T/CAIA/SH T/CAIA 中国分析测试协会标准 T/CAIA/SH 食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测 (SAT) 方法 Real-Time Simultaneous Amplification and Testing (SAT) method for d
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- 雅徨 李
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1 T/CAIA 中国分析测试协会标准 食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测 (SAT) 方法 Real-Time Simultaneous Amplification and Testing (SAT) method for detecting Salmonella spp in foods 发布 实施 中国分析测试协会发布 I
2 前言 本标准按照 GB/T 规则起草 本标准由中国分析测试协会标准化委员会提出并归口 本标准起草单位 : 上海交通大学公共卫生学院 中国科学院上海生命科学研究院 上海仁度生物科技有限公司 本标准的附录 A 附录 B 为资料性附录, 附录 C 为规范性附录 本标准主要起草人 : 王慧 储瑞蔼 邱红玲 张常娥 于明辉 本标准为首次发布 II
3 食品中沙门氏菌实时荧光 核酸恒温扩增检测 (SAT) 方法 1 范围 本标准规定了食品中沙门氏菌 (Salmonella spp) 的 SAT 检验技术方法 本标准适用于肉类 蛋品 乳制品及其加工食品等食品中的沙门氏菌的检验 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文 件 凡是不注日期的引用文件, 其最新版本适用于本部分 GB 食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB 食品安全国家标准食品微生物学检验总则 GB /T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 实验室生物安全通用要求 GB/T 实验室质量控制规范食品分子生物学检测 GB/T 实验室质量控制规范食品微生物检测 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 恒温扩增实时荧光检测技术 (Simultaneous Amplification and Testing,SAT): 指 RNA 恒温扩增实时 荧光检测技术 4 SAT 原理 在同一温度下, 以细菌 RNA 为起始模板, 通过 M-MLV 反转录酶产生靶标 RNA 的一个双链 DNA, 然后利用 T7 RNA 多聚酶以该 DNA 为模板产生多个 (100~1000)RNA 拷贝 ; 每个 RNA 拷贝数再从 3
4 反转录开始进入下一个扩增循环 ; 同时, 带有荧光标记的优化探针和这些 RNA 拷贝特异结合后, 打开茎环结构, 从而产生荧光, 根据实时荧光信号的出现时间和强度, 结合阳性对照和阴性对照即可对检测结果进行判定 5 材料和设备除微生物实验室常规灭菌及培养设备外, 其它设备如下 : 5.1 实时荧光恒温检测系统 5.2 台式离心机 5.3 恒温培养箱 :36 ±1 5.4 振荡器 5.5 冰箱 (2 ~8 和 -20 或 -80 ) 5.6 均质器 5.7 电子天平 ( 感量 0.1 g ) 5.8 微量可调移液器及配套无 DNA/RNA 酶吸头 (10μL 100μL 1000μL) 5.9 无 DNA/RNA 酶离心管 (0.5 ml 1.5mL 2.0 ml) 5.10 水浴槽 5.11 恒温混匀仪 5.12 制冰机 5.13 干热恒温器 5.14 分光光度计 5.15 比色皿 6 试剂 除特别说明外, 所用试剂均为分析纯, 水为按照 GB/T 6682 规定的一级水 溶解 RNA 所用的水 必须为无 RNA 酶污染一级水 所用试剂均用无 DNA/RNA 酶污染的容器分装 6.1 缓冲蛋白胨水 (BPW): 见附录 A 中 A 无菌生理盐水 : 见附录 A 中 A 沙门氏菌 SAT 实验相关引物和探针 4
5 上游引物 : 扩增沙门氏菌种属特异性基因的转录产物 RNA 的上游引物 ( 序列见附录 B 中 B. 1.1) 下游引物 : 扩增沙门氏菌种属特异性基因的转录产物 RNA 的下游引物, 包含 T7 启动子识别位点 ( 序 列见附录 B 中 B. 1.1) 沙门氏菌特异性探针 : 探针的 5 端标记荧光报告基团 FAM,3 端标记荧光淬灭基团 DABCYL( 序列见附录 B 中 B. 1.1) 内质控 RNA(IC-RNA), 体外转录成 RNA, 加入到每个反应体系中 ( 序列见附录 B 中 B. 1.1) 内质控探针 : 探针的 5 端标记荧光报告基团 HEX, 3 端标记荧光淬灭基团 DABCYL, 识别内质控 RNA 上的特定序列 ( 序列见附录 B 中 B. 1.1) 6.4 阳性质控品 : 由有资质的权威机构提供沙门氏菌标准菌株,-80 冰箱保存 ( 来源和编号见附录 B1.1) 6.5 SAT 反应液 ( 成分见附录 B. 1.1) 6.6 SAT 酶液 ( 含 M-MLV 反转录酶 T7 RNA 多聚酶等成分, 见附录 B.1.1) 6.7 Trizol 溶液 6.8 氯仿 6.9 异丙醇 6.10 无水乙醇 6.11 RNA 提取试剂盒 6.12 溶菌酶 7 实验室安全防护 实验室结构和设施 安全操作规程 安全设备及个体防护应符合 GB 中二级生物安全防护实验的 要求 8 检测流程 5
6 待测样品 前处理后的样品 选择性增菌液 培养后的可疑菌株 细菌 RNA 提取 SAT 检测 结果判定 阴性结果 阳性结果 传统方法确认 报告结果 9 样本的采集 保存和运送 9.1 样品采集 食品样品的采集按照 GB 要求执行 9.2 样本的保存 样品采集后应尽早检测, 如需保存, 非冷冻样品采集后应立即置 7 ~10 冰箱保存, 冷冻样品置于 -20 冰箱保存 10 实验室检测 实验室质量控制应按 GB/T 和 GB/T 进行 SAT 检测质量控制见附录 C 10.1 样品前处理 下 : 遵行 GB 食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验中的样品制备方法, 简述如 非冷冻样品采集后应立即置 7 ~10 冰箱保存, 尽可能及早检验 ; 冷冻样品应在 45 以下 6
7 不超过 15 min 或在 2 ~5 不超过 18 h 解冻 固体样品以无菌操作取样品 25 g, 若需要增菌培养, 加入 225 ml BPW 肉汤, 若不需要增菌 培养, 则加入 225 ml 无菌生理盐水 8000~10000 r/min 均质 1~2 min, 或放入盛有 BPW 肉汤的 无菌均质袋中, 用拍击式均质器拍打 1~2 min, 制备成 1:10 的样品匀液 液体样品以无菌操作取样品 25 ml, 若需要增菌培养, 加入 225 ml BPW 肉汤中, 振荡混匀 ; 若不需要增菌培养, 则直接取样品进行测试 10.2 增菌 ( 可选择 ) 将上述需要增菌的 1:10 样品匀液 (BPW 肉汤 ) 于 36 ±1 培养 18 h~24 h; 不需要增菌的样 品, 直接取 1:10 样品匀液上清液或样品原液备用 10.3 样品 RNA 提取 样品处理 在样品制备区进行, 为确保检测结果的准确性, 在进行实际样品检测时, 应设立阳性对照 阴性 对照试验 ; 然后提取实际样品 阳性对照样品和阴性对照样品中的 RNA 提取方法 Trizol 法提取 RNA (1) 取 1 ml 样品至 1.5 ml 离心管中,10,000 r/min 离心 1min, 彻底弃掉培养基, 加入 100 μl (400 μg/ml) 溶菌酶,37 悬浮细菌酶解 5-10 min (2) 立即加入 1 ml Trizol 溶液, 盖紧管盖, 激烈震荡 15s, 冰上静置 5min,12,000 r/min 离心 10min, 取上层无色水相转入新的 1.5 ml 离心管中 ; (3) 每管加入 200 μl 的氯仿, 盖紧管盖, 激烈震荡 15s,, 冰上静置 5min,12,000 r/min 2 ~8 离心 10min, 小心吸取上层水相, 转入新的 1.5mL 离心管, 定量 ; (4) 加入等体积的氯仿盖紧管盖, 激烈震荡 15s, 冰上静置 5min,12,000 r/min 2 ~8 离心 10min, 小心吸取上层水相, 转入新的 1.5mL 离心管 (5) 加入 500 μl -20 预冷的异丙醇, 轻轻颠倒混匀 ; r/min 2 ~8 离心 10min, 小心吸去 7
8 上清 ; (6) 加入 500 μl -20 预冷的 75% 的乙醇 ( 使用无 RNA 酶的灭菌水配制 ), 并轻柔颠倒, 洗涤沉淀 ; 12000r/min, 离心 5min, 小心吸去上清 ; 微离, 吸去剩余乙醇, 室温干燥 5 min; (7) 加入 20μL 无 RNA 酶水溶解 RNA (8) 利用分光光度计测定样品 OD260, 以 1 个 OD 相当于 40mg/L RNA 浓度来计算 RNA 浓度 注 :RNA 提取可采用上述方法, 也可使用等效的商品化 RNA 提取试剂盒和 RNA 纯化磁珠等, 并按其说明提取制备模板 RNA 10.4 扩增检测液配制 在 PCR 反应管中按表 1 依次加入反应试剂, 混匀 也可采用经验证的 等效的 SAT 检测反应试剂盒, 见附录 B 表 1 扩增检测液配制 加入试剂成分工作液浓度加样量 /μl SAT 反应液 1 28 μl 上游引物 10 μm 0.25 μl 下游引物 10 μm 0.25 μl 沙门氏菌特异性探 针 10 μm 0.25 μl 内质控探针 10 μm 0.25 μl 内质控 RNA μl RNA 样品 - 2 μl 10.5 恒温扩增检测 8
9 设定荧光检测仪器反应条件为 :42 1min, 共 40 个循环, 荧光通道设定为 F1(FAM) 和 F2 (HEX 或波长相近的其他染料, 如 :VIC), 荧光信号每分钟收集 1 次, 反应体系为 40μL 将上述扩增检测液混匀后取 30μL 转移至微量反应管中, 放置在干热恒温器上 60 保温 10min, 然后 42 保温 5min 快速加入提前预热至 42 的 SAT 酶液 10μL ( 含 2000U MMLV 逆转录酶和 2000U T7 RNA 多聚酶 ) 于每个反应管中,1200rpm 离心 15s 混匀 将微量反应管迅速放置荧光检测仪器内, 立即启动反应程序 11 结果判定 11.1 阈值设定 以阈值线刚好超过阴性对照扩增曲线的最高点来设置荧光信号阈值, 并扣除仪器噪声 11.2 对照检测结果分析 阳性对照出现典型扩增曲线, 且 dt 值 35, 而阴性对照无典型扩增曲线, 且荧光信号低于设定阈 值, 表明反应体系工作正常 否则, 重新检测 11.3 样品检测结果判定 检测结束后, 在反应体系工作正常的前提下, 根据样品的扩增曲线和 dt 值判定结果, 判定情况说 明见表 2 表 2 沙门氏菌实时荧光核酸扩增检测结果判定情况 F2 通道 反应 类别 F1 通道 (FAM) (HEX 或波长 相近的其他染 结果判定 料, 如 :VIC) (1) dt 值 35, 表明 样品中检出沙门氏菌, 检出结果为阳 性 ; (2) 若 35<dt 值 <40, 应重复实验, 如重复检测结果 dt 值 < 40, 则表明样品中检出沙门氏菌, 检出结果为阳性 ; 如重复检测结 果 dt 值 40, 表明样品中未检出沙门氏菌, 检出结果为阴性 9
10 对筛检结果为阳性的样品, 对样品的增菌液或可疑菌落进一步按 GB 中的操作步骤进行确认后报告结果 dt 无数值或 40, 则表明样品中未检出沙门氏菌, 检出结果为阴性 反应失败 样品中可能存在反应抑制物, 或样品比较粘稠, 油脂含 量高等原因影响 RNA 提取, 建议将样品稀释后重新检测 11.4 报告 根据表 2 进行结果判定, 报告 每 25g(mL) 样品中检出或未检出沙门氏菌 10
11 附录 A 培养基和试剂 ( 资料性附录 ) A.1 缓冲蛋白胨水 (BPW) A.1.1 成分 蛋白胨氯化钠磷酸氢二钠 ( 含 12 个结晶水 ) 磷酸二氢钾蒸馏水 10.0 g 5.0 g 9.0 g 1.5 g ml ph 7.2±0.2 A.1.2 制法将各成分加入蒸馏水中, 搅混均匀, 静置约 10 min, 煮沸溶解, 调节 ph, 高压灭菌 121, 15 min A.2 生理盐水 A.2.1 成分 氯化钠 蒸馏水 8.5 g ml A.2.2 制法 称取 8.5g 氯化钠溶于 1000mL 蒸馏水中,121 高压灭菌 15 min 11
12 附录 B ( 资料性附录 ) 食品中沙门氏菌实时荧光核酸扩增检测试剂盒 (Sal.spp.-SAT) 的组成 使用方法和注意事项 检测试剂盒组成及分类由指定单位提供, 仅供参考, 使用时, 可根据所使用产品说明进行操作 B. 1 试剂盒组成试剂盒有试剂 A 和试剂 B 组成, 用于样本的提取及扩增检测 试剂 A 组成成分裂解液核酸提取液洗涤液 主要成分去垢剂捕获探针和磁性颗粒 SDS 试剂 B 组成成分反应液 SAT 酶液检测液阳性对照内标阴性对照 主要成分 dntps NTPs 反转录酶,T7 聚合酶引物 荧光探针 Sal.spp. RNA Sal.spp. IC RNA 生理盐水 B. 1.1 试剂盒各成分的组成 沙门氏菌 SAT 实验相关引物探针序列 : 上游引物 : 5' -GGGAGAAGGCACGCTGAC-3' 下游引物 : 5' AATTTAATACGACTCACTATAGGGAGACAGCCAGCTGGTATCTTCGACTGACTT CAG-3' 沙门氏菌特异性探针 :5'-CCGAGAAGUGAUUUACUCGG-3',5 端标记荧光报告基团 FAM,3 端标记荧光淬灭基团 DABCYL 12
13 内质控探针 :5'-CGCUGGAGCGUGGUGAGCAGCG-3',5 端标记荧光报告基团 HEX, 3 端标记荧光 淬灭基团 DABCYL, 识别内质控 RNA 上的特定序列 内质控 RNA(Sal.spp.IC-RNA): 5'-UCAGGUAACACGAAAUCGUACCCCAAACCGACACAGGUGGUCAGGUAGAGAAUACCAAG GCGCUUGAGAGAACUCGGGUGAAGGAACUAGGCAAAAUGGUGCCGUAACUUCGGGAGAAG GCACGCUGACACGUAGGUUGGAGCGUGGUGAGCUGGAGCUGAAGUCAGUCGAAGAUACCA GCUGGCUGCAACUGUUUAUUAAAAACACAGCACUGUGCAAACACGAAAGUGGACGUAUACG GUGUGACGCCUGCCCGGUGCCGGAAGGUUAAUUGAUGGGGUCAGCGUAAGCGAAGCUCC U GAUCGAAGCCCCGGUAAACGGCGGCCGUAACUAUAACGGUCCUAAGGU-3' 裂解液 :50 mm Tris (ph7.0), 0. 1% (V/V) SDS,1% (V/V) Tri ton X-100,0.1%(V/V) NP-40 核酸提取液 :HEPES 50~400mM, EDTA 40~200mM, LiCl 400~2000mM,0.25uM 捕获探针和 250mg/mL 磁珠 洗涤液 :HEPES 5~50mM, NaCl 150mM, 1%SDS,EDTA 1-10mM 反应液 :Tris 25mM, MgCl 2 10 mm, dntps 1mM,NTPs 5mM,5%(v/v) 丙三醇的溶液 检测液 : 含有 0.27 μm 上游引物,0.27 μm 下游引物,0.18 μm 单链靶核酸检测探针和 0.18 μm 单链内标检测探针 SAT 酶液 : 含有 2000U M-MLV 反转录酶 2000U T7 RNA 聚合酶,20mM Tris,0.1% (V/V)TritonX-100,30mM KCl,0.01mM EDTA,0.1mM DTT,50% (V/V) 丙三醇 内标 : 含有核酸序列的体外转录 RNA 稀释物, 浓度为 copies/ml 阳性对照 : 含有沙门氏菌 23S rrna 部分基因的体外转录 RNA 稀释物, 浓度为 copies/ml 阴性对照 : 为生理盐水和裂解液 1 1 混合的溶液 阳性质控品 :, 沙门氏菌标准菌株编号 :CMCC(B) B.2 试剂盒使用方法 B.2.1 样品制备 遵行 GB 食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验中的样品制备方法, 简述如下 : B 非冷冻样品采集后应立即置 7 ~10 冰箱保存, 尽可能及早检验 ; 冷冻样品应在 45 以下 不超过 15 min 或在 2 ~5 不超过 18 h 解冻 13
14 B 固体样品以无菌操作取样品 25 g, 若需要增菌培养, 加入 225 ml BPW 肉汤, 若不需要增菌培养, 则加入 225 ml 无菌生理盐水 8000~10000 r/min 均质 1~2 min, 或放入盛有 BPW 肉汤的无菌均质袋中, 用拍击式均质器拍打 1~2 min, 制备成 1:10 的样品匀液 B 液体样品以无菌操作取样品 25 ml, 若需要增菌培养, 加入 225 ml BPW 肉汤中, 振荡混匀 ; 若不需要增菌培养, 则直接取样品进行测试 B.2.2 增菌 ( 可选择 ) 将上述需要增菌的 1:10 样品匀液 (BPW 肉汤 ) 于 36 ±1 培养 18 h~24 h; 不需要增菌的样 品, 直接取 1:10 样品匀液上清液或样品原液备用 B.2.3 样品 RNA 提取 B 样品处理 在样品制备区进行, 为确保检测结果的准确性, 在进行实际样品检测时, 应设立阳性对照 阴性对照试验 与样品一起同时提取对照试验中 RNA,RNA 提取体系见表 1 从 Sal.spp.-SAT 提取试剂 A SAT 检测试剂 B( 参见附录 B) 中取出相应试剂, 放置常温, 充分混匀, 按照试剂盒的说明书加入相应试剂和待测样品 样品处理步骤 : 分别加入表 B 1 中所列的 200 μl 样品 阴阳性对照至核酸提取液管中 ( 离心管或 深孔板 ) 每管中依次加入,200 μl 裂解液 100 μl 核酸提取液 10 μl 内标,60 保温 5min, 然后 室温放置 10min 表 B 1 Sal.spp.-SAT 提取体系 加入试剂成分制备方法每个反应管中加入体积 内标取 0.4mL 裂解液, 加入 10μL 内标, 混匀备用 10μL 核酸提取液使用前混匀 100μL 裂解液直接使用 200μL 检测样本 A 阳性对照 : 取 0.2mL 生理盐水, 加入 10μL 200μL 14
15 阳性对照品, 混匀备用 B 阴性对照 : 取 0.2mL 生理盐水, 加入 10μL 阴性对照品, 混匀备用 C 食品样本 : 增菌后培养液或 1:10 生理盐水稀释液, 或样品原液 洗涤液 直接使用 每次 700μL( 仪器提 取 ) 1mL( 手工提取 ) 扩增检测液 ( 扩增体系用于磁珠洗脱, 后期直接带着磁珠进行反应 ) 按照 40 μl 反应液 +2.5 μl 检测液比例直接混合, 振荡混匀,3000rpm 离心 10s 备用 40μL B 提取方法 B 仪器提取 样品处理过程中, 将样品及试剂加入到 96 孔深孔板中, 同时将对应的孔中加入 700μL 洗涤液 (2 次以上洗涤 ), 每个检测液孔中加入 40μL 扩增检测液 按照磁珠吸附核酸 第 1 次洗涤 第 2 次洗涤 释放磁珠至扩增检测液中的步骤, 设置好仪器程序, 进行提取 B 手工提取 将样品处理管 ( 离心管 ) 放置于磁力架上, 静止 5min, 待磁珠吸附于管壁后, 用移液器吸干管盖 和管中的气泡和液体, 保留磁珠 ; 加入洗涤液 2 次, 每次加入 1mL 洗涤震荡后, 重复前面操作 ; 将样 品管移离磁力架, 每管中加入 40μL 扩增检测液, 震荡混匀, 完成提取过程 B.2.4 恒温扩增检测 B 设定荧光检测仪器反应条件为 :42 1min, 共 40 个循环, 荧光通道设定为 F1(FAM) 和 F2(HEX 或波长相近的其他染料, 如 :VIC), 荧光信号每分钟收集 1 次, 反应体系为 40μL B 移取 30μL 上述提取后扩增检测液转移至微量反应管中, 放置在干热恒温器上 60 保温 10min, 然后 42 保温 5min 快速加入提前预热至 42 的 SAT 酶液 10μL 于每个反应管中,1200r/min 离心 15s 混匀 15
16 B 将微量反应管迅速放置荧光检测仪器内, 立即启动反应程序 B.2.5 结果判定 B 阈值设定 以阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线的最高点为荧光信号阈值, 并扣除仪器噪声 B 对照检测结果分析 阳性对照出现典型扩增曲线, 且 dt 值 35, 而阴性对照无典型扩增曲线, 且荧光信号低于设定阈 值, 表明反应体系工作正常 否则, 重新检测 B 样品检测结果判定 检测结束后, 在反应体系工作正常的前提下, 根据样品的扩增曲线和 dt 值判定结果, 判定情况说 明见表 B 2 表 B 2 沙门氏菌实时荧光核酸扩增检测结果判定情况 F2 通道 反应 类别 F1 通道 (FAM) (HEX 或波长相 近的其他染料, 结果判定 如 :VIC) (1) dt 值 35, 表明 样品中检出沙门氏菌, 检出结果为阳性 ; (2) 若 35<dt 值 <40, 应重复实验, 如重复检测结果 dt 值 < , 则表明样品中检出沙门氏菌, 检出结果为阳性 ; 如重复检测结 果 dt 值 40, 表明样品中未检出沙门氏菌, 检出结果为阴性 对筛检结果为阳性的样品, 对样品的增菌液或可疑菌落进一步按 GB 中的操作步骤进行确认后报告结果 dt 无数值或 40, 则表明样品中未检出沙门氏菌, 检出结果为阴性 反应失败 样品中可能存在反应抑制物, 或样品比较粘稠, 油脂含 量高等原因影响 RNA 提取, 建议将样品稀释后重新检测 16
17 B 报告 根据表 B 2 进行结果判定, 报告 每 25g(mL) 样品中检出或未检出沙门氏菌 B.3 注意事项 B.3.1 注意试剂盒的保存, 一般通用情况为 : 试剂 A 应保存于 2 ~30, 试剂 B 应保存于 -15 ~-35 ( 检测液应避光保存 ), 避免反复冻融 试剂 A 和试剂 B 在打开包装使用后可于 2 ~8 存放一个月, 试剂经冷藏可运输一周 使用时, 注意试剂盒使用要在有效期内 B.3.2 使用前应将所有试剂温度平衡至室温 (18 ~26 ), 充分混匀, 洗涤液平衡后仍有白色絮状物沉淀, 采用 37 水浴加热直至澄清 试剂 B 内各试剂在充分融解后, 稍作离心,SAT 酶使用前要离心, 并预热至 42 B.3.3 操作过程中注意防止 RNase 对 RNA 的降解作用, 所有使用的器皿 加样器均为专用, 离心管 吸头等一次性耗材应为灭菌不含 RNase 产品, 操作人员应戴无粉手套 口罩, 穿好工作服进行试验操作 B.3.4 提取时, 如果磁珠吸附过程中, 有个别磁珠难以吸附至管壁, 则应适当延长吸附时间 B.3.5 SAT 酶液加入反应管后, 要立即启动反应, 荧光检测反应需要马上开始 B.3.6 反应结束后, 应将微量反应管取出浸泡于 10% 84 消毒液中, 取微量反应管时, 严禁打开反应管 ( 防止污染反应区域 ) 试验结束后, 用 10% 84 消毒液清洁工作区域及用具, 最后用清水擦拭干净 17
18 附录 C ( 规范性附录 ) SAT 检测质量控制要求 C.1 应用临界弱阳性对照进行实验室质控为了防止出现漏检 ( 假阴性 ) 的情况,SAT 检测实验室应定期应用临界弱阳性对照进行室内质量控制 C.1.1 临界弱阳对照的制备取生理盐水和裂解液按照 1:1 混合作为稀释液, 将试剂盒提供阳性对照品稀释 100 倍即为临界弱阳性对照 C.1.2 临界弱阳性对照的使用方法取 200 μl 生理盐水, 加入 10 μl 临界弱阳性对照, 混匀备用 ; 核酸提取及检测同阳性对照品处理过程 C.2 质量控制所设置阳性对照 临界弱阳性对照和阴性对照的 dt 值应满足以下条件, 否则, 实验视为无效, 需重新进行 1) 阳性对照 临界弱阳性对照 :F1 通道 : 阳性对照 dt 临界弱阳性对照 dt 35,F2 通道 : 有或者无数值 2) 阴性对照 :F1 通道 :dt 无数值或为 40, 同时 F2 通道 :dt 35 18
前言 本标准按照 GB/T 规则起草 本标准由中国分析测试协会标准化委员会提出并归口 本标准起草单位 : 上海交通大学公共卫生学院 中国科学院上海生命科学研究院 上海仁度生物科技有限公司 本标准的附录 A 附录 B 为资料性附录, 附录 C 为规范性附录 本标准主要起草人 : 王慧
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标准名称
ICS 11.220 B 41 团体标准 口蹄疫病毒 O A 和 Asia1 型分型荧光 RT-PCR 检测方法 Real-Time RT-PCR for Detection of Foot and Mouth Disease Viruses serotype O, A and Asia1 ( 征求意见稿 ) 2019- xx-xx 发布 2019 - xx -xx 实施 发布 前 言 本标准按 GB/T
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124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na
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河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,
PCR 条形码试剂盒方案器材和耗材 Oxford NANOPORE Technologies Oxford Nanopore Technologies Oxford Science Park, Oxford OX4 4GA, UK
PCR 条形码试剂盒方案器材和耗材 Nanopore Technologies Science Park, OX4 4GA, UK support@nanoporetech.com www.nanoporetech.com PCR 条形码试剂盒的器材和耗材 PCR 条形码基因组 DNA 英文 器材 Hula mixer (gentle rotator mixer) Hula 混匀仪 ( 低速旋转式混匀仪
<4D F736F F D203538CAB3C6B7CEA2C9FACEEFD1A7BCECD1E92020BEFAC2E4D7DCCAFDB2E2B6A8B8C42E646F63>
中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 National food safety standard Food microbiological examination:aerobic plate count 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施 中华人民共和国卫生部 发布 前 言 本标准代替 GB/T 4789.2-2008 食品卫生微生物学检验菌落总数测定
标准名称
ICS 07.080 A40 中华人民共和国国家标准 GB/TXXXXX XXXX 常见畜禽动物源性成分检测方法实时荧光 PCR 方法 Identification of animal ingredient from common livestock and poultry Real-time PCR 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 ( 征求意见稿 ) XXXX-XX-XX 发布 XXXX-XX-XX
标准名称
ICS 11.220 B 41 团体标准 非洲猪瘟病毒实时荧光 PCR 检测方法 Real-time PCR assay for detection of African swine fever virus 2018-10 - 24 发布 2018-10 - 24 实施 发布 前 言 本标准按 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草 本标准由提出并归口 本标准起草单位 : 中国动物疫病预防控制中心
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 40 94 88 82 77 72 67 62 57 53 48 44 40 37 33 29 26 23 20 17 14 11 8 39 94 88 82 77 71 66 61 57 52 48 44 40 36 32 28 25 22 18 15 12 9 7 38 94 88
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
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中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验 National food safety standard Food microbiological examination:enterobacter sakazakii 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施 中华人民共和国卫生部 发布 前 言 本标准代替 GB/T 4789.40-2008 食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验
公安机关业务管理与执法实务全书（八）.doc
............................................. I ........................... ( )......... II ,, , , ( ) ( ) ( ) ( ) : ( ) ; ( ) ; ( ) ( ) ; ( ) ; ( ) ( ) ; ( ),, : , : ( ) ; ( ), ; ( ) ; ( ) : ( ) ; ( )
GBZ －2004.doc
C 52 GBZ GBZ/T 160.30 2004 Methods for determination of inorganic phosphorus compounds in the air of workplace 2004 5 21 2004 12 1 GBZ/T 160.30-2004 GBZ 1 GBZ 2 [ Phosphorus pentoxide Phosphorus pentasulfide
GB 15973—1995麻风病诊断标准及处理原则
炭 疽 诊 断 标 准 及 处 理 原 则 前 言 GB 17015 1997 炭 疽 (Anthrax) 是 由 炭 疽 芽 孢 杆 菌 (Bacillus anthracis) 引 起 的 一 种 人 与 动 物 共 患 传 染 病, 主 要 存 在 于 食 草 动 物 和 牲 畜 群 落 之 中, 并 能 造 成 环 境 的 广 泛 污 染 由 于 炭 疽 芽 孢 具 有 对 外 界 环 境
中华人民共和国国家环境保护标准
中 华 人 民 共 和 国 国 家 环 境 保 护 标 准 HJ 809-2016 水 质 亚 硝 胺 类 化 合 物 的 测 定 气 相 色 谱 法 Water quality-determination of nitrosamine compounds Gas chromatography ( 发 布 稿 ) 本 电 子 版 为 发 布 稿 请 以 中 国 环 境 科 学 出 版 社 出 版 的
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
<4D F736F F D204B B C8E9CBE1CDD1C7E2C3B8A3A84C4448A3A9B2E2CAD4BAD0A3ACD0DEB6A9C8D5C6DAA3BA
乳酸脱氢酶 (LDH) 测试盒 Cat numberkgt02424/kgt02448 Store at -20 for 3 months For Research Use Only( 科研专用 ) 说明书修订日期 2015.07.13 一. 测定原理乳酸脱氢酶 (Lactate dehydrogenase LDH) 能催化乳酸生成丙酮酸, 丙酮酸与 2,4- 二硝基苯肼反应生成丙酮酸二硝基苯腙,
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
童 或 老 人 在 吸 食 果 冻 时 存 在 进 入 气 管 或 支 气 管 的 隐 患 建 议 三 周 岁 以 下 的 儿 童 必 须 在 监 护 人 的 指 导 下 食 用 学 龄 儿 童 和 老 人 用 小 勺 取 食, 细 嚼 慢 咽 此 外, 果 冻 可 以 给 人 以 饱 腹 感, 儿
果 冻 的 消 费 提 示 一 儿 童 和 老 人 应 谨 慎 食 用 果 冻 由 于 幼 儿 身 体 的 自 我 保 护 机 制 发 育 还 不 完 全, 而 老 人 的 身 体 机 能 有 所 下 降, 所 以 三 岁 以 下 儿 果 冻 是 以 水 食 糖 等 为 主 要 原 料, 辅 以 增 稠 剂 ( 卡 拉 胶 等 ) 等 食 品 添 加 剂, 添 加 或 不 添 加 魔 芋 粉 果 蔬
<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D20332DC1D9B4B2504352BCECD1E9B1EAB1BEB5C4B4A6C0EDA1A2B1A3B4E6BCB0BACBCBE1CCE1C8A1B7BDB7A82DD5D4C9C6C4C8205BBCE6C8DDC4A3CABD5D>
检 验 过 程 临 床 PCR 检 验 标 本 的 处 理 保 存 及 核 酸 提 取 方 法 医 师 申 请 检 验 项 目 申 请 患 者 准 备 患 者 识 别 样 本 采 集 样 本 运 送 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 分 析 测 定 样 本 处 理 分 析 前 分 析 中 分 析 后 报 告 临 床 应 用 烟 台 市 烟 台 山 医 院 赵 善 娜 结 合 临 床 资 料 分 析 结 果 并 确 认 出
兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
Microsoft Word - 第5章.doc
第 5 章 软 件 工 程 标 准 5.1 大 纲 要 求 本 章 对 应 信 息 系 统 项 目 管 理 师 考 试 大 纲 第 6 章 6.2.3 节 的 内 容 考 试 大 纲 中 对 本 章 的 要 求 有 : 软 件 管 理 指 南 GB/T 16680 1996 计 算 机 软 件 产 品 开 发 文 件 编 制 指 南 GB/T 8567 1988 计 算 机 软 件 需 求 说 明
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B8BDBCFE3220B2BCB2A1BCE0B2E2B7BDB0B85F3035303732355F2E646F63>
附 件 2: 全 国 人 间 布 鲁 氏 菌 病 监 测 方 案 ( 试 行 ) 一 概 述 布 鲁 氏 菌 病 ( 以 下 简 称 布 病 ) 是 一 种 由 布 鲁 氏 菌 引 起 的 严 重 危 害 人 民 健 康 和 畜 牧 业 发 展 的 人 畜 共 患 传 染 病, 是 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 规 定 的 乙 类 传 染 病 染 疫 的 家 畜 是 人 间 布
甘肃省水功能区划成果报告
甘 肃 省 地 表 水 功 能 区 划 (2012-2030 年 ) 甘 肃 省 水 利 厅 甘 肃 省 环 保 厅 甘 肃 省 发 展 和 改 革 委 员 会 二 〇 一 二 年 八 月 前 言 水 功 能 区 是 指 为 满 足 水 资 源 合 理 开 发 利 用 节 约 和 保 护 的 需 求, 根 据 水 资 源 的 自 然 条 件 和 开 发 利 用 现 状, 按 照 流 域 综 合 规
全国主要流域重点断面水质自动监测周报
全 国 主 要 流 域 重 点 断 面 水 质 自 动 监 测 周 报 2016 年 第 16 期 中 国 环 境 监 测 总 站 2016 年 04 月 20 日 2016 年 第 16 周 (04 月 11 日 ~04 月 17 日 ), 全 国 主 要 水 系 148 个 水 质 自 动 监 测 断 面 中, 共 监 测 了 143 个, 其 中 Ⅰ 类 水 质 断 面 为 17 个, 占 12%;Ⅱ
<4D F736F F D20D7DC524E41D0A1C1BFD6C6B1B8CAD4BCC1BAD02E646F63>
AxyPrep 总 RNA 小量制备试剂盒 本试剂盒用于从各种动物组织 植物组织 细胞 细菌 酵母和丝状真菌中提取总 RNA 提取的总 RNA 分子完整 纯度高, 适用于 Northern Blot RT-PCR 体外翻译 Primer Extension S1 核酸酶作图 RNase 保护测定 构建 cdna 文库等各种分子生物学实验 一 试剂盒组成 贮存 稳定性 Cat. No. AP-MN-MS-RNA-4
细胞凋亡检测 doc
[ - 1 - ] cell apoptosis detection BMS306FI rh Annexin V FITC KIT 300 test 5000 ANNEXIN V rh Annexin V FITC KIT 200 test 4880 BMS306FI/100T rh Annexin V FITC KIT 100 test 2850 BMS306FI/c rh Annexin V FITC
煤 炭 学 报 仪器与药品 黏土矿物的提纯 黏土样品的制备 红外光谱 分析 射线衍射 分析 射线光电子能谱 分析
张明青 刘炯天 单爱琴 刘汉湖 为了深刻认识煤泥水中 同黏土矿物颗粒之间的相互作用 笔者用 溶液在不同 值条件下分别同高岭土和蒙脱土作用 测定黏土作用前后的 射线衍射 红外光谱和 射线光电子能谱 实验证实了在 溶液中 在黏土表面以静电形式吸附 在 溶液中 以 沉淀和静电形式吸附 此外 在 以上的溶液中还可能存在一 羟基络合吸附形式 提出了 沉淀吸附和一羟基络合吸附的吸附过程模式 黏土颗粒表面的 沉淀使颗粒间形成的非选择性
实验指导编写模板
顾 勇 编 著 2008 年 3 月 目 录 前 言 2 动 物 生 物 学 实 验 守 则 3 实 验 一 : 动 物 的 细 胞 和 组 织 及 多 细 胞 动 物 的 胚 胎 发 育 5 实 验 二 : 原 生 动 物 系 列 实 验 9 实 验 三 : 蛔 虫 和 环 毛 蚓 的 比 较 解 剖 13 实 验 四 :( 或 日 本 沼 虾 ) 和 棉 蝗 的 比 较 解 剖 与 观 察 18
<6D F726E61BDE2BEF6B7BDB0B82DD0DEB8C E657073>
组织样本 mirna 提取细胞样本 mirna 提取全血样本 mirna 提取 TaqMan mirna 反转录试剂盒 通过 HG TaqMan mirna 定量 PCR 试剂盒检测 microrna 1-4 2 3 4 5-6 7-8 7 8 9 B1802 mirna 25T/100T 500/1600 B1803 mirna 25T/100T 500/1600 D1802 HG TaqMan
moibio
说明书 Moibio Blood DNA Mini kit 小量全血基因组 DNA 提取试剂盒 ( 磁性微粒法 ) 货号 : DM104 试剂盒内容 试剂盒组成 DM104-01 (50 次 ) DM104-02 (100 次 ) 细胞裂解液 CL 10ml 20ml 结合液 CC 20ml 40ml 清洗液 CWⅠ 20ml 40ml 清洗液 CWⅡ 50ml 100ml 洗脱液 CS 5ml 10ml
N701
Discover-sc TM WTA Kit Vazyme Biotech Co., Ltd 网站 /Web: 咨询热线 /Tel: 400-600-9335 销售 /Sales: sales@vazyme.com 技术支持 /Support: support@vazyme.com 技术服务 /Service: service@vazyme.com Vazyme biotech co., ltd.
产品简介本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统, 从 100 μl-1 ml 血液中分离纯化高质量基因组 DNA 独特包埋的磁珠, 在一定条件下对核酸具有很强的亲和力, 而当条件改变时, 磁珠释放吸附的核酸, 能够达到快速分离纯化核酸的目的 整个过程不涉及有机试剂, 安全 便捷, 提取
Order: 010-59822688 Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057 TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD 版本号 : DP150128 Magnetic Blood Genomic DNA Kit 磁珠法血液基因组 DNA 提取试剂盒 目录号 :DP329 产品内容 产品组成 DP329-01 DP329-02 (50
g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
标准名称
ICS 点击此处添加中国标准文献分类号 中华人民共和国国家标准 GB/T.2 XXXX 中国汽车行驶工况第 2 部分 : 重型商用车辆 China Automotive Driving Cycle Part II: Heavy-duty commercial vehicles ( 征求意见稿 ) XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施 目次 前言... II 1 范围...
生命科学_一_.doc
I...1...3...6...7...12...13...13 7700...16...16...19...24...24...28...32...36...39...41...45...45...52...53...53...54...59 II...61...63...64...66...68...70 DNA 50...71...75 ----...75...76...78...80...81...83...85...86...88...91
最新文物管理执法全书（十七）.doc
I...1...4...12...21...27...30...36...42...48...54...59...64...69...75...83...88...93...96... 103 DNA... 109 DNA... 115... 129... 133... 144... 146... 148... 151... 156... 160... 162... 168... 178 II 1
前 言 本标准按照 GB/T 给出的规则编写 本标准附录 A 为资料性附录 本标准由中国实验动物学会归口 本标准由全国实验动物标准化技术委员会 (SAC/TC369) 技术审查 本标准由中国实验动物学会实验动物标准化专业委员会提出并组织起草 本标准主要起草单位 : 广东省实验动物监
ICS 65.020.30 B 44 中国实验动物学会团体标准 T/CALAS x-201x 实验动物 多瘤病毒普通 PCR 和实时荧光 PCR 检测方法 Laboratory animals - Methods of conventional PCR and real-time PCR for the detection of Polyoma virus ( 征求意见稿 ) 201x-xx-xx
水功能区划报告
全 国 重 要 江 河 湖 泊 水 功 能 划 (2011-2030 年 ) 二 〇 一 二 年 三 月 全 国 重 要 江 河 湖 泊 水 功 能 划 (2011-2030 年 ) 二 〇 一 二 年 三 月 前 言 水 是 生 命 之 源 生 产 之 要 生 态 之 基 水 资 源 短 缺 水 污 染 严 重 仍 然 是 当 前 制 约 经 济 社 会 可 持 续 収 展 的 主 要 瓶 颈
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Hairpin-it TM mirnas RT-PCR Quantitation Kit For the detection and quantification of mirnas using real-time RT-PCR detection instruments. User Manual Version 1406 1 2 介绍 产品简介 mirna 是由动物 植物和病毒基因组所编码的一种短小单链,
3 案 件 受 理 3.1 刑 事 案 件 的 送 检 人 员 需 提 供 公 检 法 司, 以 及 保 卫 部 门 的 盖 有 公 章 的 鉴 定 委 托 书 或 公 函, 并 出 示 本 人 的 工 作 证 民 事 案 件 的 送 检 人 员 需 提 供 委 托 单 位 或 个 人 的 委 托
法 庭 科 学 DNA 实 验 室 检 验 规 范 GA-T383-2002 1 范 围 本 标 准 规 定 了 法 庭 科 学 DNA 实 验 室 检 验 应 遵 守 的 基 本 要 求 本 标 准 适 用 于 所 有 从 事 法 庭 科 学 检 验 的 DNA 实 验 室 2 定 义 本 标 准 采 用 下 列 定 义 2.1 前 期 检 验 prior examination DNA 检 验
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Hairpin-it TM microrna and U6 snrna Normalization RT-PCR Quantitation Kit For the detection and quantification of mirnas using real-time RT-PCR detection instruments. Catalog No. E22001-E22010 User Manual
卫生检验学实习指导.doc
2007.3 1 ... 1 V B2... 4... 7... 9... 12... 14... 17... 19... 25... 29... 31... 34 2 1. 2. 3. ph= 3-9( ph=5-6) Fe 2+ lgk =21.3 510nm, 1.1 10 4 Fe 2+ Fe 3+ Fe 2+ Fe 2+ 1. 1 cm l ml2m15ml 25ml 2. 1. 000
HJ HJ/T 283-2006 HCRJ 054-1999 Specifications for environmental protection product Recessed plate filter presses and plate and frame filter presses 2006 07 28 2006 09 15 1 1 2 1 3 1 4 4 5 6 6 8 I 2006
1 2 3 3.1 3.2 3.3 PM10 3.4 TVOC 4 4.1 4.2 1 1 1 (m 3 /h. ) 3~5 30 1~2 20 20 20 20 30 10 20 20 20 25 4.3 2 2 PM10 0.08 mg/m 3 500 cfu/m 3 500 cfu/m 3 β- 4.4 3 3 20 g/m 2 00 cfu/cm 2 00 cfu/cm 2 2 4.5 4.5.1
目录 附录 A 实验室结果统计汇总和评价... 1 附录 A1 菌落总数项目结果汇总和统计评价... 1 附录 A2 大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 5 附录 A3 粪大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 9 附录 A4 大肠杆菌项目结果汇总和统计评价 附录 A5 沙门氏菌项目结果
中国检验检疫科学研究院测试评价中心 CNAS PT0026 ACAS-PT030 食品微生物学能力验证计划 中期报告 2014 年 10 月 13 日 本报告是中国检科院测试评价中心 (ACAS) 组织的 ACAS-PT030 食品微生物能力验证计划的中期报告 该中期报告供实验室参考, 结果以最终的结果报告单和技术报告为准 本能力验证计划中定量检测项目按照 ISO13528 标准, 采用稳健统计技术,
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Custom gene qrt-pcr Quantitation Kit For the detection and quantification of mrnas using real-time RT-PCR detection instruments User Manual Version 1406 2 介绍 产品简介 本产品为客户提供了便捷, 准确的基因定量检测试剂, 此反应体系经精心优化,
胶体金测试片0322
Singlepath Duopath 致病菌胶体金免疫测试片 AOAC RI Approved! 查询更多产品信息及价格, 请浏览默克密理博中文网站 : http://www.merckmillipore.com/china/ www.merckmillipore.com 客服电话 : 400 889 1988 上海 上海市浦东新区张江高科晨晖路 88 号二号楼 2 楼电话 :(021)38529000
HJ HJ/T 59-006 HCRJ 034-998 Specifications for environmental protection product Rotary brush aerator 006 04 3 006 06 5 3 4 5 6 3 7 5 8 6 A( ) 8 B 9 C( ) 0 I 006 4 3 006 6 5 (HCRJ 034-998) II HJ/T59 006
目 录 20060526- 卫 计 委 - 人 感 染 高 致 病 性 禽 流 感 应 急 预 案 20071224-( 粤 卫 2007 214 号 )- 广 东 省 人 禽 流 感 防 治 应 急 预 案 20130510- 卫 计 委 - 人 感 染 H7N9 禽 流 感 疫 情 防 控 方
人 禽 流 感 疫 情 防 控 技 术 文 件 汇 编 材 料 (2013 年 8 月 ) ( 仅 供 内 部 学 习 使 用 ) 目 录 20060526- 卫 计 委 - 人 感 染 高 致 病 性 禽 流 感 应 急 预 案 20071224-( 粤 卫 2007 214 号 )- 广 东 省 人 禽 流 感 防 治 应 急 预 案 20130510- 卫 计 委 - 人 感 染 H7N9 禽
材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响
水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况
Microsoft Word - sybr PCR 说明书200T doc
4ul 模板 --- 质粒 DNA(10-10 7 拷贝 ) 基因组 DNA(100pg-1ug) 或 cdna(1pg-100ng) 加入模板的体积可作适当调整, 但不应超过 10ul 4 将加好模板的 PCR 反应管进行短暂离心, 以确保所有试剂流到管子底部 5 PCR 反应 Real Time PCR 反应程序设置如下 : 三步法反应程序设置如下 : 94,2min; 94,10s, 60,15s,
X MGC X 22 X 23 X MGC X BALB/c 26 X MGC X MGC X MGC X..
1 0 3 8 4 9726023 UDC X MGC80-3 2000 7 2000 7 2000 7 2000 6 22.3.4...11..11 12 13 15 15 20 20 X MGC80-3. 22 X 22 X 23 X MGC80-3.23 X BALB/c 26 X MGC80-3.27 X MGC80-3 28 29 29 30 31 32 33 X MGC80-3 34 X..34.35.36
STM 系列高温加热套 ( 至 650 ) 650, STM1401 STM1501 3,,, 4 3,STM1401 STM1501 ml STM STM STM
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细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
实验前需准备的材料 离心机 已灭菌的 1.5 ml 离心管 水浴锅 无水乙醇 异丙醇 不同体积样品 DNA 的收获量 材料来源样品量收获量 人全血 (DNA 收获量会因为白细胞的量而有差别 ) 300 μl 5-15 μg 5 ml μg 10 ml μg 12 ml
VER:1010 盐析法血液基因组 DNA 提取试剂盒 (GD2516 EZgene TM SQ Blood gdna Kit) 产品组成 成分 GD2516-00 GD2516-01 GD2516-02 GD2516-03 Total Blood Volume 10 ml 50 ml 150 ml 300 ml 4 x Buffer ML* 15 ml 75 ml 225 ml 450 ml Buffer
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TM CommaX Plant Genomic DNA Kit 植物基因组 DNA 提取试剂盒 ( 离心柱型 ) 本说明书 (1.0 版 ) 适用于货号为 MNP006-1 MNP006-2 的产品 所有的技术文献均可以从本公司网站 www.biocomma.cn 得到 请访问本公司网站以确保您所使用的技术手册为最新版本 版本号 :BP029-1 www.biocomma.com 植物基因组 DNA
D 慢 性 肾 炎 E 子 宫 蓄 脓 7. 支 气 管 肺 炎 的 X 线 影 征 是 A 黑 色 阴 影 B 密 度 均 匀 的 阴 影 C 大 小 不 一 的 云 絮 状 阴 影 D 边 缘 整 齐 的 大 块 状 阴 影 E 整 个 肺 野 出 现 高 密 度 阴 影 8. 以 波 幅 变
2010 年 国 家 执 业 兽 医 资 格 考 试 试 卷 ( 下 午 卷 ) 临 床 科 目 A 1 型 题 答 题 说 明 每 一 道 考 试 题 下 面 有 A B C D E 五 个 备 选 答 案, 请 从 中 选 择 一 个 最 佳 答 案, 并 在 答 题 卡 上 将 相 应 题 号 的 相 应 字 母 所 属 的 方 框 涂 黑 1. 检 查 浅 表 淋 巴 结 活 动 性 的 基
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Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1
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A2 1 mm U V mm a 1140V a Xmm 1 Xmm 2 V Xmm Xmm 3 4 Xmm 5 Xmm 6 Xmm Xmm 7 8 9 Xmm 10 C dd dd 11 a) b) c) i) ii) d)ip4x 4 X 2.5mm 350 GB/T 4942.1 GB 4208 a) IP 54 b) IP44 a IP44 b) IP24 P C C 6.3 4 I C
一 概 述 ( 一 ) 兽 药 和 兽 药 残 留 的 概 念 掌 握 典 型 的 兽 药 : 是 指 用 于 预 防 和 治 疗 畜 禽 疾 病 的 药 物 但 是, 随 着 集 约 化 养 殖 生 产 的 开 展, 一 些 化 学 的 生 物 的 药 用 成 分 被 开 发 成 具 有 某 些
食 品 中 兽 药 残 留 检 验 一 概 述 二 兽 药 残 留 的 检 验 一 概 述 ( 一 ) 兽 药 和 兽 药 残 留 的 概 念 掌 握 典 型 的 兽 药 : 是 指 用 于 预 防 和 治 疗 畜 禽 疾 病 的 药 物 但 是, 随 着 集 约 化 养 殖 生 产 的 开 展, 一 些 化 学 的 生 物 的 药 用 成 分 被 开 发 成 具 有 某 些 功 效 的 动 物 保
附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
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产品简介康为二代测序快速 DNA 建库试剂盒 (Ion torrent) 提供了构建 DNA 文库需要的酶预混体系及反应缓冲液, 包含除接头以外的所有成分, 制备的文库可用于 Ion torrent PGM Ion Proton 二代测序平台的测序 和常规建库方法相比, 该试剂盒将多个步骤进行了合并
微信订购 : 扫一扫右侧二维码 网站订购 :www.cwbiotech.com 服务热线 :4006-222-360 版本号 :10/2016 NGS Fast DNA Library Prep Set for Ion Torrent 目录号 :CW2639S (24 rxns) CW2639M (96 rxns) 保存条件 :-20 保存, 干冰运输 产品内容 Component CW2639S
111123, Job 97
ICS 25.120.10 J62 JB/T 3185.1-1999 中 小 型 三 辊 卷 板 机 技 术 条 件 1999-05-14 发 布 2000-01-01 实 施 国 家 机 械 工 业 局 发 布 JB/T 3185.1-1999 前 言 本 标 准 是 对 JB 3185 82 中 小 型 三 辊 卷 板 机 技 术 条 件 的 修 订 本 标 准 与 JB 3185 82 相 比,
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All-in-One TM qpcr Primer Manual and Validation Report Catalog number: HQP006940 GeneCopoeia, Inc.; 广州复能基因有限公司 地址 : 广州高新技术产业开发区广州科学城掬泉路 3 号广州国际企业孵化器 D 区 8 楼定购热线 :4006 020 200 技术支持 :020-32068595 传真 :020-32052877
(Microsoft Word - \254\354\256i\(1\).doc)
神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶
![去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶](/thumbs/42/23090277.jpg "去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶")
第 一 节 细 胞 培 养 的 相 关 技 术 1 细 胞 的 复 苏 概 述 复 苏 细 胞 要 求 快 速 融 化 的 手 段, 这 样 可 以 保 证 细 胞 外 结 晶 在 很 短 的 时 间 内 即 融 化 避 免 由 于 缓 慢 融 化 使 水 分 渗 入 细 胞 内 形 成 胞 内 再 结 晶 对 细 胞 造 成 损 害 用 品 培 养 液 吸 管 离 心 管 培 养 瓶 步 骤 [1]
未命名 -1
TM CommaX Blood Genomic DNA Kit 血液基因组 DNA 提取试剂盒 ( 离心柱型 ) 本说明书 (1.0 版 ) 适用于货号为 MNP002-1 MNP002-2 的产品 所有的技术文献均可以从本公司网站 www.biocomma.cn 得到 请访问本公司网站以确保您所使用的技术手册为最新版本 版本号 :BP024-1 www.biocomma.com 血液基因组 DNA
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关 于 推 荐 深 圳 市 禅 游 科 技 股 份 有 限 公 司 股 份 进 入 全 国 中 小 企 业 股 份 转 让 系 统 挂 牌 并 公 开 转 让 的 备 案 申 请 全 国 中 小 企 业 股 份 转 让 系 统 有 限 责 任 公 司 : 根 据 全 国 中 小 企 业 股 份 转 让 系 统 业 务 规 则 ( 试 行 ) 和 全 国 中 小 企 业 股 份 转 让 系 统 主 办
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( IDI (材料与方法 0(材料 00(菌种 大肠埃希菌 7# 产气肠杆 菌 7 1 阴 沟 肠 杆 菌, # 变 形 杆 菌, 表 皮 葡 萄 球 菌, 蜡 样芽胞杆菌, 均为本实验室保藏( 00(主要仪器与试剂 # 荧光定量 +仪
实时荧光定量 +法快速检测食品中大肠埃希菌胡朝友等 ( 实验技术与方法 实时荧光定量 +法快速检测食品中大肠埃希菌 胡朝友 洪志强 张梦寒 昆山市疾病预防控制中心江苏 昆山(# 苏州市疾病预防控制中心江苏 苏州(## 摘(要 目的(应 用 实 时 荧 光 定 量 +技 术 结 合 b# = 的 前 增 菌 处 理 建 立 食 品 中 大 肠 埃 希 菌 的 快 速 灵 敏 定 量 的 检 测 方 法
1116 检验医学 2014 年 11 月第 29 卷第 11 期 LaboratoryMedicine,November2014,Vol29.No11. 荧光恒温扩增技术 (simultaneousamplification andtest,sat) 是近年来发展起来的一种新型的核酸扩增技术, 结
检验医学 2014 年 11 月第 29 卷第 11 期 LaboratoryMedicine,November2014,Vol29.No11. 1115 文章编号 :1673 8640(2014)11 1115 05 中图分类号 :R446.1 文献标志码 :A DOI:10.3969/j.isn.1673 8640.2014.11.009 荧光恒温扩增技术检测肠道病毒 71 型方法的建立与评价
FOREGENE Plant Leaf Direct qpcr Kit-Taqman Instruction Manual Plant Leaf Direct qpcr Kit- Taqman Plant Leaf Direct qpcr Kit-Taqman Plant Leaf Direct q
Plant Leaf Direct qpcr Kit- Taqman Plant Leaf Direct qpcr Kit-Taqman Plant Leaf Direct qpcr Kit (UNG)-Taqman For performing qpcr directly from Plant leaves containing low polysaccharide and polyphenol
1 适 用 范 围 本 使 用 说 明 书 适 用 于 强 化 木 地 板 的 铺 装 前 准 备 铺 装 及 使 用 过 程 2 主 要 特 征 2.1 定 义 浸 渍 纸 层 压 木 质 地 板 ( 商 品 名 称 为 强 化 木 地 板 ) 是 以 一 层 或 多 层 专 用 纸 浸 渍 热
前 言 木 地 板 使 用 说 明 书 共 分 6 部 分, 分 别 为 实 木 地 板 使 用 说 明 书 多 层 实 木 复 合 地 板 使 用 说 明 书 三 层 实 木 复 合 地 板 使 用 说 明 书 强 化 木 地 板 使 用 说 明 书 竹 地 板 使 用 说 明 书 软 木 类 地 板 使 用 说 明 书 本 部 分 为 强 化 木 地 板 使 用 说 明 书, 涉 及 内 容 为
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08-05 -RT-PCR Kit- rtth DNA polymerase RT-PCR high Plus- 逆转录一次成功 (Code No.:PCR-301) 使用说明书 研究用 TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN 目录 [1] 前言... 1 [2] 本试剂盒的特点... 1 [3] 本试剂盒的组成 (50 次份 )...
Microsoft Word 王颖 _1_
4 5 Vol. 4 No. 5 2013 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2013 PCR 王 颖 1*, 史艳宇 1, 刘金华 2, 吕航 1, 王莹 1 (1., 130022; 2., 130062) 摘要 : 目的 方法 12S rrna, PCR, ; ; 50 mg/kg DNA DNA, 结果,, ( 0.1 μg/kg) 结论,,
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Microsoft Word - RNA大量制备试剂盒 ver301.doc
AxyPrep 总 RNA 大量制备试剂盒 本试剂盒用于从各种动物组织 植物组织 细胞 细菌 酵母和丝状真菌中提取总 RNA 提取的总 RNA 分子完整 纯度高, 适用于 Northern Blot RT-PCR 体外翻译 Primer Extension S1 核酸酶作图 RNase 保护测定 构建 cdna 文库等各种分子生物学实验 一 试剂盒组成 贮存 稳定性 Cat. No. AP-MX-MS-RNA-2
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TM CommaXP N96 Plasmid Kit N96 质粒小提纯化试剂盒 本说明书适用于货号为 MNP019-1 的产品 所有的技术文献均可以从本公司网站 www.biocomma.cn 得到 请访问本公司网站以确保您所使用的技术手册为最新版本 版本号 :BP061-1 www.biocomma.com TM CommaXP N96 Plasmid Kit N96 质粒小提纯化试剂盒 产品概述
产品简介本试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统, 样品裂解后, DNA 在高盐条件下与硅胶膜结合, 在低盐 高 ph 值时 DNA 从硅胶膜上洗脱下来 本试剂盒用于从小剂量的血液 干血点 血清 / 血浆 微量组织 漱口水 毛发 微切割组织等微量样品中提取基因组 DNA, 所得基
Order: 010-59822688 Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057 TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD 版本号 : DP121221 TIANamp Micro DNA Kit 微量样品基因组 DNA 提取试剂盒 ( 离心柱型 ) 目录号 :DP316 产品内容 产品组成 DP316 (50 preps) 缓冲液 GA(Buffer
201320142015 99.4% 98.6% 99.0% 1. 1999GB17761-1999 1999 5 28 1999 10 1 GB17761-1999....... 5.1.1 6.1.1 5.2.1 6.2.1 5.2.2 6.2.2 89
2005 7 9 2005 9 1 2005 9 15 2014 4 212014 8 1 2010 8 25 201090 2003 2009 88 201320142015 99.4% 98.6% 99.0% 1. 1999GB17761-1999 1999 5 28 1999 10 1 GB17761-1999....... 5.1.1 6.1.1 5.2.1 6.2.1 5.2.2 6.2.2
討論
MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5
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213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58
赵世嘏 高乃云 楚文海 微曝气工艺是在常规 基础上发展起来的 试验表明在紫外光强 投加量为 三氯乙酸 初始浓度约为 的情况下 后该工艺对 的去除达到 以上 工艺效果受 光强 投加量 初 始浓度和 的影响 其他条件一定时 随着 光强和 投加量的增大 去除率增加 然而 投加量超过 后 去除效果增加缓慢 对不同初始浓度 时去除率最 高 而后浓度增加 去除率下降 中性或弱酸性 条件下更有利于降解 消毒副产物
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SD-PM1000 GB 4706.1-2005 GB 4706.14-2008 Q/XMJS 010-2015 Panasonic P. 3 4 Panasonic... 3... 4... 5... 5... 6... 6... 6... 7... 7... 8... 9... 12... 14... 14... 14... 15... 15... 15... 16... 17... 17...
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中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB 5413.3 2010 食 品 安 全 国 家 标 准 婴 幼 儿 食 品 和 乳 品 中 脂 肪 的 测 定 National food safety standard Determination of fat in foods for infants and young children, milk and milk products 2010-03-26
ICS 13.220 C 80 S Z D B /Z SZDB/Z 74 2013 201-01-24 2013-02-01 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. B C I GB/T 1.1-2009 II GB 50016 GB 50157 GB 50490 GB 50098 GB 50116 GB 50166 GB 50243 GB 50261 GB 50263 GB/T 21197
实验一 氨基酸的分离鉴定—纸层析法
生 物 化 学 实 验 讲 义 内 蒙 古 科 技 大 学 生 物 与 化 学 工 程 学 院 基 础 生 物 教 学 部 2010 年 1 月 目 录 实 验 一 氨 基 酸 的 分 离 鉴 定 纸 层 析 法 2 实 验 二 琼 脂 糖 电 泳 法 分 离 DNA...3 实 验 三 乳 中 酪 蛋 白 的 分 离.5 实 验 四 3,5 二 硝 基 水 杨 酸 法 测 定 还 原 糖.6 实
绿化养殖
...1...13...15...20...23...38...62...64...67...68...70...72...74...76...77...78...80...82... 101... 107... 108 II ... 109... 113... 116... 119... 123... 130... 132... 136... 137... 139... 144... 148...
序 16 9 哌 拉 西 林 射 剂 2g, 冻 干 粉 华 北 制 药 集 团 山 西 博 康 药 业 有 限 公 司 17 9 哌 拉 西 林 射 剂 500mg, 冻 干 粉 华 北 制 药 集 团 山 西 博 康 药 业 有 限 公 司 18 9 哌 拉 西 林 射 剂 1g, 冻 干 粉
附 表 一 部 分 单 独 药 品 表 金 额 : 元 序 序 1 7 阿 莫 西 林 胶 囊 250mg*24 香 港 澳 美 制 药 厂 ( ) 13.7 * 2 7 阿 莫 西 林 胶 囊 250mg*30 香 港 澳 美 制 药 厂 3 7 阿 莫 西 林 胶 囊 250mg*36 香 港 澳 美 制 药 厂 4 7 阿 莫 西 林 胶 囊 500mg*12 香 港 澳 美 制 药 厂 5
ND 张婷
Library Preparation VAHTS TM Turbo DNA Library Prep Kit for Illumina Vazyme Biotech Co., Ltd 网站 /Web: 咨询热线 /Tel: 400-600-9335 销售 /Sales: sales@vazyme.com 技术支持 /Support: support@vazyme.com 技术服务 /Service:
(CIP) : /,. - :, ISBN R CIP ( 2003) : : : : 31, : ( 010 ) ( ) : http: : gph.
(CIP) : /,. - :,2004.1 ISBN 7-116-03999-6... -.R161-62 CIP ( 2003) 117262 : : : : 31, 100083 : ( 010 ) 82324508 ( ) : http: www.gph.com.cn : zbs@ gph.com.cn : ( 010 ) 82310759 : : 787 mm 1092mm 1 / 32
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JB JB 4730.5 2004 JB 4730 1994 5 Nondestructive Testing of Pressure Equipments Part 5 Penetrant Testing 2005-07-26 2005-11-01 1.. 2.. 3.. 4.. 5.. 6.. 7.. 8.. 9. A.. B.. JB /T4730.1-4730.6-2005 1 2 3 4
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山 西 省 人 工 影 响 天 气 公 共 服 务 标 准 体 系 编 制 说 明 山 西 省 人 工 降 雨 防 雹 办 公 室 2016 年 5 月 山 西 省 人 工 影 响 天 气 公 共 服 务 标 准 体 系 创 新 团 队 带 头 人 : 李 培 仁 成 员 : 郭 学 良 贺 青 亮 张 青 裴 真 孙 鸿 娉 李 军 霞 李 义 宇 蔡 立 华 任 晓 霞 任 刚 申 东 东 封
2008 24 2004 28 2006 31 2008 3 2004 1 2004 232 2 2 1 2006 48 2 GB/T4754-2002 3 1 2 3 100 3 4 ++ 100 5 100 4 ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ) ) ( ) ( ( ) ( ( ) ( ) 5 ( ) ( ) ( ) ( ) ( )