Diagnostic Investigation of Respiratory Disease 呼吸系统疾病的诊断调查 Albert Rovira University of Minnesota Leman China Swine Conference 2013

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1 Diagnostic Investigation of Respiratory Disease 呼吸系统疾病的诊断调查 Albert Rovira University of Minnesota Leman China Swine Conference 2013

2 University of Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory 美国明尼苏达大学兽医诊断实验室 Large Animal Diagnostician (pigs >> cows) Service (pathology) >> research > teaching 大型动物诊断者 ( 猪 >> 牛 ) 服务 ( 病理学 )>> 科研 > 教学

3 University of Minnesota Veterinary Pathology 病理 Bacteriology 细菌学 Virology 病毒学 Parasitology 寄生物学 Molecular diagnostics (PCR) 分子诊断 (PCR) 的 Electron microscopy 电子显微镜 Serology 血清学 Endocrinology 内分泌科 Diagnostic Laboratory 美国明尼苏达大学兽医诊断实验室

4 University of Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory 美国明尼苏达大学兽医诊断实验室 70,000 cases/ year, 75% swine 每年 70,000 例案例,75% 关于猪 1.5 million tests/ year 每年 150 万个测试 300 different diagnostic tests 300 种不同的诊断测试 For some tests, results are available at the same day 有些测试的结果当天即可获得

5 Porcine Pneumonia 猪肺炎 Bacterial pneumonia 细菌性肺炎 1. Purulent bronchopneumonia multiple bacteria 化脓性支气管肺炎 - 多种细菌 2. Fibrinonecrotic pleuropneumonia App/A. suis 纤维非坏死胸膜肺炎 - 猪传染性胸膜炎 / 放线杆菌 3. Mycoplasma hyopneumoniae pneumonia 猪肺炎支原体肺炎 Viral pneumonia 病毒性肺炎 4. Interstitial pneumonia - PRRSV, PCV2 间质性肺炎 - PRRSV,PCV2 5. Multifocal pneumonia SIV 多灶性肺炎 - SIV 5

6 1. Purulent Bronchopneumonia 化脓性支气管肺炎 Very common 非常常见 3-wk-old to slaughter pigs 3 周大到待宰的猪 Clinical signs: dyspnea, slow growth 临床症状 : 呼吸困难, 生长缓慢 Bacteria from the upper respiratory tract invade bronchioles and alveoli 从上呼吸道细菌侵入细支气管和肺泡 Pasteurella multocida 多杀性巴氏杆菌 Bordetella bronchiseptica 支气管败血波氏杆菌 Haemophilus parasuis 副猪嗜血杆菌 Streptococcus suis 猪链球菌 Purulent Bronchopneumonia 6

7 Gross lesions: cranioventral lung consolidation: 肉眼看到的病变 : 靠腹部的肺实变 : Color: red/purple tan/gre y 颜色 : 红色 / 紫色 棕褐色 / 灰色 Firm 紧实 Purulent exudate in bronchi 支气管脓性渗出物 Sinks in formalin 在福尔马林中下沉 Purulent Bronchopneumonia 7

8 Microscopic lesions: 电镜下病变 : bronchioles/alveoli filled with neutrophils > macrophages 支气管 / 肺泡充满中性粒细胞 > 巨噬细胞 Purulent Bronchopneumonia 8

9 Diagnosis leads to control measures 诊断为基础的控制措施 Clinical signs 临床症状 Gross lesions 肉眼病变 Microscopic lesions 电镜下病变 Aerobic culture from lung, genotyping, serotyping 肺有氧培养, 基因型, 血清型 Bacterial isolates for antibiotic sensitivity and autogenous vaccine production 细菌菌株对抗生素的敏感性和自体疫苗生产 Concurrent PRRSV, PCV2, SIV, M. hyopneumoniae? - control of primary infections 并发 PCV2,PRRSV,SIV 病毒, 肺炎支原体? - 原发性感染控制

10 2. Fibrinonecrotic Pleuropneumonia 非纤维坏死胸膜肺炎 10-wk-old to slaughter pigs 10 周大的猪到待宰猪 Clinical signs: dyspnea, depression, fever, acute death 临床症状 : 呼吸困难, 抑郁, 发热, 急性死亡 Bacteria from the upper respiratory tract invade bronchioles and alveoli 从上呼吸道细菌侵入细支气管和肺泡 Actinobacillus pleuropneumoniae 胸膜肺炎放线杆菌 Actinobacillus suis 猪放线杆菌 Fibrinonecrotic Pleuropneumonia 10

11 Gross lesions: 肉眼病变 : Localization: anywhere in the lungs, frequently caudal lobes 区域 : 在肺部的任何地方, 经常尾叶 Large areas of hemorrhage/necrosis, sometimes unilateral, sometimes just one focus 大面积的出血 / 坏死, 有时单侧, 有时只有一个焦点 Pleura: fibrinous pleuritis 胸膜纤维素性胸膜炎 Fibrinonecrotic Pleuropneumonia 11

12 Microscopic lesions: 镜下病变 : Large areas of necrosis surrounded by oat cells 燕麦细胞 包围的大片坏死 Oat cells or toxic leucocytes: neutrophils and macrophages affected by bacterial leukotoxins 燕麦细胞或 有毒白细胞 中性白细胞和巨噬细胞受由细菌白细泡毒素影响 Fibrinonecrotic Pleuropneumonia 12

13 App/A.suis diagnosis APP/ A.suis 猪传染性胸膜炎 / 放线杆菌诊断 Clinical signs 临床症状 Gross lesions 肉眼病变 Microscopic lesions 镜下病变 Aerobic culture from lung / PCR / Serotyping 有氧肺培养 / PCR/ 血清型 Bacterial isolates for antibiotic sensitivity and autogenous vaccine production 细菌菌株对抗生素的敏感性和自体疫苗生产 Concurrent PRRSV, PCV2, SIV, M. hyopneumoniae? - control of primary infections 并发 PCV2,PRRSV,SIV 病毒, 肺炎支原体? - 原发性感染控制

14 3. Mycoplasma hyopneumoniae pneumonia 猪肺炎支原体肺炎 10-wk-old to slaughter pigs 10 周大的猪到屠宰猪 Clinical signs: cough, slow growth 临床症状 : 咳嗽, 生长缓慢 Commonly complicated with purulent bronchopneumonia (Pasteurella multocida, others) 常用并发化脓性支气管肺炎 ( 多杀性巴氏杆菌, 其他 ) M. hyopneumoniae colonizes the cilia of the respiratory epithelium 猪肺炎支原体寄生呼吸道上皮的纤毛 Mycoplasma hyopneumoniae pneumonia 14

15 Gross lesions: 肉眼病变 : Cranioventral lung consolidation 靠腹部肺实 Indistinguishable from purulent bronchopneumonia 与化脓性支气管肺炎难区分 Mycoplasma hyopneumoniae pneumonia 15

16 Microscopic lesions: 镜下病变 : Peribronchiolar lymphoid hyperplasia 细支气管周围淋巴组织增生 Increase in alveolar macrophages 肺泡巨噬细胞增加 Alveolar edema 肺泡水肿 Mycoplasma hyopneumoniae pneumonia 16

17 M. Hyopneumoniae diagnosis 猪肺炎支原体诊断 Clinical signs 临床症状 Gross lesions 肉眼病变 Microscopic lesions 镜下病变 PCR, sequencing PRC, 测序 Bacterial isolates for antibiotic sensitivity and autogenous vaccine production 细菌菌株对抗生素的敏感性和自体疫苗生产 Concurrent PRRSV, PCV2, SIV? - control of other infections 并发 PCV2, PRRSV,SIV? - 控制其他感染

18 4. Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) 猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) Reproductive disease in sows: abortions, piglets born weak 母猪繁殖疾病 : 流产, 仔猪出生弱 Respiratory disease in pigs of any age: depression, dyspnea 任何年龄的猪呼吸系统疾病 : 抑郁, 呼吸困难 Frequent complications: pneumonia, polyserositis, diarrhea 常见的并发症 : 肺炎, 多发性浆膜炎, 腹泻 PRRSV 18

19 Interstitial pneumonia (gross lesions): 间质性肺炎 ( 肉眼病变 ): Lungs not collapsed 肺部没有倾陷 Rubbery 胶皮质 Discoloration (multifocal to diffuse) 褪色 ( 多点性弥漫 ) PRRSV 19

20 Interstitial pneumonia (microscopic lesions): 间质性肺炎 ( 显微病变 ): Alveolar damage necrotic alveolitis 肺泡损伤 坏死性肺泡炎 Thickening of alveolar septa by infiltrating lymphocytes 肺泡间隔增厚, 浸润淋巴细胞 PRRSV NORMAL 正常 INTERSTITIAL PNEUMONIA 间质性肺炎 20

21 PRRSV diagnosis PRRSV 蓝耳病毒诊断 Clinical signs 临床症状 Gross lesions 肉眼病变 Microscopic lesions 镜下病变 PCR, sequencing PCR, 测序 Viral isolates for autogenous vaccine production 分离病毒生产自体疫苗 Concurrent, PCV2, SIV, M. hyopneumoniae,? - control of other infections 并发,PCV2,SIV, 猪肺炎支原体,...? - 控制其他感染

22 5. Swine Influenza Virus 猪流感病毒 Affects swine of any age 影响任何年龄的猪 Clinical signs: acute onset of cough, fever, depression, nasal discharge 临床症状 : 急性发作的咳嗽, 发烧, 抑郁, 鼻腔分泌物 Multiple types of influenza viruses: A, B, C 多种类型的流感病毒 A,B,C Swine influenza viruses are type A 猪流感病毒是 A 型 Multiple subtypes: 多种亚型 : H1N1 H3N2 H1N2 Swine Influenza Virus 22

23 Gross lesions: 肉眼病变 : Cranioventral, multifocal (patchy) areas of consolidation 腹侧, 多区域 ( 片状 ) 实化 Very unspecific, can be similar to purulent bronchopneumonia and M. hyopneumoniae pneumonia 非特异, 与化脓性支气管肺炎和肺炎支原体肺炎类似 Swine Influenza Virus 23

24 Microscopic lesions: bronchointerstitial pneumonia 镜下病变 : 支气管间质性肺炎 Influenza virus infects epithelial cells of trachea, bronchi and bronchioles >> alveoli 流感病毒感染的上皮细胞, 气管, 支气管和细支气管 >> 肺泡 Necrosis/attenuation of epithelium: Necrotic bronchiolitis 坏死 / 上皮细胞变薄 : 坏死性细支气管炎 Infiltration of bronchial and peribronchial tissues with lymphocytes > neutrophils 支气管和支气管周围组织浸润淋巴细胞 > 中性粒细胞 Secondary bacterial purulent bronchopneumonia is frequent 继发性细菌性化脓性支气管肺炎频繁 Normal bronchiole 正常支气管 Necrotic epithelium 坏死的上皮 Attenuated epithelium 上皮稀释 Swine Influenza Virus 24

25 SIV diagnosis SIV 猪流感诊断 Clinical signs 临床症状 Gross lesions 肉眼病变 Microscopic lesions 镜下症状 PCR, subtyping, sequencing PCR, 测序亚型 Viral isolates for autogenous vaccine production 病毒培养生产自体疫苗 Concurrent, PCV2, PRRSV, M. hyopneumoniae,? - control of other infections 并发,PCV2,PRRSV, 猪肺炎支原体,...? - 控制其他感染

26 What about serology? 有关血清学? We can run ELISAs for PRRSV, SIV, M. hyopneumoniae, App, Hps, 我们可以用 ELISA 检测 PRRSV,SIV 病毒, 肺炎支原体, 传染性肺炎, 副猪嗜血杆菌 Seroprofiles are good only for well known herds to answer a specific question 血清数据只对已知猪群有用来回答特定问题 Not very useful for diagnostic investigations 对诊断调查用处不大 Most of our serology is to confirm negative herds 大部分血清学是用来确认阴性猪群

27 PNEUMONIA 肺炎 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 CRANIOVENTRAL CONSOLIDATION 实化 PATCHY CONSOLIDATION 斑片状实化 LUNGS NOT COLLAPSED 肺没有倾陷

28 PNEUMONIA 肺炎 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 CRANIOVENTRAL CONSOLIDATION 实化 PATCHY CONSOLIDATION 斑片状实化 LUNGS NOT COLLAPSED 肺没有倾陷 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 PURULENT BRONCHOPNEUMONIA 化脓性支气管肺炎 M. HYOPNEUMONIAE PNEUMONIA 猪肺炎支原体肺炎 NECROTIC BRONCHIOLITIS 坏死性细支气管炎 INTERSTITIAL PNEUMONIA 间质性肺炎

29 PNEUMONIA 肺炎 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 CRANIOVENTRAL CONSOLIDATION 实化 PATCHY CONSOLIDATION 斑片状实化 LUNGS NOT COLLAPSED 肺没有倾陷 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 PURULENT BRONCHOPNEUMONIA 化脓性支气管肺炎 M. HYOPNEUMONIAE PNEUMONIA 猪肺炎支原体肺炎 NECROTIC BRONCHIOLITIS 坏死性细支气管炎 INTERSTITIAL PNEUMONIA 间质性肺炎 App A. suis 胸膜肺炎放线杆菌放线杆菌 P. m. H.p. S.s. B.b. M. Hyopneumoniae 猪肺炎支原体 Influenza Virus 流感病毒 PRRSV, PCV2

30 PNEUMONIA 肺炎 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 CRANIOVENTRAL CONSOLIDATION 实化 PATCHY CONSOLIDATION 斑片状实化 LUNGS NOT COLLAPSED 肺没有倾陷 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 PURULENT BRONCHOPNEUMONIA 化脓性支气管肺炎 M. HYOPNEUMONIAE PNEUMONIA 猪肺炎支原体肺炎 NECROTIC BRONCHIOLITIS 坏死性细支气管炎 INTERSTITIAL PNEUMONIA 间质性肺炎 App A. suis 胸膜肺炎放线杆菌放线杆菌 P. m. H.p. S.s. B.b. M. hyopneumoniae 猪肺炎支原体 Influenza Virus 流感病毒 PRRSV, PCV2 SEROTYPING, GENOTYPING 血清型, 基因型 SEQUENCING FOR STRAIN DIFFERENTIATION 测序区分毒株

31 PNEUMONIA 肺炎 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 CRANIOVENTRAL CONSOLIDATION 实化 PATCHY CONSOLIDATION 斑片状实化 LUNGS NOT COLLAPSED 肺没有倾陷 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 PURULENT BRONCHOPNEUMONIA 化脓性支气管肺炎 M. HYOPNEUMONIAE PNEUMONIA 猪肺炎支原体肺炎 NECROTIC BRONCHIOLITIS 坏死性细支气管炎 INTERSTITIAL PNEUMONIA 间质性肺炎 App A. suis 胸膜肺炎放线杆菌放线杆菌 P. m. H.p. S.s. B.b. M. hyopneumoniae 猪肺炎支原体 Influenza Virus 流感病毒 PRRSV, PCV2 SEROTYPING, GENOTYPING 血清型, 基因型 SEQUENCING FOR STRAIN DIFFERENTIATION 测序区分毒株 ANTIBIOTIC SENSITIVITY 抗生素的敏感性

32 PNEUMONIA 肺炎 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 CRANIOVENTRAL CONSOLIDATION 实化 PATCHY CONSOLIDATION 斑片状实化 LUNGS NOT COLLAPSED 肺不倾陷 FIBRINONECROTIC PLEUROPNEUMONIA 非纤维坏死胸膜肺炎 PURULENT BRONCHOPNEUMONIA 化脓性支气管肺炎 M. HYOPNEUMONIAE PNEUMONIA 猪肺炎支原体肺炎 NECROTIC BRONCHIOLITIS 坏死性细支气管炎 INTERSTITIAL PNEUMONIA 间质性肺炎 App A. suis 胸膜肺炎放线杆菌放线杆菌 P. m. H.p. S.s. B.b. M. Hyopneumoniae 猪肺炎支原体 Influenza Virus 流感病毒 PRRSV, PCV2 SEROTYPING, GENOTYPING 血清型, 基因型 SEQUENCING FOR STRAIN DIFFERENTIATION 测序区分毒株 ANTIBIOTIC SENSITIVITY 抗生素的敏感性 AUTOGENOUS VACCINE PRODUCTION 自体疫苗生产 AUTOGENOUS VACCINE PRODUCTION 自体疫苗生产

33 33

34 PRRSV POSITIVE 蓝而病毒阳性 SIV negative SIV 猪流感阴性 M. hyopneumoniae negative 猪肺炎支原体阴性 A. pleuropneumoniae A. 胸膜肺炎

35 35

36 PRRSV negative 蓝而病毒阴性 SIV POSITIVE SIV 猪流感阳性 M. hyopneumoniae negative 猪肺炎支原体阴性 No bacteria 没有细菌

37

38 PRRSV negative 蓝而病毒阴性 SIV negative SIV 猪流感阴性 M. hyopneumoniae POSITIVE 猪肺炎支原体阳性 A. suis 猪放线杆菌

39

40 PRRSV POSITIVE 蓝而病毒阳性 SIV negative 猪流感阴性 M. hyopneumoniae negative 猪肺炎支原体阴性 S. suis 猪链球菌

41

42 PRRSV negative 蓝而病毒阴性 SIV negative 猪流感阳性 M. hyopneumoniae POSITIVE 猪肺炎支原体阳性 P. multocida, A. pyogenes 多杀性巴氏杆菌牛源化脓隐秘杆菌

43

44 PRRSV negative 蓝而病毒阴性 SIV POSITIVE 猪流感阳性 M. hyopneumoniae negative 猪肺炎支原体阴性 P. multocida 多杀性巴氏杆菌

45

46

47 PRRSV negative 蓝而病毒阴性 SIV negative 猪流感阴性 M. hyopneumoniae POSITIVE 猪肺炎支原体阳性 No bacteria 没有细菌

48

49

50 PCV2 POSITIVE (Ct 15) 圆环 2 阳性 (CT15) PRRSV negative 蓝耳病毒阴性 SIV negative 猪流感阴性 M. hyopneumoniae negative 猪肺炎支原体阴性 H. parasuis, B. bronchiseptica 副猪嗜血杆菌, 支气管败血波氏杆菌

51 PRRSV POSITIVE North American 北美 PRRS 病毒阳性 PRRSV POSITIVE European 欧洲 PRRS 病毒阳性 PCV2 positive (Ct 35) 圆环 2 阳性 (CT15) SIV POSITIVE 流感阳性 M. hyopneumoniae POSITIVE 猪肺炎支原体阳性 P. multocida, H. parasuis 多杀性巴氏杆菌, 副猪嗜血杆菌

52 PRRSV POSITIVE North American 北美 PRRS 病毒阳性 PRRSV POSITIVE European 欧洲 PRRS 病毒阳性 PCV2 positive (Ct 35) 圆环 2 阳性 (CT15) SIV POSITIVE 流感阳性 M. hyopneumoniae POSITIVE 猪肺炎支原体阳性 P. multocida, H. parasuis 多杀性巴氏杆菌, 副猪嗜血杆菌

53 Diagnostic Investigation of Respiratory Disease 呼吸系统疾病的诊断调查 Albert Rovira University of Minnesota Leman China Swine Conference 2013

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