 - 信 号 : 大 小, 颗 粒 度

6 流 式 细 胞 术 的 检 测 范 围 细 胞 结 构 细 胞 大 小 细 胞 颗 粒 度 细 胞 表 面 积 核 浆 比 例 DNA 含 量 与 细 胞 周 期 RNA 含 量 蛋 白 质 含 量 细 胞 功 能 细 胞 表 面 / 胞 浆 / 核 的 特 异 性 抗 原 细 胞 活 性 细 胞 内 / 外 的 细 胞 因 子 激 素 结 合 位 点 细 胞 受 体 蛋 白 磷 酸 化 ph 值 钙 离 子 浓 度 细 胞 膜 电 位 线 粒 体 膜 电 位

7 流 式 细 胞 术 临 床 应 用 免 疫 淋 巴 细 胞 亚 群 分 析 HIV 免 疫 分 型, CD4 绝 对 计 数 骨 髓 等 移 植 的 免 疫 状 态 监 测 造 血 干 细 胞 计 数 HLA-B27 检 测 血 液 白 血 病 的 免 疫 分 型 微 小 残 留 检 测 网 织 红 细 胞 计 数 阵 发 性 血 红 蛋 白 尿 (PNH) 血 小 板 功 能 及 相 关 疾 病 肿 瘤 肿 瘤 的 细 胞 周 期 和 倍 体 分 析 肿 瘤 相 关 基 因 表 达 的 研 究

8 主 要 内 容 1 流 式 细 胞 术 概 述 2 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 免 疫 应 用 血 液 应 用 肿 瘤 应 用

9 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 免 疫 学

10 流 式 细 胞 术 的 应 用 ( 免 疫 ) 淋 巴 细 胞 免 疫 分 型 淋 巴 细 胞 亚 群 分 析 CD4 绝 对 计 数 HIV 的 诊 断 与 监 测 淋 巴 细 胞 CD4/CD8 分 析 CD4 绝 对 计 数 T 细 胞 活 化 骨 髓 移 植 免 疫 状 态 监 测 免 疫 功 能 和 免 疫 调 控 的 研 究 淋 巴 细 胞 和 单 核 细 胞 的 活 化 细 胞 因 子 的 研 究 淋 巴 细 胞 的 增 殖 树 突 状 细 胞 的 研 (DC) HLA-B27 检 测 CD64 感 染 免 疫 CD38 病 毒 感 染

11 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 1 免 疫 系 统 概 述 2 淋 巴 细 胞 亚 群 应 用 a. 淋 巴 细 胞 亚 群 概 述 b. 淋 巴 细 胞 亚 群 的 临 床 应 用 3 流 式 感 染 应 用 细 菌 感 染 --CD64 4 HLA-B27 应 用

12 免 疫 系 统 三 大 功 能 的 病 理 和 生 理 表 现 功 能 生 理 性 反 应 ( 有 利 ) 病 理 性 反 应 ( 有 害 ) 免 疫 防 御 清 除 病 原 微 生 物 及 其 他 有 害 抗 原 超 敏 反 应 ( 过 度 ) 免 疫 缺 陷 病 ( 不 足 ) 免 疫 自 稳 清 除 损 伤 或 衰 老 的 细 胞 自 身 免 疫 病 免 疫 网 络 调 节 免 疫 应 答 免 疫 监 视 清 除 恶 变 或 畸 变 的 恶 性 细 胞 肿 瘤 发 生 持 续 性 病 毒 感 染

13 体 液 免 疫 与 细 胞 免 疫 的 联 系 通 过 体 液 免 疫 将 其 清 除 体 液 免 疫 细 菌 病 毒 机 体 清 除 细 胞 外 抗 原 及 有 毒 物 质 T cell 不 能 识 别 病 原 体 侵 入 宿 主 细 胞 细 胞 表 面 表 达 抗 原 并 与 受 体 结 合 细 胞 免 疫 T cell 识 别 靶 细 胞 裂 解, 暴 露 病 原 体 清 除 病 原 体

14 体 液 免 疫 和 细 胞 免 疫 的 区 别 作 用 对 象 体 液 免 疫 : 游 离 在 寄 主 细 胞 外 的 抗 原 及 其 产 生 的 有 毒 物 质 ; 细 胞 免 疫 : 摧 毁 侵 入 到 寄 主 细 胞 内 的 病 毒 胞 内 寄 生 菌 或 外 来 的 组 织 团 块 癌 变 的 细 胞 等 作 用 方 式 体 液 免 疫 : 通 过 效 应 B 细 胞 ( 浆 细 胞 ) 分 泌 抗 体, 并 与 抗 原 发 生 特 异 性 结 合 来 清 除 抗 原 ; 细 胞 免 疫 : 通 过 效 应 T 细 胞 ( 杀 伤 T 细 胞 ) 分 泌 穿 孔 素 使 靶 细 胞 溶 解 死 亡

15 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 1 免 疫 系 统 概 述 2 淋 巴 细 胞 亚 群 应 用 a. 淋 巴 细 胞 亚 群 概 述 b. 淋 巴 细 胞 亚 群 的 临 床 应 用 3 流 式 感 染 应 用 细 菌 感 染 --CD64 4 HLA-B27 应 用

16 淋 巴 细 胞 亚 群 分 类 T 淋 巴 细 胞 (CD3+): 可 以 直 接 杀 伤 靶 细 胞, 辅 助 或 抑 制 B 细 胞 产 生 抗 体, 抵 御 疾 病 感 染 肿 瘤 B 淋 巴 细 胞 (CD19+): 是 体 内 专 职 产 生 抗 体 执 行 体 液 免 疫 功 能 以 清 除 游 离 感 染 病 原 微 生 物 的 淋 巴 细 胞 总 T 和 总 B 可 以 用 来 判 断 某 些 免 疫 缺 陷 和 自 身 免 疫 性 疾 病 NK 细 胞 (CD3-CD16+56+): 体 内 的 非 特 异 性 免 疫 细 胞, 行 使 免 疫 监 控 功 能, 能 够 介 导 对 某 些 肿 瘤 细 胞 和 病 毒 感 染 细 胞 的 细 胞 毒 性 作 用 NK 细 胞 在 第 一 时 间 参 与 感 染 免 疫 应 答, 清 除 外 来 病 原 体

17 淋 巴 细 胞 亚 群 辅 助 性 / 诱 导 性 T 细 胞 Th/Ti 淋 巴 细 胞 T 淋 巴 细 胞 (CD3+) B 淋 巴 细 胞 (CD3-/CD19+) (CD3+/CD4+) 抑 制 性 / 杀 伤 性 T 细 胞 Ts/Tc (CD3+/CD8+) 外 周 血 标 本 红 细 胞 裂 解 液 处 理 后 单 核 细 胞 NK 细 胞 (CD3-/CD16+56+) 粒 细 胞 17

18 淋 巴 细 胞 亚 群 辅 助 性 / 诱 导 性 T 细 胞 Th/Ti (CD3+/CD4+) 抑 制 性 / 细 胞 毒 性 T 细 胞 Ts/Tc (CD3+/CD8+) CD29 CD28 辅 助 性 T 细 胞 (CD3+/CD4+/CD29+) 诱 导 性 T 细 胞 (CD3+/CD4+/CD29-) 细 胞 毒 性 T 细 胞 (CD3+/CD8+/CD28+) 抑 制 性 T 细 胞 (CD3+/CD8+/CD28-) 各 类 免 疫 细 胞 的 功 能 分 析 18

19 检 验 单 内 容 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD19+ CD16+56+

20 CD3+: 成 熟 T 淋 巴 细 胞, 表 示 人 体 细 胞 免 疫 功 能 状 态 趋 势 病 征 增 高 可 发 生 超 敏 反 应 降 低 细 胞 免 疫 功 能 减 弱, 机 体 易 感 染 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 - C D 3 + 再 生 障 碍 性 贫 血 恶 性 胸 腔 积 液 变 应 性 鼻 炎 等 病 毒 性 感 染 恶 性 肿 瘤 心 脑 血 管 疾 病 口 腔 溃 疡 等

21 CD4+: 诱 导 性 / 辅 助 性 T 细 胞 (Ti/Th), 调 控 免 疫 反 应 最 重 要 枢 纽 细 胞 趋 势 病 征 增 高 细 菌 感 染 超 敏 反 应 自 身 免 疫 性 疾 病 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 降 低 免 疫 功 能 低 下, 易 引 发 感 染 - C D 4 + 花 粉 症 支 气 管 哮 喘 器 官 移 植 排 斥 甲 状 腺 功 能 亢 进 接 触 性 皮 炎 等 恶 性 肿 瘤 病 毒 性 感 染 免 疫 缺 陷 艾 滋 病 等

22 CD8+: 抑 制 性 / 细 胞 毒 性 T 细 胞 (Ts/Tc), 免 疫 反 应 中 直 接 杀 伤 性 细 胞 趋 势 病 征 增 高 导 致 严 重 免 疫 缺 陷, 免 疫 抑 制 降 低 发 生 过 强 免 疫 反 应 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 - C D 8 + 自 身 免 疫 性 疾 病, 如 慢 活 肝 肿 瘤 慢 性 胃 炎 部 分 病 毒 感 染 变 应 性 鼻 炎 干 燥 症 重 症 肌 无 力 等 γ- 免 疫 球 蛋 白 缺 乏 症 胸 腺 发 育 不 良 严 重 联 合 免 疫 缺 陷 病 糖 尿 病 等

23 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 CD4+/CD8+: 判 断 人 体 免 疫 功 能 紊 乱 的 临 床 诊 断 敏 感 指 标 趋 势 病 征 增 高 细 胞 免 疫 功 能 处 于 过 度 活 跃 状 态 降 低 属 免 疫 抑 制 状 态, 常 见 于 免 疫 缺 陷 病 - C D 4 + / C D 8 + 器 官 移 植 排 斥 反 应 自 身 免 疫 性 疾 病 (> 2.0 ), 如 类 风 湿 关 节 炎 1 型 糖 尿 病 高 血 压 等 恶 性 肿 瘤 某 些 白 血 病 呼 吸 道 感 染 艾 滋 病 (<0.5) 等

24 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 - C D 4 + / C D 8 + 器 官 移 植 在 器 官 移 植 受 者 没 有 功 能 监 测 个 体 化 免 疫 治 疗 疗 效 判 断 中 具 有 重 要 意 义 器 官 移 植 受 者 口 服 免 疫 抑 制 剂 类 药 物, 因 此 需 要 经 常 性 监 测 受 者 的 免 疫 功 能, 当 受 者 CD4+/CD8+ 细 胞 比 值 小 于 0.2 的 情 况 时, 必 须 立 即 停 用 免 疫 抑 制 药, 等 待 免 疫 功 能 的 适 当 恢 复

25 干 预 手 段 免 疫 调 节 当 机 体 免 疫 力 低 下 细 胞 免 疫 功 能 受 抑 制 时 ( 如 CD3+ CD4+ CD4+/CD8+ ), 适 用 免 疫 增 强 剂, 以 提 高 免 疫 功 能 ; 当 机 体 免 疫 反 应 过 强 ( 如 CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ ), 适 用 免 疫 抑 制 剂, 抑 制 机 体 免 疫 反 应

26 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 B 细 胞 (CD3-CD19+) - B C e l l 1 减 少 : 见 于 原 发 及 继 发 性 免 疫 功 能 低 下, 临 床 可 出 现 反 复 发 作 的 呼 吸 道 及 消 化 道 感 染 ; 还 可 见 于 临 床 严 重 病 毒 感 染 使 用 免 疫 抑 制 药 等 情 况 2 增 高 : 提 示 机 体 体 液 免 疫 功 能 被 增 强, 此 时 体 内 高 亲 和 力 抗 体 的 产 生 也 增 加, 见 于 临 床 各 种 细 菌 性 感 染 ; 也 见 于 B 细 胞 白 血 病 淋 巴 瘤

27 不 同 抗 原 表 达 的 意 义 - NK C e l l NK 细 胞 CD 增 高 : 某 些 病 毒 感 染 早 期 长 期 使 用 干 扰 素 及 其 干 扰 的 诱 导 物, 骨 髓 移 植 后 习 惯 性 流 产 ; 减 少 : 病 毒 感 染 ( 萨 科 奇 病 毒 脑 心 肌 炎 病 毒 流 感 病 毒 EB 病 毒 等 ) 恶 性 肿 瘤 形 成 恶 化 复 发, 特 别 是 中 晚 期 伴 转 移 的 肿 瘤, 免 疫 缺 陷 病 及 使 用 免 疫 抑 制 剂 等 2. NK 细 胞 数 量 是 肿 瘤 临 床 病 情 判 断 疗 效 监 测 的 指 标 NK 细 胞 异 常 在 病 毒 感 染 时 异 尤 其 突 出 参 与 Ⅱ 型 超 敏 反 应 和 移 植 物 抗 宿 主 反 应,IL-2 治 疗 后 外 周 血 NK 细 胞 数 量

28 淋 巴 细 胞 亚 群 在 肿 瘤 诊 疗 中 的 应 用 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) 临 床 意 义 CD3+ CD4+ CD8+ CD CD4+ CD25+ CD8+ CD28- CD4+ CD3+ CD4+/CD8+ Th1 Th2 CD45RO+ HLA-DR+ 肿 瘤 进 展 预 后 不 良 复 发 转 移 有 效 手 术 有 效 化 疗 生 活 质 量 差

29 淋 巴 细 胞 亚 群 在 自 身 免 疫 性 疾 病 中 的 应 用 疾 病 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ SLE 类 风 湿 性 关 节 炎 自 身 免 疫 性 溶 血 性 贫 血 重 症 肌 无 力 免 疫 缺 陷 病

30 淋 巴 细 胞 亚 群 在 成 人 呼 吸 疾 病 中 的 应 用 疾 病 CD3+ SARS 老 年 医 院 获 得 性 肺 炎 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ 重 症 肺 炎 慢 性 阻 塞 性 肺 病 哮 喘 急 性 发 作 期 哮 喘 缓 解 期 矽 肺 肺 结 核

31 T 淋 巴 细 胞 亚 群 在 BALF 的 不 同 表 现 疾 病 FCM 指 标 ( 肺 泡 灌 洗 液 BALF) CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ 结 节 病 特 发 性 肺 间 质 纤 维 化 (IPF) 肺 部 肿 瘤 肺 结 核

32 淋 巴 细 胞 亚 群 在 儿 科 中 的 应 用 疾 病 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ 儿 童 反 复 呼 吸 道 感 染 儿 童 肺 炎 支 原 体 肺 炎 儿 童 呼 吸 道 合 胞 病 毒 肺 炎 儿 童 非 呼 吸 道 合 胞 病 毒 肺 炎 Th1 儿 童 病 毒 性 肺 炎 Th1 SARS

33 淋 巴 细 胞 亚 群 在 消 化 系 统 疾 病 中 的 应 用 疾 病 CD3+ FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ 胃 炎 合 并 十 二 指 肠 溃 疡 胃 炎 ( 浅 表 萎 缩 肥 厚 ) 大 肠 癌 胆 管 癌 胃 癌 食 管 癌 直 肠 癌 疣 状 胃 炎 轮 状 病 毒 肠 炎 溃 疡 性 结 肠 炎

34 淋 巴 细 胞 亚 群 在 泌 尿 系 统 疾 病 中 的 应 用 疾 病 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ 泌 尿 系 统 感 染 前 列 腺 炎 慢 性 肾 小 球 肾 炎 肾 病 综 合 症 出 血 性 肾 病 综 合 症 膜 性 肾 小 球 肾 炎

35 淋 巴 细 胞 亚 群 在 内 分 泌 系 统 疾 病 中 的 应 用 疾 病 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ Grave 病 甲 亢 甲 减 糖 尿 病

36 淋 巴 细 胞 亚 群 在 皮 肤 疾 病 中 的 应 用 -1 疾 病 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ 遗 传 过 敏 性 皮 炎 白 癜 风 寻 常 型 进 展 期 麻 风 尖 锐 湿 疣 玫 瑰 糠 疹 白 塞 病 扁 平 苔 藓 带 状 疱 疹 荨 麻 疹

37 淋 巴 细 胞 亚 群 在 皮 肤 疾 病 中 的 应 用 -2 疾 病 FCM 指 标 ( 外 周 血 ) CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ CD CD4+/CD8+ 过 敏 性 紫 癜 湿 疹 活 动 期 SLE 生 殖 器 疱 疹 复 发 蕈 样 肉 芽 肿 寻 常 性 进 行 期 银 屑 病 IgM 阳 性 梅 毒 IgM 阴 性 梅 毒

38 AIDS 病 人 T 亚 群 分 析

39 T Cell 与 呼 吸 系 统 疾 病 感 染 因 素 对 T 细 胞 活 化 障 碍, 机 体 的 细 胞 免 疫 功 能 具 有 抑 制 作 用, 导 致 机 体 免 疫 力 下 降 重 症 肺 炎 患 者 T 淋 巴 细 胞 因 大 量 凋 亡 而 总 数 降 低, 亚 群 的 变 化 又 造 成 免 疫 功 能 的 紊 乱 支 气 管 哮 喘 是 以 嗜 酸 粒 细 胞,T 细 胞 等 多 种 炎 症 细 胞 在 气 道 中 浸 润 为 特 征 的 疾 病 哮 喘 患 者 气 道 炎 症 的 支 气 管 粘 膜 活 检 标 本 及 BALF 中 T 细 胞 明 显 增 加, 并 以 活 化 T 细 胞 为 主,T 细 胞 数 量 活 化 程 度 与 气 道 高 反 应 性 呈 正 相 关

40 呼 吸 道 合 胞 病 毒 ( RSV) 肺 炎 肺 炎 链 球 菌 (SP) 肺 炎 RSV 肺 炎 患 儿 外 周 血 CD3+ CD4+ CD8+ CD19+ 细 胞 百 分 比 与 对 照 组 相 仿 ; 但 CD4+/CD8+ 和 NK 细 胞 比 对 照 组 低 SP 肺 炎 患 儿 外 周 血 T 细 胞 亚 群 以 及 CD4+/CD8+ 比 值 与 对 照 组 相 仿 ; 但 CD19+B 细 胞 较 正 常 组 为 高, 而 NK 细 胞 比 对 照 组 为 低 两 感 染 组 比 较,RSV 组 CD4+ T 淋 巴 细 胞 升 高 ; 而 SP 组 B 淋 巴 细 胞 升 高

41 呼 吸 道 合 胞 病 毒 ( RSV) 肺 炎 结 论 : 肺 炎 链 球 菌 (SP) 肺 炎 1 RSV 感 染 后 刺 激 机 体 产 生 细 胞 免 疫 为 主 的 反 应 ; 2 SP 感 染 后 则 产 生 体 液 免 疫 为 主 的 反 应 3 NK 细 胞 低 下 的 RSV 肺 炎 患 儿 病 情 较 重 且 病 程 长 迁 延 不 愈, 且 存 在 更 为 严 重 的 变 态 反 应,NK 细 胞 对 该 疾 病 的 病 情 及 病 程 有 一 定 的 预 测 作 用, 在 抗 感 染 的 同 时 应 加 用 抗 变 态 反 应 药 物

42 肺 炎 支 原 体 肺 炎 (MPP) 治 疗 MPP 患 儿 存 在 免 疫 失 衡 和 紊 乱 情 况, 是 MP 患 儿 病 情 严 重 或 反 复 的 重 要 原 因 MPP 感 染 后 在 大 环 内 酯 类 抗 生 素 应 用 的 同 时, 应 适 当 加 用 免 疫 调 节 剂, 有 益 于 缩 短 病 程, 在 合 并 有 肺 外 并 发 症 时 可 改 善 患 者 预 后

43 MPP 治 疗 对 比 MPP 患 儿 : 治 疗 前 :CD3+ CD4+ CD4+/CD8+,CD8+ 治 疗 后 :CD3+ CD4+ CD4+/CD8+,CD8+ MPP 脾 氨 肽 治 疗 组 症 状 体 征 较 MPP 对 照 组 恢 复 快 结 论 :MPP 患 儿 细 胞 免 疫 功 能 受 到 抑 制, 脾 氨 肽 可 提 高 机 体 细 胞 免 疫 功 能, 对 MPP 有 较 好 的 辅 助 治 疗 作 用

44 银 屑 病 银 屑 病 是 一 种 T 细 胞 介 导 的 自 身 免 疫 性 皮 肤 病, 以 细 胞 抑 制 为 主 进 展 期 :CD4+T 细 胞 明 显 CD8+T 细 胞 明 显, CD4+/CD8+ 的 值 明 显 静 止 期 : 患 者 与 正 常 人 比 较 上 述 指 标 差 异 均 无 显 著 性 银 屑 病 经 过 治 疗 或 者 未 经 治 疗 的 患 者 通 过 自 身 细 胞 免 疫 调 节 病 情 趋 于 稳 定 时 细 胞 免 疫 功 能 也 趋 于 好 转, 处 于 亚 正 常 状 态

45 传 染 病 应 用 传 染 性 单 核 细 胞 增 多 症 巨 细 胞 病 毒 感 染 流 行 性 出 血 热 麻 疹 急 性 期 水 痘 猩 红 热 上 呼 吸 道 感 染 寄 生 虫 病 CD4,CD8, CD4 /CD8 CD4/CD8 比 值 的 倒 置 被 认 为 是 病 毒 感 染 性 疾 病 的 重 要 指 征 医 学 综 述 2000 年 第 6 卷 第 7 期

46 肾 移 植 免 疫 监 测 急 性 排 斥 反 应 是 移 植 肾 存 活 的 一 大 障 碍 动 态 观 察 受 者 T 淋 巴 细 胞 亚 群, 对 判 断 急 性 排 斥 反 应 和 估 计 移 植 肾 后 感 染 等 预 后 有 很 大 意 义 当 临 床 出 现 排 斥 时,CD4+/CD8+ 由 低 值 回 升, 并 且 大 部 分 >1.2, 因 此 我 们 认 为 当 比 值 >1.2 时 应 当 考 虑 排 斥, 当 比 值 <0.2 时, 应 及 时 停 用 免 疫 抑 制 剂 但 对 一 部 分 在 应 用 CsA 治 疗 后 比 值 较 低 的 患 者, 当 比 值 上 升 幅 度 超 过 0.4 时, 也 应 结 合 临 床 考 虑 排 斥 丁 言 德 等,T 淋 巴 细 胞 亚 群 变 化 在 肾 移 植 受 者 中 免 疫 预 示 作 用 的 探 讨, 临 床 泌 尿 外 科 杂 志,1995,10(1)

47 急 性 脑 梗 死 发 病 风 险 预 测 急 性 脑 梗 死 患 者 其 外 周 细 胞 免 疫 处 于 抑 制 状 态, 卒 中 诱 导 的 免 疫 抑 制 使 得 机 体 清 除 病 原 体 的 能 力 减 弱, 即 使 是 通 常 情 况 下 不 会 导 致 感 染 的 细 菌 数 量 也 可 导 致 卒 中 患 者 发 生 全 身 感 染 体 液 免 疫 反 应 的 关 键 细 胞 是 B 细 胞, 而 部 分 B 细 胞 产 生 抗 体 却 需 要 借 助 辅 助 性 T 细 胞 的 帮 助, 因 此,CD4+T 细 胞 的 减 少 会 使 得 机 体 细 胞 免 疫 和 体 液 免 疫 均 受 到 影 响,CD4+T 细 胞 百 分 比 检 测, 有 助 于 预 测 SAI 的 发 病 风 险 ;CD4+/CD8+ 降 低 者 感 染 显 著 增 加

48 肿 瘤 免 疫 状 态 监 测 了 解 在 不 同 情 况 下 体 内 免 疫 功 能 状 态 辅 助 临 床 疾 病 的 诊 断 探 索 疾 病 的 发 病 机 理 病 程 预 后 监 测 指 导 评 估 临 床 治 疗 方 案

49 卵 巢 恶 性 肿 瘤 手 术 及 化 疗 前 后 外 周 血 免 疫 细 胞 亚 群 的 检 测 陈 鲁, 高 永 良, 凌 雨 田, 浙 江 省 肿 瘤 医 院 研 究 所, 中 华 肿 瘤 防 治 杂 志 2006,13(9)

50 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 1 免 疫 系 统 概 述 2 淋 巴 细 胞 亚 群 应 用 a. 淋 巴 细 胞 亚 群 概 述 b. 淋 巴 细 胞 亚 群 的 临 床 应 用 3 流 式 感 染 应 用 细 菌 感 染 --CD64 4 HLA-B27 应 用

51 与 感 染 和 炎 症 有 关 的 免 疫 活 性 细 胞 及 其 表 达 的 分 子 特 定 细 胞 上 分 子 表 达 变 化 ( 不 包 括 细 胞 因 子 和 其 他 介 质 ) 表 达 于 多 种 免 疫 细 胞 的 Toll 样 受 体 及 其 配 体 (DC,Mo,Mac,G) TLR PAMP 细 菌 感 染 TLR-1/TLR-2 细 菌 寄 生 虫 中 性 粒 细 胞 PMN 上 CD64 表 达 TLR-4 革 兰 阴 性 菌 (LPS) NK,DC TLR-5 细 菌 鞭 毛 素 TLR-9 细 菌 双 链 DNA 非 甲 基 化 CpG TLR-2/TLR-6 革 兰 阳 性 菌 ( 肽 聚 糖 ), 真 菌 酵 母 多 糖 病 毒 感 染 CD8 细 胞 上 TLR-3 病 毒 双 链 RNA CD38,NKG2A 表 达 TLR-4 呼 吸 道 合 胞 病 毒 F 蛋 白 NKG2D 表 达 TLR-7/TLR-8 病 毒 单 链 RNA NK(R,subset),DCsubset TLR-9 病 毒 非 甲 基 化 CpG 基 序

52 感 染 的 实 验 室 检 测 指 标 传 统 感 染 诊 断 指 标 白 细 胞 计 数 与 感 染 的 临 床 分 级 相 关, 但 出 现 较 晚 绝 对 计 数 未 成 熟 指 数 细 菌 培 养 最 客 观 的 指 标, 但 其 检 测 周 期 长 部 分 细 菌 培 养 困 难, 是 目 前 无 法 克 服 的 缺 陷 C 反 应 蛋 白 (CRP) 虽 能 很 好 反 映 感 染 的 临 床 分 级, 但 不 具 早 期 诊 断 价 值, 且 灵 敏 度 和 特 异 性 均 不 高 新 一 代 感 染 检 测 指 标 PMN CD64 CD64 表 达 水 平 与 感 染 程 度 或 组 织 损 伤 呈 密 切 相 关,24 小 时 内 动 力 学 反 映 细 胞 因 子 TNF-a, IL-6,IL-12, CD14, CD16 降 钙 素 原 内 毒 素 活 性 测 定

53 CD64 ( IgG 受 体 FcγRI ) 指 数 CD64 index ( 成 人 ) CD64 index ( 儿 童 ) = = PMN CD64 MFI/ Lym CD64 MFI Mo CD64 MFI / PMN CD64 MFI PMN CD64 MFI - Lym CD64 MFI Mo CD64 MFI - PMN CD64 MFI CD64 指 数 可 作 为 急 性 感 染 的 重 要 补 充 诊 断 指 标 CD64 指 数 可 用 于 区 分 : 细 菌 性 感 染 与 病 毒 感 染 大 手 术 后 创 伤 导 致 的 PMN 升 高 与 细 菌 感 染 导 致 的 PMN 升 高 细 菌 感 染 与 非 感 染 性 炎 症 反 应 ( 如 自 身 免 疫 性 疾 病 等 )

54 Healthy control CD64 index (MFI) : PMN / Lym Mo/ PMN = = 0.66

55 Bacterial infection CD64 index (MFI) : PMN/Lym Mo/ PMN = =

56 中 性 粒 细 胞 CD64 index 抗 感 染 疗 效 评 估 Day CD64 感 染 指 数 随 感 染 治 疗 的 好 转 而 明 显 降 低

57 CD64 的 检 测 意 义 1 急 诊 发 热 患 者 ( 儿 ) 细 菌 感 染 的 诊 断 和 预 后 判 断 2 感 染 患 者 抗 生 素 疗 效 监 测 - 由 静 脉 注 射 转 为 口 服 给 药 的 标 志 ; 指 导 抗 生 素 用 量, 降 低 耐 药 性 的 出 现 3 血 培 养 的 辅 助 检 测 手 段 -PMN 活 化 的 早 期 标 志 ; 有 助 于 区 分 真 正 的 血 培 养 阳 性 和 培 养 时 的 污 染 4 早 期 判 断 手 术 ( 尤 其 是 大 手 术 ) 后 细 菌 感 染 与 手 术 应 激 反 应 的 鉴 别 诊 断 5 细 菌 感 染 与 非 感 染 性 炎 症 反 应 ( 如 自 身 免 疫 性 疾 病,IBD) 的 鉴 别 诊 断 6 鉴 别 不 明 原 因 的 中 性 白 细 胞 增 多 症 或 自 身 免 疫 性 疾 病 患 者 的 病 因 -- 炎 症 或 骨 髓 增 生 异 常 7 败 血 症 的 早 期 诊 断 和 监 测

58 强 制 性 脊 柱 炎 与 HLA-B27 强 直 性 脊 柱 炎 概 述 流 式 细 胞 术 检 测 HLA-B27

59 强 直 性 脊 柱 炎 概 述 强 直 性 脊 柱 炎 (ankylosing spondylitis, AS) 是 脊 柱 及 其 附 属 组 织 的 慢 性 进 行 性 炎 性 疾 病, 属 于 脊 柱 关 节 病 的 一 种 亚 型, 主 要 累 及 骶 髂 关 节 脊 柱 关 节 椎 旁 软 组 织 及 四 肢 关 节 AS 呈 高 度 遗 传 性, 青 壮 年 为 主 要 高 发 人 群, 发 病 年 龄 通 常 低 于 30 岁 ( 常 见 13~31 岁 ), 男 性 多 于 女 性 AS 早 期 发 病 隐 匿, 症 状 多 变, 极 易 被 误 诊 或 漏 诊, 故 应 争 取 早 期 诊 断, 早 期 治 疗 我 国 AS 患 者 的 发 病 率 为 3, 按 13 亿 人 口 推 算, 大 约 有 400 余 万 人 由 于 中 早 期 强 直 性 脊 柱 炎 确 诊 率 比 较 低, 实 际 发 病 率 应 该 不 止 400 万 人

60 强 直 性 脊 柱 炎 强 直 性 脊 柱 炎 早 期 以 慢 性 双 侧 骶 髂 关 节 炎 为 特 征 ; 晚 期 骨 突 关 节 融 合, 韧 带 赘 形 成, 脊 柱 韧 带 钙 化, 导 致 脊 柱 从 颈 到 骶 骨 完 全 强 直 早 期 诊 断 有 助 于 早 期 治 疗, 防 止 致 残

61 强 直 性 脊 柱 炎 常 见 症 状 腰 背 痛 骶 髂 部 疼 痛 晨 僵 腰 椎 胸 颈 等 脊 椎 疼 痛 活 动 受 限 脊 柱 畸 形 坐 骨 神 经 痛 外 周 关 节 炎 骨 科 外 周 关 节 炎 跖 底 筋 膜 炎 跟 腱 炎 肌 腱 末 端 炎 银 屑 病 炎 性 肠 病 风 湿 免 疫 科

62 主 要 内 容 强 直 性 脊 柱 炎 概 述 流 式 细 胞 术 检 测 HLA-B27

63 HLA-B27 检 测 对 AS 的 预 测 意 义 HLA-B27 阳 性 的 银 屑 病 或 炎 症 性 肠 病 患 者, 有 可 能 并 发 AS 有 腰 背 痛 但 不 伴 有 银 屑 病 和 炎 症 性 肠 病 的 患 者,HLA-B27 阴 性 几 乎 可 排 除 AS HLA-B27 还 可 帮 助 预 测 AS 患 者 得 家 庭 成 员 的 发 病 可 能 性 : HLA-B27 阳 性 的 AS 患 者, 其 一 级 亲 属 中 AS 的 患 病 率 高 达 11%~25%

64 HLA-B27 检 测 HLA-B27 阴 性 样 本 HLA-B27 阳 性 样 本

65 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 血 液 学

66 流 式 细 胞 仪 的 应 用 ( 血 液 ) 白 血 病 和 淋 巴 瘤 免 疫 分 型 残 留 白 血 病 造 血 干 细 胞 计 数 PNH 诊 断 网 织 红 细 胞 分 析 血 小 板 分 析 血 小 板 膜 糖 蛋 白 分 子 的 表 达 血 小 板 活 化 网 织 血 小 板 分 析 血 小 板 抗 体

67 白 血 病 免 疫 分 型 定 义 : 白 血 病 免 疫 分 型 是 利 用 单 克 隆 抗 体 (McAb) 检 测 白 血 病 细 胞 的 细 胞 膜 和 细 胞 浆 抗 原, 分 析 其 表 型, 以 了 解 被 测 白 血 病 细 胞 所 属 细 胞 系 列 及 其 分 化 程 度 WHO MICM 分 型 标 准 Morphology Immunology Cytogenetics Molecular Biology 形 态 学 免 疫 学 细 胞 遗 传 学 分 子 生 物 学 白 血 病 细 胞 的 异 常 表 现 在 抗 原 系 列 异 常 和 时 间 异 常

68 白 血 病 免 疫 分 型 的 意 义 获 得 精 确 诊 断 ( 定 系 定 阶 段 定 良 恶 性 ) 识 别 潜 在 治 疗 靶 位 指 导 治 疗 方 案 建 立 单 克 隆 抗 体 治 疗 帮 助 预 后 判 断 分 型 结 果 提 示 预 后 获 得 精 确 的 生 物 学 特 点 MRD 监 测

69 流 式 细 胞 仪 的 应 用 ( 血 液 ) 白 血 病 和 淋 巴 瘤 免 疫 分 型 残 留 白 血 病 造 血 干 细 胞 计 数 PNH 诊 断 网 织 红 细 胞 分 析 血 小 板 分 析 血 小 板 膜 糖 蛋 白 分 子 的 表 达 血 小 板 活 化 网 织 血 小 板 分 析 血 小 板 抗 体

70 造 血 干 细 胞 计 数 造 血 干 细 胞 是 一 群 有 一 定 增 生 能 力, 可 以 多 向 分 化 的 造 血 细 胞 在 干 细 胞 移 植 时 需 要 做 造 血 干 细 胞 绝 对 计 数 CD34 在 骨 髓 和 外 周 血 的 未 成 熟 造 血 细 胞 和 所 有 具 有 造 血 潜 能 的 集 落 形 成 细 胞 上 表 达 包 括 单 能 和 多 能 祖 细 胞

71 造 血 干 细 胞 检 测 使 用 科 室 血 液 内 科 : 造 血 干 细 胞 移 植 检 测, 应 用 广 泛, 方 案 成 熟 心 血 管 内 科 : 做 支 架 的 病 人, 同 时 输 注 分 选 CD34+ 细 胞, 对 缓 解 心 衰, 心 功 不 全 有 好 的 疗 效, 可 改 善 心 肌 缺 血 及 心 脏 功 能 心 血 管 外 科 : 外 科 手 术, 在 体 外 循 环, 输 注 CD34+ 细 胞, 对 心 肌 恢 复 有 很 大 作 用 脑 外 科 : 脑 外 伤 的 病 人, 术 前, 术 中, 术 后 检 测 CD34+ / CD133+/KDR+, 提 示 愈 后 效 果, 病 例 已 跟 踪 三 年, 并 在 国 外 期 刊 发 表

72 流 式 细 胞 仪 的 应 用 ( 血 液 ) 白 血 病 和 淋 巴 瘤 免 疫 分 型 残 留 白 血 病 造 血 干 细 胞 计 数 PNH 诊 断 网 织 红 细 胞 分 析 血 小 板 分 析 血 小 板 膜 糖 蛋 白 分 子 的 表 达 血 小 板 活 化 网 织 血 小 板 分 析 血 小 板 抗 体

73 阵 发 性 睡 眠 性 血 红 蛋 白 尿 --PNH PNH 获 得 性 造 血 干 细 胞 良 性 克 隆 性 疾 病, 是 造 血 干 细 胞 基 因 突 变 造 成 的 由 于 红 细 胞 膜 的 获 得 性 缺 陷, 对 激 活 补 体 异 常 敏 感 的 一 种 慢 性 血 管 内 溶 血, 患 者 多 伴 有 不 同 程 度 的 贫 血 患 者 体 内 红 细 胞 呈 不 均 一 性 利 用 流 式 细 胞 术 和 CD55 和 CD59 单 克 隆 抗 体, 对 PNH 患 者 红 细 胞 粒 细 胞 和 血 小 板 进 行 分 析, 证 实 存 在 膜 蛋 白 表 达 缺 陷 的 血 细 胞, 并 计 算 缺 陷 细 胞 在 全 血 中 所 占 比 例 流 式 细 胞 术 已 经 取 代 了 传 统 的 Ham 实 验, 成 为 PNH 诊 断 的 金 标 准

74 阵 发 性 血 红 蛋 白 尿 --PNH 正 常 人 红 细 胞 粒 细 胞 和 血 小 板 CD59 表 达 完 全 阳 性 PNH 患 者 血 细 胞 分 为 三 型 : Ⅰ 型 :CD59 表 达 完 全 阳 性, 荧 光 强 度 与 正 常 人 阳 性 峰 荧 光 强 度 接 近 Ⅱ 型 :CD59 表 达 部 分 阳 性, 荧 光 强 度 介 于 Ⅰ 型 与 Ⅲ 型 之 间 III 型 :CD59 表 达 完 全 阴 性 分 析 PNH 患 者 各 型 细 胞 所 占 百 分 比, 评 估 疾 病 的 严 重 程 度

75 PNH 检 测 A 正 常 人 B D 病 人

76 流 式 细 胞 仪 的 应 用 ( 血 液 ) 白 血 病 和 淋 巴 瘤 免 疫 分 型 残 留 白 血 病 造 血 干 细 胞 计 数 PNH 诊 断 网 织 红 细 胞 分 析 血 小 板 分 析 血 小 板 膜 糖 蛋 白 分 子 的 表 达 血 小 板 活 化 网 织 血 小 板 分 析 血 小 板 抗 体

77 网 织 红 细 胞 临 床 意 义 鉴 别 红 细 胞 减 少 性 疾 病 溶 血 性 疾 病 监 测 骨 髓 移 植 后 的 骨 髓 造 血 情 况 判 断 隐 性 失 血 的 有 效 指 标 监 测 放 疗 和 化 疗 对 骨 髓 造 血 功 能 的 影 响

78 流 式 细 胞 仪 的 应 用 ( 血 液 ) 白 血 病 和 淋 巴 瘤 免 疫 分 型 残 留 白 血 病 造 血 干 细 胞 计 数 PNH 诊 断 网 织 红 细 胞 分 析 血 小 板 分 析 血 小 板 膜 糖 蛋 白 分 子 的 表 达 血 小 板 活 化 网 织 血 小 板 分 析 血 小 板 抗 体

79 血 小 板 检 测 血 小 板 膜 糖 蛋 白 复 合 物 诊 断 血 小 板 缺 陷 性 疾 病 CD41-CD61 复 合 物 : 血 小 板 无 力 症 CD42a-CD42b 复 合 物 : 巨 大 血 小 板 症 血 小 板 活 化 的 相 关 检 查 血 小 板 颗 粒 膜 糖 蛋 白, 如 CD62P,CD63 血 小 板 膜 糖 蛋 白 活 化 表 位, 如 PAC-1 血 小 板 减 少 性 疾 病 血 小 板 自 身 抗 体 检 测 网 织 血 小 板 的 检 测

80 脑 栓 塞 病 人 血 小 板 活 化 检 测 A CD61-SSC 设 分 析 门 B 阴 性 对 照 C 治 疗 前 PAC-I 27.74% CD62P 15.86% D 溶 栓 后 PAC-I 9.13% CD62P 4.12%

81 巨 血 小 板 症 蓝 阴 性 对 照 绿 正 常 人 红 病 人 CD41/CD61 表 达 上 调 CD42a/CD42b 缺 失

82 流 式 细 胞 术 的 临 床 应 用 肿 瘤 学

83 流 式 细 胞 仪 的 应 用 ( 肿 瘤 ) 免 疫 功 能 检 测 与 肿 瘤 监 测 细 胞 周 期 分 析 细 胞 凋 亡 的 分 析 凋 亡 细 胞 的 分 析 凋 亡 相 关 蛋 白 的 分 析

84 肿 瘤 的 微 环 境 肿 瘤 是 一 种 组 织, 而 不 是 一 堆 或 群 细 胞, 包 括 瘤 细 胞, 成 纤 维 细 胞, 免 疫 细 胞, 血 管 组 织 和 基 质 ; 肿 瘤 是 一 种 系 统 性 疾 病, 是 一 种 以 局 部 组 织 细 胞 异 常 生 长 为 表 现 的 全 身 性 病 变, 其 中 神 经 激 素 免 疫 系 统 在 肿 瘤 发 生 过 程 也 发 生 了 病 理 性 系 统 失 调 ; Killing of tumor cells by CTLs

85 免 疫 编 辑 免 疫 清 除 免 疫 平 衡 免 疫 逃 逸 肿 瘤 休 眠 如 果 在 这 个 阶 段, 肿 瘤 细 胞 可 以 消 退, 有 助 于 改 进 对 肿 瘤 的 治 疗 促 进 肿 瘤 生 长 抑 制 肿 瘤 生 长

86 免 疫 功 能 检 测 与 肿 瘤 监 测 临 床 常 用 肿 瘤 病 人 免 疫 功 能 的 检 测 项 目 1.T 细 胞 亚 群 : 2. 自 然 杀 伤 性 细 胞 (NK): CD56+CD16+ 3.B 细 胞 :CD19+,CD20+ 4.DC 细 胞 :Lineage Cocktail(lin1),HLA-DR+

87 免 疫 系 统 与 肿 瘤 虽 然 机 体 有 免 疫 监 视 机 制, 但 肿 瘤 仍 发 生 并 持 续 发 展, 原 因 是 肿 瘤 细 胞 存 在 多 种 免 疫 逃 逸 机 制 宿 主 对 机 体 内 发 生 的 肿 瘤 免 疫 逃 逸, 表 现 为 特 异 性 的 细 胞 免 疫, 体 液 免 疫 及 非 特 异 性 免 疫 低 下

88 淋 巴 细 胞 亚 群 与 肿 瘤 Th 细 胞 : 不 仅 可 以 分 泌 大 量 的 细 胞 因 子 和 辅 助 Ts 细 胞 杀 伤 肿 瘤 细 胞, 而 且 具 有 免 疫 记 忆 和 直 接 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 功 能 Th 细 胞 减 少, 可 使 肿 瘤 发 生 免 疫 逃 逸 Ts 细 胞 : 是 抗 肿 瘤 的 主 要 效 应 细 胞, 它 通 过 释 放 穿 孔 素 及 颗 粒 酶 或 促 使 细 胞 凋 亡 来 杀 伤 肿 瘤 细 胞 NK 细 胞 是 非 抗 原 依 赖 性 免 疫 效 应 细 胞, 它 不 经 致 敏 可 直 接 杀 伤 敏 感 的 肿 瘤 细 胞 NK 细 胞 数 目 下 降 提 示 机 体 NK 细 胞 作 用 受 抑 制, 不 能 有 效 发 挥 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 作 用

89 CD4/CD8 比 值 与 肿 瘤 恶 性 肿 瘤 患 者 术 前 CD4/CD8 比 值 低 与 术 后 比 值 恢 复 正 常 当 发 生 癌 转 移 时,CD3 CD4 细 胞 数 明 显 减 少 的 同 时 CD8 细 胞 数 明 显 增 多,CD4/ CD8 比 值 明 显 降 低, 提 示 恶 性 肿 瘤 患 者 晚 期 细 胞 免 疫 功 能 更 低, 预 后 更 差 肿 瘤 终 未 期 患 者 CD4/CD8 比 值 异 常

90 动 态 检 测 肿 瘤 免 疫 功 能 的 临 床 意 义 (1) 1. 辅 助 诊 断 : 评 价 肿 瘤 患 者 的 整 体 免 疫 功 能 2. 判 断 预 后 : 常 规 肿 瘤 手 术, 放 疗 和 化 疗 可 引 起 免 疫 功 能 抑 制 ; 免 疫 功 能 恢 复 慢 或 严 重 低 下 者, 提 示 预 后 较 差 ; 免 疫 功 能 正 常 或 恢 复 较 快 者, 预 后 较 好 3. 预 测 肿 瘤 复 发 : 手 术 放 疗 和 化 疗 间 歇 期 患 者 免 疫 功 能 低 下, 是 肿 瘤 复 发 转 移 的 危 险 期 临 床 随 访 中 动 态 检 测 免 疫 功 能 有 助 于 判 断 病 变 的 发 展 状 态, 如 果 免 疫 功 能 骤 然 下 降, 预 示 肿 瘤 复 发 可 能

91 动 态 检 测 肿 瘤 免 疫 功 能 的 临 床 意 义 (2) 4. 指 导 肿 瘤 免 疫 治 疗 : 免 疫 因 子 制 剂 (IL-2, 干 扰 素 ), 活 化 的 淋 巴 细 胞 (CIK,LAK), 肿 瘤 疫 苗 等 是 目 前 临 床 常 用 提 高 肿 瘤 患 者 免 疫 功 能 的 方 法, 选 择 病 人 免 疫 功 能 恢 复 期 为 最 佳 的 免 疫 治 疗 时 机 5. 对 恶 性 血 液 病 的 筛 查 : 通 过 对 淋 巴 细 胞 亚 群 分 析, 对 淋 巴 细 胞 恶 性 增 殖 性 疾 病 进 行 初 步 筛 查, 如, 白 血 病, 淋 巴 瘤, 淋 巴 瘤 白 血 病 等

92 DNA 细 胞 周 期 检 测 与 肿 瘤 诊 断 2012 年 新 颁 布 的 全 国 医 疗 服 务 项 目 国 家 本 中 新 添 加 项 目 DNA 诊 断 肿 瘤 通 常 以 S 期 细 胞 比 率 作 为 判 断 肿 瘤 细 胞 增 殖 状 态 的 指 标 (1) 出 现 DNA 异 倍 体 峰 可 诊 断 阳 性 (2) S 期 >15%,G2/M >10% 可 诊 断 为 阳 性 DNA 非 整 倍 体 的 出 现 是 发 生 早 期 癌 变 的 一 个 重 要 标 志 在 淋 巴 瘤 (L&L) 病 理 形 态 学 不 能 做 出 诊 断 前, 可 提 供 确 切 诊 断 信 息 ; DNA 非 整 倍 体 的 交 界 瘤 应 按 恶 性 对 待 ; 形 态 学 表 现 良 性 的 肿 瘤 出 现 非 整 倍 体 提 示 恶 变 可 能 ; DNA 指 数 可 作 为 判 断 间 叶 组 织 肿 瘤 良 恶 性 的 辅 助 指 标

93 DNA 细 胞 周 期 分 析 在 肿 瘤 诊 断 中 的 意 义 监 测 病 情 预 后 情 况 与 药 效 : 流 式 细 胞 术 可 精 确 检 测 药 物 对 肿 瘤 细 胞 的 作 用, 研 究 肿 瘤 化 疗 药 物 的 选 择, 制 定 合 理 的 化 疗 方 案, 并 随 时 监 测 病 情 发 展 和 治 疗 效 果 DNA 含 量 高, 包 含 非 整 倍 体 峰 的 肿 瘤 恶 性 程 度 高, 预 后 差, 二 倍 体 或 近 二 倍 体 肿 瘤 预 后 较 好 正 常 骨 髓 细 胞 (2.93%) 肿 瘤 细 胞 (14.18%)

94 总 结 流 式 细 胞 仪 (FCM) 是 用 于 研 究 细 胞 生 物 学 的 重 要 工 具 其 特 点 是 快 速 精 确 多 参 数, 相 对 定 量 测 定 单 个 细 胞 膜 胞 浆 或 核 内 的 多 种 物 质 自 上 个 世 纪 70 年 代 以 来 已 较 广 泛 地 用 于 细 胞 生 物 学 肿 瘤 学 血 液 学 免 疫 学 等 研 究 近 年 来 由 于 仪 器 进 一 步 提 高 了 自 动 化 程 度 便 于 操 作, 多 种 单 克 隆 抗 体 的 制 备 成 功 以 及 多 种 荧 光 素 的 应 用 使 FCM 不 仅 局 限 于 研 究 并 已 较 广 泛 地 用 于 临 床 诊 断 FCM 虽 然 在 我 国 起 步 较 慢, 但 近 年 来 的 发 展 迅 速 很 多 单 位 业 已 开 展 了 不 少 工 作 可 以 预 计 在 未 来 的 10 年 中 FCM 在 医 学 中 的 应 用 必 会 有 更 大 的 发 展

95 BD Introduction

96 Helping all people live healthy lives! Helping all people live healthy lives!

条 款 内 容 第 一 章 保 险 合 同 的 构 成 第 一 条 保 险 合 同 的 构 成 生 命 附 加 学 生 平 安 意 外 伤 害 医 疗 保 险 合 同 ( 以 下 简 称 本 附 加 合 同 ) 依 主 保 险 合 同 投 保 人 的 申 请, 经 生 命 人 寿 保 险 股 份 有

条 款 内 容 第 一 章 保 险 合 同 的 构 成 第 一 条 保 险 合 同 的 构 成 生 命 附 加 学 生 平 安 意 外 伤 害 医 疗 保 险 合 同 ( 以 下 简 称 本 附 加 合 同 ) 依 主 保 险 合 同 投 保 人 的 申 请, 经 生 命 人 寿 保 险 股 份 有 生 命 附 加 学 生 平 安 意 外 伤 害 医 疗 保 险 2009 年 9 月 经 中 国 保 险 监 督 管 理 委 员 会 备 案 本 保 险 条 款 的 每 一 部 分 都 关 乎 您 的 切 身 利 益, 请 务 必 逐 条 仔 细 阅 读 以 下 为 阅 读 指 引 和 条 款 目 录, 将 有 助 于 您 阅 读 条 款 阅 读 指 引 您 享 有 的 重 要 权 益 被 保 险

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