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1 高通量分离技术 1: 硅胶基质整体色谱柱技术及其应用 广州太玮生物科技有限公司市场 技术部 / (2012 年 8 月 )

2 我们当前面临的挑战 : 液相色谱法是当前有机化合物分析最热门的技术手段之一! 医药行业 : 2010 版药典一部和二部共收载 4436 个品种, 其中新增 / 修订品种有 3483 个, 超过 50% 的新增 修订品种使用 HPLC 法 (1795 个 ) 因此, 从 2010 年开始, 医药生产企业和检测机构开始大规模购置新仪器, 以满足急剧增长的检测需要 食品行业 : 近年来频发的食品安全事件, 让国人对食品检测技术有了更高要求! 政府各级食品监管部门检测任务成倍增长 ; 食品生产企业也逐步加强自身检测能力的提高 ; 色谱方法依然是最热门 最有效的检测手段

3 我们当前面临的挑战 : 面对如此艰巨的任务, 难道我们只能增加仪器的数量? 原先 : 每天检测 20 个样品每个样品平衡取样 2 份每针运行 30min 共需 20 小时每天工作 10 小时 1 天完成任务需要 2 台 HPLC 仪器 20 平方实验室 ( 仪器室 ) 1 个检测人员 现在 : 每天检测 100 个样品每个样品平衡取样 2 份, 每份样品进样 2 针 ( 检测要求越来越严格 ) 每针运行 30min 共需 200 小时每天工作 10 小时 1 天完成任务需要 20 台 HPLC 仪器 ( 增加 360 万元购买新仪器支出 ) 100 平方实验室 ( 仪器室 ) 10 个检测人员 ( 增加每月 元人员工资支出 )

4 高通量液相色谱分离技术的优势 提高效率 减少仪器购买和维护支出 减少精密仪器场地面积 原先 : 每天检测 20 个样品每个样品平衡取样 2 份每针运行 30min 共需 20 小时每天工作 10 小时 1 天完成任务需要 2 台 HPLC 仪器 20 平方实验室 ( 仪器室 ) 1 个检测人员 现在 : 每天检测 100 个样品每个样品平衡取样 2 份, 每份样品进样 2 针 ( 检测要求越来越严格 ) 每针运行 10min 共需 67 小时每天工作 10 小时 1 天完成任务需要 7 台 HPLC 仪器 ( 增加 100 万元购买新仪器 ) 40 平方实验室 ( 仪器室 ) 3 个检测人员 ( 增加每月 8000 元人员工资 )

5 当前主要的高通量液相色谱分离技术 : 按推出市场时间顺序 2000 年, 整体柱技术 ; 2004 年, 亚 2um 全多孔颗粒技术 (1.7um,1.8um,1.9um) 2006 年, 亚 3um 全多孔颗粒技术 (2.2um,2.5um,2.4um) 2007 年, 内部实心核表层全多孔颗粒技术 (2.7um,2.6um) 注 : 以上时间仅为大致年期, 未经准确核实

6 什么是整体柱? 2000 年, 德国默克公司研究开发了整体化硅胶 (monolithic Silica), 将液相色谱分离技术的发展带入了一个崭新的领域 整体化硅胶采用了完全不含金属杂质的合成硅胶材料和尖端的 溶胶 技术制备得到, 然后键合 C18 或 C8, 采用特殊的工艺装填入 PEEK 柱管中制成我们所见到的硅胶基质整体色谱柱!

7 什么是整体柱?

8 整体柱结构特点

9 整体柱的技术

10 整体柱的技术涡流扩散的比 整体硅胶色谱柱, 几乎没有涡流扩散, 分离更加快速较全多孔颗粒色谱柱, 涡流扩散严重, 踏板高度大, 柱效低粒径越大, 涡流扩散约严重粒径越小, 压力越大

11 整体柱的技术 整体硅胶大孔结构大大降低 Van Deemter 方程的涡流扩散, 但同时增大了纵向扩散 结果 : 柱效略高于 3um 全多孔色谱柱速度提高 3 倍以上

12 整体柱的技术 纵向扩散增大对色谱柱应用的影响 : 优点 : 色谱柱平衡时间缩短梯度洗脱程序, 再平衡时间缩短缺点 : 对柱效不利通过增加流动相线速度降低对 H 的影响最佳流速比全多孔色谱柱大 1 倍注 : Van Deemter 方程是在全多孔颗粒色谱柱建立的理论, 未必能真实反映整体硅胶色谱柱的行为

13 9min 3min 整体柱的优势 1 高通量分析, 提高效率 Chromolith 整体柱可为您节省 75% 分析时间 通过简单地将流速从 1ml/min 提高到 3ml/min, 使您获得很快的分离速度, 同时分离效果并未受到影响, 柱压也大大低于 5μm 颗粒填料的色谱柱 如果您愿意, 您甚至可以将流速提高到 9ml/min

14 整体柱的优势 2 快速平衡, 减小等待时间, 尤其是梯度方法 梯度程序每个样品所需时间 = 梯度时间 + 再平衡时间全多孔颗粒色谱柱在平衡时间大约需要 10~30min 硅胶整体柱只需 3~6min 进一步提高效率, 增加通量

15 整体柱的优势 3 超低背压, 减小仪器损耗 硅胶整体柱的背压只有全多孔色谱柱的 25%, 对您的仪器来说, 这是最贴心的爱护! 压力比较图

16 整体柱的优势 4 超强抗污染能力, 延长色谱柱寿命 得益于独特大孔结构, 硅胶整体柱允许一些 大 污染物通过色谱柱而不会堵塞 ; 另外, 整体柱无柱筛板独特结构, 避免了常规色谱柱最常发生的柱筛板污染和堵塞状况的发生 色谱柱非常容易清洗, 由于 整体 结构, 即使长期反冲, 也不会对柱床造成任何损坏 永远不会有柱头塌陷发生 全多孔颗粒色谱柱污染示意图

17 整体柱的优势 5 适用领域广泛, 简化样品前处理工作 独特的 PEEK 柱管和无筛板结构, 特别适用于对金属敏感化合物分离和纯化 ; 不容易被复杂样品基质污染和堵塞, 在食品检测和中药检测显示无可比拟的优势 ; 允许较 脏 样品直接进样, 特别是需要高通量分析且不适合做过多前处理的生物样品分析, 如血样 尿样分析 最少化样品残留 在 是 - 非 检测领域, 如果前一针样品在色谱柱有残留, 很容易造成 假阳性 检测结果发生, 给实验室科学家带来不必要的麻烦 这种现象, 在兴奋剂检测和食品中非法添加物 / 危险污染物检测领域时有发生 硅胶整体柱的独特结构, 能最大限度地避免这种现象发生 节省样品前处理时间和昂贵耗材的使用

18 整体柱的优势 6 高柱效, 且可任意串联多支色谱柱, 提高超级复杂样品的分离 高于 3um 的柱效, 标准 100mm 长的色谱柱便可获得与传统色谱柱 150mm 长度更佳的分离效果 ; 可直接串联色谱柱, 成倍提高分离效果 ; 新一代 1um 大孔径整体柱, 柱效再提升 50%; 2.0mm 和 3.0mm 内径整体色谱柱可以用 习惯 流速获得更佳的分离效果和更短的分析时间, 进一步节省溶剂的同时提高工作效率 方法可线性放大至 10mm ID 和 25mm ID 的半制备和制备规格, 为高效率纯化提供最佳选择

19 整体柱的实际应用 人参皂苷的快速测定 人参皂苷是最重要的中药有效成分之一, 很多名方 验方都会使用含有人参皂苷成分的药材组方, 因此, 人参皂苷也是中药领域非常重要检测的指标成分 人参和三七是含有人参皂苷最重要的两味药材, 按照中国药典一部的方法, 人参检测需要 110min 运行时间, 三七也需要 60min, 而一些含有人参或三七的成方制剂, 也都需要 60~110min 的运行时间, 非常劳心劳力! 色谱柱 :JADE-PAKTM ODS 5um mm( 货号 : ) 人参中人参皂苷测定典型图谱 (App ID )

20 整体柱快速测定方案 1 ( 著名中药企业客户提供 ) 色谱柱 :Chromolith Performance RP-18e mm 色谱条件 Mobile phase:a-water B-ACN Gradient:0-10min 18-18%B;10-17min 18-30%B;17-25min 30-32%B; 25-30min32-90%B Detection:203nm Temp.:30 Flowrate:2mL/min Inj.5ul

21 整体柱快速测定方案 2 (Merck 实验室 ) 色谱柱 :Chromolith Performance RP-18e mm

22 整体柱的实际应用 食品添加剂的检测 热点食品添加剂检测项目 : 防腐剂 : 苯甲酸钾 山梨酸钾等甜味剂 : 糖精钠 安赛蜜 阿斯巴甜等色素 : 柠檬黄 苋菜红 靛蓝 胭脂红 日落黄 亮蓝 赤藓红 诱惑红等 常见问题 : 由于食品富含蛋白质 高分子材料 ( 增稠剂 稳定剂等 ) 和各类营养物质, 基质非常复杂 ; 而且由于食品的多样性原因, 建立通用 有效 简单的前处理方法非常困难 ; 由于样品数量巨大, 实际工作也不适合花费大量时间于样品前处理工作 ; 因此国标方法的前处理相对比较简便, 这便造成色谱柱寿命偏短

23 国家食品安全标准 : GB 乳和乳制品中苯甲酸和山梨酸的测定 色谱柱 :JADE-PAK ODS 5um mm( 货号 : ) 甲醇 :2.5g/l 磷酸二氢钾 +2.5g/l 磷酸氢二钾 (ph6.7)=10:90

24 整体柱快速完全筛查方案 ( 防腐剂 甜味剂 色素一次筛查 ) 色谱柱 :Chromolith Performance RP-18e mm

25 总结 : 整体柱是高通量 HPLC 分析的开创者高效 快速低压 抗污染 长寿命 推荐应用项目 : 药物 : 溶出度试验 含量均匀度试验 中药分析食品 : 食品添加剂 兽药残留 非法添加物生物 : 多肽 肽图测绘 蛋白组学 DMPK/ADME 研究

26 Merck 默克 Chromolith 整体柱现正热销中! 详情来电咨询 /

27 以下为广告时间

28 惊喜一 夏 活动 ( 有效期至 2012 年 8 月 31 日 ) Merck 默克明星色谱柱 + 薄层板, 黄金搭档! 编号 货号 名称 官方报价 套装优惠价 明星柱 Purospher STAR 5µm C mm 硅胶 G 薄层板 Silica gel cm 50/pk 1, 注 : 硅胶 G 薄层板可更换为硅胶 GF254 荧光薄层板 Silica gel 60 F cm 50/pk Merck 默克薄层板买一送一, 再送配套定量毛细管 编号 货号 名称 官方报价 优惠价 硅胶 G 薄层板 Silica gel cm 50/pk 1, 硅胶 GF254 荧光薄层板 Silica gel 60 F cm 50/pk 购买薄层板 3 盒额外赠送定量毛细管 1 盒 (100/PK) 3 定量毛细管 定量毛细管 10ul 5ul 4ul 3ul 2ul 1ul 100/PK 其他规格薄层板优惠活动同期进行, 欢迎来电咨询!

29 惊喜一 夏 活动 ( 有效期至 2012 年 8 月 31 日 ) Thermo 热电 Hypersil BDS C18 色谱柱买一送一! 原价购买 Hypersil BDS 5u C18 250/ mm 分析柱, 即可免费获得相同型号 B 型硅胶 JADE-PAK 系列色谱柱 1 支 产品 编号 名称 官方报价 促销价 活动方式 Hypersil BDS C18 250x4.6mm 5um 3, Hypersil BDS C18 150x4.6mm 5um 3,370 3,5 40 3,3 70 买一送一 买一送一 JADE-PAK ODS-AQ 5um mm(100% 耐水 ) 3, 赠送 JADE-PAK ODS-AQ 5um mm(100% 耐水 ) 3, 赠送

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