标题

Size: px

Start display at page:

Download "标题"

裹祝
5 years ago
Views:

1 2019 年 3 月 Vol.37 No.3 March 2019 Chinese Journal of Chromatography 313 ~ 318 庆祝 2019 年国际劳动妇女节色谱行业女学者专刊研究论文 DOI: / SP.J QuEChERS 高效液相色谱串联质谱法同时测定有机肥料中 10 种氟喹诺酮类药物残留赵娜 1, 梁嘉诚 2, 时丽艳 1, 吕运开 2 2, 于丽青 (1. 河北省产品质量监督检验研究院, 河北石家庄 ; 2. 河北大学化学与环境科学学院, 河北保定 ) 摘要 : 分析检测有机肥料中的兽药残留对于评价土壤微生物群落和人类健康的潜在风险至关重要该文建立了一种 QuEChERS 联用高效液相色谱串联质谱 (HPLC MS / MS) 同时检测有机肥料中 10 种氟喹诺酮类药物残留的分析方法样品经乙二胺四乙酸二钠 ( EDTA) Mcllvaine 缓冲溶液 (ph = 4.0) 和乙腈提取, 采用 Atlantis T3 C 18 色谱柱 (250 mm 4 6 mm, 5 μm), 以 0 2% ( 体积分数 ) 甲酸水溶液和乙腈为梯度洗脱的流动相, 采用电喷雾离子 (ESI) 源, 在多反应监测 (MRM) 扫描模式下进行检测 10 种氟喹诺酮类药物用内标法定量结果表明,10 种氟喹诺酮类药物在 10~ 500 μg / kg 范围内线性关系良好, 相关系数均大于方法检出限为 0 5 ~ 2 5 μg / kg, 定量限为 1 7~ 8 3 μg / kg 该分析方法成功应用于 9 个有机肥样品的兽药污染调查结果显示, 样品的平均加标回收率为 82 5% ~ 117 1%, 相对标准偏差为 3 4% ~ 10 2% 该方法准确可靠灵敏度高, 能够满足多种兽药残留的同时检测, 该方法有望为有机肥料兽药风险评估提供依据关键词 :QuEChERS; 高效液相色谱串联质谱 ; 氟喹诺酮 ; 有机肥料 ; 残留中图分类号 :O658 文献标识码 :A 文章编号 : (2019) Simultaneous determination of ten fluoroquinolone residues in organic fertilizers by QuEChERS and high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ZHAO Na 1, LIANG Jiacheng 2, SHI Liyan 1, LÜ Yunkai 2, YU Liqing 2 (1. Hebei Academy of Product Quality Supervision &Inspection, Shijiazhuang , China; 2. College of Chemistry and Environmental Science, Hebei University, Baoding , China) Abstract: The analysis of veterinary drugs in organic fertilizers is crucial for an assessment of their potential risks to microbial communities in soils and to human health. A method has been developed for the simultaneous determination of ten fluoroquinolones in organic fertilizers by using the QuEChERS method coupled with high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ( HPLC MS / MS). The sample was extracted with disodium ethylenediami netetraacetic acid ( EDTA) McIlvaine buffer ( ph = 4. 0) and acetonitrile. The target com pounds were separated on an Atlantis T3 C18 column (250 mm 4 6 mm, 5 μm) with a mobile phase of 0 2% (v / v) formic acid in acetonitrile and analyzed in the multiple reaction monito ring ( MRM) mode via electrospray ionization ( ESI). Ten fluoroquinolones were quantified by an internal standard method. The calibration curves of the ten fluoroquinolones exhibited good linearity over the range of μg / kg, and the correlation coefficients were above The limits of detection were μg / kg; the limits of quantification were μg / kg. The analytical method was successfully applied in a survey of veterinary drug contamination in 收稿日期 : 通讯联系人.E mail:yuliqinghbdx@ 126.com. 基金项目 : 河北省自然科学基金 (B ,B ); 河北省质量技术监督局科技计划 (2016ZD19). Foundation item: Natural Science Foundation of Hebei Province ( Nos. B , B ); Hebei Province Quality and Technical Supervision Bureau Science and Technology Plan ( No. 2016ZD19).

2 314 色谱第 37 卷 nine compost samples. The average recoveries were 82 5% %, with relative standard deviations of 3 4% %. The method is accurate, reliable, and sensitive and supports the simultaneous detection of various veterinary drug residues. Therefore, this method can provide a basis for the risk assessment of veterinary drugs in organic fertilizers. Key words: QuEChERS; high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ( HPLC MS / MS); fluoroquinolones; organic fertilizers; residues 抗生素是一类化学物质, 在低浓度下能杀灭或抑制其他微生物大量研究表明, 抗生素消耗增加会导致耐药细菌的出现和传播, 导致抗生素治疗在人类和动物中失败 [1] 鉴于抗生素耐药性的潜在危险, 许多国家已经制定了限制使用这些药物的实用指南 [2] 目前被广泛用于畜禽养殖业的抗生素按照化学结构可分为磺胺类喹诺酮类四环素类氨基糖苷类大环内酯类 β 内酰胺类等 [3] 大部分抗生素在动物肠道中不能完全被机体吸收, 约 60% ~ 90% 的抗生素以其原形或者代谢产物被排泄到动物的粪便或尿液中 [4] 这些动物排泄物与植物物质结合, 可以人工发酵成有机肥料在有机肥中, 由于代谢物再转化为母体化合物, 抗生素非常稳定, 甚至含量增加因此, 兽药可以通过农业施用有机肥到达土壤环境, 进一步影响土壤细菌群落的结构和功能 [5,6] 此外, 研究人员还指出, 土壤中的兽药残留可以被蔬菜吸收, 这可能对人类和动物造成潜在的健康风险因此, 建立一种同时检测多种兽药残留的方法, 研究兽药在有机肥中的迁移机理, 并获得更多的风险评估数据是很有必要的氟喹诺酮类药物 (fluoroquinolones, FQs) 具有广谱高效价格低廉, 杀菌能力强半衰期长等特点, 已广泛用于动物和人类感染性疾病的预防和治疗 [7,8] 不合理的用药导致药物原型或其代谢产物在粪便中残留, 畜禽粪便经过发酵制成有机肥料施于农田土壤, 氟喹诺酮进而被土壤植物和水生生物所吸收富集, 然后进入食物链, 影响食品安全, 最终将不同程度地被人类吸收, 产生毒害作用 [9] 目前, 食品和环境基质 ( 水土壤和污水污泥 ) 中兽药含量测定的分析方法已得到很好的发展 [10-13] 然而, 很少有人关注有机肥 ( 粪肥 ) 中兽药残留的分析目前报道的有机肥样品中兽药残留的前处理方 [14] [15-18] 法主要包括液液萃取和固相萃取等, 液液萃取法通常需大量的化学试剂, 且操作复杂 ; 固相萃取技术具有操作简单价格低廉易于自动化的优点, 但常规的固相萃取吸附剂为非特异性吸附, 吸附性和选择性较差, 对复杂样品的净化和富集较难有机肥料的基质非常复杂, 目标物易被干扰因此, 需要一种准确高效和便捷的样品前处理方法将氟喹诺酮类药物从有机肥料中分离出来并富集检测分散固相萃取样品前处理技术 QuEChERS 具有快速 ( quick) 简便( easy) 廉价( cheap) 有效 (effective) 耐用( rugged) 安全( safe) 等优点, 此方法包含一个液液微萃取过程, 可以除去那些会干扰色谱分析的基质成分因此,QuEChERS 技术具有净化有机肥料药物的潜力近年来在兽药残留检测中应用日趋广泛 [19,20] 本文采用 QuEChERS 技术提取有机肥料样品, 联用高效液相色谱串联质谱 ( HPLC MS / MS), 实现了有机肥料中 10 种氟喹诺酮类药物残留的同时检测该方法具有较高的准确度和精密度, 可为定性和定量分析有机肥料中氟喹诺酮类药物提供一种准确高效的检测方法, 对市场上有机肥料的质量安全监管也具有较高的应用价值 1 实验部分 1.1 仪器与试剂高效液相色谱质谱联用仪 ( 美国 Agilent 公司 ); 色谱柱 Atlantis T3 C 18 色谱柱 (250 mm 4 6 mm, 5 μm)( 美国 Agilent 公司 ); HCT165 离心机 ( 湖南长沙易达仪器有限公司 ); CP214 电子分析天平 ( 奥豪斯仪器上海有限公司 ); SK 1 快速混匀器 ( 上海上登实验设备有限公司 ); 氮吹仪 ( 青岛海科仪器有限公司 ); 真空冷冻干燥机 ( 美国 Virtis 公司 ); 0 22 μm 有机相滤膜 ( 美国 Pall 公司 ) 所有化学试剂无特殊说明外均为分析纯乙腈 ( 色谱纯 ) 磷酸氢二钠磷酸二氢钠( 天津市科密欧化学试剂有限公司 ); 柠檬酸柠檬酸钠磷酸乙二胺四乙酸二钠 ( EDTA)( 天津市恒兴化学试剂制造有限公司 ); 无水硫酸镁 ( 天津市光复精细化工研究所 ); 甲酸 ( 色谱纯 ) 氯化钠( 天津市福晨化学试剂有限公司 ); 西诺沙星 ( 纯度 99 9%) 氧氟沙星

3 第 3 期赵娜, 等 :QuEChERS 高效液相色谱串联质谱法同时测定有机肥料中 10 种氟喹诺酮类药物残留 315 ( 纯度 99 3%) 环丙沙星( 纯度 94 0%) 依诺沙星 ( 纯度 97 5%) 诺氟沙星( 纯度 99 1%) 沙拉沙星 ( 纯度 91 2%) 丹诺沙星( 纯度 94 0%) 洛美沙星 ( 纯度 99 4%) 二氟沙星( 纯度 96 1%) 恩氟沙星 ( 纯度 99 9%) 培氟沙星 ( 纯度 99 0%)( 德国 Dr. Ehrenstorfer 公司 ) 1.2 溶液的配制 EDTA Mcllvaine 缓冲溶液 ( ph = 4 0): 准确称取 34 6 g 十二水合磷酸氢二钠 6 45 g 柠檬酸和 18 6 g 乙二胺四乙酸二钠, 置于烧杯内, 加入 400 ml 超纯水, 用玻璃棒不停地搅拌, 用 1 mol / L 的氢氧化钠溶液调节 ph 值至 4 0, 转移至容量瓶, 用超纯水定容至 500 ml, 即为 0 1 mol / L 的 EDTA Mcllvaine 缓冲溶液磷酸盐缓冲溶液 (ph = 7 2): 称取 12 8 g 十二水合磷酸氢二钠和 2 18 g 二水合磷酸二氢钠, 用超纯水溶解后稀释并定容至 500 ml 标准溶液的配制 : 分别称取 20 mg 11 种药物标准品, 以 0 2% ( 体积分数, 下同 ) 的甲酸水溶液做溶剂, 配制 11 种药物的储备液 (1 000 mg / L), 储存在 4 的黑暗环境中在实验前用 0 2% 甲酸水溶液逐级稀释储备液, 得到工作溶液分别精密吸取 10 μl 除内标物 ( 西诺沙星 ) 外的其他 10 种储备溶液, 加入 10 ml 容量瓶中, 用 0 2% 甲酸水溶液稀释定容, 即得质量浓度为 1 0 mg / L 的混合标准工作液精密吸取 10 μl 11 种标准储备溶液, 加入 10 ml 容量瓶中, 用 0 2% 甲酸水溶液稀释至刻度, 摇匀, 即得质量浓度分别为 1 0 mg / L 的混合标准内标溶液, 待用 1.3 实验条件色谱条件色谱柱 :Atlantis T3 C 18 (250 mm 4 6 mm, 5 μm); 柱温 : 40 ; 进样量 : 5 μl; 流速 : 0 5 ml / min; 流动相 :A 为乙腈,B 为 0 2% 甲酸水溶液 ; 梯度洗脱程序见表 1 表 1 梯度洗脱程序 Table 1 Gradient elution program Time / min φ(mobile phase A) / % φ(mobile phase B) / % Mobile phase A: acetonitrile; mobile phase B: 0 2% ( v / v) formic acid solution 质谱条件离子源 : 电喷雾离子 ( ESI) 源, 正离子模式 ; 离子源温度 : 150 ; 检测方式 : 多反应监测模式 (MRM); 毛细管电压 : V; 喷雾压强 : kpa; 脱溶剂温度 :350 ; 脱溶剂气流量 :3 L / min 10 种兽药的其他质谱参数见表 2 表 2 10 种氟喹诺酮类药物的质谱参数 Table 2 Mass parameters of the ten fluoroquinolones Compound t R / min Parent ion (m / z) Daughter ions (m / z) Collision energies / ev Lomefloxacin hydrochloride , , 22 Pefloxacin methanesulfonate , , 20 Danofloxacin mesylate , , 46 Ofloxacin , , 14 Sarafloxacin hydrochloride , , 14 Norfloxacin , , 13 Enoxacin , , 38 Difloxacin hydrochloride , , 18 Enrofloxacin , , 20 Ciprofloxacin hydrochloride , , 42 Quantitative ion. t R : retention time. 1.4 样品预处理将有机肥料样品冷冻干燥后粉碎, 准确称取 1 0 g, 置于 50 ml 聚丙烯离心管中, 加入 5 ml EDTA Mcllvaine 缓冲液 (ph = 4 0) 和 20 ml 乙腈溶液, 以 r / min 的速度涡旋混合, 涡旋 2 min 后, 加入 1 0 g 无水硫酸镁 0 5 g 氯化钠 0 5 g 柠檬酸钠, 充分混匀, 超声提取 10 min 后, 以 r / min 的速度离心 5 min, 取 5 0 ml 上清液, 于 50 氮吹至干加入 0 5 ml 流动相溶液 ( 流动相 A 流动相 B = 4 6, v / v), 超声溶解, 过 0 22 μm 滤膜后供高效液相色谱质谱仪测定

4 316 色谱第 37 卷 2 结果与讨论 2.1 样品提取时缓冲溶液的优化本研究中测定的 10 种氟喹诺酮类药物均为酸碱两性化合物, 在酸性或碱性条件下均可进行提取 [16] 由于有机肥料基质的特殊性, 在实验过程中如果直接向样品中加入乙腈提取溶液会使样品中氟喹诺酮类药物性质发生改变因此, 在加入乙腈提取溶液前可用缓冲溶液稀释, 使之形成均相体系, 以便目标化合物的提取本试验对比了水和 2 种缓冲溶液 ( 磷酸盐缓冲溶液和 EDTA Mcllvaine 缓冲溶液 ) 在样品前处理时对目标化合物提取得到的色谱峰面积的影响, 结果见表 3 由表可知, EDTA Mcllvaine 缓冲溶液提取样品时提取效率最高, 得到的检测色谱峰面积最大, 故选择 EDTA Mcllvaine 缓冲溶液 (ph = 4 0) 作为样品提取时的缓冲溶液表 3 水和 2 种缓冲溶液提取的 10 种氟喹诺酮类药物色谱峰面积 Table 3 Peak areas of the ten fluoroquinolones extracted with water and two buffer solutions Compound Water EDTA Mcllvaine buffer solution (ph = 4.0) Phosphate buffer solution (ph = 7.2) Lomefloxacin hydrochloride Pefloxacin methanesulfonate Danofloxacin mesylate Ofloxacin Sarafloxacin hydrochloride Norfloxacin Enoxacin Difloxacin hydrochloride Enrofloxacin Ciprofloxacin hydrochloride 色谱条件的优化选择甲醇和乙腈作为流动相进行对比试验结果显示 : 甲醇作为流动相时, 组分色谱峰形易变宽, 组分分离度低而乙腈作为流动相时可明显改善酸碱化合物的峰形, 流动相中加入甲酸可增强化合物的保留性, 且色谱峰分离程度有所提高, 故本试验选用乙腈和 0 2% 的甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱色谱条件优化后得到的 10 种氟喹诺酮类药物的色谱图见图质谱条件的优化氟喹诺酮类药物的分子结构中含有羧基和叔氨图 1 10 种氟喹诺酮类药物标准溶液 (300 μg / L) 的色谱图 Fig. 1 Chromatograms of the ten fluoroquinolone standard solutions (300 μg / L) Peak Nos. and retention times: 1. lomefloxacin hydrochlo ride, 3 2 min; 2. pefloxacin methanesulfonate, 3 8 min; 3. danofloxacin mesylate, 5 0 min; 4. ofloxacin, 6 3 min; 5. sarafloxacin hydrochloride, 6 6 min; 6. norfloxacin, 9 2 min; 7. enoxacin, 11 7 min; 8. difloxacin hydrochloride, 14 1 min; 9. enrofloxacin, 14 5 min; 10. ciprofloxacin hydrochloride, 14 8 min. 基, 具有酸碱两性, 在酸性溶液的条件下呈阳离子状态, 在电喷雾正离子模式下, 极易形成 [M+H] + 准分子离子将所研究的 10 种氟喹诺酮类药物标准溶液分别单标进样, 根据目标物的分子结构特征, 采用一级质谱对目标物进行母离子全扫描, 分析得到 [M+H] + 分子离子峰, 然后二级质谱以分子离子为母离子通过优化 10 种药物目标物的特征离子对毛细管电压雾化室温度碰撞电压等质谱条件, 选取相对丰度强干扰小的离子对作为定性定量离子在进行 MRM 监测时选择信噪比最高的离子对进行检测, 以提高质谱确证的准确性 2.4 基质效应基质效应是由基质中的共提干扰物与目标化合物竞争电离所致通常会对目标化合物的灵敏度准确度和分析方法的重现性等产生影响根据基质标准曲线与溶剂标准曲线的斜率比值来评价基质效应, 若比值在 0 8 ~ 1 2 范围内, 则表明基质效应不明显本文对 10 种氟喹诺酮类药物的基质效应进行了评价 ( 见表 4), 可以看出, 基质效应对各药物无明显影响 2.5 方法学验证线性关系及检出限将标准储备溶液逐级稀释, 配制成质量浓度分别为和 500 μg / kg 的混合标准溶液, 在优化的色谱和质谱条件下进行分析以各

5 第 3 期赵娜, 等 :QuEChERS 高效液相色谱串联质谱法同时测定有机肥料中 10 种氟喹诺酮类药物残留 317 组分进样质量浓度 (μg / kg) 为横坐标峰高为纵坐标绘制标准曲线, 得线性方程 ( 见表 5) 由表可知, 10 种氟喹诺酮类药物的线性相关系数 ( r) 均大于 , 表明各目标物在相应的范围内线性关系良好分别以 3 倍和 10 倍信噪比 (S / N) 确定检出限 (LOD) 和定量限 ( LOQ), 分别为 0 5 ~ 2 5 μg / kg 和 1 7 ~ 8 3 μg / kg Compound 表 4 10 种氟喹诺酮类药物的回收率和相对标准偏差 (n = 3) Table 4 Recoveries and RSDs of the ten fluoroquinolones (n = 3) LOQ spiked level Recovery / % RSD / % 50 μg / kg Recovery / % RSD / % 200 μg / kg Recovery / % RSD / % Lomefloxacin hydrochloride Pefloxacin ethanesulfonate Danofloxacin mesylate Ofloxacin Sarafloxacin hydrochloride Norfloxacin Enoxacin Difloxacin hydrochloride Enrofloxacin Ciprofloxacin hydrochloride 表 5 10 种氟喹诺酮类药物的线性方程相关系数检出限和定量限 Table 5 Linear equations, correlation coefficients ( r), limits of detection ( LODs) and limits of quantification ( LOQs) of the ten fluoroquinolones Matrix effect Compound Linear equation r LOD / (μg / kg) LOQ / (μg / kg) Lomefloxacin hydrochloride Y = X Pefloxacin methanesulfonate Y = X Danofloxacin mesylate Y = X Ofloxacin Y = X Sarafloxacin hydrochloride Y = X Norfloxacin Y = X Enoxacin Y = X Difloxacin hydrochloride Y = X Enrofloxacin Y = X Ciprofloxacin hydrochloride Y = X Y: peak height response value; X: mass concentration (μg / kg) 方法回收率的确定向有机肥料空白样品溶液中添加 LOQ 水平 50 和 200 μg / kg 3 个水平的氟喹诺酮类药物混合标准溶液, 每个浓度水平平行测定 3 次, 以标准曲线定量, 实验结果见表 4 10 种氟喹诺酮类药物的平均回收率为 82 5% ~ 117 1%, 相对标准偏差为 3 4% ~ 10 2%, 结果表明该方法有良好的重现性 2.6 实际样品的测定采用本研究建立的 QuEChERS 联用高效液相色谱质谱测定方法, 检测了市场上常见的 9 种有机肥料样品中的氟喹诺酮类药物残留浓度测定结果 ( 见表 6) 表明, 市场上常见的有机肥料样品中药物残留主要为恩氟沙星氧氟沙星诺氟沙星和环丙沙星这 4 种抗生素在有机肥料中普遍残留的质量浓度范围为 63 0 ~ μg / kg 为验证本方法的表 6 有机肥料中氟喹诺酮类药物残留量测定 (n = 3) Table 6 Determination of fluoroquinolone residues in organic fertilizers (n = 3) Organic fertilizer Nos. Determination / ( μg / kg) Ofloxacin Norfloxacin Enrofloxacin Ciprofloxacin hydrochloride SY SY SY SY SY SY SY SY SY 可靠性, 对本方法中氟喹诺酮类药物的检出范围与 [21] 文献进行对比, 发现两种方法的测定结果非常接近, 表明本法适用于有机肥料中氟喹诺酮类药物残

6 318 色谱第 37 卷留的测定 3 结论本研究采用 QuEChERS 技术对有机肥料复杂基质样品进行前处理, 有效降低了样品基质的干扰, 并联用高效液相色谱质谱技术, 建立了可同时测定有机肥料中 10 种氟喹诺酮类药物残留的分析方法该方法检测成本低周期短准确度高重复性好操作简单快速, 适用于有机肥料质量安全监测时大批量样品中氟喹诺酮类药物残留的筛查和确证参考文献 : [1] Martínez J L. Science, 2008, 321(5887): 365 [2] Landers T F, Cohen B, Wittum T E, et al. Public Health Rep, 2012, 127(1): 4 [3] Shi A. Chinese Journal of Chromatography, 2016, 34 ( 2): 176 石奥. 色谱, 2016, 34(2): 176 [4] Li W H, Shi Y L, Gao L H, et al. Journal of Instrumental Analysis, 2010, 29(10): 987 厉文辉, 史亚利, 高立红, 等. 分析测试学报, 2010, 29(10): 987 [5] He D C. [ PhD Dissertation]. Changsha: Hunan Agricultural University, 2011 贺德春. [ 博士学位论文 ]. 长沙 : 湖南农业大学, 2011 [6] Zhang J Q, Dong Y H, An Q, et al. Soils, 2005, 37(4): 353 张劲强, 董元华, 安琼, 等. 土壤, 2005, 37(4): 353 [7] Zhang J H, Meng T, Zhou Z H, et al. China Animal Hus bandry and Veterinary Medicine, 2014, 41(5): 262 张家禾, 孟婷, 周作红, 等. 中国畜牧兽医, 2014, 41(5): 262 [8] Li X P, Jiang J Q, Qian A D, et al. Progress in Veterinary Medicine, 2013, 34(9): 99 李新朋, 姜金庆, 钱爱东, 等. 动物医学进展, 2013, 34(9): 99 [9] Qian Z Z, Liang Y, Wang L J, et al. Fisheries Research, 2018, 40(4): 286 钱卓真, 梁焱, 王丽娟, 等. 渔业研究, 2018, 40(4): 286 [10] Qiu P Z, Guo X Y, Wang N, et al. Chinese Journal of Chro matography, 2015, 33(7): 722 邱盼子, 郭欣妍, 王娜, 等. 色谱, 2015, 33(7): 722 [11] Yang Y F, Cao X M, Li X L, et al. Chinese Journal of Chro matography, 2016, 34(11): 1063 杨艳菲, 曹旭敏, 李雪莲, 等. 色谱, 2016, 34(11): 1063 [12] Li L, Liu F, Chen H H, et al. Chinese Journal of Chroma tography, 2013, 31(6): 567 李璐, 刘菲, 陈鸿汉, 等. 色谱, 2013, 31(6): 567 [13] Tong Y K, Hu Y, Xia Q F, et al. Chinese Journal of Chro matography, 2017, 35(3): 291 佟育奎, 胡月, 夏琴飞, 等. 色谱, 2017, 35(3): 291 [14] Jacobsen A M, Halling Sørensen B. Anal Bioanal Chem, 2006, 384: 1164 [15] Ho Y B, Zakaria M P, Latif P A, et al. J Chromatogr A, 2012, 1262: 160 [16] Chen Y, Zhang H, Luo Y, et al. Chinese Sci Bull, 2012, 57: 606 [17] DorivalGarcí N, LabajoRecio C, Zafra Gómez A, et al. Talanta, 2015, 138: 247 [18] Speltini A, Sturini M, Maraschi F, et al. J Chromatogr A, 2015, 1410: 44 [19] Yang J Y, Zhang Y, Zeng D P, et al. Science and Technology of Food Industry, 2015(1): 292 杨金易, 张燕, 曾道平, 等. 食品工业科技, 2015(1): 292 [20] Guo H X, Xiao G Y, Zhang X Q, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2015, 33(12): 1242 郭海霞, 肖桂英, 张禧庆, 等. 色谱, 2015, 33(12): 1242 [21] Rao Q X, Zhao J, Min H, et al. Acta Agriculturae Shang hai, 2016, 32(1): 56 饶钦雄, 赵晶, 闵红, 等. 上海农业学报, 2016, 32(1): 56

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0.

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0. 118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI