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卯宗政
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1 2018 年 2 月第 26 卷第 1 期中国实验动物学报 ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA February 2018 Vol. 26 No. 1 研究报告高脂饲料喂养时间对 2 型糖尿病肾病大鼠模型的影响高雪, 安至超, 何其英, 柳红芳 ( 北京中医药大学东直门医院, 北京 ) 摘要目的探索不同高脂饲料喂养时间对诱发型 2 型糖尿病肾病 (DN) 大鼠模型血糖胰岛素抵抗指数 (HOMA IR) 及尿白蛋白排泄率 (UAER) 等的影响方法采用单侧肾动脉结扎 + 高脂饲料喂养 + 小剂量链脲佐菌素 (STZ) 腹腔注射的方法造模, 结扎单侧肾动脉后, 组及组分别予高脂饲料喂养 4 周或 8 周, 其后予 STZ 30 mg / kg 腹腔注射, 比较两组大鼠在 STZ 注射 4 周后及实验结束时的 UAER, 观察两组大鼠血糖体重 HOMA IR 肾指数及肾脏病理等情况结果 STZ 注射 4 周后, 两组大鼠均可出现 UAER 的升高, 且组 UAER 明显高于组 (P < 0 01) 第 12 周末, 组与组肾组织 HE 染色均可见肾小球毛细血管袢肥大, 系膜基质增多 ; 肾小囊腔狭窄等病理改变组体重高于组 ( P < 0 01), 肾指数低于组 ( P < 0 01), 而血糖血清胰岛素水平 HOMA IR 及 UAER 与组相比差异无显著性 ( P > 0 05) 结论重 DN 肾损害, 但有可能会推迟干预时间, 因此在试验中应权衡选择关键词 2 型糖尿病 ; 糖尿病肾病 ; 动物模型 ; 高脂饮食中图分类号 Q95 33 文献标识码 A 文章编号 (2018) Doi: / j. issn 延长高脂饲料喂养时间能够加 Effects of high fat diet feeding time on the establishment of a rat model of type 2 diabetic nephropathy GAO Xue, AN Zhichao, HE Qiying, LIU Hongfang ( Dongzhimen Hospital, Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing , China) Corresponding author: LIU Hongfang. E mail: lhfdoctor@ 126. com Abstract Objective To investigate the effects of different high fat diet feeding time durations on blood glucose (BG), insulin resistance index ( HOMA IR), and urinary albumin excretion rate ( UAER) in rats with high fat diet induced type 2 diabetic nephropathy ( DN). Methods Unilateral renal artery ligation, high fat diet ( throughout the ex periment period), and low dose streptozotocin ( STZ) intraperitoneal injection were used to establish a type 2 DN rat mod el. After the operation, rats in the and groups received an intraperitoneal injection of STZ 30 mg / kg after 4 and 8 weeks of high fat diet feeding, respectively. UAERs of the and groups were compared at 4 weeks after the STZ injection and the end of study ( EOS). BG, body weight, HOMA IR, kidney index, and pathological changes of the kidney were observed. Results UAER was increased in both groups at 4 weeks after the STZ injection, but significantly higher in the group than in the group (P < 0 01). At the end of study (the 12th week), the renal tissues showed patho logical changes, including glomerular capillary loop hypertrophy, increased mesangial matrix, and decreased capsule space in both groups. Compared with the group, the body weight was significantly higher (P < 0 01), kidney index was sig nificantly lower (P < 0 01), while BG, serum insulin level, HOMA IR, and UAER were no significantly changed in the DM2 group (P > 0 05, respectively). Conclusions The results show that extending the feeding time of high fat diet can aggravate the kidney damages in diabetic rats, but it can also delay the start of any planned intervention. Therefore, the ex [ 基金项目 ] 北京市自然科学基金项目 ( 编号 :No ) Funded by Beijing Natural Science Foundation( No ). [ 作者简介 ] 高雪 ( ), 女, 博士研究生, 专业 : 中医药防治内分泌疾病 gaoxuecarol@ 163. com [ 通信作者 ] 柳红芳 ( ), 博士, 主任医师, 教授, 博士生导师, 研究方向 : 中医药防治内分泌疾病 lhfdoctor@ 126. com

2 中国实验动物学报 2018 年 2 月第 26 卷第 1 期 Acta Lab Anim Sci Sin,February 2018,Vol. 26 No perimental protocol should be carefully designed based on the study objective. Key words type 2 diabetes mellitus; diabetic nephropathy; animal model; high fat diet Conflict of interest statement: We declare that we have no conflict of interest statement. 糖尿病肾病 ( diabetic nephropathy, DN) 是糖尿病 (diabetes mellitus, DM) 的慢性微血管并发症之一, 严重威胁着患者的生存质量和寿命 [1] 胰岛素抵抗及高胰岛素血症是 2 型 DM 的特征性表现研究发现 2 型 DM 患者肾脏并发症的发生时间和产生机制都与 1 型 DM 不完全相同, 肾胰岛素信号转导 [2 - 异常在 2 型 DN 的产生中发挥重要作用 3] 因此制备更符合人类疾病特点的动物模型成为 2 型 DN 研究中的重要环节单侧肾动脉结扎 + 高糖高脂饲料喂养 + 小剂量链脲佐菌素 (streptozotocin, STZ) 腹腔注射的三联法是目前应用最广的诱发型 2 型 DN 动物模型制备方法 [4], 而目前的文献报道中, 关于这一模型评价的研究仍然比较缺乏, 因此本研究拟通过探索不同高脂饲料喂养时间对 2 型 DN 大鼠体重血糖胰岛素抵抗指数 (homeostasis model assess ment insulin resistance index, HOMA IR) 及尿白蛋白排泄率 (urinary albumin excretion rate, UAER) 的影响, 为改善 2 型 DN 的造模方法提供更多的实验依据 1 材料与方法 1 1 材料 SPF 级雄性 Wistar 大鼠 80 只, 体重 g, 购自北京维通利华实验动物技术有限公司 SCXK ( 京 ) 本实验在北京中医药大学教育部中医内科学重点实验室屏障动物实验设施内进行 SYXK( 京 ) 高脂饲料配方为常规饲料加 20% 蔗糖 10% 猪油 2 5% 胆固醇, 购自北京华阜康生物科技股份有限公司链脲佐菌素 ( STZ, 美国 Sigma 公司 ); 血糖仪及试纸 ( 美国强生公司 ); 大鼠尿微量白蛋白 ELISA 试剂盒 ( 美国 R&D Sys tems 公司 ) 1 2 方法型 DN 动物模型建立所有大鼠适应性饲养一周, 随机分为正常对照组 (normal control, 组 )10 只和造模组 70 只正常对照组不予手术处理, 造模组按 0 33 ml / 100 g 体重腹腔注射 10% 水合氯醛麻醉, 大鼠背部术前备皮, 常规碘伏消毒, 左侧背部切口约 1 5 cm, 充分暴露左肾, 剥离左肾包膜, 并结扎左肾动脉, 关闭腹腔, 缝合切口, 术后大鼠每天肌内注射 40 万单位青霉素, 连续 3 d 此后, 将所有造模组大鼠按照体重和血糖水平随机分为组 ( 高脂饲料喂养 4 周 ) 和组 ( 高脂饲料喂养 8 周 ) 正常对照组喂以普通饲料, 组及组喂以高脂饲料, 分别于 4 周或 8 周末禁食 12 h, 予单次腹腔注射 STZ 30 mg / kg (0 1 mol / L ph 4 2) STZ 注射 72 h 后, 尾静脉采血, 随机血糖高于 16 7 mmol / L 者, 列入观察对象标本采集和检测方法大鼠每周称重, 每两周尾尖采血, 葡萄糖氧化酶法检测随机血糖在高脂饲料喂养后的第 8 周及第 12 周, 将大鼠转入代谢笼内, 不禁食不禁水, 收集 24 h 尿液, 计算总尿量后离心 (3000 r / min 10 min) ELISA 法检测尿微量白蛋白含量比较组及组在 STZ 注射后的相同时间 ( 组第 8 周与组第 12 周 ) 及实验开始后的相同时间里 ( 组第 12 周与组第 12 周 )UAER 之间的差异实验结束时, 禁食不禁水 12 h, 麻醉后腹主动脉取血, 离心 (3800 r / min 10 min) 后取血清, 放免法检测血清胰岛素浓度, 全自动生化分析仪检测空腹血糖浓度, 计算 HOMA IR, 公式 :HOMA IR = 空腹血糖水平 ( fasting blood glucose, FGB, mmol / L) 空腹胰岛素水平 ( fasting insulin, FINS, miu / L ) / 22 5 取右肾, 分为两份, 一份放入 4% 甲醛里固定, 进行病理学观察, 另一份置液氮中保存肾组织常规制片,HE 染色, 400 光镜观察 1 3 统计学分析所有数据均用 ( x ± s) 表示,SPSS 22 0 统计软件进行统计学处理, 多组间的差异比较采用单因素方差分析, 方差齐时采用 LSD 法, 方差不齐时采用 Dunnett s T3 法, 显著性水平设定为 α = 结果 2 1 大鼠不同时间点血糖的比较两组大鼠均在 STZ 注射 1 周后开始出现血糖升高, 在 STZ 注射 2 周后血糖有一定程度的回落, 在 STZ 注射 3 周后血糖稳定于较高的水平可见, 两组在注射 STZ 后的血糖变化趋势基本相同详见表 1

3 116 中国实验动物学报 2018 年 2 月第 26 卷第 1 期 Acta Lab Anim Sci Sin,February 2018,Vol. 26 No 大鼠体重随时间变化趋势手术前, 各组大鼠的体重差异无显著性 ( P > 0 05) 手术后,DN 模型组大鼠的体重明显低于正常对照组 (P < 0 01) 此后 DN 模型组大鼠的体重逐渐升高, 且在 4 周时接近组及表 1 各组大鼠血糖随时间变化的比较 ( x ± s) 组在注射 STZ 后分别出现了体重增长速度减慢及体重下降的现象在 12 周时, 组与组的体重均低于 (P < 0 01), 但组体重略高于组 ( P < 0 01) 说明延长高脂饲料喂养时间能够增加成模后大鼠的体重详见表 2 Tab. 1 Comparison of the changes of blood glucose over time in the rats( x ± s) 4 周 4 weeks 5 周 5 weeks 6 周 6 weeks 7 周 7 weeks 8 周 8 weeks 7 16 ± ± ± ± ± ± 9 09 ## ± ± 2 53 ## 7 51 ± ± ± 2 66 ## 9 18 ± ± 0 89 F P 周 9 weeks 10 周 10 weeks 11 周 11 weeks 12 周 12 weeks ± ± ± ± 4 36 ## ± ± 4 89 ## ± ± 7 07 ## ± ± 4 79 ## F P 注 : 与比较, # P < 0 05, ## P < 0 01; 与比较, P < 0 05, P < 未测, 正常对照组每 2 周测 1 次血糖 Note. Compared with the group, # P < 0 05, ## P < 0 01; Compared with the group, P < 0 05, P < The blood glucose was de tected every 2 weeks in the group. 0 周 0 week 表 2 各组大鼠体重随时间变化的比较 ( x ± s) Tab. 2 Comparison of the changes of body weight over time in the rats( x ± s) 1 周 1 week 2 周 2 weeks 3 周 3 weeks 4 周 4 weeks 5 周 5 weeks 6 周 6 weeks ± ± ± ± ± ± ± ± ± ## ± ## ± ## ± # ± ## ± ## ± ± ## ± ## ± ## ± ± ± ## F P 周 7 weeks 8 周 8 weeks 9 周 9 weeks 10 周 10 weeks 11 周 11 weeks 12 周 12 weeks ± ± ± ± ± ± ± ## ± ## ± ## ± ## ± ## ± ## ± # ± ± ± ± ## ± ## F P 注 : 与比较, # P < 0 05, ## P < 0 01; 与比较, P < 0 05, P < 0 01 Note. Compared with the group, # P < 0 05, ## P < 0 01; Compared with the group, P < 0 05, P < 0 01.

中国实验动物学报２０１８年２月第２６卷第１期２３１１７ＡｃｔａＬａｂＡｎｉｍＳｃｉＳｉｎＦｅｂｒｕａｒｙ２０１８Ｖｏｌ２６Ｎｏ１表３大鼠血浆胰岛素及胰岛素抵抗指数的比较对３组大鼠在第１２周末的ＦＧＢＦＩＮＳ及ＨＯＴａｂ３ＭＡＩＲ进行比较后发现ＤＮ１组及ＤＮ２组的ＦＧＢＧｒｏｕｐｓ均较明显升高Ｐ００１

4 中国实验动物学报２０１８年２月第２６卷第１期２３１１７ＡｃｔａＬａｂＡｎｉｍＳｃｉＳｉｎＦｅｂｒｕａｒｙ２０１８Ｖｏｌ２６Ｎｏ１表３大鼠血浆胰岛素及胰岛素抵抗指数的比较对３组大鼠在第１２周末的ＦＧＢＦＩＮＳ及ＨＯＴａｂ３ＭＡＩＲ进行比较后发现ＤＮ１组及ＤＮ２组的ＦＧＢＧｒｏｕｐｓ均较明显升高Ｐ００１ＦＩＮＳ明显降低ＰＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅＵＡＥＲｉｎｔｈｅｒａｔｓｘ ± ｓＮＣ００１两组的ＨＯＭＡＩＲ与相比均有不同８ｗｅｅｋｓｍｇ２４ｈ模型组１ＤＮ１模型组２ＤＮ２程度的升高Ｐ００５而ＤＮ１组与ＤＮ２组之间的差异无显著性Ｐ００５详见图１各组大鼠尿白蛋白排泄率的比较ｘ ± ｓＦＰ１０３ ± ０３０２３９ ± １０６０４４ ± ０２４３３６１０００００１２ｗｅｅｋｓｍｇ２４ｈ１１８ ± ０５３２８６ ± １４４３４２ ± １４８７０９５０００２注与比较Ｐ００５Ｐ００１与模型组１比较Ｐ００５Ｐ００１ＮｏｔｅＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅＮＣｇｒｏｕｐＰ００５Ｐ００１ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅＤＮ１ｇｒｏｕｐＰ００５Ｐ００１２５大鼠肾指数的比较实验结束时ＤＮ１及ＤＮ２组肾指数５５９ ± ０８３及５０６ ± ０６８均高于２９４ ± ０５２差异有显著性Ｐ００１并且ＤＮ１组肾指数明显高于ＤＮ２组差异有显著性Ｐ００５２６大鼠肾病理学观察大鼠肾皮质区肾小球及肾小管形态基本正常图２ａＤＮ１及ＤＮ２组大鼠肾组织ＨＥ染色切片可见肾小球毛细血管袢肥大系膜基质增多肾注与比较Ｐ００５Ｐ００１图１小囊腔狭窄肾小管上皮细胞脱落等病理改变图各组大鼠胰岛素抵抗指数比较图ＮｏｔｅＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅＮＣｇｒｏｕｐＰ００５Ｐ００１Ｆｉｇ１２４Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｄｅｘｅｓｉｎｔｈｅｒａｔｓ大鼠尿白蛋白排泄率的比较在第８周时ＤＮ１组的ＵＡＥＲ明显高于正常组差异有显著性Ｐ００１在第１２周时ＤＮ１组及ＤＮ２组的ＵＡＥＲ均高于差异有显著性２ｂｃ但ＤＮ１组与ＤＮ２组均未见结节性硬化３讨论单侧肾动脉结扎高糖高脂饲料喂养小剂量ＳＴＺ腹腔注射的三联法是目前应用最广的诱发型２型ＤＮ动物模型制备方法４６ＤＮ是ＤＭ的微血管并发症之一初期多无明显的临床表现是以肾小Ｐ００１但ＤＮ１组与ＤＮ２组之间的差异无显著球滤过率增高为主后期逐渐出现微量白蛋白尿大后分别为第８周和第１２周的尿白蛋白排泄率相型常需要经过较长的时间才能够表现出较明显的肾００５详见表３先手术切除一侧的肾脏或将一侧的肾动脉进行结性Ｐ００５ＤＮ１组和ＤＮ２组在ＳＴＺ注射４周比较ＤＮ２组高于ＤＮ１组差异有显著性Ｐ图２Ｆｉｇ２量蛋白尿及肾功能不全１因此２型ＤＭ动物模损伤７为缩短实验周期目前采用较多的方法是扎相当于先破坏了５０的肾功能加重了相同条大鼠肾组织的病理改变ＨＥ染色４００ＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｒｅｎａｌｔｉｓｓｕｅｓｏｆｒａｔｓｏｆｄｉｆｆｒｅｎｔｇｒｏｕｐｓＨＥｓｔａｉｎｉｎｇ４００

5 118 中国实验动物学报 2018 年 2 月第 26 卷第 1 期 Acta Lab Anim Sci Sin,February 2018,Vol. 26 No. 1 件下剩余肾单位的损伤程度, 使 DN 的发生提前 [8-9] STZ 是最常用的致糖尿病药物, 它能够通过特异性地破坏胰腺组织, 导致胰岛 β 细胞随机快速不可逆的坏死, 减少胰岛素分泌量, 引起 DM 的发生 [10] 研究表明高糖高脂饲料喂养能够降低实验动物的胰岛素敏感性, 诱发胰岛素抵抗 [11] 同时使用小剂量 STZ 腹腔注射, 破坏部分胰岛 β 细胞, 造成胰岛素分泌的相对不足, 使模型更接近于 2 型 DM [12-13] 在这种造模方法中, 高糖高脂饲料喂养时间及 STZ 注射剂量的不同, 都会对模型造成不同的影响 [10] 目前的研究中高脂饲料喂养时间从 2 周到 8 周不等, 甚至更长的可以达到 12 ~ 15 周, STZ 注射剂量从 15 mg / kg 到 50 mg / kg 不等 [12] 魏 [14] 占英等的研究指出延长高脂饲料喂养时间能够减少 STZ 的用量, 增加成模率, 降低死亡率, 并且使模型更接近于 2 型 DM 他们认为高脂饲料喂养 8 周联合 30 mg / kg STZ 是制备 2 型 DM 的最佳组合本实验的研究结果显示, 在 STZ 注射 4 周后, 两组大鼠均可出现 UAER 的升高, 且组 UAER 明显高于组 ( 表 3), 组体重也高于组 ( 表 2) 表明延长高脂饲料喂养时间能够加重 DN 大鼠的肾损伤, 同时大鼠的体重更接近于正常大鼠, 但两组大鼠的血糖水平及增长趋势无明显差异 ( 表 1) 在第 12 周末, 组与组肾组织 HE 染色均可见肾小球毛细血管袢肥大, 系膜基质增多 ; 肾小囊腔狭窄等病理改变 ( 图 2), 同时组肾指数明显高于组, 而两组 12 周末的 UAER 之间的差异无显著性这表明组肾脏的高灌注高滤过较组重, 但组大鼠可能存在更重的肾小球滤过膜损伤组高血糖持续时间较组长, 这说明 DN 大鼠肾损伤的程度不完全取决于高血糖的持续时间 [15] 由于两组胰岛素抵抗指数之间的差异无显著性, 因此其胰岛素抵抗状态持续时间的长短可能影响了其肾损伤的程度 [16] 一些研究已经指出, 胰岛素抵抗是一个独立的肾损伤因素 [2, 17], 并不受血糖水平的影响 [18], 这与我们的研究结果是相吻合的因此可以说适当延长高脂饲料喂养时间能够加重 DN 的疾病程度 [19] 但是从整体实验过程来看, 如果选择在 DN 较轻时干预, 则高脂饲料喂养 4 周能够缩短造模周期 ; 但如果选择在 DN 较重时开始干预, 则较短的高脂饲料喂养时间并不能缩短试验周期 ( 第 12 周时两组的 UAER 之间的差异无显著性 ), 在后期还可能需要观察更长的时间另一方面, 有文献报道认为 STZ 在大鼠体内的作用并非完全的 β 细胞特异性, 它还会对大鼠的肝肾产生一定的毒性作用 [10] 而延长高脂饲料喂养时间后, 由于大鼠体重的增长, 可能会增加 STZ 的注射剂量, 加重肝肾损伤 DN 造模中所采用的单侧肾动脉结扎手术属于创伤性的干预措施, 必然会对大鼠的状态造成影响我们的研究发现, 手术后造模组大鼠体重较大鼠明显降低此后逐渐增长, 在手术后的第 4 周, 造模组大鼠的体重与正常组比较接近, 大鼠状态较好因此 STZ 注射不应早于术后第 4 周综合上述内容, 在实验中应根据具体实验目的权衡选择高脂饲料喂养时间除此之外, 本研究还发现无论是组还是组, 在注射 STZ 后的第 2 周血糖水平均有小幅度的波动, 在第 3 周之后才稳定在较高的水平因此对 DN 模型大鼠的干预应在 STZ 注射后的第 3 周 [10] 后开始 Qinna 等的研究也指出在 DM 大鼠模型中, 不同血糖水平的个体会对胰岛素和其它抗糖尿病药物的作用产生不一样的反应虽然本实验的研究结果显示, 和组大鼠的血清胰岛素水平低于, 但其 HOMA IR 明显升高这与 2 型糖尿病的病理特点是相一致的目前已经明确, 在 2 型 DM 晚期除胰岛素抵抗之外, 尚存在胰岛 β 细胞的衰竭, 可能跟长期的高胰岛素分泌有关 [12] 总而言之, 包括大鼠周龄,STZ 注射剂量次数方式, 高脂饲料喂养时间配方等诸多因素都会对造模效果和模型稳定性造成影响 [20] 因此需要有更多的研究关注模型制备的细节问题, 为 DN 领域的研究人员提供决策依据参考文献 (References) [ 1 ] 郭凯锋, 陈海冰, 贾伟平. 糖尿病肾脏疾病的流行病学进展 [J]. 医学研究杂志, 2015, 44(3): Guo KF, Chen HB, Jia WP. Progression in epidemiology of dia betic kidney diseases [ J]. J Med Res, 2015, 44 (3): [ 2 ] Welsh GI, Hale J, Eremina V, et al. Insulin signaling to the glomerular podocyte is critical for normal kidney function [ J]. Cell Metab, 2010, 12(4): [ 3 ] 肖艳华, 何笑云, 韩晴, 等. 糖尿病肾病足细胞胰岛素抵抗相关机制的研究进展 [ J]. 实用医学杂志, 2017, 33 (4): Xiao YH, He XY, Han Q, et al. Progression in the study of mechanisms of insulin resistance in diabetic nephropathy podo cytes [J]. J Prac Med, 2017, 33 (4):

6 中国实验动物学报 2018 年 2 月第 26 卷第 1 期 Acta Lab Anim Sci Sin,February 2018,Vol. 26 No [ 4 ] 高秀莹, 周迎生. 2 型糖尿病鼠类模型的研究进展 [ J]. 中国实验动物学报, 2014, 22(4): Gao XY, Zhou YS. Review of mouse and rat models for type 2 diabetes mellitus [J]. Acta Lab Anim Sci Sin, 2014, 22 (4): [ 5 ] 闫永恒, 李渐鹏, 刘战伟, 等. 不同 2 型糖尿病肾病模型建立方法及成模特点比较 [ J]. 中国食物与营养, 2016, 22 (1): Yan YH, Li JP, Liu ZW, et al. Comparison of establishment methods and characteristics of different type 2 diabetic nephropa thy models [J]. Chin Food Nutrit, 2016, 22 (1): [ 6 ] 芝敏, 胡兰英, 徐佩茹. 2 型糖尿病肾病大鼠模型的建立及其肾病理特点 [J]. 新疆医学, 2012, 42: Zhi M, Hu LY, Xu PR. Establishment of rat models of type 2 di abetic nephropathy and their pathological structural changes [ J]. Xinjiang Med Sci, 2012, 42: [ 7 ] 安增梅. 2 型糖尿病肾病动物模型常用研制方法的研究进展 [J]. 医学综述, 2013, 19(23): An ZM. Advances in research on commonly used method for ani mal models of type 2 diabetic nephropathy [ J]. Med Recapitu late, 2013, 19(23): [ 8 ] 印红爱, 吴勇军, 喻嵘, 等. 高脂喂养加单侧肾切除制作小鼠糖尿病肾病模型研究 [ J]. 湖南中医药大学学报, 2013, 33(11): Yin AH, Wu YJ, Yu R, et al. Establishment of diabetic ne phropathy mouse model by high fat diet feeding combined with u nilateral nephrectomy [J]. J Hunan Univ Chin Med, 2013, 33 (11): [ 9 ] 李晓辉, 孙汝杉, 王新源, 等. 单侧肾切除联合 STZ 诱导糖尿病肾病大鼠模型构建影响因素分析 [ J]. 长治医学院学报, 2015, 29(4): Li XH, Sun RS, Wang XY, et al. Influencing factors in the extablishment of rat model of diabetic nephropathy induced by u nilateral kidney resection and STZ [ J]. J Changzhi Med Coll, 2015, 29(4): [10] Qinna NA, Badwan AA. Impact of streptozotocin on altering nor mal glucose homeostasis during insulin testing in diabetic rats compared to normoglycemic rats [ J]. Drug Design Dev Ther, 2015, 9: [11] Burgeiro A, Cerqueira MG, Varela Rodriguez BM, et al. Glu cose and lipid dysmetabolism in a rat model of prediabetes in duced by a high sucrose diet [J]. Nutrients, 2017, 9: 638. [12] Skovso S. Modeling type 2 diabetes in rats using high fat diet and streptozotocin [J]. J Diabetes Invest, 2014, 5(4): [13] 左风云, 董岭. 大鼠 1 型与 2 型糖尿病模型的对比研究 [J]. 疾病监测与控制, 2015, 9(6): Zuo FY, Dong L. Contrast studying of rat model of type 1 diabe tes and type 2 diabetes [ J]. J Dis Monitor Control, 2015, 9 (6): [14] 魏占英, 沈丽, 冯晓慧, 等. 高脂饲料喂养时间和 STZ 剂量对建立 2 型糖尿病大鼠模型的影响 [ J]. 医学研究杂志, 2014, 43(2): Wei ZY, Shen L, Feng XH, et al. Effect of high fat diet feeding time and streptozotocin dose on establishment of a rat model of type 2 diabetes mellitus [ J]. J Med Res, 2014, 43(2): [15] 张晶露, 邱琳, 雒晓春. 糖尿病肾病发病机制研究进展 [J]. 医学综述, 2017, 23(8): Zhang JG, Qiu Lin, Luo XC. Advances in the pathogenesis of diabetic nephropathy [ J]. Med Recapitulate, 2017, 23 ( 8 ): [16] 韩爽, 徐弘昭, 许钟镐. 胰岛素抵抗在糖尿病及糖尿病肾病进展中的作用 [J]. 中国实验诊断学, 2017, 21(2): Han S, Xu HZ, Xu ZG. The role of insulin resistance in the pro gression of diabetes and diabetic nephropathy [ J]. Chin Lab Di agn, 2017, 21 (2): [17] Horita S, Nakamura M, Suzuki M, et al. Selective insulin resist ance in the kidney [ J ]. Biomed Res Int, 2016, 2016: [18] Filippone EJ, Gupta A, Farber J L. Normoglycemic diabetic ne phropathy: the role of insulin resistance [ J ]. Case Reports Nephrol Urol, 2014, 4(2): [19] 王保伟, 李颖, 刘晓红, 等. 高脂饲料喂养时间及链脲佐菌素剂量对实验型 2 型糖尿病大鼠造模的影响 [ J]. 卫生研究, 2011, 40(1): Wang BW, Li Y, Liu XH, et al. Effect of the duration of high fat diet and the dosage of streptozotocin on establishing experi mental animal model of type 2 diabetes mellitus [ J]. J Hygiene Res, 2011, 40(1): [20] 邵俊伟, 蔡逊. 高脂饮食联合链脲佐菌素建立 2 型糖尿病大鼠模型的研究进展 [J]. 中国实验动物学报, 2014, 22(4): Shao JW, Cai X. Research progress of rat models of type 2 diabe tes induced by high calorie diet combined with streptozotocin [J]. Acta Lab Anim Sci Sin, 2014, 22(4): [ 收稿日期 ]

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环球中医药 2016 年 5 月第 9 卷第 5 期摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两种电针对脊髓损伤 14 天后大鼠运动功能神经元及 MEK2 p 鄄 ERK1 表达的影响论著宋良玉摇吕威摇景泉凯摇莫雨