C--Documents and Settings-spp mdi

Size: px
Start display at page:

Download "C--Documents and Settings-spp mdi"

Transcription

1 第 32 卷第 3 期 Vol.32, No 年 3 月 Mar 生殖与避孕 Reproduction & Contraception reproduction_journal@hotmail.com 重组早孕因子 (EPF) 的表达 纯化及鉴定 练玉银 王家骥 ( 广州医学院公共卫生学院, 广州, ) 摘要 目的: 获取大量具有良好生物活性的早孕因子 (EPF) 重组蛋白 方法 : 从 HeLa 细胞中提取总 RNA, 采用 RT-PCR 的方法扩增 EPF cdna, 将该 cdna 插入载体 pgex-5x-1, 获得重组表达质粒 pgex-5x-1/epf, 将重组表达质粒 pgex-5x-1/epf 转化大肠杆菌 BL21 后通过 IPTG 进行诱导表达, 然后用谷胱甘肽 - 琼脂糖球珠亲和层析方法, 分离纯化得到纯重组 GST-EPF 融合蛋白 (repf) 再用 Xa 酶切 GST, 得到纯化的 EPF 重组蛋白 用 SDS-PAGE 鉴定其纯度, 用 Western blotting 鉴定其特异性, 用玫瑰花环抑制试验 (RIT) 检测其生物学活性 结果 : HeLa 细胞总 RNA 中有效扩增出 EPF cdna EPF cdna 以正确的阅读框架插入表达载体 pgex-5x-1, 经 IPTG 诱导后高效表达 EPF 重组蛋白 Western blotting 表明其与抗 EPF 抗体有特异性结合, RIT 检测结果显示目的蛋白具有良好的 EPF 生物学特性 结论 : 成功构建了 EPF 的原核表达载体, 并纯化获得了具有生物学特性的重组蛋白, 为进一步开展 EPF 蛋白的相关研究奠定了基础 关键词 : 早孕因子 (EPF); 表达 ; 纯化 ; 特性鉴定 中图分类号 : R411 文献标识码 : A 文章编号 : X(2012) 早孕因子 (early pregnancy factor, EPF) 是目前所知最早确认妊娠的生物化学标志物之一, 是热休克蛋 [1] 白家族成员伴侣蛋白 10(cpn10) 的同系物, 是孕卵着床前到妊娠中期存在于怀孕母体及胎生动物血清中具有免疫抑制活性的多肽 EPF 除了可作为人类及家畜受精卵着床前的超早期妊娠诊断指标外, 还是流产及早期胚胎死亡的预测指标, 而且对滋养细胞和睾丸生殖细胞等肿瘤的良恶性鉴别诊断 疗效判断和预后等都具有重要意义 目前在国内尚未见应用重组的方法制备 EPF 的报道, 本文用基因工程技术克隆出了 EPF 基因, 并利用 PGEX 表达系统进行高效表达, 经纯化后获得了大量具有良好生物学特性的 EPF 重组蛋白, 现将结果报道如下 本课题为广东省科技计划重点项目, 项目号 : 2008A 通讯作者 : 王家骥 ; Tel: ; Fax: ; wjiaji@163.com 1 材料与方法 1.1 材料原核表达载体 pgex-5x-1 谷胱甘肽琼脂糖凝胶 4B(Glutathione Sepharose 4B) 及柱子均购自 Amersham Phamacia 公司 ; LA-Taq 酶 限制性内切酶 EcoR1 与 XhoI T4DNA 连接酶均购自 TaKaRa 公司 ; cdna 合成试剂盒及 DNase I 购自 MBI 公司 ; DNA 片段纯化试剂盒购自 BBI 公司 ; BCA 试剂盒 ECL 荧光底物 ( 货号 37071) 购自 Pierce 公司 ; RNA 抽提试剂盒购自 Invitrogen 公司 ; 抗 EPF 单克隆抗体为本实验室制备 ; Western blotting 试剂盒购自 GE 公司 ; 超滤仪 Amicon Ultra-4 购自为 Millipore 公司 1.2 方法 HeLa 细胞总 RNA 的提取 HeLa 细胞在 37, 体积分数 5%CO2 的条件下培养于含体积分数 10% 胎牛血清 (Gibco) U /ml 青霉素 ( 华北制药 ) -156-

2 100 U/ml 链霉素 ( 华北制药 ) 及 2 mmol/l 谷氨酰胺 ( 北京化学试剂公司 ) 的 DMEM 培养基 (Gibco) 中 取 个细胞离心沉淀, 去上清, 使用 RNA 抽提试剂盒进行总 RNA 的提取, 操作按试剂盒说明书要求进行 RT-PCR 扩增及其产物的克隆与鉴定采用巢式 PCR, PCR 反应引物根据 Genbank 提供的 EPF 序列设计 (Genbank 登录号 Q9UDH0), 外引物正向引物 (F): 5'-CTAGAGCAGAGTACGAGTCTGAG-3', 外引物反向引物 (R): 5'-GTTGATGCCATTTCAATA GTG-3', 内引物 F( 带 EcoR1 酶切位点 ): 5'-GCT GAATTCATGGCAGGACAAGCGTTTAG-3', 外引物 R ( 带 Xho 1 酶切位点 ): 5'-GCACTCGAGTCAGTC TACGTACTTTCCAAGAATG-3', 引物由上海生工合成 PCR 反应参数为 : 94 预变性 3 min, 接着 s, s,72 1 min, 32 个循环, 最后 72 延伸 10 min; 将扩增产物回收纯化 重组表达质粒的构建利用上述引物的酶切位点, 将 PCR 扩增片段与原核表达载体 PGEX-5X-1 分别用 EcoR1 和 XhoI 酶切, 并将所获 EPF cdna 片段与线性化 PGEX-5X-1 的酶切产物相互连接, 构建重组表达质粒 pgex-5x-1/epf, 并由上海生工生物公司对其进行测序鉴定 EPF 蛋白的诱导表达与纯化将经测序鉴定的 pgex-5x-1/epf 转化感受态大肠杆菌 BL21, 获得表达菌株 pgex-5x-1/epf/bl21 培养表达菌, 待细菌生长至对数生长期 (A600=0.6~0.8) 时, 加入终浓度为 0.5 mmol/l 的 IPTG, 继续培养 3~5 h 后于 4 离心收集细菌 加入 25 ml 冰预冷的 PBS 重悬细菌, 并加入 700 µl 溶菌酶 (1 mg/ml, Sigma) 及 100 µl 孕马血清 (PMSF, 100 mmol/l, Amresco), 冻于 -70 于 37 水浴使其融解, 再重复冻融 1 次 多次重复超声裂解菌液后, 加入体积分数 20%Triton-X100, 使其终浓度为 1%, 混匀 4 孵育 30 min 后 g, 4 离心 30 min, 离心后分别取上清液与沉淀物进行 SDS-PAGE 分析 EPF 蛋白的洗涤 纯化取菌液的上清液用 0.45 µm 滤膜过滤, 将 1 L 菌液的上清滤液加入 1 ml 体积分数 50%Glutathione Sepharose 4B, 4 旋转混合仪上孵育 2~3 h 4 下 500 g 离心 5 min, 弃上清液, 加入 10 ml PBS 进行洗涤, 4 下 500 g 离心 5 min, 重复洗涤多次 将珠子加入到层析柱中, 加入还原性谷胱甘肽 (GSH) 洗脱液 [ 含 15 mmol/l 谷胱甘肽的 50 mmol/l Tris-HCl(pH 8.0)], 每次 1 ml, 收集液体, 利用 OD280 检测蛋白是否洗脱干净 蛋白液的超滤将洗脱液加入到超滤管中, 每次约 4 ml 4 下 g 离心 20 min, 直至液体都透过滤膜到下面离心管中 加入 2 ml PBS, 同样条件离心 加入适量 PBS 收集目的蛋白, 取样进行 SDS-PAGE 分析 Xa 酶切谷胱甘肽转移酶 (GST) 利用超滤管将 GST-EPF 浓缩到 0.5 ml, 浓度为 2 mg/ml 将缓冲液置换成 1 PBS, 确保 GSH 被清除 加入 10 µg Xa, 37 5 h 加入 30 µl 体积分数 50% 谷胱甘肽琼脂糖凝胶 4B, 4 旋转混合仪上孵育 1 h, 以结合酶切后游离的 GST 离心取上清液再重复一遍, 最后取上清液进行 SDS-PAGE 分析 然后过 GST 柱, 洗涤 纯化蛋白, 方法同 Western blotting 鉴定特异性用抗 EPF 单克隆抗体作为一抗进行 Western blotting, 操作按相关说明书要求进行, 验证重组蛋白的特异性 常规 Western blotting 实验后取 ECL 荧光底物 A 液和 B 液各 1 ml, 混匀后将 PVDF 膜 (Amresco) 浸泡其中, 室温孵育 3~5 min 后, 用滤纸将 PVDF 膜表面液体擦干, 并将其置于暗室, 取医用 X- 底片覆盖, 曝光 1 min 后依次显影 定影 生物学特性鉴定用经典的玫瑰花结抑制试验 (RIT) 了解重组蛋白是否有 EPF 活性, RIT 按文献 [2] 方法进行 以花结抑制百分率 25% 的最高抗体稀释度作为 RIT 指标, 用以 2 为底的对数值表示 重组蛋白稀释备用, 以早孕血清作阳性对照, 正常男性血清作阴性对照 2 结果 2.1 RT-PCR 扩增 EPF 基因以 HeLa 细胞提取总 RNA 为模板, 通过 RT-PCR 得到的 EPFcDNA 产物, 编码序列 (CDS) 全长 309 bp, 编码 103 个氨基酸, cdna 电泳条带见图 重组表达质粒的 pgex-5x-1/epf 构建 酶切及序列鉴定将 EPF 基因与原核表达载体 pgex-5x-1 分别用 EcoR1 和 XhoI 进行双酶切, 并将所获 EPF 基因片段与 pgex-5x-1 的酶切产物连接, 构建重组表达质粒 pgex-5x-1/epf( 图 2) 对插入片段进行测序分 -157-

3 析, 测序结果与 Genebank 序列完全一致 2.3 GST-EPF 重组蛋白的表达和纯化含有 pgex-5x-1/epf 的阳性克隆菌株经 IPTG 诱导, 表达蛋白进行 SDS-PAGE, 结果显示阳性克隆菌株在分子量 左右处有外源蛋白表达条带出现 ( 图 3), 与理论值一致 (GST 为 , EPF 约为 ) 破碎菌体后分别取上清液和沉淀物进行可溶性分析, 经 SDS-PAGE 显示, GST-EPF 蛋白主要分布于上清液中 ( 图 3) 利用 pgex-5x-1 载体的 GST 标签, 采用谷胱甘肽 - 琼脂糖球珠亲和层析 的方法纯化 GST-EPF 重组蛋白 收集液体, 进行 SDS-PAGE 分析 ( 图 3) 2.4 Western blotting 鉴定特异性结果显示 EPF 单克隆抗体与重组蛋白在分子量 左右处有一条蛋白条带, 说明有特异性, 有良好的抗原抗体匹配性 ( 图 4) 2.5 RIT 试验检测重组蛋白的 EPF 生物活性经检测, 阴性对照血清的 RIT 值为 12, 阳性对照血清的 RIT 值为 14, 重组蛋白的 RIT 值为 15, 故认为具有 EPF 样活性 3 讨论 1974 年澳大利亚外科医生 Morton 发现 [3], 在孕 1: DNA marker 2: EPF 基因 RT-PCR 产物 RT-PCR to amplify EPF with specific primer 图 1 EPF RT-PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳图 Figure 1 RT-PCR amplification of EPF 1: DNA marker 2: pex-5x-1/epf 质粒 EcoR1/XhoI 双酶切 pex-5x-1/epf digested with EcoR1/XhoI 图 2 pgex-5x-1/epf 酶切鉴定的琼脂糖凝胶电泳图 (EcoR1/XhoI 双酶切鉴定 ) Figure 2 The restriction analysis for pex-5x-1/epf with EcoR1/XhoI 1: 蛋白质分子量标准 protein molecular weight marker 2: pex-5x-1/epf/bl21 诱导前 before pex-5x-1/epf/bl21 induction 3: PGEX-5X-1/ EPF/BL21 诱导后上清液 the supernatant after induced by pex-5x-1/epf/bl21 4: pgex-5x-1/epf 诱导后沉淀物 the coprecipiate after induced by pex-5x-1/epf/bl21 5: 纯化后 GST-EPF 产物 GST-EPF product after purification 图 3 pgex-5x-1/epf/bl21 菌株中表达的融合蛋白 GST- EPF 的 SDS-PAGE 分析 Figure 3 SDS-PAGE analysis of GST-EPF expressed in pex- 5X-1/ EPF/BL21 图 4 重组蛋白 EPF 的 Western blotting Figure 4 EPF Western blotting -158-

4 鼠体内有一种能增强抗淋巴细胞血清 (ALS) 的抑制 T 淋巴细胞花环形成的成分, 并将它命名为早孕因子 [4,5] (EPF) 陆续的研究表明, EPF 在体内的含量于精卵结合后数小时内迅速增高, 小鼠受精后 6 h 即可在体内检测到, 人类则大约于受精后 24 h 可检测到血清中具有 EPF 活性, 并持续保持活性至妊娠中期 ; 孕 8 d 以前, EPF 主要来源于母体, 之后则主要由胚 [1] 胎组织产生 1983 年 Rolfe 等首次报道, 睾丸恶性生殖细胞肿瘤患者血清中可检测到 EPF 样活性 随着研究的深入, 学者们陆续在非生殖细胞起源的肿瘤患者 ( 乳腺癌 黑色素瘤等 ) 血清中以及人膀胱癌 T 淋巴细胞白血病细胞株 转化细胞等培养 [6,7] 上清液中可以测到 EPF 活性 无论是母源性 胚源性还是肿瘤源性的 EPF 都具有促进 ALS 抑制花结的作用, 所以 RIT 成为检测 EPF 活性的经典方法 国内苏宝田教授等自 1986 年起首先在国内对 [8-11] EPF 进行了系列研究, 从早孕妇女血清中提纯出胚源性 EPF; 并对肿瘤源性早孕因子 (t-epf) 与肿瘤的关系进行了初步研究, 结果表明血清中 EPF 样活性对良 恶性滋养细胞肿瘤的鉴别诊断 疗效判断和预后观察等有一定意义 1987 年 Mehta 提出肿瘤源性 EPF 可作为恶性滋养细胞肿瘤的一种血清标 [12] 志, 此物质的检测可作为葡萄胎 恶性葡萄胎及绒癌的鉴别诊断指标, 其重要的临床意义吸引了更多学者的关注 目前已从多种动物如鼠 猪 羊及人类孕血清 胎盘 培养胚胎组织或培养液中检测到 EPF 活性, 但随着提纯方法的不同 标本来源的不同 妊娠时间的不同 提取步骤和仪器的不同, EPF 的生物化学特性也不尽完全相同 本课题组在前期研究中已分别成功地从人工流产血液及肿瘤血液中分 [13,14] 离出早孕因子, 并对其进行纯化及鉴定 但过程繁琐, 蛋白获取率不高, 且鉴定 EPF 活性的 RIT 实验条件难以控制, 操作复杂, 判断结果欠客观, 检测 EPF 的剂量反应曲线呈钟形, 高浓度和低浓度一样呈阴性 因此, 在纯化过程中, EPF 最具活性的片段有可能被忽略, 而得到的仅是一些低活性或完全没有 [15] 活性的片段 故此, 由于纯化过程繁琐 RIT 检测方法的复杂性及检测效率低等问题而使 EPF 的应用受到极大限制 本文通过基因工程方法成功构建了可于宿主大 肠杆菌 BL21 star 菌株中高效表达的重组表达质粒 pgex-5x-1/epf 通过亲和层析获得高纯度的蛋白, RIT 表明该蛋白具有 EPF 活性 此法便可解决 EPF 相关研究中样本来源较为困难的问题, 且避免了血清样品纯化过程繁杂且易忽略活性片段的问题, 为深化 EPF 的研究 开发更简便且灵敏度更高的 EPF 检测方法和扩大其临床应用价值奠定了基础 参考文献 : [1] Rlofe BE, Morton H, Cavanagh AC, et al. Detection of an early pregnancy factor-like substance in sera ofpatients with testicular germ cell tumors. Am J Reprod Immunol, 1983, 3(2): [2] Ghaffari LA, Ghaffari LR, Pirany N, et al. Measurement of EPF for Detection of cow pregnancy using rosette inhibition test. Theriogenology, 2008, 70(1): [3] Morton H, Hegh V, Clunie GJ. Immunosuppression detected in pregnant mice by rosette inhibition test. Nature, 1974, 249(456): [4] Nahhas F, Barnea E. Human embryonic origin early pregnancy factor before and after implantation. Am J Reprod Immunol, 1990, 22(3-4): [5] Cruz YP, Selwood L, Morton H, et al. Significance of serum early pregnancy factor concentrations during pregnancy and embryonic development in Sminthopsis macroura (Spencer) (Marsupialia: Dasyuridae). Reproduction, 2001, 121(6): [6] Bojahr B, Straube W, Reddemann H. Case observations on the significance of early pregnancy factor as a tumor marker. Zentralbl Gynakol, 1993, 115(3): [7] Straube W, Romer T, Zeenni L, et al. The early pregnancy factor (EPF) as an early marker of disorders in pregnancy. Zentralbl Gynakol, 1995, 117(1):32-4. [8] 邓松华, 苏宝田, 徐振山, 等. 孕血清中早孕因子的纯化. 中国免疫学杂志, 1990, 6(3): [9] 王敏华, 苏宝田. 恶性滋养叶细胞肿瘤患者血清中早孕因子样物质的初步提纯. 安徽医科大学学报, 1992, 27(2): [10] 陈飞虎, 苏宝田, 徐光尧. EPF 单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立. 免疫学杂志, 1994, 10(40): [11] 邓松华, 苏宝田, 徐振山. 早孕因子对淋巴细胞增殖的影响. 中国病理生理杂志, 1998, 14(4): [12] Mehta AR, Shahani SK. Detection of early pregnancy factorlike activity in women with gestational trophoblastic tumors. AJRIM, 1987, 14(3):67-9. [13] 张冬云, 王家骥, 林丽白, 等. 人流血 中早孕因子 -159-

5 的分离 纯化及鉴定. 中国生物制品学杂志, 2000, 13 (3): [14] 张冬云, 王家骥, 杨英, 等. 肿瘤源性早孕因子的筛检 [15] Morton H. Early pregnancy factor: an extracellular chaperonin 10 homologue. Immunol Cell Biol, 1998, 76 (6): 纯化及鉴定. 中国生化药物杂志, 2002, 23(1):3-6. (2011 年 12 月 12 日 收稿 ) Expression, Purification and Identification of Recombinant Early Pregnancy Factor (EPF) Yu-yin LIAN, Jia-ji WANG (School of Public Health, Guangzhou Medical University, Guangzhou, ) ABSTRACT Objective: To obtain large amounts of recombinant early pregnancy factor (EPF) protein. Methods: The total RNA was extracted from HeLa cells. EPF gene fragment was amplified with RT-PCR, cloned into the expression vector pgex-5x-1. The recombinant plasmid pgex-5x-1/epf was constructed in this way and expressed under the induction of IPTG. The expressed EPF protein was purified by GST affinity chromatography, and its biological activity was detected by RIT. Results: The recombinant plasmid pgex-5x- 1 / E P F w a s s u c c e s s f u l l y c o n s t r u c t e d, a s c o n f i r m e d b y EcoR1/XhoI digested and PCR. Recombinant EPF protein was expressed in E.coli host stain BL21 star and it had good biological activity, which was confirmed by RIT. Conclusion: The cloning and expression of EPF gene laid a foundation of further study on EPF protein. Key words: early pregnancy factor (EPF); expression; purification; identification of biological activity ************************************************************************************************************************************************************************************************ 生殖与避孕 第六届编委会会议纪要 2012 年 2 月 26 日 生殖与避孕 杂志在北京国际会议中心举行了第六届编委会 会议由上海市计划生育科研所所长李元春主持, 国家人口计生委科技司的徐拥军副处长 前任主编高尔生教授 新任主编乔杰教授及 58 名编委参加会议, 另因各种原因未能参加会议的编委均提前请了假 会议伊始, 编辑部主任王黎茜回顾了中 英文期刊的创建史, 总结了期刊已取得的成绩及面临的困难, 并对未来发展作出了设想 高尔生教授对现任主编 编辑部 上海市计划生育科学研究所领导提出了殷切的期望 乔杰教授随即表达了与同道携手竭力办好期刊的决心 随后, 与会所有编委纷纷谏言谏策, 讨论了中 英文期刊的定位 稿源质量 栏目设置 对外发行 网络宣传等问题, 特别是高龄的中科院动物所陈大元院士也到会为如何更好地办好期刊给出了策略和具体的建议 编委会达成以下共识 : 1 期刊发展仍是硬道理, 要持续扩大中文期刊的影响力, 尽快拓展和提升英文期刊的知名度 2 加强编辑部人才建设, 设法解决编辑的职称晋升 业务培训等职业发展需求, 倾力引进精通英语的专业人才 3 加大对期刊经营的投入, 如改革和升级投 / 审稿采编系统和网页, 加强国内 外专家的交流等 编委纷纷表示愿意尽自己所能在财力和物力支持帮助杂志更上一层楼 李元春所长感谢各位编委对期刊发展的关心和支持, 对期刊长远发展提出的好建议 他强调, 所领导力争做好期刊后勤部长的角色, 共同推动期刊水平更上一层楼 会后, 编辑部设晚宴招待了各位领导 专家及同行 ( 编辑部 ) -160-

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽

More information

材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析

材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析 生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌

More information

7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0

7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! # $ #% %&!%'!! $ ( )& * $ +,-.)/ ) 01  * ).  2)3 )01 ( / 433% /1  0 51  -.)/$ 6',)) 4.))%) 0 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0 ".. " - 23 )"." ( ).)") 4. " ' $ 7 " #$%"$8 &' + +." 0"3 / 3 3( 0 ) %.% "(% 2). +.) ")( ) (

More information

Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT

Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT 42 6 Vol.42, No.6 2011 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2011 南极衣藻 (Chlamydomonas sp. ICE-L) 谷胱 * 甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化 1 1 燏 1 1 2 (1. 524025; 2. 266061) RT-PCR GR ORF cdna, ; IPTG,, pet-gr BL21,

More information

标题

标题 Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇

More information

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人

More information

pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC

pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC 35 3 12 9 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY Natural Science Edition Vol 35 No 3 Sept 12 pet28a + CD 210046 Rituximab VL VH CH3 CD overlap PCR Rituximab VL VH Linker ScFv ScFv IgG1 CH3 IgG1 cdna pet28a

More information

:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet

:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet 2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot

More information

Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc

Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc 重组七鳃鳗 PHB2 蛋白的原核表达及纯化 李铁松, 王颖, 高杨, 李庆伟 (, 116081) 摘要 : 为了研究 PHB2 蛋白的生物学活性及后续抗体的制备, 作者以前期构建的 pmd18-t-lm-phb2 质粒为模板, PCR 扩增 Lm-PHB2 基因全长 CDS 区, PCR 产物经 Hind III 和 EcoR I 双酶切后连接至表达载体 pet-32a, 构建重组质粒 pet-32a-lm-phb2

More information

标题

标题 吉林农业大学学报 2016 38 1 87 91 Journal of Jilin Agricultural University http xuebao jlau edu cn E mail jlndxb vip sina com 神 经 生 长 因 子 mrna 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 130118

More information

第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液

第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液 第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功

More information

10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the

10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the 2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012

More information

第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析

第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析 第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖

More information

张红丽 等 部分功能域基因的原核表达与分析 第6期 发表序列 AY819650 同源性为 100 与国外 10 株 同源性为 98畅 8 有 13 个碱基发生了突 变 其中 4 个是有意义的突变 这 4 个有意义的 突变分别为第 257 位 T C 第 505 位 A C 第 908 位 A G 第 1012 位 G C 图 4 这些差异可 能是捻转血矛线虫株间存在地域差异所致 2畅 5 HPS 原核表达与鉴定

More information

Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr

Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus

More information

2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩 准考证号 报考专业 外语政治业务 1 业务 2 总成绩 备注 病理学与病理生理学 病理学与病理生理学

2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩 准考证号 报考专业 外语政治业务 1 业务 2 总成绩 备注 病理学与病理生理学 病理学与病理生理学 2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩 准考证号 报考专业 外语政治业务 1 业务 2 总成绩 备注 103357000912484 病理学与病理生理学 72 72 242 0 386 103357000912003 病理学与病理生理学 71 72 242 0 385 103357000911503 病理学与病理生理学 77 73 234 0 384 103357000911098

More information

福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析

福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑

More information

150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as

150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as 微生物学通报 JAN 20, 2009, 36(1): 149~153 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2009 by Institute of Microbiology, CAS 生物实验室 人 SmD1 抗原的酵母真核表达及其初步应用 * 杨湘越吴文冰兰小鹏 ( 350025) 摘要 : 通过 PCR 扩增 Sm D1 基因, 与酵母表达载体 ppic9k 重组, 构建表达质粒

More information

程汉良 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 陈淑吟 对文蛤 青蛤 硬壳蛤 江户布目蛤 薄片镜蛤 和菲律宾蛤仔 种帘蛤科贝类和 个地理种 群文蛤 大连 连云港 湛江 防城港 的细胞色素 氧化酶亚基 基因片段的核苷酸序列进行了分析 以探讨这一序列在种质鉴定 种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值 测序结果 表明 所有物种扩增片段长度均为 序列 含量 明显高于 含量 物种间共有变异位点 个 其中简约信息位点

More information

材料 方法 载体构建 转基因植株的获得

材料 方法 载体构建 转基因植株的获得 生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料

More information

< 1+1 <! " #$% &!"#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) "' )!"#$%&' (1% ( )* " + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物

< 1+1 <!  #$% &!#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) ' )!#$%&' (1% ( )*  + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物 213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58

More information

II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n

II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n I SARS 21 SARS-CoV GeneBank SARS-CoV Tor2 PCR N PN422 N 40% SARS N 95% N C N 38 15%~30% SARS N N 39 Western N 30 60aa 160~170aa N Bal b/c 8 39 Western Blot 8 6 2 N N 30 184 301 360 2 2 IgG1 10 6 10 9 M

More information

時間

時間 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專

More information

12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL

12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL ( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot

More information

福建农林大学硕士学位论文番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析姓名 : 郑璐平申请学位级别 : 硕士专业 : 分子病毒学指导教师 : 吴祖建 ; 蔡新忠 20070401 番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析 作者 : 郑璐平

More information

连接

连接 502 南方医科大学学报 J South Med Univ 202;32(4) 基础研究 小鼠前列腺干细胞抗原的原核表达 纯化及抗原活性检测 董金凯 2 罗 津 3 阎瑾琦 2 张 亮 2 高江平 于继云 2 中国人民解放军总医院泌尿外科 北京 00853 2 军事医学科学院基础医学研究所 北京 00850 3 湖南省永州 市人民医院 湖南 永州 425000 摘要 目的 RT-PCR 扩增小鼠前列腺干细胞抗原

More information

11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P

11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P 37 11 215 11 中国预防兽医学报 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Vol. 37 No.11 Nov. 215 doi: 1.3969/j.issn.8-589.215.11.12 张瑛杰 1, 尹杰超 1, 李天鹤 2, 周兵 3, 徐鹏飞 1, 荆燕 1,4, 任桂萍 1*, 李德山 1* (1. 153 2. 49

More information

标题

标题 环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨

More information

陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等

陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等 生物技术通报 研究报告 IOTECHNOLOGY ULLETIN 05, (0):6- 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的 检测 陆睿 宋绍征 祁正强 葛欣 邵宾 成勇 江苏省转基因动物制药工程研究中心扬州 5009 摘 要 人组织纤溶酶原激活剂 ht-pa 是临床血栓疾病治疗的主要生物药品应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有 报道但重组人纤溶酶原激活剂 rhpa 在转基因动物中表达尚未见报道

More information

strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a

strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a 32 2 Vol. 32 No. 2 2011 4 Journal of Jinan University Medicine Edition Apr. 2011 HepG2 1 1 2 1 1 1 1. 510632 2. 510080 HepG2 MTT WST-8 HepG2 PI Annexin V-FITC /PI Western blotting HepG2 - P < 0. 01 HepG2

More information

干细胞和再生医学 科学学位 免考 免考 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 85 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 69 非定向 护理学 科学学位 免考 免考 非定向 护理学 科学学位

干细胞和再生医学 科学学位 免考 免考 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 85 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 69 非定向 护理学 科学学位 免考 免考 非定向 护理学 科学学位 2018 年秋季报考博士上线考生名单 序号 准考证号 报考专业名称 学位类型外语成绩专业基础课成绩报考类别 备注 1 180371 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 2 180393 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 3 180427 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 4 180436 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 5 180474

More information

标题

标题 第 39 卷第 6 期 Vol. 39 No. 6 摇 摇 摇 摇 中南医学科学杂志 Journal of Medical Science in Central South China 2011 年 11 月 Nov. 2011 沙眼衣原体 T 细胞抗原 CT143 原核表达 纯化及免疫活性鉴定 陆春雪1,吴移谋1,彭摇 波2,刘良专1,蔡恒玲1,李忠玉1 (1. 南华大学 微生物与免疫学教研室,湖南

More information



 细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应

More information

Microsoft Word - 11吴双林.doc

Microsoft Word - 11吴双林.doc 生物工程学报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1664-1670 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved

More information

討論

討論 MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5

More information

124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na

124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na 河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,

More information

综合报道

综合报道 55 doi:10.3969j.issn.1000-3606.2014.01.01 论 著 不 同 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 赵 玉 祥 岳 虹 霓 杨 占 华 江 苏 省 淮 安 市 保 健 院 新 生 儿 科 ( 江 苏 淮 安 223002) 摘 要 : 目 的 探 讨 妊 娠 期 高 血 压 疾 病 胎 膜 早 破 等 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 方 法 回 顾 性

More information

,,, A ECs,, A ECs,,, A ECs,,,, ( 8) 213 3,,,,,, A ECs,, ( 9) 7,,,,,, ( 10),,, 28,,A ECs,,A ECs, A ECs 7 ;, ( ) ( 11) 3 BL M IPF, IPF [2

,,, A ECs,, A ECs,,, A ECs,,,, ( 8) 213 3,,,,,, A ECs,, ( 9) 7,,,,,, ( 10),,, 28,,A ECs,,A ECs, A ECs 7 ;, ( ) ( 11) 3 BL M IPF, IPF [2 512 Chinese Medical Journal of Metallurgical Industry,October 2005,Vol122 No1 5 3 1 1 1 2 1 ( 300020) 2 : : (5 mg/ kg), 3 7 28 : 3, ; 7 :,, ; 28 :,,, :, R 563 A 1005-5495 (2005) 05-0512 - 03 Ultrastructural

More information

典型自编教材汇总

典型自编教材汇总 江 苏 大 学 食 品 与 生 物 工 程 实 验 中 心 典 型 自 编 实 验 教 材 汇 总 目 录 1. 分 子 生 物 学 与 基 因 工 程 实 验 教 程 ( 中 国 轻 工 业 出 版 社 ).1 2. 食 品 工 程 原 理 ( 化 工 原 理 ) 实 验 指 导 书 ( 讲 义 )..20 3. 仪 器 分 析 实 验 指 导 书 ( 讲 义 ).58 4. 植 物 生 理 学

More information

马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,

马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼, 1072 基 础 研 究 Basic Research www.tumorsci.org 肿 瘤 2011 年 12 月 第 31 卷 第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat

More information

22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.

22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0. 2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.

More information

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷 50 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱 研 究 * 胡 建 兰, 邵 萌, 余 林 中 南 方 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 广 东 广 州 510515 摘 要 : 目 的 研 究 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱, 建

More information

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0.

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0. 118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI

More information

第 卷 -.+$$$-+($-.(+"$(+$%"(+$#'$+(.$+*(.$+(%$%+.$$$+$$+-$( 7-($++$"$($(+'$+'$%*$$&$.$+$%+ $$".(+$+.$+'$+'( ".($#-$4$+" +'$".(+%+$$$++(* %$+$+$"(+'$%+$"

第 卷 -.+$$$-+($-.(+$(+$%(+$#'$+(.$+*(.$+(%$%+.$$$+$$+-$( 7-($++$$($(+'$+'$%*$$&$.$+$%+ $$.(+$+.$+'$+'( .($#-$4$+ +'$.(+%+$$$++(* %$+$+$(+'$%+$ 第 卷第 期 年 月 "## $%# - 基础医学 含 '- 野生及突变结合位点的胰岛素受体 '6,78&' 区报告基因载体的构建和鉴定 王美晨 王 璇 蓝 茜 李 癑 刘 莉 伊 静 李 靖 宋刘梅 马莎蕊 宁启兰 李冬民 西安交通大学医学部 遗传学与分子生物学系 环境与疾病相关基因教育部重点实验室 级临床医学七年制 级临床医学五年制 陕西西安 ( 摘要 目的 利用 6< *%&$%', :%''"D$"

More information

PCR专题改.doc

PCR专题改.doc Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1

More information

600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa

600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合

More information

网址 : 电话 : 客服电话微信 : 邮箱 : 地址 : 烟台市开发区珠江路 32 号留创园 3 号楼 E 栋 247 室 Gel Free cl

网址 :  电话 : 客服电话微信 : 邮箱 : 地址 : 烟台市开发区珠江路 32 号留创园 3 号楼 E 栋 247 室 Gel Free cl Gel Free cloning TM 不跑胶载体构建试剂盒 Gel Free Cloning TM Kit Gel Free cloning 技术是一种简单 快速并且高效的载体构建技术, 可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点 该技术不受酶切位点限制, 也不需要线性化质粒, 只需要两步 PCR 即可将目的片段构建到载体的任意位点, 具有省时, 简便的特点 克隆阳性率可达 90% 以上 Gel Free

More information

材料與方法

材料與方法 10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20

More information

医学科研方法

医学科研方法 医 学 科 研 方 法 主 讲 苏 秀 兰 细 胞 生 物 学 教 授 第 一 讲 绪 论 一 概 念 : 在 医 学 科 学 研 究 活 动 中, 运 用 科 学 的 实 践 和 理 论 思 维 的 技 巧, 充 分 发 挥 自 己 的 智 慧, 去 寻 找 观 念 世 界 与 现 实 世 界 之 间 的 联 系 或 规 律, 从 而 发 现 新 现 象, 提 出 新 理 论 的 手 段 二 医

More information

生物技术通报 材料 方法

生物技术通报 材料 方法 生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显

More information

2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告

2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告 PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)

More information

File

File 8-*+* P(M-3: (A 3-/* C&&= CC L ; = $%&& ( *+,-.*- / 0 1.*.% (1 223456 223476 89234:6 *+ 892345 ;$%*&,*$. (=* $%& (&* +, ( -%.* / 0, 1%&* 23& / (.* /& (& 43. >;/8>,8 ;>,@ABCD B;G,89 5678,99% :;=, ;,>,,

More information

第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 645 thefurtherstudiesofmyh6function. Keywords:myh6;fusionprotein;polyclonalantibody 构建形态有别的心房和心室是脊椎动物心脏形态发生时关键的一步, 随着心

第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 645 thefurtherstudiesofmyh6function. Keywords:myh6;fusionprotein;polyclonalantibody 构建形态有别的心房和心室是脊椎动物心脏形态发生时关键的一步, 随着心 第 19 卷第 5 期 2010 年 10 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.19No.5 Oct.2010 doi:10.3969/j.isn.1007 7146.2010.05.014 myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 梁艳, 宋怀婷, 李竞超, 吴秀山, 袁婺洲 ( 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室, 心脏发育研究中心,

More information

3 461 DNA lx PDV PDV 2 10% ~ 15% PDV PDV 1 PDV PDV PDV Tagashira PDV d 5 Co

3 461 DNA lx PDV PDV 2 10% ~ 15% PDV PDV 1 PDV PDV PDV Tagashira PDV d 5 Co Chinese Bulletin of Entomology 2010 47 3 460 ~ 466 檻檻 檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻 * 450002 Parasitic effects on host Plutella xylostella testes by two endoparasitoids. HE Fan BAI Su-Fen LI Xin CHAO Yun-Fei College of

More information

SNAT2 mrna SNAT2 mr- NA 2 SNAT SNAT2 12 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT pet28a+ pbk - CMVΔ SNAT2 - HA pbk - CMV -

SNAT2 mrna SNAT2 mr- NA 2 SNAT SNAT2 12 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT pet28a+ pbk - CMVΔ SNAT2 - HA pbk - CMV - 4 2 5 Vol 42 No 5 2 0 1 3 1 0 Journal of Shanghai Normal UniversityNatural Sciences Oct 2 0 1 3 2SNAT2 1 1 2* 1 200234 2 110016 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白 2( SNAT2) 属于 SLC38 家族, 参与小的中性氨基酸跨膜转运, 在哺乳动物组织中广泛表达 SNAT2

More information

标题

标题 第 35 卷第 3 期 2014 年 9 月 FOREIGN MEDICALSCIENCESECTION OF MEDGEOGRAPHY Vol.35No.3 Sep.2014 189 基础医学 含 mir-497 野生及突变结合位点的胰岛素受体 mrna3 UTR 区报告基因载体的构建和鉴定 王美晨 3 1,2 1,2 1,2 1,2, 王璇, 蓝茜, 李玥, 刘莉, 1,2 1,2 伊静, 李靖,

More information

细胞凋亡检测 doc

细胞凋亡检测 doc [ - 1 - ] cell apoptosis detection BMS306FI rh Annexin V FITC KIT 300 test 5000 ANNEXIN V rh Annexin V FITC KIT 200 test 4880 BMS306FI/100T rh Annexin V FITC KIT 100 test 2850 BMS306FI/c rh Annexin V FITC

More information

血糖水平在妊娠期糖尿病孕妇中的检测价值

血糖水平在妊娠期糖尿病孕妇中的检测价值 郑 东 霞 浙 江 省 江 山 市 航 埠 山 路 9 号 zhdx033x@163.com 郑 东 霞,1980 年 1 月, 女 性, 汉, 浙 江 省 江 山 市, 本 科, 主 治 医 师 向 : 妇 产 科 研 究 方 妊 娠 期 糖 尿 病 孕 妇 血 糖 水 平 对 妊 娠 结 局 影 响 研 究 郑 东 霞 李 水 凤 浙 江 省 江 山 市 人 民 医 院 妇 产 科 34100

More information

1172 微生物学通报 2008, Vol.35, No.8 [2], ;,,, (Saccha- romyces cerevisiae),,,,, [3] γ- GSH1 γ-, - [4],, ADH2 ADH II (alcohol dehydrogenase II),, [5] ADH2 G

1172 微生物学通报 2008, Vol.35, No.8 [2], ;,,, (Saccha- romyces cerevisiae),,,,, [3] γ- GSH1 γ-, - [4],, ADH2 ADH II (alcohol dehydrogenase II),, [5] ADH2 G 微生物学通报 AUG 20, 2008, 35(8): 1171~1175 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2008 by Institute of Microbiology, CAS 研究报告 低乙醇脱氢酶 Ⅱ 活性的抗老化啤酒 1 蔡勇 酵母工程菌的构建 1 母茜 2 王肇悦 2 张博润 1* 晏本菊 (1. 625014) (2. 100101) 摘要 : 采用自克隆技术,

More information

招生人数 其中合计推免推免硕士连读 考 试 科 目 01( 全日制 ) 耳鼻咽喉科学 ( 专业学位 ) 肿瘤学 01( 全日制 ) 内科学 ( 专业学位 ) 康复医学与理疗学 01( 全日制 ) 康复医学与理疗学 ( 专业学位 ) 麻醉学

招生人数 其中合计推免推免硕士连读 考 试 科 目 01( 全日制 ) 耳鼻咽喉科学 ( 专业学位 ) 肿瘤学 01( 全日制 ) 内科学 ( 专业学位 ) 康复医学与理疗学 01( 全日制 ) 康复医学与理疗学 ( 专业学位 ) 麻醉学 001 北京协和医院 100104 病理学与病理生理学 01( 全日制 ) 病理学与病理生理学 ( 学术型 ) 1 1 只招收推荐免试生, 不接受统考生报名 100201 内科学 01( 全日制 ) 内科学 ( 学术型 ) 12 10 西医 ) 或 654 基础医学综合 4 一无 100208 临床检验诊断学 01( 全日制 ) 临床检验诊断学 ( 学术型 ) 1 1 只招收推荐免试生, 不接受统考生报名

More information

H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g

H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g 16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%

More information

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法 实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin( 氨卡青霉素 )(100 mg/ml) 100 mg/ml Ampicillin 50 ml 配制方法 1. 称量 Ampicillin 置于 50 ml 离心管中 ; 2. 加入 40 ml 灭菌水, 充分混合溶解后, 定容至 50 ml; 3. 用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌 ; 4. 小份分装 (1 ml/ 份 ) 后,-20 保存 IPTG(

More information

Microsoft Word - 骆健美.doc

Microsoft Word - 骆健美.doc 第 30 卷 第 2 期 2015 年 4 月 天 津 科 技 大 学 学 报 Journal of Tianjin University of Science & Technology Vol. 30 No. 2 Apr. 2015 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510.20140064 IrrE 重 组 大 肠 杆 菌 的 构 建 和 性 能 分 析 骆 健 美, 郑 媛

More information

Key words: Qi-diffciency syndrome, Cyclophosphamide, Codonopsis pilosula, Shenlinbaizhu Powder, Biochemical study CTX CTX RT-PCR CTX

Key words: Qi-diffciency syndrome, Cyclophosphamide, Codonopsis pilosula, Shenlinbaizhu Powder, Biochemical study CTX CTX RT-PCR CTX 2002207202 CTX 1 2 CTX 10mg/ml 0.2ml/ /d,2d 1 2 RT-PCR 1 2 1 2 P>0.05) RT-PCR CTX CTX A study on symptom model induced by Cyclophosphamide in mice Effects of Codonopsis pilosula (Dangshen) and Shenlinbaizhu

More information

HGC27 MKN45 SGC7901 MGC803 BGC823 AGS GES μl ATCC RPMI X F12K Sigma SDS-PAGE PBS 4 d CCK-8 Tris-base Biosharp 10% CCK μ

HGC27 MKN45 SGC7901 MGC803 BGC823 AGS GES μl ATCC RPMI X F12K Sigma SDS-PAGE PBS 4 d CCK-8 Tris-base Biosharp 10% CCK μ 516 1002-0217 2017 06-0516 - 05 3 1,2, 1, 1, 1 1. 210029 2. 244000 3 RT-PCR Western-blot RNA CCK-8 Western-blot P < 0. 05 P < 0. 001 LC3Ⅱ P < 0. 001 P62 P < 0. 001 3 R 735. 2 A DOI 10. 3969 / j. issn.

More information

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 陆敏 许黎明 吴宏宇 张继恩 李国栋 黄青山 溶葡萄球菌酶 是一种能高效裂解葡萄球菌细胞壁的肽链内切酶 已有研究表明其能够有效预防和去除奶牛乳腺中葡萄球菌的感染 但该酶在牛奶中的性质研究还缺少详细的研究数据 现对重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的一些性质进行研究 检测了加入溶葡萄球菌酶后牛奶性状的变化和重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的酶活的稳定性以及溶葡萄球菌酶在牛奶中的抑 杀菌活性 结果显示 重组溶葡萄球菌酶未改变牛奶的外观性状

More information

基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作

基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作 16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting

More information

2015,35(4) 龚隆财等 :ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 49 免疫反应鉴定, 表明重组表达的 ctni linker TnC 融合蛋白具有较好的免疫原性, 保存了 ctni 和 ctnc 单体的天然结构, 有望成为天然 ctni TnC 复合物的替代物, 为下一步

2015,35(4) 龚隆财等 :ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 49 免疫反应鉴定, 表明重组表达的 ctni linker TnC 融合蛋白具有较好的免疫原性, 保存了 ctni 和 ctnc 单体的天然结构, 有望成为天然 ctni TnC 复合物的替代物, 为下一步 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2015,35(4):48 53 DOI:10.13523/j.cb.20150407 ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 龚隆财 罗镇明 杨雁青 王振宇 向军俭 (1 暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广州 510632) 王 宏 (2 广州市疾病与食品安全免疫学快速检测重点实验室暨南大学分室广州 510632)

More information

南通大学杂志社 南通大学学报 医学版. */(& 0 1&( () (' / ' '-& -' (- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志

南通大学杂志社 南通大学学报 医学版. */(& 0 1&( () (' / ' '-& -' (- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志 .*/& 0 1&) '/' '-& -'- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志物在肝细胞肝癌 2&-*&/ -&/-'%&3 44 诊断中 的作用 方法 采用实时定量聚合酶链式反应 /&$'% 9*&'&' 2%/& -&' /&-'3

More information

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗 1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华

More information

考生编号政治政治分外语外语分科目 1 科目 1 分科目 2 科目 2 分总分专业代码专业名称考试方式报名号 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 药理学全国统考 思想政治理论

考生编号政治政治分外语外语分科目 1 科目 1 分科目 2 科目 2 分总分专业代码专业名称考试方式报名号 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 药理学全国统考 思想政治理论 100019008910001 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 83 078006 药理学全国统考 110190172 100019008910002 思想政治理论 61 英语一缺考药学综合 ( 缺考生理学 51 112 078006 药理学全国统考 110199187 100019008910003 思想政治理论缺考英语一缺考生物综合缺考 生物化学与分子生物学 缺考 --

More information

932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio

932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio 2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu

More information

Microsoft Word tb 王秋玲y-研究报告.doc

Microsoft Word tb 王秋玲y-研究报告.doc 微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Sep. 20, 2016, 43(9): 1973 1979 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150885 研究报告 重组鹅 β- 防御素 12 蛋白的原核表达及生物学特性 * 王秋玲徐倩倩张婷婷赵文钧陈玉秋齐甜铭马得莹

More information

Microsoft Word - A doc

Microsoft Word - A doc pegfp-n/tnfr 载体的构建及鉴定 叶顺传, 曾秋棠, 吴辉文, 吕云波华中科技大学同济医学院协和医院心研所, 湖北武汉 (430022) E-mail:yeshunchuan@gmail.com 摘要 : 目的 : 本研究旨在构建人肿瘤坏死因子受体 (TNFR ) 绿色荧光蛋白表达载体 pegfp-n/tnfr, 为研究 TNFR 细胞内转位奠定实验基础 方法 : 培养 U937 细胞,

More information

Microsoft Word - gc 彭静.doc

Microsoft Word - gc 彭静.doc 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology DOI: 10.13345/j.cjb.170372 彭静等 / 利用抗原结合多肽嫁接抗体技术制备抗 hcg 单域抗体 Apr. 25, 2018, 34(4): 569 577 2018 Chin J Biotech, All rights reserved 医学与免疫生物技术 569 hcg 彭静, 王琼, 程小玲,

More information

<453A5CCAB3C6B7BFC6D1A73131C4EA3134C6DA5C3134C6DA5C3032B7D6CEF6>

<453A5CCAB3C6B7BFC6D1A73131C4EA3134C6DA5C3134C6DA5C3032B7D6CEF6> 227 ELISA 刘 沙 洲 1,2, 桑 小 雪 1, 欧 阳 华 学 3, 雷 绍 荣 3, 白 林 含 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 学 院, 四 川 成 都 610065;2. 成 都 市 食 品 药 品 检 测 中 心, 四 川 成 都 610045; 3. 四 川 省 农 业 科 学 院 分 析 测 试 中 心, 四 川 成 都 610066) 目 的 : 比 较

More information

材 料 与 方 法 仪 器 ACQUITY UPLC Xevo TQ-S 三 重 四 级 杆 液 质 联 用 仪 ( 美 国 Waters 公 司 ); 电 喷 雾 离 子 源 (ESI), Masslynx 4.1 数 据 处 理 系 统 (Waters);Thermo 低 温 离 心 机 ;KQ

材 料 与 方 法 仪 器 ACQUITY UPLC Xevo TQ-S 三 重 四 级 杆 液 质 联 用 仪 ( 美 国 Waters 公 司 ); 电 喷 雾 离 子 源 (ESI), Masslynx 4.1 数 据 处 理 系 统 (Waters);Thermo 低 温 离 心 机 ;KQ [ 应 用 纪 要 ] Rapid identification of 5 illegal additives in slimming health food by Xevo TQ-S 郝 刚 苏 州 市 食 品 药 品 检 验 所, 苏 州 15104 关 键 词 超 高 效 液 相 色 谱 - 质 谱, 多 反 应 监 测, 减 肥 类 保 健 食 品 非 法 添 加, 快 速 定 性 定 量

More information

The initial study of F10 gene up-regulated in the hydatidiform mole 510515 The initial study F10 gene up-regulated in the hydatidiform mole 3047065830672234 I II PCR; PCR; III IV ; F10 ; NF-κB; AP 1

More information

Microsoft Word - 事務培訓招生簡章(含報名表).doc

Microsoft Word - 事務培訓招生簡章(含報名表).doc 公 寓 大 廈 管 理 服 務 人 培 訓 講 習 招 生 簡 章 委 託 單 位 : 內 政 部 營 建 署 受 託 單 位 : 中 華 民 國 物 業 管 理 經 理 人 協 會 委 託 期 間 : 即 日 起 至 105 年 6 月 30 日 內 政 部 營 建 署 委 託 中 華 民 國 物 業 管 理 經 理 人 協 會 辦 理 事 務 管 理 公 寓 大 廈 技 術 服 務 人 員 培

More information

一、考試宗旨:考選風險管理人才,提升風險管理水準。

一、考試宗旨:考選風險管理人才,提升風險管理水準。 101 年 第 1 次 風 險 管 理 師 考 試 簡 章 一 考 試 宗 旨 : 考 選 風 險 管 理 人 才, 提 升 風 險 管 理 水 準 二 考 試 類 別 :( 一 ) 個 人 風 險 管 理 師 ;( 二 ) 企 業 風 險 管 理 師 可 同 時 報 考 三 考 試 科 目 :( 參 考 用 書 請 詳 閱 簡 章 第 二 頁 ) ( 一 ) 個 人 風 險 管 理 師 考 試 (

More information

03 年 8 月 Vol.5 No.8 支 气 管 哮 喘 ( 简 称 哮 喘 ) 是 儿 童 时 期 最 常 见 的 慢 性 呼 吸 道 疾 病 之 一 近 年 来, 随 着 人 类 文 明 的 发 展 社 会 化 进 程 的 加 快 经 济 水 平 的 提 高 和 科 技 的 进 步, 环 境

03 年 8 月 Vol.5 No.8 支 气 管 哮 喘 ( 简 称 哮 喘 ) 是 儿 童 时 期 最 常 见 的 慢 性 呼 吸 道 疾 病 之 一 近 年 来, 随 着 人 类 文 明 的 发 展 社 会 化 进 程 的 加 快 经 济 水 平 的 提 高 和 科 技 的 进 步, 环 境 03 年 8 月 Vol.5 No.8 DOI:0.7499/j.issn.008-8830.03.08.003 论 著 临 床 研 究 成 都 地 区 0~4 岁 城 乡 儿 童 哮 喘 流 行 病 学 调 查 对 比 分 析 李 敏 张 琼 时 维 娟 李 兰 李 艳 庞 英 姚 兵 蒋 虹 (. 四 川 省 医 学 科 学 院 / 四 川 省 人 民 医 院 儿 科, 四 川 成 都 6007;.

More information

11.xps

11.xps 第卷 第期 0 年 月 辽宁中医药大报 Vol. No. Mar. 0 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM 高校网页 因子分析法对中医专业生成绩的综合评价 李新崔运浩 辽宁中医药大辽宁 沈阳 0 摘 要 目的 通过对我校杏林院中医专业生四年考试课成绩的综合分析合理地公平地科地对 生成绩做出综合评价 方法 运用因子分析法对 0 名生的 门考试课成绩进行综合评分并科地给出排名

More information

Microsoft Word - 8 期中文目次.doc

Microsoft Word - 8 期中文目次.doc 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学

More information

5期xin

5期xin 中 国 农 学 通 报 2014,30(5):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 筛 选 及 生 长 曲 线 测 定 喻 华 英, 李 启 峰 ( 塔 里 木 大 学 动 物 科 学 学 院, 新 疆 阿 拉 尔 843300) 摘 要 : 为 探 究 犊 牛 腹 泻 病 中 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 形 成

More information

續論

續論 國 立 臺 北 教 育 大 學 學 報, 第 19 卷 第 1 期 (95 年 3 月 )23~50 王 士 禎 的 山 水 詩 ( 下 ): 神 韻 與 山 水 23 國 立 臺 北 教 育 大 學 王 士 禎 的 山 水 詩 ( 下 ): 神 韻 與 山 水 * 黃 雅 歆 摘 要 引 領 康 熙 詩 壇 的 王 士 禎, 匯 聚 有 清 以 來 詩 人 對 詩 歌 創 作 的 主 張, 加 以

More information

Microsoft Word - 16周同.doc

Microsoft Word - 16周同.doc 生物工程学报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1697-1704 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved

More information

i ED 3 ED 3 ED ED 17 ED 17

i ED 3 ED 3 ED ED 17 ED 17 MMPs B00017140 2003 6 i 1 2 3 ED 3 ED 3 ED 5 5 6 9 10 12 12 13 13 14 14 15 16 16 16 ED 17 ED 17 CIEF-5 21 23 27 MMPs 28 29 31 31 31 31 34 MMPs 34 MMP 34 MMP 35 MMP 36 MMP 38 MMP 39 43 43 44 44 46 ii 50

More information

国内高等医学院校基础医学二级学科评价结果(1)

国内高等医学院校基础医学二级学科评价结果(1) 国内高等校基础医学二级学科竞争力评价简介 北京大学医学图书馆参考国内外各项评价指标体系, 建立了一套基础医学二级学科竞争力评价指标体系 分别从人才队伍 科学研究和教学成果三方面一共涉及 34 项指标, 对全国 39 家校的 12 个基础医学二级学科进行了评价 我们已经连续做了 4 年的评价,2012 年度的评价结果见下表或 http://library.bjmu.edu.cn/ 名 次 2012 年度国内高等校基础医学二级学科评价结果

More information

大 学 化 学 第 卷 第 期 年 月 微 囊化技 术 在 生 物 医 学 中的 应 用 俞 耀 庭 陈 长 治 南 开 大学分 子 生物研 究 所 本 文 概 述 了微囊 固 定化技术基 本 应 用 原 理 摘要 的生 物 血液 相溶性 及 通透 性能 胞 在治 疗 肾 衰 肝 衰 及 清除 人体 内 中毒药物 般 性介 绍 微 囊 人 工 细 胞 的 一 般制 备方 法 各种 膜 材 料 对 人

More information

Thermo Scientific 分子克隆完全解决方案

Thermo Scientific 分子克隆完全解决方案 molecular biology 分子克隆完全解决方案 用于酶切 修饰和凝胶分析的工具 PCR 试剂和耗材 用于核酸纯化的试剂盒 Thermo Scientific 分子生物学工具 PCR 克隆试剂盒, 克隆酶和核酸纯化试剂盒 限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest 快速限制性内切酶品质优异, 用于快速 DNA 酶切 我们所有的 176 种 FastDigest 快速内切酶在

More information

Microsoft Word 赵凯-二校 出4154

Microsoft Word 赵凯-二校 出4154 6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 赵 1, 凯 2, 贾彦博 3*, 王啸 2, 丁枫芸 2, 肖海龙 3, 黄建萍 3 (1., 310058; 2., 310019; 3., 310022) 摘要 : 目的 ELISA 方法, Balb/c 4, ELISA,,, ELISA 结果,

More information

标题

标题 第 48 卷 第 6 期 2 1 6 年 6 月 哈 尔 滨 工 业 大 学 学 报 JOURNAL OF HARBIN INSTITUTE OF TECHNOLOGY Vol 48 No 6 Jun. 216 doi:1.11918 / j.issn.367 6234.216.6.1 大 跨 度 楼 盖 结 构 在 运 动 荷 载 下 的 振 动 性 能 杨 维 国 1, 马 伯 涛 2, 宋 毛

More information

1 1. M J M M J M J M M J

1 1. M J M M J M J M M J 2018 3 40 2 Modern Law Science Mar. 2018 Vol. 40 No. 2 1001-2397 2018 02-0041 - 16 100872 DF092 A DOI 10. 3969/j. issn. 1001-2397. 2018. 02. 03!"# 1 2017-12 - 05 2017 17CFX006 1. 1982 M. 1997 73-146 216-244.

More information

张 伟 等 + 基于 0. 的神经胶质酸性蛋白质自身抗体的血清含量测定及其在脑胶质母细胞瘤诊断中的应用 ;!1 诊断技术因其高昂费用而无法得到广泛应用 因而发展基于临床血液样本且价格相对低廉的脑胶质瘤检测手段成为必须 早在 1" 年 % 就发现唾 4 液酸乳四糖神经酰胺可用于恶性脑胶质瘤的检测 随后

张 伟 等 + 基于 0. 的神经胶质酸性蛋白质自身抗体的血清含量测定及其在脑胶质母细胞瘤诊断中的应用 ;!1 诊断技术因其高昂费用而无法得到广泛应用 因而发展基于临床血液样本且价格相对低廉的脑胶质瘤检测手段成为必须 早在 1 年 % 就发现唾 4 液酸乳四糖神经酰胺可用于恶性脑胶质瘤的检测 随后 ;!" 复旦学报 医学版!"# 基于.7 & 的神经胶质酸性蛋白自身抗体的血清含量测定及其在脑胶质母细胞瘤诊断中的应用 张 伟 危 平 施 前 复旦大学生物医学研究院蛋白组学与系统生物学研究院 上海! 摘要 目的 发展基于 0. 的血清神经胶质酸性蛋白 ((, (%) '%. 自身抗体含量测定方法 用于脑胶质瘤患者的诊断 方法 克隆 12%' 基因至 ' = #' 载体 使用大肠埃希菌中纯化得到的.

More information

第 05 期 董房等 : 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 WEB 1 2 总体功能及组成 2.1 总体功能 1 2 3Web 2.2 结构组成 Web WEB WEB 2.3 系统各模块接口关系

第 05 期 董房等 : 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 WEB 1 2 总体功能及组成 2.1 总体功能 1 2 3Web 2.2 结构组成 Web WEB WEB 2.3 系统各模块接口关系 电子科学技术 Electronic Science & Technology 电子科学技术第 02 卷第 05 期 2015 年 9 月 Electronic Science & Technology Vol.02 No.05 Sep.2015 年 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 董房 1,2, 刘洋 2, 王储 2 2, 刘赞 (1. 上海交通大学, 上海,200240; 2. 上海卫星工程研究所,

More information